Композиция для подавления фитопатогенных микроорганизмов, способ подавления фитопатогенных микроорганизмов и набор для получения композиции

 

Изобретение относится к защите растений, в частности к композиции для подавления болезнетворных бактерий и/или грибов на растениях и т.п., а также к способу, в котором применяется данная композиция, и к набору для ее получения. Композиция включает лактопероксидазу, тиоционат (SCN^-) и/или йодид (I^-) и донорную систему пероксида водорода, в частности, глюкозооксидазу и глюкозу. Преимуществом настоящего изобретения является то, что опасность появления у микроорганизмов резистентности к предложенной композиции очень мала или даже отсутствует. Кроме того, предложенная композиция имеет природную основу и экологически безопасна. 3 с. и 21 з.п. ф-лы, 5 табл.

Данное изобретение относится к композиции для подавления болезнетворных (патогенных) бактерий и/или грибов на растениях, деревьях и т.п., а также к способу, которым применяется эта композиция.

Существуют различные типы пестицидов для борьбы с микроорганизмами, такими как бактерии и грибы. Зачастую они представляют собой синтетические средства с возможными неблагоприятными действиями в отношении людей, животных и окружающей среды. Кроме того, эти средства часто обладают тем недостатком, что микроорганизм в процессе применения становится стойким к средству. После этого необходимо создавать новое средство для подавления соответствующего болезнетворного микроорганизма.

Известны также некоторые фунгициды, у которых активность связана с температурой или активность зависит от определенной степени влажности. Для обработки растений и деревьев, которые растут на открытом воздухе, такие ограниченные условия применения являются огромным недостатком. Но аналогичная проблема может иметь место и в случае культурных растений, выращиваемых в теплицах.

Таким образом, целью данного изобретения является предоставление нового пестицида, который не обладает указанными выше недостатками и который может использоваться для подавления болезнетворных бактерий и грибов на растениях, деревьях и т.п. in situ.

Данная цель достигнута согласно изобретению с помощью композиции, включающей лактопероксидазу, тиоцианат (SCN^-) и/или йод (I^-) и донорную систему пероксида водорода, в частности глюкозооксидазу и глюкозу. Помимо системы глюкозооксидаза/глюкоза могут использоваться также другие донорные водородные системы, такие как перкарбонат натрия или стабилизированный пероксид водорода.

Преимущество этого нового средства согласно изобретению состоит в том, что опасность резистентности очень мала или даже отсутствует. Кроме того, это средство имеет природную основу.

Антимикробная активность лактопероксидазы сама по себе известна и описана, например, в Европейском патенте 0514417 и международной заявке W097/26908. Однако они относятся к патентованию этой так называемой LP системы (лактопероксидазной системы), предназначенной для сохранения косметических продуктов или для медицинских целей для людей и животных. Поскольку обработка микробных инфекций на растениях, деревьях и на их частях проводится в условиях, во всех отношениях отличных (и зачастую в значительной степени изменяющихся) от условий лечения человека и животных, тот факт, что известные системы на основе лактопероксидазы могли бы также обладать биологическим действием на растительные патогены, не является очевидным.

Как уже показано выше, многие растения, в частности сельскохозяйственные культуры и деревья, растут на открытом воздухе и, таким образом, подвергаются воздействию погодных условий, таких как ветер, дождь, солнечный свет, изменение температур и т.п. Все эти факторы могут снижать эффективность системы на основе ферментов, которые, в конце концов, являются относительно чувствительными по сравнению с химическими пестицидами. Таким образом, квалифицированный специалист в области пестицидов сразу не оценит полезность и широкую применимость пестицида на основе лактопероксидазы.

В предпочтительном воплощении данного изобретения в композицию также добавлена масляная основа. Посредством включения в композицию относительно небольшого количества масляной основы удивительным образом дополнительно повышается эффективность композиции.

Масло выполняет задачу обеспечения хорошего распределения композиции на листьях и других частях растения и предотвращения испарения средства, которое фактически является водной композицией. Активность композиции не зависит от конкретной температуры и относительной влажности. Вероятность развития резистентности к композиции является незначительной, поскольку система не обладает тем специфическим действием на микроорганизмы, которым обладают антибиотики. Клетки растений, животных и человека являются не чувствительными к системе.

Композиция согласно изобретению включает, например, на литр водного раствора, по меньшей мере, 10 мг лактопероксидазы; по меньшей мере, 50 I.E. глюкозооксидазы; по меньшей мере, 0,05% глюкозы; по меньшей мере, 25 мг йодида (I^-); по меньшей мере, 5 мг тиоцианата (SCN^-); и необязательно максимально 1% масляной основы. Кроме того, максимально 0,2% агента распределения может дополнительно необязательно присутствовать. Композиция предпочтительно включает на литр водного раствора, по меньшей мере, 50 мг лактопероксидазы; по меньшей мере, 100 I.E. глюкозооксидазы; по меньшей мере, 0,1% глюкозы; по меньшей мере, 50 мг йодида (I^-); по меньшей мере, 10 мг тиоцианата (SCN^-) и необязательно максимально 0,1% масляной основы. Необязательно может присутствовать максимально 0,1% агента распределения.

Хорошая активность композиции получена, когда она включает на литр водного раствора 10-100 мг, предпочтительно 30-70 мг лактопероксидазы; 50-1000 I.E., предпочтительно 100-250 I.E. глюкозооксидазы; 0,05-2%, предпочтительно 0,1-1% глюкозы; 25-200 мг, предпочтительно 50-100 мг йодида (I^-); 5-50 мг, предпочтительно 10-20 мг тиоцианата (SCN^-) и необязательно 0,01-2%, предпочтительно 0,2-1% масляной основы. Количество агента распределения, который может быть добавлен, составляет 0,01-0,2%, предпочтительно 0,05-0,07%.

Масляная основа всегда состоит, по меньшей мере, из масла и средства для эмульгирования масла в водном растворе для образования эмульсии типа "масло в воде". Это средство для эмульгирования может представлять собой отдельный эмульгатор, но может также быть образовано самим маслом, которое обладает свойствами самоэмульгирования. Такие самоэмульгирующиеся масла могут быть получены посредством модифицирования масла, например, посредством этоксилирования. На основе профессиональных знаний квалифицированный специалист может подобрать наиболее подходящий эмульгатор для определенного масла.

Масло, используемое в масляной основе, выбрано из группы минеральных масел, растительных масел, животных масел или представляет смесь одного или более масел из одной или более этих групп. Рекомендованы масла, которые по существу уже обладают в большей или меньшей степени антимикробной активностью.

Примерами растительных масел являются арахисовое масло, кунжутное масло, масло семян рапса (рапсовое масло), льняное масло, касторовое масло, соевое масло, кукурузное масло (corn germ oil), масло семян хлопчатника (хлопковое масло). Среди этих масел кунжутное масло, как установлено, особенно подходит для цели изобретения.

В случае животного масла выбран, например, рыбий жир, такой как жир сельди или масло макрели (скумбрии). Подходящими минеральными маслами являются, например, парафиновые масла различных типов или масла керосинового типа (kerosine type oils).

Для дополнительного способствования распределению композиции по поверхности, подлежащей обработке, один или более агентов распределения может дополнительно вводиться в композиции или в масляную основу. Квалифицированный специалист в данной области очень легко может подобрать подходящие агенты распределения. Такими агентами распределения являются обычно неионогенные вещества, снижающие поверхностное натяжение. Рекомендованы этоксилированные спирты, например, Volpo Т7^TM, и фосфатидильные липиды, такие как Nathin 130^TM.

В особенно подходящем воплощении композиции согласно изобретению масляная основа состоит, по меньшей мере, из 80-90, предпочтительно 85 частей масла; 5-15, предпочтительно 10 частей эмульгатора; необязательно 1-10, предпочтительно 5 частей лецитиновой фракции. Необязательно 0,01-0,2%, предпочтительно 0,05% агента распределения может быть добавлено в композицию на литр водного раствора.

В предпочтительном воплощении композиция согласно изобретению включает масляную основу, состоящую из кунжутного масла, полиоксиэтиленсорбитолгексаолеата, такого как эмульгатор Atlas 1086 ^TM (ICI), и лецитиновой фракции, включающей фосфатидильные липиды, такие как Nathin 130^TM (ENR), а также агент распределения, состоящий из этоксилированных спиртов, такой как Volpo T7^TM (CRODA).

Для продления активности композиции in situ могут быть добавлены один или более адгезивов. Адгезивы обеспечивают, например, то, что компоненты композиции не будут смыты с растения дождем или при других условиях. Адгезивы могут также легко подбираться квалифицированным специалистом из доступного перечня. Примерами являются крахмалы, смолы, такие как ксантановая смола, аравийская камедь и карбоксиметилцеллюлозы (CMCs).

Композиция может применяться посредством распыления, разбрызгивания, атомизации, надземного распыления, орошения, погружения, капельного орошения (drip irrigation). Особенно предпочтительным способом применения композиции является распыление как посредством малообъемных способов (аэрозольные системы), так и способами распыления больших объемов. Капельное орошение может использоваться для систем культурных растений на субстрате из каменной ваты или других растительных субстратах. В обоих последних случаях присутствие масляной основы не строго обязательно для получения оптимальной активности. Погружение в ванну с композицией особенно подходит для обработки частей растений, в частности частей, подлежащих сбору, таких как луковицы, клубни, плоды и т.п.

Композиция согласно изобретению может быть получена коммерчески доступным образом в различных формах. Рекомендована форма, в которой активность фермента продлевается настолько, насколько это возможно, так как это продлевает длительность хранения продукта. Активность фермента лактопероксидазы начинает действовать, как только появляется донор пероксида водорода. В данном случае система глюкозооксидаза/глюкоза представляет собой донор пероксида водорода. Поэтому рекомендовано, по меньшей мере, для определенных применений, поставлять гидропероксидный донор отдельно от ферментной лактопероксидазы. Кроме того, масляная основа и агент распределения могут, если это необходимо, быть упакованы отдельно.

Таким образом, в конкретном воплощении изобретения предоставляется набор для получения композиции, который включает необязательно концентрированную ферментную композицию, содержащую, по меньшей мере, лактопероксидазу и необязательные добавки, композицию донора пероксида водорода, включающую, по меньшей мере, глюкозооксидазу и глюкозу, тиоцианат и/или йодид и необязательные прочие добавки, и масляную композицию, содержащую, по меньшей мере, масло, необязательный эмульгатор, необязательные агенты распределения и необязательные прочие добавки, где три композиции должны смешиваться друг с другом перед применением в таком соотношении, чтобы получить композицию согласно изобретению.

Композиция согласно изобретению может необязательно поставляться в продажу в концентрированной форме, которая может быть сухой или нет. Конечная композиция получается посредством разбавления или растворения, например, в воде.

Грибами, которые могут успешно контролироваться композицией согласно данному изобретению, являются, в частности, следующие: Bortyotinia spp. ("серая плесень"), такие как, например, В. fuckeliana (анаморфный Botrytis cinerea), Didymella spp., такие как, например, D. Bryonia (=Микосферелла у тыквенных), D. lycopersici (= рак у томатов), Puccunia spp. ("ржавчина"), такие как, например, Р. horiana (=Японская ржавчина), Sphaerotheca spp. ("настоящая мучнистая роса"), такие как, например, S. fuliginea (милдью на огурце) и S. pannose (милдью на розе), Erysiphe spp., Oidium spp. и Leveillula taurica (также типы настоящей мучнистой росы), Fusarium spp. ("гниль корневой шейки и/или вилт"), Phytophtora spp. ("заболевание корневой шейки и корня"), Pythium spp. ("заболевание корневой шейки"), Plasmopara, Peronospora и Sclerospora spp. (типы ложной мучнистой росы), Rhizoctonia, Verticillium и Sclerotina spp. (вызывает пятнистость), Rhizopus и Penicillium spp. (вызывает гниль при хранении) и Venturia spp. (вызывает паршу).

Бактериальными инфекциями, которые можно лечить композицией согласно изобретению, являются, в частности, инфекции, вызываемые Erwinia chrysanthemi, Pseudomonas syrongae, Xanthomonas campestris, Curtobactrium flaccumfaciens.

Композиция и способ согласно изобретению могут быть использованы в самом широком смысле для защиты растений и контроля патогенов, например, в сельском хозяйстве, садоводстве, при выращивании овощей, декоративных растений, плодов, луковиц, при выращивании растений в закрытых помещениях, в лесоводстве и т. д. и в качестве продукта для применения для домашних растений. Помимо самих растений и деревьев можно обрабатывать также части растений, такие как луковицы, клубни, цветы, черенки, плоды и т.п.

Защита растений и контроль патогенов, как подразумевается, означает согласно изобретению как защитную (профилактическую), так и лечебную активности. Однако в большинстве случаев это будет относиться к уничтожению болезнетворных микроорганизмов, которые уже присутствуют. Тем не менее, в ряде других случаев предусмотрена превентивная обработка частей растений. Для активизации композиции согласно изобретению необходима свободная вода, но после сушки ее можно снова сделать активной посредством добавления воды.

Композиция согласно изобретению представляет собой природный пестицид и, следовательно, экологически благоприятна.

Изобретение также относится к способу подавления болезнетворных для растений бактерий и/или грибов на растениях, деревьях или их частях, включающему нанесение композиции согласно изобретению на растение, дерево или их часть.

Изобретение будет дополнительно объяснено с помощью приведенных далее примеров, которые даны только в качестве иллюстрации.

ПРИМЕРЫ ПРИМЕР 1 Прямая активность средства согласно изобретению в отношении Verticillium lecanii Используют порошкообразные споры гриба Verticillium lecanii, который используется в качестве опытного микроорганизма, с концентрацией приблизительно 10•10¹⁰ спор/грамм. Взвешивают 10 грамм и суспендируют в 100 мл воды. Споры следует после этого оставить для замачивания в течение минимум получаса.

Приготавливают 500 мл средства ингредиентами, представленными в Таблице 1.

рН водного раствора доводят до 6,5 лимонной кислотой. Затем к 90 мл средства добавляют 10 мл суспензии спор. Лактопероксидазной системе дают возможность последовательно воздействовать на споры в течение 1, 3, 5 и 15 минут и в каждой точке отбирают 1 мл и разбавляют 1000х водопроводной водой для разбавления лактопероксидазной системы.

Из этого разбавленного раствора отбирают 30 мкл и по каплям наносят на чашку с декстрозным агаром Сабуро (Sabouraud Dextrose Agar-SDA). Спустя 24 и 48 часов определяют процент проросших спор.

Этот процент сравнивают с эталоном. Эталон содержит 10 мл суспензии спор с 90 мл воды, его также разбавляют 1000x и каплю величиной 30 мкл помещают на SDA. Опыт проводят при температуре 21^oС.

Устанавливают, что таким способом Verticillium lecanii поражается средством согласно изобретению на 99% в течение 1 минуты.

ПРИМЕР 2 Активность в отношении Verticillium lecanii после активности средства в течение 24 часов.

Эксперимент проводят по методике примера 1 с тем отличием, что лактопероксидазную систему сначала хранят в течение 24 часов в реторте объемом 500 мл и только после этого добавляют суспензию спор. Цель состоит в проверке, является ли система активной спустя 24 часа.

С такой рецептурой спустя 24 часа система остается активной и Verticillium lecanii все еще поражается на 99% в течение 1 минуты.

ПРИМЕР 3 Активность средства в отношении Verticillium lecanii без I^- Опыт проводят по методике примера 1 со средством, в котором отсутствует KI (I^-). В данном опыте исследуют только активность на спорах сразу после получения ферментной системы.

Verticillium lecanii поражается данной композицией и воплощением только на 25%. Это показывает, что добавление I^- значительно повышает биологическую активность на грибах.

ПРИМЕР 4 Активность средства в отношении Verticillium lecanii без SCN^- Опыт проводят по методике, описанной в примере 1, с тем отличием, что отсутствует KSCN (SCN^-). Исследуется немедленная активность на спорах.

Verticillium lecanii поражается на 99% средством согласно изобретению.

ПРИМЕР 5 Активность средства в отношении Verticilliuin lecanii при различных температурах
Опыт проводят по методике примера 1, но при двух различных температурах (±10^oС и 37^oС).

Verticilliuin lecanii поражается на 99% средством при обоих температурах в течение 1 минуты.

ПРИМЕР 6
Активность средства в отношении Botrytis cinerea
Опыт проводят согласно методике примера 1 со спорами Botrytis cinerea вместо спор Verticilliuin lecanii. После инкубирования в течение 30 и 60 минут определяют количество выживших спор.

Свыше 99% спор Botrytis cinerea поражается средством в течение 30 минут.

ПРИМЕР 7
Прямое действие средства согласно изобретению в отношении Sphaerotheca fuliginea (милдью огурца)
Для опыта используют пластиковые чашки Петри диаметром 9 см. Каждую чашку Петри наполняют слоем агаром толщиной слоя 8-10 мм. Агар получают растворением 10 граммов порошкообразного агара в 1 л воды и доведением этого раствора до кипения. После этого агар декантируют в химический стакан и помещают на водяную баню с холодной водой. Затем агарныйраствор охлаждают до приблизительно 50^oС и наполняют им чашки Петри. Непосредственно перед затвердением (при температуре 30-40^oС) на агаре размещают фрагменты листьев огурца круглой формы. Фрагменты листьев имеют такой же диаметр, что и чашки Петри, и их располагают на агаре обратной стороной листа вниз. При таком расположении лист может оставаться свежим в течение приблизительно 14 дней.

Фрагменты листьев последовательно инокулируют Sphaerotheca fuliginea. Для этой цели лист огурца со свежей милдью промывают распыляемым раствором. Промывную воду со спорами милдью собирают в стакан. Чашки биологического опыта с фрагментами листьев опрыскивают этой промывной водой с использованием распылителя Бадгера (Badger) (2 бара=200,0 кПа). Чашки сушат на воздухе и помещают в помещение с относительной влажностью 75%. RH 75% получают посредством растворения 150 граммов NaCl в 100 мл воды. Раствор NaCl помещают в закрытый контейнер с металлической сеткой поверх жидкости, на которой можно располагать чашки биологического опыта.

Через один-два дня после инокуляции фрагментов листьев милдью чашки биологического опыта опрыскивают различными вариациями средства согласно изобретению. Воду и химическое опрыскивание включают в качестве контрольных образцов.

Чашки биологического опыта опрыскивают с помощью распылителя Бадгера (2 бара=200,0 кПа) и сушат на воздухе. Закрытые чашки Петри помещают над насыщенным солевым раствором при RH 75%.

Через шесть-семь дней после инокуляции милдью чашки биологического опыта исследуют для оценки внешнего проявления милдью и процента покрытия листа милдью. Если необходимо и возможно, фрагменты листьев через 7 дней после инокуляции милдью снова опрыскивают средством согласно изобретению. Через пять дней после второго опрыскивания снова проводят оценку фрагментов листьев.

500 мл средства приготовлено с использованием ингредиентов, представленных в Таблице 2.

При таких концентрациях средство дает подавление в отношении Sphaerotheca fuliginea, равные приблизительно 20-25%.

ПРИМЕР 8
Активность средства при различных концентрациях лактопероксидазы
Опыт проводят по методике примера 7 с тем отличием, что вместо 30 мг/л лактопероксидазы используют концентрацию лактопероксидазы 100 мг/л (50 мг/500 мл).

При этих концентрациях средство дает результат подавления в отношении Sphaerotheca fuliginea приблизительно от 55 до 65%
ПРИМЕР 9
Активность средства при различных концентрациях лактопероксидазы с использованием масляной основы
Опыт выполняют по методике примера 7 с тем отличием, что помимо указанных в ней компонентов добавляют масляную основу, состоящую из арахисового масла, эмульгатора Atlas 1086^TM (I•I) и агентов распределения Nathin 130^TM+Volpo T7^TM. Эту масляную основу добавляют в концентрации 1:250.

Средство с 30 мг/л лактопероксидазы + масляная основа дает контроль в отношении Sphaerotheca fuliginea, равный приблизительно 50-55%, а средство с 100 мг/л лактопероксидазы + масляная основа дает подавление в отношении Sphaerotheca fuliginea приблизительно 80-95%.

Химическое средство, используемое в качестве эталона, дает контроль в отношении Sphaerotheca fuliginea, равный приблизительно 80-95%. Вода не дает заметного подавления в отношении Sphaerotheca fuliginea.

ПРИМЕР 10
Полуполевой опыт по испытанию активности средства в отношении Sphaerotheca fuliginea на растениях огурца.

От 10 до 15 молодых растений огурца помещают в закрытые изоляторы для растений, помещенные в теплицу. Растения огурца являются неопрысканными и не устойчивы к милдью. Высота растений составляет приблизительно 60 см, и растения имеют от четырех до пяти листьев. В первый день растения инокулируют милдью посредством распыления раствора спор милдью над растениями (см. пример 7 для получения спор милдью). На 7 день растения обрабатывают средством согласно изобретению, водой или химическим эталоном. Обработки проводят опрыскиванием поверх растений из ранцевого опрыскивателя под давлением приблизительно 5 бар (50000 кПа). На 8 день и в последующие дни определяют процент повреждения растения милдью. Если это необходимо, второе опрыскивание проводят на 14 день другим средством согласно изобретению.

Начальное повреждение пред опрыскиванием составляет 50% для растений, обрабатываемых средством согласно изобретению, и 50% для растений, обрабатываемых химическим эталоном.

Получают 1000 мл средства с ингредиентами, представленными в Таблице 3.

При этой концентрации средство дает результат подавления Sphaeroteca fuliginea приблизительно на 80%.

Химический эталон дает результат подавления в отношении Sphaerotheca fuliginea, равный приблизительно 40%.

ПРИМЕР 11
Полуполевой опыт для испытания активности средства в отношении Sphaerotheca fuliginea на растении огурца с добавлением агента распределения
Опыт проводят по методике примера 10 с тем отличием, что добавляют агент распределения. Концентрация агента распределения Volpo T7^TM равна 0,05%. Начальное повреждение милдью перед опрыскиванием составляет 35-40%.

При этой концентрации средство без агента распределения дает контроль Sphaerotheca fuliginea приблизительно на 85% относительно воды. При этой концентрации средство с агентом распределения в качества экстрадобавки дает подавление Sphaerotheca fuliginea приблизительно на 99%.

ПРИМЕР 12
Полевой опыт для испытания активности средства в отношении Sphaerotheca fuliginea на растении огурца с агентом распределения и без него.

Способ, используемый для полевых испытаний, представляет собой такой же способ, как и описанные в примере 10 полуполевые испытания, с тем отличием, что используются растения, полностью выращенные в теплице, и опрыскивание проводят либо с помощью ранцевого распылителя либо с помощью распылителя, установленного на тележке.

Приготавливают 1000 л средства с ингредиентами, представленными в Таблице 4.

Начальное повреждение Sphaerotheca fuliginea растении огурца перед опрыскиванием составляет 80-90%. Обработку проводят с агентом распределения и без него.

Средство с агентом распределения дает подавление Sphaerotheca fuliginea приблизительно на 90%. Средство без агента распределения дает результат подавления приблизительно на 75%.

ПРИМЕР 13
Активность средства в отношении Sphaerotheca fuliginea на растениях огурца при различных концентрациях лактопероксидазы
Опыт проводят по методике примера 12 с тем отличием, что используют следующие концентрации лактопероксидазы (LP): 70 мг/л, 60 мг/л и 50 мг/л.

В данном опыте нет изменения подавления при изменении концентрации лактопероксидазы. При всех трех концентрациях LP контрольный результат составляет приблизительно от 75 до 85%.

ПРИМЕР 14
Активность средства в отношении Levellula taurica на растениях перца овощного сладкого
Опыт проводят с использованием ранцевого опрыскивателя по методике примера 12 с тем отличием, что вместо огурца используется перец сладкий с милдью. Агент распределения не используется.

При этой концентрации средство дает подавление милдью (Levellula taurica) на перце приблизительно 60-70%.

ПРИМЕР 15
Активность средства в отношении Oiaium lycopersicum на растениях томатов
Опыт проводят использованием ранцевого опрыскивателя по методике примера 12 с тем отличием, что вместо растений огурца используют растения томатов с милдью Oidium lycopersicum.

При этой концентрации средство согласно изобретению дает подавление милдью (Oidium lycopersicum) на растениях томатов приблизительно на 80-85%.

ПРИМЕР 16
Активность средства в отношении Xanthominas campestris
Приготавливают бактериальный раствор, содержащий приблизительно 10⁸ спор/мл в питательном бульоне. Получают 500 мл средства с ингредиентами, представленными в Таблице 5.

10 мл бактериальной суспензии добавляют к 90 мл средства. После этого средству дают в течение 5, 10, 15 и 30 минут воздействовать на бактерии и в каждой временной точке отбирают 1 мл и разбавляют 1000х питательным бульоном для разбавления средства.

Из этого разбавленного раствора отбирают 0,1 мл и пипеткой наносят на чашку с питательной агаровой средой (nutrient agar - NUA) и осаждают. Спустя 72 часа платы исследуют на бактериальный рост и сравнивают результаты с эталоном.

Опыт проводят при температуре 21^oС и при рН приблизительно 7,5.

В этом опыте используют бактерии Xanthominas campestris.

В этом способе Xanthominas campestris поражаются на 100% в течение 5 минут средством согласно изобретению.

ПРИМЕР 17
Активность средства в отношении Pseudomonas syringae
Опыт проводят по методике примера 16 с тем отличием, что вместо Xanthominas campestris испытывают Pseudomonas syringae.

Pseudomonas syringae поражаются на 100% в течение 5 минут с помощью рецептуры и таким способом.

Формула изобретения

1. Композиция для подавления фитопатогенных (болезнетворных для растений) микроорганизмов, в частности грибов и бактерий, включающая лактопероксидазу, тиоцианат (SCN^-) и/или йодид (I^-), донорную систему пероксида водорода, в частности, глюкозооксидазу и глюкозу, и масляную основу.

2. Композиция по п.1, которая включает на литр водного раствора: от 10 до примерно 100 мг лактопероксидазы, от 50 до примерно 1000 I.U. глюкозооксидазы, от 0,5 до примерно 20 г глюкозы, от 25 до примерно 200 мг йодида (I^-), от 5 до примерно 50 мг тиоцианата (SCN^-), от примерно 0,01 до 2% об./об. масляной основы.

3. Композиция по любому из п.1 или 2, которая включает на литр водного раствора: от 50 до примерно 100 мг лактопероксидазы, от 100 до примерно 1000 I.U. глюкозооксидазы, от 1 до примерно 20 г глюкозы, от 50 до примерно 200 мг йодида (I^-), от 10 до примерно 50 мг тиоцианата (SCN^-), от примерно 0,4 до 2% об./об. масляной основы.

4. Композиция по любому из пп.1-3, которая включает на литр водного раствора: 30-70 мг лактопероксидазы, 100-250 I.U. глюкозооксидазы, 1-10 г глюкозы, 50-100 мг йодида (I^-), 10-20 мг тиоцианата (SCN^-), 0,2-1% об./об. масляной основы.

5. Композиция по любому из пп.1-4, отличающаяся тем, что масляная основа состоит, по меньшей мере, из масла и средства для эмульгирования масла в водном растворе, в частности, эмульгатора для получения эмульсии типа "масло в воде".

6. Композиция по п.5, отличающаяся тем, что средство для эмульгирования масла в водном растворе состоит из самого масла, которое обладает свойствами самоэмульгирования.

7. Композиция по любому из пп.5 и 6, отличающаяся тем, что масло выбрано из группы, состоящей из минеральных масел, растительных масел и животных масел.

8. Композиция по п.7, отличающаяся тем, что растительное масло выбрано из группы, включающей арахисовое масло, кунжутное масло, рапсовое масло, льняное масло, касторовое масло, соевое масло, кукурузное масло и хлопковое масло.

9. Композиция по п.7, отличающаяся тем, что животное масло представляет собой рыбий жир, выбранный из группы, включающей жир сельди и жир макрели (скумбрии).

10. Композиция по п.7, отличающаяся тем, что минеральное масло выбрано из группы, включающей парафиновые масла и масла керосинового типа.

11. Композиция по любому из пп.1-10, отличающаяся тем, что дополнительно включает один или более агентов распределения.

12. Композиция по п.11, отличающаяся тем, что агент распределения представляет собой неионогенное вещество, снижающее поверхностное натяжение, выбранное, например, из этоксилированных спиртов, таких как Volpo T^TM, и фосфатидиллипидов, таких как Nathin 130^TM.

13. Композиция по любому из п.11 или 12, отличающаяся тем, что концентрация агента распределения составляет 0,01%-0,2% об./об., предпочтительно 0,05% об./об., на 1 л водного раствора.

14. Композиция по любому из пп.1-13, отличающаяся тем, что масляная основа состоит, по меньшей мере, из 80-90, предпочтительно 85 ч. масла; 5-15, предпочтительно 10 ч. эмульгатора, и необязательно 1-10, предпочтительно 5 ч. лецитиновой фракции.

15. Композиция по п.14, отличающаяся тем, что масло представляет собой арахисовое масло, эмульгатор представляет собой ICI Atlas 1086^TM, лецитиновая фракция представляет собой Nathin 130^TM, и агент распределения представляет собой Volpo T7^TM.

16. Композиция по любому из пп.1-15, отличающаяся тем, что композиция дополнительно включает один или более адгезивов.

17. Композиция по п.16, отличающаяся тем, что адгезив выбран, например, из крахмала и смол, таких как ксантановая смола, аравийская камедь, карбоксиметилцеллюлоза (СМСs).

18. Композиция по пп.1-17, включающая на литр водного раствора: 70 мг лактопероксидазы, 250 I.U. глюкозооксидазы, 2,5 г глюкозы, 100 мг йодида (I^-), 20 мг тиоцианата (SCN^-), 0,4% об./об. масляной основы, состоящей из: 85 ч. арахисового масла, 10 ч. эмульгатора ICI Atlas 1086^TM и 5 ч. летициновой фракции Nathin 130^TM и необязательно 0,5% об./об. агента распределения Volpo TV^TM.

19. Композиция по любому из пп.1-18 для подавления болезнетворных для растений бактерий и/или грибов на растениях, деревьях и их частях, в частности, подлежащих сбору частях, таких как цветы, луковицы, клубни, плоды и т.п.

20. Композиция по любому из пп.1-19 в концентрированной форме.

21. Способ подавления фитопатогенных бактерий и/или грибов на растениях, деревьях и их частях, включающий нанесение на растение, дерево или их части композиции, определенной в любом из пп.1-18.

22. Способ по п.21, отличающийся тем, что композиция применяется посредством распыления, разбрызгивания атомизации, распыления сверху, орошения, погружения, капельного орошения.

23. Набор для получения композиции по пп.1-18, включающий необязательно концентрированную композицию фермента, состоящую, по меньшей мере, из лактопероксидазы и необязательных добавок, композиции донора пероксида водорода, состоящей, по меньшей мере, из глюкозооксидазы и глюкозы, тиоцианата и/или йодида и необязательно других добавок, и масляной композиции, включающей, по меньшей мере, масло, необязательный эмульгатор, необязательные агенты распределения и необязательно другие добавки, в котором три указанные композиции должны смешиваться друг с другом перед применением в таком соотношении, чтобы получалась композиция согласно изобретению.

24. Набор по п.23 для подавления болезнетворных для растений микроорганизмов, в частности грибов и бактерий.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5