Способ приготовления среды для разбавления спермы производителя

 

Использование: искусственное осеменение животных. Сущность изобретения: готовят раствор разбавителя. Разливают его в герметически закрываемые емкости и обрабатывают в электромагнитном поле частотой 1·10⁶-1·10¹⁰ Гц при удельной энергоемкости 9-30 Дж/см³ и температуре нагрева 70 - 75°С. 3 табл.

Изобретение относится к животноводству и касается способов приготовления сред для разведения спермы при искусственном осеменении животных. Известен способ приготовления среды для разбавления и замораживания спермы (1), включающий приготовление среды, ее обработка в магнитном поле и замораживание до -196^оС в жидком азоте. Качественные показатели данного способа это увеличение активности и выживаемости спермиев по сравнению с применяемой на данный период методикой. Недостатком данного способа является наличие многочисленных операций обработка в магнитном поле, замораживание, размораживание и подогрев до 30-35^оС. Известен способ приготовления среды для разбавления спермы производителей (2). Стерилизация разбавителя спермы производится ионизирующим излучением дозой 0,3-0,7 Мрад. Недостатком такого метода является применение установки с изотопными материалами, такая установка требует повышенной безопасности от облучения обслуживающего персонала. При стерилизации сам разбавитель становится частично источником излучения. Производительность по стерилизованному объему разбавителя стоит в прямой зависимости от мощности и количества источников излучения. Обработка среды ионизирующим излучением не разрушает токсины, выделенные микроорганизмами до обработки. Для разрушения токсинов необходима термическая обработка. Цель изобретения это устранение токсического влияния микроорганизмов среды на спермии животных. Поставленная цель достигается тем, что стерилизацию раствора осуществляют в герметично закрытых емкостях электромагнитным полем частотой 1^.10⁶-1^.10¹⁰ Гц при удельной энергоемкости в пределах 9-30 Дж/см³ при температуре нагрева 70-75^оС. Осуществление способа поясняется на примерах 1 и 2. П р и м е р 1. В прокипяченную и остывшую до 90^оС воду вносят лактозу и приготавливают 11% раствор. На 100 мл разбавителя вносится 63 мл 11% раствора лактозы, добавляется 7 мл глицерина, затем при температуре не выше 35^оС добавляется 30 мл желтка куриных яиц. Полученный таким образом раствор разбавителя разливают в герметически закрываемые емкости на 250 мл и обрабатывают в электромагнитном поле радиочастотного диапазона на частотах 1^.10⁶. 1^.10¹⁰ Гц с удельной мощностью 0,2 Вт/см³ в течение 30-150 секунд при нагреве до температуры 70-80^оС. Срок хранения контролировался по обеим характеристикам: выживаемости спермиев и стерильности среды. Полученная, согласно примеру осуществления способа, среда сохраняет пригодность при хранении в стандартных условиях в течение до 1,5 года. Для подтверждения зависимости положительного эффекта от существующих способов приведены в табл.1,2,3. Проведенные исследования показали, что при увеличении удельной мощности выше 0,3 Вт/см³ и температуре выше 80^оС белок в разбавителе сворачивается при общей стерильности среды. А при уменьшении удельной мощности ниже 0,15 Вт/см³ и температуре среды ниже 70^оС разбавитель имеет присутствие инокулированных микроорганизмов. П р и м е р 2. В прокипяченную и остывшую до 90^оС воду вносят лактозу и приготавливают 11% раствор. На 100 мл разбавителя вносится 63 мл 11% раствора лактозы, добавляется 7 мл глицерина, затем при температуре не выше 35^оС добавляется 30 мл желтка куриных яиц. Полученный таким образом раствор разбавителя разливают в герметически закрываемые емкости на 15 мл и обрабатывают в электромагнитном поле радиочастотного диапазона с удельной энергоемкостью от 4 до 21 Дж/см³ в течение 30-150 секунд при нагреве до температуры 70-80^оС. Срок хранения контролировался по обеим характеристикам: выживаемости спермиев и стерильности среды. Полученная, согласно примера осуществления способа, среда сохраняет пригодность при хранении в стандартных условиях в течение до 1,5 года. Полученные зависимости приведены в табл.2. Из результатов проведенных исследований (табл.1, 2) следует, что при обработке среды для разбавления спермы производителя в электромагнитном поле радиочастотного диапазона на частотах 1˙10⁶.1˙10¹⁰ Гц при удельной энергоемкости в пределах 9-30 Дж/см³ и температуре нагрева 70-75^оС происходит полная стерилизация среды при отсутствии свертываемости белка. Полученные, согласно указанным выше примерам, среды были использованы для разбавления и замораживания спермы. Результаты испытаний разбавленной замороженной спермы, с использованием сред для разбавления, полученных при различных обработках в электромагнитном поле, приведены в табл.3. Как видно из табл.3 в обработанную среду производилось внесение спермиев, и данная среда позволяет увеличить срок выживаемости спермиев на 1 ч по сравнению с контролем. Дополнительный положительный эффект кроме повышения качества достигается благодаря получению среды, не содержащей бактерии, часто присутствующих в липидно-белковых компонентах животного происхождения и вызывающих распространение опасных заболеваний среды осеменяемых животных. Кроме того, способ дает возможность значительно сократить и упростить технологическую операцию по обработке среды по сравнению с прототипом и применяемой технологией на данный период времени в сельскохозяйственном производстве.

Формула изобретения

СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ СРЕДЫ ДЛЯ РАЗБАВЛЕНИЯ СПЕРМЫ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ, включающий смешивание углеводных, криогенно-протекторных и липидно-белковых компонентов в водной среде с последующей стерилизацией раствора разбавителя, отличающийся тем, что, с целью устранения токсического влияния микроорганизмов среды на спермии животных, стерилизацию раствора разбавителя осуществляют в герметично закрытых емкостях электромагнитным полем частотой 1 · 10⁶ 1 · 10¹⁰ Гц при удельной энергоемкости 9 30 Дж/см³ и температуре нагрева 70 75^oС.

РИСУНКИ

Рисунок 1