Штамм несовершенного гиперпаразитарного гриба geiocladium fimbriatum oilman ет abbot № 78а внииф
2 46958
ОП И САНИ Е
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Соеетских
Социалистических
Республик
I1iLe ЮЗ П" т Е11Тн0ТЕхни ICCi АЯ БИБЛИОТЕКА Записи "»oe от авт. свидетельства М Заявлено 12.IV.1967 (¹ 1148640/30-15) Кл. 45t, 15/00 с г.рисоединением заявки № Приоритет Опубликовано 20.VI.1969. Бюллетень № 21 Дата опубликования описания 17.Х!.1969 МПК А 01п УДК 632.937.1.02:615. .779.932 (088.8) комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министрое СССР Авторы изобретения О. Д. Рудаков и H. М. Рудакова Всесоюзный научно-исследовательский институт фитопатологии Заявитель ШТАММ НЕСОВЕРШЕННОГО ГИПЕРПАРАЗИТАРНОГО ГРИБА GEIOCLADIUM FIMBRIATUM GILMAN ЕТ ABBOT М 78А ВНИИФ Изобретение относится к штаммам микроорганизмов, продуцирующих биологически активные вещества, которые могут быть использованы для борьбы с вредителями растительного и животного происхождения, в частности, с различными фитопатогенными грибами, Ранее описанные в научной литературе или хранящиеся в коллекциях штаммы этого вида, например штамм Gliocladium fimbriatum G. et Abb. ИНМИ, ранее не были известны как продуценты биологически активных веществ. Предлагаемый штамм является продуцентом биологически активных веществ, способных оказывать угнетающее действие на ряд микроорганизмов, таких как Botrytis cinerea, Fusarinm oxysporum, Erysiphe cicheracearum, Pucinia graminis, Phytophthora infestans и ряд других. Описываемый штамм был выделен методом отсева спор на агар Чапека с колоний, обнаруженных на фитофторных тканях клубней картофеля, в Московской области, осенью 1966 г., т. е. представляет из себя гиперпаразитарную форму известного сап рофитного почвенного гриба Gliocladium fimbriatum G. et Abb., относящегося к несовершенным грибам (Fungiimperfecti порядку Noniliales (Hyphales), роду Gliocladium Corda. Синонимами видового названия гриба являются Myrothesium verrucoria (Alb. et Sehvv). Ditmar ех !тг. и Metarrldzium glutinosum Pope. Наличие биологически активных веществ у описываемого изолята было установлено воздействием культуральной жидкости на прорастающие конидии и мицелий фитопатогенных грибов. При этом зооспоры Ph, infestans, например, полностью инактивируются в течение 5 — 6 сек пребывания в культуральной жидкости, разбавленной 1: 3, или в случае воздействия такой жидкости на непроросшие 10 зооспорангии не выходят, Мицелий Егуз1р11е cichoracearum invivo лизируется в течение суток. Конидии Botrytis cinerea и Fus, oxisporum прорастают, но дают уродливые ростки. Нанесение капли суспензии Gl, fimbriatum 15 в центр колонии Fusurium охуsporum, растущей на агаризованной среде Чапека в чашке Петри, показывает, что по мере роста фузариума его колонии постепенно обрастают глиокладиумом, показывая тем самым способ20 ность последнего функционировать гиперпаразитарно, с деструктивным воздействием на хозяина. Культуры описываемого штамма, выращенные на среде Чапека, не утрачивают способ25 ности воздействовать на подвижные зооспоры возбудителя фитофтороза картофеля (Phytophlhora infestans) при хранении этих культур в течение 12 месяцев при 5 С . Рассев моноспоровых культур (200 посевов) показал 30 идентичность морфологии колоний, что свидетельствует о стабильности штамма. 246958 1О Предмет изобретения Составитель А, Леонов Техрсл Л. В. Куклина Корректор Г. И. Тарасова Редактор В. Сорокин. икв" 3190 l9 Тираж .1 ьГ Потиисио» 111!И11Г1И Ко.;иве в ио лсивм изобретений и открытий ири Совете Мииист»ов СССР.Чосв I 1»ы»нская,:I. 4/5 i èïîãð»ôèÿ, ир. Сви;иова, 2 Испытание различных сред для глубинного выращивания, в состав которых входили различные источники углерода+ минеральный комплекс (KI-4PO4 0,2 ; К SO4 0,2>/о, 1gSO 02c/0 1»еЪОа, 0,1%; t. uSOa 0,1о/о и Мп$0, 0,1%), показало, что при температуре 22" С на средах, содержащих вышеназванный комплекс и сахарозу (5%) + соевую муку (1,5% ) или маннит (5%) -+ пептон (1% ), рост гриба отсутствует. На средах, содержащих глюкозу (5%) + пептон (1%) или глюкозу (5%)+NH Описываемый штамм имеет следующие технолого-биологические показатели: рост на стандартной среде Чапека (с агаром и без агара) хороший, мицелий шерстистый зеленый, в период роста с белой пушистой окантовкой. Спороношение интенсивное. Конидии в воде при температуре 18 — 22 С прорастают в течение 1 — 2 час и через сутки начинают формировать новое поколение спор. Полнос созревание культур на питательной среде при температуре 22 С вЂ” на 5 — 6 сутки. Культуральная жидкость окрашена в желто-зеленый цвет. Биологически активные вещества выделяются без дополнительных воздействий экстрагирующими веществамп. Колонии, выращенные на агаре Чапека, прп хранении в течение 6 месяцев в воздушно-сухом состоянии при температуре 5 С и новых пересевах на этой же среде сохраняют морфологические показатели и способность выделять биологически-активные вещества. При нанесении на ткани растений культуральной жидкости или суспензии спор гриба патологических явлений не наблюдается. Семена огурцов прорастают в суспензия спор гриба и дают нормально развивающиеся растения. 25 зо 5 4О 4 Предлагаемый штамм гриба Gliocladiuni Йп11 г1а1шп может быть использован в качестве биологического средства защиты растений от фитопатогенных грибов путем нанесения водной суспензии его спор на поверхностьколоний этих грибов, а также в качестве исходного штамма для отработки промышленных штаммов-продуцентов веществ, биологически активных против возбудителей болезней растений, например фитофторы картофеля, фузариоза картофеля, серой гнили, мучнистой росы и аскохитоза огурцов и ряда других. Штамм несовершенного гиперпаразитарного гриба Gliocladium fimbriatum Gilman et Abbot N 78A ВНИИФ, продуцирующий биологически активные вещества против возбудителей болезней растений, например, грибов Phytophthora 1п1ез1апв P. В., Во гу11з е1пегеа Pers., Fusariurn oxysporum Schlecht, Puccinia graminis, Er siphe eichoracearum P.Ñ. и ряда других, обладающих нижеперечисленными свойствами: Морфология. На агаре Чапека при температуре 22 — 24 С, на восьмые сутки колонии округлые, компактные, зеленоватые, ворсистые. Конидиеносцы 15 — 60 л к длины и 3 — 4 лпс ширины, вверху кистьевидно разветвленные, с компактными хорошо развитыми веточкамн 15 — 25 мк длины и пальчатовидными пли бутылковидными стеригмами 8 — 16 мк длины. Конидии одноклеточные, яйцевидные пли почти шаровидные, с гладкой оболочкой, 2,5 — 4 лк, собраны на концах веточек в шаровидные слизистые головки. Культуральные признаки. На агаре Чапека прп 22 С начало роста мицелия наблюдается на вторые сутки, появление зрелых конидий отмечается на 3 — 4 сутки, прекращение роста на 15 — 17 сутки. К этому времени диаметр колоний достигает 4 — 5 слт. Помимо агара Чапека, гриб хорошо растет и спорулирует на стерилизованном зерне овса и при глубинном выращивании в среде, содержащей 5 /0 крахмала; 1% пептона; 0,2% KHgPО4, 0 2% KELSO ; 0,2% MgSO<, 0,1 о FeSO1, 0,01% CuSO4 и 0,1% MnSO4 или близкой к ней по составу, образуя при этом до 25 10: спор в 1 слР среды.
