Способ оценки реиннервации децентрализованной почки

 

Изобретение относится к медицине, к патофизиологии и трансплантологии, и предназначено для прижизненной оценки эффективности реиннервации децентрализованной почки. Цель - повышение точности за счет неинвативного определения восстановления инервации децентрализованной почки. Подбирают подпороговую для интактных почек опытного организма тестовую дозу норадреналина. Через, один месяц после денервации почки ин ситу или ее пересадке подпороговую для интактной почки тестовую дозу норадреналина (НА) вводят внутривенно в опытный организм на фоне индуцированной водной нагрузкой диуреза , фиксируют проявление феномена повышенной чувствительности денервированных структур в виде ответной анурической паузы, продолжительность которой регистрируют. Затем тестовые воздействия НА повторяют через различные интервалы

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Г

gin (лЭ .ф

О зом.

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4817937/14 (22) 23.04.90 (46) 15.05.92. Бюл. М 18 (71) Донецкий государственный медицинский институт им. М.Горького (72) А.Г.Кот, Э.Ф.Баринов и В.M.Ìîçäoëåâский (53) 615.475 (088.8) (56) Кэннон B., Розенблют А. Повышение чувствительности денервационных структур. Закон денервации М., 1951, с. 140. (54) СПОСОБ ОЦЕНКИ РЕИННЕРВАЦИИ

ДЕЦЕНТРАЛИЗОВАННОЙ ПОЧКИ (57) Изобретение относится к медицине, к патофизиологии и трансплантологии, и предназначено для прижизненной оценки эффективности реиннервации децентрализованной почки. Цель — повышение точности за счет неинвативного определения восстановления инервации децентрализованной почки. Подбирают подпороговую для интактных почек опытного организма тестовую дозу норадреналина, Через, один

Изобретение относится к медицине, патофизиологии и трансплантологии и предназначено для оценки восстановления нервных влияний в денервированной или пересаженной почке.

Цель изобретения — повышение точности за счет неинвазивного определения восстановления иннервации децентрализованной почки.

Способ осуществляют следующим обра„„ „„1734120 А1 (si)s G 09 В 23/28, G 01 N 33/48 месяц после денервации почки ин ситу или ее пересадке подпороговую для интактной почки тестовую дозу норадреналина (НА) вводят внутривенно в опытный организм на фоне индуцированной водной нагрузкой диуреза, фиксируют проявление "феномена повышенной чувствительности денервированных структур" в виде ответной анурической паузы, продолжительность которой регистрируют. Затем тестовые воздействия

НА повторяют через различные интервалы (3, 7, 10 мес. 1,5 год и т.д.), каждый раз регистрируя величину анурической паузы, и по достоверному сокращению ее продолжительности и полному исчезновению фенолина повышенной чувствительности денервированной почки к адренергическому медиатору судят о наступлении реиннервации ее кортикального слоя. Точность и достоверность способа подтверждалась нейроморфологическими и нейрохирургическими исследованиями денервированных и пересажен н ых почек.

Подбирают подпороговую для интактных почек опытного организма тестовую дозу норадреналина по визуально регистрируемому изменению диуретической реакции в ответ на повторные введения в системный кровоток возрастающих микродоз норадреналина. Через месяц после денервации ин ситу или пересадки почки подпороговую для интактной почки тестовую дозу норадреналина вводят внутривенно в опытный организм на фоне инду1734120 цированного водной нагрузкой диуреза и наблюдают проявление феномена повышенной чувствительности децентрализованной почки в виде ответной анурической паузы, длительность которой регистрируют.

Тестовые воздействия повторяют с заданным временным. интервалом, каждый раз регистрируя продолжительность анурической паузы, и по достоверному сокращению ее продолжительности в сравнении с исходным уровнем и последующему полному исчезновению феномена гиперчувствительности денервированной почки к адренэргическому нейромедиатору делают заключение о наступлении реиннервации ее кортикального слоя.

Точность и достоверность способа подтверждена нейроморфологическими и нейрогормональными исследованиями денервированных и пересаженных почек в экспериментах на собаках.

Пример 1. Собаке-самцу после дегел ьминтизации на протяжении 5 сут и премедикации за 30 мин до вмешательства под ингаляционным эфирно-фторотановым наркозом с нейролептанальгезией оперативным путем воспроизводят бесфистульную модель для исследования выделительной функции почек путем ликвидации резервуарной функции мочевого пузыря и его запирательного механизма. B результате вмешательства у животного с интактными почками устанавливалось беспрепятственное непрерывное капельное мочевыделение через естественный анатомический путь — мочеиспускательный канал. После полного заживления операционной раны на

8-е сут собаке производили венесекцию сккательной вены, вводили в последнюю полиэтиленовый катетер и брали животное в павловский станок, предварительно подвесив под висячую часть уретры градуированный мочеприемник. Затем через зонд в желудок животного вводили 5;,-ную от массы тела нагрузку водопроводной водой, подогретой до 37 С. После развития у животного стойкого водного диуреза приступали к определению субпороговой индифферентной для пачек данного животного тестовой микродозы норадреналина. Определение начинали с введения в катетер заведомо индифферентной дозы—

0,05 мг. В условиях продолжающейся диуретической реакции поисковые пробы повторяли через 15 — 20 мин, каждый раз повышая вводимую микродозу на 0,05 мг, пока в ответ на очередное введение нейромедиатора не возникала хотя бы кратковременная анурическая пауза. Субпороговой дозой признали 0,3 мг для интактной почки данного

10 t5

55 животного. На следующем этапе исследования собаке в условиях наркоза производили абсолютную нервную децентрализацию левой почки хирургическим и электрофоретическим способом, в правую интактную почку удаляли из организма. В результате моча непрерывно наружно выделялась только из децентрализованной, т.е. абсолютно денервированной почки. После заживления операционной раны животное вновь брали в станок и после стандартной водной нагрузки внутривенно ввдили установленную тестовую дозу норадреналина, в ответ на которую возникала 14-минутная анурическая пауза — проявление гиперчувствительности денервированной почки к адренэргическому нейромедиатору. Тестовую пробу повторяли далее каждый месяц после предшествующей и измеряли продолжительность анурических пауз. Первые признаки достоверного снижения продолжительности ответа на тестовую дозу до 9 + 1 мин зарегистрировали на 7-м мес. после нервной децентрализации почки.

В последующем анурическая пауза постепенно сократилась до 6 0,5 мин, но так и не исчезла даже к 10-му мес. эксперимента.

Сделано заключение, что спонтанная реиннервация коркового вещества почки, денерированной ин ситу, имеет место, но она крайне неполноценна и неэффективна, что свидетельствует о крайне низкой степени восстановления нервных влияний в корковом веществе.

Для проверки заключения, сделанного на основании прижизненного неинвазивного исследования, опытное животное на 10-м мес эксперимента эвтаназировали, а опытную почку изъяли для нейроморфологических исследований. В нейрогистопограммах фронтальных срезов опытной почки обнаружено врастание через ворота органа толстых штопорообразных извитых нервных волокон до уровня наружного мозгового вещества, причем по мере удаления от почечных ворот плотность структурной иннервации почки резко снижается, а к кортикальном слое имеются только единичные нервные регенераты. Таким образом, нейроморфологическое исследование полностью подтвердило вывод, сделанный на основании использования предлагаемого неинвазивного способа прижизненно.

Пример 2. У собаки-самца после воспроизведения непрерывного мочевыделения из интактных почек через мочеиспускательный канал с помощью бесфистульной методики определили ин1734120

10

45

55 дифферентную субпороговую тестовую дозу, норадреналина,. составляющую 0,2 мг.

На следующем этапе исследования правую почку у этого животного удалили, а левую с целым мочеточником пересадили на подвздошные сосуды, предварительно полностью резецировав мочевой пузырь с последующим шовным соединением мочеточника аутотрансплантата с оставшейся частью мочеиспускательного канала в надпростатическом его отделе. В результате этого моча, образуемая пересаженной аутопочкой, непрерывно беспрепятственно выделялась через наружное отверстие уретры.

Первую тестовую пробу с норадреналином провели через 1 мес. — анурическая ответная пауза составила 14 мин. Последующие пробы проводили каждый месяц и даже спустя 1,5 года не наблюдали достоверных изменений выраженности феномена гиперчувствительности. Сделали вывод об отсутствии реиннервации коркового вещества гетеротопический пересаженной почки и исследовали опытную почку нейроморфологически для верификации прижизненно установленного топического диагноза. В нейрогистотопограммах почечного аутотрансплантата отметили множество хаотично расположенных и причудливо извитых толстых нервных волокон в синусе и внутренней медулле, в то время как в наружном мозговом веществе обнаруживались лишь единичные нервные регенераты, а в корковом слое таковые вообще отсутствовали.

Последнее полностью подтвердило вывод, сделанный на основании прижизненного неинвазивного исследования реиннервации почечного аутотрансплантата с помощью предлагаемого способа.

Пример 3. У собаки-самца с помощью предварительно воспроизведенной бесфистульной модели определили индифферентную субпороговую дозу норадреналина и, изъяв из его организма левую интактную почку, произвели ее аллотрансплантацию в подзвдошную область другой собаки-самца, предварительно удалив у реципиента обе собственные почки и весь резервуар мочевого пузыря. Мочеточник трансплантата соединили с реципиентным мочеиспускательным каналом, в результате чего из аллотрансплантата установилось наружное мочевыделение. После завершения трансплантации произвели хирургическую реиннервацию пересаженной аллопочки посредством имплантации в почечную паренхиму через ворота центрального отрезка подчревного нерва и паравазальных фасциально-клетчаточных лоскут ов с реципиентных сосудов.

После заживления операционной раны проверили наличие у опытного животного гиперчувствительности пересаженной ему почки к ранее подобранной субпороговой дозе норадреналина (0,25 мl). Ответная анурическая пауза составила 17 мин. Спустя месяц после пересадки тестовые пробы проверяли еженедельно. Достоверное сокращение анурической паузы по сравнению с исходным уровнем отметили в конце второго месяца — 11 - 3 мин, а на 90-е сутки зарегистрировали первое исчезнование феномена повышенной чувствительности. При этом отметили торможение стандартного индуцированного диуреза, т.е. лишь урежение капельного мочевыделения, но не анурическую паузу. Сделан вывод об эффективности использованного способа активной реиннервации в плане восстановления нервных влияний в корковом веществе аллотрансплантата. При нейрогистологических исследованиях обнаружили множественные поливалентные нервные регенераты в области сосудистых полюсов клубочков и тубулярных базальных мембран проксимальных отделов нейронов, локализующихся в корковом веществе. Там же зарегистрировано интенсивное свечение катехоламинов после обработки срезов опытного трансплантата по Фальку-Хилларпу и излучения в люминесцентном микроскопе.

Использование предлагаемого способа позволяет прижизненно и неинвазивно оценивать эффективность восстановления нервных влияний в денервированной пересаженной почке, в связи с чем способ целесообразно использовать в экспериментальной и клинической трансплантологии при разработке новых методов реиннервации почечного трансплантата.

Формула изобретения

Способ оценки реиннервации децентрализованной почки, включающий выявление феномена повышенной чувствительности денервированного органа к экзогенному нейромедиатору по визуально регистрируемому изменению диуретической реакции опытной почки в ответ на введение норадреналина в организм, отличающийся тем, что, с целью повышения точности оценки за счет неинвазивного определения восстановления иннервации децентрализованной почки, определяют субпороговую для интактной почки данного организма тестовую дозу норадреналина, спустя один месяц после децентрализации почки и далее с заданным интервалом вводят в системный кровоток на

1734120

15

25

35

45

Составитель З.Собиева

Техред М.Моргентал Корректор О.Кундрик

Редактор Е.Конча

Заказ 1672 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул,Гагарина, 101 фоне, стандартно индуцированного диуреза, регистрируют в динамике наличие и продолжительность ответной анурической паузы и по достоверному ее сокращению в сравнении с первоначальным уровнем и последующему полному исчезновению феномена денервационной гиперсенсибилизации опытной почки к адренергическому нейромедиатору судят о полноте ее реин5 нервации.