Применение 2-морфолино-5-фенил-6н-1,3,4-тиадизин, гидробромида в качестве средства, обладающего гиполипидемическим и гипергликемическим эффектом
Владельцы патента RU 2411936:
Институт физиологии Коми научного центра Уральского отделения Российской академии наук. Государственное учреждение (RU)
Изобретение относится к области фармакологии и медицины и касается применения 2-морфолино-5-фенил-6Н-1,3,4-тиадизин гидробромида в качестве средства, обладающего гиполипидемическим и гипергликемическим действием. 8 ил., 1 табл.
Изобретение относится к области профилактической медицины, отдельных специальных разделов клинической медицины и к области биологически активных соединений. Эффект изобретения может быть использован при необходимости снижения интенсивности утилизации тканями организма жирных кислот и ряда других энергетических субстратов; при объемных хирургических операциях, требующих поддержания функций центральной нервной системы; при снижении метаболизма в периферических органах и тканях; при лечении нейродегенеративных состояний; нарушении мозгового кровообращения и др.
Из уровня техники известен гиполипидемический лекарственный препарат Омакор (Omacor), Омега-3 триглицериды (Solvay Pharma), содержащий 46% этилового эфира эйкозапентоеновой кислоты, 38% этилового эфира докозагексаеновой кислоты, 4 мг альфа-токоферола (в качестве антиоксиданта). В результате приема Омакора в пероксисомах усиливается β-окисление свободных жирных кислот, что приводит к понижению их содержания в крови. Данный процесс сопровождается уменьшением содержания триглицеридов, вследствие снижения секреции печенью липопротеидов очень низкой плотности [Регистр лекарственных средств России РЛС. Энциклопедия лекарств. - 15-й вып. / Гл. ред. Г.Л.Вышковский. - М.: РЛС. - 2007, 2006. - С.656-657].
Также из уровня техники известны препараты, прием которых сопровождается гипергликемическими процессами (например, адреналин гидрохлорид). Тем не менее, лекарственного средства, обладающего и гиполипидемическим и гипергликемическим свойством, нами не обнаружено.
Технический результат настоящего изобретения заключается в расширении арсенала средств, обладающих выраженными гиполипидемическими и гипергликемическими свойствами.
Технический результат изобретения достигается тем, что в качестве фармакологического средства, обладающего гиполипидемическими и гипергликемическими свойствами, применяют 2-морфолино-5-фенил-6Н-1,3,4-тиадизин, гидробромид.
Объектом изобретения являются гиполипидемические и гипергликемические свойства 2-морфолино-5-фенил-6Н-1,3,4-тиадизин, гидробромида (формула I).
Формула I
Ранее было описано получение 2-морфолино-5-фенил-6Н-1,3,4-тиадизин, гидробромида, а также его антикоагулянтные и антиагрегатные свойства (патент РФ №2259371 (2005)). Однако гиполипидемические и гипергликемические свойства препарата выявлены впервые.
Эксперименты проведены на 8 беспородных собаках массой 20-25 кг, животных брали в опыт после адаптационного периода, препарат вводили в эффективном количестве, наибольший эффект наблюдали при введении препарата в диапазоне 46-54 мг/кг массы тела.
В первую фазу эксперимента собак наркотизировали золетилом в дозе 10 мг/кг веса животного. После этого производили установку катетеров длиной 20 см в яремную артерию и сонную вену, с целью последующего забора артериальной и венозной крови. В катетеры по всей длине вводили раствор гепарина (в соотношении 1:5 с 0,9% раствором NaCl) для предотвращения тромбирования канала катетера. После выхода животного из наркотического сна перед началом 2-й фазы эксперимента производили установку датчиков дыхания, датчиков для измерения температуры тела, датчиков для измерения ЭКГ. Послеоперационный период составлял 48 часов.
Согласно схеме вели подробный протокол эксперимента. Забор артериальной и венозной крови проводили через каждые 15 минут. Обязательным условием при проведении исследования было наличие контрольных точек забора крови для определения исходного уровня исследуемых биохимических показателей. Определяли гемоглобин и гематокрит. Отобранные образцы крови обрабатывали по стандартной схеме: плазму отделяли от эритроцитарной массы путем центрифугирования при 3000 об/мин.
В плазме проводили определение следующих биохимических показателей по стандартным методикам (см. табл.).
| Таблица | |
| Исследуемый показатель | Метод определения |
| Углеводный обмен | |
| Лактат | Спектрофотометрия; ферментативный метод |
| Пируват | Спектрофотометрия; цветная реакция |
| Глюкоза | Спектрофотометрия; ферментативный метод |
| Мочевина | Спектрофотометрия; ферментативный метод |
| Витаминная обеспеченность | |
| Витамин В1 | Спектрофотометрия; оценка стимулированной активности фермента с коферментом В1 |
| Витамин В2 | Спектрофотометрия; оценка стимулированной активности фермента с коферментом В2 |
| Витамин А | Флюориметрия |
| Витамин Е | Флюориметрия |
| Свободнорадикальное окисление | |
| Диеновые конъюгаты/кротоновый альдегид | Спектрофотометрия в ультрафиолетовой области спектра |
| Молекулы средней массы | Спектрофотометрия в ультрафиолетовой области спектра |
| Основания Шиффа | Флюориметрия |
| Жирнокислотный состав крови | |
| Свободные жирные кислоты | Высокоэффективная газожидкостная хроматография |
| В эритроцитах определяли | |
| Ферментное звено антиоксидантной системы | |
| Супероксиддисмутаза | Спектрофотометрия; кинетический метод |
| Глутатионпероксидаза | Спектрофотометрия; кинетический метод |
| Глутатионредуктаза | Спектрофотометрия; кинетический метод |
Через 20 минут после внутривенного введения 2-морфолино-5-фенил-6Н-1,3,4-тиадизин, гидробромида ненаркотизированной собаке отмечали прирост содержания глюкозы (Фиг.1) в венозной крови на 2,5 ммоль/л, сохраняющийся в течение последующих 20 мин. Через 50 минут после введения препарата уровень глюкозы в венозной крови возвращался к исходным показателям. Изменения наблюдаются и в жирнокислотном составе плазмы крови. Показано, что в течение 40 минут уровень миристиновой (С14:0) жирной кислоты остается стабильным (Фиг.2), после чего к 50-й минуте после введения препарата уровень этой жирной кислоты понижается на 25%. Пониженный уровень анализируемого метаболита сохраняется в течение 50 минут, после чего его уровень восстанавливается до исходных показателей. Уровень пальмитиновой кислоты (С16:0) в венозной крови собаки не изменялся в течение 35 минут (Фиг.3). В последующие 30 минут уровень этой жирной кислоты понижался на 30% и затем восстанавливался до исходного уровня через 100 минут после введения препарата. Динамика содержания в венозной крови стеариновой (С18:0) жирной кислоты (Фиг.4), олеиновой (С18:1) мононенасыщенной жирной кислоты (Фиг.5) полностью совпадала с изменениями, выявленными для пальмитиновой кислоты. Снижение содержания олеиновой кислоты с момента максимального эффекта препарата являлось более выраженным по сравнению со стеариновой кислотой и составило 40% и 35% соответственно. Сходная динамика наблюдалась для сывороточных показателей полиненасыщенных жирных кислот: линолевой (С18:2) жирной кислоты (Фиг.6) и линоленовой (С18:3) жирной кислоты (Фиг.7). Степень понижения содержания С18:2 в венозной крови собаки составляла 30%, а С18:3 - около 40% от исходного уровня. Иная динамика выявлена у полиненасыщенной арахидоновой (С20:4) жирной кислоты (Фиг.8). Как и для других описанных ранее жирных кислот, гиполипидемический эффект препарата проявлялся через 35 минут после его внутривенного введения. Снижение уровня С20:4 было более существенное и составило почти 50% от исходного уровня. Пониженный уровень арахидоновой кислоты сохранялся около 30 минут. После этого выявлено повышение уровня С20:4, однако даже через 100 минут после инъекции содержание анализируемого метаболита было снижено (на 20%) относительно исходного уровня.
Таким образом, особенностью вызываемого препаратом эффекта было то, что на первом этапе 2-морфолино-5-фенил-6Н-1,3,4-тиадизин, гидробромид вызывал умеренную гипергликемию с последующим восстановлением до исходного уровня к 50-й минуте. В это время начинал реализовываться гиполипидемический эффект препарата, причем степень снижения содержания разных жирных кислот отличалась как по ее глубине, так и по длительности. Это свидетельствует о том, что препарат избирательно активизирует элиминацию из кровеносного русла жирных кислот.
Фиг.1. Влияние 2-морфолино-5-фенил-6Н-1,3,4-тиадизин, гидробромида в дозе 50 мг/кг массы тела при внутривенном введении на содержание глюкозы в крови собаки.
Фиг.2. Влияние 2-морфолино-5-фенил-6Н-1,3,4-тиадизин, гидробромида в дозе 50 мг/кг массы тела при внутривенном введении на содержание С14:0 в крови собаки.
Фиг.3. Влияние 2-морфолино-5-фенил-6Н-1,3,4-тиадизин, гидробромида в дозе 50 мг/кг массы тела при внутривенном введении на содержание С16:0 в крови собаки.
Фиг.4. Влияние 2-морфолино-5-фенил-6Н-1,3,4-тиадизин, гидробромида в дозе 50 мг/кг массы тела при внутривенном введении на содержание С18:0 в крови собаки.
Фиг.5. Влияние 2-морфолино-5-фенил-6Н-1,3,4-тиадизин, гидробромида в дозе 50 мг/кг массы тела при внутривенном введении на содержание С18:1 в крови собаки.
Фиг.6. Влияние 2-морфолино-5-фенил-6Н-1,3,4-тиадизин, гидробромида в дозе 50 мг/кг массы тела при внутривенном введении на содержание С18:2 в крови собаки.
Фиг.7. Влияние 2-морфолино-5-фенил-6Н-1,3,4-тиадизин, гидробромида в дозе 50 мг/кг массы тела при внутривенном введении на содержание С18:3 в крови собаки.
Фиг.8. Влияние 2-морфолино-5-фенил-6Н-1,3,4-тиадизин, гидробромида в дозе 50 мг/кг массы тела при внутривенном введении на содержание С20:4 в крови собаки.
Применение 2-морфолино-5-фенил-6Н-1,3,4-тиадизин, гидробромида в качестве средства, обладающего гиполипидемическим и гипергликемическим эффектом.
