Способ лечения рака молочной железы

 

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для лечения рака молочной железы. Для этого при предоперационном проведении аутогемохимиотерапии аутокровь больного центрифугируют, отделяют клеточную часть от надосадочной плазмы, клеточную часть соединяют с эпиталамином, а надосадочную плазму смешивают с химиопрепаратами, инкубируют в течение 30 мин при t = 36,5-37°C и вводят больной в течение 2 недель 3 раза в неделю до 1,5 курсовых доз в составе: винкристин 1,5 мг, метотрексат 50 мг, доксорубицин 30 мг, циклофосфан 200 мг, эпиталамин 10 мг в 1 и 8 дни лечения; доксорубицин 30 мг, циклофосфан 400 мг, эпиталамин 10 мг в 3, 5, 10, 12 дни в/в капельно, в остальные дни - 2, 4, 6, 7, 9, 11, 13, 14 вводят эпиталамин по 10 мг, разведенного ex tempore в/м. Способ позволяет уменьшить токсическое влияние химиопрепаратов, увеличить их курсовые дозы и повысить эффективность лечения вплоть до полной регрессии опухоли, а также делает возможным проведение операции в адекватном объеме в максимально ранние сроки. 5 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии и может быть использовано для лечения рака молочной железы цитостатическими средствами.

Известен способ лечения рака (см. авт.свид. N 940379 от 15/05/80 A 61 K 35/14, авт. Сидоренко Ю.С., Кацман М.В.), включающий внутривенное введение винкристина, 5 фторураила, метотрексата, отличающийся тем, что 1/4 часть общепринятой курсовой дозы препарата растворяют в 50 мл физ.раствора, смешивают с 145-150 см аутокрови, инкубируют при t = 36,5-37,0^oC в течение 25-30 мин и капельно внутривенно вводят больному.

Известный способ хотя и повышает переносимость общепринятой курсовой дозы препаратов, однако не позволяет проводить иммунокоррекцию состояния организма. Возникающие в некотором проценте случаев миелодепрессия, токсические реакции со стороны желудочно-кишечного тракта, иммуной системы и др. не позволяют увеличить дозу вводимых химиопрепаратов. Длительность курса в предоперационном периоде не позволяет приблизить сроки оперативного вмешательства.

Известно, что опухолевый процесс сопровождается развитием иммунодепрессии. Кроме того, в эндокринный дисбаланс при раке молочной железы вовлечены все звенья эндокринной системы, включая гипоталамогипофизарную систему. Известен способ лечения рака молочной железы (см. кн. "Использование препаратов эпифиза в клинической практике". Изд-во Томского университета г.Томск, Сибирский филиал Всесоюзного кардиологического научного центра АМН СССР, 1989 г. стр.97-121) путем применения препарата эпифиза класса цитомединов-эпиталамина. Этот препарат давали больным при неоперабельных формах рака, после радикальной мастэктомии, химиотерапии, лучевой терапии, при противопоказаниях ко всем видам лечения. Таким больным проводили лечение эпиталамином по 10-20 мг ежедневно в течение 10-15 дней на курс лечения от 6 до 10 курсов в течение 3-5 лет с интервалом между курсами не более 6 месяцев.

В результате лечения отмечалось улучшение общего состояния, уменьшение болей интоксикации. Однако эффект был нестойким, и у некоторых больных требовались повторные курсы лечения. Не представилась возможность оценить состояние иммунитета по функциональным показателям, сравнить результаты с контрольной группой. Кроме того, длительность лечения является одним из недостатков данного способа.

Известен "Способ лечения диссеминированных форм рака молочной железы" (Патент РФ N 2019170 от 15/9/94 опубл. Бюл. N 17 от 15/9/94), выбранный нами в качестве прототипа. Способ заключается в том, что разовую дозу препаратов растворяют в 40 мл физ.раствора, смешивают со 150 мл одногруппной донорской плазмы, инкубируют при t 37-37,5^oC в течение 1 часа и вводят внутривенно капельно 3 раза в неделю до 1,5 курсовых доз.

К недостаткам данного способа следует отнести возможную несовместимость донорской плазмы по антигенному составу с кровью реципиента, проблемы с наличием плазмы редкой группы, возникновение токсических изменений со стороны крови, иммунной системы.

Целью изобретения является уменьшение токсического влияния химиопрепаратов при применении их в повышенной курсовой дозе, коррекция иммунного статуса больной, сокращение длительности курса предоперационного лечения, а также повышение эффективности лечения.

Поставленная цель достигается тем, что в предоперационном периоде при проведении аутогемохимиотерапии -200 мл аутокрови, взятой у больной, центрифугируют, отделяют клеточную часть от надосадочной плазмы, клеточную часть аутокрови обрабатывают эпиталамином, а надосадочную плазму смешивают с химиопрепаратами, инкубируют в течении 30 минут и вводят в течение 2-х недель 3 раза в неделю до 1,5 курсовых доз в составе: винкристин 1,5 мг, метотрексат 50 мг, доксорубицин 30 мг, циклофосфан 200 мг, эпиталамин 10 мг в 1 и 8 дни лечения; доксорубицин 30 мг, циклофосфан - 400 мг, эпиталамин 10 мг в 3, 5, 10, 12 дни в/в капельно; в остальные дни 2, 4, 6, 7, 9, 11, 13, 14 эпиталамин по 10 мг в/м, разведенный ех tempore физ.раствором.

Изобретение "Способ лечения рака молочной железы" является новым, так как оно не известно из уровня медицины в области химиотерапевтического лечения рака молочной железы.

Новизна изобретения заключается в том, что в предоперационном периоде при проведении аутогемохимиотерапии разделяют кровь больного на клеточную часть и надосадочную плазму, причем клеточную часть аутокрови соединяют с эпиталамином, а надосадочную плазму смешивают с химиопрепаратами, затем каждую смесь инкубируют в течение 30 минут и вливают в/в капельно больной 3 раза в неделю в течение 2-х недель до 1,5 курсовых доз, сочетая это введение с внутримышечным введением эпиталамина, разведенного ex tempore.

Известно, что основными препаратами для лечения рака молочной железы в современной онкологии являются антибиотики антрациклинового ряда. Однако увеличение доз химиопрепаратов лимитируется из-за развития тяжелых токсических реакций со стороны крови, желудочно-кишечного тракта, иммунной системы и др. Известный (способ лечения диссеминированных форм рака молочной железы> (прототип изобретения) с применением гомоплазмохимиотерапии имеет следующие недостатки. Во-первых, существует возможность развития аллергических и общебиологических реакций на введение инородной плазмы. Во-вторых, эта методика не позволяет провести иммунокоррекцию при введении химиопрепаратов. В-третьих, не обеспечивает проведение химиотерапии в столь высокой дозе и в ранние промежутки времени, которые приводили бы к значительному уменьшению опухолевой массы с переходом неоперабельного состояния в операбельное. Кроме того, в лабораторных экспериментах нами было установлено, что после обработки лимфоцитов доксорубицином (антибиотиком антрациклинового ряда) происходит угнетение их функциональной активности, а в ряде случаев и повреждение их структуры.

Для преодоления этих недостатков нами предложена оригинальная методика разделенной аутоплазмохимиотерапии с аутоклеточной иммунотерапией. При этом аутоплазмохимиотерапия исключает аллергические и общебиологические реакции организма, позволяет образовывать соединения химиопрепарат-белок, которые не обладают повреждающим действием на клетки крови, и напротив, обладают свойством направленного действия на опухоль.

Разделение клеточной массы с аутоплазмой исключает возможность повреждающего действия химиопрепаратов на клетки, а воздействие эпиталамина на клеточную массу позволяет реализовать его иммуномодулирующий эффект частично уже in vitro, не утрачивая своих свойств для организма в целом. Таким образом, формируется физиологический буфер, который смягчает и даже нивелирует негативное действие химиопрепаратов на макроорганизм. В результате появляется возможность значительного повышения разовых и суммарных доз, а также повышения интенсивности химиотерапии в целом за счет введения высоких доз химиопрепаратов в короткие промежутки времени.

Для доказательства вышесказанного нами были проведены исследования.

Кровь больных раком молочной железы инкубировали с химиопрепаратами. До и после этого лимфоциты были изучены в ряде иммунологических тестов (РСРО с эритроцитами барана и мыши, РБТЛ с различными митогенами). В первом опыте химиопрепараты были представлены смесью, включающей 5 фторурацил, циклофосфан, доксорубицин. Результаты представлены в таблице N 1.

Т. е. после обработки лимфоцитов смесью препаратов, включающей доксорубицин, уменьшилась экспрессия рецепторов к эритроцитам барана, снизился митогенный ответ ФГА, Con A, пирогенал. Во втором опыте исследовалось 2 пробы: одна - с доксорубицином, другая - со смесью 5 фторурацила и циклофосфана. Результаты изучения лимфоцитов в иммунологических тестах до и после инкубации с указанными пробами представлены в таблице N 2.

Т.е. после инкубации лимфоцитов с доксорубицином полученное снижение экспрессии рецепторов на мембранах Т и В клеток к эритроцитам мыши (EM) и барана (Ea) было намного большим в сравнении со смесью из 2-х химиопрепаратов. После обработки Т лимфоцитов Т активином уменьшилась экспрессия рецепторов к эритроцитам барана, что свидетельствует об истощении резервных возможностей клеток Т ряда.

Таким образом, после обработки химиопрепаратов отмечается изменение мембранного фенотипа лимфоцитов и угнетение их функциональной активности.

Взаимодействие доксорубицина с лимфоцитами крови больных раком молочной железы оценивали по интенсивности флюоресценции клеток. Проба, в которой лимфоциты обрабатывались плазмой, предварительно проинкубированной с доксорубицином, давала меньшую интенсивность флюоресценции (разница показателей статистически достоверна) по сравнению с пробой, где лимфоциты были обработаны доксорубицином непосредственно. Подобный, но несколько менее выраженный эффект наблюдали в пробах, в которых введению доксорубицина предшествовала инкубация клеток крови с эпиталамином. Это позволяет говорить о том, что как плазма, так и эпиталамин уменьшают проникновение доксорубицина в клетки крови, которое сопровождается повреждением их структуры.

У 20 больных раком молочной железы изучали влияние эпиталамина на функциональную активность лимфоцитов после инкубации с эпиталамином при t 36,5 - 37,0^oC в течение 30 минут по пробам РБТЛ. Контролем служили пробы без эпиталамина.

При подсчете индекса стимуляции (ИС) РБТЛ после инкубации с эпиталамином в концентрации 1:100 и 1:1000 было получено 1,44 ± 0,09 и 1,43 ± 0,11 соответственно. При сравнении этого индекса с индексом стимуляции под действием ФГА, Kon А, ЛПС, оказалось, что он не имеет статистически достоверных отличий, от ИС Kon А, который составил 1,64 ± 0,09.

Таким образом, отмечено митогенное действие эпиталамина при инкубации с клетками крови в данных условиях. Обе использованные концентрации эпиталамина обладают сходным эффектом. По нашим данным, преимущественная стимуляция отмечена в В звене при концентрации эпиталамина 1:1000.

Изобретение имеет изобретательский уровень, как для специалиста онколога-химиотерапевта явным образом не следует из уровня современной медицины в данной области лечения рака молочной железы.

Изобретение является не очевидным, новым, не следующим из уровня современной медицины, не известно ни в мировой, ни в СНГ, ни в России медицинской литературе.

Изобретение является промышленно применимым, так как может быть использовано в здравоохранении, медицинских учреждениях, занимающихся лечением больных раком молочной железы, НИИ онкологии, онкодиспансерах.

Способ лечения рака молочной железы выполняется следующим образом. У больной раком молочной железы из периферических вен забирают 200 мл крови во флакон с гемоконсервантом "Глюгицир", центрифугируют при частоте 1000 об/мин в течение 1 часа. Таким образом получают клеточную (эритротромболейкомассу) и до 100-125 мл надосадочной плазмы. В стерильных условиях, с использованием двух игл (одна - для поступления воздуха, другая длиной до 15 см - для отсасывания плазмы) отбирают в шприц Жане плазму, которую затем вводят через стерильную иглу в другой флакон с гемоконсервантом "Глюгицир". Каждый химиопрепарат, предназначенный к введению во флакон с плазмой, разводят в отдельном шприце в 10 мл физ.раствора, что суммарно составляет 40 мл и смешивают со 100-125 мл полученной плазмы. Во флакон с клеточной массой вводят 10 мг эпиталамина, разведенного ex tempore в 1 мл физ.раствора. Оба флакона с растворенными в плазме химиопрепаратами и введенным в клеточную массу эпиталамином инкубируют при t - 36,5 - 37,0^oC в течение 1 часа и вводят внутривенно капельно 3 раза в неделю до 1,5 курсовых доз. Комбинация химиопрепаратов и эпиталамина рассчитана на 2 недели и вводится в режиме: винкристин 1,5 мг, метотрексат 50 мг, доксорубицин 30 мг, циклофосфан 200 мг, эпиталамин 10 мг в 1 и 8 дни лечения; доксорубицин 30 мг, циклофосфан 400 мг, эпиталамин 10 мг в 3, 5, 10, 12 дни в/в капельно; в остальные дни 2, 4, 6, 7, 9, 11, 13, 14 эпиталамин по 10 мг в/м, разведенный ex tempore физ.раствором.

После введения препаратов наблюдают за общим состоянием больной, осуществляют лабораторный контроль: общий анализ крови 2 раза в неделю, общий анализ мочи 2 раза в неделю, ЭКГ до и после лечения, иммунограмма до и после лечения.

Пример конкретного применения "Способа лечения рака молочной железы". Больная М. (и.б. 2950/ж) 47 лет, обратилась впервые в институт 21/III-98 г. При поступлении правая молочная железа больше левой за счет расположенного в нижних квадрантах образования размером 10 х 15 см, плотного, бугристого на ощупь, с нечеткими контурами.

Над всей поверхностью молочной железы симптом лимонной корочки положителен, умеренная гиперемия, ареола инфильтрирована, белая, сосок несколько втянут. В правой подмышечной области плотные лимфоузлы до 2,5 х 2 см, ограничено подвижные. Опухоль была верифицирована цитологически. Клинический диагноз: рак правой молочной железы (узловая форма со вторичным отеком) с метастазами в правые подмышечные лимфоузлы (T₄N₂M₀) ст.III. С 26/III-98 г. до 8/IV-98 г. проведен курс на разделенной аутокрови с эпиталамином. Суммарно введено: винкристина - 3 мг, метотрексата - 100 мг, доксорубицина - 180 мг, циклофосфана - 2000 мг, эпиталамина -140 мг.

Курс переносила без каких-либо токсических явлений. Эффект был оценен через 2 недели после окончания курса: опухолевый узел полностью регрессировал, гиперемии не отмечалось, значительно уменьшился симптом лимонной корочки, лимфоузлы подмышечные сократились до 0,5 х 0,5 см, подвижные, мягкоэластичные.

Данные иммунограммы больной до и после лечения представлены в таблице N 4.

После лечения предлагаемым методом возрастает процентное и абсолютное содержание ФГА трансформированных клеток с 36 до 46% (в абс. с 0,54 до 1 · 10⁹/л и ЛПС трансформированных клеток с 28 до 32% (0,42 до 0,688 · 10⁹/л. Это подтверждается возрастанием индекса стимуляции (ФГА с 1,63 до 2,11, ЛПС - 1,27 до 1,45). Это говорит о том, что эпиталамин стимулирует функциональную активность T- и B-клеток периферической крови у больных раком молочной железы. Кроме того, количество БГЛ возрастает с 3 до 5% (0,045 до 0,11 · 10⁹/л), что свидетельствует об усилении противоопухолевой резистентности после введения эпиталамина у этих больных. Одновременно общее количество лимфоцитов возрастает с 30 до 43% при сохранности общего количества лейкоцитов. В целом это иллюстрирует стимуляцию клеточного иммунитета под действием эпиталамина.

Больной была выполнена модифицированная радикальная мастэктомия по Пейти справа. Макроскопически ткань молочной железы плотная с бело-серыми соединительно-тканными прослойками, опухолевый узел не определялся. Микроскопически на фоне фиброзной ткани очаги инфильтрирующего протокового рака. В лимфоузлах гиперплазия лимфоидной ткани.

Послеоперационный период протекал без особенностей.

Курс разделенной аутогемохимиотерапии с эпиталамином проведен в условиях РНИОИ 3-м больным местно-распространенным раком молочной железы (T₃-4N₁-2M₀-1, где M₁ - метастазы в надключичные лимфоузлы на стороне поражения). Контрольная группа состояла из 5 больных, подвергшихся системной химиотерапии традиционным методом введения химиопрепаратов и была сопоставима по всем основным критериям с основной, и подвергшихся системной химиотерапии традиционным методом введения химиопрепаратов.

Побочные токсические эффекты представлены в таблице N 5.

В контрольной группе выраженность побочных токсических реакций заставляла прерывать курс химиотерапии и не позволила ввести указанные дозы.

Непосредственные результаты предлагаемого метода показали высокую эффективность - полная регрессия первичного опухолевого узла отмечена во всех 3-х случаях, что позволило всем больным провести радикально оперативное вмешательство.

Высокую эффективность данного метода можно объяснить возможностью введения химиопрепаратов в 1,5 курсовых дозах в короткий промежуток времени (реализация доза - эффект + время - эффект), включением дополнительно иммунных противоопухолевых механизмов, снижением побочных токсических явлений и возможностью выполнения режима и соблюдения сроков введения химиопрепаратов.

Технико-экономическая эффективность способа лечения рака молочной железы заключается в том, что использование способа позволяет улучшить переносимость противоопухолевых препаратов, что позволяет увеличить курсовые дозы и соблюсти режимы, а следовательно, и повысить эффективность лечения вплоть до полной регрессии опухоли. Значительное уменьшение побочных эффектов позволяет провести операцию в максимально ранние сроки в адекватном объеме.

Формула изобретения

Способ лечения рака молочной железы, включающий внутривенное капельное введение противоопухолевых химиопрепаратов, предварительно инкубированных с аутокровью, и эпиталамина, отличающийся тем, что при предоперационном проведении аутогемохимиотерапии аутокровь больной центрифугируют, отделяют клеточную часть от надосадочной плазмы, клеточную часть соединяют с эпиталамином, а надосадочную плазму смешивают с химиопрепаратами, инкубируют в течение 30 мин при t = 36,5 - 37^oС, и вводят больной в течение 2 недель 3 раза в неделю до 1,5 курсовых доз в составе: винкристин 1,5 мг, метотрексат 50 мг, доксорубицин 30 мг, циклофосфан 200 мг, эпиталамин 10 мг в 1 и 8 дни лечения, доксорубицин 30 мг, циклофосфан 400 мг, эпиталамин 10 мг в 3, 5, 10, 12 дни в/в капельно, в остальные дни - 2, 4, 6, 7, 9, 11, 13, 14 вводят эпиталамин по 10 мг, разведенный ex tempore в/м.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4