Штамм микроорганизма escherichia coli - продуцент l- треонина, способ получения продуцирующего l-треонин штамма e.coli и способ получения l-треонина (варианты)

 

Изобретение относится к генетической инженерии. Интродуцируют генетический материал из продуцирующего треонин микроорганизма в хромосому штамма Е. coli. Осуществляют инсерцию ненативного промотора в указанную хромосому перед положением на хромосоме и в функциональной связи с генами биосинтеза треонина как показано на фиг.5. Полученный штамм культивируют в среде и выделяют L-треонин. Таким штаммом-продуцентом L-треонина является E.coli NRRL B-21593. Изобретение позволяет получить штамм E.coli, эффективно продуцирующий L-треонин с высоким выходом. 4 с. и 19 з.п.ф-лы, 5 ил., 3 табл.

Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть). Тл

Формула изобретения

1. Способ получения L-треонина, предусматривающий культивирование штамма Е. соli в среде и выделение L-треонина, отличающийся тем, что используют Е. соli, который содержит на хромосоме оперон треонина (thr), функционально связанный с ненативным промотором.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что E. coli способен образовывать 50 г/л L-треонина за 30 ч.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что ненативный промотор выбирают из группы, состоящей из промотора tас, промотора lac, промотора trp, промотора Ipp, промотора P_L и промотора Р_R.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что оперон треонина содержит ген, который кодирует устойчивую к ингибированию конечным продуктом аспартаткиназу-гомосериндегидрогеназу.

5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве Е. coli выбирают штамм kat-13.

6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что ненативный промотор представлен промотором tac.

7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что E. coli содержит дефектный ген треониндегидрогеназы на хромосоме.

8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что оперон треонина получают из штамма АТСС 21277.

9. Способ получения продуцирующего L-треонин штамма Е. соli, отличающийся тем, что интродуцируют оперон треонина (thr) из продуцирующего треонин микроорганизма в хромосому штамма Е. соli, осуществляют инсерцию ненативного промотора в указанную хромосому перед положением на хромосоме и в функциональной связи с генами биосинтеза треонина и необязательно удаляют из хромосомы регуляторные участки, препятствующие биосинтезу треонина, и участки, обуславливающие потребности в источниках питания.

10. Штамм микроорганизма Е. соli NRRL В-21593 - продуцент L-треонина.

11. Штамм по п. 10, отличающийся тем, что его хромосома содержит оперон треонина (thr), функционально связанный с ненативным промотором.

12. Штамм по п. 11, отличающийся тем, что оперон треонина состоит из гена устойчивой к ингибированию конечным продуктом аспартаткиназы-I-гомосериндегидрогеназы I (thrА), гена гомосеринкиназы (thrВ) и гена треонинсинтазы (thrС).

13. Штамм по п. 11, отличающийся тем, что он имеет обозначение штамм kat-13.

14. Штамм по п. 11, отличающийся тем, что ненативный промотор выбран из группы, состоящей из промотора tас, промотора trp, промотора Iрр, промотора Р_L и промотора Р_R.

15. Штамм по п. 11, отличающийся тем, что ненативный промотор является промотором tас.

16. Штамм по п. 11, отличающийся тем, что он содержит дефектный ген треониндегидрогеназы на хромосоме.

17. Штамм по п. 11, отличающийся тем, что оперон треонина получают из штамма АТСС 21277.

18. Способ получения L-треонина, предусматривающий культивирование штамма Е. соli в среде и выделение L-треонина, отличающийся тем, что используют Е. соli, который содержит на хромосоме оперон треонина (thr), функционально связанный с ненативным промотором, причем в качестве указанного штамма выбирают штамм Е. соli NRRL В-21593.

19. Способ по п. 18, отличающийся тем, что Е. соli способен образовывать 50 г/л L-треонина за 30 ч.

20. Способ по п. 18, отличающийся тем, что оперон треонина содержит ген, который кодирует устойчивую к ингибированию конечным продуктом аспартаткиназу-гомосериндегидрогеназу.

21. Способ по п. 18, отличающийся тем, что штамм Е. соli имеет обозначение штамм kat-3.

22. Способ по п. 18, отличающийся тем, что ненативный промотор выбирают из группы, состоящей из промотора tас, промотора trр, промотора Iрр, промотора Р_L и промотора Р_R.

23. Способ по п. 18, отличающийся тем, что ненативный промотор является промотором tас.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13, Рисунок 14, Рисунок 15, Рисунок 16, Рисунок 17, Рисунок 18, Рисунок 19, Рисунок 20, Рисунок 21, Рисунок 22, Рисунок 23, Рисунок 24, Рисунок 25, Рисунок 26, Рисунок 27, Рисунок 28, Рисунок 29, Рисунок 30, Рисунок 31, Рисунок 32, Рисунок 33, Рисунок 34, Рисунок 35, Рисунок 36, Рисунок 37, Рисунок 38, Рисунок 39, Рисунок 40, Рисунок 41, Рисунок 42