Способы лечения бесплодия

Авторы патента:

РУМАН Джейн (US)

АРК САЭС Джоан Карлос (DK)

A61P15/08 - для лечения расстройств половых желез или увеличения фертильности, например стимуляторы овуляции или сперматогенеза

A61K38/24 - фолликулостимулирующий гормон (FSH); хорионные гонадотропины, например HCG, лютеинизированный гормон (LH); тироидостимулирующий гормон (TSH)

Владельцы патента RU 2723098:

Ферринг Б.В. (NL)

Группа изобретений относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использована для лечения бесплодия у пациента. Для стимуляции развития эуплоидных бластоцист и для будущего переноса бластоцист способ включает идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН) больше или равный 4,7 нг/мл и число антральных фолликулов (AFC) больше или равное 10 в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Проводят введение дозы от 75 до 300 IU (международная единица) или эквивалентной дозы hMG (человеческий менопаузный гонадотропин) в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения. Группа изобретений относится также к способу лечения бесплодия у женщины, не имеющей PCOS (синдром поликистоза яичников), подверженной риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников. Использование данной группы изобретений позволяет проводить вспомогательную репродуктивную технологию с использованием высокоочищенного менотропина (HP-hMG) для стимуляции развития фолликулов при контролируемой стимуляции яичников, особенно у женщин, подверженных риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников. 4 н. и 10 з.п. ф-лы, 2 ил., 3 табл., 2 пр.

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Описанное здесь изобретение относится к вспомогательной репродуктивной технологии. В частности, здесь описаны способы лечения бесплодия, включающие способы контролируемой стимуляции яичников, которые могут быть особенно полезными для женщин, подверженных риску сильного ответа яичников на нее.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Методики вспомогательных репродуктивных технологий (ART) обычно включают стимулирование продукции яйцеклеток, отбор яйцеклеток из яичников женщины, их объединение со спермой in vitro и их перенос в матку женщины (донора или другой женщины). Успеху ART препятствуют риски со стороны матери и перинатальные риски, ассоциированные со стимуляцией продукции яйцеклеток, такие как синдром гиперстимуляции яичников (OHSS) и внематочная беременность. Другие беспокойства, которые возникают при ART, представляют собой продукция качественных эмбрионов и эуплоидных бластоцист для поддержания коэффициентов продолжающейся беременности и частоты живорождения.

Гонадотропины, такие как менотропин (например, человеческий менопаузный гонадотропин или hMG), фолликулостимулирующий гормон (FSH) и лютеинизирующий гормон (LH), широко использовали для контролируемой стимуляции яичников (COS), и высокоочищенный менотропин (HP-hMG) и рекомбинантный человеческий FSH (r-hFSH) использовали более недавно. Эффективность протоколов стимуляции яичников может быть усилена с использованием длительно действующих агонистов гормона, высвобождающего гормон гонадотропин (GnRH) или антагонистов GnRH для контроля цикла. См., например, Devroey et al. Fertility and Sterility 97: 561-71 (2012).

Поскольку ответы пациентов на стимуляцию яичников широко варьируют, лечения часто являются индивидуализированными. Например, индивидуализация может быть основана на прогнозируемом ответе яичников на стимуляцию гонадотропином, что прогнозирует слабый, нормальный или сильный ответ. Сильные респондеры со стороны яичников обычно определяются как женщины, у которых продуцируется большое число развивающихся фолликулов после стандартного протокола контролируемой стимуляции яичников (COS). Хотя этих пациентов обычно и рассматривают как хороших кандидатов для ART, сильный ответ яичников может быть ассоциирован с меньшими частотами имплантации и большими частотами выкидышей, и, таким образом, с пониженной вероятностью успешного исхода по сравнению с нормальным ответом яичников. Эти сильные респондеры также подвержены большему риску OHSS и связанных с ним осложнений.

Была выдвинута гипотеза о том, что стимуляция яичников может иметь общее отрицательное влияние на качество эмбрионов при оценке по морфологическим параметрам и/или посредством хромосомного анализа (например, эуплоидия относительно анеуплоидии). См., например, Hamdine et al., "Ovarian Stimulation for IVF: Mild Approaches" in Human Fertility: Methods and Protocols, Methods in Molecular Biology, Vol. 1154, Springer Science + Business Media, New York (2014). Кроме того, Haaf et al., Fertility and Sterility 91(3): 733-38 (2009) сообщали о том, что высокий выход ооцитов ассоциирован с повышенной частотой хромосомных ошибок. Однако Fatemi et al., Human Reproduction 28(2) 442-52 (2013) сообщали о том, что сильный ответ яичников не ставит под угрозу коэффициент продолжающейся беременности, а скорее увеличивает совокупную частоту беременностей.

Попытки разработки улучшенных способов ART включали исследование протоколов более мягкой стимуляции. Например, Rubio et al., Human Reproduction 25(9): 2290-2010 (2010) сообщали о том, что уменьшение дозы гонадотропина, вводимой сильным респондерам, могло улучшать частоты оплодотворения и качество эмбрионов, хотя меньшие дозы приводили к пониженному числу ооцитов. В других попытках рассматривали, влияет ли конкретный используемый гонадотропин на результаты. Например, Ziebe et al., Human Reproduction 22(9) 2404-13 (2007), сообщали о том, что применение НР-hMG по сравнению с rFSH (рекомбинантный фолликулостимулирующий гормон) могло влиять на морфологию эмбрионов и наблюдаемую улучшенную имплантацию, продолжающуюся беременность и частоты живорождения среди эмбрионов наивысшего качества, полученных в результате стимуляции НР-hMG по сравнению с rFSH. Однако следует отметить, что данные Ziebe et al. основаны на визуальной оценке ооцитов/эмбрионов в сутки три после извлечения и не основаны на хромосомном анализе. Как изложено ниже, такая визуальная оценка в сутки три не позволяет выявлять анеуплоидию. Аналогично, La Marca et al., Fertility and Sterility O-169 (2012) сообщали о том, что среди прогнозируемых сильных респондеров (субъектов, имеющих уровень АМН (антимюллеровский гормон), больший чем или равный 5,2 нг/мл) группа, стимулированная группой rFSH, имела значительно больше извлеченных ооцитов, но значительно меньшую частоту живорождения по сравнению с группой, стимулированной HP-hMG.

Следовательно, сохраняется потребность в улучшенных способах вспомогательной репродуктивной технологии, в частности для женщин, подверженных риску сильного ответа на контролируемую стимуляцию яичников.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Согласно настоящему изобретению предложена композиция (например, фармацевтическая композиция), содержащая менотропин (человеческий менопаузный гонадотропин или hMG) для применения в лечении пациента (например, женщины, подверженной риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников) для стимуляции, посредством этого, развития эуплоидных бластоцист для будущего переноса бластоцист, где данное лечение включает:

идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) до обработки/стимуляции [например, при измерении с использованием анализа Beckmann-Coulter Gen 2, как описано в Arce et al., Fertility and Sterility 99: 1644-53 (2013), или эквивалентный уровень АМН, оцениваемый другим способом (плюс/минус его коэффициент вариации)]; и

введение дозы 75-300 IU (международная единица) или эквивалентной дозы hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения. Данная доза может представлять собой или быть эквивалентной от 100 до 300 IU hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения.

Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 10, в обоих яичниках вместе вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 15, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 18, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 20, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл), и число антральных фолликулов (AFC) не меньше, чем 10, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл), и число антральных фолликулов (AFC) не меньше, чем 8, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции.

Данное лечение для стимуляции развития эуплоидных бластоцист для будущего переноса бластоцист может увеличивать долю/процентное содержание эуплоидных бластоцист по сравнению с долей/процентным содержанием анеуплоидных бластоцист. Лечение для стимуляции развития эуплоидных бластоцист для будущего переноса бластоцист может уменьшать коэффициент анеуплоидии. Коэффициент анеуплоидии обсужден ниже.

Лечение может включать введение дозы от 100 до 300 IU или эквивалентной дозы hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения, например с суток 1 до суток 10 лечения, например с суток 1 до суток 14 лечения, например с суток 1 до суток 20 лечения.

Лечение для стимуляции развития эуплоидных бластоцист для будущего переноса бластоцист может стимулировать развитие эуплоидных бластоцист (например, увеличивать долю/процентное содержание эуплоидных бластоцист по сравнению с долей/процентным содержанием анеуплоидных бластоцист) по сравнению со сравнимым способом с использованием рекомбинантного фолликулостимулирующего гормона (rFSH) в качестве гонадотропина.

Лечение может дополнительно включать введение hCG (хориогонадотропин альфа) (например, рекомбинантного hCG) для запуска овуляции.

Лечение может дополнительно включать: извлечение (например, сбор) ооцита(ов); оплодотворение (например, осеменение) ооцита(ов) и обеспечение развития оплодотворенных ооцитов до стадии бластоцисты. Оплодотворение (например, осеменение) может представлять собой оплодотворение in vitro, возможно внутрицитоплазматическую инъекцию спермы (ICSI).

Лечение может дополнительно включать оценку качества хромосом бластоцист, полученных после оплодотворения отобранных ооцитов (например, для идентификации одной или более чем одной эуплоидной бластоцисты). Лечение может дополнительно включать перенос эуплоидной бластоцисты, идентифицированной посредством оценки качества хромосом бластоцист (например, перенос в свежем состоянии). Лечение может дополнительно включать замораживание эуплоидной бластоцисты, идентифицированной посредством оценки качества хромосом бластоцист.

Менотропин может представлять собой высокоочищенный менотропин (HP-hMG).

В одном примере лечение может включать стадию введения пациенту дозы от 100 до 200 IU или эквивалентной дозы HP-hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения, например стадию введения пациенту дозы 150 IU или эквивалентной дозы HP-hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения. Лечение может включать дополнительную стадию введения антагониста GnRH в сутки 6 лечения.

Пациент (субъект) предпочтительно представляет собой пациента на стадии овуляции. Другими словами, предпочтительно, чтобы пациент (субъект) не был неовулирующим.

Согласно настоящему изобретению в другом аспекте предложена композиция, содержащая менотропин (человеческий менопаузный гонадотропин или hMG), для применения в стимуляции развития эуплоидных бластоцист (для применения в лечении бесплодия), где данное лечение включает:

введение дозы 75-300 IU или эквивалентной дозы hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения. Данная доза может представлять собой или быть эквивалентной от 100 до 300 IU hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения.

Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 10, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 15, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 18, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 20, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл), и число антральных фолликулов (AFC) не меньше, чем 10, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл), и число антральных фолликулов (AFC) не меньше, чем 8, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции.

Стимуляция развития эуплоидных бластоцист (для применения в лечении бесплодия) может увеличивать долю/процентное содержание эуплоидных бластоцист по сравнению с долей/процентным содержанием анеуплоидных бластоцист.

Лечение может включать введение дозы от 75 до 300 IU или эквивалентной дозы hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения, например с суток 1 до суток 10 лечения, например с суток 1 до суток 14 лечения, например с суток 1 до суток 20 лечения.

Стимуляция развития эуплоидных бластоцист (для применения в лечении бесплодия) может приводить к увеличению доли/процентного содержания эуплоидных бластоцист по сравнению со сравнимым способом с использованием рекомбинантного фолликулостимулирующего гормона (rFSH) в качестве гонадотропина.

Лечение может дополнительно включать введение hCG (например, рекомбинантного hCG) для запуска овуляции.

Лечение может дополнительно включать оценку качества хромосом бластоцист, полученных после оплодотворения отобранных ооцитов (например, для идентификации одной или более чем одной эуплоидной бластоцисты). Лечение может дополнительно включать перенос эуплоидной бластоцисты, идентифицированной посредством оценки качества хромосом бластоцист (например, перенос в свежем состоянии). Лечение может дополнительно включать замораживание бластоцисты, идентифицированной посредством оценки качества хромосом бластоцист.

Менотропин может представлять собой высокоочищенный менотропин (HP-hMG).

Согласно настоящему изобретению в другом аспекте предложена композиция, содержащая менотропин (человеческий менопаузный гонадотропин или hMG), для применения в лечении бесплодия (например, в контролируемой стимуляции яичников) для развития эуплоидных бластоцист для будущего переноса бластоцист, где данное лечение включает:

Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 10, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 15, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 18, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 20, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл), и число антральных фолликулов (AFC) не меньше, чем 10, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл), и число антральных фолликулов (AFC) не меньше, чем 8, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции.

Лечение для развития эуплоидных бластоцист для будущего переноса бластоцист может увеличивать долю/процентное содержание эуплоидных бластоцист по сравнению с долей/процентным содержанием анеуплоидных бластоцист.

Лечение для развития эуплоидных бластоцист для будущего переноса бластоцист может увеличивать развитие эуплоидных бластоцист (например, увеличивать долю/процентное содержание эуплоидных бластоцист по сравнению с долей/процентным содержанием анеуплоидных бластоцист) по сравнению со сравнимым способом с использованием рекомбинантного фолликулостимулирующего гормона (rFSH) в качестве гонадотропина.

Лечение может дополнительно включать введение hCG (например, рекомбинантного hCG) для запуска овуляции.

Менотропин может представлять собой высокоочищенный менотропин (HP-hMG).

Согласно настоящему изобретению в другом аспекте предложена композиция, содержащая менотропин (человеческий менопаузный гонадотропин или hMG), для применения в лечении бесплодия у женщины, подверженной риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников, где данное лечение включает:

идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) [например, при измерении с использованием анализа Beckmann-Coulter Gen 2, как описано в Arce et al., Fertility and Sterility 99: 1644-53 (2013), или эквивалентный уровень АМН, оцениваемый другим способом (плюс/минус его коэффициент вариации)] и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 10 в обоих яичниках вместе перед лечением/стимуляцией; и

Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 15, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 18, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 20, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл), и число антральных фолликулов (AFC) не меньше, чем 10, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл), и число антральных фолликулов (AFC) не меньше, чем 8, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции.

Лечение может дополнительно включать введение hCG (например, рекомбинантного hCG) для запуска овуляции.

Менотропин может представлять собой высокоочищенный менотропин (HP-hMG).

В одном примере лечение может включать стадию введения пациенту дозы от 75 до 200 IU или эквивалентной дозы HP-hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения, например стадию введения пациенту дозы 150 IU или эквивалентной дозы HP-hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения. Лечение может включать дополнительную стадию введения антагониста GnRH в сутки 6 лечения. Лечение может увеличивать число ооцитов в метафазе II (например, образующихся в результате лечения) по сравнению с эквивалентным лечением FSH. Число ооцитов в метафазе II будет оцениваться способами, хорошо известными в данной области, как обсуждено ниже.

Согласно настоящему изобретению в другом аспекте предложена композиция (например, фармацевтическая композиция), содержащая менотропин (человеческий менопаузный гонадотропин или hMG), для применения в лечении бесплодия для стимуляции, посредством этого, развития эуплоидных бластоцист для будущего переноса бластоцист пациенту (например, женщине, подверженной риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников), идентифицированному как имеющий сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) [например, при измерении с использованием анализа Beckmann-Coulter Gen 2, как описано в Arce et al., Fertility and Sterility 99: 1644-53 (2013), или эквивалентный уровень АМН, оцениваемый другим способом (плюс/минус его коэффициент вариации)], до лечения/стимуляции и возможно идентифицированному как имеющий число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 10, в обоих яичниках вместе перед лечением/стимуляцией; причем данное лечение включает введение дозы 75-300 IU или эквивалентной дозы hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения. Данная доза может представлять собой или быть эквивалентной от 100 до 300 IU hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения.

Пациент может быть идентифицирован как имеющий сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 10, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Пациент может быть идентифицирован как имеющий сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 15, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Пациент может быть идентифицирован как имеющий сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 18, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Пациент может быть идентифицирован как имеющий сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл), и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 20, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Пациент может быть идентифицирован как имеющий сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл), и число антральных фолликулов (AFC) не меньше, чем 10, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Пациент может быть идентифицирован как имеющий сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл), и число антральных фолликулов (AFC) не меньше, чем 8, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции.

Лечение для стимуляции развития эуплоидных бластоцист для будущего переноса бластоцист может увеличивать долю/процентное содержание эуплоидных бластоцист по сравнению с долей/процентным содержанием анеуплоидных бластоцист. Лечение для стимуляции развития эуплоидных бластоцист для будущего переноса бластоцист может уменьшать коэффициент анеуплоидии. Коэффициент анеуплоидии обсужден ниже.

Лечение может дополнительно включать введение hCG (например, рекомбинантного hCG) для запуска овуляции.

Менотропин может представлять собой высокоочищенный менотропин (HP-hMG).

Приведенное выше общее описание и подробное описание являются примерными и пояснительными, и предназначены для того, чтобы обеспечивать дополнительное объяснение изобретения. Для подробного понимания изобретения сделана ссылка на следующее подробное описание конкретных воплощений, взятых в сочетании с сопровождающими графическими материалами. Другие задачи, преимущества и новые характеристики будут легко очевидны специалистам в данной области из следующего подробного описания изобретения.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

На Фиг. 1 показана (А) частота сильного ответа яичников (15 или более извлеченных ооцитов) и (Б) частоты живорождений (LBR) среди женщин, классифицируемых как потенциальные сильные респондеры по высокому исходному уровню антимюллеровского гормона (АМН). Значения внутри столбиков представляют собой n/общее число. Значения р основаны на критерии хи-квадрат. Процентная доля женщин с сильным ответом яичников значительно ниже для HP-hMG по сравнению с rFSH как в длинном протоколе с агонистом, так и в протоколе с антагонистом.

На Фиг. 2 приведена блок-схема плана исследования для клинического испытания из Примера 2.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Здесь описаны способы вспомогательной репродуктивной технологии, например способы лечения бесплодия. В частности, здесь описаны способы контролируемой стимуляции яичников (COS), которые могут быть особенно полезными для женщин, подверженных риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников. В некоторых воплощениях данные способы являются полезными для оптимизации ответа яичников на COS, улучшения качества эмбрионов, увеличения доли эуплоидных бластоцист, продуцируемых посредством оплодотворения in vitro после контролируемой стимуляции яичников, уменьшения доли анеуплоидных бластоцист, продуцируемых посредством оплодотворения in vitro после контролируемой стимуляции яичников, уменьшения показателя анеуплоидии, например после контролируемой стимуляции яичников, увеличения коэффициентов продолжающейся беременности и/или увеличения частот живорождения.

Настоящее изобретение основано на неожиданном открытии авторами изобретения того, что применение высокоочищенного менотропина (HP-hMG) у потенциальных сильных респондеров со стороны яичников, подвергающихся контролируемой стимуляции яичников (COS), может оптимизировать ответ яичников, улучшать качество эмбрионов, увеличивать долю эуплоидных бластоцист, уменьшать долю анеуплоидных бластоцист, увеличивать коэффициенты продолжающейся беременности и увеличивать частоты живорождения.

Определения

Используемые здесь технические и научные термины имеют значения, обычно понятные обычному специалисту в области вспомогательной репродуктивной технологии, к которой относится настоящее изобретение, если не определено иное. Здесь сделана ссылка на разные методологии, известные обычным специалистам в данной области. В осуществлении настоящего изобретения можно использовать любые подходящие материалы и/или методы, известные обычным специалистам в данной области. Однако описаны конкретные материалы и методы. Вещества, реактивы и тому подобное, на которые сделана ссылка в следующем описании и примерах, могут быть получены из коммерческих источников, если не отмечено иное.

Формы единственного числа в том виде, в котором они здесь используются, обозначают как единственное, так и множественное число, если прямо не утверждается обозначение только единственного числа.

Термин «примерно» в том виде, в котором он здесь используется, означает, что число или интервал не ограничивается точным изложенным числом или интервалом, но охватывает интервалы около перечисленного числа или интервала, как будет понятно обычным специалистам в данной области, в зависимости от контекста, в котором используется данное число или интервал. Если иное не очевидно из контекста или договоренности в данной области, «примерно» означает вплоть до плюс или минус 10% от конкретного значения.

Термин «оптимизация ответа яичников» в том виде, в котором он здесь используется, относится к оптимизации ответа яичников на COS для достижения оптимального числа развивающихся фолликулов, такого как от 4 до 15 развивающихся фолликулов, примерно 8-15 развивающихся фолликулов, примерно 8-14 развивающихся фолликулов или примерно 11 развивающихся фолликулов.

Термин «улучшение качества эмбрионов» в том виде, в котором он здесь используется, относится к увеличению доли эуплодных бластоцист (например, бластоцист, имеющих правильное число хромосом) и/или к уменьшению доли анеуплоидных бластоцист (например, бластоцист, имеющих неправильное число хромосом), продуцируемых в одном цикле ART, который включает COS с последующим оплодотворением in vitro.

Термин «продолжающаяся беременность» в том виде, в котором он здесь используется, относится к беременности с жизнеспособным плодом и выявляемым сердцебиением плода на 10-11 неделе беременности, например в 8-9 недель после переноса бластоцисты/эмбриона.

Термин «клиническая беременность» в том виде, в котором он здесь используется, относится к беременности и выявляемому сердцебиению плода на 5-6 неделе беременности, например в 3-4 недели после переноса бластоцист/эмбрионов.

Термин «женщина» в том виде, в котором он здесь используется, относится к взрослому человеку женского пола. В некоторых воплощениях женщина, которую лечат согласно описанным здесь способам, идентифицирована как находящаяся в возрасте 35 лет или младше или идентифицирована как находящаяся в возрасте 34 лет или младше. В некоторых воплощениях женщина, которую лечат согласно описанным здесь способам, идентифицирована как находящаяся в возрасте 21-38 лет или идентифицирована как находящаяся в возрасте 21-37 лет, или идентифицирована как находящаяся в возрасте 21-36 лет, или идентифицирована как находящаяся в возрасте 21-34 лет, или идентифицирована как находящаяся в возрасте 21-32 лет, или идентифицирована как находящаяся в возрасте 21-31 лет (до лечения). В некоторых воплощениях женщина, которую лечат согласно описанным здесь способам, идентифицирована (до лечения) как имеющая BMI (индекс массы тела) 38 кг/м² или менее, 36 кг/м² или менее, 34 кг/м² или менее, 32 кг/м² или менее, 30 кг/м² или менее, или 28 кг/м² или менее, как, например, BMI 18-38, 18-36, 18-34, 18-32, 18-30 или 18-28 кг/м². В некоторых воплощениях женщина, которую лечат согласно описанным здесь способам, идентифицирована как имеющая BMI 18-25 кг/м², 18-26 кг/м², 18-29 кг/м², 18-30 кг/м², 18-32 кг/м², 18-34 кг/м², 18-36 кг/м² или 18-38 кг/м².

Как использовано здесь, субъекты, классифицируемые как «подверженные риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников», относятся к женщинам, у которых, вероятно, будет развиваться большое число фолликулов или ооцитов после стандартного протокола контролируемой стимуляции яичников (COS), таким как женщины с большей, чем средняя, вероятностью производства 15 или более чем 15 ооцитов. Женщины могут быть идентифицированы как подверженные риску, если они генерировали 15 или более чем 15 ооцитов в предыдущем цикле ART, например при предыдущем лечении посредством COS. Дополнительно или альтернативно, женщины могут быть идентифицированы как подверженные риску, если они считаются подверженными риску развития OHSS. Дополнительно или альтернативно, женщины могут быть идентифицированы как подверженные риску, если они имеют сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный примерно 5,0 нг/мл (такой как больший чем или равный примерно 5,2 нг/мл) при оценке, как описано здесь ниже (или эквивалентный уровень при оценке другим способом). Дополнительно или альтернативно, женщины могут быть идентифицированы как подверженные риску, если они имеют число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 15, большее чем или равное 18, или большее чем или равное 20 в обоих яичниках вместе до стимуляции.

Термин «менотропин» в том виде, в котором он здесь используется, включает человеческий менопаузный гонадотропин или hMG. Термин «высокоочищенный менотропин» в том виде, в котором он здесь используется, включает HP-hMG, доступный от Ferring B.V. под товарным знаком MENOPUR®, который содержит как фолликулостимулирующий гормон (FSH), так и активность лютеинизирующего гормона (LH), управляемую человеческим хорионическим гонадотропином (hCG).

Термин «агонист GnRH» в том виде, в котором он здесь используется, включает агонисты гонадотропин-высвобождающего гормона (GnRH), такие как бусерелин (например, Супрекур®), лейпрорелин (например, Лупрон®), нафарелин (например, Синарел®) и трипторелин (например, Трелстар®).

Термин «антагонист GnRH» в том виде, в котором он здесь используется, включает антагонисты гонадотропин-высвобождающего гормона (GnRH), такие как ганиреликса ацетат (например, Оргалутран®) и цетрореликса ацетат (например, Цетротид®), которые блокируют действие GnRH посредством конкурентного блокирования рецепторов GnRH на гипофизарных гонадотропоцитах и, таким образом, предотвращают продукцию гонадотропина и преждевременное высвобождение яйцеклеток.

Фраза «эффективное количество» в том виде, в котором она здесь используется, относится к дозировке, которая обеспечивает конкретный фармакологический эффект, для которого субъекту, нуждающемуся в таком лечении, вводят лекарственное средство. Подчеркивается то, что терапевтически эффективное количество не всегда будет эффективным в лечении описанных здесь состояний, даже если такая дозировка считается специалистами в данной области терапевтически эффективным количеством. Только для удобства ниже приведены типичные дозировки и терапевтически эффективные количества по отношению к взрослым субъектам-людям женского пола. Специалисты в данной области могут корректировать такие количества согласно стандартным практикам, как необходимо для лечения конкретного субъекта и/или состояния/заболевания.

Как отмечено выше, согласно настоящему изобретению предложены способы репродуктивной технологии, в которые вовлечено применение высокоочищенного менотропина (HP-hMG) у женщин, подверженных риску сильного ответа яичников на COS и подвергающихся COS. Как также отмечено выше, для задач раскрытых здесь способов женщины могут быть идентифицированы как подверженные риску сильного ответа яичников на COS, если они имеют сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный примерно 5,0 нг/мл, такой как больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл, такой как больший чем или равный примерно 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл, при измерении с использованием анализа Beckmann-Coulter Gen 2, как описано в Arce et al., Fertility and Sterility 99: 1644-53 (2013), или эквивалентный уровень АМН, оцениваемый другим способом (плюс/минус его коэффициент вариации). Сывороточные уровни АМН представляют собой суррогатный маркер резерва функциональных фолликулов яичника, и была описана положительная корреляция между сывороточными уровнями АМН и ответом яичника (например, выходом ооцитов). Id. Однако, согласно Arce et al., уровни АМН не коррелировали с качеством эмбрионов. Id.

Дополнительно или альтернативно, как также отмечено выше, для задач раскрытых здесь способов женщины могут быть идентифицированы как подверженные риску сильного ответа яичников на COS, если они имеют число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 15, большее чем или равное 18 или большее чем или равное 20, в обоих яичниках вместе до стимуляции. Антральные фолликулы представляют собой маленькие фолликулы (примерно 2-8 мм в диаметре), которые могут быть визуализированы и измерены просредством трансвагинального ультразвукового исследования. Антральные фолликулы являются другим маркером резерва яичников, и AFC использовали (наряду с другими маркерами) для прогнозирования ответа яичников на COS, например для прогнозирования того, будет ли данный субъект слабым, нормальным или сильным респондером. Однако AFC не коррелировал с качеством эмбрионов.

Способы вспомогательной репродуктивной технологии

Описанные здесь способы являются полезными в любых способах репродуктивной технологии, в которые вовлечена контролируемая стимуляция яичников (COS), таких как оплодотворение in vitro, включая внутрицитоплазматическую инъекцию спермы (ICSI), включая способы, в которые вовлечен перенос оплодотворенных яйцеклеток (например, бластоцист/эмбрионов) в свежем состоянии и способы, в которые вовлечено замораживание оплодотворенных яйцеклеток (например, бластоцист/эмбрионов) для более поздней имплантации.

В конкретных воплощениях субъект, подвергающийся COS, подвержен риску сильного ответа яичников на COS. В конкретных воплощениях субъект идентифицирован по наличию сывороточного уровня АМН, большего чем или равного примерно 5,0 нг/мл, такого как больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл, такого как больший чем или равный примерно 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл, при измерении с использованием анализа Beckmann-Coulter Gen 2, как описано в Arce et al., Fertility and Sterility 99: 1644-53 (2013), или эквивалентного уровеня АМН, оцениваемого другим способом (плюс/минус его коэффициент вариации).

В некоторых воплощениях субъект дополнительно или альтернативно идентифицирован по наличию AFC, большего чем или равного 15, большего чем или равного 18 или большего чем или равного 20, в обоих яичниках вместе до стимуляции. В некоторых воплощениях субъект исключается из лечения посредством описанных здесь способов, если данный субъект имеет AFC меньше, чем 8 или меньше, чем 10 в обоих яичниках вместе до стимуляции. В некоторых воплощениях субъекты, которых лечат описанными здесь способами, имеют (идентифицируются как имеющие) AFC по меньшей мере 10 (большее чем или равное 10) в обоих яичниках вместе до стимуляции.

Субъекты могут быть дополнительно или альтернативно идентифицированы как подвергающиеся риску, если они генерировали 15 или более чем 15 ооцитов в предыдущем цикле ART, например при предыдущем лечении посредством COS, и/или если они считаются подверженными риску развития OHSS.

В конкретных воплощениях способы включают введение субъекту HP-hMG в количестве, эффективном для стимуляции развития фолликулов. В некоторых воплощениях HP-hMG вводят в дозе от примерно 75 IU или 100 IU до примерно 300 IU/сутки или от примерно 75 до примерно 200 IU/сутки, или от примерно 100 до примерно 200 IU/сутки в течение от примерно 1 до примерно 20 суток, как, например, в течение по меньшей мере 5 суток. Фармацевтические композиции, содержащие HP-hMG, имеются в продаже, как, например, продукт MENOPUR®, продаваемый Ferring B.V., который приготовлен для подкожной инъекции. Типично исходная доза составляет 150 IU/сутки в течение первых 5 суток, которую можно затем корректировать (например, с суток 6 и далее) на основе ответа яичников (фолликулов) субъекта, который моно оценивать, например, посредством трансвагинального ультразвукового исследования (TVUS). Например, как только лидирующий фолликул достигает более 12 мм в диаметре, дозу можно корректировать на 75 IU на корректировку. Типично дозу корректируют в сторону увеличения или снижения, когда и сывороточный уровень эстрадиола, и число фолликулов больше 12 мм являются либо слишком маленькими, либо слишком большими на 6-е сутки стимуляции. HP-hMG вводят ежесуточно, пока не достигается желаемый уровень продукции фолликулов. Например, HP-hMG можно вводить, пока не развились три фолликула с диаметром больше 17 мм, что может быть определено посредством TVUS. Типично максимальный период дозирования HP-hMG составляет 20 суток.

В некоторых воплощениях способы включают введение антагониста GnRH на протяжении части периода введения HP-hMG. Например, антагонист GnRH можно вводить как только лидирующий фолликул достигает 14 мм в диаметре, и его введение можно продолжать на протяжении остального периода введения HP-hMG. Когда антагонист GnRH представляет собой ганиреликса ацетат (такой как Оргалутран®), типичную дозу 0,25 мг/сутки вводят подкожно.

В других воплощениях способы включают введение агониста GnRH до стимуляции яичников, как, например, введение трипторелина (типично 0,1 мг/сутки подкожно) или лейпрорелина (например, Лупрона®).

Как только достигается желательный уровень продукции фолликулов, овуляцию можно стимулировать способами, известными в данной области, как, например, посредством болюсной инъекции человеческого хорионического гонадотропина (hCG). Типичная доза рекомбинантного hCG (такого как Овитрель®) составляет 250 мкг (6500 IU активности hCG), обычно вводимая одной подкожной инъекцией. Затем ооциты извлекают и оплодотворяют способами, известными в данной области, такими как ICSI.

Для способов переноса в свежем состоянии одну или более чем одну бластоцисту отбирают для переноса через несколько суток после оплодотворения (например, через 5 суток). Остающиеся бластоцисты можно замораживать способами для будущего переноса, известными в данной области (включающими витрификацию). В конкретных воплощениях описанные здесь способы используют в протоколе переноса одной бластоцисты, в котором отбирают одну бластоцисту для переноса в свежем состоянии. Согласно данным воплощениям остальные бластоцисты можно замораживать способами для будущего переноса, известными в данной области.

Для способов по принципу «замораживать все» («freeze all») отобранные бластоцисты замораживают способами для будущего переноса, известными в данной области.

В конкретных воплощениях отбор бластоцист направляется морфологическим анализом. Например, морфологическое качество бластоцист можно оценивать посредством определения статуса увеличения бластоцисты и вывобождения эмбриона, ранжирования массы внутренних клеток и ранжирования трофэктодермы согласно системе ранжирования бластоцист Гарднера. См., например, Van den Abbeel et al., Reproductive Biomed. OnLine 27: 353-61 (2013). Например, бластоцисты со статусом увеличения бластоцисты и высвобождения эмбриона 4, 5 или 6, рангом массы внутренних клеток А и рангом трофэктодермы А или Б могут считаться имеющими «превосходное» качество, тогда как бластоцисты со статусом увеличения бластоцисты и высвобождения эмбриона 3, 4, 5 или 6, рангом массы внутренних клеток А или Б и рангом трофэктодермы А или Б могут считаться имеющими «хорошее» качество.

Дополнительно или альтернативно, качество бластоцист оценивают посредством хромосомного анализа, включающего генетический скрининг (например, предимплантационный генетический скрининг или PGS) для выявления анеуплоидии. В некоторых воплощениях хромосомный анализ включает всесторонний хромосомный скрининг (CCS), как описано, например, в Forman et al., Fertility and Sterility 100: 718-24 (2013). Как описано в данной статье, CCS можно проводить до переноса в свежем состоянии или до замораживания бластоцист для будущего переноса.

Согласно настоящему изобретению в другом аспекте предложена композиция, содержащая менотропин, для применения в лечении бесплодия для уменьшения показателя анеуплоидии в образующихся бластоцистах у пациента, идентифицированного как имеющий сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) [и возможно число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 10 в обоих яичниках вместе, например число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 15 в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции], где данное лечение включает введение дозы от 75 до 300 IU или эквивалентной дозы hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения.

Термин «показатель анеуплоидии» определен здесь как процентная доля [например, для субъекта (пациента)] и рассчитывается как отношение числа анеуплоидных бластоцист к общему числу бластоцист, умноженное на 100. Число анеуплоидных бластоцист можно определять, например, способами, описанными выше (например, хромосомный анализ, такой как PGS, CCS). Общее число бластоцист можно определять, например, способами, хорошо известными в данной области (например, способами, которые описаны, и на которые сделана ссылка в Примере 2 ниже).

Под «лечением бесплодия для уменьшения показателя анеуплодии в образующихся бластоцистах» подразумевается, что данное лечение уменьшает показатель анеуплодии в бластоцистах, которые образуются в результате лечения (например, эффективно уменьшает число анеуплоидных бластоцист, продуцируемых лечением, по отношению к общему числу бластоцист, продуцируемых лечением). Лечение может уменьшать показатель анеуплоидии по сравнению с эквивалентным лечением FSH.

Пациент может быть идентифицирован как имеющий сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл), и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 15, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Пациент может быть идентифицирован как имеющий сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл), и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 18, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Пациент может быть идентифицирован как имеющий сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл), и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 20, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Пациент может быть идентифицирован как имеющий сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл), и число антральных фолликулов (AFC) не меньше, чем 10 в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Пациент может быть идентифицирован как имеющий сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл), и число антральных фолликулов (AFC) не меньше, чем 8 в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции.

Лечение может дополнительно включать введение hCG (например, рекомбинантного hCG) для запуска овуляции.

Менотропин может представлять собой высокоочищенный менотропин (HP-hMG).

Согласно настоящему изобретению в другом аспекте предложена композиция, содержащая менотропин, для применения в лечении бесплодия (у пациента) для уменьшения показателя анеуплоидии в образующихся бластоцистах для будущего переноса бластоцист, где данное лечение включает:

идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) [и возможно число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 10 в обоих яичниках вместе, например число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 15 в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции]; и

введение дозы 75-300 IU или эквивалентной дозы hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения.

Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 15, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 18, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) и число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 20, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл), и число антральных фолликулов (AFC) не меньше, чем 10, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции. Лечение может включать идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл), и число антральных фолликулов (AFC) не меньше, чем 8, в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции.

Лечение может дополнительно включать введение hCG (например, рекомбинантного hCG) для запуска овуляции.

Менотропин может представлять собой высокоочищенный менотропин (HP-hMG).

В некоторых воплощениях обеспечивают поддержку фазы лютеинизации посредством введения прогестерона, как, например, посредством вагинальных прогестероновых вкладышей, с суток после извлечения ооцитов до 10-15 суток после переноса бластоцисты/эмбриона и/или с суток переноса бластоцисты/эмбриона до подтверждения продолжающейся беременности согласно протоколам, известным в данной области.

В некоторых воплощениях клиническую беременность подтверждают посредством TVUS на 5-6-ой неделях беременности (например, через 3-4 недели после переноса бластоцисты/эмбриона). В некоторых воплощениях продолжающуюся беременность подтверждают посредством TVUS на 10-11-ой неделях беременности (например, через 8-9 недель после переноса бластоцисты/эмбриона).

В некоторых воплощениях субъекта наблюдают для оценки результата беременности (например, живорождения) и/или здоровья новорожденного.

Как изложено выше, описанные здесь способы являются полезными для улучшения качества эмбрионов, увеличения доли эуплоидных бластоцист, уменьшения доли анеуплоидных бластоцист, увеличения коэффициентов продолжающейся беременности и/или увеличения частот живорождений по сравнению со сравнимыми способами с использованием рекомбинантного фолликулостимулирующего гормона (rFSH) в качестве гонадотропина. В частности, описанные здесь способы могут приводить к увеличенной доле эуплоидных бластоцист (например, к уменьшенной доле анеуплоидных бластоцист) по сравнению со сравнимыми способами с использованием rFSH в качестве гонадотропина. Описанные здесь способы также могут приводить к повышенным коэффициентам продолжающейся беременности и/или к повышенным частотам живорождения по сравнению со сравнимыми способами с использованием rFSH в качестве гонадотропина, таким как 8%-ное или 10%-ное или большее увеличение коэффициентов продолжающейся беременности и/или частот живорождения. В некоторых воплощениях данные способы приводят к меньшему числу яйцеклеток, но к большей доле эуплоидных бластоцист по сравнению со сравнимыми способами с использованием rFSH в качестве гонадотропина.

Другие аспекты описанных здесь способов проиллюстрированы в следующих примерах, которые не являются ограничивающими в каком-либо отношении.

ПРИМЕРЫ

Пример 1 - ретроспективный анализ

Выполняли ретроспективный анализ данных, полученных в двух рандомизированных контролируемых клинических испытаниях, сравнивающих результат лечения у пациентов, подвергающихся стимуляции HP-hMG или рекомбинантным FSH, следуя длинному протоколу с агонистом GnRH (Anckaert et al., Human Reproduction 27: 1829-39 (2012)) или протоколу с антагонистом GnRH (Arce et al., Fertility and Sterility, 99: 1644-53 (2013).

1. Исследуемые популяции

Главные критерии включения для длинного испытания с агонистом представляли собой женщин в возрасте 21-37 лет с главными показаниями для IVF (экстракорпоральное оплодотворение) (такими как бесплодие, связанное с трубным фактором, необъяснимое бесплодие или бесплодие, связанное с умеренным мужским фактором), уровни FSH в пределах нормальных границ (1-12 IU/л), BMI 18-29 и регулярные менструальные циклы продолжительностью 21-35 суток, которые, как предполагается, являются овуляторными. Главные критерии включения для испытания с антагонистом представляли собой женщин в возрасте 21-34 лет с диагнозом первичного бесплодия, относящегося к необъяснимому бесплодию или бесплодию, связанному с умеренным мужским фактором, уровни FSH 1-12 IU/л, BMI 18-25 и регулярные менструальные циклы продолжительностью 24-35 суток.

2. Протоколы исследования

В длинном протоколе с агонистом понижающую регуляцию осуществляли с использованием трипторелина (0,1 мг/сутки) (Decapeptyl®, Ferring Pharmaceuticals A/S) с инициацией за 5-7 суток до оценочного начала следующей менструации и продолжением до окончания введения гонадотропина. Гонадотропин (HP-hMG или rFSH) вводили в количестве 225 IU/сутки в течение первых 5 суток, и затем корректировали количество согласно ответу яичников.

В протоколе с антагонистом гонадотропин (HP-hMG или rFSH) вводили в количестве 150 IU/сутки в течение первых 5 суток, и затем корректировали количество согласно ответу яичников с суток 6. В сутки 6 инициировали введение антагониста GnRH (ганиреликс, Оргалутран, MSD) в количестве 0,25 мг/сутки и продолжали на протяжении всего лечения гонадотропином.

В обоих протоколах вводили 250 мкг hCG (хориогонадотропин альфа, Овитрель, Merck Serono), когда наблюдали три фолликула с диаметром, большим чем или равным 17 мм, и извлечение ооцитов поисходило через 36 плюс/минус 2 часа.

Поддержание функции желтого тела обеспечивали посредством вагинальным введением прогестерона.

В длинном протоколе с агонистом 1 или 2 эмбриона переносили в сутки 3. В протоколе с антагонистом 1 бластоцисту переносили в сутки 5.

Живорождение определяли как роды (по меньшей мере) одного рожденного живым новорожденного.

3. Анализы сыворотки

АМН анализировали посредством твердофазного иммуноферментного анализа (длинное испытание с агонистом: ELISA против АМН от Immunotech Beckman Coulter; испытание с антагонистом: ELISA от Beckman Coulter Gen 2; 1 нг/мл соответствует 7,14 пмоль/л). Анализы АМН имели чувствительность 0,35 и 0,08 нг/мл и общую погрешность (% коэффициента вариации) меньше 9,5 и меньше 7,7 в Immunotech Beckman Coulter и Beckman Coulter Gen 2 соответственно. FSH, эстрадиол и прогестерон анализировали посредством электрохемилюминисцентного иммуноанализа (ECLIA от Roche-Diagnostics).

4. Статистический анализ

Всего два данных испытания включали 1372 женщины. В ретроспективном анализе женщин классифицировали как потенциальных сильных респондеров, если исходный уровень АМН находился в самом верхнем квартиле (75-ый процентиль) наблюдаемого распределения уровня АМН. В обоих протоколах 75-ый процентиль был идентичным (5,0 нг/мл, что соответствует 37,4 пмоль/л). В ретроспективном анализе сто пятьдесят пять женщин, которых лечили в длинном протоколе с агонистом GnRH (76 и 79 в группах HP-hMG и rFSH соответственно), и 188 женщин - в протоколе с антагонистом GnRH (87 и 101 в группах HP-hMG и rFSH соответственно) были классифицированы как потенциальные сильные респондеры.

В каждом протоколе характеристики в исходный момент времени, данные в конце стимуляции, ответ яичнков и данные по эмбрионам сравнивали между женщинами, сгруппированными согласно их значению АМН в сутки стимуляции 1 (более чем 75-ый по сравнению с меньшим чем или равным 75-му процентилю). Аналогичные анализы проводили для потенциальных сильных респондеров, сравнивая лечения гонадотропином (HP-hMG относительно rFSH) в пределах каждого протокола. Непрерывные и категорийные данные сравнивали с использованием критерия Уилкоксона и критерия хи-квадрат или точного критерия Фишера соответственно. Для потенциальных сильных респондеров риск сильного ответа (число извлеченных ооцитов, большее чем или равное 15) и вероятность живорождения сравнивали между лечениями с использованием критерия хи-квадрат. Наблюдаемые различия в показателях живорождений между группами обработки гонадотропином дополнительно анализировали в объединенной популяции потенциальных сильных респондеров из обоих протоколов для определения того, могли ли они быть приписаны к исходным характеристикам или к переменным конца стимуляции. Для каждой переменной аппроксимировали логистическую регрессионную модель, включающую группу обработки и рассматриваемую переменную в линейном предикторе. В настоящий набор данных включали только свежие циклы лечения.

5. Результаты

Категория с высоким уровнем АМН по сравнению с категорией с невысоким уровнем АМН

Как в длинном протоколе с агонистом, так и в протоколе с антагонистом женщины в категории с высоким уровнем АМН характеризовались более молодым возрастом, большей продолжительносью менструального цикла, большим AFC, меньшим уровнем FSH и большим объемом яичников в начале стимуляции, чем женщины в категории с невысоким уровнем АМН (р меньше чем или равно 0,003 для каждой переменной). Данные характеристики показаны в Таблице 1.

Значения представляют собой медиану (IQR - межквартильный размах), если не указано иное.

* Критерий Уилкоксона (непрерывные данные); критерий хи-квадрат или точный критерий Фишера (категориальные данные).

Эмбрионы наивысшего качества были определены как 4-5 клеток в сутки 2, 7 клеток или более в сутки 3, бластомеры равного размера, 20% или менее фрагментации в сутки 3 и отсутствие многоядерности.

Бластоцисты хорошего качества определяли как бластоциты с бальным показателем увеличения и высвобождения эмбриона, большим чем или равным 4, и с массой внутренних клеток и трофэктодермой степени А или Б, с использованием определений, описанных Gardner & Schoolcraft, "In-vitro culture of human blastocysts," In Towards Reproductive certainty: fertility and genetics beyond 1998, Jansen & Mortimer, eds. (The Parthenon Publishing Group, New York 1999), стр. 378-88.

Среди женщин с извлеченными ооцитами.

Ретроспективный анализ выявил, что, независимо от использованного протокола, женщины с высоким уровнем АМН демонстрировали значимо (р меньше 0,001 для каждой переменной) более высокие сывороточные уровни эстрадиола и прогестерона, а также увеличенное число растущих фолликулов, больших чем или равных 12 мм, в конце стимуляции. Кроме того, женщины с высоким уровнем АМН имели значимо (р меньше чем или равно 0,003 для каждой переменной) больше извлеченных ооцитов, повышенную частоту сильного ответа, большую частоту раннего OHSS и вмешательства по причине гиперответа. В длинном протоколе с агонистом отмена цикла из-за гиперответа яичников происходила чаще среди женщин в категории с высоким уровнем АМН (р равно 0,001). В конце стимуляции не отмечали клинически релевантных различий в толщине эндометрия или картинах эхогенности между двумя категориями АМН. У женщин с высоким уровнем АМН было доступно значительно больше эмбрионов в сутки 3 (длинный протокол с агонистом: р равно 0,029) или бластоцист в сутки 5 (протокол с антагонистом: р меньше 0,001), но доли женщин с эмбрионом(ами) наивысшего качества или с бластоцистой(ами) хорошего качества были сходными в двух категориях АМН.

6. Стимуляция HP-hMG по сравнению с rFSH в категории с высоким уровнем АМН

В пределах каждого протокола отсутствовали клинически релевантные различия между двумя группами обработки гонадотропином в категории с высоким уровнем АМН в отношении демографических показателей, истории фертильности и маркеров резервов яичника, как показано в Таблице 2 ниже. BMI был значимо ниже у женщин, которых лечили rFSH, но это не считалось клинически релевантным. (Однако возможно, что более высокий BMI мог бы притупить ответ яичников). В конце стимуляции наблюдали более высокие уровни эстрадиола (р равен 0,012) и более низкие уровни прогестерона (р меньше 0,001) с HP-hMG в протоколе с антагонистом и длинном протокле с агонистом соответственно.

Таблица 2. Сравнение исходного уровня, уровня в конце стимуляции, характеристик ооцитов и эмбрионов между женщинами, которых лечили HP-hMG и rFSH, с потенциалом к тому, чтобы быть сильными респондерами, по высокому уровню АМН в начале стимуляции.

Значения представляют собой медиану (IQR), если не указано иное.

*Критерий Уилкоксона (непрерывные данные); критерий хи-квадрат или точный критерий Фишера (категориальные данные).

Среди женщин с извлеченными ооцитами.

Ретроспективный анализ выявил, что HP-hMG был ассоциирован с меньшим медианным числом ооцитов, извлеченных у женщин с высоким уровнем АМН по сравнению с rFSH (длинный протокол с агонистом: минус 3 ооцита, р равен 0,007; протокол с антагонистом: минус 2 ооцита, р равен 0,033). В обоих протоколах процентная доля женщин с сильным ответом яичников была значимо ниже для HP-hMG по сравнению с rFSH (длинный протокол с агонистом: 33% относительно 51%, р равен 0,025; протокол с антагонистом: 31% относительно 49%, р равен 0,015) (см. Фиг. 1А). Следовательно, при использовании HP-hMG риск сильного ответа был снижен на 35 и 37% соответственно. Не было очевидных различий между двумя группами обработки гонадотропином в том, что касается отмен цикла из-за избыточного ответа, раннего умеренного/тяжелого OHSS или вмешательств из-за избыточного ответа в любом из двух протоколов.

В пределах каждого протокола показатель оплодотворения, число эмбрионов/бластоцист, доступных для переноса, женщин с эмбрионом(ами) наивысшего качества/бластоцистой(ами) хорошего качества и процентные доли женщин с переносом были аналогичными между группами HP-hMG и rFSH в категории с высоким уровнем АМН. Однако в обоих протоколах наблюдали статистическую тенденцию (р меньше 0,10) в отношении улучшенной частоты живорождения на начатый цикл для HP-hMG по сравнению с rFSH (см. Фиг. 1Б). Ограничиваясь женщинами с переносом эмбрионов, различие в частоте живорождения между HP-hMG и rFSH было статистически значимым (р равен 0,043) в протоколе с антагонистом.

При интеграции данных от женщин с высоким уровнем АМН из обоих протоколов лечение HP-hMG было ассоциировано со значимо меньшей частотой появления сильного ответа (32% (52/163) относительно 49% (89/180), р меньше 0,001) и повышенной частотой живорождений на начатый цикл (34% (55/163) относительно 22% (39/180), р равен 0,012), а также на цикл переноса эмбриона (41% (55/133) относительно 26% (39/148), р равен 0,008) по сравнению с обработкой rFSH. Логистический регрессионный анализ (Таблица 3 ниже) показал, что тип протокола GnRH не объяснял различие в частотах живорождения между HP-hMG и rFSH, так как оно оставалось значимым (р равен 0,012) в скорректированном анализе. Вероятность живорождений значимо возрастала с доступностью эмбрионов наивысшего качества/бластоцист хорошего качества для переноса (р меньше 0,001), в то время как повышенный уровень прогестерона (р равен 0,042) и повышенное отношение прогестерон/эстрадиол (р равен 0,042) в конце стимуляции значимо снижали вероятность живорождения (Таблица 3 ниже). Однако во всех скорректированных анализах различие между двумя препаратами гонадотропина оставалось значимым (р меньше 0,05), указывая на то, что более высокая частота живорождений у женщин с высоким уровнем АМН и стимуляцией HP-hMG не могла быть приписана к различиям в исследованных переменных в исходный момент времени и в конце стимуляции.

Данные результаты показывают, что распространенность пациентов с сильным ответом яичников (т.е. 15 или более извлеченных ооцитов) была приблизительно в три раза больше у женщин с высоким уровнем АМН (большим чем или равным 5,2 нг/мл), чем у женщин в категории с невысоким уровнем АМН как в длинном протоколе с агонистом GnRH, так и в протоколе с антагонистом GnRH. Хотя женщины с высоким уровнем АМН и показывали гиперответ яичников как в протоколе с антагонистом, так и с в длинном протоколе агонистом, стимуляция яичников HP-hMG была ассоциирована со значительно меньшей частотой сильного ответа, чем стимуляция rFSH. Следовательно, риск развития сильного ответа, когда прогнозируется избыточный ответ, может быть снижен приблизительно на треть посредством применения HP-hMG вместо FSH для контролируемой стимуляции яичников, даже в протоколе с антагонистом GnRH.

Не будучи связанными какой-либо теорией, возможно, что более умеренный ответ яичников при использовании HP-hMG и, следовательно, пониженный риск гиперответа с HP-hMG по сравнению с rFSH, может быть приписан, по меньшей мере частично, отличающимся профилям изоформ FSH HP-hMG и rFSH, что может влиять на биоактивность у человека in vivo и, посредством этого, на частоту сильного ответа яичников среди потенциальных сильных респондеров. Другими вносящими вклад факторами могут быть активность LH, предоставляемая HP-hMG, которая не присутствует в rFSH, и профиль изоформ постменопаузного FSH, обнаруживаемый в активности FSH HP-hMG.

Логистические регрессионные анализы в общей популяции не идентифицировали какой(их)-либо специфической(их) переменной(ых), которая(ые) объясняла(и) разные частоты живорождения между стимуляцией HP-hMG и rFSH, но показывали, что уровни прогестерона и отношения прогестерон/эстрадиол в конце стимуляции и доступность эмбрионов наивысшего качества/бластоцист хорошего качества (при морфологической оценке; анеуплоидию не оценивали) влияли на частоты живорождения.

Авторы изобретения обнаружили, что визуальная оценка ооцитов/эмбрионов в сутки три после извлечения [см., например, Ziebe et al., Human Reproduction 22(9) 2404-13 (2007)] не дает какого-либо показателя анеуплоидии. В самом деле, авторы изобретения обнаружили, что для «лучше всего выглядящих» ооцитов/эмбрионов не является необычным (на основе визуальной оценки в сутки три) то, что они обнаруживаются анеуплоидными (после хромосомного анализа/генетического скрининга) и приводят к безуспешному исходу. Следовательно, существует потребность в методике, которая увеличивает вероятность развития эуплоидных бластоцист (уменьшает долю/процентное содержание анеуплоидных бластоцист), таким образом, чтобы уменьшить акцент на визуальную оценку ооцитов/эмбрионов.

Дальнейший анализ результатов позволил авторам изобретения предположить, что применение HP-hMG для контролируемой стимуляции яичников имеет прямое влияние на улучшенное качество ооцитов и может уменьшать частоту анеуплоидии, и показывает, что прогестерон, отношение прогестерон/эстрадиол и качество эмбрионов играют роль в результате лечения у пациентов, подверженных риску гиперответа на основе высоких сывороточных уровней АМН.

Пример 2 - проспективное клиническое испытание

Рандомизированное, слепое для эксперта клиническое испытание фазы IV, сравнивающее HP-hMG и rFSH в цикле с антагонистом GnRH, с обязательным переносом одной бластоцисты в популяции субъектов-сильных респондеров запланировано в Соединенных Штатах. Целью данного исследования является демонстрация того, что HP-hMG по меньшей мере не хуже rFSH в отношении коэффициента продолжающейся беременности (OPR) у потенциальных сильных респондеров, подвергающихся лечению IVF/ICSI. Субъекты будут проспективно классифицированы как потенциальные сильные респондеры со стороны яичников на основе сывороточного уровня АМН, большего чем или равного 5,0 нг/мл (например, большего чем или равного 5,2 нг/мл) при определении посредством анализа Beckmann-Coulter Gen 2, как описано в Arce et al., Fertility and Sterility 99: 1644-53 (2013), с использованием одной справочной лаборатории (ReproSource, Inc., Woburn, MA), с использованием материалов и реактивов из анализа Beckman Coulter-DSL (Chaska, MN).

Рандомизированное открытое слепое для эксперта многоцентровое исследование фазы IV с параллельной группой будут проводить приблизительно в 25-30 центрах по лечению бесплодия в Соединенных Штатах. Будут включены приблизительно 600 женщин. Субъекты должны быть в возрасте от 21 вплоть до 36 лет, иметь регулярные овуляторные менструальные циклы от 21 до 35 суток, даже вплоть до 45 суток (от 21 до 45 суток), индекс массы тела (BMI) от 18 до 32 кг/м² или от 18 до 30 кг/м², необъяснимый или умеренный мужской фактор бесплодия в течение периода, большего чем или равного 1 году, быть подходящими для ICSI по мнению исследователя и иметь уровень АМН, больший чем или равный 5,0 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 нг/мл). Дополнительными критериями включения может быть наличие AFC, большего чем или равного 10, большего чем или равного 15, большего чем или равного 18, или большего чем или равного 20 в обоих яичниках вместе. Ключевые критерии исключения включают эндометриоз стадии I-IV, тяжелое бесплодие, связанное с мужским фактором, синдром поликистоза яичников (PCOS) и предыдущий плохой ответ на цикл COS. Дополнительными критериями исключения могут быть наличие AFC, меньшего чем 8 или меньшего чем 10 в обоих яичниках вместе.

Базовый протокол описан на Фиг. 2. Возможно прием комбинированных пероральных контрацептивных пилюль (СОСР), начатый в предыдущем менструальном цикле, будут продолжать максимум в течение 21 суток. Субъекты будут рандомизированы 1:1 для того, чтобы быть подвергнутыми COS либо HP-hMG, либо rFSH в цикле с антагонистом GnRH. После прерывания приема СОСР начнут прием гонадотропинов (либо HP-hMG, либо rFSH) в 3-й сутки кровотечения отмены, но не раньше, чем в 5-е сутки после прерывания приема СОСР. Доза гонадотропина будет начинаться с 150 IU в течение первых 5 суток. С суток 6 стимуляции и далее на основе фолликулярного ответа, оцениваемого посредством TVUS, дозировку можно корректировать каждые сутки, по мере необходимости, на 75 IU на корректировку. Однако максимальная доза гонадотропина будет составлять 300 IU/сутки; дозирование гонадотропина может продолжаться в течение максимум 20 суток. Отсрочка стимуляции овуляции запрещена.

Когда лидирующий фолликул составляет больше 14 мм в диаметре, будет инициировано введение антагониста GnRH (ганиреликс ацетат) с суточной дозой 0,25 мг и продолжаться на протяжении всего периода лечения гонадотропином. Для индуцирования конечного созревания фолликула будут вводить одну инъекцию 250 мкг hCG (хориогонадотропин альфа), как только на TVUS будут наблюдаться три фолликула с диаметром, большим чем или равным 17 мм. Если субъект имеет больше 25 фолликулов, она будет получать триггер в виде агониста GnRH, и все образующиеся бластоцисты будут верифицированы после биопсии трофоэктодермы, без переноса свежего эмбриона для уменьшения риска OHSS.

Извлечение ооцитов будет происходить ориентировочно через 36 часов после введения hCG. Ооциты будут осеменены с использованием спермы партнера посредством ICSI через 4 плюс/минус 1 час после извлечения. Качество ооцитов, эмбрионов и бластоцист будут оценивать ежесуточно в течение 5 суток после извлечения ооцитов. В сутки 5 после ICSI будет перенесена одна бластоциста наилучшего доступного качества; все остальные бластоцисты будут заморожены с использованием способа витрификации.

Биопсию трофоэктодермы (ТЕ) для предимплантационного генетического скрининга (PGS), возможно с использованием технологии секвенирования следующего поколения (NGS), будут осуществлять с использованием лазера в сутки 5 или сутки 6 выросшей бластоцисты, но результаты не будут использовать для определения отбора бластоцисты для переноса в свежем состоянии.

Через сутки после извлечения ооцита будет инициировано введение вагинальных прогестероновых вставок (100 мг дважды в сутки - Endometrin®; Ferring) для поддержки лютеальной фазы, и оно будет продолжаться до суток анализа на β-hCG (через 10-15 суток после переноса бластоцист/эмбрионов). Лютеальную поддержку может продолжать, пока не будет подтверждена продолжающаяся беременность.

Биохимическая беременность будет подтверждена по позитивному β-hCG приблизительно через 2 недели после переноса бластоцисты. Клиническая беременность будет подтверждена посредством TVUS, показывающего по меньшей мере один внутриматочный плодный мешок с сердцебиением плода в 5-6 недель беременности. Продолжающаяся беременность будет подтверждена по по меньшей мере одному внутриматочному жизнеспособному плоду в 10-11 недель беременности.

Для субъектов без продолжающейся беременности в свежем цикле переносы одиночных замороженных бластоцист могут быть инициированы в пределах 1 года с начала лечения каждого субъекта. Результаты PGS будут использованы для отбора эуплоидных бластоцист для переноса после замораживания. Будут собраны данные по циклу замены замороженных-оттаявших эмбрионов, включая информацию по переносу бластоцист, анализу β-hCG, клинической беременности и продолжающейся беременности.

Последующее наблюдение после испытания будет включать сбор информации по родам (живорождение и здоровье новорожденного), которая будет собрана для всех субъектов с продолжающейся беременностью в свежем цикле или в 1-летних циклах замены замороженных-оттаявших эмбрионов после рандомизации. В качестве части последующего наблюдения после испытания будут оценивать частоту живорождения после цикла с использованием свежего эмбриона и совокупная частота живорождения после цикла с использованием свежего эмбриона и 1-летнего цикла замены замороженных-оттаявших эмбрионов после рандомизации.

Используемым HP-hMG будет Менопур, предоставленный в виде флакона с порошком (75 IU активности FSH и 75 IU активности LH), и 2 предварительно заполненных шприца с растворителем (каждый содержит 1,1 мл). После восстановления каждый флакон доставляет 75 IU активности FSH и 75 IU активности LH.

Используемым FSH будет рекомбнантный FSH (GONAL-F), предоставленный в виде шприца-ручки и картриджей, заполненных 300, 450 или 900 IU активности FSH на 1,08 мл раствора для инъекции.

Другими используемыми лекарственными средствами будут:

- Инъекция ганиреликса ацетата, изготовленная Merck, предоставленная в виде предварительно заполненного шприца (0,5 мл), доставляющего 0,25 мг ганиреликса. Введение ежесуточной дозы 0,25 мг будут продолжать на протяжении всего периода лечения гонадотропином.

- Овидрел (хориогонадотропин альфа), изготовленный EMD Serono, предоставленный в виде предварительно заполненного шприца (0,5 мл), доставляющего 250 мкг хориогонадотропина альфа, подлежащего введению в виде однократной инъекции, как только на TVUS будут наблюдаться 3 фолликула диаметра, большего чем или равного 17 мм.

- Эндометрии (прогестерон), изготовленный Ferring, будет предоставлен в виде капсул, подлежащих введению вагинально 2 раза в сутки, причем каждая доставляет 100 мг прогестерона (200 мг/сутки).

Первичный ожидаемый результат представляет собой коэффициент продолжающейся беременности, определенный как присутствие по меньшей мере одной внутриматочной беременности с жизнеспособным плодом с выявляемым сердцебиением плода на 10-11 неделях беременности. Вторичные ожидаемые результаты включают:

- коэффициент биохимической беременности (позитивные в отношении β-hCG)

- коэффициент клинической беременности (трансвагинальная ультрасонография, показывающая по меньшей мере один внутриматочный плодный мешок с сердцебиением плода на 5-6 неделях беременности)

- ранняя потеря беременности (определенная как 2 позитивных анализа β-hCG, но отсутствие продолжающейся беременности на 10-11 неделях беременности в свежем цикле.)

- показатель живорождения

- развитие фолликулов, оцениваемое посредством TVUS, уровень фолликулов (общее число фолликулов, число фолликулов, меньших чем или равных 9 мм, 10-11 мм, 12-14 мм, 15-16 мм и больших чем или равных 17 мм) и уровень у субъекта (размер наибольшего фолликула, средний размер фолликула, средний размер 3 наибольших фолликулов и среднее число фолликулов, больших чем или равных 17 мм, больших чем или равных 15 мм и больших чем или равных 12 мм).

- эндокринный профиль (сывороточный эстрадиол [Е2], прогестерон [Р4], hCG, LH)

- извлеченные ооциты, частота оплодотворения и качество эмбрионов.

Число извлеченных ооцитов, число ооцитов в метафазе II и число нормально оплодотворенных (2PN) ооцитов будут обобщены посредством частотного распределения и посредством описательной статистики для каждой группы обработки.

Стадию зрелости ооцитов будут оценивать до проведения ICSI. Стадию зрелости будут классифицировать как зародышевый пузырек, метафаза I, метафаза II, дегенерировавший или другие.

Частота оплодотворения будет выражена в виде процентной доли для каждого субъекта и рассчитана как отношение числа оподотворенных 2PN ооцитов к числу извлеченных ооцитов, умноженное на 100.

Качество эмбрионов через 3 суток после извлечения ооцитов будут оценивать по стадии дробления, однородности бластомеров, размеру клеток, степени фрагментации и визуальным признакам многоядерности.

Качество бластоцист через 5 суток после извлечения ооцитов будут оценивать по статусу увеличения бластоцисты и высвобождения эмбриона, рангу массы внутренних клеток бластоцисты и рангу трофэктодермы. Для каждой группы обработки на уровне бластоцисты будут предоставлены частотные распределения. Бластоциста наилучшего качества через 5 суток после извлечения ооцитов на уровне субъекта будет обобщена для бластоцист превосходного качества и бластоцист хорошего качества по отдельности посредством обработки с использованием описательной статистики.

- коэффициент анеуплоидии

Коэффициент анеуплоидии будет выражен как процентная доля для каждого субъекта и рассчитан как отношение числа анеуплоидных бластоцист к общему числу бластоцист, умноженное на 100. Число анеуплоидных бластоцист может быть определено, например, способами, описанными выше (например, хромосомным анализом, таким как PGS, CCS).

- оценка эндометрия посредством TVUS

Толщина эндометрия и картина эхогенности будут обобщены посредством частотного распределения и посредством описательной статистики, сообразно обстоятельствам, для каждой группы обработки в сутки стимуляции 6, последние сутки стимуляции и во время переноса бластоцисты в свежем цикле.

Тестирование эмбрионов и бластоцист

Число и качество эмбрионов в сутки 3

Каждый эмбрион будут оценивать в сутки 3 после осеменения. Оценка качества будет заключаться в оценке стадии дробления и параметров морфологии эмбриона (однородность бластомеров, размер клеток, степень фрагментации и визуальные признаки многоядерности).

Стадию дробления будут определять по числу бластомеров.

Однородность бластомеров будут классифицировать как бластомеры равного размера или бластомеры неравного размера (наибольший бластомер более чем на 25% больше по среднему диаметру по сравнению с наименьшим бластомером).

Размер клеток будут классифицировать как стадиеспецифичный размер клеток или нестадиеспецифичный размер клеток. Степень фрагментации будут классифицировать как одну из следующих: 0%, 1-10%, 11-20%, 21-25%, 26-30%, 31-50% или более 50% фрагментации, или полностью фрагментированные (не распознаются бластомеры).

Визуальные признаки многоядерности будут оценивать как «да» или «нет».

Число и качество бластоцист в сутки 5

Статус увеличения бластоцист и высвобождения эмбриона, ранжирование массы внутренних клеток бластоцисты и ранжирование трофэктодермы

Оценка качества бластоцист в сутки 5 после извлечения ооцитов будет состоять из оценки 3 параметров: статуса увеличения бластоцист и высвобождения эмбриона, ранга массы внутренних клеток бластоцисты и ранга трофэктодермы. Бальная оценка основана на системе классификации Gardner & Schoolcraft, 1999 [Gardner DK, Schoolcraft WB. In vitro culture of human blastocysts. In: Towards reproductive certainty (Eds Jansen R & Mortimer D). The plenary proceedings of the 11th world congress on in vitro fertilization and human reproductive genetics. The Parthenon Publishing Group.1999. 378-88.], с добавлением категорий D для массы внутренних клеток и трофэктодермы.

Статус увеличения бластоцист и высвобождения эмбриона будут оценивать как одно из следующих:

1: Ранняя бластоциста, бластоцель меньше, чем половина объема эмбриона.

2: Бластоциста с бластоцелем, объем которого составляет половину или больше, чем половину объема эмбриона.

3: Бластоциста с бластоцелем, полностью заполняющим эмбрион.

4: Увеличенная бластоциста с объемом бластоцеля, большим, чем объем раннего эмбриона, с зоной утоньшения.

5: Бластоциста на стадии высвобождения эмбриона с трофэктодермой, начинающей выпячиваться через оболочку (zona).

6: Бластоциста после высвобождения эмбриона, где бластоциста полностью покинула оболочку (zona).

Для бластоцист со статусом увеличения и высвобождения эмбриона 3-6 будут оценивать ранг массы внутренних клеток бластоцисты и ранг трофэктодермы.

Ранг массы внутренних клеток бластоцисты будут оценивать как один из следующих:

А: плотно упакованные, много клеток.

В: рыхло сгруппированные, несколько клеток.

С: очень мало клеток.

D: дегенерировавшая масса внутренних клеток или нет массы внутренних клеток.

Ранг трофэктодермы будут оценивать как один из следующих:

А: много клеток, образующих связанный эпителий.

В: мало клеток, образующих рыхлый эпителий.

С: очень мало, большие клетки

D: дегенерировавшие или очень большие клетки.

Бластоцисты со статусом увеличения и высвобождения эмбриона 3-6 будут иметь балл, объединяющий три параметра (статус увеличения бластоцисты и высвобождения эмбриона, масса внутренних клеток и трофэктодерма); например 4АВ для бластоцисты со статусом увеличения бластоцисты и высвобождения эмбриона 4, рангом массы внутренних клеток А и рангом трофэктодермы В.

Общее качество бластоцист в сутки 5

Общее качество бластоцист в сутки 5 основано на статусе увеличения бластоцист и высвобождения эмбриона, ранге массы внутренних клеток и ранге трофэктодермы.

Бластоцисты превосходного качества определяют как бластоцисты со статусом увеличения и высвобождения эмбриона 4, 5 или 6, рангом массы внутренних клеток А и рангом трофэктодермы А или В. Число и процентная доля бластоцист превосходного качества в сутки 5 представляет собой вторичный ожидаемый результат. Это будет основано на наилучшем общем бальном показателе качества оценок после осеменения в сутки 5.

Бластоцисты хорошего качества определяют как бластоцисты со статусом увеличения бластоцисты и высвобождения эмбриона 3, 4, 5 или 6, рангом массы внутренних клеток А или В и рангом трофэктодермы А или В. Число и процентная доля бластоцист хорошего качества в сутки 5 будут основаны на наилучшем общем бальном показателе качества.

Будут рассчитаны число и процентная доля бластоцист превосходного качества и бластоцист хорошего качества в сутки 5. Наилучшие бластоцисты на основе морфологии в сутки 5 будут перенесены.

Оценка уплотнения в морулах

Эмбрионы, которые не достигли стадии бластоцисты в сутки 5, но представляют собой морулы, также будут оценивать. Морулы будут классифицировать как 1 из следующих 3 вариантов:

Уплотнившиеся: полное уплотнение. Тесно уплотненные клетки. Индивидуальные клеточные мембраны больше не видны.

Уплотняющиеся: ранняя стадия. Клетки могут быть различены.

Ненормальное уплотнение: региональное или частичное уплотнение, или мало клеток (меньше 8), участвущих в уплотнении.

В сутки 5 морулы можно рассматривать для длительной культуры согласно стандарту лечения, определяемому исследователем/местом.

В сутки 6 эмбрионы можно затем подвергать биопсии трофэктодермы и витрификации или можно выбросить. Качество эмбрионов в сутки 6 следует оценивать и записывать в eCRF (электронная история болезни) способом, аналогичным способу, описанному выше.

Ожидаемые результаты после клинического испытания включают:

совокупную частоту живорождения для переноса бластоцист в свежем состоянии и после замораживания (определяемую как доля субъектов с по меньшей мере 1 жизнеспособным живорождением на стадии беременности больше 21 недели);

частоту живорождения для переноса бластоцист в свежем состоянии (определяемую как доля субъектов с по меньшей мере 1 жизнеспособным живорождением на стадии беременности больше 21 недели);

частоту ранней потери беременности при переносе бластоцист после замораживания, которая определяется как 2 позитивных анализа β-hCG, но отсутствие продолжающейся беременности в недели 10-11 беременности в цикле переноса после замораживания;

частоту поздней потери беременности (определяемую как подтвержденная продолжающаяся беременность, но отсутствие жизнеспособного живорождения на стадии беременности больше 21 недели); и

частоту позитивных анализов на β-hCG, коэффициент клинической беременности и коэффициент продолжающейся беременности для переносов бластоцист после замораживания.

Авторы настоящего изобретения считают, что данное исследование покажет, что осуществление стимуляции HP-hMG у женщин, подверженных риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников, улучшает качество эмбрионов, увеличивает долю эуплоидных бластоцист, уменьшает долю анеуплоидных бластоцист, уменьшает частоту анеуплоидии, увеличивает коэффициенты продолжающейся беременности и/или увеличивает частоты живорождения по сравнению со сравнимыми способами с использованием рекомбинантного фолликулостимулирующего гормона (rFSH) в качестве гонадотропина. Например, авторы настоящего изобретения считают, что данное исследование покажет, что осуществление стимуляции HP-hMG у женщин, подверженных риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников, приведет к меньшему числу яйцеклеток, но большей доле эуплоидных бластоцист по сравнению со сравнимыми способами с использованием rFSH в качестве гонадотропина. Кроме того, авторы настоящего изобретения считают, что данное исследование покажет, что осуществление стимуляции HP-hMG у женщин, подверженных риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников, приведет к меньшему числу яйцеклеток, но к меньшей частоте анеуплоидии по сравнению со сравнимыми способами с использованием rFSH в качестве гонадотропина.

Выше были раскрыты продукты и способы, определенные следующими пронумерованными абзацами:

1. Способ улучшения качества эмбриона, полученного посредством оплодотворения in vitro после контролируемой стимуляции яичников у женщины, подверженной риску сильного ответа яичников на нее, включающий:

отбор женщины, подверженной риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников, имеющей сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) при измерении с использованием анализа Beckmann-Coulter Gen 2, или сравнимый уровень АМН, измеренный другим способом; и

введение отобранной женщине эффективного количества высокоочищенного менотропина (HP-hMG) для стимуляции развития фолликулов.

2. Способ улучшения качества эмбриона, полученного посредством оплодотворения in vitro после контролируемой стимуляции яичников у женщины, подверженной риску сильного ответа яичников на нее, включающий введение эффективного количества высокоочищенного менотропина (HP-hMG) для стимуляции развития фолликулов женщине, отобранной как подверженная риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников, где отобранная женщина имеет сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) при измерении с использованием анализа Beckmann-Coulter Gen 2, или сравнимый уровень АМН, измеренный другим способом.

3. Способ увеличения доли эуплоидных бластоцист, полученных посредством оплодотворения in vitro после контролируемой стимуляции яичников у женщины, подверженной риску сильного ответа яичников на нее, включающий:

4. Способ увеличения процентной доли эуплоидных бластоцист, полученных посредством оплодотворения in vitro после контролируемой стимуляции яичников у женщины, подверженной риску сильного ответа яичников на нее, включающий введение эффективного количества высокоочищенного менотропина (HP-hMG) для стимуляции развития фолликулов женщине, отобранной как подверженная риску сильного ответа на контролируемую стимуляцию яичников, где отобранная женщина имеет сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) при измерении с использованием анализа Beckmann-Coulter Gen 2, или сравнимый уровень АМН, измеренный другим способом.

5. Способ лечения бесплодия у женщины, подверженной риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников, включающий:

отбор женщины, подверженной риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников, имеющей (1) сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) при измерении с использованием анализа Beckmann-Coulter Gen 2, или сравнимый уровень АМН, измеренный другим способом; и

6. Способ лечения бесплодия у женщины, подверженной риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников, включающий введение эффективного количества высокоочищенного менотропина (HP-hMG) для стимуляции развития фолликулов женщине, отобранной как подверженная риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников, где отобранная женщина имеет сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) при измерении с использованием анализа Beckmann-Coulter Gen 2, или сравнимый уровень АМН, измеренный другим способом.

7. Способ осуществления контролируемой стимуляции яичников у женщины, подверженной риску сильного ответа яичников на нее, включающий:

8. Способ осуществления контролируемой стимуляции яичников у женщины, подверженной риску сильного ответа яичников на нее, включающий введение эффективного количества высокоочищенного менотропина (HP-hMG) для стимуляции развития фолликулов женщине, отобранной как подверженная риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников, где отобранная женщина имеет сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) при измерении с использованием анализа Beckmann-Coulter Gen 2, или сравнимый уровень АМН, измеренный другим способом.

9. Способ увеличения коэффициентов продолжающейся беременности у женщины, подверженной риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников, включающий:

10. Способ увеличения коэффициентов продолжающейся беременности у женщины, подверженной риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников, включающий введение эффективного количества высокоочищенного менотропина (HP-hMG) для стимуляции развития фолликулов женщине, отобранной как подверженная риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников, где отобранная женщина имеет сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) при измерении с использованием анализа Beckmann-Coulter Gen 2, или сравнимый уровень АМН, измеренный другим способом.

11. Способ увеличения показателей частоты живорождения у женщины, подверженной риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников, включающий:

12. Способ увеличения частоты живорождения у женщины, подверженной риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников, включающий введение эффективного количества высокоочищенного менотропина (HP-hMG) для стимуляции развития фолликулов женщине, отобранной как подверженная риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников, где отобранная женщина имеет сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН), больший чем или равный 5,0 плюс/минус 0,5 нг/мл (например, больший чем или равный 5,2 плюс/минус 0,5 нг/мл) при измерении с использованием анализа Beckmann-Coulter Gen 2, или сравнимый уровень АМН, измеренный другим способом.

13. Способ по любому из пунктов 1-12, где женщина имеет число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 10, в обоих яичниках вместе до стимуляции.

14. Способ по любому из пунктов 1-12, где женщина имеет число антральных фолликулов (AFC), большее чем или равное 15, в обоих яичниках вместе до стимуляции.

15. Способ по любому из пунктов 1-12, приводящий к увеличенной доле эуплоидных бластоцист по сравнению с сопоставимым способом с использованием рекомбинантного фолликулостимулирующего гормона (rFSH) в качестве гонадотропина.

16. Способ по любому из пунктов 1-12, приводящий к увеличенному коэффициенту продолжающейся беременности.

17. Способ по любому из пунктов 1-12, приводящий к увеличенной частоте живорождения.

18. Способ по любому из пунктов 1-12, где количество вводимого HP-hMG составляет от 75-300 IU в сутки в течение от примерно 1 до примерно 20 суток.

19. Способ по любому из пунктов 1-12, где количество вводимого HP-hMG составляет от 75-200 IU в сутки в течение от примерно 1 до примерно 20 суток.

20. Способ по любому из пунктов 1-12, где HP-hMG вводят в течение по меньшей мере 5 суток.

21. Способ по любому из пунктов 1-12, дополнительно включающий введение агониста гормона, высвобождающего гормон гонадотропин (GnRH).

22. Способ по любому из пунктов 1-12, дополнительно включающий введение антагониста GnRH.

23. Способ по любому из пунктов 1-12, дополнительно включающий введение эффективного количества hCG для запуска овуляции.

24. Способ по пункту 23, дополнительно включающий сбор ооцитов у женщины.

25. Способ по пункту 25, дополнительно включающий оплодотворение собранных ооцитов in vitro.

26. Способ по пункту 25, в котором оплодотворение in vitro включает внутрицитоплазматическую инъекцию спермы (ICSI).

27. Способ по любому из пунктов 1-12, дополнительно включающий оценку качества хромосом бластоцист, полученных от женщины после оплодотворения in vitro ооцитов, отобранных у женщины.

28. Способ по пункту 27, дополнительно включающий перенос бластоцисты, определенной как эуплоидная бластоциста.

29. Способ по пункту 28, где перенос представляет собой перенос в свежем состоянии.

30. Способ по пункту 27, дополнительно включающий замораживание бластоцисты, определенной как эуплоидная бластоциста.

1. Способ лечения бесплодия у пациента для стимуляции, посредством этого, развития эуплоидных бластоцист для будущего переноса бластоцист, включающий:

идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН) больше или равный 4,7 нг/мл и число антральных фолликулов (AFC) больше или равное 10 в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции; и

введение дозы от 75 до 300 IU (международная единица) или эквивалентной дозы hMG (человеческий менопаузный гонадотропин) в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения.

2. Способ по п. 1, где лечение для стимуляции развития эуплоидных бластоцист для будущего переноса бластоцист увеличивает долю/процентное содержание эуплоидных бластоцист по сравнению с долей/процентным содержанием анеуплоидных бластоцист и/или уменьшает частоту анеуплоидии.

3. Способ стимуляции развития эуплоидных бластоцист, включающий:

введение дозы от 75 до 300 IU или эквивалентной дозы hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения.

4. Способ по любому из пп. 1-3, дополнительно включающий:

введение hCG (хориогонадотропин альфа) для стимуляции овуляции.

5. Способ по любому из пп. 1-4, дополнительно включающий:

извлечение (например, сбор) ооцита(ов);

оплодотворение (например, осеменение) ооцита(ов); и

обеспечение развития оплодотворенных ооцитов до стадии бластоцисты.

6. Способ по п. 5, дополнительно включающий оценку качества хромосом бластоцист(ы), полученной(ых) после оплодотворения собранных ооцитов.

7. Способ по п. 6, дополнительно включающий перенос эуплоидной бластоцисты, идентифицированной посредством оценки качества хромосом бластоцист(ы); или замораживание эуплоидной бластоцисты, идентифицированной посредством оценки качества хромосом бластоцист(ы).

8. Способ по любому из пп. 1-7, где hMG представляет собой высокоочищенный менотропин (HP-hMG).

9. Способ по любому из пп. 1-8, включающий стадию введения пациенту дозы от 75 до 200 IU или эквивалентной дозы HP-hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения.

10. Способ по любому из пп. 1-9, включающий стадию введения пациенту дозы 150 IU или эквивалентной дозы HP-hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения.

11. Способ по любому из пп. 1-10, включающий дополнительную стадию введения антагониста GnRH (гонадотропин-высвобождающий гормон) в сутки 6 лечения.

12. Способ лечения бесплодия у женщины, не имеющей PCOS (синдром поликистоза яичников), подверженной риску сильного ответа яичников на контролируемую стимуляцию яичников, включающий:

введение дозы от 75 до 300 IU или эквивалентной дозы hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения.

13. Способ по любому из пп. 1-12, включающий идентификацию пациента, имеющего сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН) больше или равный 4,7 нг/мл и число антральных фолликулов (AFC) больше или равное 15 в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции.

14. Способ лечения бесплодия для стимуляции, посредством этого, развития эуплоидных бластоцист для будущего переноса бластоцист у пациента, идентифицированного как имеющий сывороточный уровень антимюллеровского гормона (АМН) больше или равный 4,7 нг/мл до лечения/стимуляции и число антральных фолликулов (AFC) больше или равное 10 в обоих яичниках вместе до лечения/стимуляции; включающий введение дозы от 75 до 300 IU или эквивалентной дозы hMG в сутки с суток 1 до по меньшей мере суток 5 лечения.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, может быть использовано после хирургических вмешательств в полости матки, а также гистероскопии.

Способ подготовки семенного материала в репродуктивной технологии icsi // 2719373

Изобретение относится к медицине, а именно к репродуктологии, и может быть использовано для подготовки семенного материла для репродуктивной технологии ICSI (Intra Cytoplasmic Sperm Injection).

Средство для коррекции отдаленных последствий нарушений сперматогенеза, вызванных цитостатическим воздействием // 2717240

Изобретение относится к области медицины и фармацевтической промышленности, а именно к применению 4-гидроксиметил-2,6-диизоборнилфенола в качестве средства для коррекции отдаленных последствий нарушений сперматогенеза, вызванных цитостатическим воздействием.

Фармацевтическое применение соединения гексагидродибензо[a, g]хинолизина // 2704257

Группа изобретений относится к медицине Предложено: применение соединения гексагидродибензо[а,g]хинолизина формулы (I) для получения лекарственного средства для лечения и/или предупреждения доброкачественной гиперплазии предстательной железы; применение того же соединения в качестве ингибитора для лечения доброкачественной гиперплазии простаты, для антагонизма на вызванное норэпифрином сокращение гладкой мышцы уретры, для антагонизма на вызванное норэпифрином сокращение гладкой мышцы предстательной железы, для получения ингибитора, селективно связывающегося с α1А-адренэргическим рецептором; нетерапевтический способ in vitro ингибирования α1А-адренэргического рецептора; способ лечения и/или предупреждения доброкачественной гиперплазии простаты; фармацевтическая композиция того же назначения и способ получения фармацевтической композиции.

Способ лечения хронического эндометрита // 2701148

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для лечения больных с хроническим эндометритом. На 2-3 день после фотодинамической терапии проводят внутриматочную инстилляцию кондиционной макрофагальной средой в объеме 1 мл на кресле с приподнятым тазовым концом с экспозицией 30 минут, ежедневно в течение 1 менструального цикла 9-15 раз.

Препарат для лечения гипофункции яичников у коров и способ его применения // 2698304

Группа изобретений относится к области ветеринарии и представляет собой препарат для лечения гипофункции яичников у коров, включающий в качестве компонентов Apis mellifelica, Pulsatilla pratensis, Sulfur, Sepia, Lachesis, Creazotum, отличающийся тем, что дополнительно содержит Aristolochia, причем компоненты в препарате находятся в определенном соотношении, в мас.%, а также к способу лечения гипофункции яичников у коров, включающему введение вышеуказанного препарата подкожно или внутримышечно в количестве 5 мл 3-5 раз с интервалом в 3-5 дней.

Способ коррекции трофических нарушений эндометрия // 2695338

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для коррекции трофических нарушений эндометрия. Для этого предварительно на 5-7-й и 20-24-й день менструального цикла рассчитывают объем полости матки при трансвагинальном ультразвуковом исследовании.

Фармацевтические композиции микросфер гозерелина с пролонгированным высвобождением // 2694901

Изобретение относится к медицине, в частности к композиции микросфер гозерелина ацетата с пролонгированным высвобождением, а также к их применению для получения лекарственного средства для лечения рака предстательной железы, преждевременного полового созревания, аденомиоза, женского бесплодия или гистеромиомы.

Способ лечения наружного генитального эндометриоза // 2693050

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для лечения наружного генитального эндометриоза (НГЭ). Для этого вводят мелатонин в дозе 6 мг перорально один раз в сутки ежедневно в течение не менее 6 месяцев.

Способ повышения эффективности протоколов экстракорпорального оплодотворения у пациенток с хроническим эндометритом и неудачами имплантации // 2691993

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для повышения эффективности протоколов экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) у пациенток с хроническим эндометритом и неудачами имплантации.

Способ профилактики внутриматочных синехий после внутриматочных оперативных вмешательств // 2722261