Способ профилактики лейкоза крупного рогатого скота

Изобретение относится к области ветеринарии. Способ заключается в том, что телятам 6-месяного возраста внутримышечно вводят лигфол двумя однократными циклами 1 раз в месяц в течение 3 месяцев - первый цикл в дозе 5,0 мл и второй цикл в дозе 10,0 мл. Дополнительно вводят янтарную кислоту в дозе 100,0 мг 1 раз в сутки в течение 10 суток с интервалом в 10 суток в течение 6 месяцев. Способ обеспечивает высокий уровень иммунобиологической защиты организма и профилактирует появление РИД-положительных реакций. 3 табл.

 

Изобретение относится к ветеринарной медицине, касается способа профилактики вирусных заболеваний крупного рогатого скота и может быть использовано для защиты молодняка от заражения вирусом лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС).

Этиология заболевания связана с наличием в лимфоцитах крови больных лейкозом животных РНК-содержащего вируса экзогенного происхождения, онковируса типа С. У инфицированных животных появляется гуморальный ответ на структурные белки вируса с персистентным лимфоцитозом. В крови увеличивается количество циркулирующих В-лимфоцитов, которые составляют 40-80% от общей популяции лимфоцитов, у здоровых они составляют 15-20%.

Известны способы снижения вирулентности заболевания стимуляцией иммунологической резистентности организма, особенно находящегося в инкубационном периоде, с использованием иммуномодуляторов. Так, для профилактики лейкоза использовали интерферон альфа-2 в пяти модификациях телятам 1-6-месячного возраста /1/. Однако продолжительность курса и низкий профилактический эффект поставили под сомнение целесообразность практического применения этого способа. Коррекцию клеточных и гуморальных факторов активности иммунной системы и естественной резистентности, особенно на фоне иммунодефицита, обеспечивает использование иммуномодуляторов природного происхождения Т- и В-активинов /2/, для чего 6 мг лиофилизированного порошка В-активина растворяют в 0,01% растворе Т-активина. Т- и В-активины в комбинации вводят телятам 20-30-суточного возраста, т.е. в период завершения колострального иммунитета и начала активного функционирования собственной иммунной системы, когда под влиянием негативных факторов внешней среды возможно развитие иммунодефицитных состояний, на фоне которых животные чаще заражаются возбудителями бактериальной и вирусной природы, для восстановления активности иммунной системы и естественной резистентности до показателей физиологической нормы, что позволяет профилактировать появление РИД-положительных реакций у животных раннего возраста при слабой профилактической роли у животных более старшего возраста. Предпочтительными являются препараты, способные контролировать пролиферацию вируса в клетках за счет стимуляции эффекторных клеток иммунитета и проявляющих свойства стресс-корректоров, например лигфол. Лигфол в качестве действующего начала содержит гуминовые вещества, полученные при гидролизе древесного лигнина. В его состав входят натрия пирофосфат десятиводный, натрия хлорид и диминерализованная вода. Он обладает адаптогенной и стресс-корректорной активностью, проявляет свойства антиоксиданта, иммуномодулятора, является гепатопротектором и противоопухолевым средством, повышает резистентность к неблагополучным воздействиям, способствует сохранению здоровья и продуктивности животных. В основе его фармакологической активности лежат иммуноантиоксидантные механизмы /3/.

Лигфол исследован в качестве препарата для улучшения качества жизни и продуктивных свойств животных, а также снижения лимфоцитоза на трех группах взрослых коров (группа 1 - условно здоровые животные без клинических или серологических признаков заболевания; группа 2 - больные животные с серологическим подтверждением болезни без клинических проявления лейкоза; группа 3 - больные животные с серологическим подтверждением болезни и клиническими проявлениями лейкоза). Лигфол вводили в дозе 5,0 мл на корову 1 раз в месяц в течение 10 месяцев, что вызывало положительную динамику основного гематологического показателя развития лейкозного процесса - абсолютного лимфоцитоза в периферической крови - у условно здоровых животных (группа 1) при отсутствии статистически значимого отличия от контроля (физиологический раствор) в других группах /4/. Более интенсивная схема применения Лигфола была испытана на больных животных в возрасте 12-18 месяцев с серологическим подтверждением болезни без ее клинических проявлений. Лигфол применяли по следующей схеме: в разовой дозе 5,0 мл на корову 1 раз в 7 дней в течение месяца, затем 1 раз в месяц в течение 3 месяцев. По результатам серологических исследований (РИД, ПЦР) установлена тенденция к сдерживанию развития лейкозного процесса /5/ (прототип).

Задачей изобретения является профилактика лейкоза крупного рогатого скота у молодняка путем коррекции и сохранения в пределах физиологической нормы активности иммунной системы и показателей естественной резистентности и снижения лимфоцитоза.

Актуальность эффективной защиты молодняка от заражения вирусом лейкоза крупного рогатого скота обусловлена тем, что инфицированные ВЛКРС телята 6-месячного возраста заболевают лейкозом в гематологической стадии в соотношении один больной на 23 инфицированных, а с возрастом это соотношение изменяется - 5:1.

Эта задача решена сочетанным применением лигфола и янтарной кислоты.

Сущность способа профилактики заключается в том, что телкам с 6-месячного возраста применяют лигфол двумя однократными циклами (1 раз в месяц в течение 3 месяцев) в дозе 5,0 мл на животное (первый цикл) и 10,0 мл на животное (второй цикл) и янтарную кислоту в дозе 100 мг на корову 1 раз в сутки в течение 10 суток с интервалом в 10 суток.

Опыты проведены на телках 6-месячного возраста черно-пестрой породы в условиях хозяйства с уровнем инфицированности ВЛКРС 5%. Животных подбирали по принципу аналогов (возраст, живая масса, клиническое состояние, иммунологический статус). Были сформированы 3 группы телок 6-месячного возраста с отрицательными результатами серологических исследований (РИД с гликопротеиновым антигеном ВЛКРС) и ПЦР: 1 группа (опыт) - животные 6-месячного возраста, которым внутримышечно вводили лигфол в дозе 5,0 мл на животное 1 раз в месяц в течение 3 месяцев и в дозе 10,0 мл на животное 1 раз в месяц в течение 3 месяцев (9 голов) и дополнительно применяли янтарную кислоту в дозе 100,0 мг на животное 1 раз в сутки в течение 10 суток с интервалом в 10 суток в течение 6 месяцев; 2 группа (контроль) - животные 6-месячного возраста, которым внутримышечно вводили лигфол в дозе 5,0 мл на животное 1 раз в месяц в течение 3 месяцев и в дозе 10,0 мл на животное 1 раз в месяц в течение 3 месяцев (8 голов); 3 группа (контроль) - животные 6-месячного возраста, которым препараты на назначали (13 голов). За животными вели клинические наблюдения. Лабораторные исследования на лейкоз и иммунобиохимические исследования проводили каждые три месяца с применением современных общепринятых тестов. Результаты представлены в таблицах 1, 2 и 3.

Как видно из таблицы 1, в группах, в которых применяли лигфол,. отмечалась положительная тенденция динамики уровня лимфоцитов - снижение количества лимфоцитов в периферической крови и иммунобиохимических показателей, более выраженная в опыте. Так, абсолютное количество лимфоцитов в 1 мкл крови через 6 месяцев составило в опыте 6324 по сравнению с 5589 в контроле с применением лигфола и 6156 в контроле без применения препаратов, а процентное содержание лимфоцитов в 1 мкл крови снизилось в опыте с до 68,0±2,17% по сравнению с 69,0±2,3% (контроль с применением лигфола) и 76,0±2,16% (контроль без применения препаратов). Концентрация веществ средней и низкой молекулярной массы как показатель степени эндогенной интоксикации через 6 месяцев составила в опыте 15,093±0,51 у.е. по сравнению с 18,246±1,54 у.е. (контроль с применением лигфола) и 18,675±1,94 у.е. (контроль без применения препаратов). Как известно, при эндогенной интоксикации наблюдается выраженное изменение иммунного статуса, проявляющееся иммунодепрессией, а основным патофизиологическим механизмом эндогенной интоксикации является активация перекисного окисления липидов, иницированных свободными кислородными радикалами, поэтому активация системы антиоксидантной защиты организма воздействует непосредственно на этот механизм. У животных, не получавших лигфол, РИД-положительные реакции в течение 6 месяцев отмечались у 3 животных, у которых они повторялись 2 раза, что указывало на развитие лейкозного процесса (таблица 2). Телки опытной группы отличались большей упитанностью, они лучше развивались и у них отмечали получение полноценной половой охоты (таблица 3).

Таблица 1
Реакция иммунной системы и иммунобиохимические показатели телок 5-7-месячного возраста
Показатели	До начала работы	Контроль	Опыт
		без применения препаратов (n=13)	с применением лигфола (n=8)	с применением лигфола и янтарной кислоты (n=9)
Через 3 месяца	Через 6 месяцев	Через 3 месяца	Через 6 месяцев	Через 3 месяца	Через 6 месяцев
Лейкоциты, 109/л	10,8±1,16	9,5±0,51	8,1±0,73	11,1±0,38	8,1±0,69	7,9±0,51	9,3±1,06
Лимфоциты, %	74±1,23	66,0±1,8	76,0±2,16	72,0±2,33	69,0±2,32	59,0±2,29	68,0±2,17
абс.	7992	6270	6156	7992	5589	4661	6324
ВНСММ, у.е.	11,81±0,27	19,63±1,72	18,675±1,94	18,91±0,84	18,246±1,54	17,031±1,03	15,093±0,51
Общий белок, г/л	69,77±1,1	72,06±1,5	77,74±1,61	79,97±1,02	77,12±0,89	68,13±1,03	78,78±1,09
Альбумины, г/л	30,06±0,51	30,68±0,27	31,91±0,56	31,04±0,30	30,53±0,18	31,4±0,31	30,91±0,39
%	43,87±0,81	42,8±0,96	39,73±0,76	43,67±0,66	39,64±0,38	46,16±0,92	39,31±0,66
α1-глобулины, г/л	4,21±0,07	4,34±0,1	4,54±0,23	4,25±0,07	4,65±0,06	4,03±0,07	4,73±0,06
%	6,04±0,02	6,02±0,02	5,69±0,31	5,98±0,02	6,03±0,009	6,05±0,02	6,01±0,03
α2-глобулины, г/л	6,37±0,11	6,55±0,16	6,99±0,19	6,4±0,1	7,0±0,08	6,05±0,12	7,5±0,35
%	9,15±0,04	9,08±0,04	8,73±0,28	8,99±0,03	9,08±0,02	8,88±0,04	9,03±0,07
β-глобулины, г/л	7,37±0,12	7,68±0,18	8,92±0,22	7,58±0,12	8,41±0,12	7,21±0,13	8,66±0,27
%	10,56±0,03	10,65±0,03	11,09±0,21	10,66±0,02	10,89±0,05	10,58±0,03	11,45±0,25
γ-глобулины, г/л	21,22±0,77	22,81±1,13	25,38±1,89	30,7±0,67	26,53±0,53	19,44±0,85	26,98±0,71
%	30,38±0,72	31,46±0,87	31,79±2,32	26,08±0,59	34,36±0,33	28,47±0,82	34,20±0,61
Имунноглубины, г/л
G	-	9,86±0,57	12,4±0,62	9,53±0,52	11,92±0,49	8,68±1,05	11,54±0,56
M	-	2,61±0,12	3,82±0,19	2,72±0,2	3,33±0,17	2,13±0,25	3,63±0,15
A	-	2,12±0,19	3,08±0,15	2,01±0,11	2,43±0,4	1,57±0,21	2,97±0,14
A/Г	0,79±0,02	0,75±0,03	0,74±0,08	0,78±0,02	0,66±0,01	0,86±0,03	0,65±0,02
Общий холестирин, мМоль/л	2,48±0,31	2,94±0,11	4,06±0,19	3,23±0,09	3,72±0,04	3,15±0,07	3,75±0,16
Холестирин ЛПВП, мМоль/л	0,81±0,07	0,94±0,03	1,24±0,05	0,97±0,02	1,18±0,04	0,95±0,03	1,16±0,03
Холестирин ЛПВП, мМоль/л	1,3±0,12	1,64±0,06	2,27±0,06	1,92±0,07	2,18±0,09	2,34±0,07	2,23±0,05
Холестирин ЛПОНП, мМоль/л	0,34±0,08	0,34±0,04	0,69±0,08	0,31±0,06	0,64±0,03	0,69±0,04	0,74±0,06
Коэффициент атерогенности	1,94±0,22	2,14±0,1	2,47±0,11	2,33±0,09	2,23±0,04	1,86±0,06	2,23±0,11
Триглецирин общ., мМоль/л	0,73±0,04	0,73±0,02	0,32±0,04	0,67±0,03	0,29±0,01	0,32±0,02	0,34±0,03
β-липопротеиды, г/л	-	2,55±0,15	3,91±0,22	3,01±0,14	3,48±0,,09	2,91±0,1	3,49±0,19

Таблица 2
Динамика РИД-положительных реакций у телок 5-7-месячного возраста
Показатели	Контроль	Опыт
	без применения препаратов (n=13)	с применением лигфола (n=8)	с применением лигфола и янтарной кислоты (n=9)
через 3 месяца	через 6 месяцев	через 3 месяца	через 6 месяцев	через 3 месяца	через 6 месяцев
РИД	3 полож.	3 полож.	отриц.	отриц.	отриц.	отриц.
Титр антител	1:2	1:2

Таблица 3
Динамика клинико-физиологических показателей
№ п/п контрольных* / опытных животных	Живая масса тела контрольных / опытных телок до начала опыта, кг	Живая масса тела контрольных / опытных телок через 4 месяца, кг	% прироста живой массы контрольных / опытных телок
Телки 5-7-месячного возраста
1/1	150/150	220/230	46,7/53,3
2/2	140/140	170/210	21,4/50,0
3/3	170/175	240/245	41,2/40,0
4/4	140/135	210/210	50,0/55,6
5/5	145/145	240/220	65,5/51,7
6/6	150/150	205/230	36,7/53,3
7/7	150/155	190/225	26,7/45,2
8/8	150/155	225/245	50,0/58,1
9/9	140/135	210/21	50,0/55,6
Общий вес	1335/1340	1910/2025	43,1/51,1
Средне	151±4,0/153±3,3	212,2±10,8/225±5,87
Примечание: контроль с применением Лигфола

Проведенные исследования подтвердили эффективность сочетанного применения лигфола и янтарной кислоты молодняку крупного рогатого скота для защиты от заражения ВЛКРС, о чем свидетельствует отсутствие выявления зараженных животных среди опытных телок 5-7-месячного возраста в течение 6 месяцев и наличие серопозитивных контрольных телок-аналогов в течение этого срока. В условиях отсутствия средств специфической профилактики лейкоза крупного рогатого скота сочетанное применение лигфола и янтарной кислоты обеспечивает высокий уровень иммунобмологической защиты организма и профилактирует появление РИД-положительных реакций, т.е. развитие лейкозного процесса у крупного рогатого скота.

Источники информации

1. Ивановский А.А. Использование препаратов иммуномодуляторов для профилактики лейкоза крупного рогатого скота // Сельскохозяйственная наука Северо-Востока Европейской части России. - 1995. - Т.3. - С.26-29.

2. RU 2188655 C2, 2002.

3. Наставление по применению лигфола в качестве адаптагена и стресс-корректора в ветеринарии: утв. Департаментом ветеринарии Минсельхоза РФ 03.05.2001, №13-4-03-0063.

4. www.humiphami.ru.

5. Итоги и перспективы применения гуминовых препаратов в продуктивном животноводстве, коневодстве и птицеводстве: Сб. докл. конф. М., 2006. - 62 с.

Способ профилактики лейкоза крупного рогатого скота, включающий внутримышечное введение телятам лигфола, отличающийся тем, что телятам 6-месячного возраста применяют лигфол двумя однократными циклами 1 раз в месяц в течение 3 месяцев - первый цикл в дозе 5,0 мл и второй цикл в дозе 10,0 мл и янтарную кислоту в дозе 100,0 мг 1 раз в сутки в течение 10 суток с интервалом в 10 суток в течение 6 месяцев.