Способ получения средства, обладающего радиозащитным действием

 

Использование: в медицине, а именно в радиобиологических экспериментах, клинической и сельскохозяйственной практике на территориях с радиоактивным загрязнением . Сущность изобретения способ включает экстракцию грибов, при этом в качестве гриба используют Schizophyllum commune, а в качестве экстрагента - этиловый спирт. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 A 61 K 35/84

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4890224/13 (22) 12,12.90 (46) 30.06.93. Бюл. М 24 (71) Институт радиобиологии AH БССР и Институт микробиологии АН БССР (72) А.Н.Капич, Ю.М.Леонтьев и Е,Ф.Конопля (56) Бурлакова Е.Б. и др. Биооксиданты в лучевом поражении и злокачественном росте. М,: Наука, 1975.

Виленчик М.M. и др. Радиозащитное действие природных каротинсодержащих препаратов, исследование каротинила на белых крысах. Радиобиология, 1988, т, 28, в, 4, с. 542-544.

Изобретение относится к медицине, а именно к радиопротекторам природного происхождения, и может найти применение в радиобиологических экспериментах, клинической и сельскохозяйственной практике на территориях с радиоактивным загрязнением.

Согласно изобретению в способе получения средства, обладающего радиозащитным действием, включающем культивирование мицелия гриба на питательной среде. обработку его экстрагентом и получение конечного продукта, из грибов используют Schizophyllum commune, а в качестве экстрагента — этиловый спирт, Полученное таким образом средство обладает выраженным радиозащитным действием, не уступающим известному синтетическому препарату — ионолу.

Гриб Schizophyllum commune образует макроскопические. достаточно крупные плодовые тела (1-5 см в диаметре), отлича... Я „„1824195 À1 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО РАДИОЗАЩИТНЫМ ДЕЙСТВИЕM (57) Использование: в медицине, а именно в радиобиологических экспериментах, клинической и сельскохозяйственной практике на территориях с радиоактивным загрязнением. Сущность изобретения: способ включает экстракцию грибов, при этом в качестве гриба используют Schlzophylium commune, а в качестве экстрагента — этиловый спирт.

1 табл. ется активным ростом мицелия, что позволяет легко поступать его мицелиальные культуры. Плодовые тела сидячие до почти распростертых с отогнутым краем, часто подвешенные, прикрепляющиеся к субстрату суженным основанием, вееровидные, половинчатые до почти округлых, срастающиеся боками или черепитчатые, реже одиночные, тонкие, сухие, мягкокожистые.

Поверхность радиально-бороздчатая, от войлочной до щетинисто-волосистой, от беловатой до серой, Край лопастный, тонкий, обычно подгибающийся или заворачивающийся вниз, Ткань очень тонкая, слегка желатинозная, на разрезе заметная в виде темной линии, примыкающей к опушению шляпки. Пластинки вееровидные, радиально расходящиеся от суженного основания шляпки, с опушенными закругленными краями, от сероватых до серовато-розовых и бледно-фиолетово-розоватых. Базидии удлиненно-булавовидные. 2- 4-споровые.

1824195

20-25 х 7 — 8 мкм. Споры цилиндрические, тонкостенные, гладкие, малиновые с розоватым оттенком, 3 — 4,5 х 1-1,5 мкм. Споровый порошок розоватый.

Мицелиальные культуры, полученные из плодовых тел гриба, имеют следующие культурально-морфологические особенности: на сусло-агаре колонии белые, пушистые, быстро растущие; на среде с таннином положительная реакция на экстрацеллюлозные оксидазы, как правило, не проявляется. Генеративные гифы бесцветные, 2 — 4 мкм в диаметре, с небольшими выростами на клеточных стенках. Конидии, хламидоспоры и оидии отсутствуют. Перечисленные признаки позволяют легко идентифицировать мицелиальные культуры при получении их из плодовых тел, Предложенный способ осуществляется следующим образом.

Из плодовых тел гриба S. commune, собранных в природе, выделяют мицелиальную культуру на твердой питательной среде.

Далее мицелий гриба выращивают на жидкой питательной среде в глубинной культуре. Мицелий отделяют фильтрованием, промывают водой и экстрагируют этиловым спиртом, Спиртовой экстракт концентрируют под вакуумом, разводят дистиллированной водой. Полученное таким образом средство было испытано на облученных животных для питья при свободном доступе. ,Применение средства позволяет значительно (в 2 раза) увеличить средний срок жизни облученных животных и обеспечивает их

100 -ное выживание на 30-й день после облучения.

Пример, Выбирают наиболее крупные плодовые тела гриба S. commune и скальпелем удаляют с их поверхности частички почвы и растительные остатки. После механической очистки плодовые тела обтирают вначале сухой стерильной ватой, а затем ватой, смоченной этиловым спиртом, Разрезают плодовое тело стерильным скальпелем и переносят части ткани в чашки

Петри на поверхность агариэованной питательной среды — сусло-агара. Чашки помещают в.термостат при температуре

26-28 С. На 5 — 7-е сутки появившийся мицелий микроскопируют с целью идентификации культуры. Мицелий из эоны роста пересевают в следующую чашку с сусло-агаром для изучения культурально-морфологических свойств и уточнения видовой принадлежности гриба. Затем мицелиальную культуру S. commune пересевают в пробирки со скошенным сусло-агаром и выращивают в течение 6 суток, Культуру засевают смывом в жидкую глюкоза-пептон5

45 ную среду следующего состава: глюкоза—

10 г, пептон — 3 r, KHgP04 — 1 г, 05 г, кукурузный экстракт — 2 г, H20 — до 1 л, Глубинное культивирование проводят в колбах на качалке в течение 4-5 суток при температуре 26-28 С. Выросший мицелий измельчают путем встряхивания в колбе со стерильными бусами и используют для hoсева глюкозо-пептонной среды аналогичного состава. Культивирование проводят в течение 3-х суток при тех же условиях, Мицелий отделяют фильтрованием, промывают водой и зкстрагируют этиловым спиртом при гомогенизации в ступке с кварцевым песком. Этиловый спирт берут из расчета 25 мл на 1 г мицелия, при этом экстракцию проводят трехкратно в течение

30 мин, Спиртовой экстракт концентрируют в 100 раз под вакуумом при температуре не выше 35-40 С и далее разводят дистиллированной водой до содержания сухих веществ

О.1 мгlмл. Остаточное содержание этилового спирта не превышает 1-2ф,.

Полученное таким образом средство было испытано на мышах линии СВА, с начальной массой 18 — 20 г, подвергнутых внешнему гамма-облучению 6,0 Гр (мощность дозы — 0,055 Гр/с) на установке УГУ420 (Со). Средство давали мышам для питья при свободном доступе по 1-1 5 мл в сутки в течение 28 суток после облучения.

Для сравнения параллельно группе мышей, получавшей такую же дозу облучения, давали известный антиоксидант, обладающий радиопротекторным действием в такой же дозе.

Как видно иэ результатов, приведенных в таблице, применение средства обеспечивает 100 -ное выживание мышей на 30-й день после облучения, а также значительно увеличивает средний срок жизни по сравнению с контролем. По своему радиозащитному действию средство не уступает" известному антиоксиданту-радиопротектору — ионолу. По сравнению с известным (прототип) предложенный способ позволяет расшйрить сырьевую базу и использовать в качестве исходного сырья гриб $. commune образующий макрбскопические плодовые тела, что упрощает его идентификацию и выделение в чистую культуру.

Формула изобретения

Способ получения средства, обладающего радиоэащитным действием, включающий культивирование мицелия гриба на питательной среде, обработку его экстрагентом и получение конечного продукта, отличающийся тем, что иэ грибов используют Schlzophytlum commune, а в качестве экстрагента — этиловый спирт.

1824195

Составитель А. Капич

Редактор Л. Павлова Техред M,Ìoðãåíòàë Корректор Г. Кос

Заказ 2204 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб.. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r, Ужгород, ул.Гагарина, 101