Способ оценки ин витро интравагинальных лекарственных форм

 

Изобретение относится к медицине, а именно к технологии лекарственных форм. Способ состоит в том, что в условиях термостатирования при 37°С на подложку из пленки полиакриламидного геля 18-22% наносят смесь исследуемой пробы с водным раствором производных целлюлозы и определяют скорость стекания при наклоне 10 и 70^o, затем готовят вторую подложку с равномерно нанесенным водным раствором производных целлюлозы, помещают на нее исследуемую пробу и определяют площадь распределения и при ее значении от 13,8 мм² и выше и скорости стекания от 1,12 мм/с при наклоне 10° и от 14,68 мм/с и ниже при наклоне 70° соответственно оценивают лекарственную форму как эффективную. Способ позволяет более корректно осуществлять подбор составов и технологий вагинальных лекарственных форм. 3 ил., 2 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к технологии лекарственных форм.

Развитие технологии лекарственных препаратов неразрывно связано с развитием представлений о поведении препарата в организме. Так, например, применение методов гастро- и рентгеноскопии, томографии, физических и физико-химических методов анализа при изучении поведения пероральных лекарственных препаратов позволило определить основные этапы пребывания препарата с момента его введения - попадания в желудок до момента всасывания лекарственных веществ (т.н. "фармацевтическая фаза") и выявить влияние качественных и количественных показателей желудочного и кишечных соков, состояния слизистых желудочно-кишечного тракта на поведение лекарственного препарата на каждом из этих этапов. Это в свою очередь позволило совершенствовать технологию пероральных лекарственных форм с точки зрения направленного действия препаратов (пролонгированные формы, желудочно- или кишечно-растворимые таблетки и капсулы, осмотические системы).

Невозможность рутинного использования подобных методов исследований в повседневной практике при разработке лекарственных препаратов и стремление к стандартизации условий для изучения их поведения в "фармацевтической фазе" привели к созданию формализованных моделей (модельных систем), имитирующих определенные свойства организма. К числу подобных модельных систем относятся приборы по определению распадаемости таблеток и капсул ("Качающаяся корзинка"), изучению высвобождения лекарственных веществ ("Вращающаяся корзинка"), вошедшие практически во все фармакопеи мира [1,2,3]. Аналогичная картина наблюдается при изучении поведения мягких лекарственных форм, где в качестве модельных систем, позволяющих оценивать процессы чрезкожного всасывания, можно рассматривать диализный блок Крувчинского, аппарат "Сарториус" [4].

В настоящее время для оценки качества вагинальных лекарственных форм существует тест, описанный в Фармакопее Великобритании 1993 г., который заключается в определении времени разложения (дезинтеграции) вагинальных лекарственных форм (таблеток и суппозиториев), помещенных на перфорированную металлическую пластину прибора в водную среду [2]. Прибор состоит из прозрачного стеклянного или пластмассового цилиндра, в стенке которого при помощи трех держателей закреплена вставка из металла. Вставка состоит из двух круглых, отстоящих друг от друга на 30 мм, перфорированных пластин нержавеющей стали, каждая из которых имеет 39 отверстий диаметром 4 мм.

Прибор опускают в сосуд, содержащий 4 л воды (37^oC), оснащенный медленно работающей мешалкой и держателем, который позволяет закреплять прибор в вертикальном положении на глубине от 1 до 90 мм под уровнем воды и поворачивать его на 180^o, не вынимая из воды.

Суппозиторий или таблетку считают распавшимися, если в течение определенного времени (до 60 минут) входящие в их состав компоненты разделились (жировые на поверхности, нерастворимые на дне, растворимые растворились) или произошло размягчение суппозитория до такой степени, что образовавшаяся масса не оказывала сопротивления давлению стеклянной палочки.

Однако данный тест не отражает реальные процессы, происходящие с лекарственным препаратом на слизистой влагалища (разрушение лекарственной формы в малом объеме жидкости, смешивание с ней и распределение по поверхности слизистой, адгезию к поверхности). Кроме того, тест основан на процессе механического разрушения таблеток и суппозиториев и не является универсальным для оценки вагинальных лекарственных форм в целом, так как не может быть использован для оценки поведения других лекарственных форм (мази, капсулы и др.).

Отсутствие способа оценки лекарственных форм, учитывающего реальные процессы, протекающие при попадании лекарственного препарата в среду влагалища, затрудняет подбор составов и разработку технологий интравагинальных лекарственных препаратов.

В связи с этим, разработка способа испытаний ин витро на основе оценки поведения лекарственных препаратов во влагалище, позволяющего более корректно осуществлять подбор составов и технологий вагинальных лекарственных форм, является актуальной.

Задачей изобретения является разработка способа оценки ин витро интравагинальных лекарственных форм.

Поставленная задача решается тем, что приготавливают модельную жидкость, имитирующую отделяемое влагалища, в количестве, необходимом для проведения исследования. В качестве жидкости используют водные растворы производных целлюлозы: оксиэтилцеллюлозы (ОЭЦ) 5,3-6,0%; метилцеллюлозы (МЦ) 2,5,-2,9%; натриевой соли поликарбоксиметилового эфира целлюлозы (NaКМЦ) 3,5-3,8%; натриевой соли гидрированной формы поликарбоксиметилового эфира целлюлозы (NaНКМЦ) 3,3-3,6%.

Приготавливают две модельные подложки (А и В), имитирующие слизистую оболочку влагалища. А: подложку получают в сосуде с крышкой, площадь которого составляет около 50 см². Свободное воздушное пространство между поверхностью подложки и крышкой сосуда рассчитывают таким образом, чтобы его объем составлял ≈ 100 см³. Зная общий объем чашки, приливают такое количество раствора полимера, чтобы оставшийся свободный объем составил ≈ 100 см³. В: подложку получают на пластине из стекла шириной 15 см и длиной 30 см, термостатируют при 37^oC. На обратной поверхности стекла предварительно наносят по ширине у противоположных краев линию "старта" и линию "финиша".

В качестве подложки используется пленка полимера - полиакриламида (акриламид 18-22%, N, N' - метиленбисакриламид (сокращенно бис-акриламид) 0,2-0,3%, вода 81,8-77,7%).

На поверхность подложки А наносят 2,0 мл модельной жидкости, равномерно распределяя по всей поверхности пленки, накрывают сверху крышкой и термостатируют при 37^oC. Исследуемый лекарственный препарат (вагинальная таблетка, суппозиторий, навеска мази и т. д.) помещают на поверхность подложки при 37^oC. Наблюдают через разные промежутки времени, отмечая площадь распределения для каждого лекарственного препарата. Отмечают также однородность образовавшейся на поверхности слизистой массы лекарственного препарата.

На поверхность подложки В на уровне линии "старта" точечно наносят исследуемый лекарственный препарат, предварительно смешанный при 37^oC с 2,0 мл модельной жидкости. Пластину располагают в пространстве таким образом, чтобы плоскость поверхности пластины образовала с плоскостью горизонтальной поверхности (стола) угол 10 и 70^o. При этом линия "старта" должна находиться в верхней точке угла. Измеряют время прохождения фронта стекаемой капли от линии "старта" до линии "финиша" при данных углах наклона.

Проводят сравнительную оценку для различных образцов данной лекарственной формы. Для каждого образца проводят необходимое для получения статистически достоверных данных количество испытаний. После каждого испытания поверхность подложки очищают водой очищенной, излишки которой удаляют фильтровальной бумагой.

Образец лекарственного препарата, показавший максимальную площадь и скорость распределения, характеризуется способностью максимально распределяться по поверхности слизистой.

Образец лекарственного препарата, показавший минимальное время cтекания, характеризуется способностью максимально долго находиться в месте введения.

На основании проведенных исследований отбирают лекарственные формы такого состава, которые с учетом физико-химических свойств лекарственного вещества, этиологии и патогенеза заболевания наиболее полно отвечают поставленным требованиям.

Предлагаемый способ позволяет проводить сравнительную оценку поведения вагинальных лекарственных форм по параметрам скорости и времени распределения по поверхности слизистой и способности удержания на данной поверхности, расположенной под наклоном (адгезивные свойства) и имеет в своей основе следующие предпосылки.

Поведение лекарственного препарата во влагалище характеризуется процессами: распадаемости (также растворения или расплавления); распределения образовавшейся смеси по поверхности слизистой и высвобождения из нее лекарственных веществ; удержания смеси на поверхности слизистой, расположенной под наклоном. Протекание данных процессов зависит, в основном, от физико-химических характеристик слизистой оболочки влагалища и влагалищного отделяемого: объема отделяемого влагалища; pH среды; сродства отделяемого влагалища к гидрофильным и липофильным веществам; вязкости отделяемого; смачивания отделяемым влагалищной стенки; адгезивных свойств отделяемого по отношению к слизистой.

С точки зрения функциональной системы, подходящей для оценки поведения лекарств, влагалище можно представить как некую биологическую структуру, представляющую полую трубку диаметром 1,5-2 см, длиной 8-9 см, покрытую изнутри слоем вязкой жидкости объемом ≈ 1,5-5,0 мл и расположенную в пространстве вертикально под углом от 10^o до 70^o, что соответствует положению тела лежа и стоя (фиг 1).

При продольном разрезе эта система будет представлять пластинку, имеющую размер ≈ 6 см х 9 см, верхняя поверхность которой (слизистая) покрыта слоем вязкой жидкости (отделяемое влагалища) толщиной ≈ 0,2-0,9 мм (фиг. 2).

Оценка поведения вагинальных лекарственных препаратов в условиях живого организма человека, в силу социальных, психологических и технических причин, является чрезвычайно сложной. Изучение поведения лекарственных препаратов в среде влагалища с использованием биологического материала представляется мало возможным в силу ряда причин, связанных с его особенностями (труднодоступность, нестандартность, необходимость консервирования). В связи с этим была разработана модельная система, отражающая наиболее важные процессы, происходящие с лекарственной формой при попадании в среду влагалища.

Пример реализации.

Полиакриламидную пленку (акриламид 20%, бис-акриламид 0,25%, вода 79,75%) получают в чашке Петри, площадь которой составляет 50 см², что соответствует средней площади поверхности слизистой влагалища. На поверхность пленки наносят 2,0 мл 3,8% водного раствора NaКМЦ, равномерно распределяя по всей поверхности пленки, накрывают сверху крышкой и термостатируют при 37^oС. Приготавливают по одной чашке для каждой серии препаратов.

Вагинальный суппозиторий из исследуемой серии (1.1., 1.2., 1.3., 2.1., 2.2. , 2.3., 3.1., 3.2., 3.3., свечи "Флагил", свечи "Бетадин") помещают на поверхность слизистой при 37^oC (фиг. 3) Наблюдают через различные промежутки времени, отмечая площадь распределения для каждого лекарственного препарата (табл. 1).

Отмечают также однородность образовавшейся на поверхности слизистой массы лекарственного препарата.

Полиакриламидную пленку (акриламид 20%, бис-акриламид 0,25%, вода 79,75%) получают на пластине из стекла шириной 15 см и длиной 30 см и термостатируют при 37^oC. На обратной поверхности стекла предварительно наносят по ширине у противоположных краев линию "старта" и линию "финиша". Образец лекарственного препарата смешивают при 37^oC с 2,0 мл 3,8% водного раствора NaКМЦ и наносят на линию "старта". Пластину располагают в пространстве таким образом, чтобы плоскость поверхности пластины образовала с плоскостью горизонтальной поверхности стола угол 10^o и 70^o. При этом линия "старта" должна находиться в верхней точке угла. Измеряют время отекания для каждой серии исследуемых лекарственных препаратов при данных углах наклона (табл. 2).

После каждого испытания поверхность подложки очищают водой очищенной, излишки которой удаляют фильтровальной бумагой.

Суппозитории из серий 2.1, 2.2, 2.3, свечи "Бетадин" показали максимальную площадь и скорость распределения и характеризуются способностью максимально распределяться по поверхности слизистой.

Суппозитории из серий 1.1., 1.2., 1.3., 2.1., 2.2., 2.3., свечи "Флагил" показали минимальное время отекания и характеризуются способностью максимально долго находиться в месте введения.

Таким образом, из исследованных образцов вагинальных суппозиториев суппозитории серий 2.1., 2.2., 2.3. показали, с одной стороны, способность максимально распределяться по поверхности слизистой, а, с другой стороны, удерживаться на ней в течение длительного времени.

При использовании в качестве модельной жидкости различных вышеназванных производных целлюлозы в указанных интервалах концентраций получают сопоставимые результаты.

Технико-экономическая значимость.

Предлагаемый способ позволяет проводить на основании сравнительной оценки ин витро отбор лекарственных форм такого состава, которые при попадании в среду влагалища характеризуются определенными показателями времени и площади распределения по поверхности слизистой, а также способности удерживаться на ней в течение определенного времени и, с учетом физико-химических свойств лекарственного вещества, этиологии и патогенеза заболевания, обладают наиболее полным суммарным эффектом.

Это позволяет использовать более совершенный подход в создании вагинальных лекарственных форм, направленный на оптимизацию их составов и технологии.

ЛИТЕРАТУРА 1. Государственная Фармакопея СССР XI издания: в 2-х т. - М.: Медицина. 1990.

2. British Pharmacopea, 1993.

3. USP 23,1995.

4. Технология лекарственных форм. М.: Медицина, - 1986, в 2-х т, т 2.

Формула изобретения

Способ оценки ин витро интравагинальных лекарственных форм, отличающийся тем, что в условиях термостатирования при 37^oC на подложку из пленки полиакриламидного геля 18 - 22% наносят смесь исследуемого препарата с водным раствором производных целлюлозы и определяют скорость стекания при наклоне 10 и 70^o, затем готовят вторую подложку с равномерно нанесенным водным раствором производных целлюлозы, помещают на нее исследуемый препарат и определяют площадь распределения и при ее значении от 13,8 мм² и выше и скорости стекания от 1,12 мм/с при наклоне 10^o и от 14,68 мм/с и ниже при наклоне 70^o соответственно оценивают лекарственную форму как эффективную.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5