Препарат для санации спермы животных "спермосан - ппк"

 

Изобретение относится к животноводству, в частности к препаратам для санации спермы животных в средах для ее разбавления и хранения. Целью изобретения является снижение токсичности препарата и повышение его эффективности. Препарат содержит (в тыс.ЕД на 100 см³ среды для разбавления и хранения спермы) пенициллин 50 - 100, полимиксин 100 - 200, канамицин 25 - 50. Препарат менее токсичен известного Спермосан-3 и повышает оплодотворяемость коров на 2,7 - 24,5%. 6 табл.

Изобретение относится к животноводству, в частности к препаратам для санации спермы животных в средах для ее разбавления и хранения. Известен препарат на санации спермы животных, содержащий пенициллин, стрептомицин и стрептоцид растворимый. Известен также препарат для санации спермы животных - неоспермосан, содержащий пенициллин, стрептомицин, стрептоцид растворимый и полимиксин М сульфат. Недостатком известных препаратов является сравнительно низкая широта полезного действия из-за проявления повышенной токсичности к спермиям стрептомицина и, как следствие, снижение их бактерицидной активности по отношению к микрофлоре. Целью изобретения является снижение токсичности препарата и повышение его эффективности. Цель достигается тем, что препарат дополнительно содержит канамицин при следующем соотношении компонентов, тыс. ЕД на 100 см³ среды: Пенициллин 50-100 Полимиксин 100-200 Канамицин 25-50 Для приготовления препарата используют бензилпенициллин натриевой или калиевой соли, полимиксин М сульфат или полимиксин В сульфат и канамицин сульфат. Отвешивают расчетное количество каждого компонента и смешивают в смесителе до однородного состояния. Готовый препарат фасуют по 100, 200, 300, 500 и 1000 тыс. у.е. по пенициллину во флаконы объемом 12 см³, закрывают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками. Готовый препарат представляет собой сыпучий однородный порошок белого цвета с желтоватым оттенком, хорошо растворимый в воде. Выживаемость спермиев быка в 3%-ном растворе цитрата натрия с 10% желтка при температуре 2-5^оС с концентрацией препарата (по пенициллину) 100 ЕД/см³ не менее 200 ч, показатель абсолютной выживаемости спермиев (S) не менее 1000 у.е. Препарат сохраняет свою активность в течение 2 лет в сухом помещении при температуре не выше 20^оС. П р и м е р 1. Для экспериментальной проверки приготавливают 22 варианта смесей на основе пенициллина, полимиксина и канамицина. Каждый вариант препарата испытывают на безвредность для спермиев по показателю абсолютной выживаемости (S). Для этого антибиотики, входящие в состав препарата в различных соотношениях, вносят в среду на основе 3%-ного раствора цитрата натрия с 10% желтка для разбавления и хранения спермы быков из расчета 73-375 тыс. ЕД на 100 см³/среды. Контролем является среда без добавления антибиотиков. Свежеполученную и смешанную сперму от 1-2 быков с подвижностью спермиев не ниже 7,5 баллов и концентрацией не ниже 0,8 млрд/см³ разбавляют указанной средой с антимикробным комплексным препаратом и без него из расчета 1: 15-20. После разбавления спермы определяют ее подвижность, которую в последующем оценивают через каждые 24 ч до момента ее гибели при условии хранения в холодильнике при температуре 2-5^оС. На основе полученных данных рассчитывают показатель абсолютной выживаемости (S) спермиев, выраженный в условных единицах. Каждый вариант препарата оценивают по 5-10 опытам со следующей статистической обработкой полученных данных. Влияние различных сочетаний компонентов комплексного препарата на показатель абсолютной выживаемости спермиев быков представлено в табл.1. Из табл.1 видно, что наилучший показатель абсолютной выживаемости спермиев быков, равный 903±19 у.е., обеспечивается при использовании комплексного препарата с содержанием в 100 см³ среды: пенициллина 50 тыс.ЕД, полимиксина 100 тыс.ЕД и канамицина 25 тыс.ЕД. П р и м е р 2. В среду для замораживания спермы быков и искусственного осеменения коров и телок - ЛГЖ (лактозо-глицерино-желточную) вносят предложенный комплексный препарат спермона-ППК на основе пенициллина полимиксина и канамицина при оптимальном их соотношении, условно в расчете по пенициллину 25-200 тыс.ЕД на 100 см³. В качестве контроля используют среду со спермосаном-3 и неоспермосаном в дозах 50-200 тыс.ЕД на 100 см³ по пенициллину и среду без санирующих препаратов. Указанной средой разбавляют сперму быков в соотношении 1:3-4, эквилибрируют при температуре 2-5^оС в течение 4-5 ч и замораживают в форме гранул на фторопластовых пластинах в парах жидкого азота и хранят в сосудах Дьюара в жидком азоте. Гранулы спермы размораживают путем их оттаивания в пенициллиновых флаконах в подогретом до 40^оС нейтрализованном растворе цитрата натрия, после чего определяют биологические показатели спермы, которые представлены в табл.2. Из табл.2 следует, что предложенный препарат не токсичен для спермиев в дозах до 200 тыс.ЕД на 100 см³ среды по сравнению со спермосаном-3 и неоспермосаном, при применении которых в дозах от 100 тыс.ЕД и выше, подвижность и выживаемость спермиев быков были ниже контроля. П р и м е р 3. В лактозо-глицерино-желточную среду для разбавлении спермы с препаратом спермосаном-ППК вносят культуры тест-штаммов микроорганизмов из расчета 0,5 млн клеток на 1 см³ среды. Контролем служат среды с тест-культурами с добавлением спермосана-3 и без санирующих препаратов. Приготовленные пробы выдерживают при температуре 18^оС в течение 2 ч, затем высевают на 2% МПА. Посевы инкубируют в термостате при температуре 37^оС в течение 24-72 ч, учитывают рост тест-штаммов каждые сутки. Окончательный учет результатов проводят через 10 сут. Действие санирующих препаратов на культуры тест-штаммов микроорганизмов представлены в табл.3. Из табл.3 следует, что предложенный препарат спермосан-ППК по бактерицидному действию в 5 раз превосходит известный базовый препарат спермосан-3. П р и м е р 4. В разбавленные лактозо-глицерино-желточной средой пробы спермы быков вносят санирующие препараты спермосан-3 (базовый) и спермосан-ППК из расчета 50-100 тыс.ЕД по пенициллину на 100 см³; пробы спермы быков эквилибрируют при температуре 2-5^оС в течение 4 ч и замораживают в парах жидкого азота на фторопластовой пластине. Замороженную сперму хранят в жидком азоте в течение 2 месяцев, после чего гранулы спермы размораживают и каждую пробу высевают на 3 чашки с 2% МПА и 1 % глюкозы. Посевы инкубируют при температуре 37-38^оС в течение 48 ч. Подсчитывают среднее число выросших колоний по трем чашкам для каждой пробы спермы от 10 быков. Данные по микробной контаминации замороженно-оттаянной спермы быков в зависимости от дозы санирующих препаратов представлены в табл.4. Использование спермосана-ППК при санации спермы быков снижает ее микробную контаминацию в 2,6-22,5 раза по сравнению с базовым препаратом спермосаном-3. Изучают биологические и биохимические свойства замороженно-оттаянной спермы быков с санирующими препаратами спермосаном-3 и спермосаном-ППК по примеру 4 в дозах 50-100 тыс.ЕД на 100 см³ среды по пенициллину. Определяют осмотическую (физиологическую) резистентность, устойчивость к холодному шоку, дегидрогеназную активность, количество фосфора аденозинтрифосфорной и аденозиндифосфорной кислот, подвижность и показатель абсолютной выживаемости спермиев быков. Результаты исследований спермы 10 быков в трех опытах представлены в табл.5. Как следует из табл.5, спермосан-ППК способствует лучшему сохранению (на 4,5-30,3%) биологических и биохимических свойств замороженно-оттаянной спермы быков. П р и м е р 6. Комплексный санирующий препарат спермосан-ППК испытывают в производственных условиях на оплодотворяющую способность спермиев быков после искусственного осеменения коров и телок в хозяйствах Грузинской ССР, Литовской ССР, Калининской и Пензенской области РСФСР. Результаты производственных испытаний представлены в табл.6. Приведенные в табл.6 данные свидетельствуют о более высокой оплодотворяюще способности спермы быков, санированной предложенным препаратом спермосаном-ППК. Спермосан-ППК применяют с учетом вида животных. Препарат вносят перед разбавлением спермы в готовую среду из расчета на 100 см³ тыс. ЕД по пенициллину: для спермы быков при замораживании и плюсовой температуре хранения 50-100; для спермы баранов 25-50; для спермы хряков 25-30.

Формула изобретения

ПРЕПАРАТ ДЛЯ САНАЦИИ СПЕРМЫ ЖИВОТНЫХ "СПЕРМОСАН - ППК". Препарат для санации спермы животных, содержащий пенициллин и полимиксин, отличающийся тем, что, с целью снижения токсичности препарата и повышения его эффективности, препарат дополнительно содержит канамицин при следующем соотношении компонентов, тыс. ЕД на 100 см³ среды для разбавления и хранения спермы: Пенициллин - 50 - 100 Полимиксин - 100 - 200 Канамицин - 25 - 50

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Номер и год публикации бюллетеня: 14-2002

Извещение опубликовано: 20.05.2002        

---