Способ моделирования острого панкреатита

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной абдоминальной хирургии и касается моделирования острого панкреатита. Для этого в качестве экспериментальных животных используют беспородных собак весом 12-17 кг. Под общим обезболиванием производят верхнесрединную лапаротомию, под капсулу поджелудочной железы в области тела вводят 3,0 мл 70% раствора этилового спирта, затем лапаротомную рану ушивают. Манипуляцию проводят однократно. Способ обеспечивает моделирование адекватного острого воспаления поджелудочной железы при отсутствии побочных эффектов и простоте в исполнении. 3 ил.

 

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к абдоминальной (экспериментальной) хирургии, и может быть использовано для изучения как самого заболевания острого панкреатита, так и различных его осложнений.

Известны способы моделирования острого панкреатита с использованием собак в качестве экспериментальных животных. Такими методами являются методика Далгата и соавторов - введение аутожелчи под давлением в левый долевой проток поджелудочной железы (Д.М.Далгат, М.Ш.Магомаев, Р.Т.Меджидов /Диагностика и лечение острого панкреатита/ Вестник хирургии. -1986 - №4 - с.29-33), методика А.М.Аскерова и соавторов - перевязка селезеночной или панкреатодуоденальной артерий (С.А.Шалимов, А.П.Радзиховский, Л.В.Кейсевич /Руководство по экспериментальной хирургии. - Москва: Медицина - 1989), методика Л.Н.Огеленко и Л.Е.Щедренко - введение в ткань поджелудочной железы панкреатоцитотоксической сыворотки в комбинации с условно-патогенными микроорганизмами (С.А.Шалимов, А.П.Радзиховский, Л.В.Кейсевич /Руководство по экспериментальной хирургии. - Москва: Медицина - 1989). Во всех приведенных работах доказано развитие острого панкреатита. Однако несмотря на достоверность полученных результатов, сами авторы отмечают сложность проведения данных манипуляций, а также в ряде случаев и высокую смертность в послеоперационном периоде.

Прототипом предлагаемого изобретения является способ моделирования острого панкреатита местным воздействием повреждающего фактора (В.В.Кенц, Т.А.Цымпилова, В.М.Мавродий, Л.С.Годлевский. /Эффективность сочетанного применения электрофореза 5-фторурацила и магнитотерапии при экспериментальном панкреатите. /Курортология и физиотерапия - 1994 - №3 - с.17) путем охлаждения ткани поджелудочной железы орошением хлорэтилом. Недостатком данного метода является возможное воздействие повреждающего фактора на окружающие ткани и органы и тем самым возникновение побочных эффектов.

Задачей предлагаемого изобретения является разработка достоверного, технически простого в выполнении метода моделирования острого панкреатита.

Технический результат при использовании изобретения - упрощение способа, предотвращение побочных эффектов.

Способ моделирования острого панкреатита выполняется следующим образом. В качестве экспериментальных животных используют беспородных собак весом 12-17 кг. Под общим обезболиванием производят верхнесрединную лапаротомию, под капсулу поджелудочной железы в области тела вводят 3,0 мл 70% раствора этилового спирта, затем лапаротомную рану ушивают. Манипуляцию производят однократно.

Для оценки достоверности результатов предлагаемого способа моделирования острого панкреатита проводилось гистологическое исследование кусочков тканей поджелудочной железы. Методика апробирована на 15 собаках. На 7-е сутки после операции проводилась процедура эвтаназии экспериментальных животных путем внутрисердечного введения 100,0 мл воздуха (процедура проводилась под общим обезболиванием), затем производился забор тканей поджелудочной железы. После соответствующей гистологической проводки срезы толщиной 7 мкм окрашивались гематоксилин-эозином. Всего приготовлено 180 микропрепаратов.

На фиг.1 изображены разрушение секреторных отделов поджелудочной железы подопытных животных (окраска гематоксилин- эозин, микрофото, окуляр 10, объектив 20), на фиг.2 изображены застой крови и периваскулярный отек с инфильтрацией лимфоцитов в поджелудочной железе подопытных животных (окраска гематоксилин-эозин, микрофото, окуляр 10, объектив 40), на фиг.3 изображены большие скопления лимфоцитов в междольковой соединительной ткани поджелудочной железы подопытных животных (окраска гематоксилин-эозин, микрофото, окуляр 10, объектив 40).

В гистологических препаратах поджелудочной железы экспериментальных животных определяются обширные зоны с выраженными деструктивными процессами (фиг.1.). Клетки секреторного отдела уменьшены в размерах, они полигональной формы, гомогенные и зимогенные зоны не определяются, их ядра также уплотнены или отдельные клетки лишены ядра. Цитоплазма многих из них окрашивается интенсивно базофильно, тогда как другие в виде светлых пузырьков. Дегенеративные процессы отмечаются и в островковом аппарате. Многие инсулоциты уменьшены в размерах, их ядра с признаками кариопикноза и даже кариолизиса. Капиллярная сеть слабо проявляется. Однако в отдаленных участках небольшие дольки имеют нормальное гистологическое строение, когда секреторные отделы проявляют функциональную активность, то есть гомогенная часть секреторных клеток проявляют базофилию, ядра клеток округлой или овальной формы, тогда как в апикальной части цитоплазмы клеток определяются секреторные гранулы. Сеть кровеносных капилляров без существенных изменений. В зоне экспериментального воздействия кровеносные сосуды с выраженными застойными явлениями (фиг.2.). Периваскулярный отек сопровождается миграцией лимфоцитов, макрофагов и плазматических клеток. Одновременно встречаются и большие скопления лимфоцитов, чаще всего в междольковой соединительной ткани (фиг.3), при этом клетки лимфоидной ткани располагаются плотно. Близко расположенные кровеносные сосуды также характеризуются полнокровием и застоем.

Таким образом, в поджелудочной железе экспериментальных животных определяются выраженные деструктивно-дегенеративные процессы. Особенно в зоне воздействия химического фактора ацинусы железы сморщиваются, ациноциты без признаков секреторной активности. Дегенеративные процессы охватывают не только цитоплазму, но и ядра секреторных клеток. Наряду с деструктивными процессами экзокринной части железы определяется нарушение кровоснабжения эндокринной части поджелудочной железы. Междольковая соединительная ткань характеризуется инфильтрацией лимфоидной тканью, а также застойными явлениями в крупных кровеносных сосудах.

В целом определяются все стадии воспалительного процесса (острого панкреатита).

Способ моделирования острого панкреатита путем местного воздействия повреждающего фактора, отличающийся тем, что однократно вводят 3,0 мл 70% раствора этилового спирта под капсулу поджелудочной железы в области тела.