Способ коррекции стрептозотоцин-индуцированного сахарного диабета у крыс с использованием лекарственного средства на основе амида гетероциклических кислот



Владельцы патента RU 2687979:

федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (НИУ "БелГУ") (RU)

Изобретение относится к медицине и предназначено для коррекции сахарного диабета 2 типа в эксперименте. Проводят моделирование экспериментального сахарного диабета типа 2 путем внутрибрюшинного однократного введения стрептозотоцина в дозе 65 мг/кг с предварительным, за 15 мин, однократным внутрибрюшинным введением никотинамида в дозе 230 мг/кг, затем проводят коррекцию патологии путем внутрижелудочного введения амида 4-(4,5-дигидро-1Н-имидазол-2-ил)-1-метил-5-фенилпирролидин-2-карбоновой кислоты в дозе 8,6 мг/кг, начиная с 7 дня по 21 день включительно после введения стрептозотоцина. Способ позволяет значительно снижать концентрацию глюкозы в крови крыс и уменьшать признаки повреждения поджелудочной железы по сравнению с терапией диакамфом. 8 табл., 1 ил., 1 пр.

 

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии.

По известным литературным источникам – сахарный диабет (СД) является одной из актуальных медико-социальных проблем современного общества. Рост заболеваемости позволил говорить о глобальной эпидемии СД [Javeed N, Matveyenko AV. Circadian Etiology of Type 2 Diabetes Mellitus. Physiology (Bethesda). 2018;33(2):138-150. DOI: 10.1152/physiol.00003.2018; Schmidt AM. Highlighting Diabetes Mellitus: The Epidemic Continues. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2018;38(1):e1-e8. DOI: 10.1161/ATVBAHA.117.310221]. Широкая распространенность СД и многообразие патогенетических вариантов данного заболевания обусловливают актуальность поиска и разработки новых пероральных противодиабетических препаратов.

Известны химические вещества органической природы, потенцирующие имидазолиновые рецепторы и повышающие чувствительность к инсулину [Su CH, Liu IM, Chung HH, Cheng JT. Activation of I2-imidazoline receptors by agmatine improved insulin sensitivity through two mechanisms in type-2 diabetic rats. Neurosci Lett. 2009;457(3):125-128] и восстанавливающие инсулинпродуцирующую функцию [Efendic S, Efanov AM, Berggren PO, Zaitsev SV. Two generations of insulinotropic imidazoline compounds. Diabetes. 2002;51 Suppl 3:S448-454].

В патенте AU 2004/200272 раскрываются соединения общей формулы 1, 2 и 3 с бис-арильным молекулярным каркасом, к которому ковалентно присоединены амидиновые функциональные группы, для которых постулируется способность связываться с имидазолиновыми рецепторами I и II типов in vitro и in vivo. Указанные соединения, в частности с общей структурной формулой 1, являются структурными аналогами пентамидина (1, R1=R2=R3=H; n=5), антимикробного лекарственного препарата.

Патент US 6,057,317 указывает на возможность применения соединений общей формулы 4 при гипертонических состояниях, вызванных различными патологиями, в том числе диабетом и ожирением. Для соединений 4 методом вытеснения тритий-меченных лигандов установлено связывание с имидазолиновыми рецепторами I и II типов в наномолярном диапазоне концентраций.

В патенте US 2011/0118289 методом конкурентного связывания с радиоактивно-меченным лигандом установлено взаимодействие соединений общей формулы 6 с имидазолиновыми рецепторами II типа. Для соединений 6 на животных моделях показаны антидепрессантная и противоболевая активности. Эти же соединения и указанная для них активность запатентованы в РФ (патент RU № 2472508).

В патенте WO 2016/105449 широкий круг лигандов имидазолиновых рецепторов I типа заявляется в качестве анальгетиков при болевых синдромах различной этиологии. Большая часть применяемых соединений относится к имидазолинам различного строения, в том числе к известным из научных информационных источников агонистам имидазолиновых рецепторов I и II типов.

Однако в приведенных патентных источниках нет данных об использовании агонистов имидазолиновых рецепторов I и II типов для лечения СД 2 типа, относящихся по химической структуре к амидам гетероциклических кислот.

Известно соединение (±)-цис-3-(2'-бензимидазолил)-1,2,2-триметилциклопентанкарбоновая кислота, проявляющая сахароснижающее и антидиабетогенное действие (RU № 2205826, опубл. 10.06.2003). Данное соединение проявляет высокую сахароснижающую и антидиабетогенную активность и может быть использовано как сахароснижающее средство при манифестных формах СД 1 и 2 типа, а также как антидиабетогенное средство, которое предупреждает и/или ослабляет развитие инсулиновой недостаточности на ранних стадиях заболевания.

Действующим веществом препарата Диакамф (Diacamph) является (±)-цис-3-(2'-бензимидазолил)-1,2,2-триметилциклопентанкарбоновая кислота (http://nuph.edu.ua/ru/diakamf-3/). Это оригинальное антидиабетическое средство для лечения патологических состояний, связанных с инсулинорезистентностью (СД и его сосудистые осложнения и др.). Относится к агонистам I типа (центральных) и II типа (периферических) имидазолиновых рецепторов.

Недостатком данного решения является низкая терапевтическая эффективность препарата.

Задачей предлагаемого изобретения является создание более эффективного способа коррекции стрептозотоцин-индуцированного СД у крыс с использованием лекарственного средства на основе амида гетероциклических кислот.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является эффективный способ коррекции стрептозотоцин-индуцированного СД у крыс с использованием лекарственного средства на основе амида гетероциклических кислот, подтверждаемый более выраженным снижением концентрации глюкозы в крови крыс по сравнению с терапией диакамфом и статистически значимым улучшением показателей морфометрического и иммуногистохимического исследования поджелудочной железы, превосходящим значения в группе с терапией диакамфом.

Поставленная задача достигается тем, что предложен способ коррекции стрептозотоцин-индуцированного сахарного диабета у крыс с использованием лекарственного средства на основе амида гетероциклических кислот, включающий моделирование экспериментального сахарного диабета типа 2 путем внутрибрюшинного однократного введения стрептозотоцина в дозе 65 мг/кг с предварительным, за 15 мин, однократным внутрибрюшинным введением никотинамида в дозе 230 мг/кг, затем коррекцию патологии путем внутрижелудочного введения крысам препарата BSD24 в дозе 8,6 мг/кг, начиная с 7 дня по 21 день включительно после введения стрептозотоцина.

Основным преимуществом предлагаемого способа является то, что введение лекарственного средства на основе амида гетероциклических кислот под лабораторным шифром BSD24 в дозе 8,6 мг/кг приводит к более выраженному снижению концентрации глюкозы в крови крыс на 7-е и 21-е сутки после введения стрептозотоцина по сравнению с терапией диакамфом в дозе 8,6 мг/кг (р<0,05). Также установлено, что при внутрижелудочном введении BSD24 в дозе 8,6 мг/кг выявлено статистически значимое улучшение показателей морфометрического и иммуногистохимического исследования поджелудочной железы, превосходящее значения в группе с терапией диакамфом в дозе 8,6 мг/кг.

В связи с вышесказанным следует отметить актуальность исследования нового лекарственного средства на основе амида гетероциклических кислот под лабораторным шифром BSD24 (табл. 1, 2), а именно амида 4-(4,5-дигидро-1H-имидазол-2-ил)-1-метил-5-фенилпирролидин-2-карбоновой кислоты, С15Н20N4O, для коррекции стрептозотоцин-индуцированного СД в эксперименте, являющегося агонистом имидазолиновых рецепторов I и II типа.

Способ получения амида 4-(4,5-дигидро-1H-имидазол-2-ил)-1-метил-5-фенилпирролидин-2-карбоновой кислоты.

Химическая схема синтеза амида 4-(4,5-дигидро-1H-имидазол-2-ил)-1-метил-5-фенилпирролидин-2-карбоновой кислоты представлена на схеме 1 (Фиг.1).

Лабораторная технология производства фармацевтической субстанции: в технологический прибор, состоящий из трёхгорлой колбы объёмом 3000 мл, термометра, капельной воронки, магнитного якоря и коаксиально размещённой магнитной мешалкой последовательно при перемешивании загружают сухой дихлорметан, гидрохлорид метилглицината, безводный сульфат магния. При перемешивании добавляют по каплям через капельную воронку триэтиламин, не допуская увеличения температуры реакционной смеси выше +20 °С. При перемешивании добавляют по каплям через капельную воронку бензальдегид. Перемешивают реакционную смесь в течение 24 ч. Добавляют 500 мл воды, отделяют органическую фазу. Органическую фазу промывают насыщенным раствором гидрокарбоната натрия, водой, насыщенным раствором хлорида натрия. Высушивают органическую фазу сульфатом натрия и концентрируют в вакууме на ротационном испарителе. Получают метил-(Е)-2-(бензилиденамино)ацетат.

Далее в технологический прибор, состоящий из трёхгорлой колбы объёмом 2000 мл, термометра, капельной воронки, магнитного якоря и коаксиально размещённой магнитной мешалкой последовательно при перемешивании загружают тетрагидрофуран, метил-4-карбамоил-5-фенилпирролидин-2-карбоксилат из ТП-1, охлаждают до минус 5 °С. При перемешивании добавляют по каплям через капельную воронку раствор бромида лития в тетрагидрофуране, не допуская превышения температуры реакционной смеси выше +5 °С. При перемешивании добавляют по каплям через капельную воронку в реакционную смесь триэтиламин, не допуская превышения температуры реакционной смеси выше +10 °С. Перемешивают реакционную смесь в течение 24 ч. Промывают реакционную смесь насыщенным раствором хлорида аммония. Экстрагируют реакционную смесь трижды диэтиловым эфиром. Высушивают органическую фазу сульфатом натрия и концентрируют в вакууме на ротационном испарителе. Остаток хроматографируют на силикагеле в системе петролейный эфир-этилацетат (2:1). Получают метил-4-карбамоил-5-фенилпирролидин-2-карбоксилат.

На следующем этапе в технологический прибор, состоящий из трёхгорлой колбы объёмом 2000 мл, термометра, капельной воронки, магнитного якоря и коаксиально размещённой магнитной мешалкой последовательно при перемешивании загружают сухой диметилформамид, карбонат калия, метил-4-карбамоил-5-фенилпирролидин-2-карбоксилат из ТП-2. При перемешивании добавляют по каплям через капельную воронку метилйодид, не допуская увеличения температуры реакционной смеси выше +20°С. Перемешивают реакционную смесь в течение 48 ч. Полученную суспензию фильтруют, фильтрат концентрируют в вакууме на ротационном испарителе. Остаток хроматографируют на силикагеле в системе петролейный эфир-этилацетат (5:1). Получают метил-4-карбамоил-1-метил-5-фенилпирролидин-2-карбоксилат.

Далее в технологический прибор, состоящий из трёхгорлой колбы объёмом 1000 мл, термометра, капельной воронки, магнитного якоря и коаксиально размещённой магнитной мешалкой последовательно при перемешивании загружают этиловый спирт, метил-4-(этокси(имино)метил)-1-метил-5-фенилпирролидин-2-карбоксилат из ТП-4. При перемешивании добавляют по каплям через капельную воронку этилендиамин, не допуская превышения температуры реакционной смеси выше +25°С. Перемешивают реакционную смесь в течение 48 ч. Добавляют в реакционную смесь насыщенный раствор хлорида аммония. Экстрагируют реакционную смесь трижды диэтиловым эфиром. Высушивают органическую фазу сульфатом натрия и концентрируют в вакууме на ротационном испарителе. Остаток хроматографируют на силикагеле в системе петролейный эфир-этилацетат-триэтиламин (2:1:0.01). Получают метил-4-(4,5-дигидро-1Н-имидазол-2-ил)-1-метил-5-фенилпирролидин-2-карбоксилат.

На конечном этапе в технологический прибор, состоящий из трёхгорлой колбы объёмом 2000 мл, термометра, капельной воронки, магнитного якоря и коаксиально размещённой магнитной мешалкой последовательно при перемешивании загружают метиловый спирт, метил-4-(4,5-дигидро-1Н-имидазол-2-ил)-1-метил-5-фенилпирролидин-2-карбоксилат из ТП-5. При перемешивании пропускают газообразный аммиак из баллона, не допуская превышения температуры реакционной смеси выше +25°С, в течение 12 часов. Перемешивают реакционную смесь в течение 48 ч. В течение 2 часов пропускают в реакционную смесь аргон из баллона. Концентрируют реакционную смесь в вакууме на ротационном испарителе. Остаток хроматографируют на силикагеле в системе петролейный эфир-этилацетат-триэтиламин (3:1:0.01). Получают амид 4-(4,5-дигидро-1Н-имидазол-2-ил)-1-метил-5-фенилпирролидин-2-карбоновой кислоты.

Субстанция представляет собой кристаллический порошок белого или почти белого цвета. Испытание проводят визуально в соответствии ГФ XIII, ОФС.1.1.0006.15.

Порошок практически нерастворим в воде, растворим в метаноле, тетрагидрофуране (ГФ XIII ОФС.1.2.1.0005.15). Раствор 0,75 г субстанции в 25 мл тетрагидрофурана должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I. (ГФ XIII ОФС.1.2.1.0007.15).

Подлинность – ВЭЖХ: Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора, полученной при количественном определении, должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца амида 4-(4,5-дигидро-1H-имидазол-2-ил)-1-метил-5-фенилпирролидин-2-карбоновой кислоты.

Таблица 1

СПЕЦИФИКАЦИЯ

Таблетки BSD24, покрытые пленочной оболочкой, 50 мг

ООО «НЦ Белфарма», Российская Федерация

Показатели Методы Нормы
1 2 3
Описание Визуальный
ГФ XIII		 Круглые двояковыпуклые таблетки, покрытые пленочной оболочкой светло-желтого цвета. Должны соответствовать требованиям ГФ XIII, ОФС.1.4.1.0015.15.
Подлинность ВЭЖХ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора, полученной при количественном определении, должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца BSD24
Однородность
массы		 Гравиметрический
ГФ XIII		 В соответствии с требованиями
Тальк, аэросил гравиметрический
ГФ XIII		 Не более 3,0 % (суммарно)
Растворение ГФ XIII,
ОФС.1.4.2.0014.15,
ВЭЖХ		 Через 45 мин в раствор должно перейти не менее 70 % (Q) BSD24
Посторонние примеси ВЭЖХ Любая единичная неидентифицированная примесь – не более 0,5 %;
сумма примесей – не более 1,5 %.
Однородность дозирования: ГФ XIII, способ 1, ВЭЖХ Отклонения в однородности дозирования должны соответствовать требованиями ОФС.1.4.2.0008.15
Микробиологическая чистота ГФ XIII Категория 3А
Количественное определение ВЭЖХ От 47,5 до 52,5
Маркировка В соответствии с НД.
Хранение При температуре не выше 25 ºС
Срок годности 2 года

Таблица 2

Состав на одну таблетку

АФС – BSD24 (Проект НД) 50,00 мг
Лактоза моногидрат (USP) 65,00 мг
Крахмал картофельный (ГОСТ 7699-78, сорт «экстра» или Eur.Ph. или USP) 5,00 мг
Целлюлоза микрокристаллическая (USP или Eur.Ph.) 20,00 мг
Поливинилпирролидон низкомолекулярный (Eur.Ph. или USP) 0,7 мг
Коллидон К-25 (Eur.Ph. или USP) 0,40 мг
Магния стеарат (USP или ВР или Eur.Ph.) 1,60 мг
Аэросил (Eur.Ph.) 1,00 мг
Средняя масса ядра 143,70 мг
Состав оболочки
Гидроксипропилметилцеллюлоза (USP или Eur.Ph.) 3,23 мг
Твин-80 (USP) 0,70 мг
Титана диоксид (USP или Eur.Ph.) 1,05 мг
Тальк (ТУ 9318-013-21250238-99 или Eur.Ph или USP) 1,08 мг
Сиковит желто-оранжевый 85 Е110 (ТУ 2463-004-47929464-98) 0,005 мг
Средняя масса оболочки 6,07 мг
Средняя масса таблетки 149,77 мг

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ

Исследование выполнено на 40 крысах линии Wistar массой 200±20 г. Негенетическая форма экспериментального СД типа 2 воспроизводилась по методике Islam S., Choi H. (2007). СД моделируется стрептозотоцином («Sigma», США) (внутрибрюшинно – 65 мг/кг) с предварительным (за 15 мин) введением никотинамида (внутрибрюшинно – 230 мг/кг). Количественное определение глюкозы в крови и в моче проводилось на 3, 7, 21 сутки после введения стрептозотоцина.

На 22-е сутки после введения стрептозотоцина животных выводили из эксперимента путем передозировки этилового эфира. Фиксацию ткани поджелудочной железы, почек и печени осуществляли в 10% растворе нейтрального забуференного формалина в течение 24 ч. Срезы для стандартного гистологического исследования окрашивали гематоксилином и эозином, а также по Ван Гизон и Маллори с использованием стандартных наборов.

После обзорного гистологического исследования в каждом блоке выбирали стандартные репрезентативные участки площадью 5х5 мм2, которые вырезали и перезаливали в тканевые мультиблоки по 10-15 кусочков из разных групп эксперимента. С полученных стандартных мультиблоков изготавливали срезы толщиной 4 мкм для иммуногистохимического исследования. Таким образом, на одном стекле одновременно выполняли иммуногистохимические реакции на 10-15 образцах в идентичных условиях. Демаскировку антигенов выполняли по стандартному протоколу высокотемпературной демаскировки в цитратном буфере с рН=7,0 или трис-ЭДТА буфере с рН=9,0 в зависимости от протокола исследования (табл. 3). Для выявления реакции применяются полимерные системы детекции Ultra Vision (ThermoScientific, Великобритания) и Histofine (Nichirei Biosciences, Япония) с хромогеном – диаминобензидином. Характеристики использованных антител в соответствии с задачами исследования и особенности протоколов представлены в таблице 3.

Иммуногистохимическое исследование выполнено в лаборатории научно-образовательного центра «Прикладной иммуноморфологии и цитогенетики» НИУ БелГУ. Для типирования А- и В-клеток островков использовали первичные антитела к инсулину и глюкагону, для изучения апоптоза и пролиферативной активности - первичные антитела к про- и антиапоптогенным белкам.

Таблица 3

Маркировка антител для проведения исследования фармакологической активности препарата BSD24

Антитела Клон Фирма
Инсулин Поликлональные Spring Bioscience
клон Ab-6 (INS04 + INS05) Spring Bioscience
Глюкагон Поликлональные Spring Bioscience
Каспаза-3 JHM62 Novocastra, Великобритания
Rb-1197-P0 NeoMarkers, США
TRAIL (апоптоз индуцирующий лиганд фактора некроза опухоли) 27B12 CellMarque
p53 (Pab 240) MS-104-P0 CellMarque
PCNA Поликлональные Dako Cytomation, Дания
(PC10) MS-106-P0 NeoMarkers, США
Ki-67 (ядерный антиген пролиферирующих клеток) MIB-1 Dako Cytomation, Дания
MM1 Novocastra, Великобритания

Основная часть морфологического исследования выполнена после создания электронной галереи изображений с помощью полуавтоматического сканера микропрепаратов Mirax Desk (Carl Zeiss Microimaging GMbH, Германия), что позволило полностью стандартизовать режимы морфометрии исследования. На компьютерных изображениях микропрепаратов определяли характер распределения иммуногистохимических реакций, определяли процентное соотношение площади, занимаемой в-инсулоцитами, к общей площади островка, которая составляет 100%, объемную долю (ОД, %) островков по отношению к экзокринной части железы, площадь островков (мкм2), а также размеры ядер инсулоцитов (мкм2) и их количество (% от общего количества клеток панкреатических островков).

С помощью программы для просмотра сканированных изображений «Panno-ramicViewer 1.15» производились линейные измерения. Определение площадей иммунореактивного вещества проводили с использованием программы для анализа изображений WCIF ImageJ (США) после преобразования изображений с выделением зон реакций по типу «компьютерного скелетирования».

Количественные данные регистрировали в электронных таблицах MS Excel, средствами которой проведена статистическая обработка после определения характера распределения признаков с применением параметрических (критерий t Стьюдента) и непараметрических (критерий Пирсона – χ2 и Фишера), критериев сравнения средних.

Животных разделяли на 4 группы:

1 группа (10 животных) – интактные животные;

2 группа (10 животных) – стрептозотоцин (внутрибрюшинно – 65 мг/кг) + никотинамид (внутрибрюшинно – 230 мг/кг);

3 группа (10 животных) – животным, начиная с 7 дня по 21 день включительно после введения стрептозотоцина, вводили внутрижелудочно исследуемый препарат BSD24 в дозе 8,6 мг/кг;

4 группа (10 животных) – животным, начиная с 7 дня по 21 день включительно после введения стрептозотоцина, вводили внутрижелудочно препарат диакамф в дозе 8,6 мг/кг.

ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ

Уровень глюкозы в крови у крыс с моделированием СД на 3 день после введения стрептозотоцина и никотинамида как без терапии, так и с введением препаратов BSD24 и диакамфа достоверно превосходил таковой у интактных животных (табл. 5). В течение последующих дней наблюдений количество сахара в крови крыс достигало максимума в группе с моделью СД на 7 сутки и далее после введения стрептозотоцина. В группе животных, получавших BSD24 в дозе 8,6 мг/кг уровень сахара в крови достоверно не отличался от интактных животных (табл. 6, 7).

Таблица 4

Концентрация глюкозы в крови экспериментальных животных (n=10, ммоль/л). Исходные значения.

Интактные Стрептозотоцин, 65 мг/кг + никотинамид, 230 мг/кг (контроль) Диакамф, 8,6 мг/кг BSD24, 8,6 мг/кг
M 6,19 6,32 6,30 6,31
m 0,35 0,32 0,26 0,26

Примечание: здесь и везде далее * при р<0,05 по сравнению с интактными; ** при р<0,05 по сравнению с группой контроля

Таблица 5

Концентрация глюкозы в крови экспериментальных животных (n=10, ммоль/л). 3 день после введения стрептозотоцина.

Интактные Стрептозотоцин, 65 мг/кг + никотинамид, 230 мг/кг (контроль) Диакамф, 8,6 мг/кг BSD24, 8,6 мг/кг
M 6,39 11,36* 9,12* 9,36*
m 0,28 0,84 0,23 0,59

Таблица 6

Концентрация глюкозы в крови экспериментальных животных (n=10, ммоль/л). 7 день после введения стрептозотоцина.

Интактные Стрептозотоцин, 65 мг/кг + никотинамид, 230 мг/кг (контроль) Диакамф, 8,6 мг/кг BSD24, 8,6 мг/кг
M 6,57 13,97* 9,60* 7,39**
m 0,16 0,80 0,25 0,49

Таблица 7

Концентрация глюкозы в крови экспериментальных животных (n=10, ммоль/л). 21 день после введения стрептозотоцина.

Интактные Стрептозотоцин, 65 мг/кг + никотинамид, 230 мг/кг (контроль) Диакамф, 8,6 мг/кг BSD24, 8,6 мг/кг
M 7,20 14,12* 9,17* 8,01**
m 0,19 0,75 0,31 0,38

При стрептозотоцин-индуцированном СД в поджелудочной железе отмечаются выраженные деструктивные и воспалительные изменения островков Лангерганса, что сопровождается статистически достоверным уменьшением их размера, объемной доли, а также количества и площади инсулин-позитивных клеток. У неповрежденных в-эндокриноцитов определяется выраженная гипертрофия ядер (табл. 8)

Таблица 8

Данные морфологического и иммуногистохимического исследования в группах экспериментальных животных (n=10)

Интактные Контроль Диакамф, 8,6 мг/кг BSD24, 8,6 мг/кг
Площадь островков, мкм2 10712,0± 367,6 2190,0± 124,7* 7464,0± 141,5** 9015,0± 693,8**
ОД островков, % 26,1 ± 1,6 12,0 ± 1,2* 17, ± 0,9** 23, ± 1,3**
Количество
в-клеток, %		 78,0 ± 1,9 10,0 ± 0,8* 59, ± 4,7** 68, ± 3,9**
Площадь
в-клеток, %		 70,0 ± 3,3 20,0 ± 1,4* 36,4 ± 4,1* 46,0 ± 4,1**
Размер ядер
в-клеток, мкм2		 25,0 ± 1,07 28,9 ± 1,3* 26, ± 0,7** 27, ± 1,1**

При внутрижелудочном введении таблеток, покрытых пленочной оболочкой, содержащих 50 мг BSD24 в дозе 8,6 мг/кг установлено статистически значимое улучшение показателей морфометрического и иммуногистохимического исследования поджелудочной железы и исследуемые показатели статистически значимо не отличались от таковых в интактной группе животных (табл. 8).

Установлено, что лекарственное средство на основе амида 4-(4,5-дигидро-1H-имидазол-2-ил)-1-метил-5-фенилпирролидин-2-карбоновой кислоты под лабораторным шифром BSD24 в дозе 8,6 мг/кг обладает более выраженной терапевтической эффективностью на модели стрептозотоцин-индуцированного сахарного диабета у крыс по сравнению с препаратом диакамф в дозе 8,6 мг/кг. Это выражается в более выраженном снижении концентрации глюкозы в крови крыс на 7-е (на 23%) и 21-е (на 13%) сутки после введения стрептозотоцина по сравнению с терапией диакамфом (р<0,05). Также выявлено статистически значимое улучшение показателей морфометрического и иммуногистохимического исследования поджелудочной железы в группе с коррекцией BSD24, превосходящее значения в группе с терапией диакамфом.

Способ коррекции стрептозотоцин-индуцированного сахарного диабета у крыс с использованием лекарственного средства на основе амида гетероциклических кислот, включающий моделирование экспериментального сахарного диабета типа 2 путем внутрибрюшинного однократного введения стрептозотоцина в дозе 65 мг/кг с предварительным, за 15 мин, однократным внутрибрюшинным введением никотинамида в дозе 230 мг/кг, затем проводят коррекцию патологии путем внутрижелудочного введения амида 4-(4,5-дигидро-1Н-имидазол-2-ил)-1-метил-5-фенилпирролидин-2-карбоновой кислоты в дозе 8,6 мг/кг, начиная с 7 дня по 21 день включительно после введения стрептозотоцина.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для создания модели лечения асептического аминобисфосфонатного остеонекроза нижней челюсти при исследовании восстановительных процессов в нижнечелюстных костях.

Группа изобретений относится к средствам обучения в медицине. Система содержит тренажер, включающий анатомическую модель части тела или всего тела человека, выполненную в виде многослойного анатомического муляжа, инструмент для тестирования, выполненный с возможностью проникновения сквозь слои муляжа и снабженный иглой и датчиком положения.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть применимо для экспериментального моделирования истинной кисты поджелудочной железы. Выделяют 12-перстную кишку с поджелудочной железой.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, нейрохирургии, и может быть использовано для моделирования дегенеративно-дистрофических изменений межпозвонкового диска.

Группа изобретений относится к области медицины и раскрывает способ создания персонифицированной модели анатомической трубчатой структуры на основе данных медицинского исследования пациента.

Изобретение относится к анатомии человека, может быть применено в патологической анатомии и сравнительной анатомии человека и животных. Препарат сердца с восходящей частью аорты извлекают из трупа, промывают проточной водой, вскрывают левый желудочек.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к оперативной травматологии и имплантологии, и может быть использовано для изучения интеграции остеотропных материалов, их участия в репаративных процессах костной ткани.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной медицине и ветеринарии. После предоперационной подготовки пальпаторно определяют мечевидный отросток и край правой реберной дуги.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для отработки практических навыков по диагностике нарушений внутренних органов путем выслушивания звуковых феноменов легких, сердца, желудка, кишечника и сосудов.
Изобретение относится к области медицины, а именно к судебной медицине. Для выделения органного комплекса промежностной области человека проводят срединный разрез передней брюшной стенки, обнажение лобкового симфиза и лонных костей, распиливание нижних и верхних ветвей лонных костей.

Настоящее изобретение относится к энантиомеру [-] формулы [-]НООС-НОСН-(СН2)6-(СН=СН-СН2)2-(СН2)3-СН3 или его фармацевтически приемлемым солям. Изобретение также относится к фармацевтической композиции на основе указанного энантиомера и к способу лечения патологий, общая этиология которых представляет собой аномально низкий уровень сфингомиелина, аномально низкий уровень глиофибриллярного кислого белка (ГФКБ), аномально высокий уровень дигидрофолатредуктазы (ДГФР).

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к аналогам пептида INGAP-PP, и может быть использовано в медицине для лечения ослабленной функции поджелудочной железы, метаболического заболевания, для содействия нейропротекции и регенерации нервов, для стимуляции регенерации печени и для ингибирования воспаления.

Изобретение относится к 4-[(1S)-1-({[4-бром-1-(изохинолин-3-илметил)-3-метил-1H-пиразол-5-ил]карбонил}амино)этил]бензойной кислоте или ее фармацевтически приемлемой соли, предпочтительно к метансульфонатной соли и наиболее предпочтительно к кристаллической метансульфонатной соли указанного выше соединения.

Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии, и касается лечения диабета. Для этого вводят эффективное количество О-пара-толуоил-β-(морфолин-1-ил)пропиоамидоксима.

Изобретение относится к биарильному производному, представленному химической формулой 1, или к его фармацевтически приемлемой соли или изомеру, где A и B независимо обозначают C6-C10арил или 5-12-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S; D и E могут независимо отсутствовать или независимо обозначают C, CH, CH2, N, NH, O или S; R1 и R2 могут независимо отсутствовать или независимо обозначают водород, C1-C6алкил, C3-C6циклоалкил, 3-6-членный гетероциклоалкил, C1-C6алкил-C3-C6циклоалкил, C3-C6циклоалкил-C1-C6алкил, галоген-C1-C6алкил, C1-C6алкокси, C1-C6алкокси-C1-C6алкил, C1-C6алкокси-фенил, C3-C6циклоалкокси, C3-C6циклоалкил-C1-C6алкокси, фенил, C1-C6алкил-фенил, фенил-C1-C6алкил, галоген-фенил, пиридинил, C1-C6алкил-пиридинил или галоген-C1-C6алкил-фенил, где гетероциклоалкил содержит по меньшей мере один гетероатом, выбранный из O и S; R1 и R2 могут быть связаны друг с другом или с D и/или E с образованием 5-15-членного гетероцикла, содержащего 1-3 гетероатома, выбранных из N и O, конденсированного с A; где указанный гетероцикл необязательно замещен C1-C6алкилом, галогеном, C1-C6алкоксикарбонилом, C3-C6циклоалкил-C1-C6алкилом, галоген-фенилом или C1-C6алкил-фенилом; и когда D и E обозначают C, CH, S или N, R1 и R2 могут обозначать два или три C1-C6алкила, оксо, C3-C6циклоалкила или C1-C6алкокси, которые могут быть одинаковыми или разными; R3 и R4 независимо обозначают водород, галоген, C1-C6алкил, C3-C6циклоалкил, C1-C6алкокси, нитрил, оксо, C1-C6алкиламин или C3-C6циклоалкиламин; m и n независимо обозначают целое число от 0 до 2; G обозначает -(CR5R6)p-J-(CR5R6)q, причем J обозначает CH2, O, N, NH, S или двойную связь; R5 и R6 независимо обозначают водород, галоген или C1-C6алкил, или могут быть связаны друг с другом с образованием C3-C6циклоалкила, и когда J обозначает N, каждый из R5 и R6 в двух (CR5R6) может быть связан с образованием 5-6-членного гетероарила или 5-6-членного гетероциклоалкила, содержащих 1 или 2 атома N, или может быть замещен C1-C6алкилом; и p и q независимо обозначают целое число от 0 до 4; и R7 обозначает группу -COOH или ее изостер, выбранный из группы, состоящей из изоксазолола, пиразолола, изотиазолола, тиадиазолидинона, тиазолидиндиона, пиридинола, диоксотиадиазолидинона, тетразола, триазола, сульфонамида, ацетамида, нитрила, гидроксиацетамидина, оксадиазолона и оксадиазолтиона.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к гетероциклическому соединению формулы II или IV, к его рацемату, энантиомеру, диастереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли, где М представляет собой Н или ион Na; U представляет собой , или ; X1 представляет собой СН, Y представляет собой; каждый из X7 и X8 независимо представляет собой СН или S; каждый из R1 и R2 независимо представляет собой Н, C1-4 алкил; или R1, R2 вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют С3-6 циклоалкил; при этом алкил может быть дополнительно замещен 3 заместителями D; R3 представляет собой Н или галоген; R4 представляет собой С6-10 арил или ; при этом арил или замещен 1-2 заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена и CN; каждый из R5 и R6 независимо представляет собой Н, ОН или C1-4 алкил; n равняется 0 или 1; p равняется 1; или производное с сочлененными кольцами, которое выбрано из соединений, указанных в п.1 формулы изобретения.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к применению популяции инкапсулированных панкреатических эндокринных клеток-предшественников в производстве лекарственного средства для снижения уровня глюкозы в крови у пациента, где панкреатические эндокринные клетки-предшественники дифференцируются in vitro из клеток, экспрессирующих маркеры, характерные для линии поджелудочной энтодермы в среде с добавлением фактора, способного ингибировать ВМР, и ингибитора киназы TGF-бета рецептора I, и где панкреатические эндокринные клетки-предшественники экспрессируют NGN3, NKX6.1, NeuroD, ISL1, PDX1, PAX4, NKX2.2, PAX6 или ARX.

Группа изобретений относится к медицине и касается фармацевтической комбинации для лечения пациента с диабетом 1 или 2 типа, включающей (a) Gly(A21)-Arg(B31)-Arg(B32) человеческий инсулин или/и его фармацевтически переносимую соль в концентрации от 60 до 6000 нмoль/мл, и (b) desPro36Exendin-4(1-39)-Lys6NH2 или/и его фармацевтически переносимую соль в концентрации от 10 мкг/мл до 20 мг/мл.

Изобретение относится к производным индазола, имеющим структуру формулы I, или к его фармацевтически приемлемым солям, в которой R1 и R2 имеют значения, указанные в формуле изобретения.

Описанное изобретение относится к области биохимии. Описана группа изобретений, включающая антитело, специфически связывающееся с рецептором глюкагоноподобного пептида 1 (GLP-1R)(варианты), слитый белок GLP-1, полинуклеотид, кодирующий вышеуказанный слитый белок GLP-1, вектор экспрессии, содержащий полинуклеотид, клетку-хозяина для получения слитого белка GLP-1, содержащую вектор, фармацевтическую композицию для предотвращения или лечения инсулиннезависимого сахарного диабета у субъекта, содержащая эффективное количество вышеуказанного антитела или слитого белка GLP-1, способ предотвращения или лечения инсулиннезависимого сахарного диабета, способ предотвращения или лечения ожирения у субъекта, способ предотвращения или лечения избыточного веса у субъекта, способ предотвращения или лечения заболевания, чувствительного к стимуляции GLP-1R у субъекта, где вышеуказанные способы включают введение субъекту вышеуказанного антитела или слитого белка GLP-1 или фармацевтической композиции.

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, и может использовано для лечения гнойных ран. Для этого в I фазе раневую поверхность покрывают повязкой «Аквасель Ag повязка Гидрофайбер» и «Аквасель Ag Фоум повязка Гидрофайбер» с антимикробными, абсорбционными свойствами, а участки раны во II или III фазе покрывают гидроколлоидными повязками «Грануфлекс».
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2018-03-19 2019-05-17T08:10:20
Наверх