Способ дифференциальной диагностики обострения и ремиссии гастродуоденальных заболеваний у детей
Владельцы патента RU 2263315:
Нижегородский научно-исследовательский институт детской гастроэнтерологии (RU)
Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии, и может быть использовано для диагностики. Способ заключается в том, что исследуют слюну больного ребенка и определяют в ней содержание мочевой кислоты и при его значении 118,8 мкмоль/л и выше диагностируют обострение заболевания, а 117,5 мкмоль/л и ниже - ремиссию. Способ обеспечивает простоту, атравматичность и доступность диагностики в педиатрической практике. 2 табл.
Изобретение относится к области медицины, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано в широкой медицинской практике для диагностики фазы обострения или ремиссии гастродуоденальных заболеваний у детей.
Наиболее информативным считается способ эндоскопического исследования с прицельной биопсией, который дает возможность оценить функцию и структуру органов гастродуоденальной зоны (А.И.Волков и др. Современные инструментальные методы в комплексном обследовании гастродуоденальной слизистой у детей. Методические рекомендации. Горький. 1981 г.).
Однако этот способ диагностики достаточно сложен с точки зрения необходимости наличия специального дорогостоящего оборудования, специалиста-эндоскописта и морфолога. Кроме того, данный способ сопряжен с опасностью возникновения осложнений и травматичен.
Известны способы лабораторной диагностики фазы гастродуоденального заболевания: по повышению концентрации гистамина в базальной порции желудочного сока (Способ диагностики обострения язвенной болезни двенадцатиперстной кишки. Авт. свид. №1264410 от 23.10.86. Комарова Л.Г. и др.). Однако этот способ требует процедуры зондирования, что является травматичным для ребенка. И, кроме того, методика исследования гистамина в любой биологической жидкости трудоемка.
За прототип предлагаемого изобретения выбран лабораторный способ дифференциальной диагностики обострения и ремиссии гастродуоденальных заболеваний, включающий биохимическое исследование слюны (Л.Г.Комарова, И.А.Переслегина, Л.В.Коркоташвили «Способ дифференциальной диагностики обострения и ремиссии гастродуоденальных заболеваний». Свидетельство №1262380, зарегистрировано в Государственном реестре 16.10.85 г.).
Данный способ заключается в том, что о наличии обострения или ремиссии гастродуоденального заболевания судят по соотношению содержания в слюне аденозинтрифосфорной и пировиноградной кислот, взятых в процентах от нормы, и при этом показателе ниже 0,5 диагностируют обострение, а выше 0,5 - ремиссию заболевания. Способ атравматичен, позволяет с высокой степенью точности осуществлять диагностику.
Однако использование известного способа требует проведения двух методик, что сопряжено с большим расходом реактивов, наличием специального оборудования и большой затратой времени (5-6 часов).
Целью предлагаемого изобретения является упрощение способа за счет определения одного показателя в той же биологической среде - слюне.
Поставленная цель достигается тем, что в предлагаемом способе, включающем биохимическое исследование слюны, определяют содержание мочевой кислоты в слюне и при ее значении 118 мкмоль/л и выше диагностируют обострение гастродуоденальных заболеваний, а ниже - ремиссию.
Новым в способе является исследование мочевой кислоты в слюне, так как раньше ее определяли в других биологических средах и по другому назначению.
Так, известно участие мочевой кислоты в генезе артериальной гипертонии, патологии почек и др. Пурины в организме являются полифункциональными соединениями, обладающими способностью регулировать соотношение между активностью симпатической и парасимпатической нервной системы, а нарушение равновесия этих систем может приводить к ряду заболеваний, в том числе желудочно-кишечного тракта (Ю.И.Ровда, И.В.Павлов, В.И.Хиченко и др. Педиатрия 1995 г., №3, с.82-84).
Определение мочевой кислоты в слюне необходимо и достаточно для постановки диагноза обострения или ремиссии гастродуоденальных заболеваний у детей.
Работоспособность способа доказана следующими фактами:
Проведено обследование 58 детей с гастродуоденальными заболеваниями. Из них 31 - с обострением и 27 - ремиссией патологического процесса. В слюне определяли содержание мочевой кислоты, величина которой менялась в фазу обострения в диапазоне 118,8-635,3 мкмоль/л, а в фазу ремиссии 15,8-117,5 мкмоль/л.
| Таблица 1 Концентрация мочевой кислоты в слюне (мкмоль/л) | |||||
| Группы обследуемых детей | Концентрация мочевой кислоты | ||||
| Гастродуоденальные заболевания | Обострение Пределы колебаний | 232,5+18,8 (n=31) р<0,001 118,8-635,3 | |||
| Ремиссия Пределы колебаний | 60,2+5,65 (n=27) 15,8-117,5 | ||||
| Таблица 2 Диапазон колебаний содержания мочевой кислоты в слюне при гастродуоденальном заболевании у детей | |||||
| № | Фаза обострения | № | Фаза ремиссии | ||
| Фамилия | Мочевая кислота, мкмоль/л | Фамилия | Мочевая кислота, мкмоль/л | ||
| 1 | Больной Б. | 145,6 | 1 | Больной А. | 21,2 |
| 2 | В. | 225,0 | 2 | Б. | 32,9 |
| 3 | В. | 566,1 | 3 | В. | 47,7 |
| 4 | Е. | 176,5 | 4 | В. | 117,5 |
| 5 | 3. | 271,4 | 5 | Г. | 108,0 |
| 6 | И. | 206,0 | 6 | Д. | 39,0 |
| 7 | И. | 165,0 | 7 | Е. | 40,0 |
| 8 | К. | 180,3 | 8 | К. | 31,6 |
| 9 | К. | 142,1 | 9 | К. | 53,7 |
| 10 | К. | 405,0 | 10 | К. | 80,1 |
| 11 | К. | 190,8 | 11 | Л. | 78,1 |
| 12 | Л. | 316,4 | 12 | Л. | 75,0 |
| 13 | Л. | 118,8 | 13 | М. | 80,0 |
| 14 | Л. | 273,3 | 14 | М. | 15,8 |
| 15 | Л. | 220,0 | 15 | М. | 65,9 |
| 16 | Л. | 184,4 | 16 | М. | 47,4 |
| 17 | М. | 210,0 | 17 | Н. | 37,5 |
| 18 | М. | 281,3 | 18 | Н. | 49,0 |
| 19 | М. | 255,8 | 19 | Н. | 40,8 |
| 20 | Н. | 305,0 | 20 | О. | 31,3 |
| 21 | Н. | 247,0 | 21 | Р. | 28,0 |
| 22 | О. | 139,2 | 22 | Р. | 88,0 |
| 23 | П. | 164,0 | 23 | С. | 63,2 |
| 24 | Р. | 188,0 | 24 | С. | 50,0 |
| 25 | С. | 252,6 | 25 | С. | 24,0 |
| 26 | С. | 635,3 | 26 | Ф. | 40,0 |
| 27 | С. | 158,3 | 27 | Ш. | 112,0 |
| 28 | С. | 169,0 | |||
| 29 | С. | 375,0 | |||
| 30 | С. | 187,5 | |||
| 31 | С. | 252,6 |
Диагноз верифицирован данными гастрофиброскопии и РН-метрии желудочного сока.
Установлено, что все дети с содержанием в слюне мочевой кислоты выше 118,8 имели обострение заболевания, тогда как у детей с уровнем определяемого вещества ниже этого значения диагностировалась ремиссия.
Способ осуществляют следующим образом: утром натощак собирают слюну путем сплевывания в центрифужную пробирку. Затем слюну центрифугируют 10 минут при 3000 об/мин.
Принцип метода.
Мочевая кислота восстанавливает фосфорнофольфрамовый реактив с образованием голубого цвета, оптическая плотность которого при 640 нм пропорциональна концентрации мочевой кислоты в сыворотке крови.
Состав набора.
1. Натрий вольфрамовокислый, двухводный, 5 г - 1 флакон;
2. Натрий карбонат, 20,6 г - 1 упаковка;
3. Фосфорновольфрамовый реактив, 100 мл - 1 флакон;
4. Основной калибровочный растров мочевой кислоты, 6 ммоль/л, 3 мл - 1 флакон.
Вспомогательные реактивы.
Кислота серная, концентрированная (96%), хч - 1 мл.
В состав набора не входит.
Оборудование.
Спектрофотометр или фотоэлектроколориметр, центрифуга.
Образец.
Слюна, разведенная дистиллированной водой в 10 раз.
Приготовление рабочих растворов.
1. Раствор серной кислоты, 0,35 моль/л. В мерную колбу вместимостью 50 мл наливают 20 мл дистиллированной воды, 1,0 мл концентрированной серной кислоты и доводят объем водой до метки. Раствор стабилен.
2. Раствор натрия вольфрамовокислого. Содержимое флакона с натрием вольфрамовокислым количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл и доливают дистиллированной водой до метки. Раствор стабилен.
3. Раствор натрия карбоната. Содержимое упаковки с натрием карбонатом количественно переносят в мерную колбу вместимостью 200 мл, растворяют в дистиллированной воде, и доводят объем водой до метки. Раствор стабилен.
4. Рабочий калибровочный раствор мочевой кислоты. Отмеряют точно 1,0 мл основного калибровочного раствора мочевой кислоты, переносят в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят объем дистиллированной водой до метки. Раствор стабилен в течение 2 недель при хранении при температуре 4-8°С. Полученный раствор содержит 30 мкмоль/л мочевой кислоты.
Ход определения.
В центрифужную пробирку вносят:
| Холостая проба, мл | Калибровочная проба, мл | Опытная проба, мл | |
| Вода дистиллированная | - | - | 4,0 |
| Биологическая жидкость | - | - | 0,50 |
| Перемешивают | |||
| Раствор серной кислоты 0,35 моль/л | - | - | 0,25 |
| Раствор натрия вольфрамовокислого | - | - | 0,25 |
| Тщательно перемешивают, переворачивая пробирку и через 5 минут центрифугируют 10 минут при 3000 об/мин. | |||
| Надосадочная жидкость | - | - | 2,00 |
| Рабочий калибровочный раствор мочевой кислоты | - | 2,00 | - |
| Вода дистиллированная | 2,00 | - | - |
| Растров натрия карбоната | 1,00 | 1,00 | 1,00 |
| Фосфорнофольфрамовый реактив | 0,50 | 0,50 | 0,50 |
| Тщательно перемешивают, переворачивая пробирку и через 5 минут центрифугируют 10 минут при 3000 об/мин. |
Через 30 минут определяют экстинцию при 640 (580-700) нм при красном светофильтре ФЭКа. Расчет содержания проводят по формуле
С(мкмоль/л)=Еоп/Ест×Сст×10, где
Еоп - экстинция опытной пробы против холостой пробы;
Ест - экстинция калибровочной пробы против холостой пробы;
Сст - концентрация рабочего калибровочного раствора, 30 мкмоль/л;
10 - пересчет на разбавленную слюну.
Определяют содержание мочевой кислоты в слюне у больного и при содержании ее 118,8 и выше диагностируют обострение гастродуоденальных заболеваний, а при значении показателя ниже этой цифры - ремиссию.
Клинические примеры исполнения способа.
Пример 1.
Больная Лебедева Оля, 10 лет. История болезни №1136/1995 г. Находилась на стационарном лечении в НИИ детской гастроэнтерологии с диагнозом: язвенная болезнь 12-перстной кишки в фазе обострения, хронический гастродуоденит в фазе обострения. При поступлении проведено обследование мочевой кислоты в слюне. В результате содержание мочевой кислоты составило 118,8 мкмоль/л. При повторных исследованиях уровень мочевой кислоты варьировал до 211,6; 316,4; 331,6 мкмоль/л. Все это свидетельствовало об обострении патологического процесса. Последующее гастрофиброскопическое обследование подтвердило диагноз, выявив выраженные признаки обострения. В процессе лечения была достигнута ремиссия. Концентрация мочевой кислоты снизилась до 110,0 мкмоль/л, сопровождаемая улучшением общепринятых лабораторных показателей, включая гастрофиброскопию.
Пример 2.
Воропаев Сергей, 12 лет. История болезни №674/1995 г. Поступил в Нижегородский НИИ детской гастроэнтерологии с диагнозом: язвенная болезнь 12-перстной кишки, хронический гастродуоденит в фазе ремиссии. При поступлении проведено определение мочевой кислоты в слюне. Величина показателя соответствовала 117,5 мкмоль/л, что указывало на фазу ремиссии. Данные гастрофиброскопии (слизистая желудка бледно розового цвета, гиперплазирована, привратник сомкнут, луковица 12-перстной кишки не деформирована, рисунок слизистой сохранен) подтвердили диагноз.
Использование предлагаемого способа дифференциальной диагностики обострения и ремиссии гастродуоденальных заболеваний в сравнении с известными позволяет получить положительный эффект, который выражается в упрощении и сокращении времени проведения, атравматичности и доступности объекта исследования. Способ дополнительно может использоваться для динамического наблюдения за эффективностью лечения.
Предлагаемый способ особенно ценен в педиатрической практике, так как абсолютно безвреден, прост и доступен в применении в любых условиях.
Способ дифференциальной диагностики обострения и ремиссии гастродуоденальных заболеваний у детей, включающий биохимическое исследование слюны, отличающийся тем, что в слюне определяют содержание мочевой кислоты и при его значении 118,8 мкмоль/л и выше диагностируют обострение, а при 117,5 мкмоль/л и ниже - ремиссию гастродуоденальных заболеваний.
