Фармацевтическая композиция, включающая ингибитор ренина, блокатор кальциевых каналов и диуретик

Изобретение относится к медицине и представляет собой фармацевтическую композицию, включающую (i) алискирен, (ii) амлодипин и (iii) гидрохлортиазид. Изобретение может быть использовано для лечения состояния или заболевания, выбранного из группы, включающей гипертензию, сердечную недостаточность, как, например, острую и хроническую застойную сердечную недостаточность, дисфункцию левого желудочка и гипертрофическую кардиомиопатию, диабетическую сердечную миопатию, наджелудочковую и желудочковую экстрасистолию, мерцательную аритмию, трепетание предсердий, опасную для здоровья коррекцию сосудов, инфаркт миокарда и его последствия, атеросклероз, стенокардию, как стабильную, так и нестабильную, почечную недостаточность диабетическую и недиабетическую, сердечную недостаточность, грудную жабу, диабет, вторичный альдостеронизм, первичную и вторичную легочную гипертензию, состояния почечной недостаточности, как, например, диабетическую нефропатию, гломерулонефрит, включая IgA-нефропатию, фиброз почек, склеродермию, гломерулярный склероз, протеинурию почечного заболевания и также реноваскулярную гипертензию, диабетическую ретинопатию. Изобретение относится к способу оказания помощи при других сосудистых нарушениях, как, например, при мигрени, периферическом сосудистом заболевании, болезни Рейно, гиперплазии полости трубчатого органа, нарушении познавательной способности как, например, болезнь Альцгеймера, глаукоме и ударе, пневмофиброзе и фиброзе печени, фиброзных заболеваниях в результате накопления избытка внеклеточного матрикса, индуцированного TGF, и пролиферативных заболеваниях клеток гладких мышц, включая фиброму матки. Изобретение обеспечивает более продолжительный терапевтический эффект, чем введение каждого из этих средств по отдельности, кроме того, благодаря этому эффективные дозы обоих компонентов могут быть существенно уменьшены, а так же применятся менее часто, тем самым уменьшая побочные эффекты. 3 н. и 4 з.п. ф-лы.

 

Система ренин-ангиотензин (RAS) является комплексной гормональной системой, состоящей из предшественника с высокой молекулярной массой, ангиотензиногена, двух процессинговых ферментов, ренина и ангиотензин-конвертирующего фермента (АСЕ) и вазоактивного медиатора ангиотензина II (Ang II) (J. Cardiovasc. Pharmacol., 15 (Приложение В) (1990), стр.S1-S5). Фермент ренин катализирует расщепление ангиотензиногена в декапептид ангиотензин I, который обладает минимальной собственной биологической активностью и превращается в активный октапептид Ang II с помощью АСЕ. Ang II оказывает множественные биологические воздействия на сердечнососудистую систему, включая сужение кровеносных сосудов, активацию симпатической нервной системы, стимуляцию продуцирования альдостерона, антинатрийурез, стимуляцию развития сосудов (то есть стимуляцию пролиферации клеток гладких мышц и отложения избыточного внеклеточного матричного материала в сосудистой стенке) и стимуляцию кардиотонического развития. Ang II действует как сосудосуживающий гормон и вовлечен в патофизиологию некоторых форм гипертензии.

Сосудосуживающие эффекты ангиотензина II вызываются благодаря его действию на клетки не покрытых бороздками гладких мышц, стимуляции образования адренергических гормонов эпинефрина и норэпинефрина, а также повышению активности симпатической нервной системы в результате образования норэпинефрина. Ангиотензин II также оказывает влияние на электролитный баланс, вызывает, например, антинатрийуретический и антидиуретический эффекты в почке и тем самым способствует высвобождению, с одной стороны, сосудосуживающего пептида из гипофиза и, с другой стороны, альдостерона из надпочечных клубочков. Все такие воздействия играют важную роль в регуляции кровяного давления, в повышении как циркулирующего объема, так и периферического сопротивления сосудов. Ангиотензин II также вовлечен в рост и миграцию клеток и в образование внеклеточной основы.

Ангиотензин II взаимодействует со специфическими рецепторами на поверхности клетки-мишени. Стало возможным идентифицировать подтипы рецепторов, именуемых, например, AT1- и АТ2-рецепторы. Были предприняты большие усилия для идентификации веществ, которые связываются с AT1-рецептором. Такие активные ингредиенты часто называют антагонистами ангиотензина II. Благодаря ингибированию AT1-рецептора такие антагонисты могут быть применены, например, в качестве гипотензивных средств или для лечения, среди прочих показаний, застойной сердечной недостаточности. Поэтому понятно, что антагонисты ангиотензина II являются теми активными ингредиентами, которые связываются с подтипом AT1-рецептора.

Ингибиторы системы ренин-ангиотензин являются хорошо известными лекарственными средствами, которые понижают кровяное давление и усиливают благотворные воздействия при гипертензии и при застойной сердечной недостаточности, как описано, например, в N.Eng. J.Med. 316, 23 (1987), стр.1429-1435. Известно большое число пептидных и непептидных ингибиторов системы ренин-ангиотензин, являющихся наиболее широко изученными ингибиторами АСЕ, которые включают лекарственные препараты каптоприл, эналаприл, лизиноприл, беназеприл и спираприл. Хотя главный способ действия ингибиторов АСЕ включает предотвращение образования сосудосуживающего пептида Ang II, в журнале Hypertension, 16, 4 (1990), стр.363-370, было сообщено, что АСЕ расщепляет ряд пептидных субстратов, включая вазоактивные пептиды брадикинин и вещество Р. Было продемонстрировано предотвращение разложения брадикинина с помощью ингибиторов АСЕ, и активность ингибиторов АСЕ при некоторых состояниях, как было сообщено в Circ. Res., 66, 1(1990), стр.242-248, скорее содействует повышению уровней брадикинина, чем подавлению образования Ang II. Следовательно, невозможно предположить, что воздействие ингибитора АСЕ связано исключительно с предотвращением образования ангиотензина и последующим ингибированием системы ренин-ангиотензин.

Кроме того, с целью ингибирования превращения ангиотензина I в ангиотензин II или блокирования AT1-рецептора система ренин-ангиотензин может быть остановлена в начале ее метаболического пути. Эта начальная стадия (т.е. превращение ангиотензиногена в ангиотензин I) опосредуется ренином и может тормозиться ингибиторами ренина (RI). Ингибиторы ренина полностью прекращают образование ангиотензина II, поскольку они воздействуют на ограничивающую скорость стадию в этом каскаде. Вследствие практически полного блокирования образования ангиотензина II с помощью ингибиторов ренина эти средства можно рассматривать как характеризующиеся улучшенной эффективностью по сравнению с ингибиторами АСЕ или блокаторами AT1-рецептора. Более того, из-за высокой степени их специфичности ингибиторы ренина вызывают меньше побочных эффектов, чем ингибиторы АСЕ. Одним из таких ингибиторов ренина является алискирен. Другими ингибиторами являются детикирен, терлакирен и занкирен.

Алискирен имеет следующую химическую формулу (I):

Ингибитор ренина формулы (I), определяемый химически как 2(S),4(S),5(S),7(S)-N-(3-амино-2,2-диметил-3-оксопропил)-2,7-ди(1-метилэтил)-4-гидрокси-5-амино-8-[4-метокси-3-(3-метоксипропокси)фенил]октанамид, конкретно раскрывается в заявке на европейский патент ЕР 678503 А. Особенно предпочтительна его полусоль с фумаровой кислотой.

Недостатком в лечении гипертензии и заболеваний и состояний, относящихся к этому, является то, что монотерапия часто стимулирует компенсаторные рефлексы, которые противодействуют фармакологически индуцированному понижению кровяного давления. Такая компенсация имеет тенденцию препятствовать успешному понижению кровяного давления. В связи с этим желательно разработать дополнительные средства лечения для такого применения.

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей (i) ингибитор ренина, (ii) блокатор кальциевых каналов (ССВ) и (iii) диуретик, или, если целесообразно, в каждом случае их фармацевтически приемлемую соль, особенно для лечения заболевания или состояния, как установлено здесь ранее или в дальнейшем.

Изобретение также относится к применению (i) ингибитора ренина, (ii) блокатора кальциевых каналов (ССВ) и (iii) диуретика, или, если целесообразно, в каждом случае их фармацевтически приемлемой соли для приготовления лекарственного средства для лечения заболевания или состояния, как установлено здесь ранее или в дальнейшем.

Изобретение также относится к способу лечения заболевания или состояния, как установлено здесь ранее или в дальнейшем, включающему введение животному, включая человека, терапевтически эффективного количества (i) ингибитора ренина, (ii) блокатора кальциевых каналов (ССВ) и (iii) диуретика, или, если целесообразно, в каждом случае их фармацевтически приемлемой соли.

Настоящее изобретение далее относится к набору частей, включающему (i) фармацевтическую композицию из ингибитора ренина или его фармацевтически приемлемой соли, (ii) фармацевтическую композицию из блокатора кальциевых каналов (ССВ) или его фармацевтически приемлемой соли и (iii) фармацевтическую композицию из диуретика или его фармацевтически приемлемой соли в виде двух или трех отдельных частей из компонентов от (i) до (iii).

Согласно изобретению ингибитор ренина (i) выбирается из группы, состоящей из алискирена, детикирена, терлакирена занкирена; (ii) CCB выбирается из группы, состоящей из амлодипина, фелодипина, израдипина, лацидипина, никардипина, нифедипина, нигулдипина, нилудипина, нимодипина, нисолдипина, нитрендипина, нивалдипина, риозидина, анипамила, дилтиазема, фендилина, флунаризина, галлопамила, мибефрадила, прениламина, тиапамила и верапамила; и диуретик (iii) выбирается из группы, состоящей из буметанида, этакриновой кислоты, фуросемида, торсемида, амилорида, спиронолактона, триамтерена, хлорталидона, хлортиазида, гидрохлортиазида, гидрофлуметиазида, метилхлортиазида, метолазона и дихлорфенамида, и также амилорида. В каждом случае, если уместно, например, если соединение как таковое не находится в виде фармацевтически приемлемой соли, как в случае гидрохлортиазида, такие соединения также включают их фармацевтически приемлемые соли.

Данные о структуре активных агентов, идентифицированных с помощью родовых или торговых названий, могут быть взяты из существующего издания стандартного компендиума "The Merck Index" или из баз данных, например, LifeCycle Patents International (например, IMS World Publications). Соответствующее содержание этих источников включено сюда в виде ссылки. Любой специалист в данной области в полной мере способен идентифицировать активные средства и на основании этих ссылок также способен предложить и исследовать фармацевтические показания и свойства на стандартных моделях для испытаний как in vitro, так и in vivo.

Настоящее изобретение далее относится к вышеупомянутой фармацевтической композиции для лечения сердечной недостаточности, как, например, (острой и хронической) застойной сердечной недостаточности, дисфункции левого желудочка и гипертрофической кардиомиопатии, диабетической сердечной миопатии, наджелудочковой и желудочковой экстрасистолии, мерцательной аритмии, трепетания предсердий или опасной для здоровья коррекции сосудов.

Далее можно видеть, что комбинированная терапия с помощью комбинации по изобретению и, в частности, с помощью алискирена, в частности его полусоли с фумаровой кислотой, или гемифумарата, амлодипина, в частности его малеата или более предпочтительно его безилата, и гидрохлортиазида (HCTZ) оказывается полезной при лечении и предупреждении инфаркта миокарда и его последствий. Такая комбинированная терапия также полезна при лечении атеросклероза, стенокардии (как стабильной, так и нестабильной) и почечной недостаточности (диабетической и недиабетической). Кроме того, такая комбинированная терапия может способствовать положительной динамике при нарушении функции эндотелия, таким образом обеспечивая благоприятное воздействие на заболевания, при которых нарушена нормальная функция эндотелия, как, например, сердечная недостаточность, стенокардия и диабет. К тому же комбинация по настоящему изобретению может быть применена для лечения или предупреждения вторичного альдостеронизма, первичной и вторичной легочной гипертензии, состояний почечной недостаточности, как, например, диабетической нефропатии, гломерулонефрита (включая IgA-нефропатию), фиброза почек, склеродермии, гломерулярного склероза, протеинурии почечного заболевания и также реноваскулярной гипертензии, диабетической ретинопатии, комбинация может применяться для оказания помощи при других сосудистых нарушениях, как, например, при мигрени, периферическом сосудистом заболевании, болезни Рейно, гиперплазии полости трубчатого органа, нарушении познавательной способности (например, болезнь Альцгеймера), глаукоме и ударе, пневмофиброзе и фиброзе печени, фиброзных заболеваниях в результате накопления избытка внеклеточного матрикса, индуцированного трансформирующим фактором роста /TGF-β/, и пролиферативных заболеваниях клеток гладких мышц (как, например, фиброма матки).

Настоящее изобретение также относится к способу лечения состояния или заболевания, выбранного из группы, включающей гипертензию, сердечную недостаточность, например (острую и хроническую) застойную сердечную недостаточность, дисфункцию левого желудочка и гипертрофическую кардиомиопатию, диабетическую сердечную миопатию, наджелудочковую и желудочковую экстрасистолию, мерцательную аритмию, трепетание предсердий, опасную для здоровья коррекцию сосудов, инфаркт миокарда и его последствия, атеросклероз, стенокардию (как стабильную, так и нестабильную), почечную недостаточность (диабетическую и недиабетическую), сердечную недостаточность, грудную жабу, диабет, вторичный альдостеронизм, первичную и вторичную легочную гипертензию, состояния почечной недостаточности, как, например, диабетическую нефропатию, гломерулонефрит (включая IgA-нефропатию), фиброз почек, склеродермию, гломерулярный склероз, протеинурию почечного заболевания и также реноваскулярную гипертензию, диабетическую ретинопатию; изобретение также относится к оказанию помощи при других сосудистых нарушениях, например при мигрени, периферическом сосудистом заболевании, болезни Рейно, гиперплазии полости трубчатого органа, нарушении познавательной способности (например, болезнь Альцгеймера), при глаукоме и ударе, пневмофиброзе и фиброзе печени, фиброзных заболеваниях в результате накопления избытка внеклеточного матрикса, индуцированного TGF, и при пролиферативных заболеваниях клеток гладких мышц, включая фиброму матки; представленный способ включает введение млекопитающему при необходимости такого лечения терапевтически эффективного количества комбинации из (i) ингибитора ренина, (ii) блокатора кальциевых каналов (ССВ) и (iii) диуретика или их фармацевтически приемлемых солей и фармацевтически приемлемого носителя. Предпочтительно ингибитором ренина является алискирен, блокатором кальциевых каналов является амлодипин и диуретиком является HCTZ.

Изобретение также относится к применению комбинации из (i) ингибитора ренина, (ii) блокатора кальциевых каналов (ССВ) и (iii) диуретика или их фармацевтически приемлемых солей для лечения заболевания или состояния, описанного здесь ранее и в дальнейшем.

Используемый всюду в спецификации и в пунктах формулы изобретения термин "лечение" охватывает все различные формы или виды лечения, известные специалистам в данной области, и включает, в частности, превентивное лечение, направленное лечение и лечение, вызывающее временное облегчение.

Диуретик активирует RAS, делая таким образом ингибирование RAS с помощью ингибитора ренина (RI) более эффективным. Прибавление блокатора кальциевых каналов к ингибитору ренина, активность которого усиливается под действием диуретика, будет понижать, например, кровяное давление по механизму, отдельному от RAS. Было показано, что ССВ предохраняет почки, по меньшей мере, частично путем (i) торможения гломерулярной экспрессии TGF-β & α-актина клеток гладких мышц (Nephron, 2000 Nov.; 86(3):315-26) и (ii) усиления подавляющей рост активности путем торможения сложных путей передачи клеточных сигналов (J.Hypertens, 2002 Jan.; 20(1): 95-102).

Было обнаружено, что применение комбинации по изобретению дивергентных механизмов действия максимально увеличивает возможность избежать активирования регулирующих компенсаторное кровяное давление механизмов, которые стимулируются с помощью снижающего артериальное давление лечения в виде монотерапии. Неожиданным оказалось то, что блокирование RAS является наиболее эффективным, когда систему активируют. Таким образом, возможно достигнуть большего фармакологического ингибирования RAS, когда блокаторы этой системы вводятся одновременно с мягкими активаторами RAS. Такое активирование RAS может быть осуществлено с помощью блокаторов кальциевых каналов и диуретиков. Кроме того, каждая из этих терапий по отдельности снижает артериальное давление. Применение ингибитора ренина в такой комбинации обеспечивает наиболее эффективную и полную блокаду RAS. Неожиданным преимуществом тройной против двойной комбинации является (i) усиленный эффект понижения кровяного давления и (ii) более эффективное антипролиферативное воздействие благодаря объединенным эффектам от ингибирования ренина (усиливаемого диуретиком) и от блокатора кальциевых каналов (ССВ). Обе эти активности транслируются в повышенную тканевую защиту. Улучшенная активность и преимущество по сравнению с двойной комбинацией являются результатом потенцирования или даже синергических взаимодействий между 3 компонентами. Кроме того, может проявляться меньше побочных эффектов из-за возможности применения меньших доз объединяемых компонентов. Например, дозы отдельных компонентов можно уменьшить в 2-7 раз или уменьшить в 3-7 раз, 4-7, 5-7 или 6-7 раз, когда их вводят в комбинации, и при этом все-таки достигнуть сравнимую понижающую кровяное давление активность по сравнению с активностью каждого индивидуального средства. У людей преимущество удивительных достоинств тройных комбинаций по сравнению с двойными может быть продемонстрировано, например, при исследовании комбинации для определения полезных воздействий на снижение кровяного давления, воздействий на гипертрофию левого желудочка, на защиту почек (например, реверсия, улучшение или замедление ухудшения протеинурии; замедление снижения скорости гломерулярной фильтрации или клиренса креатинина, замедление удвоения сывороточного креатинина).

Длительное и неуправляемое гипертензивное сосудистое заболевание в конечном счете приводит к разнообразным патологическим изменениям в вовлеченных в заболевание органах, как, например, сердце и почки. Наличие диабета вызывает обострение таких изменений. Длительная гипертензия может также приводить к повышенной возможности возникновения удара. Поэтому существует большая необходимость в оценке эффективности гипотензивной терапии, в изучении при сердечно-сосудистых заболеваниях дополнительных граничных точек за пределами таковых от понижения кровяного давления для дальнейшего понимания пользы комбинированного лечения. Природа гипертензивных сосудистых заболеваний связана с многими факторами. При некоторых обстоятельствах объединяли лекарственные средства с различными механизмами действия. Однако просто использование любой комбинации лекарственных средств, характеризующихся различными способами действия, необязательно приводит к комбинациям с благоприятными эффектами.

Потенцирование означает увеличение биологического воздействия одного средства с помощью другого средства для достижения либо аддитивного, либо большего, чем аддитивный, биологического эффекта по сравнению с эффектами от отдельных средств, в то время как синергизм означает увеличение биологического воздействия одного средства с помощью другого средства для достижения большего, чем прогнозируемый, биологического эффекта путем сложения эффектов отдельных компонентов.

Согласно одному аспекту настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей (i) алискирен, (ii) амлодипин и (iii) гидрохлортиазид (HCTZ) или их фармацевтически активные соли.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способам лечения состояний, связанных с сердечными и почечными заболеваниями, путем введения фармацевтической композиции, включающей (i) алискирен, в частности его гемифумарат, амлодипин, в частности его малеат или более предпочтительно безилат, и HCTZ.

Соединения, которые следует объединить, могут присутствовать в виде фармацевтически приемлемых солей. Если эти соединения имеют, например, как минимум, один основный центр, они могут образовывать кислотно-аддитивные соли. Соответствующие кислотно-аддитивные соли могут быть также образованы при наличии, если желательно, дополнительно присутствующего основного центра. Соединения, имеющие, как минимум, одну кислотную группу (например, СООН), также могут образовывать соли с основаниями. Кроме того, соответствующие внутренние соли могут быть также образованы, если соединение содержит, например, и карбоксильную группу, и аминогруппу.

Было обнаружено, что комбинация алискирена, амлодипина и HCTZ способствует большему терапевтическому эффекту, чем введение каждого из этих средств по отдельности. О большей эффективности может также свидетельствовать увеличенная продолжительность действия. Продолжительность действия может регистрироваться либо как время возвращения до нулевой линии перед следующей дозой, либо как площадь под кривой (AUC) и выражается как результат изменения кровяного давления в миллиметрах ртутного столба (изменение в мм рт.ст.) и в виде продолжительности действия (минуты, часы или дни).

Другие преимущества состоят в том, что более низкие дозы отдельных лекарственных средств, объединяемых согласно настоящему изобретению, могут быть использованы для уменьшения дозировки, например дозы необязательно часто должны быть только меньшими, но их также применяют менее часто, или они могут применяться для уменьшения распространения побочных эффектов. Совместное введение алискирена, амлодипина и HCTZ или их фармацевтически приемлемых солей приводит к значительной ответной реакции у более высокого процента подвергшихся лечению больных, это означает то, что в результате наблюдается более высокий уровень иммунокомпетентных клеток независимо от лежащей в основе состояния этиологии. Это согласуется с желаниями и требованиями больных, подвергающихся лечению.

Может быть показано, что комбинированная терапия с применением алискирена, в частности его гемифумарата, амлодипина, в частности его малеата или более предпочтительно его безилата, и HCTZ приводит в результате к более эффективной гипотензивной терапии (и в случае злокачественной гипертензии, гипертонической болезни, реноваскулярной гипертензии, диабетической гипертензии, изолированной систолической гипертензии, и в случае другого симптоматического типа гипертензии) вследствие улучшенной эффективности, а также более высокого уровня иммунокомпетентных клеток. Комбинация также полезна для лечения или предупреждения сердечной недостаточности, как, например, (острой и хронической) застойной сердечной недостаточности, дисфункции левого желудочка и гипертрофической кардиомиопатии, диабетической сердечной миопатии, наджелудочковой и желудочковой экстрасистолии, мерцательной аритмии, трепетания предсердий или опасной для здоровья коррекции сосудов. Далее может быть показано, что комбинированная терапия с применением алискирена, амлодипина и HCTZ оказывается полезной при лечении и предупреждении инфаркта миокарда и его последствий. Комбинированная терапия с применением алискирена, амлодипина и HCTZ также полезна при лечении атеросклероза, стенокардии (как стабильной, так и нестабильной) и почечной недостаточности (диабетической и недиабетической). Кроме того, комбинированная терапия, использующая алискирен, амлодипин и HCTZ, может улучшить нарушенную функцию эндотелия, оказывая тем самым благоприятное воздействие в случае заболеваний, при которых нарушена нормальная функция эндотелия, как, например, сердечная недостаточность, грудная жаба и диабет. Кроме того, комбинация по настоящему изобретению может быть использована для лечения или предупреждения вторичного альдостеронизма, первичной и вторичной легочной гипертензии, состояний почечной недостаточности, как, например, диабетической нефропатии, гломерулонефрита (включая IgA-нефропатию), фиброза почек, склеродермии, гломерулярного склероза, протеинурии почечного заболевания и также реноваскулярной гипертензии, диабетической ретинопатии, комбинация может быть использована для оказания помощи при других сосудистых нарушениях, например при мигрени, периферическом сосудистом заболевании, болезни Рейно, гиперплазии полости трубчатого органа, нарушении познавательной способности (например, болезнь Альцгеймера), глаукоме и ударе, пневмофиброзе и фиброзе печени, фиброзных заболеваниях в результате накопления избытка внеклеточного матрикса, индуцированного TGF-β, и пролиферативных заболеваниях клеток гладких мышц (как, например, фиброма матки).

Специалист в соответствующей области в состоянии с успехом выбрать подходящую модель для испытаний, чтобы доказать эффективность комбинации по настоящему изобретению в случае указанных здесь ранее и в дальнейшем терапевтических показаний. Общепринятые исследования проводят с комбинацией из алискирена, в частности его гемифумарата, амлодипина, в частности его малеата или более предпочтительно безилата, и HCTZ, применяя следующую методологию.

Преимущества представленных комбинаций демонстрируются, например, при клиническом изучении или согласно методике исследования, в основном описанной далее. Многие протоколы клинических исследований, примененные для испытания данных комбинаций, известны специалисту в этой области. Пример клинического изучения, примененного для демонстрации преимуществ новых комбинаций, описывается Nussberger J. и др. (Hypertension, 2002, Jan.; 39(1):E1-8). Согласно такому же протоколу проводятся исследования с предпочтительными комбинациями согласно настоящей заявке, такими, как описанные здесь. Этот протокол включен в настоящую заявку путем ссылки на эту публикацию.

Эффективность лекарственного средства оценивают на различных моделях животных, включая приведенные ниже, применяя следующие приблизительные дозы. Алискирен вводят в подкожно имплантированные осмотические мини-насосы в дозах примерно 1-200 мг/кг/день (монотерапия) и примерно 1-75 мг/кг/день (комбинированная терапия). Амлодипин и HCTZ вводят перорально в дозах ниже 75 мг/кг/день в качестве монотерапии или комбинированной терапии.

Среди моделей животных, применяемых для оценки эффективности лекарственного средства, находится модель крыс, при которой используется ацетат дезоксикортикостерона (DOCA-соль), и модель крыс со спонтанной гипертензией (SHR), крыс либо поддерживают на нормальной солевой диете, либо они получают солевую нагрузку (4-8% соли в скармливаемой крысе казуарине хвощевидной или 1% NaCl в качестве питьевой воды). Для исследуемой модели с применением DOCA-соли используется протокол исследования либо острой, либо хронической формы болезни. Методика исследования острой формы болезни включает оценку воздействий различных исследуемых веществ в течение шестичасового экспериментального периода при использовании крыс с постоянно введенными бедренными артериальными и венозными катетерами. Методика исследования острого состояния оценивает способность изучаемых веществ понижать кровяное давление в течение фазы адаптирования при гипертензии в случае использования DOCA-соли. И наоборот, методика исследования хронического состояния оценивает способность исследуемых соединений предотвращать или замедлять повышение кровяного давления в течение фазы развития при гипертензии в случае использования DOCA-соли. Поэтому кровяное давление контролируют при использовании методики исследования хронического состояния с помощью радиопередатчика. Радиопередатчик хирургически имплантируют в брюшную аорту крыс перед стимуляцией лечения в случае модели с использованием DOCA-соли и, таким образом, до индуцирования гипертензии. Кровяное давление постоянно контролируют в течение периодов до 6 недель (примерно одну неделю до введения DOCA-соли и в течение 5 недель после этого).

Крысам вводят наркоз путем ингаляции 2-3% изофлураном в кислороде, затем вводят натрий-амитал (амобарбитал) 100 мг/кг, внутрибрюшинно. Степень анестезии оценивают по установившемуся ритмичному характеру дыхания.

Методика исследования острого состояния.

Крыс подвергают односторонней нефрэктомии во время имплантации DOCA. Волосы с помощью скобы направляют в левую сторону и заднюю часть шеи, обрабатывают с помощью смоченных спиртом стерильных тампонов и повидоном/иодом. Во время хирургического вмешательства крыс помещают на подогреваемую прокладку для поддержания температуры тела при 37°С.

Делается разрез в 20 мм через кожу и лежащую под ней мышцу для обнажения левой почки. Почку освобождают от окружающей ткани, выворачивают наружу и двумя лигатурами (3-0 шелк) проводят прочную обвязку вокруг почечной артерии и вены, расположенных близко к месту их соединения с аортой. Почечную артерию и вену затем перерезают и почку удаляют. Раны в мышце и на коже закрывают с помощью наложения шва из материала 4-0 шелк и зажимов для ран из нержавеющей стали, соответственно. В это же время делают разрез в 15 мм с задней стороны шеи и подкожно имплантируют гранулу с 3-недельным высвобождением (фирма Innovative Research of America, Сарасота, Флорида), содержащую ацетат дезоксикортикостерона (100 мг/кг). Рану затем закрывают с помощью зажимов из нержавеющей стали и обе раны обрабатывают повидоном/иодом; крысам делают послеоперационную внутримышечную инъекцию прокаина пенициллина G (100,000 Ед.) и бупренорфина (0,05-0,1 мг/кг) подкожно. Крысам немедленно начинают давать питьевую воду с 1% NaCl+0,2% KCl; такая обработка продолжается, как минимум, 3 недели, в это время у животных повышается артериальное давление и они становятся пригодными для эксперимента.

За сорок восемь часов до эксперимента животным дают наркоз в виде изофлурана и помещают катетеры в бедренную артерию и вену для измерения артериального давления, сбора крови и введения исследуемых соединений. Крысам дают восстановиться в течение 48 часов, помещая их для пребывания в клетку из плексигласа, которая также служит камерой для эксперимента.

Методика исследования хронического состояния.

Эта методика является такой же, что и описанная выше, за исключением того, что крысам имплантируют радиопередатчик за 7-10 дней до односторонней нефрэктомии и стимулирования DOCA и солью. Кроме того, крыс не подвергают хирургическому вмешательству для присоединения катетеров к бедренной артерии и вене. Радиопередатчики имплантируют, как описано М.К.Bazil, С.Krulan и R.L.Webb., "Телеметрический мониторинг сердечно-сосудистых параметров у находящихся в сознании крыс со спонтанной гипертензией", J.Cardiovasc. Pharmacol. 22: 897-905, 1993.

Протоколы затем вводят в компьютер для измерения кровяного давления, частоты сердечных сокращений и т.д. в заранее определенные временные точки. Собирают базовые данные в различные временные моменты и через различные интервалы времени. Например, базовые или преддозовые значения обычно состоят из набора данных и являются усредненными от трех последовательных 24-часовых временных периодов перед введением лекарственного средства.

Кровяное давление, частоту сердечных сокращений и активность определяют в различные предварительно выбранные периоды времени до, во время и после введения лекарственного средства. Все измерения проводят на несдерживаемых животных и на животных без патологических отклонений. Максимальное время исследования, определяемое сроком службы набора тестов, может продолжаться девять месяцев.

Кроме этого, крысы со спонтанной гипертензией (SHR) используются для изучения воздействий алискирена в комбинации с амлодипином и HCTZ. Гипертензивный фон SHR модифицируется либо с помощью постоянной солевой нагрузки при попытке подавить систему ренин-ангиотензин (RAS) или путем постоянного снижения соли для активации RAS у крыс со спонтанной гипертензией. Такие манипуляции осуществляют для более экстенсивной оценки эффективности различных исследуемых соединений. Для экспериментов, проводимых с крысами со спонтанной гипертензией (SHR), такие животные поставляются фермами Taconics, Germantown, Нью-Йорк (Тас: N(SHR)fBR). Радиотелеметрическое приспособление (Data Sciences International, Inc., St. Paul, Миннесота) имплантируют в низшую брюшную аорту всех исследуемых животных возраста от 14 до 16 недель. Всем крысам со спонтанной гипертензией дают возможность восстановиться после процедуры хирургической имплантации в течение, как минимум, двух недель до начала экспериментов. Сердечнососудистые параметры постоянно контролируются посредством радиопередатчика и передаются принимающему устройству, где представленные в цифровом виде сигналы затем собирают и хранят, используя систему сбора компьютеризованных данных. Кровяное давление (среднее артериальное, систолическое и диастолическое давление) и частоту сердечных сокращений контролируют у находящихся в сознании, свободно передвигающихся и спокойных крыс со спонтанной гипертензией в их клетках для пребывания. Артериальное кровяное давление и частоту сердечных сокращений измеряют каждые 10 минут в течение 10 секунд и регистрируют. Данные, полученные для каждой крысы, представляют средние значения, усредненные за период в 24 часа и полученные от образцов от 144-10 минут, собранных каждый день. Базовые значения для кровяного давления и частоты сердечных сокращений состоят из среднего значения трех последовательных 24-часовых показаний, снятых перед началом лечения лекарственными средствами. Всех крыс размещают по отдельности в помещение с регулируемыми температурой и влажностью и поддерживают 12-часовой цикл свет-темнота.

В дополнение к сердечно-сосудистым параметрам у всех крыс также еженедельно регистрируют массу тела. Средства для лечения вводят в питьевой воде путем перорального принудительного питания или в осмотических мини-насосах, как описано выше. Если введение проводят в питьевой воде, потребление воды измеряют пять раз в неделю. Дозы лекарственных средств для отдельных крыс затем рассчитывают на основании потребления воды каждой крысой, концентрации лекарственного вещества в питьевой воде и индивидуальных масс тела. Все растворы лекарственных препаратов в питьевой воде заново готовят каждые три-четыре дня.

После завершения исследований хронических состояний крысам со спонтанной гипертензией (SHR) или крысам модели с использованием DOCA-соли дают наркоз и быстро удаляют сердце. После отделения и удаления ушек предсердий левый желудочек и левый плюс правый желудочек (совокупно) взвешивают и результаты записывают. Массу левого желудочка и общую желудочковую массу затем относят к массе тела и регистрируют. Все полученные значения для кровяного давления и сердечной массы представляют группу, включающую среднее значение ± стандартную ошибку измерения.

Функцию сосудов и структуру определяют после лечения для оценки полезных воздействий комбинации. Крыс со спонтанной гипертензией (SHR) исследуют согласно способам, описанным Intengan H.D., Thibault G., Li J.S., Schiffrin E.L., Circulation, 1999, 100 (22): 2267-2275. Подобным же образом методика оценки функции сосудов у крыс модели с использованием DOCA-соли описывается Intengan H.D., Park J.B., Schiffrin, E.L., Hypertension, 1999, 34(4 Часть 2): 907-913.

Эффективность лекарственных средств для подавления диабетического почечного заболевания оценивается на различных моделях животных, включающих мышей со спонтанным диабетом (db/db) (Ziyadeh F., Hoffman В., Han D., Iglesias-de la Cruz M., Hong S., Isono M., Chen S., McGowan Т., Sharma K. "Длительное предотвращение почечной недостаточности, избыточной экспрессии матричного гена и развития гломерулярного мезангиевого матрикса путем обработки моноклональным антителом против трансформирующего фактора роста-β у мышей (db/db) с диабетом". Proc Nati Acad Sci., 2000; 97:8015-8020). Мышь (db/db) является широко распространенной моделью в случае почечных гломерулярных поражений, наблюдаемых при неинсулинзависимом диабете (тип 2 диабета). Мышей ежедневно обрабатывают наполнителем, подвергают монотерапии или комбинированной терапии. Каждые 2 недели во время исследования собирают мочу для измерения выделения альбумина с мочой. В конце эксперимента кровь собирают для определения уровней креатинина в плазме. Почки сохраняются in situ с помощью перфузионной фиксации, их удаляют и количественно оценивают почечную патологию с помощью световой микроскопии и анализа изображения. Эффективность лекарственного средства определяют по уменьшению (против контрольных опытов с наполнителем) (i) выделения альбумина с мочой, (ii) плазменного креатинина и по (iii) подавлению почечного гломерулосклероза.

Эффективность лекарственных препаратов для подавления фиброза почек оценивают на различных моделях животных, включая модель односторонней закупорки мочеточника у крыс (Ishidoya, S; Morrissey, J; McCracken, R; Reyes, A; Klahr, S. "Антагонист рецептора ангиотензина II улучшает трубчатоинтерстициальный фиброз, вызванный односторонней закупоркой мочеточника". Kid Int. 47:1285-1294, 1995). Такая модель включает лигирование одного мочеточника, что приводит к почечному фиброзу в течение 5 дней в почке, дренируемой этим мочеточником. Эффективность лекарственного средства определяют путем количественной оценки с помощью световой микроскопии и анализа изображения степени фиброза почек в подвергшихся обработке группах. Ингибиторы АСЕ и блокаторы рецептора AT1 тормозят фиброз почек на этой модели (Klar, S; Ishidoya, S; Morrissey, J. "Роль ангиотензина II при тубулоинтерстициальном фиброзе в случае нефропатии, обусловленной затруднением оттока мочи". Amer J Kid Dis. 26:141-146, 1995). Таким образом может быть продемонстрировано, что комбинированная терапия алискиреном, амлодипином и HCTZ обеспечивает повышенную защиту по сравнению с монотерапией.

Терапевтически эффективное количество каждого из компонентов комбинации по настоящему изобретению может вводиться раздельно, одновременно или последовательно, или в любом другом порядке. Унифицированная доза может также представлять определенную комбинацию.

Соответствующий активный ингредиент или его фармацевтически приемлемая соль может также быть применена в виде гидрата или может включать другие растворители, используемые для кристаллизации. Фармацевтические композиции согласно изобретению могут быть приготовлены известным по сути способом и являются композициями, подходящими для введения через тонкий кишечник, как, например, перорально или через прямую кишку, и подходящими для парентерального введения млекопитающим (теплокровным животным), включая человека, композициями, состоящими из терапевтически эффективного количества фармакологически активного соединения, одного или в комбинации с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, особенно подходящими для применения через тонкий кишечник или парентерального применения. Типичные пероральные лекарственные формы включают таблетки, капсулы, сиропы, эликсиры и суспензии. Типичные инъецируемые лекарственные формы включают растворы и суспензии.

Изобретение также относится к объединению отдельных фармацевтических композиций в форму набора. Это набор, объединяющий две или три отдельные части, например фармацевтическую композицию с алискиреном, фармацевтическую композицию с амлодипином и фармацевтическую композицию с HCTZ, или, в случае двух отдельных частей, набор, объединяющий фармацевтическую композицию из двух активных средств и фармацевтическую композицию из оставшегося активного ингредиента. Форма набора особенно предпочтительна, когда отдельные компоненты должны быть введены в различных дозированных формах (например, форма для парентерального введения алискирена и формы для перорального введения амлодипина и HCTZ) или компоненты вводятся с различными интервалами.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения (коммерческий) продукт представляет товарную упаковку, включающую в качестве активных ингредиентов комбинацию по настоящему изобретению (в виде двух или трех отдельных частей из компонентов от (i) до (iii) вместе с инструкциями для их одновременного, раздельного или последовательного применения) или любую их комбинацию, для замедления развития или для лечения упомянутых здесь заболеваний.

Такие фармацевтические препараты предназначены для введения теплокровным через тонкий кишечник, как, например, перорально, или также через прямую кишку, или парентерально вместе с препаратами, включающими фармакологически активное соединение либо одно, либо вместе с обычными фармацевтическими вспомогательными веществами. Например, фармацевтические препараты состоят из примерно от 0,1 до 90%, предпочтительно примерно от 1 до 80%, активных соединений. Фармацевтические препараты для введения через тонкий кишечник или для парентерального введения представлены, например, в формах со стандартными дозами, как, например, таблетки с покрытием, таблетки, капсулы или суппозитории и также ампулы. Их изготавливают известным по сути способом, например, применяя традиционные способы смешения, гранулирования, покрытия, солюбилизации и лиофилизации. Так, фармацевтические препараты для перорального применения могут быть получены путем объединения активных соединений с твердыми наполнителями, если желательно, полученную смесь гранулируют и, если требуется или необходимо, смесь или гранулят перерабатывают после прибавления подходящих вспомогательных веществ в таблетки или в сердцевины таблеток с покрытием.

Дозировка активного соединения может зависеть от множества факторов, как, например, способ введения, виды теплокровных, возраст и/или состояние индивидуума.

Предпочтительными дозировками для активных ингредиентов фармацевтической комбинации согласно настоящему изобретению являются терапевтически эффективные дозировки, особенно тех соединений, которые коммерчески доступны.

Алискирен поставляется в виде подходящей стандартной дозы, например, в виде капсулы или таблетки, включающей терапевтически эффективное количество, например примерно от 1 до 1,000 мг, предпочтительно примерно от 150 до 500 мг алискирена, которая может быть применена больными. Предпочтительно алискирен применяют раз в день.

В случае амлодипина предпочтительными формами со стандартными дозами являются, например, таблетки или капсулы, содержащие, например, примерно от 1 до 40 мг, предпочтительно от 2,5 до 20 мг, применяемые ежедневно перорально. В случае HCTZ предпочтительными формами со стандартной дозой являются, например, таблетки или капсулы, включающие, например, примерно от 5 до 200 мг, предпочтительно примерно от 5 до 25 мг, применяемые перорально один раз в день. Указанные выше дозы охватывают терапевтически эффективное количество активных ингредиентов по настоящему изобретению.

Пример предпочтительной композиции включает количество алискирена между 140 и 220 мг, например 160 мг, количество амлодипина между 2 и 12 мг (например, 2,5 или 5, или 10 мг) и количество HCTZ между 5 и 30 мг, предпочтительно между 5 и 15 (например, 12,5 или 6,25 мг).

Другой пример предпочтительной композиции включает количество алискирена между 350 и 550 мг, например 450 мг, количество амлодипина между 2 и 12 мг (например, 2,5 или 5, или 10 мг) и количество HCTZ между 5 и 30 мг, предпочтительно между 10 и 30 (например, 12,5 или 25 мг).

Еще один пример предпочтительной композиции включает количество алискирена между 550 и 700 мг, например 640 мг, количество амлодипина между 2 и 12 мг (например, 2,5 или 5, или 10 мг) и количество HCTZ между 5 и 30 мг, предпочтительно между 10 и 30 (например, 12,5 или 25 мг).

1. Фармацевтическая композиция, включающая

(i) алискирен,

(ii) амлодипин, и

(iii) гидрохлортиазид,

или, если целесообразно, в каждом случае их фармацевтически приемлемая соль для лечения состояния или заболевания, выбранного из группы, включающей гипертензию, сердечную недостаточность, как, например, острую и хроническую застойную сердечную недостаточность, дисфункцию левого желудочка и гипертрофическую кардиомиопатию, диабетическую сердечную миопатию, наджелудочковую и желудочковую экстрасистолию, мерцательную аритмию, трепетание предсердий, опасную для здоровья коррекцию сосудов, инфаркт миокарда и его последствия, атеросклероз, стенокардию, как стабильную, так и нестабильную, почечную недостаточность диабетическую и недиабетическую, сердечную недостаточность, грудную жабу, диабет, вторичный альдостеронизм, первичную и вторичную легочную гипертензию, состояния почечной недостаточности, как, например, диабетическую нефропатию, гломерулонефрит, включая IgA-нефропатию, фиброз почек, склеродермию, гломерулярный склероз, протеинурию почечного заболевания, и также диабетическую ретинопатию, способ оказания помощи при других сосудистых нарушениях, как, например, при мигрени, периферическом сосудистом заболевании, болезни Рейно, гиперплазии полости трубчатого органа, нарушении познавательной способности как, например, болезнь Альцгеймера, глаукоме и ударе, пневмофиброзе и фиброзе печени, фиброзных заболеваниях в результате накопления избытка внеклеточного матрикса, индуцированного TGF, и пролиферативных заболеваниях клеток гладких мышц, включая фиброму матки.

2. Фармацевтическая композиция по п.1, содержащая алискирен в количестве в пределах от 1 до 1000 мг, амлодипин в количестве в пределах от 1 до 40 мг и гидрохлортиазид в количестве в пределах от 5 до 200 мг.

3. Фармацевтическая композиция по п.2, содержащая алискирен в количестве в пределах от 140 до 550 мг, амлодипин в количестве в пределах от 2 до 12 мг и гидрохлортиазид в количестве в пределах от 5 до 30 мг.

4. Товарная упаковка, включающая (i) алискирен или его фармацевтически приемлемую соль, (ii) амлодипин или его фармацевтически приемлемую соль и (iii) гидрохлортиазид или его фармацевтически приемлемую соль, в виде двух или трех отдельных частей из компонентов от (i) до (iii) вместе с инструкциями для совместного, раздельного или последовательного их применения для задержки развития или лечения состояния или заболевания, выбранного из группы, включающей гипертензию, сердечную недостаточность, как, например, острую и хроническую застойную сердечную недостаточность, дисфункцию левого желудочка и гипертрофическую кардиомиопатию, диабетическую сердечную миопатию, наджелудочковую и желудочковую экстрасистолию, мерцательную аритмию, трепетание предсердий, опасную для здоровья коррекцию сосудов, инфаркт миокарда и его последствия, атеросклероз, стенокардию, как стабильную, так и нестабильную, почечную недостаточность диабетическую и недиабетическую, сердечную недостаточность, грудную жабу, диабет, вторичный альдостеронизм, первичную и вторичную легочную гипертензию, состояния почечной недостаточности, как, например, диабетическую нефропатию, гломерулонефрит, включая IgA-нефропатию, фиброз почек, склеродермию, гломерулярный склероз, протеинурию почечного заболевания, и также реноваскулярную гипертензию, диабетическую ретинопатию, для оказания помощи при других сосудистых нарушениях, как, например, при мигрени, периферическом сосудистом заболевании, болезни Рейно, гиперплазии полости трубчатого органа, нарушении познавательной способности, как, например, болезнь Альцгеймера, глаукоме и ударе, пневмофиброзе и фиброзе печени, фиброзных заболеваниях в результате накопления избытка внеклеточного матрикса, индуцированного TGF, и пролиферативных заболеваниях клеток гладких мышц, включая фиброму матки.

5. Набор частей, включающий

(i) фармацевтическую композицию из алискирена или его фармацевтически приемлемой соли,

(ii) фармацевтическую композицию из амлодипина или его фармацевтически приемлемой соли,

(iii) фармацевтическую композицию из гидрохлортиазида или его фармацевтически приемлемой соли в виде двух или трех отдельных частей из компонентов от (i) до (iii).

6. Набор по п.5, где алискирен находится в количестве в пределах от 1 до 1000 мг, амлодипин находится в количестве в пределах от 1 до 40 мг и гидрохлортиазид находится в количестве в пределах от 5 до 200 мг.

7. Набор по п.5, где алискирен находится в количестве в пределах от 140 до 550 мг, амлодипин находится в количестве в пределах от 2 до 12 мг и гидрохлортиазид находится в количестве в пределах от 5 до 30 мг.