Способ количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах

Авторы патента:

Леонов Клим Андреевич (RU)

G01N33/49 - крови

Владельцы патента RU 2686116:

Общество с ограниченной ответственностью "Инновационные Фармакологические Разработки" (ООО "Ифар") (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к фармакологии и токсикологии, может быть использовано для количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах. Способ включает экстракцию определяемого вещества ацетонитрилом при кислом значении рН среды с добавлением натрия хлорида с последующим определением его методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с градиентным режимом элюирования с использованием в качестве подвижной фазы смеси 0,5% раствора калия фосфорнокислого однозамещенного, подкисленного до рН 4,0 ортофосфорной кислотой, и метанола при градиенте концентрации последнего от 5 до 75%. 2 пр., 5 ил., 2 табл.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Изобретение относится к области медицины, а именно к фармакологии и токсикологии, и может быть использовано для определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в различных биологических средах, в том числе в плазме крови млекопитающих.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Производное 4-аминопиридина - 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорид является действующим веществом разрабатываемого лекарственного средства для коррекции когнитивных функций при сосудистых заболеваниях головного мозга.

Одной из актуальных задач при создании нового лекарственного средства является проведение исследований фармакокинетики с целью оценки всасывания, распределения, метаболизма и экскреции. Для проведения исследований фармакокинетики требуется разработать биоаналитическую методику количественного определения действующего вещества в биологических средах, в частности в плазме крови. Для количественного определения действующего вещества в плазме крови могут быть использованы различные методы - физико-химические, иммунологические, микробиологические и другие методы, обладающие специфичностью, высокой чувствительностью, точностью и воспроизводимостью.

Одним из самых распространенных для изучения фармакокинетики лекарственного средства является метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), который обладает рядом преимуществ по сравнению с другими методами, а именно: высокой чувствительностью, которая позволяет определять микроколичества вещества и высокой скоростью анализа.

Высокая чувствительность методики - ключевой критерий для разработки способа количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида, поскольку его эффективная доза лежит в диапазоне 0,1-10 мг/кг в зависимости от способа введения, а при использовании таких низких доз концентрации действующего вещества в биологических средах, как правило, находятся в диапазоне очень низких концентраций от 10 до 1000 нг/мл.

В настоящее время не существует способов количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах. Для поиска возможных прототипов проведен анализ сведений о методах определения 4-аминопиридина и его производных. Описаны методы определения 4-аминопиридина.

Известен способ определения 4-аминопиридина и его метаболитов в биологических средах организма (плазме крови и моче) с использованием радиоактивной метки 14С и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) (заявка на патент US 2017035742, МПК А61К 31/4409 (2013.01), опуб. 09.02.2017; Caggiano А. и соавт., 2013). Однако для определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида данный способ не применим вследствие значительных отличий в химической структуре и сложности введения радиоактивной метки ¹⁴С в структуру молекулы.

В качестве прототипа использован ранее описанный оптимизированный способ определения 4-аминопиридина в плазме крови и моче с использованием метода ВЭЖХ (Gupta R.N., Hansebout R.R., 1996), который включает экстракцию определяемого вещества смесью 35% хлорной кислоты и метанола (1:100) с последующим определением его методом ВЭЖХ с использованием в качестве подвижной фазы смеси октансульфоновой кислоты в 10 мМ растворе натрия фосфорнокислого однозамещенного (рН=4,2) с ацетонитрилом. Однако для определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида данный способ не применим вследствие значительных отличий его химической структуры и физико-химических свойств от прототипа.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Предлагаемое изобретение решает задачу разработки нового высокоэффективного способа количественного определения лекарственного средства для коррекции когнитивных функций при сосудистых заболеваниях головного мозга в биологических средах - 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида.

ОСУЩЕСТВЛЕНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Поставленная задача решается способом количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах, включающем экстракцию определяемого вещества ацетонитрилом при кислом значении рН среды с добавлением натрия хлорида, с последующим определением его методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с градиентным режимом элюирования с использованием в качестве подвижной фазы смеси 0,5% раствора, содержащего калий фосфорнокислый однозамещенный (рН=4,0), и метанола при градиенте концентрации последнего от 5 до 75%.

Наиболее оптимальными, но не необходимыми режимами высокоэффективной жидкостной хроматографии при этом являются:

скорость подачи потока элюента - 0,1 мл/мин;

объем вводимой пробы - 20 мкл;

детектор - спектрофотометрический, 280 нм;

время анализа - 20 мин;

температура термостата колонки - 35°С.

Отсутствие источников информации, содержащих ту же совокупность признаков, что и в разработанном способе, сообщает ему соответствие критерию «новизна».

Та же совокупность признаков позволяет получить новый непредсказуемый эффект - разработка высокоэффективного способа количественного определения в биологических средах нового лекарственного средства - 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида (далее субстанция NL) и, таким образом, сообщает ему соответствие критерию «изобретательский уровень».

Проведение количественного определения нового лекарственного средства с использованием известного оборудования с помощью известных препаратов сообщает разработанному способу соответствие критерию «промышленная применимость».

Таким образом, разработанный способ соответствует всем 3 критериям охраноспособности изобретения и может быть квалифицирован как изобретение.

На Фиг. 1 представлена хроматограмма раствора субстанции NL с концентрацией 1000 нг/мл.

На Фиг. 2 представлена хроматограмма NL в плазме крови с концентрацией 1000 нг/мл при экстракции ацетонитрилом в нейтральной среде.

На Фиг. 3 представлена хроматограмма NL в плазме крови с концентрацией 1000 нг/мл при экстракции ацетонитрилом в кислой среде.

На Фиг. 4 представлена хроматограмма образца плазмы крови крысы, время забора крови 30 мин.

На Фиг. 5 представлена хроматограмма образца плазмы крови крысы, время забора крови 60 мин.

Пример 1. Подбор условий пробоподготовки

В качестве биологической среды использовали плазму крови крыс.В качестве метода извлечения NL из биологической матрицы использовали жидкостно-жидкостную экстракцию ацетонитрилом. Важнейшим и подлежащим оптимизации показателем при экстракции является степень извлечения. На степень извлечения может оказывать влияние множество внешних факторов: рН среды, температура, скорость, время перемешивания и т.д. Оптимизировали процедуру пробоподготовки по значению рН среды и времени перемешивания. При этом скорость перемешивания выбрана максимальной - 4000 об/мин, температура - комнатной. Определение степени извлечения при различных варьируемых внешних значениях осуществляли путем сравнения значений площадей пиков в растворе субстанции NL и в плазме крови аналогичных концентраций. Кислое значение рН среды создавали добавлением к плазме крови 20% раствора ортофосфорной кислоты, щелочное - 0,1 М раствора натрия гидроксида. Полученные хроматограммы представлены на фиг. 1-3, результаты подбора условий пробоподготовки представлены в таблице 1.

Из таблицы 1 видно, что наибольшая степень извлечения NL из плазмы крови крыс наблюдается при жидкостно-жидкостной экстракции ацетонитрилом при кислом значении рН среды. Также видно, что наибольшая степень извлечения наблюдается при времени перемешивания, равном 10 мин при экстракции и 5 мин при добавлении неорганической соли. Степень извлечения NL из плазмы крови животного составляет около 96%.

Для подтверждения возможности применения разработанных условий для определения NL в другой биологической среде (плазма крови кроликов) проводили исследование степени извлечения из данной матрицы методом жидкостно-жидкостной экстракции ацетонитрилом при кислом значении рН среды и времени перемешивания в течение 10 и 5 мин. Результаты исследования представлены в таблице 2.

Из таблицы 2 видно, что степень извлечения NL из плазмы крови кроликов составляет 96,4% и находится на одном уровне со степенью извлечения NL из плазмы крови крыс.Следовательно, в качестве биологической матрицы при определении NL в плазме крови животного можно использовать плазму крови как крыс, так и кроликов, ввиду одинаковой степени извлечения аналита.

Пример 2. Количественное определение субстанции NL в плазме крови.

Приготовление подвижной фазы А (ПФ А). 2,5 г калия фосфорнокислого однозамещенного помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл, прибавляют 300 мл воды очищенной, перемешивают до полного растворения, прибавляют воду очищенную до метки и перемешивают. Доводят рН полученного раствора до 4,0 ортофосфорной кислотой.

Приготовление раствора субстанции NL с концентрацией 1 мг/мл

Около 0,01 г (точная навеска) субстанции NL помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в 5 мл подвижной фазы А (ПФ А), доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают.

Раствор хранят не более 3 суток при температуре 2-8°С.

Приготовление раствора субстанции NL с концентрацией 0,01 мг/мл

1 мл раствора субстанции NL с концентрацией 1 мг/мл помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора ПФ А до метки и перемешивают.1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора ПФ А до метки и перемешивают. Раствор используют свежеприготовленным.

Приготовление градуировочных растворов субстанции NL

Из раствора субстанции NL с концентрацией 0,01 мг/мл методом параллельно-последовательного разбавления готовят растворы субстанции NL с концентрациями: 20, 10, 7, 5, 2, 1, 0,5, 0,25 мкг/мл. Растворы используют свежеприготовленными.

Приготовление градуировочных образцов NL в плазме крови животных

В пластиковую центрифужную микропробирку типа «Эппендорф» вместимостью 2 мл помещают 450 мкл холостой плазмы крови крыс, не содержащей NL, прибавляют 50 мкл исходного калибровочного раствора субстанции соответствующей концентрации и перемешивают. Затем прибавляют 1 мл ацетонитрила и тщательно перемешивают на встряхивателе при 4000 об/мин в течение 10 мин. К полученной смеси прибавляют 0,1-0,2 г натрия хлорида и тщательно перемешивают на встряхивателе при 4000 об/мин в течение 5 мин. Полученный раствор центрифугируют при 13000 об/мин в течение 10 мин. Водную фазу отбрасывают, а органическую упаривают под вакуумом до сухого остатка при температуре 45°С в течение 90-100 мин. К сухому остатку прибавляют 500 мкл подвижной фазы А (ПФ А), перемешивают на встряхивателе в течение 5 мин и центрифугируют. Надосадочную жидкость используют для анализа.

Подготовка пробы

В пластиковую центрифужную микропробирку типа «Эппендорф» вместимостью 2 мл помещают 500 мкл плазмы крови крыс, содержащей NL, прибавляют 1 мл ацетонитрила и тщательно перемешивают на встряхивателе при 4000 об/мин в течение 10 мин. К полученной смеси прибавляют 0,1-0,2 г натрия хлорида и тщательно перемешивают на встряхивателе при 4000 об/мин в течение 5 мин. Полученный раствор центрифугируют при 13000 об/мин в течение 10 мин. Водную фазу отбрасывают, а органическую упаривают под вакуумом до сухого остатка при температуре 45°С в течение 90-100 мин. К сухому остатку прибавляют 500 мкл подвижной фазы А (ПФ А), перемешивают на встряхивателе в течение 5 мин и центрифугируют. Надосадочную жидкость используют для анализа.

Проверка пригодности хроматографической системы

Готовят модельный раствор NL в плазме крови животного с концентрацией 1000 нг/мл.

Время удерживания NL должно составлять около 9,6 мин, относительное стандартное отклонение времени удерживания не должно превышать 10%, соотношение сигнал/шум должно быть не менее 160/1, среднее квадратическое отклонение выходного сигнала не должно превышать 5%.

Анализируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Далее анализируют градуировочные растворы. По результатам анализа градуировочных растворов строят градуировочный график зависимости площади пика анализируемого вещества от его концентрации в плазме крови животных. Концентрацию NL в исследуемых образцах определяют по градуировочному графику.

Хроматограммы, полученные при анализе образцов плазмы крови крыс после внутрижелудочного введения субстанции NL представлены на фиг. 4 и фиг. 5.

Как видно из приведенных примеров, предлагаемое изобретение позволяет получить необходимую и достоверную информацию о способе количественного определения субстанции 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах.

ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ

1 Caggiano A., Blight А., Рапу T.J. (2013) Identification of metabolites of dalfampridine (4-aminopyridine) in dog and rat. Journal of Drug Assessment, 2:1, 72-80, DOI: 10.3109/21556660.2013.794143.

2 Заявка на патент US 2017035742.

3 Gupta R.N., Hansebout R.R. Optimization of the determination of 4-aminopyridine in human serum and urine by column liquid chromatography. Journal of Chromatography B, 677 (1996) 183-189.

Способ количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах, включающий экстракцию определяемого вещества ацетонитрилом при кислом значении рН среды с добавлением натрия хлорида с последующим определением его методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с градиентным режимом элюирования с использованием в качестве подвижной фазы смеси 0,5% раствора калия фосфорнокислого однозамещенного, подкисленного до рН 4,0 ортофосфорной кислотой, и метанола при градиенте концентрации последнего от 5 до 75%.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для подбора оптимального криопротектора по содержанию гликогена в лейкоцитах консервированной крови.

Способ прогнозирования течения процесса заживления лапаротомной раны при механической желтухе неопухолевого происхождения // 2685717

Изобретение относится к области медицины, а именно к хирургии, и предназначено для прогнозирования течения репаративного процесса лапаротомной раны при механической желтухе неопухолевого происхождения.

Способ оценки состояния микробиоты кишечника // 2685553

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для оценки состояния микробиоты кишечника. Для этого осуществляют взятие пробы крови.

Способ прогнозирования состояния микробиоты кишечника новорожденных // 2685508

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования состояния микрофлоры кишечника у новорожденных детей.

Система и способ определения концентраций глюкозы, нечувствительных к гематокриту // 2684938

Группа изобретений относится к области определения концентрации глюкозы. Способ определения концентрации глюкозы в крови содержит этапы, на которых: вставляют тест-полоску в разъем порта полоски измерительного устройства для соединения по меньшей мере двух электродов; инициируют последовательность измерения после нанесения образца.

Способ определения высвобождения аденозинтрифосфорной кислоты из эритроцитов in vitro // 2684642

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для определения высвобождения аденозинтрифосфорной кислоты из эритроцитов in vitro.

Способ скринингового определения высокой вероятности наличия аллергического характера воспаления, ассоциированного с повышенным уровнем в крови интерлейкина-8, при бронхолегочных заболеваниях у детей // 2684406

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для скринингового определения высокой вероятности наличия аллергического характера воспаления при бронхолегочных заболеваниях у детей старше 2 лет с повышенным уровнем в крови интерлейкина-8.

Диагностика и лечение синдрома раздраженного кишечника и воспалительного заболевания кишечника // 2683781

Группа изобретений относится к медицине и предназначена для диагностики и лечения синдрома раздраженного кишечника (СРК). Описаны способы, анализы и системы для диагностики, выбора терапии и лечения СРК на основании уровня антител к винкулину и к CdtB у субъекта.

Способ прогнозирования риска отдалённых фатальных сердечных и цереброваскулярных событий после плановой эндоваскулярной реваскуляризации миокарда // 2683691

Изобретение относится к медицине, кардиологии, оценке индивидуального риска развития отдаленных (более 5 лет после чрескожного коронарного вмешательства, ЧКВ) фатальных сердечных и цереброваскулярных событий.

Способ прогнозирования течения репаративного процесса лапаротомной раны при остром перитоните // 2683312

Изобретение относится к области медицины, а именно к хирургии, и предназначено для прогнозирования течения репаративного процесса лапаротомной раны при остром перитоните.

Способ определения резистентности тромбоцитов к антиагрегантным препаратам у пациентов с ишемической болезнью сердца // 2686700

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, клинической лабораторной диагностике и гематологии. Способ определения резистентности к антиагрегантным препаратам у пациентов с ишемической болезнью сердца, принимающих лекарственные средства группы антиагрегантов не менее 6 месяцев, заключается во взятии крови в пробирку с 3,8% цитратом натрия в соотношении 9:1, разделении центрифугированием на плазму и эритроциты с получением богатой и бедной тромбоцитами плазмы, определении индивидуально пациенту значений светопропускания с графической регистрацией в течение 5 мин с постоянным перемешиванием и температурой 37°С, добавлении к суспензии тромбоцитов в соотношении 10:1 индуктора агрегации тромбоцитов коллагена однократно на 10 секунде регистрации агрегации тромбоцитов на лазерном агрегометре в концентрации 2 мкмоль/л, при этом дополнительно вносят к богатой тромбоцитами плазме индуктор коллаген в соотношении 2:1 по 2 мкмоль/л на 1, 2, 3 и 4 минутах исследования и при получении значений агрегации тромбоцитов в диапазоне от 45 до 100% определяют резистентность к антиагрегантным препаратам. 3 пр.

Способ ранней диагностики активной фазы эндокринной офтальмопатии // 2687082

Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии и эндокринологии, и предназначено для ранней диагностики активной фазы эндокринной офтальмопатии (ЭОП). Для ранней диагностики активности ЭОП пациентам определяют в сыворотке крови содержание антител к рецептору тиреотропного гормона (TSAbs - thyroid stimulating antibodies), интерлейкина 17 (IL-17 - interleukin-17), ВВ-изоформы тромбоцитарного фактора роста (PDGF-BB - platelet-derived growth factor - BB) и матриксной металлопротеиназы 13 (ММР-13 - matrix metalloproteinases-13) с использованием иммуноферментного анализа. Рассчитывают значения дискриминантных функций f1 и f2 по формулам:f1=-2,68+0,11×x1+0,19×x2+0,002×x3+0,06×x4f2=-26,67+0,74×x1+0,46×x2+0,007×x3+0,19×x4,где цифровые показатели - константа и коэффициенты регрессии, x1 - уровень TSAbs, x2 - уровень IL-17, x3 - уровень PDGF-BB, x4 - уровень ММР-13. При значении f1<f2 диагностируют активную фазу ЭОП, а при значении f1>f2 - неактивную ЭОП. Использование изобретения позволяет осуществить раннюю диагностику активной фазы ЭОП, когда признаки заболевания еще не достигли клинической манифестации, и определить дальнейшую индивидуальную терапевтическую тактику. 2 табл., 3 пр.

Способ прижизненной дифференциальной диагностики туберкулёза и микобактериозов крупного рогатого скота // 2687553

Изобретение относится к медицине и ветеринарии и касается способа прижизненной дифференциальной диагностики туберкулеза и микобактериозов крупного рогатого скота. Для этого используют индуцированную люминолзависимую хемилюминесценцию, в качестве объекта исследований используют сыворотку от положительно реагирующего на ППД-туберкулин крупного рогатого скота хозяйств с неясной эпизоотической ситуацией. В качестве основного индуктора используют комплексный аллерген из атипичных микобактерий (КАМ), а в качестве дополнительного индуктора используют аллерген туберкулезный рекомбинантный (АТР). Изобретение позволяет ускорить и повысить достоверность прижизненной дифференциальной диагностики туберкулеза и микобактериозов крупного рогатого скота за счет использование аллергенов in vitro, предотвратить необоснованный убой продуктивных животных в хозяйствах различных форм собственности, в том числе фермерских и личных подсобных. 3 табл., 2 пр.

Способ подготовки пробы мочи для определения монометилфталата, моноэтилфталата, монобутилфталата, монобензилфталата, моноэтилгексилфталата методом высокоэффективной жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии // 2687738

Изобретение относится к области аналитической химии. Способ подготовки пробы мочи для определения монофталатов методом ВЭЖХ/масс-спектрометрии включает центрифугирование пробы мочи 10 мин со скоростью 2000 об/мин., затем в пробу вносят концентрированную уксусную кислоту до достижения pH смеси 4,8., далее к 5 см3 подкисленного образца добавляют 0,2 см3 водного раствора фермента β-глюкуронидазы (Helix Pomatia). Полученную смесь инкубируют при температуре +37°С в течение 24 часов, охлаждают и доводят до pH 7, добавляя 40%-ный раствор гидроксида натрия. Смесь центрифугируют 10 мин со скоростью 2000 об/мин. и отбирают верхний слой в количестве 5 см3. Используя этот верхний слой, проводят ТФЭ на картридже Oasis HLB 5сс в два этапа: на первом этапе пропускают через него последовательно 1 см3 метанола и 1 см3 дистиллированной воды, полученные сливы удаляют, наносят на картридж, отобранный после центрифугирования верхний слой жидкости в количестве 5 см3, промывают картридж 1 см3 5%-ным раствором метанола и пропускают через картридж 0,5 см3 ацетонитрила, собирая экстракт. На втором этапе этот же картридж вначале последовательно промывают 1 см3 0,4%-ным раствором натрия гидроокиси, 1 см3 5%-ного раствора метанола и полученный слив удаляют, затем пропускают через указанный картридж 0,5 см3 ацетонитрила, присоединяя полученный при этом экстракт к экстракту, полученному на первом этапе. Объединенный экстракт фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,2 мкм, получая подготовленную для исследования пробу мочи. Изобретение обеспечивает повышение степени экстракции монометилфталата (ММФ) до 100%, моноэтилфталата (МЭФ) до 94%, монобутилфталата (МБФ) - 96%, монобензилфталата (МБзФ) - 92%, моноэтилгексилилфталата (МЭГФ) - 100% с погрешностью извлечения ± 10% и позволяет расширить диапазон измеряемых концентраций монофталатов от 10-4 до 10-1 мг/дм3. 1 ил. , 8 табл.

Способ прогнозирования тяжести геморрагической лихорадки с почечным синдромом // 2688691

Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования тяжести геморрагической лихорадки с почечным синдромом. Для этого пациенту проводят общее и биохимическое исследование крови, определяют: определяют гематокрит, относительное содержание сегментоядерных и палочкоядерных лейкоцитов и моноцитов, концентрацию креатинина и С-реактивного белка. Вычисляют значения функций классификации степеней тяжести ГЛПС по формулам: где KF1 - значение функции классификации легкой формы ГЛПС; KF2 - значение функции классификации среднетяжелой формы ГЛПС; KF3 - значение функции классификации тяжелой формы ГЛПС; x1 - гематокрит, %; х2 - относительное содержание сегментоядерных лейкоцитов, %; х3 - относительное содержание палочкоядерных лейкоцитов, %; x4 - относительное содержание моноцитов, %; x5 - концентрация креатинина, мкмоль/л; x6 - концентрация C-реактивного белка, мг/л, определяют степень тяжести ГЛПС, за которую принимают индекс функции классификации с наибольшим значением. Использование данного способа позволяет прогнозировать тяжесть геморрагической лихорадки с почечным синдромом, что дает возможность оптимизировать лечебную тактику данных больных. 3 пр., 1 табл.

Система измерения энергетических затрат организма в экстремальных условиях // 2688724

Изобретение относится к системам динамического контроля (или мониторинга) газовых сред и устройствам неинвазивного контроля состояния энергетического обмена организма человека в условиях чрезмерных или разнонаправленных физических, психологических, стрессовых нагрузок в течение продолжительного времени. Предлагаемая система отбора проб выдыхаемого воздуха для мониторинга энергетических затрат организма человека предусматривает решение нескольких задач: а) создание системы измерения энергетических затрат организма в экстремальных условиях, не требующей зависимости от энергоисточников, б) динамичность исследований, позволяющая в режиме мониторинга производить отбор проб воздуха через короткие промежутки времени при частой смене непродолжительных видов деятельности в экстремальных условиях; в) доставка множества проб воздуха к единым центрам оценки газового состава и определения энерготрат, находящимся дистанционно на удалении в стационарных и мобильных пунктах измерения; г) низкое сопротивление дыханию (не более 30 мм вод.ст.) и снижение ошибки при оценке легочной вентиляции за счет малоинерционных волюметров и использования двух легких (до 100 г) мешков из плотной ткани объемом 5 л каждый - аналогов дыхательных мешков портативных дыхательных мешков, используемых ранее на ВМФ (ПДУ-1 и ПДУ-2); д) снижение объемных характеристик и массы системы забора проб, позволяющей проводить исследования в малогабаритных автономных объектах и помещениях и снижающей ошибку за счет весовых характеристик; учет всех необходимых поправок и коэффициентов (давление, температура, влажность), оказывающих влияние на конечные величины газообмена и энерготрат; е) возможность проводить мониторинг (многоразовый забор проб) динамики энерготрат, не снимая с испытателя предлагаемую систему и проводя заборы проб воздуха в специальные камеры, что позволяет более объективно отражать или моделировать реальные нагрузки при отдельных видах профессиональной деятельности в экстремальных условиях; ж) возможность комплектации системы из элементов существующих приборов и средств измерения; з) расширение и повышение объективности методической базы. 1 ил.

Способ получения смесей, имитирующих нормальную и патологическую мочу человека, применяемых для обучения студентов глюкозооксидазному методу определения глюкозы в биологических жидкостях // 2688922

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторным методам исследования, и предназначено для обучения студентов глюкозооксидазному методу количественного определения глюкозы в моче с использованием смесей, имитирующих нормальную и патологическую мочу человека. Для этого в качестве смесей, имитирующих мочу, используют натрий-фосфатный буфер (рН 6,0-7,0), подкрашенный 1% раствором титанового желтого до цвета, аналогичного цвету нормальной мочи, без или с добавлением порошка глюкозы (декстрозы) до 0,5-2,0% (28-112 ммоль/л) от объема имитирующей мочу смеси, соответственно. По результатам выполненного глюкозооксидазного метода устанавливают наличие или отсутствие у потенциального пациента глюкозурии. Использование изобретения обеспечивает 100%-ную точность определения уровня глюкозы в имитаторе мочи, позволяет многократно и самостоятельно выполнить обучающие методики за счет их безопасности, простоты, воспроизводимости, однозначности интерпретации, низкой стоимости для освоения и закрепления умений и навыков по количественному определению глюкозы в моче глюкозооксидазным методом. 1 табл., 1 пр.

Двухкамерная аналитическая тест-полоска // 2689154

Группа изобретений относится к области измерения аналитов. Аналитическая тест-полоска содержит профилированный определяющий слой, определяющий две разделенные по текучей среде ячейки для пробы, причем каждая ячейка для пробы имеет порт на периметре аналитической тест-полоски и выполнена с возможностью приема соответствующей пробы текучей среды через соответствующий порт; общий электрод, расположенный на определяющем слое и в электрическом соединении с каждой из ячеек для пробы; и два электрода ячеек, каждый электрод в электрическом соединении с соответствующей одной из ячеек для пробы. При этом определяющий слой, общий электрод и электроды ячеек расположены с открытием участка поверхности общего электрода и соответствующих участков поверхности электродов ячеек. Также раскрывается способ анализа пробы текучей среды и система для анализа пробы текучей среды. Группа изобретений обеспечивает надежное нанесение текучей среды в порты тест-полоски. 3 н. и 17 з.п. ф-лы, 5 ил.