Способ дифференциальной диагностики острого и хронического активного гепатитов в

 

Использование: в инфекционных, гастроэнтерологических и гепатологических отделениях клинических больниц для дифференциальной диагностики. Цель: повышение точности. Сущность изобретения: в плазме крови пациента радиоиммунологическим методом определяют уровень лейкотриена В4. При повышении его содержания относительно нормы в 3 раза диагностируют острый вирусный гепатит В, а при снижении относительно нормы в 2 раза - хронический активный гепатит В. Положительный эффект: повышается точность диагностики на 31%, что позволяет назначить своевременную адекватную терапию, предотвратить рейнфекцию у больных и расширить область применения способа. 1 табл. сл с

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) (я)з 6 01 N 33/534

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4852250/14 (22) 16.07.90 (46) 30.10,92. Бюл, Я 40 (71) Харьковский научно-исследовательский институт терапии (72) Н.И. Яблучанский,. О.Я. Бабак, Е.И. Гришина, Л,А. Лифшиц и В,А. Калюжный (56) 1. С.Н. Соринсон "Вирусные гепатиты", Л., 1987.

2. А,И. Хазанов "Функциональная диагностика заболеваний печени", M., Медицина, 1988. (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ОСТРОГО И ХРОНИЧЕСКОГО

АКТИВНОГО ГЕПАТИТОВ В.

Изобретение относится к медицине, в частности к гепатологии, и может быть использовано в инфекционных, гастрознтерологических и гепатологических отделениях клинических больниц.

Известен способ дифференциальной диагностики острого вирусного гепатита (ОВП и хоонического активного гепатита (ХАГ) по клиническим данным.По этому способу для ХАГ характерна большая длительность заболевания, отсутствие преджелтушного периода, плотная консистенция печени и "внепеченочные" знаки.

Недостаток этого способа заключается в том, что клинические проявления ХАГ могут впервые развиваться при уже сформировавшемся патологическим процессе без предшествующего анамнеза, а преджелтушный период при ОВГ достаточно вариа(57) Использование: в инфекционных, гастроэнтерологических и гепатологических отделениях клинических больниц для дифференциальной диагностики. Цель: повышение точности. Сущность изобретения: в плазме крови пациента радиоиммунологи-: ческим методом определяют уровень лейкотриена В4, При повышении его содержания относительно нормы в 3 раза диагностируют острый вирусный гепатит В, а при снижении относительно нормы в 2 раза — хронический активный гепатит В. Положительный эффект: повышается точность диагностики на 317, что позволяет назначить своевременную адекватную терапию. предотвратить реинфекцию у больных и расширить область применения способа, 1 табл. белен по срокам (от одного дня до нескольких недель) и не имеет характерной клинической картины. Кроме того, консистенция печени, определяемая пальпаторно. — cy6bективное понятие, она может быть достаточно плотной и при ОВГ. Самые распространенные "внепеченочные" знаки — "сосудистые звездочки" встречаются при

ХАГ в 75 случаев. Таким образом, этот с особ не является достаточно надежным, Известен способ дифференциальной диагностики ОВГ и ХАГ, основанный íà определении уровней сывороточных трансаминаз — аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартвтаминотрансферазы (АСТ). П ри увеличении содержания.АЛТ и АСТ в 10 и более раз относительно нормы диагностируют

ОВГ, при их уменьшении — ХАГ. Недостатком этого способа является его низкая на1772758

35

55 дежность, т.к. повышение уровня АСТ в 5 раэ отмечается у 94,4ф> больных ОВГ и у

93 (больных ХАГ, а АЛТ вЂ” у 97 (больных

ОВГ и 87,5$ больных ХАГ, Кроме того, известный способ не пригоден для дифференциальной диагностики в ранние сроки, т.к, активность трансминаэ достигает максимума на 2-3 неделе заболевания.

Известен также способ дифференциальной диагностики ОВГ и ХАГ, которйй основан на определении в сыворотке крови уровня гамма — глубулинов турбодиметрическим методом. При увеличении их содержания выше нормы диагностируют ХАГ, а при их содержании, соответствующем норме—

ОВГ.

Недостатком данного способа является его небольшая точность, что особенно проявляется во второй половине заболевания

08Г, когда уровень гамма — глобулинов также может повышаться. Это объясняется тем, что подъем уровня гамма — глобулинов отражает активацию гуморального иммунитета, а не форму заболевания. Гуморальный иммунитет может активизироваться как при

ОВГ, так и при ХАГ, т.к. s основе сравниваемых заболеваний лежит процесс воспаления (острый или хронический), Целью изобретения является повышение точности дифференциальной диагностики.

Поставленная цель достигается тем, что в плазме крови радиоиммунологическим методом определяют уровень лейкотриена (ЛТ) 84. При повышении его содержания относительно нормы диагностируют ОВГ, а при снижении относительно нормы — ХРГ.

Использование в заявляемом способе в качестве биохимического критерия ЛТ 84 позволяет повысить точность дифференциальной диагностики по сравнению с прототипом, т.к.. выбранный критерий обладает высокой специфичностью. Это объясняется тем, что ЛТ 84 является медиатором воспа-. ления, т.е. того процесса, который лежит в основе ОВГ и ХАГ. Он индуцирует адгезионные свойства полиморфно-ядерных лейкоцитов, усиливает их способность к агрегации, подвижность, способствует высвобождению лизоцина из лейкоцитов, обеспечивая таким образом адекватное развитие воспалительного процесса, направленного на выздоровление.

Именно поэтому при ОВГ возрастает потребность в ЛТ 84, и организм увеличивает его синтез, что сопровождается повышением его содержания в плазме крови.

Переход процесса в хроническую стадию сопровождается рассогласованием механизмов адекватного ответа, снижением порога чувствительности, нарушениями в процессе синтеза биологически активных веществ. Кроме того, при ХАГ происходит нарушение в системе мононуклеарных фагоцитов, клетки которой в печени являются основными продуцентами ЛТ ВЧ, вследствие чего наблюдается снижение синтеза ЛТ

84 при хроническом воспалительном процессе в ткани печени, и соответственно при

ХАГ выявлено снижение уровня ЛТ 84 в плазме крови.

Способ осуществляют следующим образом.

1. Забирают у больного утром натощак

3,0 мл венозной крови в пластиковую пробирку, содержащую 0,2 мл 2, раствора ЭДТА. с помощью пластикового шприца.

Центрифугируют кровь при 4000 об/мин в течение 15 мин для деления плазмы, которую затем отбирают из верхнего слоя, Определяют концентрацию ЛТ 84 в плазме крови радиоиммунологическим методом с помощью наборов фирмы

"Amersham". Наборы позволяют с высокой точностью определить содержание ЛТ 84 по конкурентному связыванию (ЗН) ЛТ и эндогенного ЛТ 84 в плазме крови с антителами к ЛТ 84. Разделение связанного с антителами и свободного ЛТ 84 достигается осаждением свободного ЛТ В4 суспензией древесного угля (декстрана), После центрифугирования измеряют активность супернатанта.

Для определения содержания ЛТ В4 в диапазоне от 1,6 до 200 гlмл строится стандартная кривая из 6 точек, Для этого в 6 пробирок вместо проб добавляют стандартный раствор, При построении стандартной кривой для каждой известной концентрации немеченных ЛТ 84 в пробе ло величине радиоактивной метке в супернатанте рассчитывают процент связывания антисывороткой меченного (3 Н) ЛТ 84. На оси ординат откладывают величину процента связывания меченого, а на оси абсцисс в логарифмическом масштабе — количество немеченного исследуемого вещества. соответствующего определенному проценту связывания.

При определении содержания ЛТ В4 используют антисыворотку, стандарты, буфер, входящие в набор реактивов для радиоммунологического определения ЛТ 84.

Диагностируют ОВГ при увеличении уровня ЛТ В4 s плазме крови относительно нормы, а при его снижении относительно нормы — ХАГ, Для установления нормы (М) содержания ЛТ В4 в плазме крови была исследована группа здоровых лиц (доноров) в количестве 20 человек.

1772758

В таблице показаны результатыопределения уровня ЛТ 84 в плазме крови у различных групп наблюдений, Иэ таблицы видно, что при ОВГ уровень

ЛТ 84 повышается (в среднем в 3 раза), а при ХАГ уровень ЛТ 84 снижается в (среднем в 2 раза), Изменения уровней ЛТ 84 при-0BI и

ХАГ носят диаметрально противоположный характер различия сравниваемых показателей (р<001).

Пример 1, Больной И„27 лет, история болезни й. 368 поступил во 2-е отделение

2-й инфекционной больницы г. Харькова

27.09 89, с жалобами на тошноту после приема пищи. слабость, чувство тяжести в правом подреберье, желтушность склер, потемнение мочи, Анамнез заболевания; считает себя больным а течение 2 месяцев, когда появилась слабость, 3а неделю до обращения к врачу появилось чувство тяжести а правом подреберье, тошнота, окружающие обратили внимание на желтушность склер. Больной был направлен районной поликлиникой в инфекционною больницу с подозрением на острый вирусный гепатит.

Анамнез жизни: с 1984 по 1986 годы являлся донором, в июле 1989 г. прооперирован по поводу язвенной болезни двенадцатиперстной кишки. Обьективные данные; состояние удовлетворительное. Склеры и видимые слизистые иктеричны. Субиктеричность кожных покровов. В легких аизикулярное дыхание. АД 110/70 мм рт,ст.

Тоны сердца громкие, ритмичные, ЧСС 60 в минуту. Язык чистый, влажный. Живот мягкий, участвует а акте дыхания, умеренно болезненный при пальпации в правом подреберье, Печень нэ 2-3 см ниже края реберной дуги, крэй ее ровный, плотно-эластичный, поверхность гладкая. Селезенка не увеличена.

Лабораторные данные: анализ крови: эритроциты 4,4 10 г/л, Нв 137 г/л ц.п.о, 9

12 тромбоциты 141- t 0 г/л, лейкоциты 4,0 10 г/л, эозин 2, пэл. 2, сегменты 64, лимфоциты

23, моноциты 9, СОЭ 12 мм/ч. В анализе мочи обнаружены желчные пигменты. В сыворотке крови методом РОПГА обнаружен

HBs Ag, ACT 3,4 ммоль ч/л, АЛТ 3,7 ммоль/л, гамма — ГТП 180 Е/л. ЩФ 5,1 Е/л, билирубин общий 41,5 мкмоль/л, билирубин прямой 18,4 мкмоль/л, билирубин непрямой 23,1 мкмоль/л. Протромбиновый индекс 65%. Общий белок 62,0 г/л, альбумины 56,5%, глобулины; а1 — 3,9%, а2—

3,9%; P — 10,5%; )< — 25,5%, А/Г 1,32.

20

30

Инструментальные данные; Эхосоноскопия: печень умеренно увеличена в размерах, ткань ее однородной структуры, повышенной эхогенной плотности. Отмеча5 ется незначительное расширение желчных ходов. Селезенка не увеличена.

Сканирование печени: печень умеренно увеличена в размерах. распределение РФП диффузно- неравномерное, определяется активация селезенки.

Проведенное исследование вызвало определенные сомнения в диагнозе острого вирусного гепатита В, в связи с чем у больного бйл дополнительно определен уровень

5 лейкотриена 84 в плазме крови, который составил 17,4 пг/мл. Кроме того, была произведена пункционная биопсия печени, Морфологическая картина биоптата ткани печени соответствовала характеру биоптата при хроническом активном гепатите.

Для дальнейшего лечения больной был переведен в гастроэнтерологическое отделение Харьковского НИИ терапии.

Пример 2. Больной А,. 35 лет, история болезни N. 579, поступил ао 2-е отделение

22-й инфекционной больницы г, Харькова

30.10.89. с жалобами на боли в правом подреберье, тошноту, желтушность кожных покровов, темную мочу.

Анамнез заболевания; считает себя больным около двух недель, когда появилась легкая тошнота, субиктеричность склер. К врачу не обращался, В день госпитализации состояние значительно ухудшилось; желтушность кожных покровов усилилась, моча темная, боли а правом подреберье. При обращении а поликлинику он был направлен в 22-ю инфекционную больницу г, Харькова с диагнозом: острый вирусный гепатит.

Анамнез жизни: из перенесенных заболеваний отмечает пневмонию в 1987 г., и в мае 1989 г., по поводу которых проходил стационарное лечение.

Объективные данные: состояние удовлетворительное. Кожные покровы и видимые слизистые желтушной окраски.

Внепеченочных энэкоа нет. Со стороны органов дыхания и сердечно-сосудистой системы патологии не выявлено. Живот мягкий, болезненный при пальпэции в правом подреберье. Нижний край печени на 3 — 4 см ниже края реберной дуги, плотно-эластичный, ровный, болезненный при пальпации, Г!альпируется нижний полюс селезенки, Лабораторные данные: анализ крови; эритроциты 4,5 10 г/л, На 141 г/л: ц.пп.

0,9, тромбоциты 225 10 г/л, лейкоциты

6,8 10 г/л эозин 1, палочки 1, сегменты

44, лимфоциты 48, моноциты 6, СОЭ 18

1772758 8

Составитель В. Брусиловская

Техред M.Ìîðãåíòaë Корректор H.Áó÷oê

Редактор

Заказ 3844 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 мм/ч, в моче обнаружены желчные пигменты. В сыворотке крови методом РОПГА выявлен HBsAg, АСТ 4,1 ммоль/ч.л., АЛТ 4,5 ммоль/ч.л., гамма — Mfl 210Е/л, ЩФ 4,7

Е/л. Билирубин общий 56,8 мкмоль/л, пря- 5 мой — 23,5 мкмоль/л, непрямой — 33,3 мкмоль/л. Протромбиновый индекс 72 .

Общий белок — 72 г/л, альбумины 53,6®, глобулины. а1-3,27, ар -4,2, р-7,4, у - 31,6, А/Г 1-17.. 10

Инструментальные данные: Эхосоноскопия: печень умеренно увеличена в размерах, ткань печени однородной структуры, со стороны желчевывод йцих путей патологии не выявлено. Селезенка умеренно уве- 15 личена. Сканирование печени; печень умеренно увеличена в размерах, накопление РФП диффузно — неравномерное, отмечается активация ретикуло-зндотелиальной системы, повышенное накопление РФП в 20 селезенке.

В результате проведенного исследования возникла необходимость проведения дифференциального диагноза между острым и хроническим активным гепатитами В. 25

Поэтому у больного в плазме крови определили уровень ЛТ 84, который составил 119,4 пг/мл. Кроме того, была проведена пункционная биопсия печени. Морфологические изменения в ткани печени соответствовали изменениям, характерным для острого вирусного гепатита. Установленный диагноз: острый вирусный гепатит. Больной продолжил курс лечения в инфекционном стационаре.

Использование предложенного способа диагностики по сравнению с прототипом позволяет повысить точность íà 31 и специфичность способа, дает возможность назначить своевременную адекватную терапию, предотвратить реинфекцию у больных ХАГ и расширить область применения способа.

Формуле изобретения

Способ дифференциальной диагностики острого и хронического активного гепатита 8 путем исследования крови, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью повышения точности, в плазме крови радиоиммунологически определяют уровень лейкотриена 64 и при повышении его уровня относительно нормы в 3 раза диагностируют острый вирусный гепатит 8, а при его снижении s 2 разе — хронический активный гепатит В.