Способ подбора оптимального криопротектора по содержанию гликогена в лейкоцитах консервированной крови

Авторы патента:

Шерстнев Филипп Сергеевич (RU)

Перфилова Елена Александровна (RU)

Утемов Сергей Вячеславович (RU)

Ветошкин Константин Александрович (RU)

Костяев Андрей Александрович (RU)

Федоровская Надежда Станиславовна (RU)

G01N33/49 - крови

Владельцы патента RU 2686107:

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства" (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для подбора оптимального криопротектора по содержанию гликогена в лейкоцитах консервированной крови. Для этого у больного до начала криогемотрансфузионной терапии получают порцию венозной крови, делят на равные части в пробирки, в одной из которых контрольная проба (КП) крови не содержит криопротектора, в другие добавляют по одной равной дозе тестируемых криопротекторов - опытные пробы (ОП). Пробирки герметизируют пробками, содержимое перемешивают на шейкере при температуре плюс 37°C в течение 4 ч, капли ОП и КП наносят в объеме 4 мкл на предметные стекла, делают 2-3 мазка, быстро высушивают на воздухе при комнатной температуре, фиксируют в 10% спирт-формалиновой смеси, окрашивают на гликоген по методу Шабадаша, лейкоциты микроскопируют в проходящем свете. Проводят сравнительное исследование среднего цитохимического коэффициента (СЦК) сегментоядерных (с/я) нейтрофилов и лимфоцитов ОП и КП; при равности показателей СЦК ОП и СЦК КП тестируемый криопротектор оценивают как оптимальный для конкретного больного и пригодный к использованию; при значениях СЦК ОП, отличных от СЦК КП, делают заключение как о непригодном к использованию криопротекторе. Изобретение обеспечивает возможность индивидуального подбора оптимального криопротектора на доклиническом этапе криогемотрансфузионной терапии. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно цитохимической лабораторной диагностике, и может быть использовано для подбора in vitro оптимального (наилучшего, наиболее благоприятного в данных условиях) криопротектора на доклиническом этапе гемотрансфузионной терапии и предупреждения постгрансфузионных осложнений криопротекторного генеза. Для осуществления способа у больного до начала криогемотрансфузионной терапии получают порцию венозной крови, делят на равные части в пробирки, в одной из которых контрольная проба (КП) крови не содержит криопротектора, в другие добавляют по одной равной дозе тестируемых криопротекторов - опытные пробы (ОП); пробирки герметизируют пробками, содержимое перемешивают на шейкере при температуре плюс 37°C в течение 4 ч, капли ОП и КП наносят в объеме 4 мкл на предметные стекла, делают 2-3 мазка, быстро высушивают на воздухе при комнатной температуре, фиксируют в 10% спирт - формалиновой смеси, окрашивают на гликоген по методу Шабадаша, лейкоциты микроскопируют в проходящем свете, проводят сравнительное исследование среднего цитохимического коэффициента (СЦК) сегментоядерных (с/я) нейтрофилов и лимфоцитов ОП и КП по Кэплоу (1955) в модификации Астальди и Верга (1957); при равности показателей СЦК ОП и СЦК КП тестируемый криопротектор оценивают как оптимальный для конкретного больного и пригодным к использованию (ПКИ); при значениях СЦК ОП, отличных от СЦК КП, делают заключение как о непригодном к использованию криопротекторе. Способ прост и доступен врачу по клинической лабораторной диагностике современного лечебно-профилактического учреждения (ЛПУ).

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике по подбору оптимального криопротектора на доклиническом этапе гемотрансфузионной терапии и предупреждению посттрансфузионных осложнений криопротекторного генеза.

Уровень техники.

В современной клинической медицине посттрансфузионные реакции и осложнения рассматривают как один из универсальных механизмов патогенеза различных заболеваний, характеризующихся накоплением в тканях организма избытка токсических продуктов обмена веществ или клеточного реагирования, маркерами которых служат качественные и полуколичественные характеристики определенных цитохимических ферментативных реакций в лейкоцитах крови до и после смешивания с криопротекторами. Эти процессы могут развиваться как по типу яркой многосимптомной реакции, так и скрытно развивающихся труднокупируемых в последующем посттрансфузионных осложнений (Цитохимия замороженной клетки / Обозная Э.И., Пушкарь Н.С.. Маркова О.П.. Панков Е.Я. - Киев: Наук. Думка, 1981. - 176 с.). Поэтому возникает проблема выявления ранних признаков вредного влияния токсичных криопротекторов на организм и эффективного предупреждения посттрансфузионных осложнений криопротекторного генеза.

Известные методы биологического и биохимического исследования сыворотки крови (определение концентрации молекул средней массы, продуктов перекисного окисления липидов, билирубина и т.д.) имеют ряд недостатков:

- необходимость вводить криопротектор или гемоконсервант на его основе в сосудистое русло больного, то есть производить инвазивную манипуляцию, которая может быть сопряжена с техническими трудностями, осложнениями технического характера или непереносимостью субъектом лекарственного препарата;

- необходимость использования лабораторных технологий и специальной биохимической лаборатории, оснащенной сложным оборудованием и реактивами, что делает анализы не всегда доступными и дорогими как для лечебно-профилактических учреждений, так и для пациентов.

Эти недостатки ограничивают количество и частоту необходимых исследований.

На основании предложенных в литературе лабораторных модификаций для оценки полноценности ядерных клеток крови на этапах низкотемпературного консервирования и прогнозирования предполагаемых результатов криогемотрансфузионной терапии широко используются методы клинической и полуколичественной оценки цитохимических показателей активаторов жизненно важных клеточных ферментов в периферической крови пациентов.

Известен метод цитохимического обнаружения гликогена для оценки нормальных и патологических процессов (Углеводы и углеводный обмен: Материалы Второй Всесоюз. конф. по пробл. «Химия и обмен углеводов». 24-27 янв. 1961 г. М.: Изд-во АН СССР, 1962. - С. 157-163).

За прототип предлагаемого изобретения выбран способ, позволяющий выявить содержание гликогена в лейкоцитах высушенных мазков донорской крови (Архагов Ю.Ф. Изменение морфологии и функционально-метаболической активности лейкоцитов в процессе хранения донорской крови и под влиянием различных лучей: Автореф. дис. … канд. мед. наук. М., 2003. - 155 с.). Основным недостатком способа - прототипа является отсутствие сравнительных исследований СЦК лейкоцитов на гликоген в мазках проб венозной крови, смешанных с 15% раствором гексаметиленбистетра-оксиэтилмочевины (15% ГМБТОЭМ). 3,3% раствором глицерола (3,3% Гл). 10% раствором диметилсульфоксида (10% ДМСО), гемоконсервантом Тромбокриодмац (ТКД) или гемоконсервантом на основе 55% раствора диметилацетамида (ДМАЦ) с 5% раствором гидроксиэтилкрахмал (ГЭК) (55% ДМАЦ+5% ГЭК). со значениями СЦК КП. Вместе с тем, подбор оптимального криопротектора на этапе. предшествующем криогемотрансфузионной терапии, очень важен для больного, так как позволяет снизить риск посттрансфузионных осложнений криопротекгорного генеза.

Целью изобретения является устранение отмеченного недостатка и создание такого способа, который бы позволял подобрать in vitro для конкретного больного оптимальный криопротектор на этапе, предшествующем плановой криогемотрансфузионной терапии.

Раскрытие изобретения.

Техническим результатом изобретения является доступность, простота подбора оптимального криопротектора на доклиническом этапе криогемотрансфузионной терапии.

Технический результат в заявляемом способе подбора оптимального криопротектора по содержанию гликогена в лейкоцитах консервированной крови достигается тем, что, как и в способе-прототипе, анализ содержания гликогена в лейкоцитах осуществляют по методу Шабодаша.

Новым в способе является то, что подбор оптимального криопротектора проводят путем сравнительных исследований СЦК ОП на гликоген с 15% ГМБТОЭМ, 3,3 Гл, 10% ДМСО, гемоконсервантом ТКД или комбинированным гемоконсервантом 55% ДМАЦ с 5% ГЭК со значениями СЦК КП. При этом: об оптимальности криопротектора и его пригодности к использованию судят в случаях аналогичности значений показателей СЦК ОП и СЦК КП.

Необходимое оборудование:

1. Предметные стекла.

2. Пробирки для крови на 20 мл с винтовой герметичной пробкой.

3. Световой микроскоп с проходящим светом.

4. Набор тест-доз различных криопротекторов или гемоконсервантов на их основе, разрешенных к клиническому применению М3 России.

5. Набор реагентов для цитохимического определения гликогена в лейкоцитах.

Заявляемый способ имеет основное преимущество в сравнении с прототипом - проведение подбора оптимального криопротектора путем сравнительных исследований значений СЦК ОП аутологичной крови на гликоген, смешанных с тест-дозами 15% ГМБТОЭМ, 3.3% Гл, ТКД. 10% ДМСО или 55% ДМАЦ +5% ГЭК, со значениями СЦК КП.

Заявляемый способ осуществляют следующим образом. У обследуемого натощак до начала внутривенных трансфузий криоконсервированных компонентов крови (криогемотрансфузионной терапии) готовят в пробирках «линейку» из тест-доз с 15% ГМБТОЭМ, 3,3% глицерола, гемоконсервантом ТКД, 10% ДМСО или комбинированным гемоконсервантом на основе 55% ДМАЦ и 5% ГЭК по 1,5 мл в каждой; эксфузируют 25 мл аутологичной венозной крови на стабилизирующем растворе цитрата натрия и фасуют с помощью дозаторной пипетки в 6 помеченных маркером пробирок по 4,0 мл в каждую; затем в пробирку №1 вносят 0,25 мл тест-дозы 15% ГМБТОЭМ, в пробирку №2 - 0,25 мл тест-дозы 3,3% Гл, в пробирку №3 - 0,25 мл тест-дозы ТКД, в пробирку №4 - 0,25 мл тест-дозы 10% ДМСО, в пробирку №5 - 0,25 мл тест-дозы гемоконсерванта на основе 55% ДМАЦ +5% ГЭК, в пробирку №6 с контрольной пробой крови (КП) криопротектор не вносят; компоненты в пробирках №№1-6 герметизируют пробками, содержимое перемешивают на шейкере при температуре плюс 37°C в течение 4 ч (модель трансфузии); из каждой пробирки биопробы раскапывают с помощью дозаторной пипетки на чистые предметные стекла, из них готовят по 2-3 тонких мазка, высушивают на воздухе при комнатной температуре, фиксируют в 10% растворе спирт-формалина и окрашивают по методу Шабодаша (Справочник по клиническим лабораторным методам исследования под ред. Е.А. Кост. Москва "Медицина" 1975 г.); окрашенные и высушенные мазки микроскопируют в проходящем свете, производят качественный и полуколичественный анализ содержания гликогена в с/я нейтрифилах и лимфоцитах с подсчетом значений СЦК лимфоцитов по Кэплоу (1955) в модификации Астальди и Верга (1957). При этом: об оптимальности криопротектора и его пригодности к использованию с лечебной целью конкретному пациенту судят в случаях аналогичности значений показателей СЦК ОП и СЦК КП. При значениях СЦК ОП, отличающихся от СЦК КП, делают заключение о биопробах с высоким клиническим риском и непригодными для криогемотрансфузии.

Необходимое оборудование: предметные стекла, пробирки для крови на 5 и 20 мл с винтовой герметичной пробкой, световой микроскоп с проходящим светом, набор тест- доз различных криопротекторов или гемоконеервантов на их основе, разрешенных к клиническому применению М3 России, набор реагентов для цитохимического определения гликогена в лейкоцитах in vitro диагностики фирмы Диахим-ЦитоСтейн - ПАС (Россия).

В качестве иллюстрации работоспособности заявляемого способа подбора оптимального криопротектора по содержанию гликогена в лейкоцитах консервированной крови приводим 3 примера (Табл. 1), которые подтверждают практическое применение данного способа.

Примечание: жирным шрифтом обозначены оптимальные значения СЦК ОП и СЦК КП.

Пример №1. Результаты исследования крови донора П-ва 45 лет показывают, что из числа исследованных тест-доз криопротекторов оптимальным является 3,3% раствор Глицерола (СЦК с/я нейтрофилов 2,42% (в КП 2,42%); СЦК лимфоцитов 0,92% (в КП 0,92%). Заключение: ПКИ является криопротектор 3,3% Глицерол, а НКИ являются 15% ГМБТОЭМ, ТКД, 10% ДМСО и комбинированный криопротектор на основе 55% ДМАЦ и 5% ГЭК, которые несут риски посттрансфузионных осложнений.

Пример №2. Результаты исследования крови донора Н-н 33 лет показывают, что из числа исследованных тест-доз криопротекторов оптимальными являются комбинированный криопротектор, содержащий 55% ДМАЦ +5% ГЭК и 3,3% Глицерол, у которых СЦК с/я нейтрофилов 2,00% (в КП 2,00%). Согласно СЦК лимфоцитов в ОП и КП оптимальным также является криопротектор, содержащий 55% ДМАЦ +5% ГЭК 0,76%. Заключение: ПКИ является криопротектор на основе 55% ДМАЦ +5% ГЭК и 3,3% Глицерола, а НКИ являются 15% ГМБТОЭМ, ТКД и 10% ДМСО, которые несут риски посттрансфузионных осложнений.

Пример №3. Результаты исследования крови донора С-ва 47 лет показывают, что из числа исследованных тест-доз криопротекторов оптимальным является 3,3% раствор Глицерола (СЦК с/я нейтрофилов в КП и ОП составляет 2,41%, а СЦК лимфоцитов - по 0,94%. Заключение: ПКИ является криопротектор 3,3% Глицерол, а НКИ являются 15% ГМБТОЭМ, ТКД, 10% ДМСО и комбинированный криопротектор на основе 55% ДМАЦ и 5% ГЭК, которые несут риски посттрансфузионных осложнений.

Представленные примеры иллюстрируют применимость предлагаемого способа подбора оптимального криопротектора по содержанию гликогена в лейкоцитах консервированной крови. Способ дешев и может быть внедрен в практику гематологического центра, использующего трансфузии криоконсервированных компонентов крови или костного мозга.

Таким образом, благодаря использованию более чувствительного способа диагностики оптимального криопротектора по содержанию гликогена в лейкоцитах консервированной крови удается оценить эффективность и снизить риски планируемой криогемотрансфузионной терапии криопротекторного генеза.

Предлагаемое изобретение отвечает критериям «новизна» и «изобретательский уровень», так как проведенные патентно-информационные исследования не выявили источников патентной и научно-технической литературы, которые бы порочили новизну предлагаемого способа, равно как и известных способов с существенными признаками предлагаемого технического решения. Техническим результатом использования является возможность проведения индивидуального скрининга криопротекторов на доклиническом этапе их применения.

Способ подбора оптимального криопротектора по содержанию гликогена в лейкоцитах консервированной крови, отличающийся тем, что у больного до начала криогемотрансфузионной терапии получают порцию венозной крови, делят на равные части в пробирки, в одной из которых контрольная проба (КП) крови не содержит криопротектора, в другие добавляют по одной равной дозе тестируемых криопротекторов - опытные пробы (ОП), пробирки герметизируют пробками, содержимое перемешивают на шейкере при температуре плюс 37°C в течение 4 ч, капли ОП и КП наносят в объеме 4 мкл на предметные стекла, делают 2-3 мазка, быстро высушивают на воздухе при комнатной температуре, фиксируют в 10% спирт-формалиновой смеси, окрашивают на гликоген по методу Шабадаша, лейкоциты микроскопируют в проходящем свете, проводят сравнительное исследование среднего цитохимического коэффициента (СЦК) сегментоядерных (с/я) нейтрофилов и лимфоцитов ОП и КП; при равности показателей СЦК ОП и СЦК КП тестируемый криопротектор оценивают как оптимальный для конкретного больного и пригодный к использованию; при значениях СЦК ОП, отличных от СЦК КП, делают заключение как о непригодном к использованию криопротекторе.

Изобретение относится к области медицины, а именно к хирургии, и предназначено для прогнозирования течения репаративного процесса лапаротомной раны при механической желтухе неопухолевого происхождения.

Способ оценки состояния микробиоты кишечника // 2685553

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для оценки состояния микробиоты кишечника. Для этого осуществляют взятие пробы крови.

Способ прогнозирования состояния микробиоты кишечника новорожденных // 2685508

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования состояния микрофлоры кишечника у новорожденных детей.

Система и способ определения концентраций глюкозы, нечувствительных к гематокриту // 2684938

Группа изобретений относится к области определения концентрации глюкозы. Способ определения концентрации глюкозы в крови содержит этапы, на которых: вставляют тест-полоску в разъем порта полоски измерительного устройства для соединения по меньшей мере двух электродов; инициируют последовательность измерения после нанесения образца.

Способ определения высвобождения аденозинтрифосфорной кислоты из эритроцитов in vitro // 2684642

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для определения высвобождения аденозинтрифосфорной кислоты из эритроцитов in vitro.

Способ скринингового определения высокой вероятности наличия аллергического характера воспаления, ассоциированного с повышенным уровнем в крови интерлейкина-8, при бронхолегочных заболеваниях у детей // 2684406

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для скринингового определения высокой вероятности наличия аллергического характера воспаления при бронхолегочных заболеваниях у детей старше 2 лет с повышенным уровнем в крови интерлейкина-8.

Диагностика и лечение синдрома раздраженного кишечника и воспалительного заболевания кишечника // 2683781

Группа изобретений относится к медицине и предназначена для диагностики и лечения синдрома раздраженного кишечника (СРК). Описаны способы, анализы и системы для диагностики, выбора терапии и лечения СРК на основании уровня антител к винкулину и к CdtB у субъекта.

Способ прогнозирования риска отдалённых фатальных сердечных и цереброваскулярных событий после плановой эндоваскулярной реваскуляризации миокарда // 2683691

Изобретение относится к медицине, кардиологии, оценке индивидуального риска развития отдаленных (более 5 лет после чрескожного коронарного вмешательства, ЧКВ) фатальных сердечных и цереброваскулярных событий.

Способ прогнозирования течения репаративного процесса лапаротомной раны при остром перитоните // 2683312

Изобретение относится к области медицины, а именно к хирургии, и предназначено для прогнозирования течения репаративного процесса лапаротомной раны при остром перитоните.

Способ диагностики хламидийной урогенитальной инфекции у мужчин // 2683024

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской диагностике, и может быть использовано для диагностики хламидийной урогенитальной инфекции у мужчин на основе оценки уровней цитокинов.

Способ количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах // 2686116

Изобретение относится к области медицины, а именно к фармакологии и токсикологии, может быть использовано для количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах. Способ включает экстракцию определяемого вещества ацетонитрилом при кислом значении рН среды с добавлением натрия хлорида с последующим определением его методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с градиентным режимом элюирования с использованием в качестве подвижной фазы смеси 0,5% раствора калия фосфорнокислого однозамещенного, подкисленного до рН 4,0 ортофосфорной кислотой, и метанола при градиенте концентрации последнего от 5 до 75%. 2 пр., 5 ил., 2 табл.

Способ определения резистентности тромбоцитов к антиагрегантным препаратам у пациентов с ишемической болезнью сердца // 2686700

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, клинической лабораторной диагностике и гематологии. Способ определения резистентности к антиагрегантным препаратам у пациентов с ишемической болезнью сердца, принимающих лекарственные средства группы антиагрегантов не менее 6 месяцев, заключается во взятии крови в пробирку с 3,8% цитратом натрия в соотношении 9:1, разделении центрифугированием на плазму и эритроциты с получением богатой и бедной тромбоцитами плазмы, определении индивидуально пациенту значений светопропускания с графической регистрацией в течение 5 мин с постоянным перемешиванием и температурой 37°С, добавлении к суспензии тромбоцитов в соотношении 10:1 индуктора агрегации тромбоцитов коллагена однократно на 10 секунде регистрации агрегации тромбоцитов на лазерном агрегометре в концентрации 2 мкмоль/л, при этом дополнительно вносят к богатой тромбоцитами плазме индуктор коллаген в соотношении 2:1 по 2 мкмоль/л на 1, 2, 3 и 4 минутах исследования и при получении значений агрегации тромбоцитов в диапазоне от 45 до 100% определяют резистентность к антиагрегантным препаратам. 3 пр.

Способ ранней диагностики активной фазы эндокринной офтальмопатии // 2687082

Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии и эндокринологии, и предназначено для ранней диагностики активной фазы эндокринной офтальмопатии (ЭОП). Для ранней диагностики активности ЭОП пациентам определяют в сыворотке крови содержание антител к рецептору тиреотропного гормона (TSAbs - thyroid stimulating antibodies), интерлейкина 17 (IL-17 - interleukin-17), ВВ-изоформы тромбоцитарного фактора роста (PDGF-BB - platelet-derived growth factor - BB) и матриксной металлопротеиназы 13 (ММР-13 - matrix metalloproteinases-13) с использованием иммуноферментного анализа. Рассчитывают значения дискриминантных функций f1 и f2 по формулам:f1=-2,68+0,11×x1+0,19×x2+0,002×x3+0,06×x4f2=-26,67+0,74×x1+0,46×x2+0,007×x3+0,19×x4,где цифровые показатели - константа и коэффициенты регрессии, x1 - уровень TSAbs, x2 - уровень IL-17, x3 - уровень PDGF-BB, x4 - уровень ММР-13. При значении f1<f2 диагностируют активную фазу ЭОП, а при значении f1>f2 - неактивную ЭОП. Использование изобретения позволяет осуществить раннюю диагностику активной фазы ЭОП, когда признаки заболевания еще не достигли клинической манифестации, и определить дальнейшую индивидуальную терапевтическую тактику. 2 табл., 3 пр.

Способ прижизненной дифференциальной диагностики туберкулёза и микобактериозов крупного рогатого скота // 2687553

Изобретение относится к медицине и ветеринарии и касается способа прижизненной дифференциальной диагностики туберкулеза и микобактериозов крупного рогатого скота. Для этого используют индуцированную люминолзависимую хемилюминесценцию, в качестве объекта исследований используют сыворотку от положительно реагирующего на ППД-туберкулин крупного рогатого скота хозяйств с неясной эпизоотической ситуацией. В качестве основного индуктора используют комплексный аллерген из атипичных микобактерий (КАМ), а в качестве дополнительного индуктора используют аллерген туберкулезный рекомбинантный (АТР). Изобретение позволяет ускорить и повысить достоверность прижизненной дифференциальной диагностики туберкулеза и микобактериозов крупного рогатого скота за счет использование аллергенов in vitro, предотвратить необоснованный убой продуктивных животных в хозяйствах различных форм собственности, в том числе фермерских и личных подсобных. 3 табл., 2 пр.

Способ подготовки пробы мочи для определения монометилфталата, моноэтилфталата, монобутилфталата, монобензилфталата, моноэтилгексилфталата методом высокоэффективной жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии // 2687738

Изобретение относится к области аналитической химии. Способ подготовки пробы мочи для определения монофталатов методом ВЭЖХ/масс-спектрометрии включает центрифугирование пробы мочи 10 мин со скоростью 2000 об/мин., затем в пробу вносят концентрированную уксусную кислоту до достижения pH смеси 4,8., далее к 5 см3 подкисленного образца добавляют 0,2 см3 водного раствора фермента β-глюкуронидазы (Helix Pomatia). Полученную смесь инкубируют при температуре +37°С в течение 24 часов, охлаждают и доводят до pH 7, добавляя 40%-ный раствор гидроксида натрия. Смесь центрифугируют 10 мин со скоростью 2000 об/мин. и отбирают верхний слой в количестве 5 см3. Используя этот верхний слой, проводят ТФЭ на картридже Oasis HLB 5сс в два этапа: на первом этапе пропускают через него последовательно 1 см3 метанола и 1 см3 дистиллированной воды, полученные сливы удаляют, наносят на картридж, отобранный после центрифугирования верхний слой жидкости в количестве 5 см3, промывают картридж 1 см3 5%-ным раствором метанола и пропускают через картридж 0,5 см3 ацетонитрила, собирая экстракт. На втором этапе этот же картридж вначале последовательно промывают 1 см3 0,4%-ным раствором натрия гидроокиси, 1 см3 5%-ного раствора метанола и полученный слив удаляют, затем пропускают через указанный картридж 0,5 см3 ацетонитрила, присоединяя полученный при этом экстракт к экстракту, полученному на первом этапе. Объединенный экстракт фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,2 мкм, получая подготовленную для исследования пробу мочи. Изобретение обеспечивает повышение степени экстракции монометилфталата (ММФ) до 100%, моноэтилфталата (МЭФ) до 94%, монобутилфталата (МБФ) - 96%, монобензилфталата (МБзФ) - 92%, моноэтилгексилилфталата (МЭГФ) - 100% с погрешностью извлечения ± 10% и позволяет расширить диапазон измеряемых концентраций монофталатов от 10-4 до 10-1 мг/дм3. 1 ил. , 8 табл.

Способ прогнозирования тяжести геморрагической лихорадки с почечным синдромом // 2688691

Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования тяжести геморрагической лихорадки с почечным синдромом. Для этого пациенту проводят общее и биохимическое исследование крови, определяют: определяют гематокрит, относительное содержание сегментоядерных и палочкоядерных лейкоцитов и моноцитов, концентрацию креатинина и С-реактивного белка. Вычисляют значения функций классификации степеней тяжести ГЛПС по формулам: где KF1 - значение функции классификации легкой формы ГЛПС; KF2 - значение функции классификации среднетяжелой формы ГЛПС; KF3 - значение функции классификации тяжелой формы ГЛПС; x1 - гематокрит, %; х2 - относительное содержание сегментоядерных лейкоцитов, %; х3 - относительное содержание палочкоядерных лейкоцитов, %; x4 - относительное содержание моноцитов, %; x5 - концентрация креатинина, мкмоль/л; x6 - концентрация C-реактивного белка, мг/л, определяют степень тяжести ГЛПС, за которую принимают индекс функции классификации с наибольшим значением. Использование данного способа позволяет прогнозировать тяжесть геморрагической лихорадки с почечным синдромом, что дает возможность оптимизировать лечебную тактику данных больных. 3 пр., 1 табл.

Система измерения энергетических затрат организма в экстремальных условиях // 2688724

Изобретение относится к системам динамического контроля (или мониторинга) газовых сред и устройствам неинвазивного контроля состояния энергетического обмена организма человека в условиях чрезмерных или разнонаправленных физических, психологических, стрессовых нагрузок в течение продолжительного времени. Предлагаемая система отбора проб выдыхаемого воздуха для мониторинга энергетических затрат организма человека предусматривает решение нескольких задач: а) создание системы измерения энергетических затрат организма в экстремальных условиях, не требующей зависимости от энергоисточников, б) динамичность исследований, позволяющая в режиме мониторинга производить отбор проб воздуха через короткие промежутки времени при частой смене непродолжительных видов деятельности в экстремальных условиях; в) доставка множества проб воздуха к единым центрам оценки газового состава и определения энерготрат, находящимся дистанционно на удалении в стационарных и мобильных пунктах измерения; г) низкое сопротивление дыханию (не более 30 мм вод.ст.) и снижение ошибки при оценке легочной вентиляции за счет малоинерционных волюметров и использования двух легких (до 100 г) мешков из плотной ткани объемом 5 л каждый - аналогов дыхательных мешков портативных дыхательных мешков, используемых ранее на ВМФ (ПДУ-1 и ПДУ-2); д) снижение объемных характеристик и массы системы забора проб, позволяющей проводить исследования в малогабаритных автономных объектах и помещениях и снижающей ошибку за счет весовых характеристик; учет всех необходимых поправок и коэффициентов (давление, температура, влажность), оказывающих влияние на конечные величины газообмена и энерготрат; е) возможность проводить мониторинг (многоразовый забор проб) динамики энерготрат, не снимая с испытателя предлагаемую систему и проводя заборы проб воздуха в специальные камеры, что позволяет более объективно отражать или моделировать реальные нагрузки при отдельных видах профессиональной деятельности в экстремальных условиях; ж) возможность комплектации системы из элементов существующих приборов и средств измерения; з) расширение и повышение объективности методической базы. 1 ил.

Способ получения смесей, имитирующих нормальную и патологическую мочу человека, применяемых для обучения студентов глюкозооксидазному методу определения глюкозы в биологических жидкостях // 2688922

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторным методам исследования, и предназначено для обучения студентов глюкозооксидазному методу количественного определения глюкозы в моче с использованием смесей, имитирующих нормальную и патологическую мочу человека. Для этого в качестве смесей, имитирующих мочу, используют натрий-фосфатный буфер (рН 6,0-7,0), подкрашенный 1% раствором титанового желтого до цвета, аналогичного цвету нормальной мочи, без или с добавлением порошка глюкозы (декстрозы) до 0,5-2,0% (28-112 ммоль/л) от объема имитирующей мочу смеси, соответственно. По результатам выполненного глюкозооксидазного метода устанавливают наличие или отсутствие у потенциального пациента глюкозурии. Использование изобретения обеспечивает 100%-ную точность определения уровня глюкозы в имитаторе мочи, позволяет многократно и самостоятельно выполнить обучающие методики за счет их безопасности, простоты, воспроизводимости, однозначности интерпретации, низкой стоимости для освоения и закрепления умений и навыков по количественному определению глюкозы в моче глюкозооксидазным методом. 1 табл., 1 пр.

Двухкамерная аналитическая тест-полоска // 2689154

Группа изобретений относится к области измерения аналитов. Аналитическая тест-полоска содержит профилированный определяющий слой, определяющий две разделенные по текучей среде ячейки для пробы, причем каждая ячейка для пробы имеет порт на периметре аналитической тест-полоски и выполнена с возможностью приема соответствующей пробы текучей среды через соответствующий порт; общий электрод, расположенный на определяющем слое и в электрическом соединении с каждой из ячеек для пробы; и два электрода ячеек, каждый электрод в электрическом соединении с соответствующей одной из ячеек для пробы. При этом определяющий слой, общий электрод и электроды ячеек расположены с открытием участка поверхности общего электрода и соответствующих участков поверхности электродов ячеек. Также раскрывается способ анализа пробы текучей среды и система для анализа пробы текучей среды. Группа изобретений обеспечивает надежное нанесение текучей среды в порты тест-полоски. 3 н. и 17 з.п. ф-лы, 5 ил.