Способ определения морфологических изменений соединительной ткани в популяционных массовых исследованиях

 

Использование: в области медицины, в частности, в диагностике сердечно-сосудистых заболеваний. Сущность изобретения: проводят микробиопсию кожи, взятую у основания ногтевой пластинки, и по измененным физическим свойствам (изменение положения и интенсивности рефлексов рентгеновской диафракционной картины) судят о состоянии коллагена соединительной ткани, а затем о состоянии соединительной ткани. Способ позволяет осуществлять морфологические исследования основной структуры СТ-коллагена в условиях массовых эпидемиологических исследований и является легкоосуществимым, малотравматичным и в то же время высокоинформативным диагностическим методом.

Изобретение относится к области медицины, в частности, к диагностике сердечно-сосудистых заболеваний.

Эпидемиологический подход к изучению наиболее распространенных заболеваний (сердечно-сосудистые, онкологические и др.) дает наиболее точную информацию о состоянии здоровья населения ("Ежегодник мировой санитарной статистики", ВОЗ, Женева, 1990). Этот же метод позволяет судить не только о распространенности тех или иных заболеваний, но и проводить многоплановые научные исследования, а также диагностические и лечебные вмешательства.

Массовые популяционные исследования в диагностическом плане затруднены рядом обстоятельств и сложные, трудоемкие методы исследования неприемлемы в условиях амбулаторного, ограниченного во времени приема обследуемых; в основном диагностические процедуры включают функциональные методы исследований и пробы крови.

Диагностика состояния тканей, как правило, осуществляется при постмортальных исследованиях. В доступной нам литературе не встретились сведения об изучении тканей человека в условиях массовых исследований. Прижизненная диагностика свойств соединительной ткани (СТ) чрезвычайно важна, т.к. СТ является основной тканью организма человека (В.В.Серов, А.Б.Шехтер "Соединительная ткань", 1981) и большое число патологических состояний связано с нарушениями строения СТ как наследуемых генетически (V.A.McKuzick "Mendelian Inheritance in Man 8th ed. 1989), так и имеющих патогенетическую связь (Bonnet J, et al. "Serum type III procollagen peptide levels in coronary artery disease (a marker of atherosclerosis)", Eur.J.Clin.Invest. 1988 Fev. 18 (1), 18-21.

Известна работа James V.J. et al. "Use of X-Ray Diffraction in Study of Human Diabetic and Aging Collagen" Diabetes, v.40, March, 1991, взятая нами за прототип, в которой определены измененные физические свойства коллагена (К) основной составной части СТ, у больных с инсулин-зависимым сахарным диабетом при этом используется травматичный забор тканей сухожилий; метод используется лишь у 25 лиц и не обсуждается возможность метода при массовых популяционных обследованиях. Обнаружены изменения экваториального расстояния d 14-15A^o у больных диабетом по сравнению с нормой, однако выбор указанного межплоскостного расстояния (одного из нескольких десятков на рентгенограммах K) представляется неубедительным, т.к. в нормальных волокнах K оно сильно зависит от состояния гидратации тканей (контрольная группа состояла из секционного материала). К тому же измерения указанного межплоскостного расстояния представляются лежащими на грани точности измерения, т.к. велика реальная ошибка измерения d под этими углами за счет естественной ширины линий.

Мы предлагаем измерять полуширину и интенсивность всех наблюдаемых на рентгенограммах рефлексов (под большими, малыми и средними углами дифракции) прежде всего для неориентированных образцов, что позволяет нам точно определять полуширину и относительную интенсивность рефлексов и максимально нивелировать их форму. Наиболее информативной оказывается область дифракционной картины под большими углами (межплоскостные расстояния от 2,9A^o до 14A^o), так как полуширина и интенсивность рефлексов в этой области, с одной стороны, может быть измерена с максимальной точностью, а с другой реагирует на изменения в структуре и степени ее упорядочения на всех иерархических уровнях.

Цель: определить физические свойства основной стурктуры СТ коллагена путем изучения положения и интенсивности рефлексов рентгеновской дифракционной картины в микробиопсийном материале кожи ногтевого ложа в условиях массовых эпидемиологических исследований.

Способ осуществляется следующим образом: при соблюдении правил асептики, но без предварительной обработки ногтевого ложа 1 пальца рук производят отслойку и забор биоптата кожи (примерно длиной 0,5 мм, шириной 5-8 мм) у основания ногтевой пластинки, затем производят обработку 5% раствором йода. Используя метод рентгеновской дифракции устанавливается наличие или отсутствие изменения положения и интенсивности рефлексов рентгеновской дифракционной картины, что свидетельствует об измененных структуральных свойствах макромолекул коллагена. Хронометрия забора биопсийного материала 2-3 минуты.

Образцы анализируются по вышеописанному способу рентгеновского исследования К.

Заключение: таким образом, предложенный способ морфологического исследования основной структуры СТ коллагена в условиях массовых эпидемиологических исследований является легкоосуществимым, малотравматичным и в то же время высокоинформативным диагностическим методом.

Формула изобретения

Способ определения морфологических изменений соединительной ткани в популяционных массовых исследованиях путем определения физических свойств коллагена, отличающийся тем, что проводят микробиопсию кожи, взятую у основания ногтевой пластинки, и по измененным физическим свойствам: изменение положения и интенсивности рефлексов рентгеновской дифракционной картины в виде нарушенной ориентации трехмерных молекул коллагена и измененных геометрических параметров и интенсивности рефлексов, судят о состоянии коллагена соединительной ткани и затем о состоянии соединительной ткани.