Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей



Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей
Y02A40/162 -
Y02A40/162 -
C12N15/8218 - Получение мутаций или генная инженерия; ДНК или РНК, связанные с генной инженерией, векторы, например плазмиды или их выделение, получение или очистка; использование их хозяев (мутанты или микроорганизмы, полученные генной инженерией C12N 1/00,C12N 5/00,C12N 7/00; новые виды растений A01H; разведение растений из тканевых культур A01H 4/00; новые виды животных A01K 67/00; использование лекарственных препаратов, содержащих генетический материал, который включен в клетки живого организма, для лечения генетических заболеваний, для генной терапии A61K 48/00 пептиды вообще C07K)

Владельцы патента RU 2725953:

ДЕВГЕН НВ (BE)

Изобретение относится к области биотехнологии. Описана группа изобретений, включающая двухцепочечную рибонуклеиновую кислоту (дцРНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, ДНК-конструкцию для экспрессии вышеуказанной дцРНК, клетку-хозяин, композицию для предотвращения или борьбы с нападением насекомых-вредителей, применение композиции для предотвращения и/или борьбы с нападением вредителя, применение композиции в качестве пестицида для растений, способ подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого- вредителя с целью предотвращения и/или борьбы с нападением вредителей, применение дцРНК, ДНК-конструкции или композиции для предотвращения или борьбы с нападением насекомого-вредителя, и набор, содержащий дцРНК, ДНК-конструкцию или композицию, для предотвращения или борьбы с нападением насекомого-вредителя и один подходящий разбавитель или носитель. Изобретение расширяет арсенал средств для подавления экспрессии гена-мишени у насекомых-вредителей. 9 н. и 17 з.п. ф-лы, 21 табл., 6 пр., 21 ил.

 

Область изобретения

Настоящее изобретение относится в целом к генетическому контролю нападения видов насекомых-вредителей, в частности, предотвращению и/или борьбе с нападением вредителей на растения. Более конкретно, настоящее изобретение относится к подавлению экспрессии генов-мишеней у видов насекомых-вредителей с помощью интерферирующих молекул рибонуклеиновой кислоты (РНК). Также предлагаются композиции и комбинации, содержащие интерферирующие молекулы РНК по настоящему изобретению для использования в местных применениях, например, в форме инсектицидов.

Предпосылки изобретения

Существует множество видов насекомых-вредителей, которые могут поражать или нападать на большое множество местообитаний и организмов-хозяев. Насекомые-вредители включают разнообразные виды из отрядов насекомых Hemiptera (клопы), Coleoptera (жуки), Siphonaptera (блохи), Dichyoptera (тараканы и богомолы), Lepidoptera (моли и бабочки), Orthoptera (например, кузнечики) и Diptera (настоящие мухи). Нападение вредителей может приводить к значительному ущербу. Насекомые-вредители, которые нападают на виды растений, вызывают особые проблемы в сельском хозяйстве, поскольку они могут приводить к серьезному повреждению сельскохозяйственных культур и значительно снижать урожайность растений. Большое разнообразие различных типов растений, включая товарные культуры, такие как рис, хлопчатник, соя, картофель и кукуруза, чувствительны к нападению вредителей.

Традиционно, нападение насекомых-вредителей предотвращают или контролируют посредством применения химических пестицидов. Однако данные химические вещества не всегда пригодны для применения в обработке сельскохозяйственных культур, так как они могут являться токсичными для других видов и могут наносить значительный ущерб окружающей среде. За последние десятилетия исследователи разработали более экологически безопасные способы контроля нападения вредителей. Например, применялись микроорганизмы, такие как бактерии Bacillus thuringiensis, которые в естественных условиях экспрессируют белки, токсичные для насекомых-вредителей. Ученые также выделили гены, кодирующие эти инсектицидные белки, и использовали их для создания трансгенных культур, устойчивых к насекомым-вредителям, например, растения кукурузы и хлопчатника, генетически сконструированные для продуцирования белков семейства Cry.

Хотя бактериальные токсины являлись весьма успешными в борьбе с определенными типами вредителей, они не эффективны против всех видов вредителей. Исследователи, следовательно, искали другие, более целенаправленные подходы к борьбе с вредителями и, в частности, к РНК-интерференции или “сайленсингу генов” в качестве средств для борьбы с вредителями на генетическом уровне.

РНК-интерференция или ʺRNAiʺ является процессом, посредством которого экспрессия генов в отношении клетки или всего организма подавляется последовательность-специфическим образом. RNAi является в настоящее время общепризнанным методом в данной области для ингибирования или подавления экспрессии генов у самых разнообразных организмов, включая организмы-вредители, такие как грибы, нематоды и насекомые. Кроме того, предыдущие исследования показали, что подавление экспрессии генов-мишеней у видов насекомых-вредителей можно использовать в качестве средства для борьбы с нападением вредителей.

WO2007/074405 описывает способы ингибирования экспрессии генов-мишеней у беспозвоночных вредителей, включая колорадского жука. Кроме того, WO2009/091864 описывает композиции и способы подавления генов-мишеней у видов насекомых-вредителей, включая вредителей из рода Lygus.

Хотя применение RNAi для подавления экспрессии генов у видов вредителей в данной области известно, успех данного метода в применении в качестве меры борьбы с вредителями зависит от выбора наиболее подходящих генов-мишеней, а именно тех, у которых потеря функции приводит к значительному нарушению жизненно важного биологического процесса и/или гибели организма. Настоящее изобретение, таким образом, направлено на подавление конкретных генов-мишеней у насекомых-вредителей в качестве средства достижения более эффективного предотвращения и/или борьбы с нападением насекомых-вредителей, в частности на растения.

Краткое описание изобретения

Авторы настоящего изобретения пытались идентифицировать улучшенные средства для предотвращения и/или борьбы с нападением насекомых-вредителей с применением генетических подходов. В частности, они исследовали применение RNAi для подавления генов таким образом, чтобы снизить способность насекомых-вредителей выживать, расти, колонизировать специфические местообитания и/или нападать на организмы-хозяева, и таким образом ограничить ущерб, наносимый вредителем.

Таким образом, в соответствии с одним аспектом настоящего изобретения предлагается интерферирующая рибонуклеиновая кислота (РНК или двухцепочечная РНК), которая функционирует при поглощении видами насекомых-вредителей с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя,

при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, при этом сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или имеющую такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59 -62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или

(iv) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, таким образом, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной соответствующему указанному фрагменту любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или

(v) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43- 46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389, или

(vi) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 70%, предпочтительно по меньшей мере на 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389.

В конкретном аспекте настоящего изобретения молекулы интерферирующей РНК по настоящему изобретению содержат по меньшей мере одну двухцепочечную область, как правило, сайленсирующий элемент интерферирующей РНК, содержащий смысловую цепь РНК, соединенную путем комплементарного спаривания оснований с антисмысловой цепью РНК, где смысловая цепь молекулы dsRNA содержит последовательность нуклеотидов, комплементарную последовательности нуклеотидов, расположенной в пределах РНК-транскрипта гена-мишени.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК или двухцепочечной РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или

(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75% предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, или

(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233.

Эти гены-мишени кодируют белки, входящие в состав комплекса тропонин/миофиламент.

В дополнительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК или двухцепочечной РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности или

(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75% предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, или

(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273.

Эти гены-мишени кодируют рибосомальные белки насекомых.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей РНК, которая содержит по меньшей мере одну двухцепочечную область, как правило, сайленсирующий элемент молекулы интерферирующей РНК, содержащий смысловую цепь РНК, соединенную путем комплементарного спаривания оснований с антисмысловой цепью РНК, где смысловая цепь молекулы dsRNA содержит последовательность по меньшей мере из 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или 100% комплементарной последовательности нуклеотидов, расположенной в пределах РНК-транскрипта гена-мишени из комплекса тропонин/миофиламент.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок wings up A (тропонин I) насекомых (например, у насекомых ортолог белка CG7178 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 1, 2, 174, 404, 175, 180, 181, 188 и 189. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или несколькими из SEQ ID NO 79, 349, 405, 352 или 356.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок upheld (например, у насекомых ортолог белка CG7107 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 121, 130, 142, 143, 176, 177, 182 и 183. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или несколькими из SEQ ID NO 330, 350 или 353.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок тропомиозин 1 (например, у насекомых ортолог белка CG4898 Dm) или белок тропомиозин 2 (например, у насекомых ортолог белка CG4843 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 123 и 132. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 332.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует тяжелую цепь миозина (например, у насекомых ортолог белка CG17927 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 122, 131, 144, 145, 178 и 179. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или несколькими из SEQ ID NO 331 или 351.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует цитоплазматический белок легкой цепи миозина (например, у насекомых ортолог белка CG3201 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 124 и 133. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 333.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок spaghetti squash (например, у насекомых ортолог белка CG3595 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 125 и 134. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO 334.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок zipper (например, у насекомых ортолог белка CG15792 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 126 и 135. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO 335.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует тропонин C (например, у насекомых ортолог белка CG2981, CG7930, CG9073, CG6514, CG12408, CG9073, CG7930, CG2981, CG12408 или CG6514 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 127 и 136, или 128 и 137, или 184 и 185. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или несколькими из SEQ ID NO 336, 337 и 354.

Согласно другому варианту осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей РНК, которая содержит по меньшей мере одну двухцепочечную область, как правило, сайленсирующий элемент молекулы интерферирующей РНК, содержащий смысловую цепь РНК, соединенную путем комплементарного спаривания оснований с антисмысловой цепью РНК, где смысловая цепь молекулы dsRNA содержит последовательность по меньшей мере из 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или 100% комплементарной последовательности нуклеотидов, расположенной в пределах РНК-транскрипта гена-мишени, который кодирует рибосомный белок насекомых.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S3A (например, у насекомых ортолог белка CG2168 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 11, 12 и 141. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или обеими из SEQ ID NO 84 или 328.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок LP1 (например, у насекомых ортолог белка CG4087 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен посредством SEQ ID NO 3 и 4. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 80.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S3 (например, у насекомых ортолог белка CG6779 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 7 и 8. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 82.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L10Ab (например, у насекомых ортолог белка CG7283 Dm), представленный с помощью SEQ ID NO 9 и 10. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 83.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S18 (например, у насекомых ортолог белка CG8900 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 13 и 14. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 85.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L4 (например, у насекомых ортолог белка CG5502 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 5 и 6. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 81.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S27 (например, у насекомых ортолог белка CG10423 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 15 и 16, 204 и 205. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или обеими из SEQ ID NO 86 и 359.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L6 (например, у насекомых ортолог белка CG11522 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 17 и 18. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 87.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S13 (например, у насекомых ортолог белка CG13389 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 19 и 20. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 88.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L12 (например, у насекомых ортолог белка CG3195 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 21 и 22. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 89.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L26 (например, у насекомых ортолог белка CG6846 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 158 и 159. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 343.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L21 (например, у насекомых ортолог белка CG12775 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 165, 166 и 167. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 347 и 348.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S12 (например, у насекомых ортолог белка CG11271 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 156 и 157. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 342.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S28b (например, у насекомых ортолог белка CG2998 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 160 и 161. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 344.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L13 (например, у насекомых ортолог белка CG4651 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 154 и 155. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 341.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L10 (например, у насекомых ортолог белка CG17521 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 163 и 164. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 345.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L5 (например, у насекомых ортолог белка CG17489 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 152 и 153. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 340.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S15Aa (например, у насекомых ортолог белка CG2033 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 150 и 151. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 339.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L19 (например, у насекомых ортолог белка CG2746 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 200 и 201. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 357.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L27 (например, у насекомых ортолог белка CG4759 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 386. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 390.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок субъединицы II митохондриальной цитохром с-оксидазы (например, у насекомых ортолог белка CG34069 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 25 и 26. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 91.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует γ-цепь АТФ-синтазы (например, у насекомых ортолог белка CG7610 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 129 и 138. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 338.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует убиквитин-5E (например, у насекомых ортолог белка CG32744 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 186 и 187, 202 и 203. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или обеими из SEQ ID NO 355 и 358.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует протеасомную субъединицу бета-типа (например, у насекомых ортолог белка CG17331 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 387. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 391.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок, который у насекомых является ортологом белка CG13704 Dm, при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 388. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 392.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок Rpn12 (например, у насекомых ортолог белка CG4157 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 389. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 393.

В соответствии со вторым аспектом настоящего изобретения предусматривается композиция для предотвращения и/или борьбы с нападением насекомых-вредителей, содержащая по меньшей мере одну интерферирующую рибонуклеиновую кислоту (РНК) и по меньшей мере один подходящий носитель, наполнитель или разбавитель, причем интерферирующая РНК функционирует при поглощении насекомым с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного вредителя,

при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, при этом сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей по меньшей мере на 75% идентична любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или имеющую такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59 -62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, таким образом, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75% идентичной любому соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или

(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75% идентична любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389, или

(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389.

Композицию по настоящему изобретению можно применять для предотвращения и/или борьбы с нападением вредителя. В некоторых вариантах осуществления композицию можно применять в качестве пестицида для растения или для материала для размножения или репродуктивного материала растения. В дополнительном аспекте предусматривается комбинация для предотвращения и/или борьбы с нападением насекомых-вредителей, содержащая композицию по настоящему изобретению и по меньшей мере одно активное средство.

В дополнительном аспекте в данном документе предусматривается способ подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя с целью предотвращения и/или борьбы с нападением вредителей, включающий приведение в контакт указанного вида вредителя с эффективным количеством по меньшей мере одной интерферирующей рибонуклеиновой кислоты (РНК), причем интерферирующая РНК функционирует при поглощении вредителем с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась бы по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, таким образом, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274 -277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась бы по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или

(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена являются подобными в последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389, или

(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389.

В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривается выделенный полинуклеотид, выбранный из группы, состоящей из:

(i) полинуклеотида, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, которая представлена любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательностью, или

(ii) полинуклеотид, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, представленной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательностью, или

(iii) полинуклеотида, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, которая представлена в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, таким образом, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей указанный полинуклеотид являлся по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичным любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или

(iv) полинуклеотида, который содержит фрагмент по меньшей мере из 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотида, представленного в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, и при этом указанный фрагмент или указанная комплементарная последовательность обладают такой нуклеотидной последовательностью, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или

(v) полинуклеотида, который содержит фрагмент по меньшей мере из 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотида, представленного в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, и при этом указанный фрагмент или указанная комплементарная последовательность обладают такой нуклеотидной последовательностью, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или

(vi) полинуклеотида, кодирующего аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 70%, предпочтительно по меньшей мере на 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389, и

при этом указанный полинуклеотид составляет не более 10000, 9000, 8000, 7000, 6000, 5000, 4000, 3000, 2000 или 1500 нуклеотидов в длину.

Аминокислотные последовательности, кодируемые генами-мишенями по настоящему изобретению, представлены SEQ ID NO 79, 349, 405, 352, 356, 80, 326, 81, 327, 82, 83, 328, 84, 329, 85, 86, 359, 87-91, 330, 350, 353, 331, 351, 332-336, 337, 354, 338-344, 346, 345, 347, 348, 357, 355, 358, 390-393, соответственно.

В конкретном аспекте по настоящему изобретению выделенный полинуклеотид является частью молекулы интерферирующей РНК, как правило, частью сайленсирующего элемента, содержащего по меньшей мере одну двухцепочечную область, содержащую смысловую цепь РНК, соединенную путем комплементарного спаривания оснований с антисмысловой цепью РНК, где смысловая цепь молекулы dsRNA содержит последовательность нуклеотидов, комплементарную последовательности нуклеотидов, расположенной в пределах РНК-транскрипта гена-мишени. Более конкретно, выделенный полинуклеотид клонирован в ДНК-конструкцию в смысловой и антисмысловой ориентации так, что при транскрипции смыслового и антисмыслового полинуклеотида формируется молекула dsRNA, которая функционирует при поглощении вредителем с ингибированием или подавлением экспрессии гена-мишени в указанном вредителе.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к выделенному полинуклеотиду, который клонирован в ДНК-конструкцию в смысловой и антисмысловой ориентации так, что при транскрипции смыслового и антисмыслового полинуклеотида формируется молекула dsRNA, которая функционирует при поглощении насекомым с ингибированием или подавлением экспрессии гена-мишени в пределах комплекса тропонин/миофиламент.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок wings up A (тропонин I) насекомых (например, у насекомых ортолог белка CG7178 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 1, 2, 174, 404, 175, 180, 181, 188 и 189. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или несколькими из SEQ ID NO 79, 349, 405, 352 или 356.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок upheld (например, у насекомых ортолог белка CG7107 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 121, 130, 142, 143, 176, 177, 182 и 183. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или несколькими из SEQ ID NO 330, 350 или 353.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок тропомиозин 1 (например, у насекомых ортолог белка CG4898 Dm) или белок тропомиозин 2 (например, у насекомых ортолог белка CG4843 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 123 и 132. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 332.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует тяжелую цепь миозина (например, у насекомых ортолог белка CG17927 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 122, 131, 144, 145, 178 и 179. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или несколькими из SEQ ID NO 331 или 351.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует цитоплазматический белок легкой цепи миозина (например, у насекомых ортолог белка CG3201 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 124 и 133. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 333.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок spaghetti squash (например, у насекомых ортолог белка CG3595 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 125 и 134. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 334.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок zipper (например, у насекомых ортолог белка CG15792 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 126 и 135. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO 335.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует тропонин C (например, у насекомых ортолог белка CG2981, CG7930, CG9073, CG6514, CG12408, CG9073, CG7930, CG2981, CG12408 или CG6514 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 127 и 136, или 128 и 137, или 184 и 185. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или несколькими из SEQ ID NO 336, 337 и 354.

В соответствии с другими вариантами осуществления настоящее изобретение относится к выделенному полинуклеотиду, который клонирован в ДНК-конструкцию в смысловой и антисмысловой ориентации так, что при транскрипции смыслового и антисмыслового полинуклеотида формируется молекула dsRNA, которая функционирует при поглощении насекомым с ингибированием или подавлением экспрессии гена-мишени, который кодирует рибосомный белок насекомых.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S3A (например, у насекомых ортолог белка CG2168 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 11, 12 и 141. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или обеими из SEQ ID NO 84 или 328.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок LP1 (например, у насекомых ортолог белка CG4087 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 3 и 4. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 80.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S3 (например, у насекомых ортолог белка CG6779 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 7 и 8. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 82.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L10Ab (например, у насекомых ортолог белка CG7283 Dm), представленный с помощью SEQ ID NO 9 и 10. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 83.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S18 (например, у насекомых ортолог белка CG8900 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 13 и 14. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 85.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L4 (например, у насекомых ортолог белка CG5502 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 5 и 6. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 81.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S27 (например, у насекомых ортолог белка CG10423 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 15 и 16, 204 и 205. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или обеими из SEQ ID NO 86 и 359.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L6 (например, у насекомых ортолог белка CG11522 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 17 и 18. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 87.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S13 (например, у насекомых ортолог белка CG13389 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 19 и 20. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 88.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L12 (например, у насекомых ортолог белка CG3195 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 21 и 22. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 89.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L26 (например, у насекомых ортолог белка CG6846 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 158 и 159. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 343.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L21 (например, у насекомых ортолог белка CG12775 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 165, 166 и 167. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 347 и 348.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S12 (например, у насекомых ортолог белка CG11271 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 156 и 157. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 342.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S28b (например, у насекомых ортолог белка CG2998 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 160 и 161. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 344.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L13 (например, у насекомых ортолог белка CG4651 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 154 и 155. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 341.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L10 (например, у насекомых ортолог белка CG17521 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 163 и 164. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 345.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L5 (например, у насекомых ортолог белка CG17489 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 152 и 153. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 340.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S15Aa (например, у насекомых ортолог белка CG2033 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 150 и 151. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 339.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L19 (например, у насекомых ортолог белка CG2746 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 200 и 201. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 357.

В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L27 (например, у насекомых ортолог белка CG4759 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 386. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 390.

Предпочтительно способы по настоящему изобретению находят практическое применение в предотвращении и/или борьбе с нападением насекомых-вредителей, в частности, борьбе с нападением вредителей сельскохозяйственных культур, таких как, но без ограничений, хлопчатник, картофель, рис, клубника, люцерна, соя, томат, канола, подсолнечник, сорго, просо, кукуруза, баклажан, перец и табак. В дополнение, интерферирующую РНК по настоящему изобретению можно вводить в растения, подлежащие защите, с помощью обычных методов генной инженерии.

Во всех аспектах настоящего изобретения в предпочтительных вариантах осуществления ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарную ей последовательность, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или

(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75% предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, или

(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233.

Эти гены-мишени кодируют белки, входящие в состав комплекса тропонин/миофиламент.

Во всех аспектах настоящего изобретения в предпочтительных вариантах осуществления ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266 -269, 165, 167, 166, 270-273 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или

(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75% предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, или

(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273.

Эти гены-мишени кодируют рибосомальные белки насекомых.

Во всех аспектах настоящего изобретения в предпочтительных вариантах осуществления ген-мишень (i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарную ей последовательность, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, или

(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, или

(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313.

Краткое описание таблиц и фигур

Таблица 1 Новые мишени Lygus hesperus, идентифицированные из первого анализа.

Таблица 1B Новые мишени Lygus hesperus в пути Lh594.

Таблица 1C Новые мишени Lygus hesperus, идентифицированные из второго цикла анализа.

Таблица 2 Полинуклеотидные последовательности генов-мишеней, идентифицированные у Lygus hesperus.

Таблица 3 Аминокислотные последовательности генов-мишеней, идентифицированные у Lygus hesperus.

Таблица 4 dsRNA (смысловая цепь, представленная эквивалентной последовательностью ДНК), соответствующие генам-мишеням Lygus hesperus и праймерам для продуцирования dsRNA.

Таблица 5 Ранжирование мишеней Lygus hesperus в соответствии с кривыми дозовой зависимости (DRC) и по сравнению с исходными мишенями Lh423 и Lh105.

Таблица 6 Мишени Lygus hesperus из второго цикла анализа-ранжирования в соответствии с DRC и по сравнению с исходными мишенями Lh423 и Lh594.

Таблица 7 Полинуклеотидные последовательности генов-мишеней, идентифицированные у колорадского жука (CPB).

Таблица 8 Аминокислотные последовательности генов-мишеней, идентифицированные у CPB.

Таблица 9 dsRNA (смысловая цепь, представленная эквивалентной последовательностью ДНК), соответствующие CPB генам-мишеням и праймерам для продуцирования dsRNA.

Таблица 10 Полинуклеотидные последовательности генов-мишеней, идентифицированные у коричневого дельфацида (BPH).

Таблица 11 Аминокислотные последовательности генов-мишеней, идентифицированные у BPH.

Таблица 12 dsRNA (смысловая цепь, представленная эквивалентной последовательностью ДНК), соответствующие BPH генам-мишеням и праймерам для продуцирования dsRNA.

Таблица 13 Праймеры, используемые для амплификации cDNA тлей, на основе геномной последовательности гороховой тли.

Таблица 14 Полинуклеотидные последовательности генов-мишеней, идентифицированные у тлей.

Таблица 15 Аминокислотные последовательности генов-мишеней, идентифицированные у тлей.

Таблица 16 dsRNA (смысловая цепь, представленная эквивалентной последовательностью ДНК), соответствующие генам-мишеням тлей и праймерам для продуцирования dsRNA.

Таблица 17 Вырожденные праймеры, используемые для амплификации CPB Ld594 cDNA.

Таблица 18 Вырожденные праймеры, используемые для амплификации BPH cDNA.

Таблица 19: Новые мишени Leptinotarsa decemlineata из данного теста.

Таблица 20: Новые идентифицированные мишени Nilaparvata lugens.

Таблица 21: Новые идентифицированные мишени Acyrthosiphon pisum.

Фигура 1: Полоски Lh001_009 второго подтверждающего анализа. Темные полосы: смертность в день 3-6, светлые полосы: смертность в день 6-8. Кандидатные клоны названы с применением “Lygxxx” скрининговых кодов и “Lhxxx” номенклатурных кодов мишеней.

Фигура 2: Полоски Lh010_020 второго подтверждающего анализа. Темные полосы: смертность в день 3-6, светлые полосы: смертность в день 6-8. Кандидатные клоны названы с применением “Lygxxx” скрининговых кодов и “Lhxxx” номенклатурных кодов мишеней.

Фигура 3: Анализ смертности новых мишеней Lygus из полосок Lh001-Lh009, выражен в % смертности за 10-дневный период. Контроли обозначены пунктирными линиями. Положительный контроль: Lh423 dsRNA (RpL19). Отрицательные контроли: GFP dsRNA и только корм (контроль).

Фигура 4: Анализ смертности новых мишеней Lygus из полосок Lh010-Lh020, выражен в % смертности за 10-дневный период. Контроли обозначены пунктирными линиями. Положительный контроль: Lh423 (RpL19). Отрицательные контроли: GFP и только корм (контроль).

Фигуры 5-9 Новые мишени Lygus hesperus-кривые дозовой зависимости при концентрациях очищенной синтетической dsRNA в диапазоне от 0,4 до 0,025 мкг/мкл (на фигуре единица измерения “мкг/мкл” не отображена). GFP dsRNA и воду milliQ применяли как отрицательные контроли. dsRNA мишеней получали с использованием праймеров, как описано в примерном разделе 1.1.

Фигура 10 Lh594 кривая дозовой зависимости, при концентрациях dsRNA в диапазоне от 0,05 до 0,001 мкг/мкл. GFP dsRNA и воду milliQ применяли как отрицательные контроли.

Фигура 11 A dsRNA активность в биопробе Lygus hesperus в отсутствие tRNA. Lh594 (5 мкг/мкл); положительный контроль: Lh423 (5 мкг/мкл); отрицательные контроли: GFP dsRNA (5 мкг/мкл) и вода milliQ; B Идентификация Lh594 предела активности с использованием уменьшающейся концентрации dsRNA (от 5 мкг до 0,25 мкг). Отрицательные контроли: GFP dsRNA (5 мкг/мкл) и вода milliQ.

Фигура 12 Полоски Lh010-Lh020 второго подтверждающего анализа мишеней второго теста. Темные полосы: смертность в день 4-8, светлые полосы: смертность в день 4-6. Кандидатные клоны названы с применением “Lygxxx” скрининговых кодов и “Lhxxx” номенклатурных кодов мишеней.

Фигура 13 Результаты анализа для мишеней Lygus пути тропонина, тестированных при 0,5 мкг/мкл фиксировано.

Фигура 14 A-B Новые мишени Lygus hesperus из пути тропонина-кривые дозовой зависимости при концентрациях очищенной синтетической dsRNA в диапазоне от 0,4 до 0,025 мкг/мкл (на фигуре единица измерения “мкг/мкл” не всегда отображена). GFP dsRNA и воду milliQ применяли как отрицательные контроли.

Фигура 15 A-D Новые мишени Lygus hesperus из мишеней второго теста - кривые дозовой зависимости при концентрациях очищенной синтетической dsRNA в диапазоне от 0,5 до 0,05 мкг/мкл. GFP dsRNA и воду milliQ применяли как отрицательные контроли.

Фигура 16 Анализ выживаемости личинок CPB, обработанных с помощью 1 мкг dsRNA Ld594, Ld619 и Ld620. Положительные контроли включали 1 мкг dsRNA исходных мишеней Ld513 и Ld049. Отрицательные контроли включали воду milliQ и FP.

Фигура 17 Эффекты Ld594, Ld619 и Ld620 dsRNA на окукливание CPB 4 возрастной стадии личинок по сравнению с необработанным контролем (UTC). Жукам скармливали 1 мкг dsRNA, распределенной на листовых дисках картофеля, затем предоставляли возможность питаться на необработанных листьях картофеля (A) в течение 4 дней перед помещением на вермикулит. Для оценки эффекта dsRNA мертвых насекомых извлекали из вермикулита (из-за сильных эффектов, индуцированных с помощью Ld594 dsRNA, ни одну куколку невозможно восстановить из вермикулита и, следовательно, никакое изображение не доступно для данной dsRNA-мишени) (B).

Фигура 18 Эффект CPB Ld594, 619 и 620 dsRNA на выживаемость и приспособляемость имаго CPB. Оценки проводили в дни 4, 6, 7, 8, 11 и 13. Контроль MQ: вода milliQ.

Фигура 19 Активность dsRNA из Nl594 пути у коричневого дельфацида. DsRNA тестировали при 0,5 мкг/мкл в присутствии 0,1% CHAPSO. Положительный контроль: Nl537 dsRNA (0,5 мкг/мкл), отрицательные контроли: GFP dsRNA (0,5 мкг/мкл) и только корм.

Фигура 20 Активность dsRNA из Ap594, Ap423, Ap537 и Ap560 на A. pisum. DsRNA тестировали при 0,5 мкг/мкл в присутствии 5 мкг/мкл tRNA. Отрицательный контроль: GFP dsRNA (0,5 мкг/мкл).

Фигура 21 Проценты смертности личинок L. decemlineata на искусственном корме, обработанном с помощью dsRNA. Ld583, Ld584, Ld586 и Ld588 представляют клоны-мишени. Положительный контроль: Ld513; отрицательный контроль: FP.

Подробное описание настоящего изобретения

Авторы настоящего изобретения обнаружили, что подавление экспрессии конкретных генов-мишеней у видов насекомых-вредителей с помощью RNAi можно применять для эффективного предотвращения и/или борьбы с нападением указанного насекомого-вредителя.

Применяемый в данном документе термин “борьба” с нападением вредителей относится к любому воздействию на вредителя, которое служит для ограничения и/или уменьшения количества организмов вредителей и/или повреждения, вызываемого вредителем. Предпочтительные гены-мишени являются, следовательно, жизненно важными генами, которые контролируют или регулируют одну или более жизненно важные биологические функции у насекомых-вредителей, например, деление клеток, размножение, энергетический обмен, пищеварение, неврологическая функция и тому подобное. Подавление данных жизненно важных генов с помощью RNAi методов может вести к гибели насекомого или иным образом значительно замедлять рост и развитие, или нарушать способность вредителей колонизировать местообитание или нападать на организмы-хозяева.

Авторы настоящего изобретения в настоящее время идентифицировали лучшие гены-мишени видов насекомых-вредителей, принадлежащих к Lygus, Leptinotarsa, Nilaparvata и Acyrthosiphum родам, чьи мишени предусматриваются для применения в отдельности или в комбинации в качестве эффективных средств для RNAi-опосредованной борьбы с нападением насекомых на, например, агрономически важные культуры. Ортологи этих недавно идентифицированных генов-мишеней можно использовать у других видов насекомых для борьбы с нападением насекомых на соответствующие значимые культуры.

Более конкретно, авторы настоящего изобретения описывают в данном документе, что гены, кодирующие белки комплекса тропонин/миофиламент, образуют отличные гены-мишени для подавления с помощью методики РНК-ингибирования. Один из данных генов-мишеней кодировал белок тропонин I (wings up A) насекомых, который является ортологом белка CG7178 дрозофилы. Данный белок участвует в мышечных сокращениях и принадлежит к физиологическому пути, который еще не полностью исследован для борьбы с (насекомыми) вредителями посредством РНК-ингибирования. Кроме того, поскольку данный белковый комплекс является специфичным для животных, не известен ни один гомолог или ортолог генов растений, что снижает риск нетипичных фенотипов растений при экспрессии dsRNA-мишени в растениях. В дополнение, у дрозофилы тропонин I описывается как гаплонедостаточный ген, проявляющий мутантный фенотип в гетерозиготном состоянии. Такие гены особенно восприимчивы к снижению уровней экспрессии mRNA и как таковые могут считаться идеальными мишенями RNAi.

Дополнительные вызывающие интерес гены-мишени в данном комплексе тропонин/миофиламент перечислены ниже.

ID аннотации Цитология Dm идентификатор
up upheld CG7107
Tm1 тропомиозин 1 CG4898
Tm2 тропомиозин 2 CG4843
Mhc тяжелая цепь миозина CG17927
Mlc-c цитоплазматическая легкая цепь миозина CG3201
sqh spaghetti squash CG3595
zip zipper CG15792

Таким образом, в соответствии с одним вариантом осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарную ей последовательность, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или

(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75% предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, или

(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233.

В предпочтительном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок насекомых, выбранный из комплекса тропонин/миофиламент, выбранный из группы, включающей тропонин I (например, у насекомых ортолог белка CG7178 Dm), белок upheld (например, у насекомых ортолог белка CG7107 Dm), белок тропомиозин 1 (например, у насекомых ортолог белка CG4898 Dm), белок тропомиозин 2 (например, у насекомых ортолог белка CG4843 Dm), тяжелую цепь миозина (например, у насекомых ортолог белка CG17927 Dm), цитоплазматический белок легкой цепи миозина (например, у насекомых ортолог белка CG3201 Dm), белок spaghetti squash (например, у насекомых ортолог белка CG3595 Dm), белок zipper (например, у насекомых ортолог белка CG15792 Dm), тропонин C (например, у насекомых ортолог белка CG2981, CG7930, CG9073, CG6514, CG12408, CG9073, CG7930, CG2981, CG12408 или CG6514 Dm).

В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или

(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75% предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, или

(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273.

В предпочтительном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок насекомых, выбранный из группы, содержащей рибосомный белок S3A (например, у насекомых ортолог белка CG2168 Dm), рибосомный белок LP1 (например, у насекомых ортолог белка CG4087 Dm), рибосомный белок S3 (например, у насекомых ортолог белка CG6779 Dm), рибосомный белок L10Ab (например, у насекомых ортолог белка CG7283 Dm), рибосомный белок S18 (например, у насекомых ортолог белка CG8900 Dm), рибосомный белок L4 (например, у насекомых ортолог белка CG5502 Dm), рибосомный белок S27 (например, у насекомых ортолог белка CG10423 Dm), рибосомный белок L6 (например, у насекомых ортолог белка CG11522 Dm), рибосомный белок S13 (например, у насекомых ортолог белка CG13389 Dm), и рибосомный белок L12 (например, у насекомых ортолог белка CG3195 Dm), рибосомный белок L26 (например, у насекомых ортолог белка CG6846 Dm), рибосомный белок L21 (например, у насекомых ортолог белка CG12775 Dm), рибосомный белок S12 (например, у насекомых ортолог белка CG11271 Dm), рибосомный белок S28b (например, у насекомых ортолог белка CG2998 Dm), рибосомный белок L13 (например, у насекомых ортолог белка CG4651 Dm), рибосомный белок L10 (например, у насекомых ортолог белка CG17521 Dm), рибосомный белок L5 (например, у насекомых ортолог белка CG17489 Dm), рибосомный белок S15Aa (например, у насекомых ортолог белка CG2033 Dm), рибосомный белок L19 (например, у насекомых ортолог белка CG2746 Dm), рибосомный белок L27 (например, у насекомых ортолог белка CG4759 Dm).

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарную ей последовательность, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, или

(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, или

(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 141, 11, 12 или комплементарную ей последовательность, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 141, 11, 12 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 141, 11, 12 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 141, 11, 12 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 141, 11, 12 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 141, 11, 12 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 141, 11, 12 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 141, 11, 12 или комплементарной ей последовательности, или

(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 141, 11, 12 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 141, 11, 12, или

(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 141, 11, 12.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 17, 18 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 17, 18 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 17, 18 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 17, 18 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 17, 18 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 17, 18 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 17, 18 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 17, 18 или комплементарной ей последовательности, или

(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 17, 18 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 17, 18, или

(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 17, 18.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 19, 20 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 19, 20 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 19, 20 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 19, 20 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 19, 20 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 19, 20 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 19, 20 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 19, 20 или комплементарной ей последовательности, или

(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 19, 20 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 19, 20, или

(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 19, 20.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 165, 166, 167 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 165, 166, 167 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 165, 166, 167 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 165, 166, 167 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 165, 166, 167 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 165, 166, 167 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 17, 18 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 165, 165, 167 или комплементарной ей последовательности, или

(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 165, 166, 167 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 165, 166, 167, или

(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 165, 166, 167.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183 или комплементарной ей последовательности, или

(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, или

(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179 или комплементарной ей последовательности, или

(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179, или

(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137 или комплементарной ей последовательности, или

(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137 или комплементарную ей последовательность, где два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 128, 149, 184, 137, или

(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК или двухцепочечной РНК), которая подавляет экспрессию гена-мишени, кодирующего белок субъединицы II митохондриальной цитохром с-оксидазы (например, у насекомых ортолог белка CG34069 Dm).

Таким образом, в одном аспекте настоящее изобретение предлагает интерферирующую рибонуклеиновую кислоту (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя.

Применяемый в данном документе термин “ген-мишень” включает любой ген у насекомого-вредителя, который предполагается подавить. В предпочтительном варианте осуществления ген-мишень подавляется так, чтобы бороться с нападением вредителя, например, путем нарушения жизненно важного биологического процесса, происходящего у вредителя, или путем уменьшения патогенности вредителя. Предпочтительные гены-мишени, следовательно, включают, но без ограничений, те, которые играют ключевую роль в регуляции питания, выживания, роста, развития, размножения, нападения и способности вызывать поражение. В соответствии с одним вариантом осуществления ген-мишень является таковым, что при подавлении или ингибировании его экспрессии насекомое-вредитель погибает. В соответствии с другим вариантом осуществления ген-мишень является таковым, что при подавлении или ингибировании его экспрессии рост вредителя предотвращается или замедляется, или останавливается, или задерживается, или затрудняется, размножение вредителя предотвращается, или предотвращается переход через жизненные циклы вредителя. В соответствии еще с другим вариантом осуществления настоящего изобретения ген-мишень является таковым, что при подавлении или ингибировании его экспрессии повреждение, вызванное вредителем и/или способностью вредителя поражать или нападать на местообитания, поверхности и/или растение, или сельскохозяйственную культуру уменьшается; или вредитель прекращает питаться из своих природных пищевых ресурсов, таких как растения и растительные продукты. Термины “нападать” и “поражать” или “нападение” и “поражение”, как правило, используются взаимозаменяемо повсеместно.

Гены-мишени могут экспрессироваться во всех или некоторых клетках насекомых-вредителей. Кроме того, гены-мишени могут экспрессироваться насекомым-вредителем только на определенной стадии его жизненного цикла, например, зрелой стадии имаго, незрелой нимфы или личиночной стадии, или стадии яйца.

Применяемые в данном документе виды “вредителей” предпочтительно являются видами насекомых, которые вызывают поражение или нападают, предпочтительно на растения. Виды насекомых могут включать и виды, принадлежащие к отрядам Coleoptera, Lepidoptera, Diptera, Dichyoptera, Orthoptera, Hemiptera или Siphonaptera.

Предпочтительными насекомыми, патогенными для растений, в соответствии с настоящим изобретением, являются вредители растений, выбранные из группы, включающей Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук), или L. texana (картофельный жук Leptinotarsa texana)); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Laodelphax spp. (например, L. striatellus (малый коричневый дельфацид)); Nephotettix spp. (например, N. virescens, или N. cincticeps (зеленая рисовая цикадка), или N.nigropictus (рисовая цикадка)); Sogatella spp. (или S. furcifera (белоспинный рисовый дельфацид)); Chilo spp. (например, C. suppressalis (огневка азиатская стеблевая), C. auricilius (огневка Chilo auricilius), или C. polychrysus (темноголовая рисовая огневка)); Sesamia spp. (например, S. inferens (розовый сверлильщик)); Tryporyza spp. (например, T. innotata (огневка Tryporyza innotata), или T. incertulas (желтый рисовый сверлильщик)); Anthonomus spp. (например, A. grandis (долгоносик хлопковый)); Phaedon spp. (например, P. cochleariae (хреновый листоед)); Epilachna spp. (например, E. varivetis (зерновка бобовая мексиканская)); Tribolium spp. (например, T. castaneum (хрущак каштановый)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук), D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный корнегрыз); Ostrinia spp. (например, O. nubilalis (огневка кукурузная)); Anaphothrips spp. (например, A. obscrurus (трипс злаковый)); Pectinophora spp. (например, P. gossypiella (розовый коробочный червь хлопчатника)); Heliothis spp. (например, H. virescens (табачная листовертка)); Trialeurodes spp. (например, T. abutiloneus (белокрылка Trialeurodes abutiloneus) T. vaporariorum (белокрылка тепличная)); Bemisia spp. (например, B. argentifolii (белокрылка магнолиевая)); Aphis spp. (например, A. gossypii (тля хлопковая)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк Lygus lineolaris) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Euschistus spp. (например, E. conspersus (клоп Euschistus conspersus)); Chlorochroa spp. (например, C. sayi (клоп Сэя)); Nezara spp. (например, N. viridula (зеленый овощной клоп)); Thrips spp. (например, T. tabaci (трипс луковый)); Frankliniella spp. (например, F. fusca (трипс табачный), или F. occidentalis (западный цветочный трипс)); Acheta spp. (например, A. domesticus (сверчок домовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Macrosiphum spp. (например, M. euphorbiae (тля картофельная большая)); Blissus spp. (например, B. leucopterus leucopterus (клоп-черепашка пшеничный североамериканский)); Acrosternum spp. (например, A. hilare (клоп-щитник Acrosternum hilare)); Chilotraea spp. (например, C. polychrysa (огневка Chilotraea polychrysa)); Lissorhoptrus spp. (например, L. oryzophilus (долгоносик рисовый водяной)); Rhopalosiphum spp. (например, R. maidis (тля кукурузная)); и Anuraphis spp. (например, A. maidiradicis (тля кукурузная корневая)).

В соответствии с более конкретным вариантом осуществления настоящее изобретение применимо к видам, принадлежащим к семейству Chrysomelidae или листоеды. Жуки листоеды, такие как колорадские жуки, блошки, кукурузные корневые жуки, и долгоносики, такие как долгоносик люцерновый, являются особенно важными вредителями. Конкретные виды рода Leptinotarsa, контролируемые в соответствии с настоящим изобретением, включают колорадского жука (Leptinotarsa decemlineata (Say)) и ложного картофельного жука (Leptinotarsa juncta (Say)). CPB является (серьезным) вредителем нашего домашнего картофеля, других культурных и диких клубненосных и неклубненосных видов картофеля и других видов растений семейства Solanaceous (пасленовых), включая сельскохозяйственные культуры томатов, баклажанов, перцев, табака (виды рода Nicotiana, включая декоративные), физалиса, риса, кукурузы или хлопчатника; и виды сорняков/травянистых растений, паслен каролинский, черный паслен, дурман обыкновенный, белену и паслен клювообразный. Кукурузные корневые жуки включают виды, основывающие род Diabrotica (например, D. undecimpunctata undecimpunctata, D. undecimpunctata howardii, D. longicornis, D. virgifera и D. balteata). Кукурузные корневые жуки причиняют существенный вред кукурузе и тыквенным.

В соответствии с более конкретным вариантом осуществления настоящее изобретение применимо к видам, принадлежащим к отряду Hemipterans (семейство Aphidoidea), таким как Myzus persicae (тля персиковая зеленая), Aphis fabae (тля свекловичная), Acyrthosiphum pisum (тля гороховая), Brevicoryne brassicae (тля капустная), Sitobion avenae (тля большая злаковая), Cavariella aegopodii (тля зонтичная), Aphis craccivora (тля арахисовая), Aphis gossypii (тля хлопковая), Toxoptera aurantii (тля померанцевая), Cavariella spp (тля тминная), Chaitophorus spp (тли рода Chaitophorus), Cinara spp.(тли рода Cinara), Drepanosiphum platanoides (тля яворовая), Elatobium spp (тли рода Elatobium), которые вызывают повреждение растений, таких как деревья рода сливы, в частности, персик, абрикос и слива; деревьев, которые в основном культивируются для производства древесины, таких как ивы и тополя, пропашных культур, таких как кукуруза, хлопчатник, соя, пшеница и рис, овощных культур из семейств Solanaceae, Chenopodiaceae, Compositae, Cruciferae и Cucurbitaceae, включая, но без ограничений, артишок, спаржу, фасоль, свеклу, брокколи, брюссельскую капусту, кочанную капусту, морковь, цветную капусту, мускусную дыню, сельдерей, кукурузу, огурцы, укроп, капусту кормовую, кольраби, репу, баклажан, салат, горчицу, бамию, петрушку, пастернак, горох, перец, картофель, редис, шпинат, тыкву, томат, репу, кресс водяной и арбуз; или полевых культур, таких как, но без ограничений, табак, сахарная свекла и подсолнечник; цветочных культур или других декоративных растений, таких как сосны и хвойные деревья. Другие Hemipterans относятся к Nilaparvata ssp (например N. lugens, Sogatella furcifera) и причиняют вред растениям риса. Другие Hemipterans относятся к Lygus ssp (например, Lygus hesperus, Lygus rugulipennis, Lygus lineolaris, Lygus sully) и другим видам растительноядных насекомых в семействе Miridae, и причиняют вред хлопчатнику, растениям картофеля, клубнике, хлопчатнику, люцерне, канола, персику, сливам, винограду, латуку, баклажану, луку, зеленым бобам. А также некоторым средиземноморским деревьям и некоторым декоративным деревьям, таким как вяз (Ulmus spp.), кедровый орех (Pinus Pinea), платан кленолистный (Platanus Acerifolia), яблоня (Malus alba). Другие Hemipterans относятся к семейству Pentatomoidea, их обычно называют щитники, лесные клопы и клопы-вонючки (например, коричневый мраморный щитник (Halyomorpha halys), клоп-щитник (Euschistus conspersus), зеленый овощной клоп (Nezara viridula), щитник красноногий (Pentatoma rufipes), клоп капустный (Murgantia histrionica), клоп (Oebalus pugnax)), и они наносят ущерб плодам, включая яблоки, персики, инжир, шелковицу, плодам цитрусовых и хурме, ежевике, и овощам, включая сахарную кукурузу, томаты, соевые бобы, фасоль лимскую и паприку, капусту, цветную капусту, репу, хрен, капусту кормовую, горчицу, брюссельскую капусту, картофель, баклажаны, бамию, бобы, спаржу, свеклу, сорняки, фруктовые деревья и полевые культуры, такие как полевая кукуруза и соевые бобы. Щитники также являются вредителями трав, сорго и риса.

Растение для применения в способах по настоящему изобретению или трансгенное растение в соответствии с настоящим изобретением охватывает любое растение, но предпочтительно является растением, которое является восприимчивым к нападению насекомых, патогенных для растения.

Соответственно, настоящее изобретение распространяется на растения и на способы, описываемые в данном документе, где растение выбирают из следующей группы растений (или сельскохозяйственных культур): люцерна, яблоня, абрикос, артишок, спаржа, авокадо, банан, ячмень, бобы, свекла, ежевика, черника, брокколи, брюссельская капуста, капуста, канола, морковь, маниок, цветная капуста, зерновые, сельдерей, вишня, цитрусы, клементины, кофе, кукуруза, хлопчатник, огурцы, баклажаны, эндивий, эвкалипт, инжир, виноград, грейпфрут, арахис, физалис, киви, латук, лук-порей, лимон, лайм, сосна, кукуруза, манго, дыня, просо, грибы, орехи, овес, бамия, лук, апельсин, декоративное растение или цветок, или дерево, папайя, петрушка, горох, персики, арахис, торфяной мох, перец, хурма, ананас, подорожник, слива, гранат, картофель, тыква, красный эндивий, редис, рапсовое семя, малина, рис, рожь, сорго, соя, соевые бобы, шпинат, клубника, сахарная свекла, сахарный тростник, подсолнечник, сладкий картофель, мандарин, чай, табак, томаты, виноград культурный, арбуз, пшеница, ямс и кабачок.

В конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение предусматривает гены-мишени, которые кодируют белки, участвующие в функции белка wings up A (тропонина I), субъединицы II митохондриальной цитохром с-оксидазы или одного из рибосомных белков, как указано в таблице 1.

В предпочтительных вариантах осуществления настоящее изобретение предусматривает гены-мишени, которые выбраны из группы генов (i) имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или (ii) имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, или (iii) имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или (iv) имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент из по меньшей мере 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, таким образом, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или (v) имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 70%, предпочтительно по меньшей мере на 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389, или (vi) ген которой у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389,

и где нуклеотидная последовательность указанного гена составляет не более 10000, 9000, 8000, 7000, 6000, 5000, 4000, 3000, 2000 или 1500 нуклеотидов в длину.

Аминокислотные последовательности, кодируемые генами-мишенями по настоящему изобретению, представлены SEQ ID NO 79, 349, 405, 352, 356, 80, 326, 81, 327, 82, 83, 328, 84, 329, 85, 86, 359, 87-91, 330, 350, 353, 331, 351, 332-336, 337, 354, 338-344, 346, 345, 347, 348, 357, 355, 358, 390-393.

Применяемый в данном документе термин ʺобладающийʺ имеет такое же значение, как ʺсодержащийʺ.

Применяемый в данном документе термин ʺидентичность последовательностейʺ используется для описания сходства последовательностей между двумя или более нуклеотидными или аминокислотными последовательностями. Процент ʺидентичности последовательностейʺ между двумя последовательностями определяется путем сравнения двух оптимально выровненных последовательностей в окне сравнения (определенное число положений), при этом часть последовательности в окне сравнения может содержать присоединения или делеции (т.е. пробелы) по сравнению с контрольной последовательностью с целью достижения оптимального выравнивания. Процент идентичности последовательностей рассчитывается путем определения числа положений, в которых идентичное нуклеотидное основание или аминокислотный остаток встречается в обеих последовательностях, с получением числа ʺсовпадающихʺ положений, деления числа совпадающих положений на общее число положений в окне сравнения и умножения результата на 100. Способы и программное обеспечение для определения идентичности последовательностей доступны в данной области и включают программное обеспечение Blast и GAP-анализ. Для нуклеиновых кислот процент идентичности рассчитывают предпочтительно с помощью инструмента выравнивания BlastN, посредством чего процент идентичности рассчитывают по всей длине запросной нуклеотидной последовательности.

Специалисту в данной области будет понятно, что гомологи или ортологи (гомологи, существующие у различных видов) генов-мишеней, представленные любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389, могут быть идентифицированы. Данные гомологи и/или ортологи вредителей также находятся в рамках настоящего изобретения. Предпочтительные гомологи и/или ортологи являются генами, подобными в нуклеотидной последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов гомолог и/или ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80% или 85%, более предпочтительно по меньшей мере на 90% или 95%, и наиболее предпочтительно по меньшей мере приблизительно 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности. Аналогично, также предпочтительными гомологами и/или ортологами являются белки, которые подобны в аминокислотной последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей гомолог и/или ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80% или 85%, более предпочтительно по меньшей мере на 90% или 95%, и наиболее предпочтительно по меньшей мере приблизительно 99% идентичной любой из SEQ ID NO 79, 349, 405, 352, 356, 80, 326, 81, 327, 82, 83, 328, 84, 329, 85, 86, 359, 87-91, 330, 350, 353, 331, 351, 332-336, 337, 354, 338-344, 346, 345, 347, 348, 357, 355, 358, 390-393.

Другие гомологи являются генами, которые являются аллелями гена, содержащего последовательность, которая представлена любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389. Дополнительные предпочтительные гомологи являются генами, содержащими по меньшей мере один однонуклеотидный полиморфизм (SNP) по сравнению с геном, содержащим последовательность, которая представлена любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389.

ʺИнтерферирующая рибонуклеиновая кислота (РНК)ʺ по настоящему изобретению охватывает любой тип молекулы РНК, способной подавлять или подвергать ʺсайленсингуʺ экспрессию гена-мишени, включая, но без ограничений, смысловую РНК, антисмысловую РНК, короткую интерферирующую РНК (siRNA), микроРНК (miRNA), двухцепочечную РНК (dsRNA), шпилечную РНК (RNA) и тому подобное. Способы анализа функциональных молекул интерферирующих РНК хорошо известны в данной области и описаны в данном документе в других местах.

Молекулы интерферирующей РНК по настоящему изобретению обеспечивают последовательность-специфическое подавление экспрессии гена-мишени путем связывания с целевой нуклеотидной последовательностью в пределах гена-мишени. Связывание происходит в результате спаривания оснований между комплементарными областями интерферирующей РНК и целевой нуклеотидной последовательности. Применяемый в данном документе термин ʺсайленсирующий элементʺ относится к части или области интерферирующей РНК, содержащей или состоящей из последовательности нуклеотидов, которая комплементарна или по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и которая функционирует как активная часть интерферирующей РНК с непосредственным подавлением экспрессии указанного гена-мишени. В одном варианте осуществления настоящего изобретения сайленсирующий элемент содержит или состоит из последовательности по меньшей мере из 17 последовательных нуклеотидов, предпочтительно по меньшей мере 18 или 19 последовательных нуклеотидов, более предпочтительно по меньшей мере 21 последовательного нуклеотида, еще более предпочтительно по меньшей мере 22, 23, 24 или 25 последовательных нуклеотидов, комплементарных целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени.

Применяемое в данном документе выражение ʺэкспрессия гена-мишениʺ относится к транскрипции и накоплению РНК-транскрипта, кодируемого геном-мишенью, и/или трансляции mRNA в белок. Термин ʺподавлятьʺ предназначен для обозначения любого из способов, известных в данной области, с помощью которого молекулы интерферирующей РНК снижают уровень первичных транскриптов РНК, mRNA или белка, полученного из гена-мишени. В определенных вариантах осуществления подавление относится к ситуации, когда уровень РНК или белка, полученного из гена, уменьшается по меньшей мере на 10%, предпочтительно по меньшей мере на 33%, более предпочтительно по меньшей мере на 50%, еще более предпочтительно по меньшей мере на 80%. В особенно предпочтительных вариантах осуществления подавление относится к снижению уровня РНК или белка, полученного из гена, по меньшей мере на 80%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, более предпочтительно по меньшей мере на 95% и наиболее предпочтительно по меньшей мере на 99% в клетках насекомого-вредителя по сравнению с соответствующим контрольным насекомым-вредителем, которое, например, не подвергалось воздействию интерферирующей РНК или подвергалось воздействию контрольной молекулы интерферирующей РНК. Способы выявления снижения уровней РНК или белка хорошо известны в данной области и включают гибридизацию РНК в растворе, нозерн гибридизацию, обратную транскрипцию (например, количественный анализ ОТ-ПЦР (RT-PCR)), микроматричный анализ, связывание антител, иммуноферментный твердофазный анализ (ELISA) и вестерн-блоттинг. В другом варианте осуществления настоящего изобретения подавление относится к снижению уровней РНК или белка, достаточному для получения выявляемого изменения фенотипа вредителя, по сравнению с соответствующей мерой борьбы с вредителями, например, гибелью клеток, прекращением роста или тому подобное. Подавление, таким образом, можно измерить с помощью фенотипического анализа насекомого-вредителя с использованием методов, обычных в данной области.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения интерферирующая РНК подавляет экспрессию гена с помощью РНК-интерференции или RNAi. RNAi является процессом последовательность-специфической генной регуляции, как правило, опосредованной молекулами двухцепочечной РНК, такими как короткие интерферирующие РНК (siRNA). siRNA содержат смысловую цепь РНК, соединенную путем комплементарного спаривания оснований с антисмысловой цепью РНК. Смысловая цепь или “направляющая цепь” молекулы siRNA содержит последовательность нуклеотидов, комплементарную последовательности нуклеотидов, расположенных в пределах РНК-транскрипта гена-мишени. Смысловая цепь siRNA, следовательно, способна соединяться с РНК-транскриптом посредством спаривания оснований по Уотсон-Крику и направлять РНК на деградацию в пределах клеточного комплекса, известного как индуцируемый RNAi сайленсирующий комплекс или RISC. Таким образом, в отношении предпочтительных молекул интерферирующей РНК по настоящему изобретению сайленсирующий элемент, как изложено в данном документе, может являться двухцепочечной областью, содержащей соединенные комплементарные цепи, из которых по меньшей мере одна цепь содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной или по меньшей мере частично комплементарной целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени. В одном варианте осуществления двухцепочечная область составляет в длину по меньшей мере 21, 22, 23, 24, 25, 30, 35, 40, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 125, 150, 175, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 пар оснований.

Более длинные двухцепочечные молекулы РНК (dsRNA), содержащие один или более функциональных двухцепочечных сайленсирующих элементов, которые описаны в данном документе в других местах, и способные к сайленсингу генов посредством RNAi, также рассматриваются в рамках настоящего изобретения. Такие более длинные молекулы dsRNA содержат по меньшей мере 80, 200, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 пар оснований. Данные молекулы dsRNA могут служить в качестве предшественников активных молекул siRNA, которые направляют РНК-транскрипт к комплексу RISC для последующей деградации. Молекулы dsRNA, присутствующие в среде, окружающей организм или его клетки, могут поглощаться организмом и перерабатываться ферментом, называемым Dicer, с получением молекул siRNA. Альтернативно, dsRNA может быть получена in vivo, т.е. транскрибирована из полинуклеотида или полинуклеотидов, кодирующих dsRNA, присутствующих в клетке, например, бактериальной клетке или растительной клетке, и впоследствии обработана с помощью Dicer, либо в пределах клетки-хозяина, либо предпочтительно в пределах клеток насекомого-вредителя после поглощения более длинной dsRNA-предшественника. dsRNA может образовываться из двух отдельных (смысловой и антисмысловой) цепей РНК, которые соединяются посредством комплементарного спаривания оснований. Альтернативно, dsRNA может являться одной цепью, способной складываться назад на себя с образованием шпилечной РНК (РНК) или структуры стебель-петля. В случае РНК, двухцепочечная область или ʺстебельʺ образована из двух областей или сегментов РНК, которые являются существенно инвертированными повторами друг друга и обладают достаточной комплементарностью для обеспечения образования двухцепочечной области. Один или более функциональных двухцепочечных сайленсирующих элементов могут присутствовать в данной ʺобласти стебляʺ молекулы. Области инвертированных повторов, как правило, разделены областью или сегментом РНК, известным как область ʺпетлиʺ. Данная область может содержать любую нуклеотидную последовательность, придающую достаточную гибкость для обеспечения осуществления самоспаривания между фланкирующими комплементарными областями РНК. В общем, область петли является по существу одноцепочечной и действует как разделительный элемент между инвертированными повторами.

Все молекулы интерферирующей РНК по настоящему изобретению обеспечивают последовательность-специфическое подавление экспрессии гена-мишени путем связывания с целевой нуклеотидной последовательностью в пределах гена-мишени. Связывание происходит в результате комплементарного спаривания оснований между сайленсирующим элементом интерферирующей РНК и целевой нуклеотидной последовательностью. Молекулы интерферирующей РНК по настоящему изобретению содержат по меньшей мере один или по меньшей мере два сайленсирующих элемента. В одном варианте осуществления настоящего изобретения целевая нуклеотидная последовательность содержит последовательность нуклеотидов, которая представлена РНК-транскриптом гена-мишени или его фрагментом, при этом фрагмент составляет предпочтительно по меньшей мере 17 нуклеотидов, более предпочтительно по меньшей мере 18, 19 или 20 нуклеотидов, или наиболее предпочтительно по меньшей мере 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 нуклеотидов. В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения целевая нуклеотидная последовательность содержит последовательность нуклеотидов, эквивалентную РНК-транскрипту, кодируемому любым из полинуклеотидов, который выбирают из группы, включающей (i) полинуклеотид, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100 или 1115 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, представленной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательностью, или (ii) полинуклеотид, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, представленной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности,

или (iii) полинуклеотида, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, которая представлена в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательностью, таким образом, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей указанный полинуклеотид являлся по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичным любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или (iv) полинуклеотид, который содержит фрагмент по меньшей мере из 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотида, представленного любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательностью, и при этом указанный фрагмент или указанная комплементарная последовательность обладает нуклеотидной последовательностью, таким образом, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности,

или (v) полинуклеотид, который содержит фрагмент по меньшей мере из 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотида, представленного в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательностью, и при этом указанный фрагмент или указанная комплементарная последовательность обладает нуклеотидной последовательностью, таким образом, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или (vi) полинуклеотид, кодирующий аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 70%, предпочтительно по меньшей мере на 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389. В более предпочтительном варианте осуществления вышеупомянутого указанный полинуклеотид составляет в длину не более чем 10000, 9000, 8000, 7000, 6000, 5000, 4000, 3000, 2000 или 1500 нуклеотидов.

Предпочтительно молекулы интерферирующей РНК по настоящему изобретению содержат по меньшей мере одну двухцепочечную область, как правило, сайленсирующий элемент интерферирующей РНК, содержащий смысловую цепь РНК, соединенную путем комплементарного спаривания оснований с антисмысловой цепью РНК, при этом смысловая цепь молекулы dsRNA содержит последовательность нуклеотидов, комплементарную последовательности нуклеотидов, расположенной в пределах РНК-транскрипта гена-мишени.

Сайленсирующий элемент или по меньшей мере одна его цепь, при этом сайленсирующий элемент является двухцепочечным, может являться полностью комплементарным или частично комплементарным целевой нуклеотидной последовательности гена-мишени. Применяемый в данном документе термин ʺполностью комплементарныйʺ означает, что все основания нуклеотидной последовательности сайленсирующего элемента являются комплементарными или ʺсоответствуютʺ основаниям целевой нуклеотидной последовательности. Термин ʺпо меньшей мере частично комплементарныйʺ означает, что существует менее чем 100% совпадения между основаниями сайленсирующего элемента и основаниями целевой нуклеотидной последовательности. Специалисту в данной области будет понятно, что сайленсирующий элемент должен являться лишь по меньшей мере частично комплементарным целевой нуклеотидной последовательности для опосредования подавления экспрессии гена-мишени. Как известно в данной области, последовательности РНК со вставками, делециями и нарушениями комплементарности относительно целевой последовательности все же могут являться эффективными при RNAi. В соответствии с настоящим изобретением предпочтительно, чтобы сайленсирующий элемент и целевая нуклеотидная последовательность гена-мишени обладали по меньшей мере 80% или 85% идентичности последовательности, предпочтительно по меньшей мере 90% или 95% идентичности последовательности или более предпочтительно по меньшей мере 97% или 98% идентичности последовательности, и еще более предпочтительно по меньшей мере 99% идентичности последовательности. Альтернативно, сайленсирующий элемент может содержать 1, 2 или 3 нарушения комплементарности по сравнению с целевой нуклеотидной последовательностью на каждом отрезке из 24 частично комплементарных нуклеотидов.

Специалисту в данной области будет очевидным, что степень комплементарности между сайленсирующим элементом и целевой нуклеотидной последовательностью может варьировать в зависимости от гена-мишени, подлежащего подавлению, или в зависимости от вида насекомого-вредителя, у которого экспрессия гена подлежит контролю.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения сайленсирующий элемент содержит последовательность нуклеотидов, которая является эквивалентом РНК любого из полинуклеотидов, выбранных из группы, включающей полинуклеотид, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100 или 1115 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, представленной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательностью, или (ii) полинуклеотид, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, представленной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, таким образом, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей указанный полинуклеотид являлся по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичным любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или (iii) полинуклеотид, который содержит фрагмент по меньшей мере из 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотида, представленного в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, и при этом указанный фрагмент или указанная комплементарная последовательность обладают такой нуклеотидной последовательностью, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, при этом указанный полинуклеотид составляет не более 10000, 9000, 8000, 7000, 6000, 5000, 4000, 3000, 2000 или 1500 нуклеотидов в длину. Следует понимать, что в таких вариантах осуществления сайленсирующий элемент может содержать или состоять из области двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых, смысловая цепь, содержит последовательность нуклеотидов по меньшей мере частично комплементарную целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени.

Целевую нуклеотидную последовательность можно выбирать из любой подходящей области или нуклеотидной последовательности гена-мишени или его РНК-транскрипта. Например, целевая нуклеотидная последовательность может располагаться в пределах 5’UTR или 3’UTR гена-мишени или РНК транскрипта или в пределах экзонной или интронной областей гена.

Специалисту в данной области известны способы идентифицирования наиболее подходящих целевых нуклеотидных последовательностей в рамках полноразмерного гена-мишени. Например, множество сайленсирующих элементов, воздействующих на различные области гена-мишени, можно синтезировать и тестировать. Альтернативно, расщепление РНК-транскрипта с помощью ферментов, таких как РНКаза Н, можно использовать для определения сайтов в РНК, которые находятся в конформации, восприимчивой к сайленсингу гена. Сайты-мишени также можно идентифицировать с применением in silico подходов, например, использование компьютерных алгоритмов, предназначенных для прогнозирования эффективности сайленсинга генов на основе воздействия на различные сайты в пределах гена полной длины.

Интерферирующие РНК по настоящему изобретению могут содержать один сайленсирующий элемент или несколько сайленсирующих элементов, при этом каждый сайленсирующий элемент содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии указанного гена-мишени. Конкатемерные РНК-конструкции данного типа описаны в WO2006/046148, который включен в данном документе в качестве ссылки. В контексте настоящего изобретения термин ʺнесколькоʺ означает по меньшей мере два, по меньшей мере три, по меньшей мере четыре и т.д., и по меньшей мере до 10, 15, 20 или по меньшей мере 30. В одном варианте осуществления интерферирующая РНК содержит несколько копий одного сайленсирующего элемента, т.е. повторов сайленсирующего элемента, который связывается с конкретной целевой нуклеотидной последовательностью в пределах определенного гена-мишени. В другом варианте осуществления сайленсирующие элементы в пределах интерферирующей РНК содержат или состоят из различных последовательностей нуклеотидов, комплементарных различным целевым нуклеотидным последовательностям. Должно быть ясно, что комбинации нескольких копий одного и того же сайленсирующего элемента, комбинированные с сайленсирующими элементами, связывающимися с различными целевыми нуклеотидными последовательностями, находятся в рамках настоящего изобретения.

Различные целевые нуклеотидные последовательности могут происходить из одного гена-мишени у вида насекомого-вредителя для достижения улучшения подавления конкретного гена-мишени у вида насекомого-вредителя. В этом случае сайленсирующие элементы можно комбинировать в интерферирующей РНК в исходном порядке, в котором целевые нуклеотидные последовательности встречаются в гене-мишени, или сайленсирующие элементы можно смешивать и комбинировать случайно в любом порядке ранжирования в рамках интерферирующей РНК по сравнению с порядком целевых нуклеотидных последовательностей в гене-мишени.

Альтернативно различные целевые нуклеотидные последовательности представляют один ген-мишень, но происходят из различных видов насекомых-вредителей.

Альтернативно различные целевые нуклеотидные последовательности могут происходить из различных генов-мишеней. Если интерферирующая РНК предназначена для использования для предупреждении и/или борьбы с нападением вредителей, предпочтительно выбирать различные гены-мишени из группы генов, регулирующих жизненно важные биологические функции вида насекомого-вредителя, включая, но без ограничений, выживание, рост, развитие, размножение и патогенность. Гены-мишени могут регулировать одинаковые или различные биологические пути или процессы. В одном варианте осуществления по меньшей мере один из сайленсирующих элементов содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, при этом ген-мишень выбран из группы генов, которая описана ранее.

В дополнительном варианте осуществления настоящего изобретения различные гены, на которые воздействуют различные сайленсирующие элементы, происходят из одного вида насекомого-вредителя. Данный подход предназначен для достижения усиленного воздействия на один вид насекомого-вредителя. В частности, различные гены-мишени могут экспрессироваться дифференциально на различных стадиях жизненного цикла насекомого, например, зрелого имаго, незрелой личиночной и стадии яйца. Интерферирующую РНК по настоящему изобретению можно использовать для предотвращения и/или борьбы с нападением насекомых-вредителей на более чем одной стадии жизненного цикла насекомого.

В альтернативном варианте осуществления настоящего изобретения различные гены, на которые воздействуют различные сайленсирующие элементы, происходят из различных видов насекомых-вредителей. Интерферирующую РНК по настоящему изобретению можно, таким образом, использовать для предотвращения и/или борьбы с нападением более чем одного вида насекомых-вредителей одновременно.

Сайленсирующие элементы могут располагаться в виде одной непрерывной области интерферирующей РНК или могут разделяться присутствием линкерной последовательности. Линкерная последовательность может содержать короткую случайную нуклеотидную последовательность, которая не комплементарна ни одной из целевых нуклеотидных последовательностей или генов-мишеней. В одном варианте осуществления линкер является при определенных условиях самостоятельно расщепляющейся последовательностью РНК, предпочтительно pH-чувствительным линкером или гидрофобно-чувствительным линкером. В одном варианте осуществления линкер содержит последовательность нуклеотидов, эквивалентную интронной последовательности. Линкерные последовательности по настоящему изобретению могут находиться в диапазоне длины от приблизительно 1 пары оснований до приблизительно 10000 пар оснований, при условии, что линкер не ухудшает способности интерферирующей РНК подавлять экспрессию гена(генов)-мишени.

В дополнение к сайленсирующему элементу(элементам) и любым линкерным последовательностям интерферирующая РНК по настоящему изобретению может содержать по меньшей мере одну дополнительную полинуклеотидную последовательность. В различных вариантах осуществления настоящего изобретения дополнительную последовательность выбирают из (i) последовательности, способной защитить интерферирующую РНК от РНК процессинга, (ii) последовательности, влияющей на стабильность интерферирующей РНК, (iii) последовательности, обеспечивающей связывание белков, например, для облегчения поглощения интерферирующей РНК клетками вида насекомого-вредителя, (iv) последовательности, облегчающей крупномасштабное производство интерферирующей РНК, (v) последовательности, которая является аптамером, который связывается с рецептором или молекулой на поверхности клеток насекомого-вредителя для облегчения поглощения, или (vi) последовательности, которая катализирует процессинг интерферирующей РНК в клетках насекомого-вредителя и тем самым повышает эффективность интерферирующей РНК. Структуры для повышения стабильности молекулы РНК хорошо известны в данной области и описаны дополнительно в WO2006/046148, который включен в данном документе в качестве ссылки.

Длина интерферирующей РНК по настоящему изобретению должна являться достаточной для поглощения клетками вида насекомого-вредителя и подавления генов-мишеней у вредителя, как описано в данном документе в других местах. Однако верхний предел длины может зависеть от (i) требования к интерферирующей РНК поглощаться клетками вредителя и (ii) требования к интерферирующей РНК подвергаться процессингу в клетках вредителя для опосредования сайленсинга генов путем RNAi. Длина также может зависеть от способа получения и состава для доставки интерферирующей РНК к клеткам. Предпочтительно интерферирующая РНК по настоящему изобретению составляет от 21 до 10000 нуклеотидов в длину, предпочтительно от 50 до 5000 нуклеотидов или от 100 до 2500 нуклеотидов, более предпочтительно от 80 до 2000 нуклеотидов в длину.

Интерферирующая РНК может содержать основания ДНК, неприродные основания или неприродные связи остова, или модификации сахарофосфатного остова, например, для повышения стабильности во время хранения или повышения устойчивости к деградации нуклеазами. Дополнительно, интерферирующая РНК может быть получена химически или ферментативно специалистом в данной области с помощью управляемых вручную или автоматизированных реакций. Альтернативно, интерферирующая РНК может транскрибироваться из полинуклеотида, кодирующего таковую. Таким образом, в настоящем документе предусматривается выделенный полинуклеотид, кодирующий любую из интерферирующих РНК по настоящему изобретению.

Также в настоящем документе предусматривается выделенный полинуклеотид, выбранный из группы, включающей (i) полинуклеотид, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, представленной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательностью, или (ii) полинуклеотид, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100 или 1115 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, представленной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательностью, или (iii) полинуклеотид, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности так, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей указанный полинуклеотид является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичным любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или (iv) полинуклеотид, который содержит фрагмент по меньшей мере из 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, и при этом указанный фрагмент или указанная комплементарная последовательность обладают такой нуклеотидной последовательностью, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или (v) полинуклеотид, который содержит фрагмент по меньшей мере из 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотида, представленного в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, и при этом указанный фрагмент или указанная комплементарная последовательность обладают такой нуклеотидной последовательностью, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или (vi) полинуклеотид, кодирующий аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 70%, предпочтительно по меньшей мере на 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389, и при этом указанный полинуклеотид составляет не более 10000, 9000, 8000, 7000, 6000, 5000, 4000, 3000, 2000 или 1500 нуклеотидов в длину.

В предпочтительных вариантах осуществления выделенный полинуклеотид является частью молекулы интерферирующей РНК, как правило, частью сайленсирующего элемента, содержащего по меньшей мере одну двухцепочечную область, содержащую смысловую цепь РНК, соединенную путем комплементарного спаривания оснований с антисмысловой цепью РНК, при этом смысловая цепь молекулы dsRNA содержит последовательность нуклеотидов, комплементарную последовательности нуклеотидов, расположенной в пределах РНК-транскрипта гена-мишени. Смысловая цепь dsRNA, следовательно, способна соединяться с РНК-транскриптом и воздействовать на РНК для деградации в пределах RNAi-индуцируемого сайленсирующего комплекса или RISC.

Полинуклеотиды по настоящему изобретению можно вставлять с помощью рутинных методов молекулярного клонирования в ДНК-конструкции или векторы, известные в данной области. Следовательно, в соответствии с одним вариантом осуществления предусматривается ДНК-конструкция, содержащая любые из полинуклеотидов по настоящему изобретению. Предпочтительно в данном документе предусматривается ДНК-конструкция, содержащая полинуклеотид, кодирующий по меньшей мере одну из интерферирующих РНК по настоящему изобретению. ДНК-Конструкция может являться рекомбинантным ДНК-вектором, например, бактериальным, вирусным или дрожжевым вектором. В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ДНК-конструкция является экспрессирующей конструкцией, и полинуклеотид функционально связан с по меньшей мере одной регуляторной последовательностью, способной управлять экспрессией полинуклеотидной последовательности. Термин ʺрегуляторная последовательностьʺ следует рассматривать в широком контексте, и он предназначен для обозначения любой нуклеотидной последовательности, способной воздействовать на экспрессию полинуклеотидов, с которыми она функционально связана, включая, но без ограничений, промоторы, энхансеры и другие природные или синтетические элементы-активаторы транскрипции. Регуляторная последовательность может располагаться на 5'-или 3'-конце полинуклеотидной последовательности. Термин ʺфункционально связанныйʺ относится к функциональной связи между регуляторной последовательностью и полинуклеотидной последовательностью, такой, что регуляторная последовательность управляет экспрессией полинуклеотида. Функционально связанные элементы могут являться смежными или несмежными.

Предпочтительно регуляторная последовательность является промотором, выбранным из группы, включающей, но без ограничений, конститутивные промоторы, индуцируемые промоторы, тканеспецифические промоторы и промоторы, специфичные для стадии роста/развития. В одном варианте осуществления полинуклеотид находится под контролем сильного конститутивного промотора, такого как любой, выбранный из группы, включающей CaMV35S промотор, двойной CaMV35S промотор, убиквитиновый промотор, актиновый промотор, rubisco промотор, GOS2 промотор, промотор 34S вируса мозаики норичника.

Необязательно одну или более последовательностей терминации транскрипции можно включать в экспрессирующую конструкцию по настоящему изобретению. Термин ʺпоследовательность терминации транскрипцииʺ охватывает управляющую последовательность в конце транскрипционной единицы, которая сигнализирует о терминации транскрипции, 3’ процессинге и полиаденилировании первичного транскрипта. Дополнительные регуляторные последовательности, включая, но без ограничений, энхансеры транскрипции или трансляции, можно включать в экспрессионную конструкцию, например, как с усиленным двойным промотором CaMV35S.

Настоящее изобретение также охватывает способ создания любой из интерферирующих РНК по настоящему изобретению, включающий этапы: (i) контакта полинуклеотида, кодирующего указанную интерферирующую РНК, или ДНК-конструкции, содержащей полинуклеотид, с бесклеточными компонентами; или (ii) введения в клетку (например, путем трансформации, трансфекции или инъекции) полинуклеотида, кодирующего указанную интерферирующую РНК, или ДНК-конструкции, содержащей полинуклеотид.

Настоящее изобретение, таким образом, также относится к любому двухцепочечному рибонуклеотиду, полученному при экспрессии полинуклеотида, описанного в данном документе.

Соответственно, также в данном документе предусматривается клетка-хозяин, трансформированная любым из полинуклеотидов, описанных в данном документе. Дополнительно настоящим изобретением охватываются клетки-хозяева, содержащие любую из интерферирующих РНК по настоящему изобретению, любой из полинуклеотидов по настоящему изобретению или ДНК-конструкцию, содержащую любой из полинуклеотидов. Клетка-хозяин может являться прокариотической клеткой, включая, но без ограничений, грамположительные и грамотрицательные бактериальные клетки, или эукариотической клеткой, включая, но без ограничений, клетки дрожжей или клетки растений. Предпочтительно указанная клетка-хозяин является бактериальной клеткой или растительной клеткой. Бактериальную клетку можно выбирать из группы, включающей, но без ограничений, грамположительные и грамотрицательные клетки, включающие Escherichia spp. (например, E. coli), Bacillus spp. (например, B. thuringiensis), Rhizobium spp., Lactobacillus spp., Lactococcus spp., Pseudomonas spp. и Agrobacterium spp. Полинуклеотид или ДНК-конструкция по настоящему изобретению может существовать или поддерживаться в клетке-хозяине как внехромосомный элемент, или может являться стабильно включенным в геном клетки-хозяина. Характеристики, представляющие особый интерес при выборе клетки-хозяина для целей настоящего изобретения, включают простоту, с которой полинуклеотид или ДНК-конструкцию, кодирующую интерферирующую РНК, можно ввести в хозяина, доступность совместимых экспрессионных систем, эффективность экспрессии и стабильность интерферирующей РНК в хозяине.

Предпочтительно интерферирующие РНК по настоящему изобретению экспрессируются в растительных клетках-хозяевах. Предпочтительные растения, представляющие интерес, включают, но без ограничений, хлопчатник, картофель, рис, томат, канолу, сою, подсолнечник, сорго, просо, кукурузу, люцерну, землянику, баклажаны, перец и табак.

В ситуациях, где интерферирующая РНК экспрессируется в клетке-хозяине и/или применяется для предотвращения и/или борьбы с нападением вредителя на организм-хозяин, предпочтительно, чтобы интерферирующая РНК не демонстрировала значительных ʺнецелевыхʺ эффектов, т.е. интерферирующая РНК не влияла на экспрессию генов в хозяине. Предпочтительно сайленсирующий элемент не демонстрирует значительной комплементарности с нуклеотидными последовательностями, кроме заданной целевой нуклеотидной последовательности гена-мишени. В одном варианте осуществления настоящего изобретения сайленсирующий элемент демонстрирует менее 30%, более предпочтительно менее 20%, более предпочтительно менее 10% и еще более предпочтительно менее 5% идентичности последовательности с любым геном клетки-хозяина или организма. Если известны данные геномной последовательности для организма-хозяина, можно перепроверить идентичность с сайленсирующим элементом, применяя стандартные инструменты биоинформатики. В одном варианте осуществления отсутствует идентичность последовательности между сайленсирующим элементом и геном из клетки-хозяина или организма-хозяина в области из 17, более предпочтительно в области из 18 или 19 и наиболее предпочтительно в области из 20 или 21 последовательных нуклеотидов.

При практическом применении настоящего изобретения интерферирующие РНК по настоящему изобретению можно использовать для предотвращения и/или борьбы с любым насекомым вредителем, принадлежащим к отрядам Coleoptera, Lepidoptera, Diptera, Dichyoptera, Orthoptera, Hemiptera и Siphonaptera.

Кроме того, в соответствии с другим аспектом настоящего изобретения в настоящем документе предусматривается композиция для предотвращения и/или борьбы с нападением насекомых-вредителей, содержащая по меньшей мере одну интерферирующую рибонуклеиновую кислоту (РНК) и необязательно по меньшей мере один подходящий носитель, наполнитель или разбавитель, причем интерферирующая РНК функционирует при поглощении насекомым с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного вредителя. Интерферирующей РНК может являться любая из тех, которые раскрыты в других разделах данного документа. Предпочтительно интерферирующая РНК содержит или состоит по меньшей мере из одного сайленсирующего элемента, при этом указанный сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых (смысловая цепь) содержит последовательность нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени. ʺГеном-мишеньюʺ может являться любой ген-мишень, раскрываемый в разделах настоящего документа, включая, но без ограничений, гены, участвующие в регуляции выживания, росте, развитии, размножении и патогенности вредителя. Альтернативно, композиция содержит по меньшей мере одну клетку-хозяина, содержащую по меньшей мере одну интерферирующую молекулу РНК или конструкцию ДНК, кодирующую тот же самый и необязательно по меньшей мере один подходящий носитель, наполнитель или разбавитель, причем интерферирующая РНК функционирует при поглощении клетки-хозяина насекомым с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного вредителя.

При практическом применении настоящего изобретения композицию можно использовать для предотвращения и/или борьбы с любым насекомым вредителем, принадлежащим к отрядам Coleoptera, Lepidoptera, Diptera, Dichyoptera, Orthoptera, Hemiptera и Siphonaptera. Таким образом, композиция может быть представлена в любой форме, подходящей для применения по отношению к насекомым-вредителям или для применения к субстратам и/или организмам, в частности растений, чувствительных к нападению указанного насекомого-вредителя. В одном варианте осуществления композиция предназначена для применения в целях предотвращения и/или борьбы с нападением вредителей растений, или материала для размножения, или репродуктивного материала растения и, таким образом, направлена на виды насекомых-вредителей, которые нападают на растения. Композиция по настоящему изобретению особенно эффективна, если насекомое-вредитель относится к категории “грызущих” насекомых, которые наносят значительное повреждение растениям, поедая растительные ткани, такие как корни, листья, цветы, почки, ветки и т.п. Примеры из этой большой категории насекомых включают жуков и их личинок.

Композицию по настоящему изобретению можно применять для борьбы с насекомыми-вредителями на всех этапах их жизненного цикла, например, этапе половозрелой особи, этапах личинки и яйца.

В контексте композиции по настоящему изобретению интерферирующая РНК может быть получена из ДНК-конструкции, в частности экспрессионной конструкции, которые описаны в других разделах данного документа, содержащей полинуклеотид, который ее кодирует. В предпочтительных вариантах осуществления интерферирующая РНК может быть произведена внутри клетки-хозяина или организма, сконструированного для экспрессии указанной интерферирующей РНК с полинуклеотидом, который ее кодирует.

Подходящие организмы-хозяева для применения в композициях по настоящему изобретению включают, но без ограничений, композиции, которые известны как колонизирующие среду на и/или вокруг вызывающих интерес растений или культурных растений, т.е. растений или культурных растений, чувствительных к нападению видов насекомых-вредителей. Такие микроорганизмы включают, но без ограничений, микроорганизмы, которые заселяют филлоплану (поверхность листьев растений) и/или ризосферу (почву, окружающую корни растений). Эти микроорганизмы отбирают так, чтобы они были способны успешно конкурировать с организмами дикого типа, присутствующими в среде растения. Подходящие микроорганизмы для применения в качестве хозяев включают различные виды бактерий, дрожжей и грибов. Понятно, что выбираемые микроорганизмы не должны быть токсичными для растений. Такие композиции, применяемые по отношению к растениям, чувствительным к нападению видов насекомых-вредителей, будут поглощаться насекомыми-вредителями при кормлении на обработанных растениях.

Организмы-хозяева, которые в естественных условиях не заселяют растение и/или их среду, также находятся в рамках настоящего изобретения. Такие организмы могут служить лишь в качестве средства для получения интерферирующей РНК композиции. Например, в одном варианте осуществления интерферирующая РНК ферментируется/продуцируется в бактериальном хозяине и бактерии после этого инактивируются/погибают. Полученные бактерии могут быть обработаны и использованы в качестве инсектицидного спрея таким же способом, как были использованы штаммы Bacillus thuringiensis в качестве инсектицида для нанесения распылением. В некоторых вариантах осуществления бактериальный экстракт или лизат может быть подходящим образом очищен с тем, чтобы оставить экстракт, содержащий, по сути, чистую интерферирующую РНК, который затем составляют в одну из композиций по настоящему изобретению. Стандартные методики экстракции/очистки будут известны специалисту в данной области.

Композиции по настоящему изобретению могут находиться в любой подходящей физической форме для применения по отношению к насекомым. Например, композиция может быть в твердой форме (порошок, таблетка или приманка), жидкой форме (в том числе форма, вводимая в качестве распыляемого инсектицида) или форме геля. В конкретном варианте осуществления композиция может представлять собой покрытие, пасту или порошок, который можно нанести на субстрат с целью защиты указанного субстрата от нападения насекомых. В данном варианте осуществления композицию можно применять для защиты любого субстрата или материала, который чувствителен к нападению насекомых или повреждению, наносимому насекомыми.

Природа наполнителей и физической формы композиции может варьировать в зависимости от природы субстрата, который необходимо обрабатывать. Например, композиция может представлять собой жидкость, которую наносят кистью или распыляют на подлежащий обработке материал или субстрат или впечатывают в него, или покрытие или порошок, который наносят на подлежащий обработке материал или субстрат.

В одном варианте осуществления композиция находится в форме приманки. Приманка предназначена для привлечения насекомого войти в контакт с композицией. После вхождения в контакт с нею композиция поглощается насекомым путем, например, переваривания, и опосредует RNAi, таким образом убивая насекомое. Указанная приманка может содержать пищевой продукт, такой как белковый продукт питания, например, рыбную муку. В качестве приманки также можно применять борную кислоту. Приманка может зависеть от вида, являющегося мишенью. Также можно применять аттрактант. Аттрактантом может быть феромон, такой как, например, феромон самца или самки. Как, например, в настоящем изобретении можно применять феромоны, приведенные в книге ʺInsect Pheremones and their use in Pest Managementʺ (Howse et al., Chapman and Hall, 1998). Аттрактант действует как привлекающий насекомого к приманке и может быть направлен на конкретное насекомое или может привлекать целый спектр насекомых. Приманка может быть в любой подходящей форме, такой как твердая, пастообразная форма, форма таблетки или порошковая форма.

Приманка также может быть принесена насекомым обратно в колонию. Затем приманка может играть роль источника питания для других членов колонии, обеспечивая, таким образом, эффективную борьбу с большим количеством насекомых и, потенциально, всей колонией насекомых-вредителей. Это является преимуществом, связанным с применением двухцепочечной РНК по настоящему изобретению, поскольку замедленное действие RNAi-опосредованных эффектов на вредителей делает возможным перенос приманки обратно в колонию, таким образом доставляя максимальный эффект в смысле воздействия на насекомых.

Кроме того, композиции, которые контактируют с насекомыми, могут оставаться на кутикуле насекомого. При очистке, независимо от того, чистится ли отдельное насекомое самостоятельно, или насекомые чистят друг друга, композиции могут быть поглощены и, таким образом, могут опосредовать свои эффекты на насекомых. Для этого необходимо, чтобы композиция была достаточно стабильной с тем, чтобы интерферирующая РНК оставалась интактной и была способна опосредовать RNAi даже при воздействии внешних условий среды в течение длительного периода времени, который может представлять собой, например, период длительностью несколько дней.

Приманки могут быть представлены в подходящем ʺкорпусеʺ или ʺловушкеʺ. Такие корпуса и ловушки коммерчески доступны, а существующие ловушки могут быть адаптированы для включения композиций по настоящему изобретению. Любой корпус или ловушка, которые могут заманивать насекомого зайти, включены в объем настоящего изобретения. Корпус или ловушка могут иметь форму, например, коробки, и могут быть представлены в заранее сформированном состоянии или могут быть, например, в форме складываемого картона. Подходящие материалы для корпуса или ловушки включают пластмассу и картон, в частности, гофрированный картон. Подходящими размерами для такого корпуса или ловушки являются, например, ширина 7-15 см, длина 15-20 см и высота 1-5 см. Внутренние поверхности ловушек могут быть оклеены липким веществом с тем, чтобы ограничить движение насекомого после попадания в ловушку. Корпус или ловушка могут иметь внутри подходящее углубление, которое может удерживать на месте приманку. Ловушка отличается от корпуса, поскольку насекомое после входа не может легко покинуть ловушку, в то время как корпус играет роль ʺкормушкиʺ, которая обеспечивает насекомому предпочтительную среду, в которой они могут кормиться и чувствовать себя в безопасности от хищников.

Соответственно, в дополнительном аспекте настоящее изобретение предлагает корпус или ловушку для насекомых, которые содержат композицию по настоящему изобретению, которая может включать любой из признаков описываемой в данном документе композиции.

В дополнительном альтернативном варианте осуществления композиция может быть представлена в форме спрея. Таким образом, человек-пользователь может непосредственно опрыскивать композицией вредителя. Композиция затем усваивается насекомым, откуда она может опосредовать РНК-интерференцию, таким образом борясь с насекомым. Предпочтительно спрей представляет собой распыляемый под давлением спрей/спрей в виде аэрозоля или спрей для пульверизатора. Частицы могут иметь подходящий размер так, чтобы они прикреплялись к насекомому, например к экоскелету, и могли поглощаться оттуда. Размер частиц может быть измерен известными способами, такими как применение Mastersizer, который является коммерчески доступным устройством.

В еще одном дополнительном варианте осуществления носитель представляет собой электростатически заряженный порошок или частицу, которая прикрепляется к насекомому. Подходящие порошки и частицы, которые могут прикрепляться к насекомому и, таким образом, доставлять РНК-конструкции по настоящему изобретению, описаны подробно в WO 94/00980 и WO 97/33472, обе из которых включены в данный документ в качестве ссылки.

Альтернативно, носитель может содержать магнитные частицы, которые прикрепляются к кутикуле насекомого. Подходящие магнитные частицы, которые могут прикрепляться к насекомому и, таким образом, доставлять РНК-конструкции по настоящему изобретению, описаны подробно в WO 00/01236, ссылка на которую включена в данный документ.

В еще одном дополнительном варианте осуществления носитель композиции содержит металлические частицы, которые изначально не намагничены, но которые могут стать магнитно поляризованными под воздействием электрического поля, производимым организмом насекомого. Этот механизм действия подробно описан в WO 2004/049807 и включен в данный документ в качестве ссылки.

Предпочтительно композиция включает носитель, который увеличивает поглощение интерферирующей РНК насекомым-вредителем. Такой носитель может представлять собой липидный носитель, предпочтительно содержащий одно или несколько из следующего: эмульсии типа масла в воде, мицеллы, холестерин, липополиамины и липосомы. Другие средства, которые способствуют поглощению конструкций по настоящему изобретению, хорошо известны специалистам в данной области и включают поликатионы, декстраны и (трис)-катионные липиды, такие как CS096, CS102 и т.п. Коммерчески доступные липосомы включают LIPOFECTIN® и CELLFECTIN® и т.п. Ряд подходящих носителей перечислены под заголовком ʺУсиливающее трансфекцию средствоʺ в патентной заявке WO 03/004644, а каждый из приведенных примеров, таким образом, включен в качестве ссылки.

В дополнительном предпочтительном варианте осуществления носитель представляет собой конденсирующее нуклеиновую кислоту средство. Предпочтительно конденсирующее нуклеиновую кислоту средство включает спермидин или протамина сульфат или его производное.

Если композиция по настоящему изобретению предназначена для применения в предотвращении и/или борьбе с нападением насекомых на растение, то композиция может содержать подходящий с точки зрения сельского хозяйства носитель. Таким носителем может быть любой материал, который переносит подлежащее обработке растение, который не причиняет ненадлежащий вред для среды или других находящихся в ней организмов и который позволяет интерферирующей РНК оставаться эффективной по отношению к видам насекомых-вредителей. В частности, композиции по настоящему изобретению могут быть составлены для доставки растениям согласно установившимся сельскохозяйственным методикам, применяемым в биоинсектицидной промышленности. Композиция может содержать дополнительные компоненты, способные осуществлять другие функции, включая, но без ограничений, (i) усиление или повышение поглощения интерферирующей РНК клетками вредителя и (ii) стабилизацию активных компонентов композиции. Конкретными примерами таких дополнительных компонентов, содержащихся в композиции, включающей интерферирующую РНК, являются tRNA дрожжей или общая РНК дрожжей.

Композиции могут быть составлены для непосредственного применения или в виде концентрата основной композиции, который необходимо разбавить перед применением. Альтернативно, композиция может поставляться в виде набора, содержащего интерферирующую РНК или клетку-хозяина, ее содержащую или экспрессирующую, в одной емкости и подходящий разбавитель или носитель для РНК или клетки-хозяина в отдельной емкости. При конкретном применении настоящего изобретения композицию можно применять по отношению к растению или любой части растения на любом этапе развития растения. В одном варианте осуществления композицию применяют по отношению к надземным частям растения, например, при культивировании растительных культур в полевых условиях. В дополнительном варианте осуществления композицию применяют по отношению к семенам растения либо пока они находятся в хранилище, либо сразу после высадки в почву. Обычно важно хорошо осуществлять борьбу с вредителями на ранних стадиях роста растения, поскольку это время, когда растение может быть наиболее тяжело повреждено видами вредителей.

Композицию можно вносить в среду насекомых-вредителей при помощи различных методик, включая, но без ограничений, опрыскивание, распыление, опыление, рассеивание, полив, нанесение покрытия на семена, обработка семян, внесение в почву и введение в поливную воду. При обработке растений, чувствительных к нападению вредителей, композиция может быть доставлена на растение или часть растения до появления вредителя (с целью предотвращения) или после начала появления признаков нападения вредителя (с целью борьбы с вредителем).

В дополнительном варианте осуществления настоящего изобретения композиции по настоящему изобретению могут быть составлены так, чтобы они содержали по меньшей мере одно дополнительное активное средство. Таким образом, композиция может быть представлена в виде ʺнабора частейʺ, включающего композицию, содержащую интерферирующую РНК, в одной емкости и один или несколько подходящих активных ингредиентов, например химический или биологический пестицид, в отдельной емкости. Альтернативно, композиции могут быть представлены в виде смесей, которые стабильны и подлежат применению в сочетании друг с другом.

Подходящие активные ингредиенты, которые могут действовать дополняющим образом по отношению к интерферирующим молекулам РНК по настоящему изобретению, включают, но без ограничений, следующие: хлорпирофос, аллетрин, ресметрин, тетрабромэтил, диметол-циклопропанкарбоновая кислота (которую обычно включают в жидкие композиции); и гидраметилнон, авермектин, хлорпирофос, сульфурамид, гидропрен, фипронил (рецептор GABA), изопропилфенилметилкарбамат, индоксакарб (PARA), новифлумурон (ингибитор синтеза хитина), имипротрин (PARA), абамектин (глутамат-зависимый канал для ионов хлора), имидаклоприд (ацетилхолиновый рецептор) (которые включены в композиции приманок).

В предпочтительном варианте осуществления активный ингредиент известен как предпочтительный инсектицид в плане проблем, связанных со здравоохранением и окружающей средой, такой как, например, гидраметилнон и авермектин.

В следующем варианте осуществления настоящего изобретения композицию составляют так, чтобы она содержала по меньшей мере одно агрономическое средство, например, гербицид или дополнительный пестицид. Применяемое в данном документе выражение ʺвторой пестицидʺ или ʺдополнительный пестицидʺ относится к пестициду, отличному от первой или изначальной интерферирующей молекулы РНК композиции. Альтернативно, композиция по настоящему изобретению может быть доставлена в комбинации по меньшей мере с одним другим агрономическим средством, например, гербицидом или вторым пестицидом. В одном варианте осуществления композиция представлена в комбинации с гербицидом, выбранным из любого известного из уровня техники, например, глифосатом, имидазолиноном, сульфонилмочевиной и бромоксинилом. В следующем варианте осуществления композиция представлена в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным пестицидом. Дополнительный пестицид может быть выбран из любых известных из уровня техники пестицидов и/или может включать интерферирующую рибонуклеиновую кислоту, которая функционирует при поглощении вредителем с подавлением экспрессии гена-мишени указанного вида вредителя. В одном варианте осуществления целевым вредителем является вид насекомого-вредителя, а интерферирующая РНК выбрана из любой из описанных в данном документе интерферирующих РНК. В следующем варианте осуществления дополнительный пестицид включает интерферирующую РНК, которая функционирует с подавлением экспрессии известного гена у любого целевого вида вредителя, но не ограничиваясь вредителями-насекомыми. Изначальная интерферирующая молекула РНК композиции и второй или дополнительный пестицид(ы) могут целенаправленно воздействовать на один вид насекомого-вредителя или могут быть направлены на воздействие на различные виды насекомых-вредителей. Например, изначальная интерферирующая РНК и второй пестицид могут целенаправленно воздействовать на различные виды насекомых-вредителей или может целенаправленно воздействовать на различные семейства или классы организмов-вредителей, например, грибы, или нематоды, или насекомые. Специалисту в данной области будет понятно, как протестировать комбинации интерферирующих молекул РНК и других агрономических средств в отношении синергических эффектов. В предпочтительном варианте осуществления композиция содержит первую интерферирующую молекулу РНК, описанную в других разделах данного документа, и один или несколько дополнительных пестицидов, каждый из которых токсичен для одного и того же насекомого-вредителя, причем один или несколько дополнительных пестицидов выбраны из пататина, инсектицидного белка Bacillus thuringiensis, инсектицидного белка Xenorhabdus, инсектицидного белка Photorhabdus, инсектицидного белка Bacillus laterosporous, инсектицидного белка Bacillus spaericus и лигнина, и при этом указанный инсектицидный белок Bacillus thuringiensis выбран из группы, состоящей из Cry1Ab, Cry1C, Cry2Aa, Cry3, TIC851, CryET70, Cry22, VIP, TIC901, TIC1201, TIC407, TIC417, бинарного инсектицидного белка, выбранного из CryET33 и CryET34, CryET80 и CryET76, TIC100 и TIC101 и PS149B1, и инсектицидных химер любого из перечисленных инсектицидных белков.

Различные компоненты описанных в данном документе комбинаций можно вводить, например, организму-хозяину, чувствительному к нападению вредителя, в любом порядке. Компоненты на подлежащую обработке территорию или организм можно доставлять одновременно или последовательно.

Также в данном документе предусматривается способ предотвращения и/или борьбы с нападением вредителей, при котором вид насекомого-вредителя контактирует с эффективным количеством по меньшей мере одной интерферирующей РНК, при этом РНК функционирует при поглощении указанным вредителем с подавлением экспрессии жизненно важного гена-мишени вредителя. Жизненно важным геном-мишенью может являться любой ген вредителя, участвующий в регуляции жизненно важного биологического процесса, необходимого вредителю для инициирования или поддержания нападения, включая, но без ограничений, выживание, рост, развитие, размножение и патогенность. В частности, ген-мишень может являться любым из генов вредителя, как описано в данном документе в других местах.

В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, или 310-313, или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук Leptinotarsa texana)); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк Lygus lineolaris) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук).

В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, или 310-313, или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук Leptinotarsa texana)); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк Lygus lineolaris) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук),

где ортологические гены кодируют белок, обладающий аминокислотной последовательностью, которая является по меньшей мере на 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% идентичной аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO 79, 349, 405, 352 или 356 (при оптимальном выравнивании указанных кодируемых белков).

В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 141, 11, 12, 47-50 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук Leptinotarsa texana)); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк Lygus lineolaris) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук).

В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 141, 11, 12, 47-50 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук Leptinotarsa texana)); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк Lygus lineolaris) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук), при этом ортологические гены кодируют белок, обладающий аминокислотной последовательностью, которая является по меньшей мере на 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% идентичной аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO 328 или 84 (при оптимальном выравнивании указанных кодируемых белков).

В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарный по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду в любой из SEQ ID NO 17, 18, 59-62 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук Leptinotarsa texana)); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк Lygus lineolaris) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук).

В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 17, 18, 59-62 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук Leptinotarsa texana)); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк Lygus lineolaris) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук), при этом ортологические гены кодируют белок, обладающий аминокислотной последовательностью, которая является по меньшей мере на 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% идентичной аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO 87 (при оптимальном выравнивании указанных кодируемых белков).

В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 19, 20, 63-66 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук Leptinotarsa texana)); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк Lygus lineolaris) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук).

В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарный по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду в любой из SEQ ID NO 19, 20, 63-66 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук Leptinotarsa texana)); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк Lygus lineolaris) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук), при этом ортологические гены кодируют белок, обладающий аминокислотной последовательностью, которая является по меньшей мере на 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% идентичной аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO 88 (при оптимальном выравнивании указанных кодируемых белков).

В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук Leptinotarsa texana)); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк Lygus lineolaris) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук). В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук Leptinotarsa texana)); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк Lygus lineolaris) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук), при этом ортологические гены кодируют белок, обладающий аминокислотной последовательностью, которая является по меньшей мере на 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% идентичной аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO 347 или 348 (при оптимальном выравнивании указанных кодируемых белков).

В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарный по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду в любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук Leptinotarsa texana)); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк Lygus lineolaris) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук).

В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук Leptinotarsa texana)); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк Lygus lineolaris) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук),

при этом ортологические гены кодируют белок, обладающий аминокислотной последовательностью, которая является по меньшей мере на 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% идентичной аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO 330, 350 или 353 (при оптимальном выравнивании указанных кодируемых белков).

В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук Leptinotarsa texana)); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк Lygus lineolaris) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук).

В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду в любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук Leptinotarsa texana)); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк Lygus lineolaris) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук), при этом ортологические гены кодируют белок, обладающий аминокислотной последовательностью, которая является по меньшей мере на 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% идентичной аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO 331 или 351(при оптимальном выравнивании указанных кодируемых белков).

В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук Leptinotarsa texana)); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк Lygus lineolaris) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук).

В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук Leptinotarsa texana)); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк Lygus lineolaris) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук), при этом ортологические гены кодируют белок, обладающий аминокислотной последовательностью, которая является по меньшей мере на 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% идентичной аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO 337 или 354 (при оптимальном выравнивании указанных кодируемых белков).

Кроме того, в данном документе предусматривается способ предотвращения и/или борьбы с нападением вредителей в поле культурных растений, при этом указанный способ включает экспрессию в указанных растениях эффективного количества интерферирующей РНК, описываемой в данном документе.

В способе, предназначенном для борьбы с нападением вредителя, фраза ʺэффективное количествоʺ распространяется на количество или концентрацию интерферирующей РНК, необходимые для получения фенотипического эффекта у вредителя таким образом, чтобы уменьшались количества организмов-вредителей, поражающих организм-хозяин, и/или уменьшалось количество повреждений, вызванных вредителем. В одном варианте осуществления фенотипическим эффектом является гибель вредителя, и интерферирующая РНК используется для достижения по меньшей мере 20%, 30%, 40%, предпочтительно по меньшей мере 50%, 60%, 70%, более предпочтительно по меньшей мере 80% или 90% смертности вредителей по сравнению с контрольными насекомыми-вредителями. В дополнительном варианте осуществления фенотипические эффекты включают, но без ограничений, остановку роста вредителя, прекращение питания и уменьшение яйцекладки. Общее количество организмов-вредителей, поражающих организм-хозяин, можно таким образом уменьшить по меньшей мере на 20%, 30%, 40%, предпочтительно по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, более предпочтительно по меньшей мере на 80% или 90% по сравнению с контрольными вредителями. Альтернативно, ущерб, наносимый насекомыми-вредителями, можно уменьшить по меньшей мере на 20%, 30%, 40%, предпочтительно по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, более предпочтительно по меньшей мере на 80% или 90% по сравнению с контрольными насекомыми-вредителями. Таким образом, способ по настоящему изобретению можно применять для достижения по меньшей мере 20%, 30%, 40%, предпочтительно по меньшей мере 50%, 60%, 70%, более предпочтительно по меньшей мере 80% или 90% эффективности при борьбе с вредителями.

Применяемый в данном документе термин ʺрастениеʺ может содержать любой репродуктивный материал или материал для размножения растения. Ссылка на растение также может включать клетки растений, протопласты растений, культуры тканей растений, растительные каллусы, маточные корневища растений и растительные клетки, которые являются интактными в растениях или частях растений, такие как зародыши, пыльца, семяпочки, семена, листья, цветы, ветки, фрукты, ядра, колосья, початки, шелуха, стебли, корни, кончики корней и тому подобное.

Также в данном документе предусматривается применение интерферирующей рибонуклеиновой кислоты (РНК), описываемой в данном документе, или ДНК-конструкции, описываемой в данном документе, для предотвращения и/или борьбы с нападением насекомых-вредителей, предпочтительно нападением насекомых-вредителей на растения.

Настоящее изобретение будет дополнительно понятно со ссылкой на следующие неограничивающие примеры.

Примеры

Пример 1 Идентификация генов-мишеней у видов насекомых вредителей

1.1. Нормализованная cDNA-библиотека Lygus hesperus и получение dsRNA в многолуночных планшетах для скрининговых исследований

Нуклеиновые кислоты выделили из нимф Lygus hesperus различных стадий жизни, включая только что вылупившихся нимф 2, 4, 6 и 9 дневных нимф и взрослых. Библиотеку cDNA получали с использованием ПЦР-набора для синтеза cDNA SMARTer™, следуя инструкциям производителя (Clontech кат. № 634925). Библиотеку cDNA нормализовали с использованием Trimmer kit (Evrogen кат. № NK001) и клонировали в векторе PCR4-TOPO (Invitrogen). Нормализация введенных в клоны адаптеров M2 (Trimmer Kit, Evrogen, SEQ ID NO 92: AAGCAGTGGTATCAACGCAG), противоположно ориентированных на каждом конце клонов. Рекомбинантные конструкции векторов трансформировали в клетки Escherichia coli, штамм TOP10 (Invitrogen). Трансформированные клетки затем разбавляли и высевали с целью получения отдельных колоний или клонов. Клоны проверяли для подтверждения того, что избыточность клонов для библиотеки не превышает 5%. Отдельные клоны отбирали в жидкую LB (бульон Лурия) среду, в 96-луночные планшеты с глубокими лунками, и выращивали в течение ночи при 37°C. Планшеты также включали положительные (Lh423) и отрицательные (FP) контрольные клоны.

Для создания dsRNA с помощью ПЦР создали смысловой и антисмысловой фрагменты ДНК, содержащие последовательность промотора T7. Вкратце, помещали по 1 мкл бактериальной суспензии на клон в многолуночные ПЦР-планшеты, содержащие REDTaq® (Sigma кат. № D4309) и праймеры oGCC2738 (SEQ ID NO 93: AAGCAGTGGTATCAACGCAG) и oGCC2739 (SEQ ID NO 94: GCGTAATACGACTCACTATAGGAAGCAGTGGTATCAACGCAG) на основе M2 и T7-M2 последовательностей, соответственно. За ПЦР-реакцией следовала in vitro транскрипция, где добавляли 6 мкл продукта ПЦР на клон к 9 мкл RiboMAX™ Large Scale RNA Production System-T7 (Promega кат. № P1300) и инкубировали в течение ночи при 37°C. Конечный раствор dsRNA разбавляли в 2 раза в L. hesperus сахарозной пище, содержащей 15% сахарозы и 5 мкг/мкл дрожжевой tRNA (Invitrogen кат. № 15401-029) и использовали для скрининга. dsRNA, соответствующей положительному контрольному клону Lh423, является SEQ ID NO 101, и отрицательному FP контрольному клону является SEQ ID NO 104 (см. таблицу 4).

1.2. Скрининг на новые и эффективные гены-мишени Lygus hesperus с использованием cDNA-библиотеки экспрессируемых dsRNA

Разработали новое скрининговое исследование на эффективные мишени Lygus hesperus. Постановка анализа являлась следующей: каждая лунка 96-луночного планшета содержит однодневную L. hesperus нимфу под действием саше из парафильма, содержащего сахарозную пищу, которая включает либо тестируемую dsRNA, либо контрольную dsRNA в присутствии tRNA. Каждый планшет содержал dsRNA из 90 различных клонов, 3×Lh423 (положительный контроль) и 3×FP (флуоресцентный белок; отрицательный контроль). Каждый клон (тестируемая dsRNA) реплицировали на трех планшетах. После трех дней воздействия зарегистрировали число выживших нимф и заменили пищу на свежую пищу (комплексной) для выращивания, не содержащую dsRNA. Смертность оценивали в дни 4, 6 и 8. Идентичную постановку использовали для подтверждающих анализов первого и второго цикла, соответственно с 8 и 20 насекомыми, с одной нимфой на лунку.

Систему анализа проверяли с использованием dsRNA, соответствующей мишени Lh423, в качестве положительного контроля и dsRNA флуоресцентного белка в качестве отрицательного контроля: более 90% являлись истинно положительными и менее 5% являлись ложноположительными, соответственно.

Протестировали двадцать 96-луночных планшетов, поименованных Lh001-Lh020 (см. нижнюю линию на фигурах 1 и 2), содержащих 1800 отдельных клонов. 205 кандидатов идентифицировали и протестировали в первом подтверждающем анализе. Устанавливая пороговую величину на показателе ≥50% смертности, 41 отдельный клон идентифицировали и продвинули во второй цикл подтверждения. В анализе клоны сравнивали с положительными контролями Lh423 (RpL19) и Lh105.2 (Sec23) и отрицательным контролем Pt (кодирующим флуоресцентный белок коралла). dsRNA, соответствующей положительному контрольному клону(Lh423), является SEQ ID NO 101, соответствующей положительному контрольному клону Lh105.2 является SEQ ID NO 102 и отрицательному контрольному клону (Pt), является SEQ ID NO 104 (см. таблицу 4).

Подтверждающие анализы второго цикла, тестирующие 20 насекомых/тестируемых dsRNA, начали для всех тестируемых dsRNA, показывающих ≥50% смертности в первом подтверждении (фигуры 1 и 2). Подходящие мишени, соответствующие подтвержденным тестируемым dsRNA, обозначили с помощью ʺLhxxx числоʺ (см. таблицу 1). Применяя то же пороговое значение при ≥50% смертности, в первом скрининге подтвердили 15 мишеней.

Выполнили второй скрининг для идентификации новых мишеней Lygus hesperus. Результаты подтверждающих анализов второго цикла представлены на фигуре 12. Применяя то же пороговое значение при ≥50% смертности, несколько мишеней подтвердили во втором скрининге (см. таблицу 1С).

1.3. Идентификация мишеней Lygus

Одновременно с подтверждающими анализами на насекомых, вставки, соответствующие положительным клонам, секвенировали и для подтверждения идентичности мишеней использовали BlastX поиски по сравнению с базами данных белков Drosophila и Triboliu. В таблице 1 приводится краткое изложение биоинформационного анализа и текущая аннотация новых идентифицированных целевых последовательностей L. hesperus.

Пятнадцать новых мишеней L. hesperus идентифицировали в первом скрининге и 11 новых мишеней L. Hesperus идентифицировали во втором скрининге. Все мишени проявляют высокую эффективность против нимф L. hesperus, указывая на то, что cDNA, кодирующие двухцепочечные РНК, содержащиеся в них, являются существенно важными для выживания вредителя и, таким образом, представляют гены-мишени, представляющие интерес в целях борьбы с вредителями. Последовательности ДНК и предсказанные аминокислотные последовательности данных генов-мишеней, следовательно, определили и представили в таблицах 2 и 3, соответственно.

Lh594, ортолог Lygus hesperus к тропонину I Drosophila, участвующему в сокращении мышц и, следовательно, отсутствующему у растений, представляет новый класс мишеней, относящихся к специфическому для животных физиологическому пути, еще не изученному на GM-RNAi. У плодовой мушки тропонин I описан как гаплонедостаточный ген, проявляющий мутантный фенотип в гетерозиготном состоянии. Такие гены могут являться особенно восприимчивыми к снижению уровней экспрессии mRNA и, таким образом, могут рассматриваться как идеальные мишени для RNAi.

В данном пути Lh594 отобрали восемь мишеней (см. таблицу 1B). Для каждой мишени до 4 пар вырожденных праймеров ПЦР сконструировали на основе выравнивания последовательностей различных насекомых, включая пчелу, Tribolium и тлю. Данные праймеры применяют для амплификации фрагментов из мишеней Lygus hesperus. Последовательности ДНК и предсказанные аминокислотные последовательности данных генов-мишеней определили и представили в таблицах 2 и 3, соответственно.

Таблица 1
новые мишени Lygus hesperus, ранжированные по % смертности в соответствии с результатами второго подтверждающего анализа (первый скрининг)
ID мишени позиция во 2-м подтвер-ждении Лучшие попадания Drosophila НАЗВАНИЕ ОБОЗНАЧЕНИЕ
Lh594 1 CG7178 wings up A (тропонин I) wupA
Lh618 2 CG2168 рибосомный белок S3A RpS3A
Lh609 3 CG4087 рибосомный белок LP1 RpLP1
Lh595 4 - не обнаружено попаданий для Drosophila, специфическая мишень/
последовательность Lygus
Lh611 5 CG6779 рибосомный белок S3 RpS3
Lh560 6 CG10423 рибосомный белок S27 RpS27
Lh596 7 - не обнаружено попаданий для Drosophila, специфическая мишень/последовательность Lygus RpL34b
Lh615 8 CG11522 рибосомный белок L6 RpL6
Lh617 9 CG7283 рибосомный белок L10Ab RpL10Ab
Lh612 10 CG13389 рибосомный белок S13 RpS13
Lh246 11 CG3195 рибосомный белок L12 RpL12
Lh429 12 CG8900 рибосомный белок S18 RpS18
Lh610 13 CG5502 рибосомный белок L4 RpL4
Lh597 14 не обнаружено попаданий
Lh598 15 CG34069 субъединица II митохондриальной цитохром с-оксидазы mt:CoII
Lh614 - CG7610 γ-цепь ATP синтазы ATPsyn-γ

Таблица 1B
новые мишени Lygus hesperus в пути Lh594
ID мишени Лучшее попадание (попадания) НАЗВАНИЕ ОБОЗНАЧЕНИЕ
Lh619 CG7107 тропонин T (upheld) up
Lh620 CG17927 тяжелая цепь миозина Mhc
Lh621 CG4843 Тропомиозин2 (Tm2) Tm2
Lh622 CG3201 цитоплазматическая легкая цепь миозина Mlc-c
Lh623 CG3595 spaghetti squash sqh
Lh624 CG15792 zipper zip
Lh625 *CG2981,CG7930,CG9073,CG6514,CG12408 тропонин C
Lh626 *CG9073,CG7930,CG2981,CG12408,CG6514 тропонин C
* не ясно: несколько попаданий в семействе ранжированы в соответствии с собственным значением.

Таблица 1C
новые мишени Lygus hesperus, ранжированные по % смертности в соответствии с результатами второго подтверждающего анализа (второй скрининг)
ID мишени позиция
во 2-м подтверждении
Лучшие попадания Drosophila НАЗВАНИЕ ОБОЗНАЧЕНИЕ
Lh631 1 CG6846 Рибосомный белок L26 RpL26
Lh634.2 2 CG12775 Рибосомный белок L21 RpL21
Lh634.1 3 CG12775 Рибосомный белок L21 RpL21
Lh630 4 CG11271 Рибосомный белок S12 RpS12
Lh632 5 CG2998 Рибосомный белок S28b RpS28b
Lh618.2 6 CG2168 Рибосомный белок S3A RpS3A
Lh629 7 CG4651 Рибосомный белок L13 RpL13
Lh633.2 8 CG17521 Рибосомный белок L10 RpL10
Lh628 9 CG17489 Рибосомный белок L5 RpL5
Lh633 10 CG17521 Рибосомный белок L10 RpL10
Lh627 11 CG2033 Рибосомный белок S15Aa RpS15A

1.4. Клонирование полноразмерной cDNA с помощью RACE (быстрая амплификация концов cDNA)

Для клонирования полноразмерной cDNA, начиная от известного клона внутреннего фрагмента из самых эффективных мишеней, использовали набор 5’/3’ RACE (Roche, кат. № 1734792; на основе Sambrook, J. & Russell, D.M). Следовали стандартному протоколу, описанному в руководстве по эксплуатации. Вкратце, для 5’ RACE сконструировали антисмысловой праймер, специфический для целевой последовательности, на известной последовательности и применяли для синтеза первой цепи cDNA, применяя РНК Lygus в качестве матрицы. К первой цепи cDNA добавили хвост и использовали в качестве якоря для синтеза второй цепи и амплификации неизвестной концевой части транскрипта. Для 3’ RACE применяли якорный олиго-dT праймер для синтеза первой цепи cDNA. Для 5’ и 3’ RACE во второй реакции ПЦР применяли вложенные праймеры, специфические для целевой последовательности. Фрагменты ПЦР анализировали на агарозном геле, очищали, клонировали и секвенировали для подтверждения.

Последовательности полноразмерной cDNA, соответствующие мишеням, собрали в VectorNTi, полностью интегрированном пакете программного обеспечения для анализа последовательности, с целью анализа последовательности ДНК (Invitrogen).

Пример 2. In vitro получение двухцепочечных РНК для сайленсинга генов

2.2. Получение dsRNA, соответствующих частичным последовательностям генов-мишеней Lygus hesperus

Двухцепочечную РНК синтезировали в миллиграммовых количествах. Сначала две отдельные матрицы 5' T7 РНК-полимеразного промотора (смысловая матрица и антисмысловая матрица) создали с помощью ПЦР. ПЦР разрабатывали и проводили таким образом, чтобы получить смысловой и антисмысловой матричные полинуклеотиды, каждый из которых обладает T7 промотором в различной ориентации по отношению к целевой последовательности, подлежащей транскрибированию.

Для каждого из генов-мишеней создали смысловую матрицу, применяя мишень-специфический T7 прямой праймер и мишень-специфический обратный праймер. Антисмысловые матрицы создали, применяя мишень-специфический прямой праймер и мишень-специфический T7 обратный праймер. Последовательности соответствующих праймеров для амплификации смысловой и антисмысловой матриц посредством ПЦР для каждого из генов-мишеней приведены в таблице 4. ПЦР-продукты анализировали с помощью электрофореза в агарозном геле и очистили. Полученные смысловую и антисмысловую T7 матрицы смешали и транскрибировали путем добавления T7 РНК-полимеразы. Одноцепочечным РНК, полученным путем транскрипции с матриц, предоставили возможность соединиться, обработали с помощью ДНКазы и РНКазы и очистили осаждением. Смысловая цепь образующейся в результате dsRNA, полученная от каждого из генов-мишеней, приведена в таблице 4.

2.2. Испытания анализа выживаемости для новых мишеней Lygus hesperus

Для создания возможности ранжирования в соответствии с эффективностью, in vitro dsRNA, соответствующие новым мишеням, синтезировали и применили к L. hesperus в 10-дневных биопробах анализа выживаемости. Вкратце, однодневных нимф L. hesperus поместили в 96-луночные планшеты с сахарозными пленками, содержащими 0,5 мкг/мкл dsRNA-мишени, с добавлением 5 мкг/мкл дрожжевой tRNA. Планшеты инкубировали в течение 3 дней в стандартных условиях выращивания Lygus. В дни 3, 6 и 8 пищевые пленки обновляли пленками, содержащими только пищу Lygus. Lh423 (RpL19) использовали в качестве положительного контроля, а GFP dsRNA и сахарозную пищу использовали в качестве отрицательного контроля.

Результаты анализа выживаемости подтвердили данные первого и второго подтверждающих анализов. Lh594 установили в качестве высокоэффективной мишени с активностью и скоростью поражения, более сильной, чем сильный контроль Lh423.

До сих пор скрининг Lygus на новые мишени идентифицировал новые мишени с активностями более высокими или находящимися в диапазоне положительного контроля Lh423, которые включают Lh429, Lh594, Lh609, Lh610, Lh611, Lh617 и Lh618. Смертность, вызванная данными мишенями, показана на фигурах 3 и 4.

Для обеспечения более точного ранжирования мишеней в соответствии с их активностью выполнили анализы концентрации в зависимости от дозы. Новые мишени тестировали в in vitro анализах при концентрации в диапазоне от 0,4 до 0,025 мкг/мкл. Согласно условию, 24-дневных нимф тестировали в постановке с 96-луночным планшетом, в сахарозной пище с добавлением dsRNA и носителя tRNA. Результаты представлены в виде % выживаемости в течение 10-дневного эксперимента (фигуры 5-9) и суммированы в таблице 5.

На основе анализа кривой концентрации мишени ранжировали путем сравнения с исходными контролями Lh423 и Lh105 (таблица 5).

Таблица 5
ранжирование новых мишеней Lygus в соответствии с DRC и по сравнению с исходными мишенями Lh423 и Lh105
ID
мишени
Эффективность, выраженная в мкг/мкл dsRNA, необходимая для достижения 90% уничтожения в день 7
Lh594 0,025 (в день 6)
Lh618 0,05-0,1
Lh612 0,05
Lh615 0,05
Lh423 0,1
Lh595 0,1
Lh560 0,1
Lh610 0,1
Lh617 0,1
Lh105 0,2
Lh614 0,2 (в день 6)
Lh611 0,2
Lh596 0,3
Lh609 Не определено
Lh429 Не определено

Эффективность Lh594 подтвердили дополнительно. Эффект данной мишени отчетливо наблюдается по меньшей мере за один день до эффекта других мишеней и исходного положительного контроля Lh105 и Lh423. Так как Lh594 являлась высокоэффективной, в стандартном DRC эксперименте с концентрацией в диапазоне от 0,4 до 0,025 мкг/мкл dsRNA LD50 не достигли (фигура 6), следовательно, Lh594 эксперимент повторили, включая более низкие концентрации в диапазоне от 0,05 до 0,001 мкг/мкл dsRNA (фигура 10). В заключение, активность Lh594 наблюдали при такой низкой концентрации, как 0,0025 мкг/мкл, и получили примерно 90% уничтожение (что соответствует примерно 10% выживаемости) в день 6 при 0,025 мкг dsRNA.

Для дополнительного изучения эффективности Lh594 и роли носителя tRNA в ответе на RNAi у Lygus hesperus дополнительные in vitro анализы питания подготовили в отсутствие носителя tRNA. Lh594, Lh423 (исходный контроль) и GFP (отрицательный контроль) dsRNA получили in vitro, применяя стандартный способ. dsRNA очистили и тестировали при 5 мкг/мкл в отсутствие tRNA (фигура 11 A).

В отсутствие tRNA, мишени Lh594 и Lh423 индуцировали высокую летальность у нимф Lygus. Результаты данного эксперимента были воспроизведены позднее. dsRNA-мишень обладала способностью индуцировать эффекты RNAi-путем-кормления у нимф Lygus в отсутствие tRNA.

Для исследования активности dsRNA при более низких концентрациях в отсутствие носителя tRNA, поставили дополнительные эксперименты, применяя уменьшение количеств dsRNA (фигура 11 B).

Аналогичный подход применялся для мишеней Lygus, которые идентифицировали во втором скрининге. Для обеспечения ранжирования мишеней в соответствии с их активностью выполнили анализы концентрации в зависимости от дозы. Новые мишени тестировали в in vitro анализах при концентрациях в диапазоне от 0,5 до 0,05 мкг/мкл. Согласно условию, 24-дневных нимф тестировали в постановке с 96-луночным планшетом, в сахарозной пище с добавлением dsRNA и носителя tRNA. Результаты представлены в виде % выживаемости в течение 9-дневного эксперимента (фигуры 15 A-D). Lh594 и Lh423 включили в анализ в качестве эталонных мишеней. Результаты суммированы в таблице 6. На основе анализа кривой концентрации мишени ранжировали путем сравнения с исходным контролем Lh423.

Таблица 6
новые мишени Lygus из второго скрининга, ранжирование в соответствии с DRC и по сравнению с исходными мишенями Lh423 и Lh594
ID мишени Эффективность, выраженная в мкг/мкл dsRNA, необходимой для достижения 90% уничтожения в день 7
Lh594 0,025 (в день 6)
Lh634 0,1
Lh423 0,1
Lh631 0,4
Lh633 0,4
Lh627 0,5
Lh628 0,5
Lh630 0,5
Lh632 0,5
Lh629 Не определено

Пример 3. Скрининг пути тропонина

Для создания возможности тестирования мишеней пути тропонина, in vitro полученные dsRNA, соответствующие Lh619, Lh620, Lh621, Lh622, Lh622, Lh623, Lh624, Lh625 и Lh626, синтезировали и применили к L. hesperus в 10-дневных биопробах анализа выживаемости. Вкратце, однодневных нимф L. hesperus поместили в 96-луночные планшеты с сахарозными пленками, содержащими 0,5 мкг/мкл dsRNA-мишени, с добавлением 5 мкг/мкл дрожжевой tRNA. Планшеты инкубировали в течение 3 дней в стандартных условиях выращивания Lygus. В дни 3, 6 и 8 пищевые пленки обновляли пленками, содержащими только пищу Lygus. Lh594 (тропонин I) использовали в качестве положительного контроля и GFP dsRNA и сахарозную пищу использовали в качестве отрицательных контролей (фигура 13). Четыре мишени затем включили в анализы кривой дозовой зависимости в in vitro анализе, с концентрациями в диапазоне от 0,4 до 0,025 мкг/мкл. Согласно условию, 24-дневных нимф тестировали в постановке с 96-луночным планшетом, в сахарозной пище с добавлением dsRNA и носителя tRNA. Результаты представлены в виде % выживаемости в течение 10-дневного эксперимента (фигуры 14 A-B).

Пример 4. Идентификация генов-мишеней у Leptinotarsa decemlineata

4.1. Нормализованная cDNA-библиотека Leptinotarsa decemlineata и получение dsRNA в многолуночных планшетах для скрининговых исследований

Нуклеиновые кислоты выделили из личинок Leptinotarsa decemlineata различных стадий. Библиотеку cDNA получали с использованием ПЦР-набора для синтеза cDNA SMARTer™, следуя инструкциям производителя (Clontech кат. № 634925). Библиотеку cDNA нормализовали, применяя набор Trimmer kit (Evrogen кат. № NK001), и клонировали в PCR®-BLUNTII-TOPO® вектор (Invitrogen). При нормализации клонов вводили M2 адаптеры (Trimmer Kit, Evrogen, SEQ ID NO 92: AAGCAGTGGTATCAACGCAG), противоположно ориентированных на каждом конце клонов. Рекомбинантные конструкции векторов трансформировали в клетки Escherichia coli, штамм TOP10 (Invitrogen). Трансформированные клетки затем разбавляли и высевали с целью получения отдельных колоний или клонов. Клоны проверяли для подтверждения того, что избыточность клонов для библиотеки не превышает 5%. Отдельные клоны инокулировали в жидкую LB (бульон Лурия) среду, в 96-луночные планшеты, и выращивали в течение ночи при 37°C. Планшеты также включали положительный (Ld513) и отрицательный (FP) контрольные клоны.

Для создания dsRNA с помощью ПЦР создали смысловой и антисмысловой фрагменты ДНК, содержащие последовательность T7 промотора. Вкратце, на клон, 1 мкл бактериальной суспензии помещали в многолуночные ПЦР-планшеты, содержащие REDTaq® (Sigma кат. № D4309) и праймеры oGCC2738 (SEQ ID NO 93: AAGCAGTGGTATCAACGCAG) и oGCC2739 (SEQ ID NO 94: GCGTAATACGACTCACTATAGGAAGCAGTGGTATCAACGCAG) на основе последовательностей M2 и T7-M2, соответственно. За ПЦР реакцией следовала in vitro транскрипция, при этом на клон использовали 6 мкл ПЦР-продукта в 20 мкл реакционного объема, содержащего реагенты для транскрипции, обеспеченные набором RiboMAX™ Large Scale RNA Production System-T7 kit (Promega кат. № P1300), и инкубировали в течение ночи при 37°C. Конечный раствор dsRNA разбавляли стерильной водой Milli-Q и использовали для скрининга. dsRNA, соответствующей положительному Ld513 контрольному клону, является SEQ ID NO 400 (см. таблицу 9), и отрицательному FP контрольному клону, является SEQ ID NO 104 (см. таблицу 4).

4.2. Скрининг на новые и эффективные гены мишени Leptinotarsa decemlineata с использованием cDNA-библиотеки экспрессируемых dsRNA

Каждая лунка 48-луночного планшета содержала 0,5 мл искусственной пищи, предварительно обработанной с помощью наружного покрытия 25 мкл (или 1 мкг) тестируемой или контрольной dsRNA. Одну L2 личинку помещали в каждую лунку и на клон тестировали 3 личинки. Количества выживших CPB оценивали в дни 4, 7 и 10.

Во второй биопробе личинок CPB кормили пищей, обработанной наружно наносимой тестируемой dsRNA, полученной из клонов, полученных из нормализованной библиотеки cDNA. Одну личинку помещали в лунку 48-луночного мультипланшета, содержащего 0,5 мл пищи, предварительно обработанной с помощью наружного покрытия 25 мкл 40 нг/мкл dsRNA раствора. Всего на обработку (клон) тестировали двадцать четыре личинки. Количество выживших насекомых оценивали в дни 4, 5, 6, 7, 8 и 11. Процент смертности личинок рассчитывали относительно дня 0 (начало исследования) (см. фигуру 21).

4.3. Идентификация мишеней у L. decemlineata жуков

Новые целевые последовательности из скрининга в 5.2. и целевые последовательности, соответствующие мишеням пути тропонина, ортологическим Lygus Lh594, Lh619 и Lh620 последовательностям, идентифицировали у L. decemlineata. Праймеры, которые обеспечили соответствующие фрагменты cDNA для Ld594, перечислены в таблице 17. Последовательности cDNA и предсказанные аминокислотные последовательности данных генов-мишеней определили и представили в таблицах 7 и 9, соответственно.

4.4. Получение dsRNA, соответствующих частичным последовательностям L. decemlineata генов-мишеней

dsRNA синтезировали с использованием праймеров, которые указаны в таблице 9. Смысловая цепь полученной в результате dsRNA, полученная из генов-мишеней, приведена в таблице 9.

4.5. Испытания анализа выживаемости для новых L. decemlineata мишеней

Ранний личиночный анализ

Синтетические dsRNA получили для 3 мишеней, Ld594, Ld619 и Ld620, и тестировали в анализе с питанием на личинках CPB (см. фигуру 16). 10-дневный анализ проводили в 48-луночных планшетах, на искусственной пище (на основе Gelman et al, J Ins Sc,1:7, 1-10: Artificial diets for rearing the Colorado Potato Beetle), с добавлением 1 мкг dsRNA/лунку с 12 личинками согласно условиям.

Наблюдали четкий эффект на развитие личинок. Второй анализ поставили для изучения эффекта данных dsRNA в течение окукливания и метаморфоза (см. анализ окукливания ниже).

Анализ окукливания

Анализ окукливания CPB поставили для изучения эффекта RNAi нокдауна Ld594, Ld619 и Ld620 в течение окукливания и метаморфоза. Личинок четвертой возрастной стадии кормили 1 мкг in vitro синтезированной dsRNA, распределенной на листовых дисках картофеля, и затем переносили в коробку с необработанными свежими листьями картофеля. Через четыре дня выживших насекомых помещали на вермикулит для обеспечения окукливания. Обработанные с помощью Lh594 насекомые были медленными, более мелкими и, в основном, не способными пройти окукливание. Вылупление куколки оценивали в конце эксперимента. Для необработанного контроля 24 личинки окуклились и все вылупились в здоровых имаго. Для Ld620 наблюдали снижение численности личинок, прогрессирующих в окукливание. Для трех протестированных мишеней отсутствовали личинки, развившиеся в здоровые куколки, и ни одна не вылупилась в имаго. Мертвые насекомые, извлеченные из вермикулита, демонстрировали различную степень пороков развития (фиг. 17).

Ld594, Ld619 и Ld620 вначале предстали в качестве несмертельных мишеней в анализе личинок CPB, хотя снижение жизнеспособности отчетливо наблюдалось у насекомых, обработанных dsRNA. С другой стороны, в анализе окукливания все 3 мишени индуцировали сильные эффекты и ингибировали вхождение в окукливание и/или метаморфоз.

Анализ имаго

Для оценки активности Ld594, Ld619 и Ld620 у имаго CPB поставили анализ листовых дисков. Листовые диски картофеля (1,7 см в диаметре) покрыли dsRNA или контролями и поместили в 3,5 см чашки Петри с одним взрослым жуком. На следующий день насекомым предоставили свежий обработанный листовой диск. На третий день имаго перенесли в коробку, содержащую достаточно свежих, необработанных листьев картофеля для поддержания выживания необработанных контролей. На обработку тестировали 6 имаго и подсчитывали количества выживших и умирающих насекомых с регулярными интервалами от дня 6 до дня 13. Насекомые считались умирающими, если они не могли перевернуться после укладывания на спину.

Несмотря на относительно высокий уровень фона в отрицательном контроле в данном конкретном анализе, наблюдали четкие эффекты на насекомых, которых подвергли воздействию Ld594 или Ld619 dsRNA (фиг. 18).

Пример 5. Идентификация генов-мишеней у Nilaparvata lugens

5.1. Идентификация мишеней Nilaparvata lugens

Новые целевые последовательности, соответствующие мишеням пути тропонина и названные Nl594 (тропонин I), Nl619 (тропонин T) и Nl626 (тропонин C), идентифицировали у коричневого дельфацида, Nilaparvata lugens. Ортологические последовательности генов Lygus, названные Nl594 (тропонин I), Nl619 (тропонин T) и Nl625/626 (тропонин C), клонировали посредством ПЦР с вырожденными праймерами с использованием BPH cDNA в качестве матрицы. В дополнение, полноразмерную cDNA идентифицировали для Nl594, применяя RACE (см. способ выше). ПЦР-систему AmpliTaq Gold (Applied Biosystems) применяли, следуя инструкциям производителя и в стандартных условиях для реакции ПЦР с вырожденными праймерами, как правило, следующим образом: 1 цикл в 10 минут при 95°C, с последующими 40 циклами по 30 секунд при 95°C, 1 минуту при 50°C и 1 минуту при 72°C, с последующими 10 минутами при 72°C. Для увеличения степени успеха до 10 различных вырожденных праймеров, прямых и обратных, разработали на основе выравниваний ортологических последовательностей у других видов и использовали в различных комбинациях. Полученные ПЦР-фрагменты очищали из геля с помощью набора для экстракции геля (Qiagen Cat. No 28706) и клонировали в TOPO TA вектор (Invitrogen). Клоны секвенировали и консенсусные последовательности использовали в Blast поисках в отношении различных доступных баз данных последовательностей насекомых для подтверждения значимости вставки. Вырожденные праймеры, которые привели к успешной амплификации, перечислены в таблице 18.

Последовательности ДНК и предсказанные аминокислотные последовательности данных генов-мишеней и еще одного гена-мишени (Nl537) определили и представили в таблицах 10 и 11, соответственно.

5.2 Получение dsRNA, соответствующих частичным последовательностям генов-мишеней Nilaparvata lugens

dsRNA синтезировали с использованием праймеров, которые указаны в таблице 12. Смысловая цепь образующейся в результате dsRNA, полученная от каждого из генов-мишеней, приведена в таблице 12.

5.3. Испытания анализа выживаемости для новых мишеней Nilaparvata lugens

dsRNA синтезировали и тестировали в предварительно оптимизированных анализах RNAi-путем-кормления у BPH, в присутствии цвиттерионного детергента, CHAPSO, при 0,1% конечной концентрации. dsRNA тестировали при 0,5 мкг/мкл конечной концентрации. Nl537, эффективную мишень в анализах BPH, использовали в качестве исходной мишени в данном анализе. Выживаемость насекомых оценивали на протяжении 9 дней.

Результаты биопробы показали, что у BPH Nl594, Nl619 и Nl626 также являлись эффективными мишенями RNAi у BPH (фиг. 19).

Пример 6. Идентификация генов-мишеней у Acyrthosiphon pisum

6.1 Идентификация мишеней Acyrthosiphon pisum

Новые целевые последовательности идентифицировали у тлей и назвали Ap423, Ap537, Ap560 и Ap594, следуя той же номенклатуре: “Apxxx”, где “Ap” соответствует Acyrthosiphon pisum и “xxx” соответствует ID мишени. Праймеры разрабатывали на основе открытого источника предсказания генов в AphidBase (ref: http://www.aphidbase.com/) (таблица 13).

Последовательности ДНК и предсказанные аминокислотные последовательности данных генов-мишеней определили и представили в таблицах 14 и 15, соответственно.

6.2 Получение dsRNA, соответствующих частичным последовательностям генов-мишеней тли

dsRNA синтезировали с использованием праймеров, которые указаны в таблице 16. Смысловая цепь образующейся в результате dsRNA, полученная от каждого из генов-мишеней, приведена в таблице 16.

6.3 Испытания анализа выживаемости для новых мишеней у тлей

RNAi-путем-кормления тестировали у Acyrthosiphon pisum (гороховая тля) с 4 мишенями Ap594, Ap423, Ap560, Ap537. Последовательности амплифицировали с помощью ПЦР с использованием праймеров, разработанных на основе открытого источника информации о последовательностях (http://www.aphidbase.com), и cDNA, полученной из тлей. Синтетические dsRNA получали и тестировали в конечной концентрации 0,5 мкг/мкл в присутствии 5 мкг/мкл дрожжевой tRNA в сахарозной пище. Десять новорожденных нимф гороховой тли поместили в маленькую чашку Петри (32 мм). Пятьдесят мкл пищи (с tRNA и dsRNA) наносили пипеткой на верхнюю часть первого слоя парафильма. Второй слой парафильма покрывал пищу и создавал пакетик для кормления, где тли могли питаться. На каждую мишень подготовили пять повторов 10 новорожденных нимф. GFP dsRNA использовали в качестве отрицательного контроля. Пищу обновляли в дни 4 и 7 анализов и оценивали выживаемость (фиг. 20).

Таблица 2
ID мишени Последовательность cDNA (смысловая цепь) 5’→3’
Lh594 SEQ ID NO 1
Lh609 SEQ ID NO 3
Lh610 SEQ ID NO 5
Lh610 (b) SEQ ID NO 139
Lh611 SEQ ID NO 7
Lh611 (b) SEQ ID NO 140
Lh617 SEQ ID NO 9
Lh618 SEQ ID NO 11
Lh618 (b) SEQ ID NO 141
Lh429 SEQ ID NO 13
Lh423 SEQ ID NO 95
Lh105.2 SEQ ID NO 96
Lh560 SEQ ID NO 15
Lh615 SEQ ID NO 17
Lh612 SEQ ID NO 19
Lh246 SEQ ID NO 21
Lh597 SEQ ID NO 23
Lh598 SEQ ID NO 25
Lh619 SEQ ID NO 121
Lh619 (b) SEQ ID NO 142
Lh619 (c) SEQ ID NO 143
Lh620 SEQ ID NO 122
Lh620 (b) SEQ ID NO 144
Lh620 (c) SEQ ID NO 145
Lh621 SEQ ID NO 123
Lh622 SEQ ID NO 124
Lh623 SEQ ID NO 125
Lh623 (b) SEQ ID NO 146
Lh624 SEQ ID NO 126
Lh624 (b) SEQ ID NO 147
Lh625 SEQ ID NO 127
Lh625 (b) SEQ ID NO 148
Lh626 SEQ ID NO 128
Lh626 (b) SEQ ID NO 149
Lh614 SEQ ID NO 129
Lh627 SEQ ID NO 150
Lh628 SEQ ID NO 152
Lh629 SEQ ID NO 154
Lh630 SEQ ID NO 156
Lh631 SEQ ID NO 158
Lh632 SEQ ID NO 160
Lh633.1 SEQ ID NO 162
Lh633.2 SEQ ID NO 163
Lh634.1 SEQ ID NO 165
Lh634.2 SEQ ID NO 167
Lh595.1 SEQ ID NO 168
Lh595.2 SEQ ID NO 170
Lh596 SEQ ID NO 172

Таблица 3
ID мишени Соответствующая аминокислотная последовательность
cDNA клона, представленного в таблице 2
Lh594 SEQ ID NO 79
Lh609 SEQ ID NO 80
Lh610 SEQ ID NO 81
Lh610 (b) SEQ ID NO 326
Lh611 SEQ ID NO 82
Lh611 (b) SEQ ID NO 327
Lh617 SEQ ID NO 83
Lh618 SEQ ID NO 84
Lh618 (b) SEQ ID NO 328
Lh429 SEQ ID NO 85
Lh429 (b) SEQ ID NO 329
Lh423 SEQ ID NO 99
Lh105.2 SEQ ID NO 100
Lh560 SEQ ID NO 86
Lh615 SEQ ID NO 87
Lh612 SEQ ID NO 88
Lh246 SEQ ID NO 89
Lh597 SEQ ID NO 90
Lh598 SEQ ID NO 91
Lh619 SEQ ID NO 330
Lh620 SEQ ID NO 331
Lh621 SEQ ID NO 332
Lh622 SEQ ID NO 333
Lh623 SEQ ID NO 334
Lh624 SEQ ID NO 335
Lh625 SEQ ID NO 336
Lh626 SEQ ID NO 337
Lh614 SEQ ID NO 338
Lh627 SEQ ID NO 339
Lh628 SEQ ID NO 340
Lh629 SEQ ID NO 341
Lh630 SEQ ID NO 342
Lh631 SEQ ID NO 343
Lh632 SEQ ID NO 344
Lh633.1 SEQ ID NO 345
Lh633.2 SEQ ID NO 346
Lh634.1 SEQ ID NO 347
Lh634.2 SEQ ID NO 348

Таблица 4
ID мишени Прямые праймеры
5’→3’
Обратные праймеры
5’→3’
dsRNA: смысловая цепь, представленная эквивалентной последовательностью ДНК
5’→3’
Lh594 SEQ ID NO 27
SEQ ID NO 29
SEQ ID NO 28
SEQ ID NO 30
SEQ ID NO 2
Lh609 SEQ ID NO 31
SEQ ID NO 33
SEQ ID NO 32
SEQ ID NO 34
SEQ ID NO 4
Lh610 SEQ ID NO 35
SEQ ID NO 37
SEQ ID NO 36
SEQ ID NO 38
SEQ ID NO 6
Lh611 SEQ ID NO 39
SEQ ID NO 41
SEQ ID NO 40
SEQ ID NO 42
SEQ ID NO 8
Lh617 SEQ ID NO 43
SEQ ID NO 45
SEQ ID NO 44
SEQ ID NO 46
SEQ ID NO 10
Lh618 SEQ ID NO 47
SEQ ID NO 49
SEQ ID NO 48
SEQ ID NO 50
SEQ ID NO 12
Lh429 SEQ ID NO 51
SEQ ID NO 53
SEQ ID NO 52
SEQ ID NO 54
SEQ ID NO 14
Lh423 SEQ ID NO 105
SEQ ID NO 107
SEQ ID NO 106
SEQ ID NO 108
SEQ ID NO 101
Lh105.2 SEQ ID NO 109
SEQ ID NO 111
SEQ ID NO 110
SEQ ID NO 112
SEQ ID NO 102
GFP SEQ ID NO 113
SEQ ID NO 115
SEQ ID NO 114
SEQ ID NO 116
SEQ ID NO 103
Pt SEQ ID NO 117
SEQ ID NO 119
SEQ ID NO 118
SEQ ID NO 120
SEQ ID NO 104
Lh560 SEQ ID NO 55
SEQ ID NO 57
SEQ ID NO 56
SEQ ID NO 58
SEQ ID NO 16
Lh615 SEQ ID NO 59
SEQ ID NO 61
SEQ ID NO 60
SEQ ID NO 62
SEQ ID NO 18
Lh612 SEQ ID NO 63
SEQ ID NO 65
SEQ ID NO 64
SEQ ID NO 66
SEQ ID NO 20
Lh246 SEQ ID NO 67
SEQ ID NO 69
SEQ ID NO 68
SEQ ID NO 70
SEQ ID NO 22
Lh597 SEQ ID NO 71
SEQ ID NO 73
SEQ ID NO 72
SEQ ID NO 74
SEQ ID NO 24
Lh598 SEQ ID NO 75
SEQ ID NO 77
SEQ ID NO 76
SEQ ID NO 78
SEQ ID NO 26
Lh619 SEQ ID NO 206
SEQ ID NO 208
SEQ ID NO 207
SEQ ID NO 209
SEQ ID NO 130
Lh620 SEQ ID NO 210
SEQ ID NO 212
SEQ ID NO 211
SEQ ID NO 213
SEQ ID NO 131
Lh621 SEQ ID NO 214
SEQ ID NO 216
SEQ ID NO 215
SEQ ID NO 217
SEQ ID NO 132
Lh622 SEQ ID NO 218
SEQ ID NO 220
SEQ ID NO 219
SEQ ID NO 221
SEQ ID NO 133
Lh623 SEQ ID NO 222
SEQ ID NO 224
SEQ ID NO 223
SEQ ID NO 225
SEQ ID NO 134
Lh624 SEQ ID NO 226
SEQ ID NO 228
SEQ ID NO 227
SEQ ID NO 229
SEQ ID NO 135
Lh625 SEQ ID NO 230
SEQ ID NO 232
SEQ ID NO 231
SEQ ID NO 233
SEQ ID NO 136
Lh626 SEQ ID NO 234
SEQ ID NO 236
SEQ ID NO 235
SEQ ID NO 237
SEQ ID NO 137
Lh614 SEQ ID NO 238
SEQ ID NO 240
SEQ ID NO 239
SEQ ID NO 241
SEQ ID NO 138
Lh627 SEQ ID NO 242
SEQ ID NO 244
SEQ ID NO 243
SEQ ID NO 245
SEQ ID NO 151
Lh628 SEQ ID NO 246
SEQ ID NO 248
SEQ ID NO 247
SEQ ID NO 249
SEQ ID NO 153
Lh629 SEQ ID NO 250
SEQ ID NO 25
SEQ ID NO 251
SEQ ID NO 253
SEQ ID NO 155
Lh630 SEQ ID NO 254
SEQ ID NO 256
SEQ ID NO 255
SEQ ID NO 257
SEQ ID NO 157
Lh631 SEQ ID NO 258
SEQ ID NO 260
SEQ ID NO 259
SEQ ID NO 261
SEQ ID NO 159
Lh632 SEQ ID NO 262
SEQ ID NO 264
SEQ ID NO 263
SEQ ID NO 265
SEQ ID NO 161
Lh633.2 SEQ ID NO 266
SEQ ID NO 268
SEQ ID NO 267
SEQ ID NO 269
SEQ ID NO 164
Lh634.1 SEQ ID NO 270
SEQ ID NO 272
SEQ ID NO 271
SEQ ID NO 273
SEQ ID NO 166
Lh595 SEQ ID NO 274
SEQ ID NO 276
SEQ ID NO 275
SEQ ID NO 277
SEQ ID NO 169
Lh596 SEQ ID NO 278
SEQ ID NO 280
SEQ ID NO 279
SEQ ID NO 281
SEQ ID NO 173

Таблица 7
ID мишени Последовательность cDNA (смысловая цепь)
5’→3’
Ld594 SEQ ID NO 174
Ld594(b) SEQ ID NO 404
Ld619 SEQ ID NO 176
Ld620 SEQ ID NO 178
Ld583 SEQ ID NO 386
Ld584 SEQ ID NO 387
Ld586 SEQ ID NO 388
Ld588 SEQ ID NO 389
Ld513 SEQ ID NO 394

Таблица 8
ID мишени Соответствующая аминокислотная последовательность cDNA клона, представленного в таблице 9
Ld594 SEQ ID NO 349
Ld594(b) SEQ ID NO 405
Ld619 SEQ ID NO 350
Ld620 SEQ ID NO 351
Ld583 SEQ ID NO 390
Ld584 SEQ ID NO 391
Ld586 SEQ ID NO 392
Ld588 SEQ ID NO 393
Ld513 SEQ ID NO 395

Таблица 9
ID мишени Прямые праймеры
5’→3’
Обратные праймеры
5’→3’
dsRNA: смысловая цепь, представленная эквивалентной последовательностью
ДНК 5’→3’
Ld594 SEQ ID NO 282
SEQ ID NO 284
SEQ ID NO 283
SEQ ID NO 285
SEQ ID NO 175
Ld619 SEQ ID NO 286
SEQ ID NO 288
SEQ ID NO 287
SEQ ID NO 289
SEQ ID NO 177
Ld620 SEQ ID NO 290
SEQ ID NO 292
SEQ ID NO 291
SEQ ID NO 293
SEQ ID NO 179
Ld513 SEQ ID NO 396
SEQ ID NO 398
SEQ ID NO 397
SEQ ID NO 399
SEQ ID NO 400

Таблица 10
ID мишени Последовательность cDNA (смысловая цепь)
5’→3’
Nl594 SEQ ID NO 180
Nl619 SEQ ID NO 182
Nl626 SEQ ID NO 184
Nl537 SEQ ID NO 186

Таблица 11
ID мишени Соответствующая аминокислотная последовательность cDNA клона, представленного в таблице 12
Nl594 SEQ ID NO 352
Nl619 SEQ ID NO 353
Nl626 SEQ ID NO 354
Nl537 SEQ ID NO 355

Таблица 12
ID мишени Прямые праймеры
5’→3’
Обратные праймеры
5’→3’
dsRNA: смысловая цепь, представленная эквивалентной последовательностью ДНК
5’→3’
Nl594 SEQ ID NO 294
SEQ ID NO 296
SEQ ID NO 295
SEQ ID NO 297
SEQ ID NO 181
Nl619 SEQ ID NO 298
SEQ ID NO 300
SEQ ID NO 299
SEQ ID NO 301
SEQ ID NO 183
Nl626 SEQ ID NO 302
SEQ ID NO 304
SEQ ID NO 303
SEQ ID NO 305
SEQ ID NO 185
Nl537 SEQ ID NO 306
SEQ ID NO 308
SEQ ID NO 307
SEQ ID NO 309
SEQ ID NO 187

Таблица 13
Мишень Прямой праймер Обратный праймер
Ap594 SEQ ID NO 369 SEQ ID NO 370
Ap423 SEQ ID NO 371 SEQ ID NO 372
Ap537 SEQ ID NO 373 SEQ ID NO 374
Ap560 SEQ ID NO 375 SEQ ID NO 376

Таблица 14
ID мишени Последовательность cDNA (смысловая цепь) 5’→3’
Ap594 SEQ ID NO 188
Ap423 SEQ ID NO 200
Ap537 SEQ ID NO 202
Ap560 SEQ ID NO 204

Таблица 15
ID мишени Соответствующая аминокислотная последовательность cDNA клона, представленного в таблице 16
Ap594 SEQ ID NO 356
Ap423 SEQ ID NO 357
Ap537 SEQ ID NO 358
Ap560 SEQ ID NO 359

Таблица 16
ID мишени Прямые праймеры
5’→3’
Обратные праймеры
5’→3’
dsRNA: смысловая цепь, представленная эквивалентной последовательностью ДНК
5’→3’
Ap594 SEQ ID NO 310
SEQ ID NO 312
SEQ ID NO 311
SEQ ID NO 313
SEQ ID NO 189
Ap423 SEQ ID NO 314
SEQ ID NO 316
SEQ ID NO 315
SEQ ID NO 317
SEQ ID NO 201
Ap537 SEQ ID NO 318
SEQ ID NO 320
SEQ ID NO 319
SEQ ID NO 321
SEQ ID NO 203
Ap560 SEQ ID NO 322
SEQ ID NO 324
SEQ ID NO 323
SEQ ID NO 325
SEQ ID NO 205

Таблица 17
Мишень Прямой праймер Обратный праймер
Ld594 SEQ ID NO 377 SEQ ID NO 378

Таблица 18
Мишень Прямой праймер Обратный праймер
Nl594 seq id no 379 seq id no 380
Nl619 seq id no 381 seq id no 382
Nl626 seq id no 383 seq id no 384

Таблица 19
ID мишени Лучшие попадания Drosophila НАЗВАНИЕ ОБОЗНАЧЕНИЕ
Ld583 CG4759 Рибосомный белок L27 RpL27
Ld584 CG 17331 Протеасома, субъединица бета-типа
Ld586 CG13704 неизвестный
Ld588 CG4157 Rpn12

Таблица 20
ID мишени Лучшие попадания Drosophila НАЗВАНИЕ ОБОЗНАЧЕНИЕ
Nl594 CG7178 wings up A (тропонин I) wupA
Nl619 CG7107 тропонин T (upheld) up
Nl626 *CG9073, CG7930, CG2981, CG12408, CG6514, CG2981, CG7930, CG9073, CG6514, CG12408 тропонин C
Nl537 CG32744 Убиквитин-5E; способ модификации белка
*неясно: несколько попаданий в семействе

Таблица 21
ID мишени Лучшие попадания Drosophila НАЗВАНИЕ ОБОЗНАЧЕНИЕ
Ap594 CG7178 wings up A (тропонин I) wupA
Ap423 CG2746 рибосомный белок L19 RpL19
Ap537 CG32744 Убиквитин-5E; способ модификации белка
Ap560 CG10423 рибосомный белок S27 RpS27

Специалистам в данной области будет очевидно, что многочисленные изменения и/или модификации можно внести в вышеупомянутые анализы без отступления от сущности или объема данного анализа, который описан в общем. Специалисты в данной области обнаружат или смогут установить, применяя не более чем обычное экспериментирование, многие эквиваленты конкретных примеров, и такие эквиваленты охватываются настоящим изобретением. Настоящий пример, таким образом, следует рассматривать во всех отношениях как иллюстративный, а не ограничительный.

--->

СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> ДЕВГЕН НВ

<120> ПОДАВЛЕНИЕ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ У НАСЕКОМЫХ-ВРЕДИТЕЛЕЙ

<130> NLW/P122274WO01

<160> 405

<170> PatentIn версия 3.5

<210> 1

<211> 1096

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 1

gcgatctaag gcaggtggca gacagctcga tgacggcagt gggccaagca ataatggata 60

gtcattcata gcaccccagc tttactaagc tctgccgtag tgttggattg ggagcggata 120

caattcacca cagaacagct atgacatgat acgcagtccg aataccctca taaaggacta 180

gtctgcaggt ttaacgatcg cgtagcagtg tatcacgcag agtacatggg gagtgactgt 240

gtgaacctgc tgggtacatc atcacccctc tccttcttca gttatataag acacagtccc 300

taaaggacac cagcaaaaat ggcggatgat gaggcgaaga aggccaaaca ggccgaaatc 360

gagaggaagc gcgctgaagt gcgcaagagg atggaggaag cctctaaggc gaagaaagcc 420

aagaagggtt tcatgacccc ggaaaggaag aagaaactcc gactcctgct gaggaaaaaa 480

gccgctgagg aactgaagaa ggagcaggaa cgcaaagcag ctgagaggag gcgaacgatt 540

gaggagcgct gcgggcaaat tgccgacgtc gacaacgcca atgaagcaac cttgaagaaa 600

ctctgcacag actaccataa gcgaattgac gctctggaga ggagtaaaat tgacatcgaa 660

ttcgaagtgg agagacgtga ccttgagatc gccgacctca acagccaggt caacgacctc 720

cgtggtaaat tcgtcaaacc taccttgaaa aaggtttcca agtacgaaaa caaattcgcc 780

aagctccaga agaaggctgc cgagttcaac ttcagaaacc aactcaaggt cgtcaaaaag 840

aaagaattca ccctggaaga agaagacaaa gagccgaaga aatcggaaaa ggcggagtgg 900

cagaagaaat gaagggaaaa caagcacacc atctcacaaa ataaaataaa cgaaaatctt 960

tcacacgttt accaatttta taacacggtc ctcacaaatt atgttcctta aataatttgt 1020

ataatccatc ctcgcactac aatcaatatt aatatttaaa tacaaaacca aaaaaaaaaa 1080

aaaaaaaaaa aaaaaa 1096

<210> 2

<211> 491

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 2

caaacaggcc gaaatcgaga ggaagcgcgc tgaagtgcgc aagaggatgg aggaagcctc 60

taaggcgaag aaagccaaga agggtttcat gaccccggaa aggaagaaga aactccgact 120

cctgctgagg aaaaaagccg ctgaggaact gaagaaggag caggaacgca aagcagctga 180

gaggaggcga acgattgagg agcgctgcgg gcaaattgcc gacgtcgaca acgccaatga 240

agcaaccttg aagaaactct gcacagacta ccataagcga attgacgctc tggagaggag 300

taaaattgac atcgaattcg aagtggagag acgtgacctt gagatcgccg acctcaacag 360

ccaggtcaac gacctccgtg gtaaattcgt caaacctacc ttgaaaaagg tttccaagta 420

cgaaaacaaa ttcgccaagc tccagaagaa ggctgccgag ttcaacttca gaaaccaact 480

caaggtcgtc a 491

<210> 3

<211> 431

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 3

atgggcatca tgtcgaaagc tgaactcgct tgtgtttact ccgctctcat cctcatcgac 60

gacgatgtcg ccgtgacggg tgagaagatt caaaccatcc tgaaggctgc cagtgtcgac 120

atcgagccgt actggcccgg tctgttcgcc aaggccctcg agggtatcaa ccccaaagac 180

ctcatctcct ccattggaag cggagttggt gctggagcgc cggctgtcgg tggagctgca 240

cctgccgccg ctgctgcccc tgccgctgag gctaagaagg aagagaagaa gaaggtcgaa 300

agcgatccag aatccgatga tgacatgggc ttcggtcttt tcgactaaga gcattccaca 360

gcgggttctc atttgttttt aagattttct tttaaaaaat aaaacttcca aaaaaaaaaa 420

aaaaaaaaaa g 431

<210> 4

<211> 332

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 4

gggcatcatg tcgaaagctg aactcgcttg tgtttactcc gctctcatcc tcatcgacga 60

cgatgtcgcc gtgacgggtg agaagattca aaccatcctg aaggctgcca gtgtcgacat 120

cgagccgtac tggcccggtc tgttcgccaa ggccctcgag ggtatcaacc ccaaagacct 180

catctcctcc attggaagcg gagttggtgc tggagcgccg gctgtcggtg gagctgcacc 240

tgccgccgct gctgcccctg ccgctgaggc taagaaggaa gagaagaaga aggtcgaaag 300

cgatccagaa tccgatgatg acatgggctt cg 332

<210> 5

<211> 468

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 5

atgggggcag gtcttctcca taaccataga ttatcttcgt gtatcgtgtc gggctttcgg 60

ctgaggtcct aattagtaaa taatgattcc gcctacgtcg cggcctcagg tcactgtcta 120

cagtgacaaa aatgaggcca ccgggactct cctcaacctc ccggctgtct tcaacgcccc 180

cattcgcccc gatgttgtga acttcgttca ccaaaatgtc gctaaaaacc acaggcagcc 240

ctactgtgtc tccgctcaag ctggtcatca gacttcagct gagtcctggg gtaccggtcg 300

tgctgtggct cgtatccccc gtgttcgcgg aggtggtact caccgctcag gtcagggtgc 360

ttttggcaac atgtgtcgcg gcggtaggat gttcgctccc actcgcccat ggcgtcgttg 420

gcaccgcaaa atcaacgtta accaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaa 468

<210> 6

<211> 429

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 6

gggcaggtct tctccataac catagattat cttcgtgtat cgtgtcgggc tttcggctga 60

ggtcctaatt agtaaataat gattccgcct acgtcgcggc ctcaggtcac tgtctacagt 120

gacaaaaatg aggccaccgg gactctcctc aacctcccgg ctgtcttcaa cgcccccatt 180

cgccccgatg ttgtgaactt cgttcaccaa aatgtcgcta aaaaccacag gcagccctac 240

tgtgtctccg ctcaagctgg tcatcagact tcagctgagt cctggggtac cggtcgtgct 300

gtggctcgta tcccccgtgt tcgcggaggt ggtactcacc gctcaggtca gggtgctttt 360

ggcaacatgt gtcgcggcgg taggatgttc gctcccactc gcccatggcg tcgttggcac 420

cgcaaaatc 429

<210> 7

<211> 523

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 7

atgggatctc tatgctgaaa aggtcgccac cagaggtttg tgtgctattg cacaagctga 60

atccctccgt tacaaactca ttggcggtct tgctgtccga ggggcttgct atggtgtcct 120

tcgcttcatc atggaaaatg gtgccaaggg ttgcgaagtc gtagtatctg gaaaactgcg 180

tggtcagaga gccaagtcaa tgaagttcgt ggatggtttg atgatccaca gtggggatcc 240

ctgtaacgaa tatgttgata ctgctacccg acatgtgctc cttagacaag gtgtcctggg 300

aataaaggtg aagattatgt tgccgtggga cgttaccggc aaaaatgggc cgaagaaccc 360

tcttcccgac cacgtcagcg ttctcttacc taaggaggag ctaccaaatt tggccgttag 420

tgtgcctgga tccgacatca aaccaaagcc tgaagtacca gcacccgctt tgtgaatata 480

aacttctttt ttgtaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaa 523

<210> 8

<211> 431

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 8

attgcacaag ctgaatccct ccgttacaaa ctcattggcg gtcttgctgt ccgaggggct 60

tgctatggtg tccttcgctt catcatggaa aatggtgcca agggttgcga agtcgtagta 120

tctggaaaac tgcgtggtca gagagccaag tcaatgaagt tcgtggatgg tttgatgatc 180

cacagtgggg atccctgtaa cgaatatgtt gatactgcta cccgacatgt gctccttaga 240

caaggtgtcc tgggaataaa ggtgaagatt atgttgccgt gggacgttac cggcaaaaat 300

gggccgaaga accctcttcc cgaccacgtc agcgttctct tacctaagga ggagctacca 360

aatttggccg ttagtgtgcc tggatccgac atcaaaccaa agcctgaagt accagcaccc 420

gctttgtgaa t 431

<210> 9

<211> 823

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 9

catggggaca ctctcttttt cttcatcgcg tggctcgctg ccgtgtggtt agggagtttc 60

ctactttaat tttttagtgt aattcatctt caaaatgacg tcgaaggttt ctcgtgagac 120

cctctacgag tgcatcaatg gagtcatcca gtcctcccag gagaagaaga ggaacttcgt 180

ggagactgtg gagatccaga tcggtctgaa gaactacgat ccccagaagg acaagcgttt 240

ctcgggaact gtcaagctga agcacattcc aaggcctaaa atgcaggttt gcatcctcgg 300

agatcaacag cattgcgacg aggccaaagc caacaacgtg ccctacatgg acgtcgaggc 360

tctgaagaag ctcaacaaaa acaagaagct cgtcaagaaa ttggccaaga aatacgacgc 420

tttcctcgcc tcagaagccc tcatcaagca gatccccagg ctcctcggac ccggtctcaa 480

caaggcgggc aagttccctg gtctcctctc tcaccaggag tccatgatga tgaagatcga 540

cgaagtcaag gccaccatca agttccaaat gaagaaggtg ttgtgcctct cagtggctgt 600

cggtcacgtc ggcatgactg ctgatgagct cgtccagaac gtgcacttgt cggtcaactt 660

cctcgtttcg ctcctcaaga agcactggca gaacgtcagg tctctccacg tcaaatccac 720

gatgggacct ccccagaggc tttactaaac atcttgtttt ttacttttga cgaataaaat 780

tcgttttatt ctcgaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaa 823

<210> 10

<211> 607

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 10

ccctctacga gtgcatcaat ggagtcatcc agtcctccca ggagaagaag aggaacttcg 60

tggagactgt ggagatccag atcggtctga agaactacga tccccagaag gacaagcgtt 120

tctcgggaac tgtcaagctg aagcacattc caaggcctaa aatgcaggtt tgcatcctcg 180

gagatcaaca gcattgcgac gaggccaaag ccaacaacgt gccctacatg gacgtcgagg 240

ctctgaagaa gctcaacaaa aacaagaagc tcgtcaagaa attggccaag aaatacgacg 300

ctttcctcgc ctcagaagcc ctcatcaagc agatccccag gctcctcgga cccggtctca 360

acaaggcggg caagttccct ggtctcctct ctcaccagga gtccatgatg atgaagatcg 420

acgaagtcaa ggccaccatc aagttccaaa tgaagaaggt gttgtgcctc tcagtggctg 480

tcggtcacgt cggcatgact gctgatgagc tcgtccagaa cgtgcacttg tcggtcaact 540

tcctcgtttc gctcctcaag aagcactggc agaacgtcag gtctctccac gtcaaatcca 600

cgatggg 607

<210> 11

<211> 435

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 11

atgggaccaa taaagatcaa ctttcccaga gaaagacttg ctatgcccag cataatcagg 60

tccgagaaat ccgcaaaaag atggttaaaa acatcagtga cagcatttcc agctgtgatt 120

tgaggagtgt tgtgaacaag ctgatcccag actccatcgc taaagatata gaaaagaatt 180

gccaaggaat ctacccactc cacgatgtgt acattcggaa ggtgaaggtg ttgaagaagc 240

cgaggttcga gctcagcaag ctccttgagc ttcacgtcga tggcaaaggg atcgacgaac 300

ccggcgcgaa agtgacgagg actgacgctt acgagcctcc agttcaagag tctgtctaag 360

taaacatttt atataaagtt aacaaaaaat aaaggtgtct cgcctgacta aaaaaaaaaa 420

aaaaaaaaaa aaaaa 435

<210> 12

<211> 353

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 12

ccaataaaga tcaactttcc cagagaaaga cttgctatgc ccagcataat caggtccgag 60

aaatccgcaa aaagatggtt aaaaacatca gtgacagcat ttccagctgt gatttgagga 120

gtgttgtgaa caagctgatc ccagactcca tcgctaaaga tatagaaaag aattgccaag 180

gaatctaccc actccacgat gtgtacattc ggaaggtgaa ggtgttgaag aagccgaggt 240

tcgagctcag caagctcctt gagcttcacg tcgatggcaa agggatcgac gaacccggcg 300

cgaaagtgac gaggactgac gcttacgagc ctccagttca agagtctgtc taa 353

<210> 13

<211> 474

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 13

catgggtacg aatatcgacg gtaaaagaaa ggtgatgttc gccatgaccg ccatcaaagg 60

tgtcggcaga cggtacgcca acattgtcct caagaaggcc gatgtcaact tggacaagag 120

ggccggcgaa tgctccgaag aagaagttga aaagatcgtt accatcatgc aaaaccctag 180

gcaatacaaa attcccaact ggttcctcaa cagacaaaaa gacaccgtcg agggcaaata 240

ctctcagttg acttcctccc tgctggattc caagctccgt gacgaccttg agcgactcaa 300

gaagatcagg gcccacagag gcatgaggca ctactggggt ttgagggtgc gtggtcaaca 360

cacgaagacc accggaagga gaggacgaac tgttggtgtg tccaagaaga agtaatttta 420

atttcctaat aaattggttt tttcaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaa 474

<210> 14

<211> 332

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 14

gaaaggtgat gttcgccatg accgccatca aaggtgtcgg cagacggtac gccaacattg 60

tcctcaagaa ggccgatgtc aacttggaca agagggccgg cgaatgctcc gaagaagaag 120

ttgaaaagat cgttaccatc atgcaaaacc ctaggcaata caaaattccc aactggttcc 180

tcaacagaca aaaagacacc gtcgagggca aatactctca gttgacttcc tccctgctgg 240

attccaagct ccgtgacgac cttgagcgac tcaagaagat cagggcccac agaggcatga 300

ggcactactg gggtttgagg gtgcgtggtc aa 332

<210> 15

<211> 440

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 15

gtgagttctt ctgttgatta gtttttcctt ccctgaaatt atttcgttga agttaatttg 60

gattaccctg aaagaatccg ctgctttttc tctcgctaaa aatcttttac acccgtcacc 120

acggccccct gtgggcaggc acaagctgaa gcacctgccc gtgcacccta actcgcactt 180

catggacgtc aactgccctg ggtgttataa aatcccaacg gtgttctccc ccgcccagaa 240

cgacttcggc tgctggacct gttccaccat cctctgcctg cccacagggg gccgtgccga 300

cctcaccaaa agatgctcgt ttaggagaaa tcaacattat tattcttggt gggaacactt 360

attttttttg taattaaatt tcaaactaca aaataacttt tccgaaaaac actacaaaaa 420

aaattaaaaa caaaaaaaaa 440

<210> 16

<211> 324

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 16

cttccctgaa attatttcgt tgaagttaat ttggattacc ctgaaagaat ccgctgcttt 60

ttctctcgct aaaaatcttt tacacccgtc accacggccc cctgtgggca ggcacaagct 120

gaagcacctg cccgtgcacc ctaactcgca cttcatggac gtcaactgcc ctgggtgtta 180

taaaatccca acggtgttct cccccgccca gaacgacttc ggctgctgga cctgttccac 240

catcctctgc ctgcccacag ggggccgtgc cgacctcacc aaaagatgct cgtttaggag 300

aaatcaacat tattattctt ggtg 324

<210> 17

<211> 357

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 17

atgggttcaa gagagttaaa gccaagaggg ccaagaagga cgacggtgag atatttgccg 60

ctaaaaagga agtctacaag ccctctgagc agaggaaagc agaccagaaa aacattgaca 120

aacagaccct gaaagccatc aagcgactca agggagacgc ttgcctcatg aggaaatacc 180

tttgcaccat gttcggattc aggagcagtc aatatcccca ccgtatgaag ttttaatatg 240

ttttcagcca ataaataagt gaaagtttct cttttttatt actacagact caaattttta 300

ttttctgaaa attattaaaa attcttaatg gcaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaa 357

<210> 18

<211> 223

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 18

gttcaagaga gttaaagcca agagggccaa gaaggacgac ggtgagatat ttgccgctaa 60

aaaggaagtc tacaagccct ctgagcagag gaaagcagac cagaaaaaca ttgacaaaca 120

gaccctgaaa gccatcaagc gactcaaggg agacgcttgc ctcatgagga aatacctttg 180

caccatgttc ggattcagga gcagtcaata tccccaccgt atg 223

<210> 19

<211> 632

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 19

atgggacctt ttttccgtgt gtctggctta ggcctcgcgt gttcttgtat ttttacggga 60

aatttagtga aaaagtgtaa atttaacgcg taaaaatggg tcgtatgcac gcacctggta 120

agggtatttc ccagtcagct ctcccctatc gtcgtagcgt cccaacatgg ctgaagctca 180

ctcctgacga cgtcaaggat cagattttca aactcaccaa gaaaggactg actccatctc 240

agatcggtgt catcctcagg gattctcacg gtgtggctca agtcagattc gtcaccgggt 300

cgaagatcct caggatcatg aaagccatcg gcctcgctcc tgacctccca gaggacctct 360

acttcctcat caaaaaagcc gttgctatca ggaaacatct tgaaagaaat aggaaagaca 420

aagactctaa attcggactt atccccgtcg agtccaggat ccacaggttg gcaagatact 480

acaaaaccaa gggcaccctt ccacccacct ggaaatacga gtccagcacc gcctctgctc 540

tggtggcttg aatattcaac tttttatttg tctactgttt aattaatata atgtgattta 600

gcaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aa 632

<210> 20

<211> 457

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 20

gggtcgtatg cacgcacctg gtaagggtat ttcccagtca gctctcccct atcgtcgtag 60

cgtcccaaca tggctgaagc tcactcctga cgacgtcaag gatcagattt tcaaactcac 120

caagaaagga ctgactccat ctcagatcgg tgtcatcctc agggattctc acggtgtggc 180

tcaagtcaga ttcgtcaccg ggtcgaagat cctcaggatc atgaaagcca tcggcctcgc 240

tcctgacctc ccagaggacc tctacttcct catcaaaaaa gccgttgcta tcaggaaaca 300

tcttgaaaga aataggaaag acaaagactc taaattcgga cttatccccg tcgagtccag 360

gatccacagg ttggcaagat actacaaaac caagggcacc cttccaccca cctggaaata 420

cgagtccagc accgcctctg ctctggtggc ttgaata 457

<210> 21

<211> 407

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 21

atgggaccgt ttgcctcaca atccagaaca gacaggctgc catatccgtc gtcccctctg 60

cagcctccct cgtaatcaag gccctcaaag agcccccgag ggacaggaag aagaacaaga 120

acatcaaaca cgacggtaac ctgagtatgg atgacattct cggaattgcc aaaaccatga 180

ggccgaggtc gatgtccagg aaactggaag gaaccgtcaa ggaaatcctt gggacagctc 240

agtctgtcgg atgcacgatc gaaggccgag ctccccacga cgtcatcgac tccatcaaca 300

acggcgaaat ggaaatccct gacgaataaa ctgttcatga gtttatggat tttatataaa 360

aaataaaaag ttgaaaaatc caaaaaaaaa aaaaaaaaag aaaaaaa 407

<210> 22

<211> 302

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 22

accgtttgcc tcacaatcca gaacagacag gctgccatat ccgtcgtccc ctctgcagcc 60

tccctcgtaa tcaaggccct caaagagccc ccgagggaca ggaagaagaa caagaacatc 120

aaacacgacg gtaacctgag tatggatgac attctcggaa ttgccaaaac catgaggccg 180

aggtcgatgt ccaggaaact ggaaggaacc gtcaaggaaa tccttgggac agctcagtct 240

gtcggatgca cgatcgaagg ccgagctccc cacgacgtca tcgactccat caacaacggc 300

ga 302

<210> 23

<211> 794

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 23

catggggagt caatttggat ctatcgccag atgaagatgt ctcctgccgt gttcgctgtt 60

ctgctggtac tttcagcttc ccaggtcttg ggagatgatg catccaagtt ccaacacgag 120

gaaatcatgg aagtcctcag ctcggtcaac aaaaccgtca acaaattgta cgacttgatg 180

tccacgcaga aggaaagaga tattgacttt atcgagaaga aaatggatga gacgtaccag 240

caactcagga acaagaggga ggcgccggct gagaaccctg aagccattga caagatccaa 300

aacgcgttca aaagctttca agacggcgtc aaggacttcg tcaagtccgc ttcttcctcg 360

gacctctaca agaaggttca ggaaatcggc gaggacctgt agaacaaagg caaagagctc 420

ggagagaagc tgcaagaaac catcaataac gccagaacga aaaactcaga cgagaagaag 480

gactaaactg aggattttga ctctgcacaa acgcccgttg gtgtttaaac gtatttctta 540

cgtttattat catcggggtt catgaaatca aaaatacacc atcgcatacc acctcgaaaa 600

gaacataata tatgtgaaaa gacaagaaaa ggtgttcaat tgtgtcttta actggtggtt 660

atcacgattc acatgaaata ctactaagaa aacccaaaaa ccgtcatgaa acccgaagta 720

tgcttctgta ttacctaatt gtgctgataa ttcttaataa aatattatac tgagaaaaaa 780

aaaaaaaaaa aaaa 794

<210> 24

<211> 278

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 24

ttctgctggt actttcagct tcccaggtct tgggagatga tgcatccaag ttccaacacg 60

aggaaatcat ggaagtcctc agctcggtca acaaaaccgt caacaaattg tacgacttga 120

tgtccacgca gaaggaaaga gatattgact ttatcgagaa gaaaatggat gagacgtacc 180

agcaactcag gaacaagagg gaggcgccgg ctgagaaccc tgaagccatt gacaagatcc 240

aaaacgcgtt caaaagcttt caagacggcg tcaaggac 278

<210> 25

<211> 437

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 25

atgggatcca ataataacca ttaaggcaat tggacatcaa tgatactgaa catatgaata 60

ttcagatatc aaaaatatcg aaatagaatc atatataaaa ccaactaacg cattagaaaa 120

taacgaattc cgattacttg aagtagacaa tcgaatcgta ttacctataa aatcaactat 180

ccgaattcta gttacatcat ctgatgtaat tcattcatga accatcccaa gtttgggaat 240

caaaattgat ggcacaccag gacgattaaa tcaagggaga ataaacataa accgaccagg 300

actaatatat gggcaatgtt ctgaaatttg tggagcaaac cacagattta taccaatcgt 360

aattgaaaga gtttcaatta atcaatttat aaactgatta aattcaaaat aaaaaaaaaa 420

aaaaaaaaaa aaaaaaa 437

<210> 26

<211> 327

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 26

aacgcagagt acatgggatc caataataac cattaaggca attggacatc aatgatactg 60

aacatatgaa tattcagata tcaaaaatat cgaaatagaa tcatatataa aaccaactaa 120

cgcattagaa aataacgaat tccgattact tgaagtagac aatcgaatcg tattacctat 180

aaaatcaact atccgaattc tagttacatc atctgatgta attcattcat gaaccatccc 240

aagtttggga atcaaaattg atggcacacc aggacgatta aatcaaggga gaataaacat 300

aaaccgacca ggactaatat atgggca 327

<210> 27

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 27

gcgtaatacg actcactata ggcaaacagg ccgaaatcga ga 42

<210> 28

<211> 23

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 28

tgacgacctt gagttggttt ctg 23

<210> 29

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 29

caaacaggcc gaaatcgaga 20

<210> 30

<211> 45

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 30

gcgtaatacg actcactata ggtgacgacc ttgagttggt ttctg 45

<210> 31

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 31

gcgtaatacg actcactata gggggcatca tgtcgaaagc tg 42

<210> 32

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 32

cgaagcccat gtcatcatcg 20

<210> 33

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 33

gggcatcatg tcgaaagctg 20

<210> 34

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 34

gcgtaatacg actcactata ggcgaagccc atgtcatcat cg 42

<210> 35

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 35

gcgtaatacg actcactata gggggcaggt cttctccata acca 44

<210> 36

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 36

gattttgcgg tgccaacgac 20

<210> 37

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 37

gggcaggtct tctccataac ca 22

<210> 38

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 38

gcgtaatacg actcactata gggattttgc ggtgccaacg ac 42

<210> 39

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 39

gcgtaatacg actcactata ggattgcaca agctgaatcc ctcc 44

<210> 40

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 40

attcacaaag cgggtgctgg 20

<210> 41

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 41

attgcacaag ctgaatccct cc 22

<210> 42

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 42

gcgtaatacg actcactata ggattcacaa agcgggtgct gg 42

<210> 43

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 43

gcgtaatacg actcactata ggccctctac gagtgcatca atgg 44

<210> 44

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 44

cccatcgtgg atttgacgtg 20

<210> 45

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 45

ccctctacga gtgcatcaat gg 22

<210> 46

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 46

gcgtaatacg actcactata ggcccatcgt ggatttgacg tg 42

<210> 47

<211> 47

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 47

gcgtaatacg actcactata ggccaataaa gatcaacttt cccagag 47

<210> 48

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 48

ttagacagac tcttgaactg gaggc 25

<210> 49

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 49

ccaataaaga tcaactttcc cagag 25

<210> 50

<211> 47

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 50

gcgtaatacg actcactata ggttagacag actcttgaac tggaggc 47

<210> 51

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 51

gcgtaatacg actcactata gggaaaggtg atgttcgcca tgac 44

<210> 52

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 52

ttgaccacgc accctcaaac 20

<210> 53

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 53

gaaaggtgat gttcgccatg ac 22

<210> 54

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 54

gcgtaatacg actcactata ggttgaccac gcaccctcaa ac 42

<210> 55

<211> 47

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 55

gcgtaatacg actcactata ggcttccctg aaattatttc gttgaag 47

<210> 56

<211> 28

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 56

caccaagaat aataatgttg atttctcc 28

<210> 57

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 57

cttccctgaa attatttcgt tgaag 25

<210> 58

<211> 50

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 58

gcgtaatacg actcactata ggcaccaaga ataataatgt tgatttctcc 50

<210> 59

<211> 47

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 59

gcgtaatacg actcactata gggttcaaga gagttaaagc caagagg 47

<210> 60

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 60

catacggtgg ggatattgac tg 22

<210> 61

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 61

gttcaagaga gttaaagcca agagg 25

<210> 62

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 62

gcgtaatacg actcactata ggcatacggt ggggatattg actg 44

<210> 63

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 63

gcgtaatacg actcactata gggggtcgta tgcacgcacc tg 42

<210> 64

<211> 23

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 64

tattcaagcc accagagcag agg 23

<210> 65

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 65

gggtcgtatg cacgcacctg 20

<210> 66

<211> 45

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 66

gcgtaatacg actcactata ggtattcaag ccaccagagc agagg 45

<210> 67

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 67

gcgtaatacg actcactata ggaccgtttg cctcacaatc ca 42

<210> 68

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 68

tcgccgttgt tgatggagtc 20

<210> 69

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 69

accgtttgcc tcacaatcca 20

<210> 70

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 70

gcgtaatacg actcactata ggtcgccgtt gttgatggag tc 42

<210> 71

<211> 45

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 71

gcgtaatacg actcactata ggggtatcaa cgcagagtac atggg 45

<210> 72

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 72

gtccttgacg ccgtcttgaa 20

<210> 73

<211> 23

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 73

ggtatcaacg cagagtacat ggg 23

<210> 74

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 74

gcgtaatacg actcactata gggtccttga cgccgtcttg aa 42

<210> 75

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 75

gcgtaatacg actcactata ggtgcccata tattagtcct ggtc 44

<210> 76

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 76

aacgcagagt acatgggatc 20

<210> 77

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 77

tgcccatata ttagtcctgg tc 22

<210> 78

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 78

gcgtaatacg actcactata ggaacgcaga gtacatggga tc 42

<210> 79

<211> 197

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 79

Met Ala Asp Asp Glu Ala Lys Lys Ala Lys Gln Ala Glu Ile Glu Arg

1 5 10 15

Lys Arg Ala Glu Val Arg Lys Arg Met Glu Glu Ala Ser Lys Ala Lys

20 25 30

Lys Ala Lys Lys Gly Phe Met Thr Pro Glu Arg Lys Lys Lys Leu Arg

35 40 45

Leu Leu Leu Arg Lys Lys Ala Ala Glu Glu Leu Lys Lys Glu Gln Glu

50 55 60

Arg Lys Ala Ala Glu Arg Arg Arg Thr Ile Glu Glu Arg Cys Gly Gln

65 70 75 80

Ile Ala Asp Val Asp Asn Ala Asn Glu Ala Thr Leu Lys Lys Leu Cys

85 90 95

Thr Asp Tyr His Lys Arg Ile Asp Ala Leu Glu Arg Ser Lys Ile Asp

100 105 110

Ile Glu Phe Glu Val Glu Arg Arg Asp Leu Glu Ile Ala Asp Leu Asn

115 120 125

Ser Gln Val Asn Asp Leu Arg Gly Lys Phe Val Lys Pro Thr Leu Lys

130 135 140

Lys Val Ser Lys Tyr Glu Asn Lys Phe Ala Lys Leu Gln Lys Lys Ala

145 150 155 160

Ala Glu Phe Asn Phe Arg Asn Gln Leu Lys Val Val Lys Lys Lys Glu

165 170 175

Phe Thr Leu Glu Glu Glu Asp Lys Glu Pro Lys Lys Ser Glu Lys Ala

180 185 190

Glu Trp Gln Lys Lys

195

<210> 80

<211> 115

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 80

Met Gly Ile Met Ser Lys Ala Glu Leu Ala Cys Val Tyr Ser Ala Leu

1 5 10 15

Ile Leu Ile Asp Asp Asp Val Ala Val Thr Gly Glu Lys Ile Gln Thr

20 25 30

Ile Leu Lys Ala Ala Ser Val Asp Ile Glu Pro Tyr Trp Pro Gly Leu

35 40 45

Phe Ala Lys Ala Leu Glu Gly Ile Asn Pro Lys Asp Leu Ile Ser Ser

50 55 60

Ile Gly Ser Gly Val Gly Ala Gly Ala Pro Ala Val Gly Gly Ala Ala

65 70 75 80

Pro Ala Ala Ala Ala Ala Pro Ala Ala Glu Ala Lys Lys Glu Glu Lys

85 90 95

Lys Lys Val Glu Ser Asp Pro Glu Ser Asp Asp Asp Met Gly Phe Gly

100 105 110

Leu Phe Asp

115

<210> 81

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 81

Met Ile Pro Pro Thr Ser Arg Pro Gln Val Thr Val Tyr Ser Asp Lys

1 5 10 15

Asn Glu Ala Thr Gly Thr Leu Leu Asn Leu Pro Ala Val Phe Asn Ala

20 25 30

Pro Ile Arg Pro Asp Val Val Asn Phe Val His Gln Asn Val Ala Lys

35 40 45

Asn His Arg Gln Pro Tyr Cys Val Ser Ala Gln Ala Gly His Gln Thr

50 55 60

Ser Ala Glu Ser Trp Gly Thr Gly Arg Ala Val Ala Arg Ile Pro Arg

65 70 75 80

Val Arg Gly Gly Gly Thr His Arg Ser Gly Gln Gly Ala Phe Gly Asn

85 90 95

Met Cys Arg Gly Gly Arg Met Phe Ala Pro Thr Arg Pro Trp Arg Arg

100 105 110

Trp His Arg Lys Ile Asn Val Asn Gln

115 120

<210> 82

<211> 133

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 82

Trp Asp Leu Tyr Ala Glu Lys Val Ala Thr Arg Gly Leu Cys Ala Ile

1 5 10 15

Ala Gln Ala Glu Ser Leu Arg Tyr Lys Leu Ile Gly Gly Leu Ala Val

20 25 30

Arg Gly Ala Cys Tyr Gly Val Leu Arg Phe Ile Met Glu Asn Gly Ala

35 40 45

Lys Gly Cys Glu Val Val Val Ser Gly Lys Leu Arg Gly Gln Arg Ala

50 55 60

Lys Ser Met Lys Phe Val Asp Gly Leu Met Ile His Ser Gly Asp Pro

65 70 75 80

Cys Asn Glu Tyr Val Asp Thr Ala Thr Arg His Val Leu Leu Arg Gln

85 90 95

Gly Val Leu Gly Ile Lys Val Lys Ile Met Leu Pro Trp Asp Val Thr

100 105 110

Gly Lys Asn Gly Pro Lys Asn Pro Leu Pro Asp His Val Ser Val Leu

115 120 125

Leu Pro Lys Glu Glu

130

<210> 83

<211> 217

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 83

Met Thr Ser Lys Val Ser Arg Glu Thr Leu Tyr Glu Cys Ile Asn Gly

1 5 10 15

Val Ile Gln Ser Ser Gln Glu Lys Lys Arg Asn Phe Val Glu Thr Val

20 25 30

Glu Ile Gln Ile Gly Leu Lys Asn Tyr Asp Pro Gln Lys Asp Lys Arg

35 40 45

Phe Ser Gly Thr Val Lys Leu Lys His Ile Pro Arg Pro Lys Met Gln

50 55 60

Val Cys Ile Leu Gly Asp Gln Gln His Cys Asp Glu Ala Lys Ala Asn

65 70 75 80

Asn Val Pro Tyr Met Asp Val Glu Ala Leu Lys Lys Leu Asn Lys Asn

85 90 95

Lys Lys Leu Val Lys Lys Leu Ala Lys Lys Tyr Asp Ala Phe Leu Ala

100 105 110

Ser Glu Ala Leu Ile Lys Gln Ile Pro Arg Leu Leu Gly Pro Gly Leu

115 120 125

Asn Lys Ala Gly Lys Phe Pro Gly Leu Leu Ser His Gln Glu Ser Met

130 135 140

Met Met Lys Ile Asp Glu Val Lys Ala Thr Ile Lys Phe Gln Met Lys

145 150 155 160

Lys Val Leu Cys Leu Ser Val Ala Val Gly His Val Gly Met Thr Ala

165 170 175

Asp Glu Leu Val Gln Asn Val His Leu Ser Val Asn Phe Leu Val Ser

180 185 190

Leu Leu Lys Lys His Trp Gln Asn Val Arg Ser Leu His Val Lys Ser

195 200 205

Thr Met Gly Pro Pro Gln Arg Leu Tyr

210 215

<210> 84

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 84

Gly Thr Asn Lys Asp Gln Leu Ser Gln Arg Lys Thr Cys Tyr Ala Gln

1 5 10 15

His Asn Gln Val Arg Glu Ile Arg Lys Lys Met Val Lys Asn Ile Ser

20 25 30

Asp Ser Ile Ser Ser Cys Asp Leu Arg Ser Val Val Asn Lys Leu Ile

35 40 45

Pro Asp Ser Ile Ala Lys Asp Ile Glu Lys Asn Cys Gln Gly Ile Tyr

50 55 60

Pro Leu His Asp Val Tyr Ile Arg Lys Val Lys Val Leu Lys Lys Pro

65 70 75 80

Arg Phe Glu Leu Ser Lys Leu Leu Glu Leu His Val Asp Gly Lys Gly

85 90 95

Ile Asp Glu Pro Gly Ala Lys Val Thr Arg Thr Asp Ala Tyr Glu Pro

100 105 110

Pro Val Gln Glu Ser Val

115

<210> 85

<211> 128

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 85

Lys Val Met Phe Ala Met Thr Ala Ile Lys Gly Val Gly Arg Arg Tyr

1 5 10 15

Ala Asn Ile Val Leu Lys Lys Ala Asp Val Asn Leu Asp Lys Arg Ala

20 25 30

Gly Glu Cys Ser Glu Glu Glu Val Glu Lys Ile Val Thr Ile Met Gln

35 40 45

Asn Pro Arg Gln Tyr Lys Ile Pro Asn Trp Phe Leu Asn Arg Gln Lys

50 55 60

Asp Thr Val Glu Gly Lys Tyr Ser Gln Leu Thr Ser Ser Leu Leu Asp

65 70 75 80

Ser Lys Leu Arg Asp Asp Leu Glu Arg Leu Lys Lys Ile Arg Ala His

85 90 95

Arg Gly Met Arg His Tyr Trp Gly Leu Arg Val Arg Gly Gln His Thr

100 105 110

Lys Thr Thr Gly Arg Arg Gly Arg Thr Val Gly Val Ser Lys Lys Lys

115 120 125

<210> 86

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 86

Val Leu Leu Leu Ile Ser Phe Ser Phe Pro Glu Ile Ile Ser Leu Lys

1 5 10 15

Leu Ile Trp Ile Thr Leu Lys Glu Ser Ala Ala Phe Ser Leu Ala Lys

20 25 30

Asn Leu Leu His Pro Ser Pro Arg Pro Pro Val Gly Arg His Lys Leu

35 40 45

Lys His Leu Pro Val His Pro Asn Ser His Phe Met Asp Val Asn Cys

50 55 60

Pro Gly Cys Tyr Lys Ile Pro Thr Val Phe Ser Pro Ala Gln Asn Asp

65 70 75 80

Phe Gly Cys Trp Thr Cys Ser Thr Ile Leu Cys Leu Pro Thr Gly Gly

85 90 95

Arg Ala Asp Leu Thr Lys Arg Cys Ser Phe Arg Arg Asn Gln His Tyr

100 105 110

Tyr Ser Trp Trp Glu His Leu Phe Phe Leu

115 120

<210> 87

<211> 77

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 87

Gly Phe Lys Arg Val Lys Ala Lys Arg Ala Lys Lys Asp Asp Gly Glu

1 5 10 15

Ile Phe Ala Ala Lys Lys Glu Val Tyr Lys Pro Ser Glu Gln Arg Lys

20 25 30

Ala Asp Gln Lys Asn Ile Asp Lys Gln Thr Leu Lys Ala Ile Lys Arg

35 40 45

Leu Lys Gly Asp Ala Cys Leu Met Arg Lys Tyr Leu Cys Thr Met Phe

50 55 60

Gly Phe Arg Ser Ser Gln Tyr Pro His Arg Met Lys Phe

65 70 75

<210> 88

<211> 151

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 88

Met Gly Arg Met His Ala Pro Gly Lys Gly Ile Ser Gln Ser Ala Leu

1 5 10 15

Pro Tyr Arg Arg Ser Val Pro Thr Trp Leu Lys Leu Thr Pro Asp Asp

20 25 30

Val Lys Asp Gln Ile Phe Lys Leu Thr Lys Lys Gly Leu Thr Pro Ser

35 40 45

Gln Ile Gly Val Ile Leu Arg Asp Ser His Gly Val Ala Gln Val Arg

50 55 60

Phe Val Thr Gly Ser Lys Ile Leu Arg Ile Met Lys Ala Ile Gly Leu

65 70 75 80

Ala Pro Asp Leu Pro Glu Asp Leu Tyr Phe Leu Ile Lys Lys Ala Val

85 90 95

Ala Ile Arg Lys His Leu Glu Arg Asn Arg Lys Asp Lys Asp Ser Lys

100 105 110

Phe Gly Leu Ile Pro Val Glu Ser Arg Ile His Arg Leu Ala Arg Tyr

115 120 125

Tyr Lys Thr Lys Gly Thr Leu Pro Pro Thr Trp Lys Tyr Glu Ser Ser

130 135 140

Thr Ala Ser Ala Leu Val Ala

145 150

<210> 89

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 89

Gly Thr Val Cys Leu Thr Ile Gln Asn Arg Gln Ala Ala Ile Ser Val

1 5 10 15

Val Pro Ser Ala Ala Ser Leu Val Ile Lys Ala Leu Lys Glu Pro Pro

20 25 30

Arg Asp Arg Lys Lys Asn Lys Asn Ile Lys His Asp Gly Asn Leu Ser

35 40 45

Met Asp Asp Ile Leu Gly Ile Ala Lys Thr Met Arg Pro Arg Ser Met

50 55 60

Ser Arg Lys Leu Glu Gly Thr Val Lys Glu Ile Leu Gly Thr Ala Gln

65 70 75 80

Ser Val Gly Cys Thr Ile Glu Gly Arg Ala Pro His Asp Val Ile Asp

85 90 95

Ser Ile Asn Asn Gly Glu Met Glu Ile Pro Asp Glu

100 105

<210> 90

<211> 133

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 90

His Gly Glu Ser Ile Trp Ile Tyr Arg Gln Met Lys Met Ser Pro Ala

1 5 10 15

Val Phe Ala Val Leu Leu Val Leu Ser Ala Ser Gln Val Leu Gly Asp

20 25 30

Asp Ala Ser Lys Phe Gln His Glu Glu Ile Met Glu Val Leu Ser Ser

35 40 45

Val Asn Lys Thr Val Asn Lys Leu Tyr Asp Leu Met Ser Thr Gln Lys

50 55 60

Glu Arg Asp Ile Asp Phe Ile Glu Lys Lys Met Asp Glu Thr Tyr Gln

65 70 75 80

Gln Leu Arg Asn Lys Arg Glu Ala Pro Ala Glu Asn Pro Glu Ala Ile

85 90 95

Asp Lys Ile Gln Asn Ala Phe Lys Ser Phe Gln Asp Gly Val Lys Asp

100 105 110

Phe Val Lys Ser Ala Ser Ser Ser Asp Leu Tyr Lys Lys Val Gln Glu

115 120 125

Ile Gly Glu Asp Leu

130

<210> 91

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 91

Thr Tyr Glu Tyr Ser Asp Ile Lys Asn Ile Glu Ile Glu Ser Tyr Ile

1 5 10 15

Lys Pro Thr Asn Ala Leu Glu Asn Asn Glu Phe Arg Leu Leu Glu Val

20 25 30

Asp Asn Arg Ile Val Leu Pro Ile Lys Ser Thr Ile Arg Ile Leu Val

35 40 45

Thr Ser Ser Asp Val Ile His Ser Thr Ile Pro Ser Leu Gly Ile Lys

50 55 60

Ile Asp Gly Thr Pro Gly Arg Leu Asn Gln Gly Arg Ile Asn Ile Asn

65 70 75 80

Arg Pro Gly Leu Ile Tyr Gly Gln Cys Ser Glu Ile Cys Gly Ala Asn

85 90 95

His Arg Phe Ile Pro Ile Val Ile Glu Arg Val Ser Ile Asn Gln Phe

100 105 110

Ile Asn Leu Asn Ser Lys

115

<210> 92

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Адаптер

<400> 92

aagcagtggt atcaacgcag 20

<210> 93

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 93

aagcagtggt atcaacgcag 20

<210> 94

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 94

gcgtaatacg actcactata ggaagcagtg gtatcaacgc ag 42

<210> 95

<211> 717

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 95

aaagtgtggt tctcttcgtc cgaccatgag ttcgctcaaa ctgcagaaga ggctcgccgc 60

ctcggtgatg agatgcggca agaagaaagt gtggttggac cctaatgaaa tcaacgaaat 120

cgccaacacc aactctaggc aaaacatccg taagctgatc aaggatggtt tgatcatcaa 180

aaagcctgtg gctgtccact ccagagcccg cgtccgtaaa aacacagaag ccagacggaa 240

gggtcgtcat tgtggcttcg gtaagaggaa gggtaccgcc aacgccagaa tgcctgtgaa 300

ggtcctgtgg gtcaacagaa tgagagtcct gcgacggctc cttaaaaaat acagagaagc 360

caagaagatc gataggcaaa tgtaccacga cctttacatg aaagccaaag gtaacgtctt 420

caaaaacaag agggtactga tggacttcat tcacaagaag aaggctgaaa aggcgagatc 480

aaagatgttg aaggaccagg cagaggcgag acgtttcaag gtcaaggagg cgaagaagag 540

gcgcgaggag aggatcgcca ccaagaagca agagatcatg caggcgtacg cccgagaaga 600

cgaggctgcc gtcaaaaagt gatctcgccc cctccgtttt taaattttaa acaaaaaacg 660

tattttgtac aaaaatttac aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaa 717

<210> 96

<211> 2304

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 96

atgacgacct acgaggagtt cattcaacag agcgaggagc gcgacggtat caggttcact 60

tggaacgtct ggccatcaag tcgcatcgaa gccaccaggt tggtcgtacc cgtaggatgt 120

ctctatcaac cactaaaaga acgcacggat cttccagcta ttcaatacga tcccgttcta 180

tgcactagga atacctgtag agccatactc aacccgatgt gccaagtaaa ctatagggca 240

aagttgtggg tgtgtaactt ctgtttccag aggaatccgt tcccaccaca atacgccgca 300

atttccgagc agcatcagcc tgctgagttg attccatcat tctcaactat agagtatact 360

atatctagag ctcaattttt gcctcctata ttcctattgg tggtggatac gtgtttggat 420

gatgacgagc taggagctct gaaagattcg ttacaaacgt ctctatcttt gctaccaacc 480

aactccctag ttggtctgat cacgtttggt aaaatggtcc aagttcacga acttgggtgt 540

gaaggttgtt cccggagcta cgtgttcaga ggcaccaagg atttgacgtc caagcaagta 600

caggacatgc ttgggatcgg aaaggtttcc gcttctcctc agcaacagca gcaaagggca 660

atgggcggtc agcagccatt ccccaccaat cggttcattc agccgattca aagttgtgac 720

atgagcctca ccgacttgtt gggcgaaatg cagcgtgatc catggccagt gggtcagggt 780

aagcgacctc ttagatcaac gggtgctgct ctagctattg ccattgggtt gttggagtgc 840

tcctacccca acacgggagc aaaagtcatg ttgttccttg gtggcccttg ttcccaaggg 900

cctggtcaag ttgtcaatga tgacctgagg gaacctatcc gctctcatca tgacatccag 960

aaagataatg cccgctacat gaaaaaagcc attaaacatt acgattcttt ggcattgaga 1020

gcagccacta atgggcattc agtagacatt tattcctgtg ctttagatca gacaggtttg 1080

gcggaaatga agcaatgttg caattctact gggggtcata tggtgatggg tgacaccttc 1140

aactccactt tgttcaaaca gacgttccag agggtgctct cccgtgatca aaaaggcgaa 1200

ttcaaaatgg ctttcaatgg cgtagttgaa gtcaaaacct cccgagagct aaaagttatg 1260

ggagccattg ggccttgcgt ttcattgaat acgaaaggtc cgtgtgttag tgaaactgac 1320

atagggcttg gaggaacttg ccagtggaag ttctgcacat ttaaccaaaa taccactgct 1380

gccatgttct ttgaggtagt aaaccaacac gctgctccta tccctcaagg tggaagagga 1440

tgtatacagt tcataactca ataccagcat gcgtcgggcc aaaggcgcat ccgagtaacc 1500

actgtagcca ggaattgggc tgatgcgact accaacatgc accatgttag tgcaggattt 1560

gatcaggaag ctggagcggt actcatggcc aggatggtcg ttcacagagc tgaaactgat 1620

gatggacctg atgtcatgag atgggctgat cgcatgttga ttcgtctttg ccagaaattc 1680

ggcgagtaca acaaggatga tccaaatagt ttccgcctcc cagaaaactt ctcgctttac 1740

ccacagttca tgtatcactt gagaaggtcc caattcttgc aggtattcaa caacagccca 1800

gacgaaacgt cgtactatcg tcacatcttg atgcgggaag atttgtcgca gagcttgatc 1860

atgattcagc cgatcctgta cagttacagt ttcaacggtc cagaaccagt ccttttggac 1920

acttccagca ttcaacctga tcggatcctg ctgatggaca ccttcttcca aatcctcatc 1980

ttccacggcg agaccatcgc ccagtggcgt gcccaaaggt accaggacct acctgaatat 2040

gagaacttca agcagctcct acaggctcct gtagacgatg ctaaggaaat cctgcacact 2100

cggttcccca tgccgaggta cattgacacc gaacagggcg gatcacaagc tagattcctt 2160

ctctccaaag tcaacccatc ccaaactcac aacaacatgt acggctatgg aggggaattt 2220

ggagcccctg tgctcactga tgatgtttcc ctccaagtct tcatggaaca ccttaaaaag 2280

ctagccgttt catttactgc ctag 2304

<210> 97

<211> 311

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> GUS

<400> 97

ccagcgtatc gtgctgcgtt tcgatgcggt cactcattac ggcaaagtgt gatggagcat 60

cagggcggct atacgccatt tgaagccgat gtcacgccgt atgttattgc cgggaaaagt 120

gtacgtatct gaaatcaaaa aactcgacgg cctgtgggca ttcagtctgg atcgcgaaaa 180

ctgtggaatt gatccagcgc cgtcgtcggt gaacaggtat ggaatttcgc cgattttgcg 240

acctcgcaag gcatattcgg gtgaaggtta tctctatgaa ctgtgcgtca cagccaaaag 300

ccagacagag t 311

<210> 98

<211> 170

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Интрон

<400> 98

ctcgagcctg agagaaaagc atgaagtata cccataacta acccattagt tatgcattta 60

tgttatatct attcatgctt ctactttaga taatcaatca ccaaacaatg agaatctcaa 120

cggtcgcaat aatgttcatg aaaatgtagt gtgtacactt accttctaga 170

<210> 99

<211> 198

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 99

Met Ser Ser Leu Lys Leu Gln Lys Arg Leu Ala Ala Ser Val Met Arg

1 5 10 15

Cys Gly Lys Lys Lys Val Trp Leu Asp Pro Asn Glu Ile Asn Glu Ile

20 25 30

Ala Asn Thr Asn Ser Arg Gln Asn Ile Arg Lys Leu Ile Lys Asp Gly

35 40 45

Leu Ile Ile Lys Lys Pro Val Ala Val His Ser Arg Ala Arg Val Arg

50 55 60

Lys Asn Thr Glu Ala Arg Arg Lys Gly Arg His Cys Gly Phe Gly Lys

65 70 75 80

Arg Lys Gly Thr Ala Asn Ala Arg Met Pro Val Lys Val Leu Trp Val

85 90 95

Asn Arg Met Arg Val Leu Arg Arg Leu Leu Lys Lys Tyr Arg Glu Ala

100 105 110

Lys Lys Ile Asp Arg Gln Met Tyr His Asp Leu Tyr Met Lys Ala Lys

115 120 125

Gly Asn Val Phe Lys Asn Lys Arg Val Leu Met Asp Phe Ile His Lys

130 135 140

Lys Lys Ala Glu Lys Ala Arg Ser Lys Met Leu Lys Asp Gln Ala Glu

145 150 155 160

Ala Arg Arg Phe Lys Val Lys Glu Ala Lys Lys Arg Arg Glu Glu Arg

165 170 175

Ile Ala Thr Lys Lys Gln Glu Ile Met Gln Ala Tyr Ala Arg Glu Asp

180 185 190

Glu Ala Ala Val Lys Lys

195

<210> 100

<211> 767

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 100

Met Thr Thr Tyr Glu Glu Phe Ile Gln Gln Ser Glu Glu Arg Asp Gly

1 5 10 15

Ile Arg Phe Thr Trp Asn Val Trp Pro Ser Ser Arg Ile Glu Ala Thr

20 25 30

Arg Leu Val Val Pro Val Gly Cys Leu Tyr Gln Pro Leu Lys Glu Arg

35 40 45

Thr Asp Leu Pro Ala Ile Gln Tyr Asp Pro Val Leu Cys Thr Arg Asn

50 55 60

Thr Cys Arg Ala Ile Leu Asn Pro Met Cys Gln Val Asn Tyr Arg Ala

65 70 75 80

Lys Leu Trp Val Cys Asn Phe Cys Phe Gln Arg Asn Pro Phe Pro Pro

85 90 95

Gln Tyr Ala Ala Ile Ser Glu Gln His Gln Pro Ala Glu Leu Ile Pro

100 105 110

Ser Phe Ser Thr Ile Glu Tyr Thr Ile Ser Arg Ala Gln Phe Leu Pro

115 120 125

Pro Ile Phe Leu Leu Val Val Asp Thr Cys Leu Asp Asp Asp Glu Leu

130 135 140

Gly Ala Leu Lys Asp Ser Leu Gln Thr Ser Leu Ser Leu Leu Pro Thr

145 150 155 160

Asn Ser Leu Val Gly Leu Ile Thr Phe Gly Lys Met Val Gln Val His

165 170 175

Glu Leu Gly Cys Glu Gly Cys Ser Arg Ser Tyr Val Phe Arg Gly Thr

180 185 190

Lys Asp Leu Thr Ser Lys Gln Val Gln Asp Met Leu Gly Ile Gly Lys

195 200 205

Val Ser Ala Ser Pro Gln Gln Gln Gln Gln Arg Ala Met Gly Gly Gln

210 215 220

Gln Pro Phe Pro Thr Asn Arg Phe Ile Gln Pro Ile Gln Ser Cys Asp

225 230 235 240

Met Ser Leu Thr Asp Leu Leu Gly Glu Met Gln Arg Asp Pro Trp Pro

245 250 255

Val Gly Gln Gly Lys Arg Pro Leu Arg Ser Thr Gly Ala Ala Leu Ala

260 265 270

Ile Ala Ile Gly Leu Leu Glu Cys Ser Tyr Pro Asn Thr Gly Ala Lys

275 280 285

Val Met Leu Phe Leu Gly Gly Pro Cys Ser Gln Gly Pro Gly Gln Val

290 295 300

Val Asn Asp Asp Leu Arg Glu Pro Ile Arg Ser His His Asp Ile Gln

305 310 315 320

Lys Asp Asn Ala Arg Tyr Met Lys Lys Ala Ile Lys His Tyr Asp Ser

325 330 335

Leu Ala Leu Arg Ala Ala Thr Asn Gly His Ser Val Asp Ile Tyr Ser

340 345 350

Cys Ala Leu Asp Gln Thr Gly Leu Ala Glu Met Lys Gln Cys Cys Asn

355 360 365

Ser Thr Gly Gly His Met Val Met Gly Asp Thr Phe Asn Ser Thr Leu

370 375 380

Phe Lys Gln Thr Phe Gln Arg Val Leu Ser Arg Asp Gln Lys Gly Glu

385 390 395 400

Phe Lys Met Ala Phe Asn Gly Val Val Glu Val Lys Thr Ser Arg Glu

405 410 415

Leu Lys Val Met Gly Ala Ile Gly Pro Cys Val Ser Leu Asn Thr Lys

420 425 430

Gly Pro Cys Val Ser Glu Thr Asp Ile Gly Leu Gly Gly Thr Cys Gln

435 440 445

Trp Lys Phe Cys Thr Phe Asn Gln Asn Thr Thr Ala Ala Met Phe Phe

450 455 460

Glu Val Val Asn Gln His Ala Ala Pro Ile Pro Gln Gly Gly Arg Gly

465 470 475 480

Cys Ile Gln Phe Ile Thr Gln Tyr Gln His Ala Ser Gly Gln Arg Arg

485 490 495

Ile Arg Val Thr Thr Val Ala Arg Asn Trp Ala Asp Ala Thr Thr Asn

500 505 510

Met His His Val Ser Ala Gly Phe Asp Gln Glu Ala Gly Ala Val Leu

515 520 525

Met Ala Arg Met Val Val His Arg Ala Glu Thr Asp Asp Gly Pro Asp

530 535 540

Val Met Arg Trp Ala Asp Arg Met Leu Ile Arg Leu Cys Gln Lys Phe

545 550 555 560

Gly Glu Tyr Asn Lys Asp Asp Pro Asn Ser Phe Arg Leu Pro Glu Asn

565 570 575

Phe Ser Leu Tyr Pro Gln Phe Met Tyr His Leu Arg Arg Ser Gln Phe

580 585 590

Leu Gln Val Phe Asn Asn Ser Pro Asp Glu Thr Ser Tyr Tyr Arg His

595 600 605

Ile Leu Met Arg Glu Asp Leu Ser Gln Ser Leu Ile Met Ile Gln Pro

610 615 620

Ile Leu Tyr Ser Tyr Ser Phe Asn Gly Pro Glu Pro Val Leu Leu Asp

625 630 635 640

Thr Ser Ser Ile Gln Pro Asp Arg Ile Leu Leu Met Asp Thr Phe Phe

645 650 655

Gln Ile Leu Ile Phe His Gly Glu Thr Ile Ala Gln Trp Arg Ala Gln

660 665 670

Arg Tyr Gln Asp Leu Pro Glu Tyr Glu Asn Phe Lys Gln Leu Leu Gln

675 680 685

Ala Pro Val Asp Asp Ala Lys Glu Ile Leu His Thr Arg Phe Pro Met

690 695 700

Pro Arg Tyr Ile Asp Thr Glu Gln Gly Gly Ser Gln Ala Arg Phe Leu

705 710 715 720

Leu Ser Lys Val Asn Pro Ser Gln Thr His Asn Asn Met Tyr Gly Tyr

725 730 735

Gly Gly Glu Phe Gly Ala Pro Val Leu Thr Asp Asp Val Ser Leu Gln

740 745 750

Val Phe Met Glu His Leu Lys Lys Leu Ala Val Ser Phe Thr Ala

755 760 765

<210> 101

<211> 511

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 101

ggtgatgaga tgcggcaaga agaaagtgtg gttggaccct aatgaaatca acgaaatcgc 60

caacaccaac tctaggcaaa acatccgtaa gctgatcaag gatggtttga tcatcaaaaa 120

gcctgtggct gtccactcca gagcccgcgt ccgtaaaaac acagaagcca gacggaaggg 180

tcgtcactgt ggcttcggta agaggaaggg taccgccaac gccagaatgc ctgtgaaggt 240

cctgtgggtc aacagaatga gagtcctgcg acggctcctt aaaaaataca gagaagccaa 300

gaagatcgat aggcaaatgt accacgacct ttacatgaaa gccaaaggta acgtcttcaa 360

aaacaagagg gtactgatgg acttcattca caagaagaag gctgaaaagg cgagatcaaa 420

gatgttgaag gaccaggcag aggcgagacg tctcaaggtc aaggaggcga agaagaggcg 480

cgaggagagg atcgccacca agaagcaaga g 511

<210> 102

<211> 1145

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 102

tgggttgttg gagtgctcct accccaacac gggagcaaaa gtcatgttgt tccttggtgg 60

cccttgttcc caagggcctg gtcaagttgt caatgatgac ctgagggaac ctatccgctc 120

tcatcatgac atccagaaag ataatgcccg ctacatgaaa aaagccatta aacattacga 180

ttctttggca ttgagagcag ccactaatgg gcattcagta gacatttatt cctgtgcttt 240

agatcagaca ggtttggcgg aaatgaagca atgttgcaat tctactgggg gtcatatggt 300

gatgggtgac accttcaact ccactttgtt caaacagacg ttccagaggg tgctctcccg 360

tgatcaaaaa ggcgaattca aaatggcttt caatggcgta gttgaagtca aaacctcccg 420

agagctaaaa gttatgggag ccattgggcc ttgcgtttca ttgaatacga aaggtccgtg 480

tgttagtgaa actgacatag ggcttggagg aacttgccag tggaagttct gcacatttaa 540

ccaaaatacc actgctgcca tgttctttga ggtagtaaac caacacgctg ctcctatccc 600

tcaaggtgga agaggatgta tacagttcat aactcaatac cagcatgcgt cgggccaaag 660

gcgcatccga gtaaccactg tagccaggaa ttgggctgat gcgactacca acatgcacca 720

tgttagtgca ggatttgatc aggaagctgg agcggtactc atggccagga tggtcgttca 780

cagagctgaa actgatgatg gacctgatgt catgagatgg gctgatcgca tgttgattcg 840

tctttgccag aaattcggcg agtacaacaa ggatgatcca aatagtttcc gcctcccaga 900

aaacttctcg ctttacccac agttcatgta tcacttgaga aggtcccaat tcttgcaggt 960

attcaacaac agcccagacg aaacgtcgta ctatcgtcac atcttgatgc gggaagattt 1020

gtcgcagagc ttgatcatga ttcagccgat cctgtacagt tacagtttca acggtccaga 1080

accagtcctt ttggacactt ccagcattca acctgatcgg atcctgctga tggacacctt 1140

cttcc 1145

<210> 103

<211> 258

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> GFP

<400> 103

agatacccag atcatatgaa acggcatgac tttttcaaga gtgccatgcc cgaaggttat 60

gtacaggaaa gaactatatt tttcaaagat gacgggaact acaagacacg taagtttaaa 120

cagttcggta ctaactaacc atacatattt aaattttcag gtgctgaagt caagtttgaa 180

ggtgataccc ttgttaatag aatcgagtta aaaggtattg attttaaaga agatggaaac 240

attcttggac acaaattg 258

<210> 104

<211> 745

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Флуоресцентный белок коралла Pt

<400> 104

agtgtaataa cttactttga gtctaccgtc atgagtgcaa ttaaaccagt catgaagatt 60

gaattggtca tggaaggaga ggtgaacggg cacaagttca cgatcacggg agagggacaa 120

ggcaagcctt acgagggaac acagactcta aaccttacag tcactaaagg cgtgcccctt 180

cctttcgctt tcgatatctt gtcaacagca ttccagtatg gcaacagggt atttaccaaa 240

tacccagatg atataccgga ctatttcaag cagacctttc cggaaggata ttcgtgggaa 300

agaactttca aatatgaaga gggcgtttgc accacaaaga gtgacataag cctcaagaaa 360

ggccaaccag actgctttca atataaaatt aactttaaag gggagaagct tgaccccaac 420

ggcccaatta tgcagaagaa gaccctgaaa tgggagccat ccactgagag gatgtacatg 480

gacgtggata aagacggtgc aaaggtgctg aagggcgatg ttaatgcggc cctgttgctt 540

gaaggaggtg gccattatcg ttgtgacttt aacagtactt acaaggcgaa gaaaactgtg 600

tccttcccag catatcactt tgtggaccac cgcattgaga ttttgagcca caatacggat 660

tacagcaagg ttacactgta tgaagttgcc gtggctcgca attctcctct tcagattatg 720

gcgccccagt aaaggcttaa cgaaa 745

<210> 105

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 105

gcgtaatacg actcactata ggtgatgaga tgcggcaaga ag 42

<210> 106

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 106

ctcttgcttc ttggtggcga tc 22

<210> 107

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 107

ggtgatgaga tgcggcaaga ag 22

<210> 108

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 108

gcgtaatacg actcactata ggctcttgct tcttggtggc gatc 44

<210> 109

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 109

gcgtaatacg actcactata ggtgggttgt tggagtgctc ctac 44

<210> 110

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 110

ggaagaaggt gtccatcagc ag 22

<210> 111

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 111

tgggttgttg gagtgctcct ac 22

<210> 112

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 112

gcgtaatacg actcactata ggggaagaag gtgtccatca gcag 44

<210> 113

<211> 46

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 113

gcgtaatacg actcactata ggagataccc agatcatatg aaacgg 46

<210> 114

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 114

caatttgtgt ccaagaatgt ttcc 24

<210> 115

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 115

agatacccag atcatatgaa acgg 24

<210> 116

<211> 46

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 116

gcgtaatacg actcactata ggcaatttgt gtccaagaat gtttcc 46

<210> 117

<211> 43

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 117

gcgtaatacg actcactata ggagtgtaat aacttacttt gag 43

<210> 118

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 118

tttcgttaag cctttactgg 20

<210> 119

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 119

agtgtaataa cttactttga g 21

<210> 120

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 120

gcgtaatacg actcactata ggtttcgtta agcctttact gg 42

<210> 121

<211> 473

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 121

tgccgggccg ctcgccgaac catctgggaa gcttggaatg ggctcgactg ccgaactgat 60

caactttttc ggtccacacc ttttctatca actccttata ccgctccagg atgccgcctt 120

caaacagttt tttcttgtcg tcataagatc tggtgtcaac tcttcgttca tatttggagg 180

cgacttggat tttgggtggg tacttgccgg tgagggcctc agggtccaag ccttttttca 240

aggctttgtg ccgaagttgt tgcttctgtc tttccttcag ttctttaaga tcgtagtctt 300

gcctcttttg cctttcctca agatcgtatt tctcggtctc aagtttgaca atggcttccc 360

agagttcctg agctttgatg cgtagcctgt ctatgctcat attttctatc gccaggggct 420

tgagcctaat gctgagggag atacgtttct cttcctccag ctgctccttg gtc 473

<210> 122

<211> 773

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 122

gctgctcgcc gtccagttcg ttttcgagtt ccctgacacg ttgttccagc ttggcgatgg 60

ccttcttgcc tcccttgagg gcgttgtttt cggcttcgtc caacctgact tggagttcct 120

tgatttgcgt ttccagagcc ttgcggagct tctcctgggt ctgagcgtgg tcctgttctg 180

ccctgagttc atcagctaac ctagcggcat caaccattgc cttcttggcc ttctcttcgg 240

agttcttggc ttcgttgaga agttcgtcga ggtcagcatg aagtgtctgc aactctccct 300

caagcttgcg tttggcggct gaggcgctgg tagcttgggc agccaactcg ttgatctgtt 360

cgtgggcatc tccaagttct tgttcggctt ggcgcctgcc cctgtcggcc tgttcgagga 420

gagtgcgcga ctcctcgagc tcgtttccga gagcgttggc cctcctttcg gcgattccga 480

gttgttcacg agcatcgtcg cgtgcccttt gttcttcctc aagagcggtc tgtacgtcct 540

tgagttgttg ttggtatttc ttgatggtct tctgggcttc ggcgttagcc ttgttggcgt 600

ggtcgagagc gatttcgagt tcgttgatgt cggcttcaag cttcttcttc atgcgaagag 660

cctcagcctt acccttggct tcagcctcca agctggcttg catggagtcg agtgcccgtt 720

ggtggttctt cctggtgttc tcgaactcct cctccttttc ctggatccgc cgg 773

<210> 123

<211> 771

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 123

tggacgccat caagaagaaa atgcaggcga tgaagatgga gaaggacacg gccatggaca 60

aggccgacac ctgcgagggg caggccaagg acgctaacac ccgcgccgac aaaatccttg 120

aagatgtgag ggacctccaa aagaaactca accaggtaga aagtgatctc gaaaggacca 180

agagggaact cgagacgaaa accaccgaac tcgaagagaa ggagaaggcc aacaccaacg 240

ctgagagcga ggtcgcctcc ctcaacagga aagtccagat ggttgaagag gacttggaaa 300

gatctgaaga aaggtccggc accgcacaac aaaaactgtc cgaagcctcc cacgccgctg 360

atgaagcctc tcgtatgtgc aaagtattgg agaacaggtc acaacaggat gaggagagga 420

tggaccagct caccaaccag ctgaaagaag cccgactcct cgctgaagac gccgacggca 480

aatcggatga ggtatcaagg aagctggcct tcgttgaaga cgaactggaa gtagctgaag 540

atcgtgtcaa atctggagac tcgaagatca tggagcttga ggaggagttg aaagttgtcg 600

gtaacagctt gaaatctctc gaagtttcag aggagaaggc caaccagcga gtcgaagagt 660

acaaacgtca aatcaagcaa ctgactgtca agttgaagga ggctgaagct cgcgctgagt 720

tcgccgaaaa gacagtcaag aagttgcaga aagaggtgga ccggctggag g 771

<210> 124

<211> 257

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 124

tgcgggccct ggggcagaat cccacagaat ctgacgtgaa gaagttcacc caccagcaca 60

aaccagatga aagaatcagc ttcgaggtgt ttctcccgat ataccaagcc atatcgaagg 120

gtaggacgtc agacacagct gaagacttca tcgagggtct cagacacttt gacaaagatg 180

gaaatggctt catttcaaca gctgagcttc gccacttgct cacaactttg ggcgaaaaac 240

tgaccgacga cgaggtg 257

<210> 125

<211> 410

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 125

gccacctcca acgtgtttgc catgttcgat caggctcaga ttcaagaatt caaggaggca 60

ttcaacatga tcgaccagaa cagggacggc ttcgtggata aggaagacct ccatgacatg 120

ctcgcttccc taggtaagaa cccctcagac gagtatctcg aggggatgat gaacgaggcg 180

cctggtccca tcaacttcac aatgttcctc accctcttcg gtgagcggct tcagggaact 240

gatccggagg aggttatcaa gaacgcattt gggtgttttg acgaagacaa caacggattc 300

atcaacgagg aaagactgcg cgagctgctc acctccatgg gggacaggtt cactgatgaa 360

gacgtggacg aaatgtaccg agaggccccc atcaagaacg gcatgttcga 410

<210> 126

<211> 1021

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 126

tgttcatcct ggagcaggag gagtatcaga gagaaggtat tgaatggaag ttcatcgact 60

tcggacttga tcttcagccg accattgatc tcattgataa gccaatggga gtcatggctc 120

tcctggatga agaatgttgg ttccccaaag ccactgacaa gaccttcgtt gagaagctgg 180

tcggtgctca cagcgttcac cccaaattca tcaaaactga tttccgtgga gtcgccgact 240

ttgctgtcgt ccattatgcc ggaaaagtcg attattcggc ggcgcagtgg ctgatgaaga 300

acatggaccc tctgaacgaa aacgtcgtgc agctcctcca gaactcgcaa gatccgttcg 360

tcatccacat ctggaaggac gcagagatcg tcggcatggc tcaccaagct ctcagcgaca 420

ctcagtttgg agctcgtacc aggaagggta tgttccgaac cgtgtctcaa ctctacaaag 480

accagctgtc caaactcatg atcacacttc gcaacacgaa ccccaacttc gtccgttgca 540

tcctccccaa ccacgagaag agagctggca agatcgatgc tcctttggtg ctggatcagc 600

tcagatgcaa cggtgtgttg gaaggcatca gaatttgcag acaaggtttc ccgaatagaa 660

tcccattcca ggaattccgg caaagatacg agctcttaac tcccaatgtc atccccaaag 720

ggttcatgga cggtaaaaag gcttgcgaga agatgatcaa cgctctcgaa ctggacccta 780

atctctacag agttggtcag tccaagatat tcttcagagc tggagtctta gctcatctag 840

aagaagagcg cgactataag attactgatc tgatagccaa tttccgggct ttctgtaggg 900

gatatcttgc ccgaaggaac taccaaaagc gtcttcagca gctcaacgcc attcgtatta 960

tccagcgaaa ttgctcagct tacttgaagt tgaggaactg gcaatggtgg cggctgtaca 1020

c 1021

<210> 127

<211> 325

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 127

cggtcatcat ctccatgaac tcgtcgaagt caacagttcc ggaaccgtca gaatcaattt 60

cagcaatcat catgtcaagt tcttgggagg tgattttgtc gtcgagttcc ttcaggattt 120

ccctcaagac gtcagtggta atgtaaccgt tcccttcctt gtcgtagagc ctgaaggcct 180

ccctcagttc ttgctgcatg gcctcagcat cttgtgtctc atcttctgtc aggaaaccgg 240

cagccaaggc tacgaactcc tcaaattcaa gttgtccaga gccatcagcg tcgacctccg 300

caatgatctc ctccaggatc ttctt 325

<210> 128

<211> 463

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 128

cggtcatcat ctccatgaac tcgtcgaagt cgacagttcc ggatccgtca gagtcgatct 60

cctcgatgat catgtccagc tcctcgttgg tcagctgctc gtccaattca tgaaggattt 120

ctttgaggca ggaggtcggg atgtagccat taccttcttt gtcgtagaga cggaaggctt 180

ctcgcagctc tttctgcatg gcttcatcgt cttcctcaac aatgaacttg gctgccaacg 240

tgatgaactc ttcaaactcc agccttcccg atttgtcagc gtcaacttct tcgatgagtt 300

catcgagaat cttcttgttg aagggttgac ccatgagtct gaggatgtcg gccaccatgt 360

ccgtcgggat ggaacccgag tgatcccggt cgaaagcgtt caacgcgatg gtcatgatgg 420

ggataattcg gttaattctg ttagaccagt ccgattagtg acg 463

<210> 129

<211> 413

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 129

atgggtgaag gagggtgcct gctcagagca gtcctccagg atgacggcta tggacaacgc 60

ctcgaagaac gccgctgaga tgatcgacaa gctgaccttg acgttcaaca ggactcggca 120

agccgtcatc accagggagc tcatcgaaat catctccggt gcctctgctt tggagtaacg 180

tctcagctca cccagccacc tcccgtagat ccactagtgc tgcgagagac cgagtacctc 240

gttctattca ccctgtacat ttcttaatca atattattgg aattcgattc gatagtcgta 300

tgctgggaaa tatcttgttc atattcatga tacttgttca acattgttct ggtaaataat 360

ttatgtaata caggttgagt taccaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaa 413

<210> 130

<211> 449

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 130

gcagctggag gaagagaaac gtatctccct cagcattagg ctcaagcccc tggcgataga 60

aaatatgagc atagacaggc tacgcatcaa agctcaggaa ctctgggaag ccattgtcaa 120

acttgagacc gagaaatacg atcttgagga aaggcaaaag aggcaagact acgatcttaa 180

agaactgaag gaaagacaga agcaacaact tcggcacaaa gccttgaaaa aaggcttgga 240

ccctgaggcc ctcaccggca agtacccacc caaaatccaa gtcgcctcca aatatgaacg 300

aagagttgac accagatctt atgacgacaa gaaaaaactg tttgaaggcg gcatcctgga 360

gcggtataag gagttgatag aaaaggtgtg gaccgaaaaa gttgatcagt tcggcagtcg 420

agcccattcc aagcttccca gatggttcg 449

<210> 131

<211> 719

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 131

aggagttcga gaacaccagg aagaaccacc aacgggcact cgactccatg caagccagct 60

tggaggctga agccaagggt aaggctgagg ctcttcgcat gaagaagaag cttgaagccg 120

acatcaacga actcgaaatc gctctcgacc acgccaacaa ggctaacgcc gaagcccaga 180

agaccatcaa gaaataccaa caacaactca aggacgtaca gaccgctctt gaggaagaac 240

aaagggcacg cgacgatgct cgtgaacaac tcggaatcgc cgaaaggagg gccaacgctc 300

tcggaaacga gctcgaggag tcgcgcactc tcctcgaaca ggccgacagg ggcaggcgcc 360

aagccgaaca agaacttgga gatgcccacg aacagatcaa cgagttggct gcccaagcta 420

ccagcgcctc agccgccaaa cgcaagcttg agggagagtt gcagacactt catgctgacc 480

tcgacgaact tctcaacgaa gccaagaact ccgaagagaa ggccaagaag gcaatggttg 540

atgccgctag gttagctgat gaactcaggg cagaacagga ccacgctcag acccaggaga 600

agctccgcaa ggctctggaa acgcaaatca aggaactcca agtcaggttg gacgaagccg 660

aaaacaacgc cctcaaggga ggcaagaagg ccatcgccaa gctggaacaa cgtgtcagg 719

<210> 132

<211> 737

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 132

gcaggcgatg aagatggaga aggacacggc catggacaag gccgacacct gcgaggggca 60

ggccaaggac gctaacaccc gcgccgacaa aatccttgaa gatgtgaggg acctccaaaa 120

gaaactcaac caggtagaaa gtgatctcga aaggaccaag agggaactcg agacgaaaac 180

caccgaactc gaagagaagg agaaggccaa caccaacgct gagagcgagg tcgcctccct 240

caacaggaaa gtccagatgg ttgaagagga cttggaaaga tctgaagaaa ggtccggcac 300

cgcacaacaa aaactgtccg aagcctccca cgccgctgat gaagcctctc gtatgtgcaa 360

agtattggag aacaggtcac aacaggatga ggagaggatg gaccagctca ccaaccagct 420

gaaagaagcc cgactcctcg ctgaagacgc cgacggcaaa tcggatgagg tatcaaggaa 480

gctggccttc gttgaagacg aactggaagt agctgaagat cgtgtcaaat ctggagactc 540

gaagatcatg gagcttgagg aggagttgaa agttgtcggt aacagcttga aatctctcga 600

agtttcagag gagaaggcca accagcgagt cgaagagtac aaacgtcaaa tcaagcaact 660

gactgtcaag ttgaaggagg ctgaagctcg cgctgagttc gccgaaaaga cagtcaagaa 720

gttgcagaaa gaggtgg 737

<210> 133

<211> 205

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 133

cagaatccca cagaatctga cgtgaagaag ttcacccacc agcacaaacc agatgaaaga 60

atcagcttcg aggtgtttct cccgatatac caagccatat cgaagggtag gacgtcagac 120

acagctgaag acttcatcga gggtctcaga cactttgaca aagatggaaa tggcttcatt 180

tcaacagctg agcttcgcca cttgc 205

<210> 134

<211> 326

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 134

ggaggcattc aacatgatcg accagaacag ggacggcttc gtggataagg aagacctcca 60

tgacatgctc gcttccctag gtaagaaccc ctcagacgag tatctcgagg ggatgatgaa 120

cgaggcgcct ggtcccatca acttcacaat gttcctcacc ctcttcggtg agcggcttca 180

gggaactgat ccggaggagg ttatcaagaa cgcatttggg tgttttgacg aagacaacaa 240

cggattcatc aacgaggaaa gactgcgcga gctgctcacc tccatggggg acaggttcac 300

tgatgaagac gtggacgaaa tgtacc 326

<210> 135

<211> 944

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 135

gacttgatct tcagccgacc attgatctca ttgataagcc aatgggagtc atggctctcc 60

tggatgaaga atgttggttc cccaaagcca ctgacaagac cttcgttgag aagctggtcg 120

gtgctcacag cgttcacccc aaattcatca aaactgattt ccgtggagtc gccgactttg 180

ctgtcgtcca ttatgccgga aaagtcgatt attcggcggc gcagtggctg atgaagaaca 240

tggaccctct gaacgaaaac gtcgtgcagc tcctccagaa ctcgcaagat ccgttcgtca 300

tccacatctg gaaggacgca gagatcgtcg gcatggctca ccaagctctc agcgacactc 360

agtttggagc tcgtaccagg aagggtatgt tccgaaccgt gtctcaactc tacaaagacc 420

agctgtccaa actcatgatc acacttcgca acacgaaccc caacttcgtc cgttgcatcc 480

tccccaacca cgagaagaga gctggcaaga tcgatgctcc tttggtgctg gatcagctca 540

gatgcaacgg tgtgttggaa ggcatcagaa tttgcagaca aggtttcccg aatagaatcc 600

cattccagga attccggcaa agatacgagc tcttaactcc caatgtcatc cccaaagggt 660

tcatggacgg taaaaaggct tgcgagaaga tgatcaacgc tctcgaactg gaccctaatc 720

tctacagagt tggtcagtcc aagatattct tcagagctgg agtcttagct catctagaag 780

aagagcgcga ctataagatt actgatctga tagccaattt ccgggctttc tgtaggggat 840

atcttgcccg aaggaactac caaaagcgtc ttcagcagct caacgccatt cgtattatcc 900

agcgaaattg ctcagcttac ttgaagttga ggaactggca atgg 944

<210> 136

<211> 318

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 136

atcctggagg agatcattgc ggaggtcgac gctgatggct ctggacaact tgaatttgag 60

gagttcgtag ccttggctgc cggtttcctg acagaagatg agacacaaga tgctgaggcc 120

atgcagcaag aactgaggga ggccttcagg ctctacgaca aggaagggaa cggttacatt 180

accactgacg tcttgaggga aatcctgaag gaactcgacg acaaaatcac ctcccaagaa 240

cttgacatga tgattgctga aattgattct gacggttccg gaactgttga cttcgacgag 300

ttcatggaga tgatgacc 318

<210> 137

<211> 423

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 137

atccccatca tgaccatcgc gttgaacgct ttcgaccggg atcactcggg ttccatcccg 60

acggacatgg tggccgacat cctcagactc atgggtcaac ccttcaacaa gaagattctc 120

gatgaactca tcgaagaagt tgacgctgac aaatcgggaa ggctggagtt tgaagagttc 180

atcacgttgg cagccaagtt cattgttgag gaagacgatg aagccatgca gaaagagctg 240

cgagaagcct tccgtctcta cgacaaagaa ggtaatggct acatcccgac ctcctgcctc 300

aaagaaatcc ttcatgaatt ggacgagcag ctgaccaacg aggagctgga catgatcatc 360

gaggagatcg actctgacgg atccggaact gtcgacttcg acgagttcat ggagatgatg 420

acc 423

<210> 138

<211> 252

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 138

ggtgaaggag ggtgcctgct cagagcagtc ctccaggatg acggctatgg acaacgcctc 60

gaagaacgcc gctgagatga tcgacaagct gaccttgacg ttcaacagga ctcggcaagc 120

cgtcatcacc agggagctca tcgaaatcat ctccggtgcc tctgctttgg agtaacgtct 180

cagctcaccc agccacctcc cgtagatcca ctagtgctgc gagagaccga gtacctcgtt 240

ctattcaccc tg 252

<210> 139

<211> 1110

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 139

gtctccgctc aagctggtca tcagacttca gctgagtcct ggggtaccgg tcgtgctgtg 60

gctcgtatcc cccgtgttcg cggaggtggt actcaccgct caggtcaggg tgcttttggc 120

aacatgtgtc gcggcggtag gatgttcgct cccactcgcc catggcgtcg ttggcaccgc 180

aagatcaacg ttaaccaaaa acgttatgcc gtcgtgtccg ccatcgctgc atccggcgtc 240

ccagccctcg tcatgtccaa aggacacatg gtgcaaagcg tccctgaatt cccccttgtt 300

gtgtctgaca aagttcagga atacactaaa accaaacagg ctgtcatctt ccttcaccgc 360

atcaaagcct ggcaagacat ccagaaagtg tacaagtcga agaggttccg tgctggtaag 420

ggtaaaatga ggaaccgcag gaggatccag aggcgtggac ccctcatcat ctacgaccag 480

gatcagggtc tgaacagggc tttccgtaac attcccggcg tcgatttgat cgaagtgagc 540

cgcctcaact tgctgaagct cgctccagga ggtcacatcg gccggttcgt catctggact 600

cagtcggcct tcgagaagtt ggacgccctc tacggcacct ggaagaagaa gtccaccctc 660

aaggctggat acaatctccc catgcccaag atggccaaca ccgacctttc ccgcctcttc 720

aaggccccgg agatcaaggc tgtcctcagg aatcccaaga agaccatcgt acgacgagtg 780

cgcaaactga accctctccg caacaccagg gctatgctgc gtctcaaccc atacgctgct 840

gtcctcaaga ggaaggccat ccttgatcaa aggaagttga aactccagaa gctcgtagaa 900

gctgccaaga agggagatac caagctgtcg ccccgcgtcg agcgtcacct gaagatgatc 960

gagagaagga aagccctgat caagaaagcc aaggctgcca agcccaagaa gcccaaaacg 1020

gccaagaaac ccaagaccgc cgagaaggca ccagcacccg ccaagaaggc ggcagcgccc 1080

aaaaaggcca ccacccctgc caagaaatga 1110

<210> 140

<211> 729

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 140

atggccaatg ctaagcctat ttctaagaag aagaagtttg tgtctgacgg tgtcttcaaa 60

gccgaattga acgaatttct taccagagaa ctcgctgaag aggggtactc aggtgttgag 120

gtccgagtga cccccaacaa gacagaaatt atcatcatgg cgacaaggac acaaagcgtt 180

cttggtgata agggccgccg aatcagggag ctcacgtctg tagttcagaa aagattcaat 240

ttcaagcctc agactttgga tctctatgct gaaaaggtcg ccaccagagg tttgtgtgct 300

attgcacaag ctgaatccct ccgttacaaa ctcattggcg gtcttgctgt ccgaggggct 360

tgctatggtg tccttcgctt catcatggaa aatggtgcca agggttgcga agtcgtagta 420

tctggaaaac tgcgtggtca gagagccaag tcaatgaagt tcgtggatgg tttgatgatc 480

cacagtgggg atccctgtaa cgaatatgtt gatactgcta cccgacatgt gctccttaga 540

caaggtgtcc tgggaataaa ggtgaagatt atgttgccgt gggacgttac cggcaaaaat 600

gggccgaaga accctcttcc cgaccacgtc agcgttctct tacctaagga ggagctacca 660

aatttggccg ttagtgtgcc tggatccgac atcaaaccaa agcctgaagt accagcaccc 720

gctttgtga 729

<210> 141

<211> 789

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 141

atggctgttg gtaaaaataa gggtctatcg aaaggaggaa agaagggagt taaaaaaaag 60

gtagtggacc ctttcaccag gaaggattgg tacgatgtta aggctccttc catgttcaaa 120

aagcgtcaag ttggcaaaac tttggtcaac cgaactcagg gaaccaagat tgcttctgaa 180

gggttgaaag gacgagtttt cgaagtttcg ctcgctgata tccaggagga cactgatgcc 240

gagcgctcct tcaggaaatt caggctcatc gctgaagatg tccaagccag aaacgtcctt 300

accaatttcc acggtatgga tttgaccact gacaaactcc ggagcatggt caagaagtgg 360

cagactctca tcgaagccaa cgttgacgtc aagaccaccg acggctacct cctgcgcgtc 420

ttctgcatag gattcaccaa taaagatcaa ctttcccaga gaaagacttg ctatgcccag 480

cataatcagg tccgagaaat ccgcaaaaag atggttaaaa acatcagtga cagcatttcc 540

agctgtgatt tgaggagtgt tgtgaacaag ctgatcccag actccatcgc taaagatata 600

gaaaagaatt gccaaggaat ctacccactc cacgatgtgt acattcggaa ggtgaaggtg 660

ttgaagaagc cgaggttcga gctcagcaag ctccttgagc ttcacgtcga tggcaaaggg 720

atcgacgaac ccggcgcgaa agtgacgagg actgacgctt acgagcctcc agttcaagag 780

tctgtctaa 789

<210> 142

<211> 473

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 142

gaccaaggag cagctggagg aagagaaacg tatctccctc agcattaggc tcaagcccct 60

ggcgatagaa aatatgagca tagacaggct acgcatcaaa gctcaggaac tctgggaagc 120

cattgtcaaa cttgagaccg agaaatacga tcttgaggaa aggcaaaaga ggcaagacta 180

cgatcttaaa gaactgaagg aaagacagaa gcaacaactt cggcacaaag ccttgaaaaa 240

aggcttggac cctgaggccc tcaccggcaa gtacccaccc aaaatccaag tcgcctccaa 300

atatgaacga agagttgaca ccagatctta tgacgacaag aaaaaactgt ttgaaggcgg 360

catcctggag cggtataagg agttgataga aaaggtgtgg accgaaaaag ttgatcagtt 420

cggcagtcga gcccattcca agcttcccag atggttcggc gagcggcccg gca 473

<210> 143

<211> 1463

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 143

gggtctcagc tgaggcacat tccatctcgt cgcaaatctt tcctgcatct ctcctgggtg 60

acctttaggt gaccaatcac atccatcatg tcggacgagg agtattcgga gtcggaggaa 120

gagacccagc cggaaccaca gaaaaaacca gaggctgaag gaggcggcga cccagaattc 180

gtcaagcgta aggaagccca gacctcagcc ttagacgagc agcttaaaga ctatatcgca 240

gaatggagga aacaaagagc tcgcgaagaa gaagacctca agaagctgaa ggagaagcaa 300

gccaagcgca aggtcgctcg ggcagaagaa gaaaagagat tggcggaaaa gaagaagcag 360

gaagaagaac gacgtgtgag ggaagcagaa gagaagaaac agagggaaat cgaagagaag 420

aggcgaaggc ttgaagaggc cgagaagaag agacaagcca tgatggctgc tctcaaggac 480

cagagcaaaa cgaagggacc caattttgtc gttaataaga aagccgaaac ccttggcatg 540

tcctccgctc aaattgagcg caacaagact aaggaacagc ttgaggaaga aaaacgtatc 600

tccctcagca ttaggctcaa gcccctggcg atagaaaata tgagcataga caggctacgc 660

ataaaagctc aggaactctg ggaagccatt gtcaaacttg agaccgagaa atacgatctt 720

gaggaaaggc aaaagaggca agactacgat cttaaagaac tgaaggaaag acagaagcaa 780

caacttcggc acaaagcctt gaaaaaaggc ttggaccctg aggccctcac cggcaagtac 840

ccacccaaaa tccaagtcgc ctccaaatat gaacgaagag ttgacaccag atcttatgac 900

gacaagaaaa aactgtttga aggcggcatc ctggagcggt ataaggagtt gatagaaaag 960

gtgtggaccg aaaaagttga tcagttcggc agtcgagccc attccaagct tcccagatgg 1020

ttcggcgagc ggcccggcaa gaagaaggat gcccctgaaa gcccggaaga agaggaagtg 1080

aaggtagaag atgaacctga agctgaacca agcttcatgc tcgacgaaga agaagaagaa 1140

gcggaagaag aggaggcgga agaggaagag gaagccgagg aagaggagga agaagaagag 1200

gaagaggaag aggaggagga ggaagaagaa taggtctttt tcaacatttc actgcaccca 1260

cagttccacg gtctttccgc ccacaaactc aatctgtgct cacgagatct tagcaggaaa 1320

agtattgcga cccgataaga acaaattaaa ttatttttgg aatatctcgt tcagttattt 1380

cgtgagaaac aattttattc atgtaaacga ttaaaagatc ccatacattt ccaaaaaaaa 1440

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaa 1463

<210> 144

<211> 773

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 144

ccggcggatc caggaaaagg aggaggagtt cgagaacacc aggaagaacc accaacgggc 60

actcgactcc atgcaagcca gcttggaggc tgaagccaag ggtaaggctg aggctcttcg 120

catgaagaag aagcttgaag ccgacatcaa cgaactcgaa atcgctctcg accacgccaa 180

caaggctaac gccgaagccc agaagaccat caagaaatac caacaacaac tcaaggacgt 240

acagaccgct cttgaggaag aacaaagggc acgcgacgat gctcgtgaac aactcggaat 300

cgccgaaagg agggccaacg ctctcggaaa cgagctcgag gagtcgcgca ctctcctcga 360

acaggccgac aggggcaggc gccaagccga acaagaactt ggagatgccc acgaacagat 420

caacgagttg gctgcccaag ctaccagcgc ctcagccgcc aaacgcaagc ttgagggaga 480

gttgcagaca cttcatgctg acctcgacga acttctcaac gaagccaaga actccgaaga 540

gaaggccaag aaggcaatgg ttgatgccgc taggttagct gatgaactca gggcagaaca 600

ggaccacgct cagacccagg agaagctccg caaggctctg gaaacgcaaa tcaaggaact 660

ccaagtcagg ttggacgaag ccgaaaacaa cgccctcaag ggaggcaaga aggccatcgc 720

caagctggaa caacgtgtca gggaactcga aaacgaactg gacggcgagc agc 773

<210> 145

<211> 5446

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 145

tcaggaaaac tggctggtgc tgatattgag acctatctgc tggagaaggc tcgtgtcatc 60

tcccaacaaa cactcgagag atcctaccac attttctacc agatgatgtc tggagctgtc 120

aagggcgtca aggaaatgtg cttgctggtc gacgatatct atacgtacaa cttcatatcc 180

cagggtaaag tcagcattgc aggcgttgat gacggagagg aaatggttct gaccgatcaa 240

gccttcgaca tcttgggttt caccaagcaa gagaaggaag acatctacaa gatcaccgcc 300

gctgtcattc acatgggtac catgaagttc aagcaaaggg gtcgtgaaga gcaggctgaa 360

gccgatggaa ctgaggaagg cggtaaggtc ggtgtgctcc tcggtatcga cggtgacgac 420

ttgtacaaga atatgtgcaa gcccagaatc aaggtcggaa ctgagttcgt gacccaggga 480

aagaacgtca accaggtctc atactctctc ggtgccatgt ccaagggtat gttcgatcgt 540

ctcttcaaat tcttggtcaa gaaatgtaac gaaactctgg acaccaaaca gaagagacag 600

cacttcattg gtgtactgga tattgccggg ttcgaaattt tcgacttcaa cggttttgag 660

caactgtgta tcaacttcac caacgagaaa ttgcaacaat tcttcaacca ccacatgttc 720

gtactcgagc aagaagagta caagagggaa ggcattaact gggctttcat tgatttcgga 780

atggacttgc tcgcttgtat tgaactgatt gagaagccca tgggtatctt gtccatcctt 840

gaagaagagt ctatgttccc caaggctact gacaagacct ttgaggacaa actcatcacc 900

aaccacttgg gcaaatctcc caacttcagg aagcccgccg ttccaaagcc tggccaacaa 960

gctggtcact tcgccatcgc tcactacgct ggttgcgtgt catacaacat caccggctgg 1020

cttgagaaga acaaggatcc gttgaacgac actgttgtcg atcagtacaa gaagggaacc 1080

aacaaactgt tgtgcgagat cttcgctgat catcctggcc aatctggtgc ccctggtggt 1140

gatgctggtg gcaagggtgg tcgtggcaag aaaggtggtg gcttcgccac tgtgtcatct 1200

tcctacaagg aacaattgaa caacttgatg accactttga agagcacaca gcctcacttc 1260

gtccgttgta tcatccccaa cgaattgaaa cagcccggtg ttattgattc tcacttggtc 1320

atgcaccagc tgacttgtaa cggtgtactt gaaggcatcc gtatttgccg taaaggcttc 1380

cccaacagga tgaactaccc tgacttcaag ctccgataca agatccttaa ccccgctgcc 1440

gtggacagag agagtgatat cctcaaggct gctggtctcg tccttgagtc aactgggctc 1500

gaccctgata tgtaccgtct cggccacacc aaggtgttct tcagggccgg agttttgggt 1560

caacttgaag aattgcgtga cgacaggctt agcaagatca tcggatggat gcaggccttc 1620

atgcgcggtt acctcgtcag gaaggagtac aagaagctcc aggaacagag gttagccctc 1680

caagttgtcc agcgcaactt gagaaggtac ctccaactga ggacctggcc ctggtggaag 1740

atgtggtcca gggtcaagcc cctcctcaac gtcgccaacg tcgaagagga gatgcggaaa 1800

ctcgaagagt tggtcgccga gacccaggcc gctttggaga aggaggagaa gctgaggaag 1860

gaggccgaag cccttaacgc caagcttctc caagagaaga ccgaccttct caggaacttg 1920

gaaggagaga agggatccat cagcggtatc caggaacgat gtgccaagct gcaagcccaa 1980

aaggccgatc ttgagtctca actcatggac acccaagaaa ggctgcagaa cgaagaagat 2040

gccaggaacc agctcttcca acagaagaag aaattggaac aagaagccgc tgccctcaag 2100

aaggacatcg aagatctcga actctccaac caaaagaccg accaagataa ggccagcaag 2160

gaacaccaaa tcagaaacct caatgacgag atcgctcacc aagatgactt gatcaacaag 2220

ctcaacaagg agaagaaaat ccagagcgaa ctcaaccaaa agactgctga agaacttcag 2280

gccgctgaag acaaaatcaa ccacctcacc aaggttaagg tcaagcttga acagaccttg 2340

gatgaactcg aagacaccct cgaacgtgaa aagaaactcc gaggagatgt cgaaaaggcc 2400

aagaggaaga ctgaaggcga cctcaagctc actcaggaag ccgttgccga tcttgaaagg 2460

aacaagaaag aactcgaaca gaccatccag aggaaagaca aggaaattgc ttccctcacc 2520

gccaagctcg aagacgaaca atccatcgtc aacaagactg gcaaacagat caaggaactc 2580

cagagccgca ttgaagagct cgaggaggaa gtcgaggctg agaggcaagc ccgcggaaag 2640

gctgagaagc aacgtgctga cctcgcccgc gaacttgagg aactcggcga gaggttagag 2700

gaagctggtg gtgccacctc tgcccagatc gagctcaaca agaagcgtga agctgagatg 2760

agcaaactca ggagggacct ggaagaagcc aacatccagc acgaaggcac gctcgccaac 2820

ctccgcaaga agcacaacga tgctgtcagt gagatgggag accaaatcga ccagctcaac 2880

aaacttaaga ccaaggttga aaaggagaag tctcaatacc tcggtgaact caacgacgtc 2940

cgcgcctcca ttgaccactt gaccaacgag aaggctgcca ctgaaaaggt tgccaagcaa 3000

ctgcaacacc aaatcaatga agttcaaggc aaacttgatg aagctaacag gacgctcaac 3060

gacttcgatg ctgccaagaa gaagttgtct attgagaact ctgacctcct cagacagttg 3120

gaggaagctg agagccaagt ttctcaactt agcaagatca agatctccct caccactcaa 3180

ctcgaggaca ctaagcgtct cgccgatgag gaagctaggg aacgcgcaac ccttcttggc 3240

aagttccgca acttggaaca cgaccttgac aacctgaggg aacaggtgga ggaagaagcc 3300

gaagctaagg ctgatatcca acgtcaactc agcaaggcca acgctgaagc tcagttgtgg 3360

cgcagcaagt acgaaagcga gggtgttgcc cgcgctgagg agcttgagga ggccaagagg 3420

aaactccagg cccgtttggc tgaggctgag gagaccattg agtccctcaa ccagaaggtt 3480

atcgcccttg agaagacgaa gcagcgcctt gccactgaag tcgaggatct gcagctcgag 3540

gtcgaccgtg ccaacgccat tgccaatgcc gctgaaaaga aggctaaggc tattgacaag 3600

atcattggtg aatggaaact caaggttgat gaccttgctg ctgagcttga tgctagtcaa 3660

aaggaatgca gaaactactc cactgagctc ttcaggctca agggagctta tgaagaagga 3720

caggaacaac ttgaagctgt ccgcagggag aacaagaacc ttgctgatga agtcaaggac 3780

ttgctcgacc agatcggtga gggtggccgc aacatccacg aaattgagaa gcagcgcaag 3840

aggctcgaag ttgagaagga cgaacttcag gccgctcttg aggaggctga agccgctctt 3900

gaacaggagg agaacaaagt actcagggct caacttgagc tcagccaggt gcgtcaagaa 3960

attgaccgcc gcatccagga gaaggaagag gagttcgaga acaccaggaa gaaccaccaa 4020

cgggcactcg actccatgca agccagcttg gaggctgaag ccaagggtaa ggctgaggct 4080

cttcgcatga agaagaagct tgaagccgac atcaacgaac tcgaaatcgc tctcgaccac 4140

gccaacaagg ctaacgccga agcccagaag accatcaaga aataccaaca acaactcaag 4200

gacgtacaga ccgctcttga ggaagaacaa agggcacgcg acgatgctcg tgaacaactc 4260

ggaatcgccg aaaggagggc caacgctctc ggaaacgagc tcgaggagtc gcgcactctc 4320

ctcgaacagg ccgacagggg caggcgccaa gccgaacaag aacttggaga tgcccacgaa 4380

cagatcaacg agttggctgc ccaagctacc agcgcctcag ccgccaaacg caagcttgag 4440

ggagagttgc agacacttca tgctgacctc gacgaacttc tcaacgaagc caagaactcc 4500

gaagagaagg ccaagaaggc aatggttgat gccgctaggt tagctgatga actcagggca 4560

gaacaggacc acgctcagac ccaggagaag ctccgcaagg ctctggaaac gcaaatcaag 4620

gaactccaag tcaggttgga cgaagccgaa aacaacgccc tcaagggagg caagaaggcc 4680

atcgccaagc tggaacaacg tgtcagggaa ctcgaaaacg aactggacgg cgagcagagg 4740

agacacgccg acgcacaaaa gaacctccgt aaatccgagc gtagaattaa ggagctcagt 4800

ttccagtccg acgaggaccg taagaaccac gaacgcatgc aagacctcgt agacaaactg 4860

caacagaaga tcaagactta caagaggcag attgaagaag ccgaagaaat cgcggccctt 4920

aacctcgcca aattccgcaa agcacaacaa gaactcgaag aagctgaaga acgcgctgat 4980

ctcgctgaac aggctgtttc caaattcaga acaaagggtg gacgcgcagg atctgctgcc 5040

agagcgatga gccctgtcgg ccagaagtga aggaacgaat aagcggacgt ataagctatc 5100

aatacctcgc acacaaacct gccaggcctc aatttgacgg caatgccttc ccaccacgat 5160

tcgatctaca tcccgacgac ttttaagatc tttgatagca acgcaaaaca tcaaatgaaa 5220

atcttttaaa ttttatgtat ttattttgac ctattttatt aagttattgt taatacaaac 5280

ataattccat gagctagata tctagccaac gaaccatcac aatcacgatt attcgaactg 5340

tacgatagaa gcattatttg tacagctgga ccatttacaa aatatttttg cttcgaataa 5400

taaagagttt atatcgcgaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaa 5446

<210> 146

<211> 964

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 146

tcctcctctg gtgcccgact cttcaaatac ccaaatccag tcatgtcttc ccgtaaaacc 60

gctggccgca gggcgaccac caagaagcgc gctcagcgtg cgacgtcaaa cgtattcgcc 120

atgttcgatc aggctcagat tcaagaattc aaggaggcat tcaacatgat cgaccagaac 180

agggacggct tcgtggataa ggaagacctc catgacatgc tcgcttccct aggtaagaac 240

ccctcagacg agtatctcga ggggatgatg aacgaggcgc ctggtcccat caacttcaca 300

atgttcctca ccctcttcgg tgagcggctt cagggaactg atccggagga ggttatcaag 360

aacgcatttg ggtgttttga cgaagacaac aacggattca tcaacgagga aagactgcgc 420

gagctgctca cctccatggg ggacaggttc actgatgaag acgtggacga aatgtaccga 480

gaggccccca tcaagaacgg catgttcgac tacatcgaat tcactcggat cctcaagcac 540

ggagccaaag acaaagacga gcagtgacct atcaaatcct cgtcaacctc ccttcagtaa 600

tttgaaacca atccatcaaa ttttgtttaa aactcttact taaaatccga tcatctacgt 660

cactttgcca ccaatcggta ttattttttg agccgttcct acataaatcg aattaatttt 720

atacctacga atcatattgt tggaaatttc tctcttgtac ttatactttc tgttatttcc 780

taatttttct aactaaccaa gttagtcgtt agtttttatt cattccttta taaattatta 840

gttatccatt tttaatcatc ttgaagttat ttgtttttcg agtggtagaa tatttataca 900

ttttccaata tataatggtt tattcattct taaaaaacga aaaaaaagaa aaaaaaaaaa 960

aaaa 964

<210> 147

<211> 5872

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 147

gatcttacct gcctgaacga ggcgtccgtt cttcacaaca tcaaggacag atattactcc 60

ggattgattt atacgtattc gggactcttc tgcgtggtgg tcaaccctta caagaaactg 120

ccaatctaca cagagagaat catggagaaa tacaaaggcg tcaaaagaca cgacctccct 180

ccacacgtat tcgccatcac agacacagct taccgttcta tgctgcaaga tagggaagat 240

caatcgatac tctgcaccgg cgaatcgggt gcggggaaaa ccgaaaacac gaaaaaagta 300

atccagtact tggcctacgt tgcagcctcg aaacccaaat cttccgcatc cccacatacg 360

gcccagagtc aagctctgat cattggagaa ctcgaacaac agctgcttca agctaaccca 420

attttggaag cattcggaaa cgccaagact gttaaaaacg ataattcttc tcgattcggt 480

aaattcattc gtatcaattt cgacgcatca ggctacatcg caggagccaa catagaaacg 540

tatcttctag agaaatctag ggccatcaga caagcgaaag atgagcgaac gttccacatc 600

ttttaccaac ttctggccgg agcatctgca gaacaaagaa aggagttcat cctcgaagat 660

ccgaaaaact accctttcct cagcagcggg atggtgtctg tgcctggagt tgacgatggt 720

gttgatttcc aagcaactat cgcctccatg tccatcatgg gcatgaccaa cgacgatctt 780

tccgctctct tccgcatcgt cagtgccgtc atgctgttcg gcagcatgca gttcaagcag 840

gagcgaaaca gcgaccaggc gacgctccca gacaacactg tagcgcaaaa aatcgcccac 900

ctccttggtc tctcaatcac agagatgacc aaagcgttcc tcaggcctag aatcaaagta 960

ggacgggatt tcgtcaccaa ggctcaaact aaggaacaag ttgagttcgc agtggaagcc 1020

atttcgaaag cctgctacga acgtatgttc cgatggctcg tcaacagaat caaccgctcc 1080

ctggatcgta ccaaaaggca gggagcatct ttcattggta ttcttgatat ggctggtttc 1140

gaaatctttg agatcaactc cttcgagcag ctttgtatca attacaccaa tgagaaactt 1200

caacaactct tcaaccacac catgttcatt ttggagcaag aggagtacca gagagaaggt 1260

attgaatgga agttcatcga cttcggactt gatcttcagc cgaccattga tctcattgat 1320

aagccaatgg gagtcatggc tctcctggat gaagaatgtt ggttccccaa agccactgac 1380

aagaccttcg ttgagaagct ggtcggtgct cacagcgttc accccaaatt catcaaaact 1440

gatttccgtg gagtcgccga ctttgctgtc gtccattatg ccggaaaagt cgattattcg 1500

gcggcgcagt ggctgatgaa gaacatggac cctctgaacg aaaacgtcgt gcagctcctc 1560

cagaactcgc aagatccgtt cgtcatccac atctggaagg acgcagagat cgtcggcatg 1620

gctcaccaag ctctcagcga cactcagttt ggagctcgta ccaggaaggg tatgttccga 1680

accgtgtctc aactctacaa agaccagctg tccaaactca tgatcacact tcgcaacacg 1740

aaccccaact tcgtccgttg catcctcccc aaccacgaga agagagctgg caagatcgat 1800

gctcctttgg tgctggatca gctcagatgc aacggtgtgt tggaaggcat cagaatttgc 1860

agacaaggtt tcccgaatag aatcccattc caggaattcc ggcaaagata cgagctctta 1920

actcccaatg tcatccccaa agggttcatg gacggtaaaa aggcttgcga gaagatgatc 1980

aacgctctcg aactggaccc taatctctac agagttggtc agtccaagat attcttcaga 2040

gctggagtct tagctcatct agaagaagag cgcgactata agattactga tctgatagcc 2100

aatttccggg ctttctgtag gggatatctt gcccgaagga actaccaaaa gcgtcttcag 2160

cagctcaacg ccattcgtat tatccagcga aattgctcag cttacttgaa gttgaggaac 2220

tggcaatggt ggcggctgta caccaaggtc aaacctctgc ttgaagtgac gaaacaagaa 2280

gagaagctga cgcaaaagga agacgaactg aagcaggtcc gcgagaaact ggacaaccag 2340

gtgaggtcca aggaagagta tgaaaagagg cttcaggacg ctttggagga gaaagctgct 2400

ctggcagagc aacttcaggc agaagtagag ctgtgtgcgg aagccgaaga aatgagagcc 2460

aggctcgctg tgaggaagca agaactagag gaaattctcc acgatctaga agccagaata 2520

gaggaagaag agcaacgaaa cacggtcctc atcaacgaaa agaagaagtt gaccctcaac 2580

atcgccgacc tcgaagaaca actggaagag gaagaaggag ctcgacagaa actccaactc 2640

gaaaaagtcc agatcgaagc tcggctgaag aaaatggaag aggacctcgc tctggccgaa 2700

gacaccaaca ccaaagtcgt aaaggagaag aaagtgttgg aagagagggc tagtgacttg 2760

gcccagaccc tcgctgagga agaagaaaaa gctaaacacc tcgcgaagct caagaccaag 2820

cacgagacga cgatagcgga attggaagag aggttgctca aagacaatca gcagaggcag 2880

gaaatggata ggaacaagag gaagatcgaa tcagaggtga atgatttgaa agaacaaatt 2940

aacgagaaga aggtccaagt agaggagctt cagttgcaac tcgggaagag ggaagaggaa 3000

atcgctcaag ctctgatgag aattgacgag gaaggagcag gcaaagctca gactcaaaag 3060

gctctcaggg aattggagtc tcagctggct gagctacaag aggatctaga ggctgaaaag 3120

gccgctcgcg ccaaggccga aaagcagaag cgcgacctca acgaagaact cgagtccctc 3180

aagaatgaac ttcttgactc actggacacg acagcagctc aacaggaatt gaggaccaag 3240

agagaacacg aactggcaac gctcaagaaa acattagaag aggaaacgca cattcacgaa 3300

gtatctctca ccgaaatgag gcacaaacac actcaagaag tcgctgcact caacgaacag 3360

ttggagcaac tcaaaaaggc caaatctgca ctcgaaaaat cgaaagcaca acttgaaggg 3420

gaagctgctg agctcgccaa cgaactggaa acagcaggaa cgagcaaggg cgagagtgaa 3480

aggaaacgga agcaggccga atcgtctctg caggagctct cgtcgcgact cttggaaatg 3540

gagagaacca aagccgagct ccaagagagg gtccagaaac tgtctgcaga agccgactct 3600

gtcaatcagc agttggaagc agcggaactg aaagcatcag cagccctcaa ggcatctggt 3660

accttggaga ctcagctcca ggaggcgcaa gtgctcctgg aagaggaaac tcggcagaag 3720

ctgtcgttga ccaccaaact gaaaggcctc gaaagcgaaa gagatgctct caaagagcaa 3780

ctctacgaag aggacgaggg taggaagaac ctagaaaaac agatggcgat actcaatcaa 3840

caagtagctg aaagcaagaa gaagtctgaa gaagaaacgg aaaaaataac tgaactcgaa 3900

gaaagtcgca aaaaattgct caaagacata gaaattcttc aaaggcaagt cgaagaactt 3960

caagttacca acgacaaatt agagaaaggc aagaagaagc tgcagtcaga actggaagac 4020

ctcaccatcg acctggagtc tcagagaaca aaggtggtcg agctcgagaa gaaacaaaga 4080

aatttcgaca aagttttggc cgaagaaaaa gcgttgtcgc aacaaatcac gcacgagagg 4140

gatgcggctg aaagagaagc ccgtgaaaag gaaactagag tactgtcgct gacgcgagaa 4200

ctcgatgaat tcatggagaa aatcgaggaa ctggagagaa gcaaacggca actccaggct 4260

gaactagacg agctggtcaa caaccaaggc accaccgaca aaagcgtgca cgaattggaa 4320

agggcgaaac gagttctgga gtcacaactt gcagagcaga aagcacaaaa tgaagagctt 4380

gaagatgaac tccaaatgac ggaagacgcc aaattgaggc tcgaagtcaa catgcaagct 4440

ctgagagctc aattcgaaag agatctacag ggcaaagaag agtcgggaga agaaaagagg 4500

agaggattgc tgaaacagct gagggacatt gaggctgaac ttgaagacga gagaaaacaa 4560

aggaccgctg ctgttgcctc tagaaagaag attgaagcgg atttcaaaga tgtagaacag 4620

caactggaaa tgcacactaa ggtaaaggaa gatcttcaga agcaactgaa gaaatgccag 4680

gtccaactga aggacgcaat cagagacgcg gaagaggctc ggctcggtcg ggaagagctg 4740

caggctgccg ctaaagaggc cgaaaggaag tggaagggtt tggaaacgga gctcattcaa 4800

gtgcaagagg atttgatggc gagcgaaagg cagcggcggg cagcggaagc cgaaagggat 4860

gaagtcgttg aagaagccaa caagaatgtc aagagcttat cgaatcttct cgacgaaaag 4920

aagaggctcg aagcccaatg ctcaggcctg gaagaggaac tcgaagaaga acttagcaac 4980

aatgaggccc tccaagacaa agcgagaaaa gcacaactca gcgttgagca acttaatgca 5040

gaacttgctg ccgaacggag taatgtgcag aaacttgagg gaacgagatt gtcgatggaa 5100

aggcaaaaca aggaactgaa ggccaaactg aacgaactgg aaacgttaca acgcaacaag 5160

ttcaaggcca atgcgtctct ggaggctaag attaccaatc ttgaagagca actggaaaat 5220

gaagccaagg aaaagctact tctccagaaa ggcaacagga agctcgacaa gaaaatcaaa 5280

gacctcctcg ttcaattgga ggatgaaagg aggcatgccg accagtataa agaacaagtc 5340

gagaagatca acgtcagggt gaagacgcta aagcgaactt tggacgacgc cgaagaagaa 5400

atgagtaggg agaagaccca gaagaggaaa gcacttcgcg aattggaaga cctcagggag 5460

aactacgatt ccctactccg agagaacgat aacctcaaaa acaaactcag gcggggcggc 5520

ggtatttccg ggatctcgag caggctcgga ggctccaagc gaggttccat ccccggagag 5580

gattcccagg gtctcaacaa caccacagac gaatcagtcg atggtgacga tatctcgaat 5640

ccttaaacgc tacttggatt taccagccag catccaactt tccactgaag acgtctccca 5700

taaacgttga aagagacccg tcgaggaaga aaaaaaggct ctttaagaaa aactattctg 5760

cctttttcaa aactttgtac ttaaaagtac tttcgcttaa caatgaaaga agaataaaaa 5820

tgtaaagttt tcatttatac aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aa 5872

<210> 148

<211> 325

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 148

aagaagatcc tggaggagat cattgcggag gtcgacgctg atggctctgg acaacttgaa 60

tttgaggagt tcgtagcctt ggctgccggt ttcctgacag aagatgagac acaagatgct 120

gaggccatgc agcaagaact gagggaggcc ttcaggctct acgacaagga agggaacggt 180

tacattacca ctgacgtctt gagggaaatc ctgaaggaac tcgacgacaa aatcacctcc 240

caagaacttg acatgatgat tgctgaaatt gattctgacg gttccggaac tgttgacttc 300

gacgagttca tggagatgat gaccg 325

<210> 149

<211> 428

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 149

aattatcccc atcatgacca tcgcgttgaa cgctttcgac cgggatcact cgggttccat 60

cccgacggac atggtggccg acatcctcag actcatgggt caacccttca acaagaagat 120

tctcgatgaa ctcatcgaag aagttgacgc tgacaaatcg ggaaggctgg agtttgaaga 180

gttcatcacg ttggcagcca agttcattgt tgaggaagac gatgaagcca tgcagaaaga 240

gctgcgagaa gccttccgtc tctacgacaa agaaggtaat ggctacatcc cgacctcctg 300

cctcaaagaa atccttcatg aattggacga gcagctgacc aacgaggagc tggacatgat 360

catcgaggag atcgactctg acggatccgg aactgtcgac ttcgacgagt tcatggagat 420

gatgaccg 428

<210> 150

<211> 538

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 150

gcttctttta caaatcgcac cacgccgact taattcattc ccggagggtt taaattttat 60

cgaagcagca tggtgcggat gaatgtgctg agcgatgctc tgaaaagcat caacaatgct 120

gagaagaggg gcaaaaggca ggtgctcctg aggccttgtt ccaaagtcat cattaaattc 180

cttacagtga tgatgaagaa aggttatatc ggcgaattcg aaatagtaga tgatcacaga 240

tctggtaaaa tcgtcgtcaa cctcaacggc agattgaaca aatgtggagt tatatcgccc 300

agattcgacg tacccatcac acaaatcgaa aaatggacga acaacctcct gccttcccga 360

cagttcggtt atgtcgtact caccactagt ggagggatca tggatcacga agaagccagg 420

cgaaaacatc ttgggggtaa aatattaggg tttttctttt aataaaaaaa gacgagatgt 480

aaattaataa aactctttta cgtttcgcta aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaa 538

<210> 151

<211> 405

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 151

ccacgccgac ttaattcatt cccggagggt ttaaatttta tcgaagcagc atggtgcgga 60

tgaatgtgct gagcgatgct ctgaaaagca tcaacaatgc tgagaagagg ggcaaaaggc 120

aggtgctcct gaggccttgt tccaaagtca tcattaaatt ccttacagtg atgatgaaga 180

aaggttatat cggcgaattc gaaatagtag atgatcacag atctggtaaa atcgtcgtca 240

acctcaacgg cagattgaac aaatgtggag ttatatcgcc cagattcgac gtacccatca 300

cacaaatcga aaaatggacg aacaacctcc tgccttcccg acagttcggt tatgtcgtac 360

tcaccactag tggagggatc atggatcacg aagaagccag gcgaa 405

<210> 152

<211> 470

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 152

tgtcgatggc ggtcttaaca tcccccattc caccaagagg ttccctgggt acgacagtga 60

gtctaaggaa ttcaacgctg aggtccacag gaagcacatt ttcggcattc acgtcgctga 120

ctacatgcgt cagctggctg aagaggatga cgatgcttac aagaagcagt tctcgcagta 180

tgtcaagaac ggagtcactg ctgacagcat tgaaagtatc tacaagaagg ctcacgaagc 240

aatccgagct gatccaactc gcaaaccact tgagaagaag gaagtcaaga agaagaggtg 300

gaaccgcgcc aagctttcct tgtctgaaag gaagaacacc atcaaccaaa agaaggcaac 360

ttatctcaag aaagtggaag ctggagaaat cgaataagtt tttatattcc tgacattacc 420

cattaaaggt ttcgttttaa cctaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa 470

<210> 153

<211> 387

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 153

tgtcgatggc ggtcttaaca tcccccattc caccaagagg ttccctgggt acgacagtga 60

gtctaaggaa ttcaacgctg aggtccacag gaagcacatt ttcggcattc acgtcgctga 120

ctacatgcgt cagctggctg aagaggatga cgatgcttac aagaagcagt tctcgcagta 180

tgtcaagaac ggagtcactg ctgacagcat tgaaagtatc tacaagaagg ctcacgaagc 240

aatccgagct gatccaactc gcaaaccact tgagaagaag gaagtcaaga agaagaggtg 300

gaaccgcgcc aagctttcct tgtctgaaag gaagaacacc atcaaccaaa agaaggcaac 360

ttatctcaag aaagtggaag ctggaga 387

<210> 154

<211> 745

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 154

gtcctacgtg tttccggaaa aacgtgcatt tcgcgtaccc ctcgtggtga tccgttttca 60

tagaaataat ccaaaatggc tcccaagggg aataatatga ttcccaatgg ccatttccac 120

aaggattggc agaggttcat caaaacctgg ttcaaccagc ctgcccgcaa gttgaggagg 180

agaaacaaga ggttggagaa ggcccaacgg ctcgcgcccc gccccgcggg acctcttcgc 240

cccgctgtca gatgtcccac cgtcaggtac cacaccaagc tacgacctgg acgtggcttc 300

accttggaag aaatcaagag agccggtctg tgcaaaggat tcgcgatgtc catcggaatc 360

gctgtcgacc ccagaagaag gaataaatcc atcgagtccc tccaactcaa tgtacagaga 420

ctcaaggagt acagggctaa gcttatcctc ttcccacaca agaatgccaa gaaactgaag 480

aagggagaag ctactgagga agagaggaag gtggccaccc aacagcccct gccagttatg 540

cccatcaagc aaccagtcat caaattcaag gctcgcgtca ttacagacga tgagaagaaa 600

tactctgcct tcaccgccct ccgcaaggga cgagcagacc aaaggttggt cggtatccgt 660

gctaagcgcg caaaggaagc cgcagaaaac gccgaagacc cctctaaagc tcctaaaaaa 720

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaa 745

<210> 155

<211> 527

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 155

aacgtgcatt tcgcgtaccc ctcgtggtga tccgttttca tagaaataat ccaaaatggc 60

tcccaagggg aataatatga ttcccaatgg ccatttccac aaggattggc agaggttcat 120

caaaacctgg ttcaaccagc ctgcccgcaa gttgaggagg agaaacaaga ggttggagaa 180

ggcccaacgg ctcgcgcccc gccccgcggg acctcttcgc cccgctgtca gatgtcccac 240

cgtcaggtac cacaccaagc tacgacctgg acgtggcttc accttggaag aaatcaagag 300

agccggtctg tgcaaaggat tcgcgatgtc catcggaatc gctgtcgacc ccagaagaag 360

gaataaatcc atcgagtccc tccaactcaa tgtacagaga ctcaaggagt acagggctaa 420

gcttatcctc ttcccacaca agaatgccaa gaaactgaag aagggagaag ctactgagga 480

agagaggaag gtggccaccc aacagcccct gccagttatg cccatca 527

<210> 156

<211> 576

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 156

gccttattga acgtggtcga cagaaaactc ggtttctgag ctcatctcaa catggatatc 60

gaagaaccgg ccgcggcccc tacggagccc tcggacgtca acaccgccct tcaagaggtc 120

ctcaaggccg cccttcaaca cggagtcgtc gtccacggta tccacgagtc cgccaaggcc 180

ctcgacaaga ggcaagcttt gttgtgcgtc ctcgctgaga actgcgacga gccgatgtac 240

aagaagctgg tacaagccct ctgctcagag caccacatcc ccctcgtcaa agtagattcc 300

aataagaaac tcggcgaatg gacgggcctt tgcaagatcg acaagaccgg caaatctagg 360

aaaatcgtcg gctgctcttg tgtcgtcatc aaggactggg gtgaggacac gccccacttg 420

gacctcctca aggactacat cagggacgtc ttctaagaag tttctcctca atttcctttt 480

tataatgatt taacaactga gaattaataa taaaaatgtt aaattaaaca aaaaaatctc 540

aaaactgtaa aaaaaaagaa gaaaaaaaaa aaaaaa 576

<210> 157

<211> 442

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 157

ccttattgaa cgtggtcgac agaaaactcg gtttctgagc tcatctcaac atggatatcg 60

aagaaccggc cgcggcccct acggagccct cggacgtcaa caccgccctt caagaggtcc 120

tcaaggccgc ccttcaacac ggagtcgtcg tccacggtat ccacgagtcc gccaaggccc 180

tcgacaagag gcaagctttg ttgtgcgtcc tcgctgagaa ctgcgacgag ccgatgtaca 240

agaagctggt acaagccctc tgctcagagc accacatccc cctcgtcaaa gtagattcca 300

ataagaaact cggcgaatgg acgggccttt gcaagatcga caagaccggc aaatctagga 360

aaatcgtcgg ctgctcttgt gtcgtcatca aggactgggg tgaggacacg ccccacttgg 420

acctcctcaa ggactacatc ag 442

<210> 158

<211> 601

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 158

ctttcatttg tatagtacgg acgggtagtt tagttgtgtc ggttcatcgt aattcatcgg 60

ctgaatcatg aagatgaata aattggtcac ttcctcgagg aggaagaaca ggaagaggca 120

cttcaccgcc ccatcccaca tccgtagaaa gttgatgtcg gcaccactgt ccaaagaact 180

taggcagaag tacaacgtcc gaactatgcc tgtgaggaag gacgatgaag tccaggttgt 240

acgaggacac tacaaaggcc aacaggttgg caaagtcctc caggtgtaca ggaagaagtt 300

cattatttac attgagcgga tccaaagaga aaaagccaat ggtgccagcg tttacgttgg 360

cattcacccc tcaaagtgtg tgatcgtcaa attgaaggtc gacaaggata ggaaagaaat 420

ccttgacaga agatccaaag gacgtgactt ggcacttggc aaggacaagg gcaaatacac 480

cgaagacagt acgactgcta tggacacgtc ttaaattaat ttggtttatt tggttcctta 540

actccgttct tctttaataa tgactttttt aaagcaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa 600

a 601

<210> 159

<211> 448

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 159

gtacggacgg gtagtttagt tgtgtcggtt catcgtaatt catcggctga atcatgaaga 60

tgaataaatt ggtcacttcc tcgaggagga agaacaggaa gaggcacttc accgccccat 120

cccacatccg tagaaagttg atgtcggcac cactgtccaa agaacttagg cagaagtaca 180

acgtccgaac tatgcctgtg aggaaggacg atgaagtcca ggttgtacga ggacactaca 240

aaggccaaca ggttggcaaa gtcctccagg tgtacaggaa gaagttcatt atttacattg 300

agcggatcca aagagaaaaa gccaatggtg ccagcgttta cgttggcatt cacccctcaa 360

agtgtgtgat cgtcaaattg aaggtcgaca aggataggaa agaaatcctt gacagaagat 420

ccaaaggacg tgacttggca cttggcaa 448

<210> 160

<211> 456

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 160

ggctgttgtc ggctggtcat atcccgtttt ccacgtggtg tgtcgagtta tttttcttgt 60

aaattcgcat ttaaaatcgg atttataacc gaaattcatt atggaaaagc cagtagtttt 120

ggcccgtgtc atcaaaatcc tcggacgtac cggctcacag ggccaatgta cgcaagtgaa 180

ggtggagttc attggtgagc agaaccgaca gatcatcagg aacgtgaaag gaccagttag 240

agaaggcgac atcctcacac tcctagagtc tgaaagagaa gcgagaagac tgaggtagtg 300

ggaggtggcg atgcgttacg ttattttact tcattcaaca tttgaaaaaa accatcttcg 360

tgacaaaaaa catcttcacg caactatttg tattacctat gtttcgtaaa taaagtaacc 420

tcgttactta aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaa 456

<210> 161

<211> 321

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 161

ctgttgtcgg ctggtcatat cccgttttcc acgtggtgtg tcgagttatt tttcttgtaa 60

attcgcattt aaaatcggat ttataaccga aattcattat ggaaaagcca gtagttttgg 120

cccgtgtcat caaaatcctc ggacgtaccg gctcacaggg ccaatgtacg caagtgaagg 180

tggagttcat tggtgagcag aaccgacaga tcatcaggaa cgtgaaagga ccagttagag 240

aaggcgacat cctcacactc ctagagtctg aaagagaagc gagaagactg aggtagtggg 300

aggtggcgat gcgttacgtt a 321

<210> 162

<211> 865

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 162

aatcccggat tcatcgtttt attgaattgt ttttcgaagt ttctggtatt atcgttaaat 60

tagtctgtta agccctcatc cgtgatttgg caagttgttg attgttctat tttccttttt 120

ccagaaaatg gggagacgtc cagcgaggtg ttatcggtac tgtaaaaaca agccataccc 180

ccaaatcccg gttctgtcgt ggtgtccccg accccaagat caggatcttc gatctgggaa 240

agaagaaggc ccgcgtggaa gacttccccc tctgcgttca cctcgtctcc gatgagtacg 300

agcagctgtc ctccgaagcc ctcgaggcag gacgtatctg ctgcaacaag tacctcgtca 360

agaactgcgg caaggaccag ttccacatca ggatgaggct ccaccccttc cacgtcatta 420

ggatcaacaa aatgttatcg tgcgctggag ctgataggct ccagacaggg atgagaggag 480

cgttcggaaa gccgcaagga accgtcgctc gcgtccgcat cggtcagccc atcatgagcg 540

tccgctcgtc cgacaggtac aaggccgccg tcatcaaggc tctgaggaga gccaaattca 600

agttccctgg tcgccagaag atctacgttt ccaagaaatg gggcttcacc aagttcgacc 660

gcgaagagta cgagggcctt aggaacgaca acaaactagc gaatgacggc tgcaacgtca 720

aattgaggcc ggatcacgga cctttgcagg cgtggaggaa ggctcagctt gacatcgctg 780

ctggcctcta aattactttc caatggtttt ataaatcaac aaataaaact cgttttatgt 840

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaa 865

<210> 163

<211> 792

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 163

ggttcctttc tcagattttg actttgccgt gttgtctctc ccaattttcc aaaatgggga 60

gacgtccagc gaggtgttat cggtactgta aaaacaagcc ataccccaaa tcccggttct 120

gtcgtggtgt ccccgacccc aagatcagga tcttcgatct gggaaagaag aaggcccgcg 180

tggaagactt ccccctctgc gttcacctcg tctccgatga gtacgagcag ctgtcctccg 240

aagccctcga ggcaggacgt atctgctgca acaagtacct cgtcaagaac tgcggcaagg 300

accagttcca catcaggatg aggctccacc ccttccacgt cattaggatc aacaaaatgt 360

tatcgtgcgc tggagctgat aggctccaga cagggatgag aggagcattc ggaaagccgc 420

aaggaaccgt cgctcgcgtc cgcatcggtc agcccatcat gagcgtccgc tcgtccgaca 480

ggtacaaggc cgccgtcatc gaggctctga ggagagccaa attcaagttc cctggtcgcc 540

agaagatcta cgtttccaag aaatggggct tcaccaagtt cgaccgcgaa gagtacgagg 600

gccttaggaa cgacaacaaa ctagcgaatg gcggctgcaa cgtcaaattg aggccggatc 660

acggaccttt gcaggcgtgg aggaaggctc agcttgacat cgctgctggc ctctaaatta 720

ctttccaatg gttttataaa tcaacaaata aaactcgttt tatctaaaaa aaaaaaaaaa 780

aaaaaaaaaa aa 792

<210> 164

<211> 645

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 164

agccctcatc cgtgatttgg caagttgttg attgttctat tttccttttt ccagaaaatg 60

gggagacgtc cagcgaggtg ttatcggtac tgtaaaaaca agccataccc ccaaatcccg 120

gttctgtcgt ggtgtccccg accccaagat caggatcttc gatctgggaa agaagaaggc 180

ccgcgtggaa gacttccccc tctgcgttca cctcgtctcc gatgagtacg agcagctgtc 240

ctccgaagcc ctcgaggcag gacgtatctg ctgcaacaag tacctcgtca agaactgcgg 300

caaggaccag ttccacatca ggatgaggct ccaccccttc cacgtcatta ggatcaacaa 360

aatgttatcg tgcgctggag ctgataggct ccagacaggg atgagaggag cgttcggaaa 420

gccgcaagga accgtcgctc gcgtccgcat cggtcagccc atcatgagcg tccgctcgtc 480

cgacaggtac aaggccgccg tcatcaaggc tctgaggaga gccaaattca agttccctgg 540

tcgccagaag atctacgttt ccaagaaatg gggcttcacc aagttcgacc gcgaagagta 600

cgagggcctt aggaacgaca acaaactagc gaatgacggc tgcaa 645

<210> 165

<211> 619

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 165

gctttaccga ttccgttctt gtttagtcca cgtttctctg ctcattcgtg cagattttaa 60

aacatgacca actccaaagg ttatcgtcgc ggaacgaggg atctcttctc gaggcccttc 120

cgtcaccatg gtgtcatccc actctcaacg tacatgaaag tataccgagt aggagacatc 180

gtatctatca aaggtaatgg agcagtgcaa aaaggtatgc cccacaaagt ttaccacggc 240

aagaccggac gagtctacaa tgttacacct cgcgcccttg gtgttattgt caacaagagg 300

gttcgtggaa aaatccttcc caagaggatc aacatcagga ttgaacacgt caaccacagt 360

aaatgcagag aagatttctt gaagcgagtg cgagaaaatg aaaggctccg caaattcgcc 420

aaagaaactg gcaccagggt tgaactcaaa agacagcctg ctcagccacg ccctgcacac 480

tttgtacaag ctaaagaagt cccagagctg ctggccccca taccttacga gttcatcgct 540

taaaaaattt tcaattccat cttaacttta tatatttgaa taaaattgtg ttctcaaaaa 600

aaaaaaaaaa aaaaaaaaa 619

<210> 166

<211> 461

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 166

acgtttctct gctcattcgt gcagatttta aaacatgacc aactccaaag gttatcgtcg 60

cggaacgagg gatctcttct cgaggccctt ccgtcaccat ggtgtcatcc cactctcaac 120

gtacatgaaa gtataccgag taggagacat cgtatctatc aaaggtaatg gagcagtgca 180

aaaaggtatg ccccacaaag tttaccacgg caagaccgga cgagtctaca atgttacacc 240

tcgcgccctt ggtgttattg tcaacaagag ggttcgtgga aaaatccttc ccaagaggat 300

caacatcagg attgaacacg tcaaccacag taaatgcaga gaagatttct tgaagcgagt 360

gcgagaaaat gaaaggctcc gcaaattcgc caaagaaact ggcaccaggg ttgaactcaa 420

aagacagcct gctcagccac gccctgcaca ctttgtacaa g 461

<210> 167

<211> 481

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 167

caacgtacat gaaagtatac cgagtaggag acatcgtatc tatcaaaggt aatggagcag 60

tgcaaaaagg tatgccccac aaagtttacc acggcaagac cggacgagtc tataatgtta 120

cacctcgcgc ccttggtgtt attgtcaaca agagggttcg tggaaaaatc cttcccaaga 180

ggatcaacat caggattgaa cacgtcaacc acagtaaatg cagagaagat ttcttgaagc 240

gagtgcgaga aaatgagagg ctccgcaaat tcgccaaaga aactggcacc agggttgaac 300

tcaaaagaca gcctgctcag ccacgccctg cacactttgt acaagctaaa gaagtcccag 360

agctgctggc ccccatacct tacgagttca tcgcttaaac aattttcaat tccatcttaa 420

ctttatatat ttgaataaaa ttgtgttccc taaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa 480

a 481

<210> 168

<211> 747

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 168

gcataaatat atagggcgat tgatttagcg gccgcgaatt cgcccttaag cagtggtatc 60

aacgcagagg gggggtcttc tctcccggtt ttcttcttgc ccgaatcgtc catcctgatg 120

ttggggtcac tgtcaccacg accatacccc aatttggggt atggcttggt tgtcccctac 180

ccataaatcc tgattggaca tctccccatt atgaaagact gcgagaaaca cccctgcccc 240

cggctttaaa cccacggcta aggggggatt cgcgggcggc aaatttcatt cggcccatag 300

tgagtcgtat tacaattcac tgggcgtcct ttttacacct tcggaccggg aaaaacctgg 360

cggttaccca aaatccgtta tttgccacat ccccctttac tccactgggt tatataacaa 420

agaggcccct tccaatgtcc tttcccaaaa gtgcgcagcc ctatactaat ggcctttaaa 480

ggaaccccta ttaaaaaaaa aacccttaac cacaggttgg tgatgtaacc aaggaaaata 540

atgaacacac cgggccaaag aaggtgatac ccctggtctt ggcgaccgcc tgtcaaatct 600

tcctcccgga acgaaacccg tagtggcatc gaggaataac cttgcgcatc atagactcca 660

aatggccact gtggccgctc tcgattcatg gaagaaatga gatgacccct accccgcgca 720

aaaggattca gaaccaatac cagaatc 747

<210> 169

<211> 1052

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<220>

<221> иной_признак

<222> (662)..(665)

<223> n представляет собой a, c, g или t

<400> 169

ggttttcttc ttgcccgaat cgtccatcct gatgttgggg tcactgtcac cacgaccata 60

ccccaatttg gggtatggct tggttgtccc ctacccataa atcctgattg gacatctccc 120

cattatgaaa gactgcgaga aacacccctg cccccggctt taaacccacg gctaaggggg 180

gattcgcggg cggcaaattt cattcggccc atagtgagtc gtattacaat tcactgggcg 240

tcctttttac accttcggac cgggaaaaac ctggcggtta cccaaaatcc gttatttgcc 300

acatccccct ttactccact gggttatata acaaagaggc cccttccaat gtcctttccc 360

aaaagtgcgc agccctatac taatggcctt taaaggaacc cctattaaaa aaaaaaccct 420

taaccacagg ttggtgatgt aaccaaggaa aataatgaac acaccgggcc aaagaaggtg 480

atacccctgg tcttggcgac cgcctgtcaa atcttcctcc cggaacgaaa cccgtagtgg 540

catcgaggaa taaccttgcg catcatagac tccaaatggc cactgtggcc gctctcgatt 600

catggaagaa atgagatgac ccctaccccg cgcaaaagga ttcagaacca ataccagaat 660

cnnnntagca aaacggctat ttcccggttc tttgtcggat tcttttgcca gggccatgcc 720

ttttcccgga atggaaggcg ggctgtttga gaaacgcatt aaatgggatt agtccattca 780

taggccaccc aaggaaacca ctttaatttc gggttggtag gttgagagaa atggtgaggg 840

gtaacaattt tacaccggga accgtttatg cccagaatta ccccagcttc gaattaaccc 900

cccctaaagg ggatagttcc gccgggttaa aagaaattcg ccttaaacca gtgttttaaa 960

gcaggagaca gaagtgtttc tcgcaagctt tcaaaatggg gagatgtcca atcaggattt 1020

atgggtaggg tacaaccaag ccgaacccca aa 1052

<210> 170

<211> 555

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 170

tagcaaaacg gctatttccc ggttctttgt cggattcttt tgccagggcc atgccttttc 60

ccggaatgga aggcgggctg tttgagaaac gcattaaatg ggattagtcc attcataggc 120

cacccaagga aaccacttta atttcgggtt ggtaggttga gagaaatggt gaggggtaac 180

aattttacac cgggaaccgt ttatgcccag aattacccca gcttcgaatt aaccccccct 240

aaaggggata gttccgccgg gttaaaagaa attcgcctta aaccagtgtt ttaaagcagg 300

agacagaagt gtttctcgca agctttcaaa atggggagat gtccaatcag gatttatggg 360

tagggtacaa ccaagccgaa ccccaaatcc ctgttctgtc gtggtgacag tgaccccaag 420

atctggatgt tcgttttggg aaagaagaaa accgggaggg accacttcct cctctgcgtt 480

gataccactg cttaagggcg aattcgttta aacctgcagg actagtccct tagtgagggt 540

aatctagcag cccac 555

<210> 171

<211> 1052

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<220>

<221> иной_признак

<222> (662)..(665)

<223> n представляет собой a, c, g или t

<400> 171

ggttttcttc ttgcccgaat cgtccatcct gatgttgggg tcactgtcac cacgaccata 60

ccccaatttg gggtatggct tggttgtccc ctacccataa atcctgattg gacatctccc 120

cattatgaaa gactgcgaga aacacccctg cccccggctt taaacccacg gctaaggggg 180

gattcgcggg cggcaaattt cattcggccc atagtgagtc gtattacaat tcactgggcg 240

tcctttttac accttcggac cgggaaaaac ctggcggtta cccaaaatcc gttatttgcc 300

acatccccct ttactccact gggttatata acaaagaggc cccttccaat gtcctttccc 360

aaaagtgcgc agccctatac taatggcctt taaaggaacc cctattaaaa aaaaaaccct 420

taaccacagg ttggtgatgt aaccaaggaa aataatgaac acaccgggcc aaagaaggtg 480

atacccctgg tcttggcgac cgcctgtcaa atcttcctcc cggaacgaaa cccgtagtgg 540

catcgaggaa taaccttgcg catcatagac tccaaatggc cactgtggcc gctctcgatt 600

catggaagaa atgagatgac ccctaccccg cgcaaaagga ttcagaacca ataccagaat 660

cnnnntagca aaacggctat ttcccggttc tttgtcggat tcttttgcca gggccatgcc 720

ttttcccgga atggaaggcg ggctgtttga gaaacgcatt aaatgggatt agtccattca 780

taggccaccc aaggaaacca ctttaatttc gggttggtag gttgagagaa atggtgaggg 840

gtaacaattt tacaccggga accgtttatg cccagaatta ccccagcttc gaattaaccc 900

cccctaaagg ggatagttcc gccgggttaa aagaaattcg ccttaaacca gtgttttaaa 960

gcaggagaca gaagtgtttc tcgcaagctt tcaaaatggg gagatgtcca atcaggattt 1020

atgggtaggg tacaaccaag ccgaacccca aa 1052

<210> 172

<211> 1175

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 172

ctcagcgaga tccctaagac aacgcctgcc acgtgggaga atatcggaca cgcctcccca 60

gagtgcggaa aggggaacgg cgttccgtat cggtcaaggt gcaagcttcg gaaccggagg 120

acgaccgttg caaggtgcaa ggggcaggta tcttgtattt tcattgtgcg tgtcgacatc 180

taccaaactg agacttggag ttcgatattt tgacgatggg gccgggggcc ggaggcaaaa 240

cgacaaacac aggcaccgtg accgtgttcc ggtccctggc ctgcgttgcc ttacgttcac 300

atcttgttct tgcgctttct ctggttttac gataacccta ctacgagttt agtagagccg 360

atcccgtagc cgaagccaaa gcccaagcgc tccgtatccg agaacgcgga agagcacgaa 420

ctccccaaac ccctccgccc ctcccccgcg cgtatccgaa acacaaatgc agcgggcagt 480

acaggttttg gaaggggacg cgggcagtga gcgcaatgca agtaaatgtg attagctcat 540

ggctacgcag ccctgctttt tcagtttcgg ttcggatcgt tagggggtgt gggattggga 600

gcggattcaa tctggacagg aaacagctat gaccaaggtc acgccaagct ctgaattaac 660

cctcaggaaa gggactagtc cggcaggttg aaacgaactc gcccctaagc agtggtatca 720

gagcacagtg gttttttttt tttgtttttt ttcgtagaaa aaaatatgta ttaagtcaat 780

taattaaatc attggttttc tggcttcaca acaggtggca cgtgctgtgc tcggagaaat 840

ttatgaacta tgttctgttc ttcaatgagg aaagatgaga tgatccattc tcagacacat 900

tcagacagag gacaccaccg taagccctat ccacagtctg tccacgtaag gggatcgtgt 960

ccccttccat gggcagagca gggagagggc cgtaagcttg ttcttgcgtc atcaacatgt 1020

gggggtaatg ttggtcatag cgatgttcgg tacacaagag aaccacctgg tgtaatcatt 1080

acagcacagc aatactctgt gttttgtaag ataacaaaaa aggtacttaa gacgctgaac 1140

cattttctac gatcggaaaa caaaaaaaaa gaaaa 1175

<210> 173

<211> 1023

<212> ДНК

<213> Lygus hesperus

<400> 173

tcagcgagat ccctaagaca acgcctgcca cgtgggagaa tatcggacac gcctccccag 60

agtgcggaaa ggggaacggc gttccgtatc ggtcaaggtg caagcttcgg aaccggagga 120

cgaccgttgc aaggtgcaag gggcaggtat cttgtatttt cattgtgcgt gtcgacatct 180

accaaactga gacttggagt tcgatatttt gacgatgggg ccgggggccg gaggcaaaac 240

gacaaacaca ggcaccgtga ccgtgttccg gtccctggcc tgcgttgcct tacgttcaca 300

tcttgttctt gcgctttctc tggttttacg ataaccctac tacgagttta gtagagccga 360

tcccgtagcc gaagccaaag cccaagcgct ccgtatccga gaacgcggaa gagcacgaac 420

tccccaaacc cctccgcccc tcccccgcgc gtatccgaaa cacaaatgca gcgggcagta 480

caggttttgg aaggggacgc gggcagtgag cgcaatgcaa gtaaatgtga ttagctcatg 540

gctacgcagc cctgcttttt cagtttcggt tcggatcgtt agggggtgtg ggattgggag 600

cggattcaat ctggacagga aacagctatg accaaggtca cgccaagctc tgaattaacc 660

ctcaggaaag ggactagtcc ggcaggttga aacgaactcg cccctaagca gtggtatcag 720

agcacagtgg tttttttttt ttgttttttt tcgtagaaaa aaatatgtat taagtcaatt 780

aattaaatca ttggttttct ggcttcacaa caggtggcac gtgctgtgct cggagaaatt 840

tatgaactat gttctgttct tcaatgagga aagatgagat gatccattct cagacacatt 900

cagacagagg acaccaccgt aagccctatc cacagtctgt ccacgtaagg ggatcgtgtc 960

cccttccatg ggcagagcag ggagagggcc gtaagcttgt tcttgcgtca tcaacatgtg 1020

ggg 1023

<210> 174

<211> 454

<212> ДНК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 174

ccaagaaggc caagaagggg tttatgaccc ctgagaggaa gaagaaactt aggttattgc 60

tgagaaagaa agcagcagaa gaactgaaaa aagaacaaga acgcaaagct gccgaaagga 120

gacgtattat tgaagagaga tgcggaaaac caaaactcat tgatgaggca aatgaagagc 180

aggtgaggaa ctattgcaag ttatatcacg gtagaatagc taaactggag gaccagaaat 240

ttgatttgga ataccttgtc aaaaagaaag acatggagat cgccgaattg aacagtcaag 300

tcaacgacct caggggtaaa ttcgtcaaac ccactctcaa gaaagtatcc aaatacgaga 360

acaaatttgc taaactccaa aagaaagcag cagaattcaa tttccgtaat caactgaaag 420

ttgtaaagaa gaaggagttc accctggagg agga 454

<210> 175

<211> 431

<212> ДНК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 175

ggtttatgac ccctgagagg aagaagaaac ttaggttatt gctgagaaag aaagcagcag 60

aagaactgaa aaaagaacaa gaacgcaaag ctgccgaaag gagacgtatt attgaagaga 120

gatgcggaaa accaaaactc attgatgagg caaatgaaga gcaggtgagg aactattgca 180

agttatatca cggtagaata gctaaactgg aggaccagaa atttgatttg gaataccttg 240

tcaaaaagaa agacatggag atcgccgaat tgaacagtca agtcaacgac ctcaggggta 300

aattcgtcaa acccactctc aagaaagtat ccaaatacga gaacaaattt gctaaactcc 360

aaaagaaagc agcagaattc aatttccgta atcaactgaa agttgtaaag aagaaggagt 420

tcaccctgga g 431

<210> 176

<211> 888

<212> ДНК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 176

agcagtggta tcaacgcaga gtacgcgggg acatcgagga gaagaggcaa cgcctcgaag 60

aggctgaaaa gaaacgccag gccatgatgc aggccctcaa ggaccagaac aagaacaagg 120

ggcccaactt caccatcacc aagagggatg cttcatctaa cctttctgcc gctcagttgg 180

aacgcaacaa gaccaaggag caactcgagg aagagaagaa aatttccctt tccatccgca 240

tcaagccctt ggtcgttgat ggtctgggcg tagataaact ccgtctgaaa gcacaagaac 300

tttgggaatg catcgtcaag ttggagactg aaaagtacga cttggaagag aggcagaaac 360

gtcaagacta cgatctcaaa gagctgaaag aaagacagaa acaacagctg agacacaaag 420

ccttgaagaa gggtctagac ccagaagccc taaccggcaa atacccgcct aaaatccaag 480

tagcctccaa atatgaacgt cgtgttgaca cgaggtcgta tggagacaaa aagaagctat 540

tcgaaggggg attagaagaa atcattaaag agaccaatga aaagagctgg aaagagaaat 600

ttggacagtt cgattccaga caaaaggcaa gacttcccaa gtggttcggt gaacgtcctg 660

gcaaaaaacc tggagatccc gaaactccag aaggcgagga ggagggcaaa caagtcattg 720

atgaggatga cgacctcaag gagcctgtaa tcgaagctga aattgaagaa gaggaggaag 780

aagaggaagt cgaggtcgat gaagaagaag aggatgacga agaagaagaa gaagaagagt 840

gaatgccaaa ggcagaagat aatcatgaaa tcaacattag ataacgtc 888

<210> 177

<211> 404

<212> ДНК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 177

caaggaccag aacaagaaca aggggcccaa cttcaccatc accaagaggg atgcttcatc 60

taacctttct gccgctcagt tggaacgcaa caagaccaag gagcaactcg aggaagagaa 120

gaaaatttcc ctttccatcc gcatcaagcc cttggtcgtt gatggtctgg gcgtagataa 180

actccgtctg aaagcacaag aactttggga atgcatcgtc aagttggaga ctgaaaagta 240

cgacttggaa gagaggcaga aacgtcaaga ctacgatctc aaagagctga aagaaagaca 300

gaaacaacag ctgagacaca aagccttgaa gaagggtcta gacccagaag ccctaaccgg 360

caaatacccg cctaaaatcc aagtagcctc caaatatgaa cgtc 404

<210> 178

<211> 1155

<212> ДНК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 178

gctcttcaga atgaacttga agaatctcgt acactgttgg aacaagctga ccgtgcccgt 60

cgccaagcag aacaagaatt gggagatgct cacgaacaat tgaatgatct tggtgcacag 120

aatggttctc tgtctgccgc caagaggaaa ctggaaactg aactccaaac tctccattcc 180

gatcttgatg aacttctcaa tgaagccaag aactctgagg agaaggctaa gaaagccatg 240

gtcgatgcag ctcgtcttgc agatgaactg agagcagaac aagatcatgc acaaactcag 300

gagaaacttc gtaaagcctt agaatcacaa atcaaggacc ttcaagttcg tctcgacgag 360

gctgaagcta acgccctcaa aggaggtaag aaagcaatcg ctaaacttga acaacgcgtc 420

agggaattgg agaatgagtt agatggtgaa caaagacgac acgccgatgc tcaaaagaat 480

ttgagaaagt ccgaacgtcg catcaaggag ctcagcctcc aagctgaaga agaccgtaag 540

aaccacgaaa aaatgcaaga cttagtcgac aaacttcaac agaaaatcaa gacccacaag 600

aggcaaatag aagaagctga agaaatagcg gctctcaatt tggccaaatt ccgtaaagca 660

caacaggaat tggaagaagc agaagagcgt gcagaccttg ctgaacaagc aattgtcaaa 720

ttccgtacca agggacgttc tggatcagca gctaggggag ccagccctgc gcctcagcga 780

cagcgtccca cattcggaat gggagattca cttggaggtg ccttccctcc aaggttcgat 840

cttgcacccg actttgaatg aatctgacat tgtgttataa gtgtaaggtg aacattctat 900

cgcagtgtaa atatcatccc aatgcgaatc aattctacat tcagtttaag tcattctatc 960

tctcaaaata ataatagtgt catccattct cactatcaaa tcaagacaag agatgatgat 1020

cagagaacac gtatcacatc tacagcaaac cctcagtcct cggcatctct gataatattt 1080

tcaattatcg agattgatga tatcgggtgt tgaatgctga tgaatagaag gcgccctatg 1140

gaaataagag agaag 1155

<210> 179

<211> 523

<212> ДНК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 179

gaatctcgta cactgttgga acaagctgac cgtgcccgtc gccaagcaga acaagaattg 60

ggagatgctc acgaacaatt gaatgatctt ggtgcacaga atggttctct gtctgccgcc 120

aagaggaaac tggaaactga actccaaact ctccattccg atcttgatga acttctcaat 180

gaagccaaga actctgagga gaaggctaag aaagccatgg tcgatgcagc tcgtcttgca 240

gatgaactga gagcagaaca agatcatgca caaactcagg agaaacttcg taaagcctta 300

gaatcacaaa tcaaggacct tcaagttcgt ctcgacgagg ctgaagctaa cgccctcaaa 360

ggaggtaaga aagcaatcgc taaacttgaa caacgcgtca gggaattgga gaatgagtta 420

gatggtgaac aaagacgaca cgccgatgct caaaagaatt tgagaaagtc cgaacgtcgc 480

atcaaggagc tcagcctcca agctgaagaa gaccgtaaga acc 523

<210> 180

<211> 865

<212> ДНК

<213> nilaparvata lugens

<400> 180

ctaggagtat ctcctacgta attcggtgct tgagccaact gcagctactc acttttttcc 60

aggttcagtg gtagggacgc aaacacagct aaaatggcgg acgatgaggc aaagaaggca 120

aagcaggcgg aaatcgaccg caagagagcc gaggtccgca agcggatgga ggaagcctcc 180

aaggccaaga aggccaagaa aggtttcatg acgcctgaca gaaagaagaa gctcaggttg 240

ttgctgagga aaaaggctgc tgaggaattg aagaaggaac aggagaggaa agccgcggaa 300

aggagaagga tcatcgagga gaggtgtggc aaggctgttg atctcgatga cggaagtgaa 360

gagaaagtca aggcaacttt aaaaacctat cacgacagaa ttggaaaatt ggaggatgaa 420

aaatttgacc tggaatatat tgtaaaaaag aaagacttcg agatcgctga cctcaacagc 480

caggtgaatg acctccgtgg taaatttgtc aagccaacct tgaaaaaagt ctccaaatat 540

gagaacaaat tcgccaagct ccagaagaaa gcagctgaat tcaatttcag aaatcagctc 600

aaagttgtca agaagaagga attcaccttg gaagaagaag acaaggagcc gaagaaatcg 660

gagaaagccg aatggcagaa gaaatgaact cacatcacct cttcataata ttgtcccaca 720

cttctacaac cttcatcaaa taacttttat tcgagtaaac ttactgttac taacaaaatt 780

acaaaaccaa actcttatca tcaacgtagg caatgtgctc aacttatttc ttaaacatat 840

tgtccagcta tttattgaaa ttaaa 865

<210> 181

<211> 269

<212> ДНК

<213> nilaparvata lugens

<400> 181

aagaagaagc tcaggttgtt gctgaggaaa aaggctgctg aggaattgaa gaaggaacag 60

gagaggaaag ccgcggaaag gagaaggatc atcgaggaga ggtgtggcaa ggctgttgat 120

ctcgatgacg gaagtgaaga gaaagtcaag gcaactttaa aaacctatca cgacagaatt 180

ggaaaattgg aggatgaaaa atttgacctg gaatatattg taaaaaagaa agacttcgag 240

atcgctgacc tcaacagcca ggtgaatga 269

<210> 182

<211> 553

<212> ДНК

<213> nilaparvata lugens

<400> 182

aatgatggcg gctctcaagg accagagcaa atcgaaagga cccaacttca ccgtaaacaa 60

gaaaacagac ttgaacatga cgtcagctca aatggaaagg aacaagacta aggagcagct 120

ggaggaggag aagaagatct ctctgtcgtt ccgcatcaag ccgttggcca tcgagaacat 180

gagcatcaac gcactgcgcg ccaaggccca ggaactgtgg gactgcatcg tcaagctcga 240

aactgagaag tacgatctgg aggaacgcca gaagaggcag gactacgatc tcaaagaatt 300

gaaagaaaga caaaagcaac agctgaggca taaagccctc aaaaaaggtc tagaccctga 360

ggctctcaca ggaaagtacc caccaaaaat ccaagttgcc tccaaatatg aaagacgtgt 420

agatacaagg tcatacgacg acaagaagaa gctcttcgaa ggtggctggg acacattaac 480

atcagaaacc aatgagaaaa tatggaagag cagaaacgat cagttttcaa atcgtagcaa 540

ggctaaactg cca 553

<210> 183

<211> 470

<212> ДНК

<213> nilaparvata lugens

<400> 183

atgatggcgg ctctcaagga ccagagcaaa tcgaaaggac ccaacttcac cgtaaacaag 60

aaaacagact tgaacatgac gtcagctcaa atggaaagga acaagactaa ggagcagctg 120

gaggaggaga agaagatctc tctgtcgttc cgcatcaagc cgttggccat cgagaacatg 180

agcatcaacg cactgcgcgc caaggcccag gaactgtggg actgcatcgt caagctcgaa 240

actgagaagt acgatctgga ggaacgccag aagaggcagg actacgatct caaagaattg 300

aaagaaagac aaaagcaaca gctgaggcat aaagccctca aaaaaggtct agaccctgag 360

gctctcacag gaaagtaccc accaaaaatc caagttgcct ccaaatatga aagacgtgta 420

gatacaaggt catacgacga caagaagaag ctcttcgaag gtggctggga 470

<210> 184

<211> 367

<212> ДНК

<213> nilaparvata lugens

<400> 184

tgccttcgac cgtgaaaggt ctggaagtat cccaacagac atggtcgccg acatcctcag 60

gctcatggga cagcctttca acaagaagat cctcgacgaa ctcattgagg aagttgatgc 120

tgacaaatct ggccgtcttg agtttgacga attcgtgact ctggccgcca aattcattgt 180

tgaggaagac gatgaggcaa tgcagaagga attgaaggaa gctttcagat tatacgacaa 240

ggaaggtaac ggctacatcc ccacatcatg tctgaaggaa atcttaaggg aacttgacga 300

tcagctgaca aacgaggaac tcaacatgat gattgatgag atcgactctg acggatcagg 360

aactgtt 367

<210> 185

<211> 204

<212> ДНК

<213> nilaparvata lugens

<400> 185

acatcctcag gctcatggga cagcctttca acaagaagat cctcgacgaa cttattgagg 60

aggttgatgc tgacaagtct ggccgtctag agtttgacga attcgtgact ctggccgcca 120

aattcattgt tgaggaagac gatgaggcaa tgcagaagga attgaaggaa gctttcagat 180

tatacgacaa ggaaggtaac ggct 204

<210> 186

<211> 221

<212> ДНК

<213> nilaparvata lugens

<400> 186

cgtaaaaact ctgaccggca agaccatcac cttggaagtg gagccttccg ataccattga 60

aaacgtgaag gccaagatcc aagacaagga gggaattcct cccgaccagc agagacttat 120

cttcgctgga aagcaactgg aggatggcag aaccctgtcc gactacaaca tccaaaaaga 180

atctacactc cacttggttc tcagacttcg tggtggaact a 221

<210> 187

<211> 221

<212> ДНК

<213> nilaparvata lugens

<400> 187

cgtaaaaact ctgaccggca agaccatcac cttggaagtg gagccttccg ataccattga 60

aaacgtgaag gccaagatcc aagacaagga gggaattcct cccgaccagc agagacttat 120

cttcgctgga aagcaactgg aggatggcag aaccctgtcc gactacaaca tccaaaaaga 180

atctacactc cacttggttc tcagacttcg tggtggaact a 221

<210> 188

<211> 759

<212> ДНК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 188

atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa 60

gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc 120

ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag 180

aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa 240

ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg 300

aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa 360

gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa 420

ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg 480

gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa 540

gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa 600

ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc 660

gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata 720

ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca 759

<210> 189

<211> 759

<212> ДНК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 189

atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa 60

gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc 120

ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag 180

aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa 240

ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg 300

aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa 360

gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa 420

ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg 480

gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa 540

gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa 600

ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc 660

gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata 720

ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca 759

<210> 190

<211> 759

<212> ДНК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 190

atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa 60

gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc 120

ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag 180

aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa 240

ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg 300

aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa 360

gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa 420

ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg 480

gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa 540

gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa 600

ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc 660

gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata 720

ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca 759

<210> 191

<211> 759

<212> ДНК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 191

atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa 60

gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc 120

ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag 180

aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa 240

ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg 300

aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa 360

gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa 420

ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg 480

gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa 540

gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa 600

ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc 660

gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata 720

ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca 759

<210> 192

<211> 759

<212> ДНК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 192

atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa 60

gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc 120

ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag 180

aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa 240

ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg 300

aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa 360

gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa 420

ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg 480

gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa 540

gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa 600

ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc 660

gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata 720

ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca 759

<210> 193

<211> 759

<212> ДНК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 193

atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa 60

gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc 120

ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag 180

aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa 240

ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg 300

aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa 360

gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa 420

ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg 480

gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa 540

gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa 600

ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc 660

gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata 720

ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca 759

<210> 194

<211> 759

<212> ДНК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 194

atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa 60

gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc 120

ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag 180

aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa 240

ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg 300

aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa 360

gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa 420

ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg 480

gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa 540

gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa 600

ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc 660

gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata 720

ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca 759

<210> 195

<211> 759

<212> ДНК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 195

atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa 60

gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc 120

ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag 180

aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa 240

ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg 300

aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa 360

gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa 420

ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg 480

gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa 540

gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa 600

ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc 660

gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata 720

ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca 759

<210> 196

<211> 759

<212> ДНК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 196

atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa 60

gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc 120

ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag 180

aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa 240

ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg 300

aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa 360

gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa 420

ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg 480

gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa 540

gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa 600

ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc 660

gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata 720

ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca 759

<210> 197

<211> 759

<212> ДНК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 197

atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa 60

gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc 120

ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag 180

aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa 240

ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg 300

aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa 360

gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa 420

ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg 480

gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa 540

gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa 600

ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc 660

gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata 720

ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca 759

<210> 198

<211> 759

<212> ДНК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 198

atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa 60

gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc 120

ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag 180

aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa 240

ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg 300

aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa 360

gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa 420

ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg 480

gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa 540

gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa 600

ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc 660

gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata 720

ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca 759

<210> 199

<211> 759

<212> ДНК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 199

atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa 60

gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc 120

ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag 180

aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa 240

ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg 300

aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa 360

gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa 420

ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg 480

gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa 540

gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa 600

ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc 660

gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata 720

ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca 759

<210> 200

<211> 541

<212> ДНК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 200

cggtaatgcg atgcggtaag aagaaggtat ggttggatcc aaacgaaata aatgaaattg 60

ccaacaccaa ttccagacaa aatattcgta agttgatcaa agatggtttg atcattaaaa 120

agccagtagc tgtacactct agggctcgtg cacgtaaaaa tgcagatgcc agaagaaaag 180

gtcgtcattg tggttttggt aaaaggaagg gtactgctaa tgctcgaaca cctcaaaaag 240

acctttgggt gaaaagaatg cgagtattaa ggcggttgct taaaaaatac cgtgaagcaa 300

agaaaattga caaccatctt taccatcagt tatacatgaa ggctaagggt aatgttttca 360

agaacaaacg tgtattgatg gagttcatcc acaaaaagaa ggcagagaag gcccgtgcca 420

agatgttgag tgatcaagct gaagctagac gtcaaaaggt taaggaagct aggaaacgta 480

aagaagcaag atttttacaa aataggaagg aacttttggc tgcatacgcc cgagaagatg 540

a 541

<210> 201

<211> 541

<212> ДНК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 201

cggtaatgcg atgcggtaag aagaaggtat ggttggatcc aaacgaaata aatgaaattg 60

ccaacaccaa ttccagacaa aatattcgta agttgatcaa agatggtttg atcattaaaa 120

agccagtagc tgtacactct agggctcgtg cacgtaaaaa tgcagatgcc agaagaaaag 180

gtcgtcattg tggttttggt aaaaggaagg gtactgctaa tgctcgaaca cctcaaaaag 240

acctttgggt gaaaagaatg cgagtattaa ggcggttgct taaaaaatac cgtgaagcaa 300

agaaaattga caaccatctt taccatcagt tatacatgaa ggctaagggt aatgttttca 360

agaacaaacg tgtattgatg gagttcatcc acaaaaagaa ggcagagaag gcccgtgcca 420

agatgttgag tgatcaagct gaagctagac gtcaaaaggt taaggaagct aggaaacgta 480

aagaagcaag atttttacaa aataggaagg aacttttggc tgcatacgcc cgagaagatg 540

a 541

<210> 202

<211> 823

<212> ДНК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 202

gttgtagtcg gaaagggtac gtccgtcttc aagttgtttt ccggcaaaga tcaaacgttg 60

ttggtctggt gggatacctt ctttgtcttg gatcttggct tttacatttt caatggaatc 120

agatgattcc acctccaatg taatggtctt tccagtgagg gtctttacaa agatttgcat 180

accaccacgg agacgcaaca ctaagtgaag ggtagattct ttctggatgt tgtagtcaga 240

aagtgtgcgt ccgtcttcaa gttgctttcc ggcaaagatc aaacgttgtt ggtcaggtgg 300

aataccttct ttgtcttgga tcttagcttt tacattttca atggaatctg atgactcaac 360

ttccaatgta atggtctttc cagtgagggt ctttacaaag atttgcatac caccacggag 420

acgcaacact aagtgaaggg tagattcttt ctggatgttg tagtcggaaa gggtacgtcc 480

gtcttcaagt tgctttccgg caaagatcaa acgttgttgg tctggtggga taccttcttt 540

gtcttggatc ttggctttta cattttcaat ggaatcagat gattccacct ccaatgtaat 600

ggtctttcca gtgagggtct ttacaaagat ttgcatacca ccacggagac gcaacactaa 660

gtgaagggta gattctttct ggatgttgta gtcggaaagg gtacgtccgt cttcaagttg 720

ctttccagca aagatcaaac gttgctggtc tggtgggata ccttccttgt cttggatctt 780

ggccttaaca ttttcaatgg aatctgatga ctcaacttcc aaa 823

<210> 203

<211> 823

<212> ДНК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 203

gttgtagtcg gaaagggtac gtccgtcttc aagttgtttt ccggcaaaga tcaaacgttg 60

ttggtctggt gggatacctt ctttgtcttg gatcttggct tttacatttt caatggaatc 120

agatgattcc acctccaatg taatggtctt tccagtgagg gtctttacaa agatttgcat 180

accaccacgg agacgcaaca ctaagtgaag ggtagattct ttctggatgt tgtagtcaga 240

aagtgtgcgt ccgtcttcaa gttgctttcc ggcaaagatc aaacgttgtt ggtcaggtgg 300

aataccttct ttgtcttgga tcttagcttt tacattttca atggaatctg atgactcaac 360

ttccaatgta atggtctttc cagtgagggt ctttacaaag atttgcatac caccacggag 420

acgcaacact aagtgaaggg tagattcttt ctggatgttg tagtcggaaa gggtacgtcc 480

gtcttcaagt tgctttccgg caaagatcaa acgttgttgg tctggtggga taccttcttt 540

gtcttggatc ttggctttta cattttcaat ggaatcagat gattccacct ccaatgtaat 600

ggtctttcca gtgagggtct ttacaaagat ttgcatacca ccacggagac gcaacactaa 660

gtgaagggta gattctttct ggatgttgta gtcggaaagg gtacgtccgt cttcaagttg 720

ctttccagca aagatcaaac gttgctggtc tggtgggata ccttccttgt cttggatctt 780

ggccttaaca ttttcaatgg aatctgatga ctcaacttcc aaa 823

<210> 204

<211> 172

<212> ДНК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 204

aagacttgct tcatcctact gcaattgaag aacgcaggaa acacaaatta aagcgccttg 60

ttcaacaccc aaactctttt ttcatggatg tcaaatgccc tggatgttat aaaattacaa 120

ctgtattcag tcacgctcag agtgtagtta tatgtaccgg atgttccaca at 172

<210> 205

<211> 172

<212> ДНК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 205

aagacttgct tcatcctact gcaattgaag aacgcaggaa acacaaatta aagcgccttg 60

ttcaacaccc aaactctttt ttcatggatg tcaaatgccc tggatgttat aaaattacaa 120

ctgtattcag tcacgctcag agtgtagtta tatgtaccgg atgttccaca at 172

<210> 206

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 206

cgaaccatct gggaagcttg gaatg 25

<210> 207

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 207

gcagctggag gaagagaaac gtatc 25

<210> 208

<211> 47

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 208

gcgtaatacg actcactata ggcgaaccat ctgggaagct tggaatg 47

<210> 209

<211> 46

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 209

gcgtaatacg actcactata ggcagctgga ggaagagaaa cgtatc 46

<210> 210

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 210

agttcgagaa caccaggaag 20

<210> 211

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 211

cctgacacgt tgttccagct tg 22

<210> 212

<211> 45

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 212

gcgtaatacg actcactata ggaggagttc gagaacacca ggaag 45

<210> 213

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 213

gcgtaatacg actcactata ggcctgacac gttgttccag cttg 44

<210> 214

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 214

gcaggcgatg aagatggaga 20

<210> 215

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 215

ccacctcttt ctgcaacttc ttga 24

<210> 216

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 216

gcgtaatacg actcactata gggcaggcga tgaagatgga ga 42

<210> 217

<211> 46

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 217

gcgtaatacg actcactata ggccacctct ttctgcaact tcttga 46

<210> 218

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 218

cagaatccca cagaatctga cgtga 25

<210> 219

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 219

gcaagtggcg aagctcagct 20

<210> 220

<211> 47

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 220

gcgtaatacg actcactata ggcagaatcc cacagaatct gacgtga 47

<210> 221

<211> 41

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 221

gcgtaatacg actcactata ggcaagtggc gaagctcagc t 41

<210> 222

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 222

cgtgtttgcc atgttcgatc a 21

<210> 223

<211> 23

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 223

ggtacatttc gtccacgtct tca 23

<210> 224

<211> 43

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 224

gcgtaatacg actcactata ggcgtgtttg ccatgttcga tca 43

<210> 225

<211> 43

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 225

gcgtaatacg actcactata ggtacatttc gtccacgtct tca 43

<210> 226

<211> 23

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 226

gacttgatct tcagccgacc att 23

<210> 227

<211> 23

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 227

ccattgccag ttcctcaact tca 23

<210> 228

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 228

gcgtaatacg actcactata ggacttgatc ttcagccgac catt 44

<210> 229

<211> 45

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 229

gcgtaatacg actcactata ggccattgcc agttcctcaa cttca 45

<210> 230

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 230

cgcaatgatc tcctccagga t 21

<210> 231

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 231

ggtcatcatc tccatgaact cgtc 24

<210> 232

<211> 43

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 232

gcgtaatacg actcactata ggcgcaatga tctcctccag gat 43

<210> 233

<211> 45

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 233

gcgtaatacg actcactata gggtcatcat ctccatgaac tcgtc 45

<210> 234

<211> 26

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 234

cgtcactaat cggactggtc taacag 26

<210> 235

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 235

ggtcatcatc tccatgaact cgtc 24

<210> 236

<211> 48

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 236

gcgtaatacg actcactata ggcgtcacta atcggactgg tctaacag 48

<210> 237

<211> 45

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 237

gcgtaatacg actcactata gggtcatcat ctccatgaac tcgtc 45

<210> 238

<211> 23

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 238

ggtgaaggag ggtgcctgct cag 23

<210> 239

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 239

cagggtgaat agaacgaggt actcg 25

<210> 240

<211> 40

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 240

aatacgactc actatagggc gctatgaaat tccaagcaca 40

<210> 241

<211> 47

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 241

gcgtaatacg actcactata ggcagggtga atagaacgag gtactcg 47

<210> 242

<211> 29

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 242

ctcaacgaag gtcttgtcag tggctttgg 29

<210> 243

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 243

ttcgcctggc ttcttcgtga 20

<210> 244

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 244

gcgtaatacg actcactata ggccacgccg acttaattca ttcc 44

<210> 245

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 245

gcgtaatacg actcactata ggttcgcctg gcttcttcgt ga 42

<210> 246

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 246

tgtcgatggc ggtcttaaca tc 22

<210> 247

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 247

tctccagctt ccactttctt gaga 24

<210> 248

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 248

gcgtaatacg actcactata ggtgtcgatg gcggtcttaa catc 44

<210> 249

<211> 46

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 249

gcgtaatacg actcactata ggtctccagc ttccactttc ttgaga 46

<210> 250

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 250

aacgtgcatt tcgcgtaccc 20

<210> 251

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 251

tgatgggcat aactggcagg 20

<210> 252

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 252

gcgtaatacg actcactata ggaacgtgca tttcgcgtac cc 42

<210> 253

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 253

gcgtaatacg actcactata ggtgatgggc ataactggca gg 42

<210> 254

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 254

ccttattgaa cgtggtcgac ag 22

<210> 255

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 255

ctgatgtagt ccttgaggag 20

<210> 256

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 256

gcgtaatacg actcactata ggccttattg aacgtggtcg acag 44

<210> 257

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 257

gcgtaatacg actcactata ggctgatgta gtccttgagg ag 42

<210> 258

<211> 26

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 258

gtacggacgg gtagtttagt tgtgtc 26

<210> 259

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 259

ttgccaagtg ccaagtcacg 20

<210> 260

<211> 48

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 260

gcgtaatacg actcactata gggtacggac gggtagttta gttgtgtc 48

<210> 261

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 261

gcgtaatacg actcactata ggttgccaag tgccaagtca cg 42

<210> 262

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 262

ctgttgtcgg ctggtcatat cc 22

<210> 263

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 263

taacgtaacg catcgccacc 20

<210> 264

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 264

gcgtaatacg actcactata ggctgttgtc ggctggtcat atcc 44

<210> 265

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 265

gcgtaatacg actcactata ggtaacgtaa cgcatcgcca cc 42

<210> 266

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 266

agccctcatc cgtgatttgg 20

<210> 267

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 267

gatccggcct caatttgacg 20

<210> 268

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 268

gcgtaatacg actcactata ggagccctca tccgtgattt gg 42

<210> 269

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 269

gcgtaatacg actcactata gggatccggc ctcaatttga cg 42

<210> 270

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 270

acgtttctct gctcattcgt gc 22

<210> 271

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 271

cttgtacaaa gtgtgcaggg 20

<210> 272

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 272

gcgtaatacg actcactata ggacgtttct ctgctcattc gtgc 44

<210> 273

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 273

gcgtaatacg actcactata ggcttgtaca aagtgtgcag gg 42

<210> 274

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 274

ggttttcttc ttgcccgaat cg 22

<210> 275

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 275

tttggggttc ggcttggttg 20

<210> 276

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 276

gcgtaatacg actcactata ggggttttct tcttgcccga atcg 44

<210> 277

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 277

gcgtaatacg actcactata ggtttggggt tcggcttggt tg 42

<210> 278

<211> 23

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 278

tcagcgagat ccctaagaca acg 23

<210> 279

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 279

ccccacatgt tgatgacgca 20

<210> 280

<211> 45

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 280

gcgtaatacg actcactata ggtcagcgag atccctaaga caacg 45

<210> 281

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 281

gcgtaatacg actcactata ggccccacat gttgatgacg ca 42

<210> 282

<211> 23

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 282

ggtttatgac ccctgagagg aag 23

<210> 283

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 283

ctccagggtg aactccttct tc 22

<210> 284

<211> 43

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 284

gcgtaatacg actcactata ggtttatgac ccctgagagg aag 43

<210> 285

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 285

gcgtaatacg actcactata ggctccaggg tgaactcctt cttc 44

<210> 286

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 286

caaggaccag aacaagaaca aggg 24

<210> 287

<211> 26

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 287

gacgttcata tttggaggct acttgg 26

<210> 288

<211> 46

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 288

gcgtaatacg actcactata ggcaaggacc agaacaagaa caaggg 46

<210> 289

<211> 47

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 289

gcgtaatacg actcactata ggacgttcat atttggaggc tacttgg 47

<210> 290

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 290

aatctcgtac actgttggaa caagc 25

<210> 291

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 291

ggttcttacg gtcttcttca gcttg 25

<210> 292

<211> 47

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 292

gcgtaatacg actcactata ggaatctcgt acactgttgg aacaagc 47

<210> 293

<211> 45

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 293

gcgtaatacg actcactata ggttcttacg gtcttcttca gcttg 45

<210> 294

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 294

aagaagaagc tcaggttgtt gc 22

<210> 295

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 295

tcattcacct ggctgttgag 20

<210> 296

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 296

gcgtaatacg actcactata ggaagaagaa gctcaggttg ttgc 44

<210> 297

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 297

gcgtaatacg actcactata ggtcattcac ctggctgttg ag 42

<210> 298

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 298

acatcctcag gctcatggga 20

<210> 299

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 299

agccgttacc ttccttgtcg 20

<210> 300

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 300

gcgtaatacg actcactata ggacatcctc aggctcatgg ga 42

<210> 301

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 301

gcgtaatacg actcactata ggagccgtta ccttccttgt cg 42

<210> 302

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 302

acatcctcag gctcatggga 20

<210> 303

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 303

agccgttacc ttccttgtcg 20

<210> 304

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 304

gcgtaatacg actcactata ggacatcctc aggctcatgg ga 42

<210> 305

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 305

gcgtaatacg actcactata ggagccgtta ccttccttgt cg 42

<210> 306

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 306

cgtaaaaact ctgaccggca agac 24

<210> 307

<211> 26

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 307

tagttccacc acgaagtctg agaacc 26

<210> 308

<211> 46

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 308

gcgtaatacg actcactata ggcgtaaaaa ctctgaccgg caagac 46

<210> 309

<211> 48

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 309

gcgtaatacg actcactata ggtagttcca ccacgaagtc tgagaacc 48

<210> 310

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 310

atggccgacg atgaagctaa g 21

<210> 311

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 311

tggttgtggt tctggttcgg 20

<210> 312

<211> 43

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 312

gcgtaatacg actcactata ggatggccga cgatgaagct aag 43

<210> 313

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 313

gcgtaatacg actcactata ggtggttctg gttcgggttc aa 42

<210> 314

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 314

cggtaatgcg atgcggtaag 20

<210> 315

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 315

tcatcttctc gggcgtatgc 20

<210> 316

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 316

gcgtaatacg actcactata ggcggtaatg cgatgcggta ag 42

<210> 317

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 317

gcgtaatacg actcactata ggtcatcttc tcgggcgtat gc 42

<210> 318

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 318

tttggaagtt gagtcatcag attcc 25

<210> 319

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 319

gttgtagtcg gaaagggtac gtcc 24

<210> 320

<211> 47

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 320

gcgtaatacg actcactata ggtttggaag ttgagtcatc agattcc 47

<210> 321

<211> 46

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 321

gcgtaatacg actcactata gggttgtagt cggaaagggt acgtcc 46

<210> 322

<211> 23

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 322

aagacttgct tcatcctact gca 23

<210> 323

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 323

attgtggaac atccggtaca 20

<210> 324

<211> 45

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 324

gcgtaatacg actcactata ggaagacttg cttcatccta ctgca 45

<210> 325

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 325

gcgtaatacg actcactata ggattgtgga acatccggta ca 42

<210> 326

<211> 424

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 326

Met Ile Pro Pro Thr Ser Arg Pro Gln Val Thr Val Tyr Ser Asp Lys

1 5 10 15

Asn Glu Ala Thr Gly Thr Leu Leu Asn Leu Pro Ala Val Phe Asn Ala

20 25 30

Pro Ile Arg Pro Asp Val Val Asn Phe Val His Gln Asn Val Ala Lys

35 40 45

Asn His Arg Gln Pro Tyr Cys Val Ser Ala Gln Ala Gly His Gln Thr

50 55 60

Ser Ala Glu Ser Trp Gly Thr Gly Arg Ala Val Ala Arg Ile Pro Arg

65 70 75 80

Val Arg Gly Gly Gly Thr His Arg Ser Gly Gln Gly Ala Phe Gly Asn

85 90 95

Met Cys Arg Gly Gly Arg Met Phe Ala Pro Thr Arg Pro Trp Arg Arg

100 105 110

Trp His Arg Lys Ile Asn Val Asn Gln Lys Arg Tyr Ala Val Val Ser

115 120 125

Ala Ile Ala Ala Ser Gly Val Pro Ala Leu Val Met Ser Lys Gly His

130 135 140

Met Val Gln Ser Val Pro Glu Phe Pro Leu Val Val Ser Asp Lys Val

145 150 155 160

Gln Glu Tyr Thr Lys Thr Lys Gln Ala Val Ile Phe Leu His Arg Ile

165 170 175

Lys Ala Trp Gln Asp Ile Gln Lys Val Tyr Lys Ser Lys Arg Phe Arg

180 185 190

Ala Gly Lys Gly Lys Met Arg Asn Arg Arg Arg Ile Gln Arg Arg Gly

195 200 205

Pro Leu Ile Ile Tyr Asp Gln Asp Gln Gly Leu Asn Arg Ala Phe Arg

210 215 220

Asn Ile Pro Gly Val Asp Leu Ile Glu Val Ser Arg Leu Asn Leu Leu

225 230 235 240

Lys Leu Ala Pro Gly Gly His Ile Gly Arg Phe Val Ile Trp Thr Gln

245 250 255

Ser Ala Phe Glu Lys Leu Asp Ala Leu Tyr Gly Thr Trp Lys Lys Lys

260 265 270

Ser Thr Leu Lys Ala Gly Tyr Asn Leu Pro Met Pro Lys Met Ala Asn

275 280 285

Thr Asp Leu Ser Arg Leu Phe Lys Ala Pro Glu Ile Lys Ala Val Leu

290 295 300

Arg Asn Pro Lys Lys Thr Ile Val Arg Arg Val Arg Lys Leu Asn Pro

305 310 315 320

Leu Arg Asn Thr Arg Ala Met Leu Arg Leu Asn Pro Tyr Ala Ala Val

325 330 335

Leu Lys Arg Lys Ala Ile Leu Asp Gln Arg Lys Leu Lys Leu Gln Lys

340 345 350

Leu Val Glu Ala Ala Lys Lys Gly Asp Thr Lys Leu Ser Pro Arg Val

355 360 365

Glu Arg His Leu Lys Met Ile Glu Arg Arg Lys Ala Leu Ile Lys Lys

370 375 380

Ala Lys Ala Ala Lys Pro Lys Lys Pro Lys Thr Ala Lys Lys Pro Lys

385 390 395 400

Thr Ala Glu Lys Ala Pro Ala Pro Ala Lys Lys Ala Ala Ala Pro Lys

405 410 415

Lys Ala Thr Thr Pro Ala Lys Lys

420

<210> 327

<211> 242

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 327

Met Ala Asn Ala Lys Pro Ile Ser Lys Lys Lys Lys Phe Val Ser Asp

1 5 10 15

Gly Val Phe Lys Ala Glu Leu Asn Glu Phe Leu Thr Arg Glu Leu Ala

20 25 30

Glu Glu Gly Tyr Ser Gly Val Glu Val Arg Val Thr Pro Asn Lys Thr

35 40 45

Glu Ile Ile Ile Met Ala Thr Arg Thr Gln Ser Val Leu Gly Asp Lys

50 55 60

Gly Arg Arg Ile Arg Glu Leu Thr Ser Val Val Gln Lys Arg Phe Asn

65 70 75 80

Phe Lys Pro Gln Thr Leu Asp Leu Tyr Ala Glu Lys Val Ala Thr Arg

85 90 95

Gly Leu Cys Ala Ile Ala Gln Ala Glu Ser Leu Arg Tyr Lys Leu Ile

100 105 110

Gly Gly Leu Ala Val Arg Gly Ala Cys Tyr Gly Val Leu Arg Phe Ile

115 120 125

Met Glu Asn Gly Ala Lys Gly Cys Glu Val Val Val Ser Gly Lys Leu

130 135 140

Arg Gly Gln Arg Ala Lys Ser Met Lys Phe Val Asp Gly Leu Met Ile

145 150 155 160

His Ser Gly Asp Pro Cys Asn Glu Tyr Val Asp Thr Ala Thr Arg His

165 170 175

Val Leu Leu Arg Gln Gly Val Leu Gly Ile Lys Val Lys Ile Met Leu

180 185 190

Pro Trp Asp Val Thr Gly Lys Asn Gly Pro Lys Asn Pro Leu Pro Asp

195 200 205

His Val Ser Val Leu Leu Pro Lys Glu Glu Leu Pro Asn Leu Ala Val

210 215 220

Ser Val Pro Gly Ser Asp Ile Lys Pro Lys Pro Glu Val Pro Ala Pro

225 230 235 240

Ala Leu

<210> 328

<211> 262

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 328

Met Ala Val Gly Lys Asn Lys Gly Leu Ser Lys Gly Gly Lys Lys Gly

1 5 10 15

Val Lys Lys Lys Val Val Asp Pro Phe Thr Arg Lys Asp Trp Tyr Asp

20 25 30

Val Lys Ala Pro Ser Met Phe Lys Lys Arg Gln Val Gly Lys Thr Leu

35 40 45

Val Asn Arg Thr Gln Gly Thr Lys Ile Ala Ser Glu Gly Leu Lys Gly

50 55 60

Arg Val Phe Glu Val Ser Leu Ala Asp Ile Gln Glu Asp Thr Asp Ala

65 70 75 80

Glu Arg Ser Phe Arg Lys Phe Arg Leu Ile Ala Glu Asp Val Gln Ala

85 90 95

Arg Asn Val Leu Thr Asn Phe His Gly Met Asp Leu Thr Thr Asp Lys

100 105 110

Leu Arg Ser Met Val Lys Lys Trp Gln Thr Leu Ile Glu Ala Asn Val

115 120 125

Asp Val Lys Thr Thr Asp Gly Tyr Leu Leu Arg Val Phe Cys Ile Gly

130 135 140

Phe Thr Asn Lys Asp Gln Leu Ser Gln Arg Lys Thr Cys Tyr Ala Gln

145 150 155 160

His Asn Gln Val Arg Glu Ile Arg Lys Lys Met Val Lys Asn Ile Ser

165 170 175

Asp Ser Ile Ser Ser Cys Asp Leu Arg Ser Val Val Asn Lys Leu Ile

180 185 190

Pro Asp Ser Ile Ala Lys Asp Ile Glu Lys Asn Cys Gln Gly Ile Tyr

195 200 205

Pro Leu His Asp Val Tyr Ile Arg Lys Val Lys Val Leu Lys Lys Pro

210 215 220

Arg Phe Glu Leu Ser Lys Leu Leu Glu Leu His Val Asp Gly Lys Gly

225 230 235 240

Ile Asp Glu Pro Gly Ala Lys Val Thr Arg Thr Asp Ala Tyr Glu Pro

245 250 255

Pro Val Gln Glu Ser Val

260

<210> 329

<211> 152

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 329

Met Ser Leu Met Leu Pro Glu Lys Phe Gln His Ile Leu Arg Ile Met

1 5 10 15

Gly Thr Asn Ile Asp Gly Lys Arg Lys Val Met Phe Ala Met Thr Ala

20 25 30

Ile Lys Gly Val Gly Arg Arg Tyr Ala Asn Ile Val Leu Lys Lys Ala

35 40 45

Asp Val Asn Leu Asp Lys Arg Ala Gly Glu Cys Ser Glu Glu Glu Val

50 55 60

Glu Lys Ile Val Thr Ile Met Gln Asn Pro Arg Gln Tyr Lys Ile Pro

65 70 75 80

Asn Trp Phe Leu Asn Arg Gln Lys Asp Thr Val Glu Gly Lys Tyr Ser

85 90 95

Gln Leu Thr Ser Ser Leu Leu Asp Ser Lys Leu Arg Asp Asp Leu Glu

100 105 110

Arg Leu Lys Lys Ile Arg Ala His Arg Gly Met Arg His Tyr Trp Gly

115 120 125

Leu Arg Val Arg Gly Gln His Thr Lys Thr Thr Gly Arg Arg Gly Arg

130 135 140

Thr Val Gly Val Ser Lys Lys Lys

145 150

<210> 330

<211> 381

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 330

Met Ser Asp Glu Glu Tyr Ser Glu Ser Glu Glu Glu Thr Gln Pro Glu

1 5 10 15

Pro Gln Lys Lys Pro Glu Ala Glu Gly Gly Gly Asp Pro Glu Phe Val

20 25 30

Lys Arg Lys Glu Ala Gln Thr Ser Ala Leu Asp Glu Gln Leu Lys Asp

35 40 45

Tyr Ile Ala Glu Trp Arg Lys Gln Arg Ala Arg Glu Glu Glu Asp Leu

50 55 60

Lys Lys Leu Lys Glu Lys Gln Ala Lys Arg Lys Val Ala Arg Ala Glu

65 70 75 80

Glu Glu Lys Arg Leu Ala Glu Lys Lys Lys Gln Glu Glu Glu Arg Arg

85 90 95

Val Arg Glu Ala Glu Glu Lys Lys Gln Arg Glu Ile Glu Glu Lys Arg

100 105 110

Arg Arg Leu Glu Glu Ala Glu Lys Lys Arg Gln Ala Met Met Ala Ala

115 120 125

Leu Lys Asp Gln Ser Lys Thr Lys Gly Pro Asn Phe Val Val Asn Lys

130 135 140

Lys Ala Glu Thr Leu Gly Met Ser Ser Ala Gln Ile Glu Arg Asn Lys

145 150 155 160

Thr Lys Glu Gln Leu Glu Glu Glu Lys Arg Ile Ser Leu Ser Ile Arg

165 170 175

Leu Lys Pro Leu Ala Ile Glu Asn Met Ser Ile Asp Arg Leu Arg Ile

180 185 190

Lys Ala Gln Glu Leu Trp Glu Ala Ile Val Lys Leu Glu Thr Glu Lys

195 200 205

Tyr Asp Leu Glu Glu Arg Gln Lys Arg Gln Asp Tyr Asp Leu Lys Glu

210 215 220

Leu Lys Glu Arg Gln Lys Gln Gln Leu Arg His Lys Ala Leu Lys Lys

225 230 235 240

Gly Leu Asp Pro Glu Ala Leu Thr Gly Lys Tyr Pro Pro Lys Ile Gln

245 250 255

Val Ala Ser Lys Tyr Glu Arg Arg Val Asp Thr Arg Ser Tyr Asp Asp

260 265 270

Lys Lys Lys Leu Phe Glu Gly Gly Ile Leu Glu Arg Tyr Lys Glu Leu

275 280 285

Ile Glu Lys Val Trp Thr Glu Lys Val Asp Gln Phe Gly Ser Arg Ala

290 295 300

His Ser Lys Leu Pro Arg Trp Phe Gly Glu Arg Pro Gly Lys Lys Lys

305 310 315 320

Asp Ala Pro Glu Ser Pro Glu Glu Glu Glu Val Lys Val Glu Asp Glu

325 330 335

Pro Glu Ala Glu Pro Ser Phe Met Leu Asp Glu Glu Glu Glu Glu Ala

340 345 350

Glu Glu Glu Glu Ala Glu Glu Glu Glu Glu Ala Glu Glu Glu Glu Glu

355 360 365

Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu

370 375 380

<210> 331

<211> 1689

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 331

Ser Gly Lys Leu Ala Gly Ala Asp Ile Glu Thr Tyr Leu Leu Glu Lys

1 5 10 15

Ala Arg Val Ile Ser Gln Gln Thr Leu Glu Arg Ser Tyr His Ile Phe

20 25 30

Tyr Gln Met Met Ser Gly Ala Val Lys Gly Val Lys Glu Met Cys Leu

35 40 45

Leu Val Asp Asp Ile Tyr Thr Tyr Asn Phe Ile Ser Gln Gly Lys Val

50 55 60

Ser Ile Ala Gly Val Asp Asp Gly Glu Glu Met Val Leu Thr Asp Gln

65 70 75 80

Ala Phe Asp Ile Leu Gly Phe Thr Lys Gln Glu Lys Glu Asp Ile Tyr

85 90 95

Lys Ile Thr Ala Ala Val Ile His Met Gly Thr Met Lys Phe Lys Gln

100 105 110

Arg Gly Arg Glu Glu Gln Ala Glu Ala Asp Gly Thr Glu Glu Gly Gly

115 120 125

Lys Val Gly Val Leu Leu Gly Ile Asp Gly Asp Asp Leu Tyr Lys Asn

130 135 140

Met Cys Lys Pro Arg Ile Lys Val Gly Thr Glu Phe Val Thr Gln Gly

145 150 155 160

Lys Asn Val Asn Gln Val Ser Tyr Ser Leu Gly Ala Met Ser Lys Gly

165 170 175

Met Phe Asp Arg Leu Phe Lys Phe Leu Val Lys Lys Cys Asn Glu Thr

180 185 190

Leu Asp Thr Lys Gln Lys Arg Gln His Phe Ile Gly Val Leu Asp Ile

195 200 205

Ala Gly Phe Glu Ile Phe Asp Phe Asn Gly Phe Glu Gln Leu Cys Ile

210 215 220

Asn Phe Thr Asn Glu Lys Leu Gln Gln Phe Phe Asn His His Met Phe

225 230 235 240

Val Leu Glu Gln Glu Glu Tyr Lys Arg Glu Gly Ile Asn Trp Ala Phe

245 250 255

Ile Asp Phe Gly Met Asp Leu Leu Ala Cys Ile Glu Leu Ile Glu Lys

260 265 270

Pro Met Gly Ile Leu Ser Ile Leu Glu Glu Glu Ser Met Phe Pro Lys

275 280 285

Ala Thr Asp Lys Thr Phe Glu Asp Lys Leu Ile Thr Asn His Leu Gly

290 295 300

Lys Ser Pro Asn Phe Arg Lys Pro Ala Val Pro Lys Pro Gly Gln Gln

305 310 315 320

Ala Gly His Phe Ala Ile Ala His Tyr Ala Gly Cys Val Ser Tyr Asn

325 330 335

Ile Thr Gly Trp Leu Glu Lys Asn Lys Asp Pro Leu Asn Asp Thr Val

340 345 350

Val Asp Gln Tyr Lys Lys Gly Thr Asn Lys Leu Leu Cys Glu Ile Phe

355 360 365

Ala Asp His Pro Gly Gln Ser Gly Ala Pro Gly Gly Asp Ala Gly Gly

370 375 380

Lys Gly Gly Arg Gly Lys Lys Gly Gly Gly Phe Ala Thr Val Ser Ser

385 390 395 400

Ser Tyr Lys Glu Gln Leu Asn Asn Leu Met Thr Thr Leu Lys Ser Thr

405 410 415

Gln Pro His Phe Val Arg Cys Ile Ile Pro Asn Glu Leu Lys Gln Pro

420 425 430

Gly Val Ile Asp Ser His Leu Val Met His Gln Leu Thr Cys Asn Gly

435 440 445

Val Leu Glu Gly Ile Arg Ile Cys Arg Lys Gly Phe Pro Asn Arg Met

450 455 460

Asn Tyr Pro Asp Phe Lys Leu Arg Tyr Lys Ile Leu Asn Pro Ala Ala

465 470 475 480

Val Asp Arg Glu Ser Asp Ile Leu Lys Ala Ala Gly Leu Val Leu Glu

485 490 495

Ser Thr Gly Leu Asp Pro Asp Met Tyr Arg Leu Gly His Thr Lys Val

500 505 510

Phe Phe Arg Ala Gly Val Leu Gly Gln Leu Glu Glu Leu Arg Asp Asp

515 520 525

Arg Leu Ser Lys Ile Ile Gly Trp Met Gln Ala Phe Met Arg Gly Tyr

530 535 540

Leu Val Arg Lys Glu Tyr Lys Lys Leu Gln Glu Gln Arg Leu Ala Leu

545 550 555 560

Gln Val Val Gln Arg Asn Leu Arg Arg Tyr Leu Gln Leu Arg Thr Trp

565 570 575

Pro Trp Trp Lys Met Trp Ser Arg Val Lys Pro Leu Leu Asn Val Ala

580 585 590

Asn Val Glu Glu Glu Met Arg Lys Leu Glu Glu Leu Val Ala Glu Thr

595 600 605

Gln Ala Ala Leu Glu Lys Glu Glu Lys Leu Arg Lys Glu Ala Glu Ala

610 615 620

Leu Asn Ala Lys Leu Leu Gln Glu Lys Thr Asp Leu Leu Arg Asn Leu

625 630 635 640

Glu Gly Glu Lys Gly Ser Ile Ser Gly Ile Gln Glu Arg Cys Ala Lys

645 650 655

Leu Gln Ala Gln Lys Ala Asp Leu Glu Ser Gln Leu Met Asp Thr Gln

660 665 670

Glu Arg Leu Gln Asn Glu Glu Asp Ala Arg Asn Gln Leu Phe Gln Gln

675 680 685

Lys Lys Lys Leu Glu Gln Glu Ala Ala Ala Leu Lys Lys Asp Ile Glu

690 695 700

Asp Leu Glu Leu Ser Asn Gln Lys Thr Asp Gln Asp Lys Ala Ser Lys

705 710 715 720

Glu His Gln Ile Arg Asn Leu Asn Asp Glu Ile Ala His Gln Asp Asp

725 730 735

Leu Ile Asn Lys Leu Asn Lys Glu Lys Lys Ile Gln Ser Glu Leu Asn

740 745 750

Gln Lys Thr Ala Glu Glu Leu Gln Ala Ala Glu Asp Lys Ile Asn His

755 760 765

Leu Thr Lys Val Lys Val Lys Leu Glu Gln Thr Leu Asp Glu Leu Glu

770 775 780

Asp Thr Leu Glu Arg Glu Lys Lys Leu Arg Gly Asp Val Glu Lys Ala

785 790 795 800

Lys Arg Lys Thr Glu Gly Asp Leu Lys Leu Thr Gln Glu Ala Val Ala

805 810 815

Asp Leu Glu Arg Asn Lys Lys Glu Leu Glu Gln Thr Ile Gln Arg Lys

820 825 830

Asp Lys Glu Ile Ala Ser Leu Thr Ala Lys Leu Glu Asp Glu Gln Ser

835 840 845

Ile Val Asn Lys Thr Gly Lys Gln Ile Lys Glu Leu Gln Ser Arg Ile

850 855 860

Glu Glu Leu Glu Glu Glu Val Glu Ala Glu Arg Gln Ala Arg Gly Lys

865 870 875 880

Ala Glu Lys Gln Arg Ala Asp Leu Ala Arg Glu Leu Glu Glu Leu Gly

885 890 895

Glu Arg Leu Glu Glu Ala Gly Gly Ala Thr Ser Ala Gln Ile Glu Leu

900 905 910

Asn Lys Lys Arg Glu Ala Glu Met Ser Lys Leu Arg Arg Asp Leu Glu

915 920 925

Glu Ala Asn Ile Gln His Glu Gly Thr Leu Ala Asn Leu Arg Lys Lys

930 935 940

His Asn Asp Ala Val Ser Glu Met Gly Asp Gln Ile Asp Gln Leu Asn

945 950 955 960

Lys Leu Lys Thr Lys Val Glu Lys Glu Lys Ser Gln Tyr Leu Gly Glu

965 970 975

Leu Asn Asp Val Arg Ala Ser Ile Asp His Leu Thr Asn Glu Lys Ala

980 985 990

Ala Thr Glu Lys Val Ala Lys Gln Leu Gln His Gln Ile Asn Glu Val

995 1000 1005

Gln Gly Lys Leu Asp Glu Ala Asn Arg Thr Leu Asn Asp Phe Asp

1010 1015 1020

Ala Ala Lys Lys Lys Leu Ser Ile Glu Asn Ser Asp Leu Leu Arg

1025 1030 1035

Gln Leu Glu Glu Ala Glu Ser Gln Val Ser Gln Leu Ser Lys Ile

1040 1045 1050

Lys Ile Ser Leu Thr Thr Gln Leu Glu Asp Thr Lys Arg Leu Ala

1055 1060 1065

Asp Glu Glu Ala Arg Glu Arg Ala Thr Leu Leu Gly Lys Phe Arg

1070 1075 1080

Asn Leu Glu His Asp Leu Asp Asn Leu Arg Glu Gln Val Glu Glu

1085 1090 1095

Glu Ala Glu Ala Lys Ala Asp Ile Gln Arg Gln Leu Ser Lys Ala

1100 1105 1110

Asn Ala Glu Ala Gln Leu Trp Arg Ser Lys Tyr Glu Ser Glu Gly

1115 1120 1125

Val Ala Arg Ala Glu Glu Leu Glu Glu Ala Lys Arg Lys Leu Gln

1130 1135 1140

Ala Arg Leu Ala Glu Ala Glu Glu Thr Ile Glu Ser Leu Asn Gln

1145 1150 1155

Lys Val Ile Ala Leu Glu Lys Thr Lys Gln Arg Leu Ala Thr Glu

1160 1165 1170

Val Glu Asp Leu Gln Leu Glu Val Asp Arg Ala Asn Ala Ile Ala

1175 1180 1185

Asn Ala Ala Glu Lys Lys Ala Lys Ala Ile Asp Lys Ile Ile Gly

1190 1195 1200

Glu Trp Lys Leu Lys Val Asp Asp Leu Ala Ala Glu Leu Asp Ala

1205 1210 1215

Ser Gln Lys Glu Cys Arg Asn Tyr Ser Thr Glu Leu Phe Arg Leu

1220 1225 1230

Lys Gly Ala Tyr Glu Glu Gly Gln Glu Gln Leu Glu Ala Val Arg

1235 1240 1245

Arg Glu Asn Lys Asn Leu Ala Asp Glu Val Lys Asp Leu Leu Asp

1250 1255 1260

Gln Ile Gly Glu Gly Gly Arg Asn Ile His Glu Ile Glu Lys Gln

1265 1270 1275

Arg Lys Arg Leu Glu Val Glu Lys Asp Glu Leu Gln Ala Ala Leu

1280 1285 1290

Glu Glu Ala Glu Ala Ala Leu Glu Gln Glu Glu Asn Lys Val Leu

1295 1300 1305

Arg Ala Gln Leu Glu Leu Ser Gln Val Arg Gln Glu Ile Asp Arg

1310 1315 1320

Arg Ile Gln Glu Lys Glu Glu Glu Phe Glu Asn Thr Arg Lys Asn

1325 1330 1335

His Gln Arg Ala Leu Asp Ser Met Gln Ala Ser Leu Glu Ala Glu

1340 1345 1350

Ala Lys Gly Lys Ala Glu Ala Leu Arg Met Lys Lys Lys Leu Glu

1355 1360 1365

Ala Asp Ile Asn Glu Leu Glu Ile Ala Leu Asp His Ala Asn Lys

1370 1375 1380

Ala Asn Ala Glu Ala Gln Lys Thr Ile Lys Lys Tyr Gln Gln Gln

1385 1390 1395

Leu Lys Asp Val Gln Thr Ala Leu Glu Glu Glu Gln Arg Ala Arg

1400 1405 1410

Asp Asp Ala Arg Glu Gln Leu Gly Ile Ala Glu Arg Arg Ala Asn

1415 1420 1425

Ala Leu Gly Asn Glu Leu Glu Glu Ser Arg Thr Leu Leu Glu Gln

1430 1435 1440

Ala Asp Arg Gly Arg Arg Gln Ala Glu Gln Glu Leu Gly Asp Ala

1445 1450 1455

His Glu Gln Ile Asn Glu Leu Ala Ala Gln Ala Thr Ser Ala Ser

1460 1465 1470

Ala Ala Lys Arg Lys Leu Glu Gly Glu Leu Gln Thr Leu His Ala

1475 1480 1485

Asp Leu Asp Glu Leu Leu Asn Glu Ala Lys Asn Ser Glu Glu Lys

1490 1495 1500

Ala Lys Lys Ala Met Val Asp Ala Ala Arg Leu Ala Asp Glu Leu

1505 1510 1515

Arg Ala Glu Gln Asp His Ala Gln Thr Gln Glu Lys Leu Arg Lys

1520 1525 1530

Ala Leu Glu Thr Gln Ile Lys Glu Leu Gln Val Arg Leu Asp Glu

1535 1540 1545

Ala Glu Asn Asn Ala Leu Lys Gly Gly Lys Lys Ala Ile Ala Lys

1550 1555 1560

Leu Glu Gln Arg Val Arg Glu Leu Glu Asn Glu Leu Asp Gly Glu

1565 1570 1575

Gln Arg Arg His Ala Asp Ala Gln Lys Asn Leu Arg Lys Ser Glu

1580 1585 1590

Arg Arg Ile Lys Glu Leu Ser Phe Gln Ser Asp Glu Asp Arg Lys

1595 1600 1605

Asn His Glu Arg Met Gln Asp Leu Val Asp Lys Leu Gln Gln Lys

1610 1615 1620

Ile Lys Thr Tyr Lys Arg Gln Ile Glu Glu Ala Glu Glu Ile Ala

1625 1630 1635

Ala Leu Asn Leu Ala Lys Phe Arg Lys Ala Gln Gln Glu Leu Glu

1640 1645 1650

Glu Ala Glu Glu Arg Ala Asp Leu Ala Glu Gln Ala Val Ser Lys

1655 1660 1665

Phe Arg Thr Lys Gly Gly Arg Ala Gly Ser Ala Ala Arg Ala Met

1670 1675 1680

Ser Pro Val Gly Gln Lys

1685

<210> 332

<211> 256

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 332

Asp Ala Ile Lys Lys Lys Met Gln Ala Met Lys Met Glu Lys Asp Thr

1 5 10 15

Ala Met Asp Lys Ala Asp Thr Cys Glu Gly Gln Ala Lys Asp Ala Asn

20 25 30

Thr Arg Ala Asp Lys Ile Leu Glu Asp Val Arg Asp Leu Gln Lys Lys

35 40 45

Leu Asn Gln Val Glu Ser Asp Leu Glu Arg Thr Lys Arg Glu Leu Glu

50 55 60

Thr Lys Thr Thr Glu Leu Glu Glu Lys Glu Lys Ala Asn Thr Asn Ala

65 70 75 80

Glu Ser Glu Val Ala Ser Leu Asn Arg Lys Val Gln Met Val Glu Glu

85 90 95

Asp Leu Glu Arg Ser Glu Glu Arg Ser Gly Thr Ala Gln Gln Lys Leu

100 105 110

Ser Glu Ala Ser His Ala Ala Asp Glu Ala Ser Arg Met Cys Lys Val

115 120 125

Leu Glu Asn Arg Ser Gln Gln Asp Glu Glu Arg Met Asp Gln Leu Thr

130 135 140

Asn Gln Leu Lys Glu Ala Arg Leu Leu Ala Glu Asp Ala Asp Gly Lys

145 150 155 160

Ser Asp Glu Val Ser Arg Lys Leu Ala Phe Val Glu Asp Glu Leu Glu

165 170 175

Val Ala Glu Asp Arg Val Lys Ser Gly Asp Ser Lys Ile Met Glu Leu

180 185 190

Glu Glu Glu Leu Lys Val Val Gly Asn Ser Leu Lys Ser Leu Glu Val

195 200 205

Ser Glu Glu Lys Ala Asn Gln Arg Val Glu Glu Tyr Lys Arg Gln Ile

210 215 220

Lys Gln Leu Thr Val Lys Leu Lys Glu Ala Glu Ala Arg Ala Glu Phe

225 230 235 240

Ala Glu Lys Thr Val Lys Lys Leu Gln Lys Glu Val Asp Arg Leu Glu

245 250 255

<210> 333

<211> 85

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 333

Arg Ala Leu Gly Gln Asn Pro Thr Glu Ser Asp Val Lys Lys Phe Thr

1 5 10 15

His Gln His Lys Pro Asp Glu Arg Ile Ser Phe Glu Val Phe Leu Pro

20 25 30

Ile Tyr Gln Ala Ile Ser Lys Gly Arg Thr Ser Asp Thr Ala Glu Asp

35 40 45

Phe Ile Glu Gly Leu Arg His Phe Asp Lys Asp Gly Asn Gly Phe Ile

50 55 60

Ser Thr Ala Glu Leu Arg His Leu Leu Thr Thr Leu Gly Glu Lys Leu

65 70 75 80

Thr Asp Asp Glu Val

85

<210> 334

<211> 174

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 334

Met Ser Ser Arg Lys Thr Ala Gly Arg Arg Ala Thr Thr Lys Lys Arg

1 5 10 15

Ala Gln Arg Ala Thr Ser Asn Val Phe Ala Met Phe Asp Gln Ala Gln

20 25 30

Ile Gln Glu Phe Lys Glu Ala Phe Asn Met Ile Asp Gln Asn Arg Asp

35 40 45

Gly Phe Val Asp Lys Glu Asp Leu His Asp Met Leu Ala Ser Leu Gly

50 55 60

Lys Asn Pro Ser Asp Glu Tyr Leu Glu Gly Met Met Asn Glu Ala Pro

65 70 75 80

Gly Pro Ile Asn Phe Thr Met Phe Leu Thr Leu Phe Gly Glu Arg Leu

85 90 95

Gln Gly Thr Asp Pro Glu Glu Val Ile Lys Asn Ala Phe Gly Cys Phe

100 105 110

Asp Glu Asp Asn Asn Gly Phe Ile Asn Glu Glu Arg Leu Arg Glu Leu

115 120 125

Leu Thr Ser Met Gly Asp Arg Phe Thr Asp Glu Asp Val Asp Glu Met

130 135 140

Tyr Arg Glu Ala Pro Ile Lys Asn Gly Met Phe Asp Tyr Ile Glu Phe

145 150 155 160

Thr Arg Ile Leu Lys His Gly Ala Lys Asp Lys Asp Glu Gln

165 170

<210> 335

<211> 1881

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 335

Asp Leu Thr Cys Leu Asn Glu Ala Ser Val Leu His Asn Ile Lys Asp

1 5 10 15

Arg Tyr Tyr Ser Gly Leu Ile Tyr Thr Tyr Ser Gly Leu Phe Cys Val

20 25 30

Val Val Asn Pro Tyr Lys Lys Leu Pro Ile Tyr Thr Glu Arg Ile Met

35 40 45

Glu Lys Tyr Lys Gly Val Lys Arg His Asp Leu Pro Pro His Val Phe

50 55 60

Ala Ile Thr Asp Thr Ala Tyr Arg Ser Met Leu Gln Asp Arg Glu Asp

65 70 75 80

Gln Ser Ile Leu Cys Thr Gly Glu Ser Gly Ala Gly Lys Thr Glu Asn

85 90 95

Thr Lys Lys Val Ile Gln Tyr Leu Ala Tyr Val Ala Ala Ser Lys Pro

100 105 110

Lys Ser Ser Ala Ser Pro His Thr Ala Gln Ser Gln Ala Leu Ile Ile

115 120 125

Gly Glu Leu Glu Gln Gln Leu Leu Gln Ala Asn Pro Ile Leu Glu Ala

130 135 140

Phe Gly Asn Ala Lys Thr Val Lys Asn Asp Asn Ser Ser Arg Phe Gly

145 150 155 160

Lys Phe Ile Arg Ile Asn Phe Asp Ala Ser Gly Tyr Ile Ala Gly Ala

165 170 175

Asn Ile Glu Thr Tyr Leu Leu Glu Lys Ser Arg Ala Ile Arg Gln Ala

180 185 190

Lys Asp Glu Arg Thr Phe His Ile Phe Tyr Gln Leu Leu Ala Gly Ala

195 200 205

Ser Ala Glu Gln Arg Lys Glu Phe Ile Leu Glu Asp Pro Lys Asn Tyr

210 215 220

Pro Phe Leu Ser Ser Gly Met Val Ser Val Pro Gly Val Asp Asp Gly

225 230 235 240

Val Asp Phe Gln Ala Thr Ile Ala Ser Met Ser Ile Met Gly Met Thr

245 250 255

Asn Asp Asp Leu Ser Ala Leu Phe Arg Ile Val Ser Ala Val Met Leu

260 265 270

Phe Gly Ser Met Gln Phe Lys Gln Glu Arg Asn Ser Asp Gln Ala Thr

275 280 285

Leu Pro Asp Asn Thr Val Ala Gln Lys Ile Ala His Leu Leu Gly Leu

290 295 300

Ser Ile Thr Glu Met Thr Lys Ala Phe Leu Arg Pro Arg Ile Lys Val

305 310 315 320

Gly Arg Asp Phe Val Thr Lys Ala Gln Thr Lys Glu Gln Val Glu Phe

325 330 335

Ala Val Glu Ala Ile Ser Lys Ala Cys Tyr Glu Arg Met Phe Arg Trp

340 345 350

Leu Val Asn Arg Ile Asn Arg Ser Leu Asp Arg Thr Lys Arg Gln Gly

355 360 365

Ala Ser Phe Ile Gly Ile Leu Asp Met Ala Gly Phe Glu Ile Phe Glu

370 375 380

Ile Asn Ser Phe Glu Gln Leu Cys Ile Asn Tyr Thr Asn Glu Lys Leu

385 390 395 400

Gln Gln Leu Phe Asn His Thr Met Phe Ile Leu Glu Gln Glu Glu Tyr

405 410 415

Gln Arg Glu Gly Ile Glu Trp Lys Phe Ile Asp Phe Gly Leu Asp Leu

420 425 430

Gln Pro Thr Ile Asp Leu Ile Asp Lys Pro Met Gly Val Met Ala Leu

435 440 445

Leu Asp Glu Glu Cys Trp Phe Pro Lys Ala Thr Asp Lys Thr Phe Val

450 455 460

Glu Lys Leu Val Gly Ala His Ser Val His Pro Lys Phe Ile Lys Thr

465 470 475 480

Asp Phe Arg Gly Val Ala Asp Phe Ala Val Val His Tyr Ala Gly Lys

485 490 495

Val Asp Tyr Ser Ala Ala Gln Trp Leu Met Lys Asn Met Asp Pro Leu

500 505 510

Asn Glu Asn Val Val Gln Leu Leu Gln Asn Ser Gln Asp Pro Phe Val

515 520 525

Ile His Ile Trp Lys Asp Ala Glu Ile Val Gly Met Ala His Gln Ala

530 535 540

Leu Ser Asp Thr Gln Phe Gly Ala Arg Thr Arg Lys Gly Met Phe Arg

545 550 555 560

Thr Val Ser Gln Leu Tyr Lys Asp Gln Leu Ser Lys Leu Met Ile Thr

565 570 575

Leu Arg Asn Thr Asn Pro Asn Phe Val Arg Cys Ile Leu Pro Asn His

580 585 590

Glu Lys Arg Ala Gly Lys Ile Asp Ala Pro Leu Val Leu Asp Gln Leu

595 600 605

Arg Cys Asn Gly Val Leu Glu Gly Ile Arg Ile Cys Arg Gln Gly Phe

610 615 620

Pro Asn Arg Ile Pro Phe Gln Glu Phe Arg Gln Arg Tyr Glu Leu Leu

625 630 635 640

Thr Pro Asn Val Ile Pro Lys Gly Phe Met Asp Gly Lys Lys Ala Cys

645 650 655

Glu Lys Met Ile Asn Ala Leu Glu Leu Asp Pro Asn Leu Tyr Arg Val

660 665 670

Gly Gln Ser Lys Ile Phe Phe Arg Ala Gly Val Leu Ala His Leu Glu

675 680 685

Glu Glu Arg Asp Tyr Lys Ile Thr Asp Leu Ile Ala Asn Phe Arg Ala

690 695 700

Phe Cys Arg Gly Tyr Leu Ala Arg Arg Asn Tyr Gln Lys Arg Leu Gln

705 710 715 720

Gln Leu Asn Ala Ile Arg Ile Ile Gln Arg Asn Cys Ser Ala Tyr Leu

725 730 735

Lys Leu Arg Asn Trp Gln Trp Trp Arg Leu Tyr Thr Lys Val Lys Pro

740 745 750

Leu Leu Glu Val Thr Lys Gln Glu Glu Lys Leu Thr Gln Lys Glu Asp

755 760 765

Glu Leu Lys Gln Val Arg Glu Lys Leu Asp Asn Gln Val Arg Ser Lys

770 775 780

Glu Glu Tyr Glu Lys Arg Leu Gln Asp Ala Leu Glu Glu Lys Ala Ala

785 790 795 800

Leu Ala Glu Gln Leu Gln Ala Glu Val Glu Leu Cys Ala Glu Ala Glu

805 810 815

Glu Met Arg Ala Arg Leu Ala Val Arg Lys Gln Glu Leu Glu Glu Ile

820 825 830

Leu His Asp Leu Glu Ala Arg Ile Glu Glu Glu Glu Gln Arg Asn Thr

835 840 845

Val Leu Ile Asn Glu Lys Lys Lys Leu Thr Leu Asn Ile Ala Asp Leu

850 855 860

Glu Glu Gln Leu Glu Glu Glu Glu Gly Ala Arg Gln Lys Leu Gln Leu

865 870 875 880

Glu Lys Val Gln Ile Glu Ala Arg Leu Lys Lys Met Glu Glu Asp Leu

885 890 895

Ala Leu Ala Glu Asp Thr Asn Thr Lys Val Val Lys Glu Lys Lys Val

900 905 910

Leu Glu Glu Arg Ala Ser Asp Leu Ala Gln Thr Leu Ala Glu Glu Glu

915 920 925

Glu Lys Ala Lys His Leu Ala Lys Leu Lys Thr Lys His Glu Thr Thr

930 935 940

Ile Ala Glu Leu Glu Glu Arg Leu Leu Lys Asp Asn Gln Gln Arg Gln

945 950 955 960

Glu Met Asp Arg Asn Lys Arg Lys Ile Glu Ser Glu Val Asn Asp Leu

965 970 975

Lys Glu Gln Ile Asn Glu Lys Lys Val Gln Val Glu Glu Leu Gln Leu

980 985 990

Gln Leu Gly Lys Arg Glu Glu Glu Ile Ala Gln Ala Leu Met Arg Ile

995 1000 1005

Asp Glu Glu Gly Ala Gly Lys Ala Gln Thr Gln Lys Ala Leu Arg

1010 1015 1020

Glu Leu Glu Ser Gln Leu Ala Glu Leu Gln Glu Asp Leu Glu Ala

1025 1030 1035

Glu Lys Ala Ala Arg Ala Lys Ala Glu Lys Gln Lys Arg Asp Leu

1040 1045 1050

Asn Glu Glu Leu Glu Ser Leu Lys Asn Glu Leu Leu Asp Ser Leu

1055 1060 1065

Asp Thr Thr Ala Ala Gln Gln Glu Leu Arg Thr Lys Arg Glu His

1070 1075 1080

Glu Leu Ala Thr Leu Lys Lys Thr Leu Glu Glu Glu Thr His Ile

1085 1090 1095

His Glu Val Ser Leu Thr Glu Met Arg His Lys His Thr Gln Glu

1100 1105 1110

Val Ala Ala Leu Asn Glu Gln Leu Glu Gln Leu Lys Lys Ala Lys

1115 1120 1125

Ser Ala Leu Glu Lys Ser Lys Ala Gln Leu Glu Gly Glu Ala Ala

1130 1135 1140

Glu Leu Ala Asn Glu Leu Glu Thr Ala Gly Thr Ser Lys Gly Glu

1145 1150 1155

Ser Glu Arg Lys Arg Lys Gln Ala Glu Ser Ser Leu Gln Glu Leu

1160 1165 1170

Ser Ser Arg Leu Leu Glu Met Glu Arg Thr Lys Ala Glu Leu Gln

1175 1180 1185

Glu Arg Val Gln Lys Leu Ser Ala Glu Ala Asp Ser Val Asn Gln

1190 1195 1200

Gln Leu Glu Ala Ala Glu Leu Lys Ala Ser Ala Ala Leu Lys Ala

1205 1210 1215

Ser Gly Thr Leu Glu Thr Gln Leu Gln Glu Ala Gln Val Leu Leu

1220 1225 1230

Glu Glu Glu Thr Arg Gln Lys Leu Ser Leu Thr Thr Lys Leu Lys

1235 1240 1245

Gly Leu Glu Ser Glu Arg Asp Ala Leu Lys Glu Gln Leu Tyr Glu

1250 1255 1260

Glu Asp Glu Gly Arg Lys Asn Leu Glu Lys Gln Met Ala Ile Leu

1265 1270 1275

Asn Gln Gln Val Ala Glu Ser Lys Lys Lys Ser Glu Glu Glu Thr

1280 1285 1290

Glu Lys Ile Thr Glu Leu Glu Glu Ser Arg Lys Lys Leu Leu Lys

1295 1300 1305

Asp Ile Glu Ile Leu Gln Arg Gln Val Glu Glu Leu Gln Val Thr

1310 1315 1320

Asn Asp Lys Leu Glu Lys Gly Lys Lys Lys Leu Gln Ser Glu Leu

1325 1330 1335

Glu Asp Leu Thr Ile Asp Leu Glu Ser Gln Arg Thr Lys Val Val

1340 1345 1350

Glu Leu Glu Lys Lys Gln Arg Asn Phe Asp Lys Val Leu Ala Glu

1355 1360 1365

Glu Lys Ala Leu Ser Gln Gln Ile Thr His Glu Arg Asp Ala Ala

1370 1375 1380

Glu Arg Glu Ala Arg Glu Lys Glu Thr Arg Val Leu Ser Leu Thr

1385 1390 1395

Arg Glu Leu Asp Glu Phe Met Glu Lys Ile Glu Glu Leu Glu Arg

1400 1405 1410

Ser Lys Arg Gln Leu Gln Ala Glu Leu Asp Glu Leu Val Asn Asn

1415 1420 1425

Gln Gly Thr Thr Asp Lys Ser Val His Glu Leu Glu Arg Ala Lys

1430 1435 1440

Arg Val Leu Glu Ser Gln Leu Ala Glu Gln Lys Ala Gln Asn Glu

1445 1450 1455

Glu Leu Glu Asp Glu Leu Gln Met Thr Glu Asp Ala Lys Leu Arg

1460 1465 1470

Leu Glu Val Asn Met Gln Ala Leu Arg Ala Gln Phe Glu Arg Asp

1475 1480 1485

Leu Gln Gly Lys Glu Glu Ser Gly Glu Glu Lys Arg Arg Gly Leu

1490 1495 1500

Leu Lys Gln Leu Arg Asp Ile Glu Ala Glu Leu Glu Asp Glu Arg

1505 1510 1515

Lys Gln Arg Thr Ala Ala Val Ala Ser Arg Lys Lys Ile Glu Ala

1520 1525 1530

Asp Phe Lys Asp Val Glu Gln Gln Leu Glu Met His Thr Lys Val

1535 1540 1545

Lys Glu Asp Leu Gln Lys Gln Leu Lys Lys Cys Gln Val Gln Leu

1550 1555 1560

Lys Asp Ala Ile Arg Asp Ala Glu Glu Ala Arg Leu Gly Arg Glu

1565 1570 1575

Glu Leu Gln Ala Ala Ala Lys Glu Ala Glu Arg Lys Trp Lys Gly

1580 1585 1590

Leu Glu Thr Glu Leu Ile Gln Val Gln Glu Asp Leu Met Ala Ser

1595 1600 1605

Glu Arg Gln Arg Arg Ala Ala Glu Ala Glu Arg Asp Glu Val Val

1610 1615 1620

Glu Glu Ala Asn Lys Asn Val Lys Ser Leu Ser Asn Leu Leu Asp

1625 1630 1635

Glu Lys Lys Arg Leu Glu Ala Gln Cys Ser Gly Leu Glu Glu Glu

1640 1645 1650

Leu Glu Glu Glu Leu Ser Asn Asn Glu Ala Leu Gln Asp Lys Ala

1655 1660 1665

Arg Lys Ala Gln Leu Ser Val Glu Gln Leu Asn Ala Glu Leu Ala

1670 1675 1680

Ala Glu Arg Ser Asn Val Gln Lys Leu Glu Gly Thr Arg Leu Ser

1685 1690 1695

Met Glu Arg Gln Asn Lys Glu Leu Lys Ala Lys Leu Asn Glu Leu

1700 1705 1710

Glu Thr Leu Gln Arg Asn Lys Phe Lys Ala Asn Ala Ser Leu Glu

1715 1720 1725

Ala Lys Ile Thr Asn Leu Glu Glu Gln Leu Glu Asn Glu Ala Lys

1730 1735 1740

Glu Lys Leu Leu Leu Gln Lys Gly Asn Arg Lys Leu Asp Lys Lys

1745 1750 1755

Ile Lys Asp Leu Leu Val Gln Leu Glu Asp Glu Arg Arg His Ala

1760 1765 1770

Asp Gln Tyr Lys Glu Gln Val Glu Lys Ile Asn Val Arg Val Lys

1775 1780 1785

Thr Leu Lys Arg Thr Leu Asp Asp Ala Glu Glu Glu Met Ser Arg

1790 1795 1800

Glu Lys Thr Gln Lys Arg Lys Ala Leu Arg Glu Leu Glu Asp Leu

1805 1810 1815

Arg Glu Asn Tyr Asp Ser Leu Leu Arg Glu Asn Asp Asn Leu Lys

1820 1825 1830

Asn Lys Leu Arg Arg Gly Gly Gly Ile Ser Gly Ile Ser Ser Arg

1835 1840 1845

Leu Gly Gly Ser Lys Arg Gly Ser Ile Pro Gly Glu Asp Ser Gln

1850 1855 1860

Gly Leu Asn Asn Thr Thr Asp Glu Ser Val Asp Gly Asp Asp Ile

1865 1870 1875

Ser Asn Pro

1880

<210> 336

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 336

Lys Lys Ile Leu Glu Glu Ile Ile Ala Glu Val Asp Ala Asp Gly Ser

1 5 10 15

Gly Gln Leu Glu Phe Glu Glu Phe Val Ala Leu Ala Ala Gly Phe Leu

20 25 30

Thr Glu Asp Glu Thr Gln Asp Ala Glu Ala Met Gln Gln Glu Leu Arg

35 40 45

Glu Ala Phe Arg Leu Tyr Asp Lys Glu Gly Asn Gly Tyr Ile Thr Thr

50 55 60

Asp Val Leu Arg Glu Ile Leu Lys Glu Leu Asp Asp Lys Ile Thr Ser

65 70 75 80

Gln Glu Leu Asp Met Met Ile Ala Glu Ile Asp Ser Asp Gly Ser Gly

85 90 95

Thr Val Asp Phe Asp Glu Phe Met Glu Met Met Thr

100 105

<210> 337

<211> 141

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 337

Ile Pro Ile Met Thr Ile Ala Leu Asn Ala Phe Asp Arg Asp His Ser

1 5 10 15

Gly Ser Ile Pro Thr Asp Met Val Ala Asp Ile Leu Arg Leu Met Gly

20 25 30

Gln Pro Phe Asn Lys Lys Ile Leu Asp Glu Leu Ile Glu Glu Val Asp

35 40 45

Ala Asp Lys Ser Gly Arg Leu Glu Phe Glu Glu Phe Ile Thr Leu Ala

50 55 60

Ala Lys Phe Ile Val Glu Glu Asp Asp Glu Ala Met Gln Lys Glu Leu

65 70 75 80

Arg Glu Ala Phe Arg Leu Tyr Asp Lys Glu Gly Asn Gly Tyr Ile Pro

85 90 95

Thr Ser Cys Leu Lys Glu Ile Leu His Glu Leu Asp Glu Gln Leu Thr

100 105 110

Asn Glu Glu Leu Asp Met Ile Ile Glu Glu Ile Asp Ser Asp Gly Ser

115 120 125

Gly Thr Val Asp Phe Asp Glu Phe Met Glu Met Met Thr

130 135 140

<210> 338

<211> 58

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 338

Trp Val Lys Glu Gly Ala Cys Ser Glu Gln Ser Ser Arg Met Thr Ala

1 5 10 15

Met Asp Asn Ala Ser Lys Asn Ala Ala Glu Met Ile Asp Lys Leu Thr

20 25 30

Leu Thr Phe Asn Arg Thr Arg Gln Ala Val Ile Thr Arg Glu Leu Ile

35 40 45

Glu Ile Ile Ser Gly Ala Ser Ala Leu Glu

50 55

<210> 339

<211> 130

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 339

Met Val Arg Met Asn Val Leu Ser Asp Ala Leu Lys Ser Ile Asn Asn

1 5 10 15

Ala Glu Lys Arg Gly Lys Arg Gln Val Leu Leu Arg Pro Cys Ser Lys

20 25 30

Val Ile Ile Lys Phe Leu Thr Val Met Met Lys Lys Gly Tyr Ile Gly

35 40 45

Glu Phe Glu Ile Val Asp Asp His Arg Ser Gly Lys Ile Val Val Asn

50 55 60

Leu Asn Gly Arg Leu Asn Lys Cys Gly Val Ile Ser Pro Arg Phe Asp

65 70 75 80

Val Pro Ile Thr Gln Ile Glu Lys Trp Thr Asn Asn Leu Leu Pro Ser

85 90 95

Arg Gln Phe Gly Tyr Val Val Leu Thr Thr Ser Gly Gly Ile Met Asp

100 105 110

His Glu Glu Ala Arg Arg Lys His Leu Gly Gly Lys Ile Leu Gly Phe

115 120 125

Phe Phe

130

<210> 340

<211> 131

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 340

Val Asp Gly Gly Leu Asn Ile Pro His Ser Thr Lys Arg Phe Pro Gly

1 5 10 15

Tyr Asp Ser Glu Ser Lys Glu Phe Asn Ala Glu Val His Arg Lys His

20 25 30

Ile Phe Gly Ile His Val Ala Asp Tyr Met Arg Gln Leu Ala Glu Glu

35 40 45

Asp Asp Asp Ala Tyr Lys Lys Gln Phe Ser Gln Tyr Val Lys Asn Gly

50 55 60

Val Thr Ala Asp Ser Ile Glu Ser Ile Tyr Lys Lys Ala His Glu Ala

65 70 75 80

Ile Arg Ala Asp Pro Thr Arg Lys Pro Leu Glu Lys Lys Glu Val Lys

85 90 95

Lys Lys Arg Trp Asn Arg Ala Lys Leu Ser Leu Ser Glu Arg Lys Asn

100 105 110

Thr Ile Asn Gln Lys Lys Ala Thr Tyr Leu Lys Lys Val Glu Ala Gly

115 120 125

Glu Ile Glu

130

<210> 341

<211> 214

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 341

Met Ala Pro Lys Gly Asn Asn Met Ile Pro Asn Gly His Phe His Lys

1 5 10 15

Asp Trp Gln Arg Phe Ile Lys Thr Trp Phe Asn Gln Pro Ala Arg Lys

20 25 30

Leu Arg Arg Arg Asn Lys Arg Leu Glu Lys Ala Gln Arg Leu Ala Pro

35 40 45

Arg Pro Ala Gly Pro Leu Arg Pro Ala Val Arg Cys Pro Thr Val Arg

50 55 60

Tyr His Thr Lys Leu Arg Pro Gly Arg Gly Phe Thr Leu Glu Glu Ile

65 70 75 80

Lys Arg Ala Gly Leu Cys Lys Gly Phe Ala Met Ser Ile Gly Ile Ala

85 90 95

Val Asp Pro Arg Arg Arg Asn Lys Ser Ile Glu Ser Leu Gln Leu Asn

100 105 110

Val Gln Arg Leu Lys Glu Tyr Arg Ala Lys Leu Ile Leu Phe Pro His

115 120 125

Lys Asn Ala Lys Lys Leu Lys Lys Gly Glu Ala Thr Glu Glu Glu Arg

130 135 140

Lys Val Ala Thr Gln Gln Pro Leu Pro Val Met Pro Ile Lys Gln Pro

145 150 155 160

Val Ile Lys Phe Lys Ala Arg Val Ile Thr Asp Asp Glu Lys Lys Tyr

165 170 175

Ser Ala Phe Thr Ala Leu Arg Lys Gly Arg Ala Asp Gln Arg Leu Val

180 185 190

Gly Ile Arg Ala Lys Arg Ala Lys Glu Ala Ala Glu Asn Ala Glu Asp

195 200 205

Pro Ser Lys Ala Pro Lys

210

<210> 342

<211> 134

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 342

Met Asp Ile Glu Glu Pro Ala Ala Ala Pro Thr Glu Pro Ser Asp Val

1 5 10 15

Asn Thr Ala Leu Gln Glu Val Leu Lys Ala Ala Leu Gln His Gly Val

20 25 30

Val Val His Gly Ile His Glu Ser Ala Lys Ala Leu Asp Lys Arg Gln

35 40 45

Ala Leu Leu Cys Val Leu Ala Glu Asn Cys Asp Glu Pro Met Tyr Lys

50 55 60

Lys Leu Val Gln Ala Leu Cys Ser Glu His His Ile Pro Leu Val Lys

65 70 75 80

Val Asp Ser Asn Lys Lys Leu Gly Glu Trp Thr Gly Leu Cys Lys Ile

85 90 95

Asp Lys Thr Gly Lys Ser Arg Lys Ile Val Gly Cys Ser Cys Val Val

100 105 110

Ile Lys Asp Trp Gly Glu Asp Thr Pro His Leu Asp Leu Leu Lys Asp

115 120 125

Tyr Ile Arg Asp Val Phe

130

<210> 343

<211> 148

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 343

Met Lys Met Asn Lys Leu Val Thr Ser Ser Arg Arg Lys Asn Arg Lys

1 5 10 15

Arg His Phe Thr Ala Pro Ser His Ile Arg Arg Lys Leu Met Ser Ala

20 25 30

Pro Leu Ser Lys Glu Leu Arg Gln Lys Tyr Asn Val Arg Thr Met Pro

35 40 45

Val Arg Lys Asp Asp Glu Val Gln Val Val Arg Gly His Tyr Lys Gly

50 55 60

Gln Gln Val Gly Lys Val Leu Gln Val Tyr Arg Lys Lys Phe Ile Ile

65 70 75 80

Tyr Ile Glu Arg Ile Gln Arg Glu Lys Ala Asn Gly Ala Ser Val Tyr

85 90 95

Val Gly Ile His Pro Ser Lys Cys Val Ile Val Lys Leu Lys Val Asp

100 105 110

Lys Asp Arg Lys Glu Ile Leu Asp Arg Arg Ser Lys Gly Arg Asp Leu

115 120 125

Ala Leu Gly Lys Asp Lys Gly Lys Tyr Thr Glu Asp Ser Thr Thr Ala

130 135 140

Met Asp Thr Ser

145

<210> 344

<211> 65

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 344

Met Glu Lys Pro Val Val Leu Ala Arg Val Ile Lys Ile Leu Gly Arg

1 5 10 15

Thr Gly Ser Gln Gly Gln Cys Thr Gln Val Lys Val Glu Phe Ile Gly

20 25 30

Glu Gln Asn Arg Gln Ile Ile Arg Asn Val Lys Gly Pro Val Arg Glu

35 40 45

Gly Asp Ile Leu Thr Leu Leu Glu Ser Glu Arg Glu Ala Arg Arg Leu

50 55 60

Arg

65

<210> 345

<211> 229

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 345

Leu Phe Tyr Phe Pro Phe Ser Arg Lys Trp Gly Asp Val Gln Arg Gly

1 5 10 15

Val Ile Gly Thr Val Lys Thr Ser His Thr Pro Lys Ser Arg Phe Cys

20 25 30

Arg Gly Val Pro Asp Pro Lys Ile Arg Ile Phe Asp Leu Gly Lys Lys

35 40 45

Lys Ala Arg Val Glu Asp Phe Pro Leu Cys Val His Leu Val Ser Asp

50 55 60

Glu Tyr Glu Gln Leu Ser Ser Glu Ala Leu Glu Ala Gly Arg Ile Cys

65 70 75 80

Cys Asn Lys Tyr Leu Val Lys Asn Cys Gly Lys Asp Gln Phe His Ile

85 90 95

Arg Met Arg Leu His Pro Phe His Val Ile Arg Ile Asn Lys Met Leu

100 105 110

Ser Cys Ala Gly Ala Asp Arg Leu Gln Thr Gly Met Arg Gly Ala Phe

115 120 125

Gly Lys Pro Gln Gly Thr Val Ala Arg Val Arg Ile Gly Gln Pro Ile

130 135 140

Met Ser Val Arg Ser Ser Asp Arg Tyr Lys Ala Ala Val Ile Lys Ala

145 150 155 160

Leu Arg Arg Ala Lys Phe Lys Phe Pro Gly Arg Gln Lys Ile Tyr Val

165 170 175

Ser Lys Lys Trp Gly Phe Thr Lys Phe Asp Arg Glu Glu Tyr Glu Gly

180 185 190

Leu Arg Asn Asp Asn Lys Leu Ala Asn Asp Gly Cys Asn Val Lys Leu

195 200 205

Arg Pro Asp His Gly Pro Leu Gln Ala Trp Arg Lys Ala Gln Leu Asp

210 215 220

Ile Ala Ala Gly Leu

225

<210> 346

<211> 220

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 346

Met Gly Arg Arg Pro Ala Arg Cys Tyr Arg Tyr Cys Lys Asn Lys Pro

1 5 10 15

Tyr Pro Lys Ser Arg Phe Cys Arg Gly Val Pro Asp Pro Lys Ile Arg

20 25 30

Ile Phe Asp Leu Gly Lys Lys Lys Ala Arg Val Glu Asp Phe Pro Leu

35 40 45

Cys Val His Leu Val Ser Asp Glu Tyr Glu Gln Leu Ser Ser Glu Ala

50 55 60

Leu Glu Ala Gly Arg Ile Cys Cys Asn Lys Tyr Leu Val Lys Asn Cys

65 70 75 80

Gly Lys Asp Gln Phe His Ile Arg Met Arg Leu His Pro Phe His Val

85 90 95

Ile Arg Ile Asn Lys Met Leu Ser Cys Ala Gly Ala Asp Arg Leu Gln

100 105 110

Thr Gly Met Arg Gly Ala Phe Gly Lys Pro Gln Gly Thr Val Ala Arg

115 120 125

Val Arg Ile Gly Gln Pro Ile Met Ser Val Arg Ser Ser Asp Arg Tyr

130 135 140

Lys Ala Ala Val Ile Glu Ala Leu Arg Arg Ala Lys Phe Lys Phe Pro

145 150 155 160

Gly Arg Gln Lys Ile Tyr Val Ser Lys Lys Trp Gly Phe Thr Lys Phe

165 170 175

Asp Arg Glu Glu Tyr Glu Gly Leu Arg Asn Asp Asn Lys Leu Ala Asn

180 185 190

Gly Gly Cys Asn Val Lys Leu Arg Pro Asp His Gly Pro Leu Gln Ala

195 200 205

Trp Arg Lys Ala Gln Leu Asp Ile Ala Ala Gly Leu

210 215 220

<210> 347

<211> 159

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 347

Met Thr Asn Ser Lys Gly Tyr Arg Arg Gly Thr Arg Asp Leu Phe Ser

1 5 10 15

Arg Pro Phe Arg His His Gly Val Ile Pro Leu Ser Thr Tyr Met Lys

20 25 30

Val Tyr Arg Val Gly Asp Ile Val Ser Ile Lys Gly Asn Gly Ala Val

35 40 45

Gln Lys Gly Met Pro His Lys Val Tyr His Gly Lys Thr Gly Arg Val

50 55 60

Tyr Asn Val Thr Pro Arg Ala Leu Gly Val Ile Val Asn Lys Arg Val

65 70 75 80

Arg Gly Lys Ile Leu Pro Lys Arg Ile Asn Ile Arg Ile Glu His Val

85 90 95

Asn His Ser Lys Cys Arg Glu Asp Phe Leu Lys Arg Val Arg Glu Asn

100 105 110

Glu Arg Leu Arg Lys Phe Ala Lys Glu Thr Gly Thr Arg Val Glu Leu

115 120 125

Lys Arg Gln Pro Ala Gln Pro Arg Pro Ala His Phe Val Gln Ala Lys

130 135 140

Glu Val Pro Glu Leu Leu Ala Pro Ile Pro Tyr Glu Phe Ile Ala

145 150 155

<210> 348

<211> 131

<212> БЕЛОК

<213> Lygus hesperus

<400> 348

Thr Tyr Met Lys Val Tyr Arg Val Gly Asp Ile Val Ser Ile Lys Gly

1 5 10 15

Asn Gly Ala Val Gln Lys Gly Met Pro His Lys Val Tyr His Gly Lys

20 25 30

Thr Gly Arg Val Tyr Asn Val Thr Pro Arg Ala Leu Gly Val Ile Val

35 40 45

Asn Lys Arg Val Arg Gly Lys Ile Leu Pro Lys Arg Ile Asn Ile Arg

50 55 60

Ile Glu His Val Asn His Ser Lys Cys Arg Glu Asp Phe Leu Lys Arg

65 70 75 80

Val Arg Glu Asn Glu Arg Leu Arg Lys Phe Ala Lys Glu Thr Gly Thr

85 90 95

Arg Val Glu Leu Lys Arg Gln Pro Ala Gln Pro Arg Pro Ala His Phe

100 105 110

Val Gln Ala Lys Glu Val Pro Glu Leu Leu Ala Pro Ile Pro Tyr Glu

115 120 125

Phe Ile Ala

130

<210> 349

<211> 150

<212> БЕЛОК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 349

Lys Lys Ala Lys Lys Gly Phe Met Thr Pro Glu Arg Lys Lys Lys Leu

1 5 10 15

Arg Leu Leu Leu Arg Lys Lys Ala Ala Glu Glu Leu Lys Lys Glu Gln

20 25 30

Glu Arg Lys Ala Ala Glu Arg Arg Arg Ile Ile Glu Glu Arg Cys Gly

35 40 45

Lys Pro Lys Leu Ile Asp Glu Ala Asn Glu Glu Gln Val Arg Asn Tyr

50 55 60

Cys Lys Leu Tyr His Gly Arg Ile Ala Lys Leu Glu Asp Gln Lys Phe

65 70 75 80

Asp Leu Glu Tyr Leu Val Lys Lys Lys Asp Met Glu Ile Ala Glu Leu

85 90 95

Asn Ser Gln Val Asn Asp Leu Arg Gly Lys Phe Val Lys Pro Thr Leu

100 105 110

Lys Lys Val Ser Lys Tyr Glu Asn Lys Phe Ala Lys Leu Gln Lys Lys

115 120 125

Ala Ala Glu Phe Asn Phe Arg Asn Gln Leu Lys Val Val Lys Lys Lys

130 135 140

Glu Phe Thr Leu Glu Glu

145 150

<210> 350

<211> 279

<212> БЕЛОК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 350

Gln Trp Tyr Gln Arg Arg Val Arg Gly Asp Ile Glu Glu Lys Arg Gln

1 5 10 15

Arg Leu Glu Glu Ala Glu Lys Lys Arg Gln Ala Met Met Gln Ala Leu

20 25 30

Lys Asp Gln Asn Lys Asn Lys Gly Pro Asn Phe Thr Ile Thr Lys Arg

35 40 45

Asp Ala Ser Ser Asn Leu Ser Ala Ala Gln Leu Glu Arg Asn Lys Thr

50 55 60

Lys Glu Gln Leu Glu Glu Glu Lys Lys Ile Ser Leu Ser Ile Arg Ile

65 70 75 80

Lys Pro Leu Val Val Asp Gly Leu Gly Val Asp Lys Leu Arg Leu Lys

85 90 95

Ala Gln Glu Leu Trp Glu Cys Ile Val Lys Leu Glu Thr Glu Lys Tyr

100 105 110

Asp Leu Glu Glu Arg Gln Lys Arg Gln Asp Tyr Asp Leu Lys Glu Leu

115 120 125

Lys Glu Arg Gln Lys Gln Gln Leu Arg His Lys Ala Leu Lys Lys Gly

130 135 140

Leu Asp Pro Glu Ala Leu Thr Gly Lys Tyr Pro Pro Lys Ile Gln Val

145 150 155 160

Ala Ser Lys Tyr Glu Arg Arg Val Asp Thr Arg Ser Tyr Gly Asp Lys

165 170 175

Lys Lys Leu Phe Glu Gly Gly Leu Glu Glu Ile Ile Lys Glu Thr Asn

180 185 190

Glu Lys Ser Trp Lys Glu Lys Phe Gly Gln Phe Asp Ser Arg Gln Lys

195 200 205

Ala Arg Leu Pro Lys Trp Phe Gly Glu Arg Pro Gly Lys Lys Pro Gly

210 215 220

Asp Pro Glu Thr Pro Glu Gly Glu Glu Glu Gly Lys Gln Val Ile Asp

225 230 235 240

Glu Asp Asp Asp Leu Lys Glu Pro Val Ile Glu Ala Glu Ile Glu Glu

245 250 255

Glu Glu Glu Glu Glu Glu Val Glu Val Asp Glu Glu Glu Glu Asp Asp

260 265 270

Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu

275

<210> 351

<211> 286

<212> БЕЛОК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 351

Ala Leu Gln Asn Glu Leu Glu Glu Ser Arg Thr Leu Leu Glu Gln Ala

1 5 10 15

Asp Arg Ala Arg Arg Gln Ala Glu Gln Glu Leu Gly Asp Ala His Glu

20 25 30

Gln Leu Asn Asp Leu Gly Ala Gln Asn Gly Ser Leu Ser Ala Ala Lys

35 40 45

Arg Lys Leu Glu Thr Glu Leu Gln Thr Leu His Ser Asp Leu Asp Glu

50 55 60

Leu Leu Asn Glu Ala Lys Asn Ser Glu Glu Lys Ala Lys Lys Ala Met

65 70 75 80

Val Asp Ala Ala Arg Leu Ala Asp Glu Leu Arg Ala Glu Gln Asp His

85 90 95

Ala Gln Thr Gln Glu Lys Leu Arg Lys Ala Leu Glu Ser Gln Ile Lys

100 105 110

Asp Leu Gln Val Arg Leu Asp Glu Ala Glu Ala Asn Ala Leu Lys Gly

115 120 125

Gly Lys Lys Ala Ile Ala Lys Leu Glu Gln Arg Val Arg Glu Leu Glu

130 135 140

Asn Glu Leu Asp Gly Glu Gln Arg Arg His Ala Asp Ala Gln Lys Asn

145 150 155 160

Leu Arg Lys Ser Glu Arg Arg Ile Lys Glu Leu Ser Leu Gln Ala Glu

165 170 175

Glu Asp Arg Lys Asn His Glu Lys Met Gln Asp Leu Val Asp Lys Leu

180 185 190

Gln Gln Lys Ile Lys Thr His Lys Arg Gln Ile Glu Glu Ala Glu Glu

195 200 205

Ile Ala Ala Leu Asn Leu Ala Lys Phe Arg Lys Ala Gln Gln Glu Leu

210 215 220

Glu Glu Ala Glu Glu Arg Ala Asp Leu Ala Glu Gln Ala Ile Val Lys

225 230 235 240

Phe Arg Thr Lys Gly Arg Ser Gly Ser Ala Ala Arg Gly Ala Ser Pro

245 250 255

Ala Pro Gln Arg Gln Arg Pro Thr Phe Gly Met Gly Asp Ser Leu Gly

260 265 270

Gly Ala Phe Pro Pro Arg Phe Asp Leu Ala Pro Asp Phe Glu

275 280 285

<210> 352

<211> 197

<212> БЕЛОК

<213> nilaparvata lugens

<400> 352

Met Ala Asp Asp Glu Ala Lys Lys Ala Lys Gln Ala Glu Ile Asp Arg

1 5 10 15

Lys Arg Ala Glu Val Arg Lys Arg Met Glu Glu Ala Ser Lys Ala Lys

20 25 30

Lys Ala Lys Lys Gly Phe Met Thr Pro Asp Arg Lys Lys Lys Leu Arg

35 40 45

Leu Leu Leu Arg Lys Lys Ala Ala Glu Glu Leu Lys Lys Glu Gln Glu

50 55 60

Arg Lys Ala Ala Glu Arg Arg Arg Ile Ile Glu Glu Arg Cys Gly Lys

65 70 75 80

Ala Val Asp Leu Asp Asp Gly Ser Glu Glu Lys Val Lys Ala Thr Leu

85 90 95

Lys Thr Tyr His Asp Arg Ile Gly Lys Leu Glu Asp Glu Lys Phe Asp

100 105 110

Leu Glu Tyr Ile Val Lys Lys Lys Asp Phe Glu Ile Ala Asp Leu Asn

115 120 125

Ser Gln Val Asn Asp Leu Arg Gly Lys Phe Val Lys Pro Thr Leu Lys

130 135 140

Lys Val Ser Lys Tyr Glu Asn Lys Phe Ala Lys Leu Gln Lys Lys Ala

145 150 155 160

Ala Glu Phe Asn Phe Arg Asn Gln Leu Lys Val Val Lys Lys Lys Glu

165 170 175

Phe Thr Leu Glu Glu Glu Asp Lys Glu Pro Lys Lys Ser Glu Lys Ala

180 185 190

Glu Trp Gln Lys Lys

195

<210> 353

<211> 184

<212> БЕЛОК

<213> nilaparvata lugens

<400> 353

Met Met Ala Ala Leu Lys Asp Gln Ser Lys Ser Lys Gly Pro Asn Phe

1 5 10 15

Thr Val Asn Lys Lys Thr Asp Leu Asn Met Thr Ser Ala Gln Met Glu

20 25 30

Arg Asn Lys Thr Lys Glu Gln Leu Glu Glu Glu Lys Lys Ile Ser Leu

35 40 45

Ser Phe Arg Ile Lys Pro Leu Ala Ile Glu Asn Met Ser Ile Asn Ala

50 55 60

Leu Arg Ala Lys Ala Gln Glu Leu Trp Asp Cys Ile Val Lys Leu Glu

65 70 75 80

Thr Glu Lys Tyr Asp Leu Glu Glu Arg Gln Lys Arg Gln Asp Tyr Asp

85 90 95

Leu Lys Glu Leu Lys Glu Arg Gln Lys Gln Gln Leu Arg His Lys Ala

100 105 110

Leu Lys Lys Gly Leu Asp Pro Glu Ala Leu Thr Gly Lys Tyr Pro Pro

115 120 125

Lys Ile Gln Val Ala Ser Lys Tyr Glu Arg Arg Val Asp Thr Arg Ser

130 135 140

Tyr Asp Asp Lys Lys Lys Leu Phe Glu Gly Gly Trp Asp Thr Leu Thr

145 150 155 160

Ser Glu Thr Asn Glu Lys Ile Trp Lys Ser Arg Asn Asp Gln Phe Ser

165 170 175

Asn Arg Ser Lys Ala Lys Leu Pro

180

<210> 354

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> nilaparvata lugens

<400> 354

Ala Phe Asp Arg Glu Arg Ser Gly Ser Ile Pro Thr Asp Met Val Ala

1 5 10 15

Asp Ile Leu Arg Leu Met Gly Gln Pro Phe Asn Lys Lys Ile Leu Asp

20 25 30

Glu Leu Ile Glu Glu Val Asp Ala Asp Lys Ser Gly Arg Leu Glu Phe

35 40 45

Asp Glu Phe Val Thr Leu Ala Ala Lys Phe Ile Val Glu Glu Asp Asp

50 55 60

Glu Ala Met Gln Lys Glu Leu Lys Glu Ala Phe Arg Leu Tyr Asp Lys

65 70 75 80

Glu Gly Asn Gly Tyr Ile Pro Thr Ser Cys Leu Lys Glu Ile Leu Arg

85 90 95

Glu Leu Asp Asp Gln Leu Thr Asn Glu Glu Leu Asn Met Met Ile Asp

100 105 110

Glu Ile Asp Ser Asp Gly Ser Gly Thr Val

115 120

<210> 355

<211> 73

<212> БЕЛОК

<213> nilaparvata lugens

<400> 355

Val Lys Thr Leu Thr Gly Lys Thr Ile Thr Leu Glu Val Glu Pro Ser

1 5 10 15

Asp Thr Ile Glu Asn Val Lys Ala Lys Ile Gln Asp Lys Glu Gly Ile

20 25 30

Pro Pro Asp Gln Gln Arg Leu Ile Phe Ala Gly Lys Gln Leu Glu Asp

35 40 45

Gly Arg Thr Leu Ser Asp Tyr Asn Ile Gln Lys Glu Ser Thr Leu His

50 55 60

Leu Val Leu Arg Leu Arg Gly Gly Thr

65 70

<210> 356

<211> 253

<212> БЕЛОК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 356

Met Ala Asp Asp Glu Ala Lys Lys Ala Lys Gln Ala Glu Ile Asp Arg

1 5 10 15

Lys Arg Ala Glu Val Arg Lys Arg Met Glu Glu Ala Ser Lys Ala Lys

20 25 30

Lys Ala Lys Lys Gly Phe Met Thr Pro Asp Arg Lys Lys Lys Leu Arg

35 40 45

Leu Leu Leu Lys Lys Lys Ala Ala Glu Glu Leu Lys Lys Glu Gln Glu

50 55 60

Arg Lys Ala Ala Glu Arg Arg Arg Ile Ile Glu Glu Arg Cys Gly Gln

65 70 75 80

Pro Lys Asn Ile Asp Asp Ala Gly Glu Glu Glu Leu Ala Glu Ile Cys

85 90 95

Glu Glu Leu Trp Lys Arg Val Tyr Thr Val Glu Gly Ile Lys Phe Asp

100 105 110

Leu Glu Arg Asp Ile Arg Met Lys Val Phe Glu Ile Ser Glu Leu Asn

115 120 125

Ser Gln Val Asn Asp Leu Arg Gly Lys Phe Val Lys Pro Thr Leu Lys

130 135 140

Lys Val Ser Lys Tyr Glu Asn Lys Phe Ala Lys Leu Gln Lys Lys Ala

145 150 155 160

Ala Glu Phe Asn Phe Arg Asn Gln Leu Lys Val Val Lys Lys Lys Glu

165 170 175

Phe Thr Leu Glu Glu Glu Asp Lys Glu Lys Lys Pro Asp Trp Ser Lys

180 185 190

Lys Gly Asp Glu Lys Lys Gly Glu Gly Glu Asp Gly Asp Gly Thr Glu

195 200 205

Asp Glu Lys Thr Asp Asp Gly Leu Thr Thr Glu Gly Glu Ser Val Ala

210 215 220

Gly Asp Leu Thr Asp Ala Thr Glu Asp Ala Gln Ser Asp Asn Glu Ile

225 230 235 240

Leu Glu Pro Glu Pro Val Val Glu Pro Glu Pro Glu Pro

245 250

<210> 357

<211> 179

<212> БЕЛОК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 357

Val Met Arg Cys Gly Lys Lys Lys Val Trp Leu Asp Pro Asn Glu Ile

1 5 10 15

Asn Glu Ile Ala Asn Thr Asn Ser Arg Gln Asn Ile Arg Lys Leu Ile

20 25 30

Lys Asp Gly Leu Ile Ile Lys Lys Pro Val Ala Val His Ser Arg Ala

35 40 45

Arg Ala Arg Lys Asn Ala Asp Ala Arg Arg Lys Gly Arg His Cys Gly

50 55 60

Phe Gly Lys Arg Lys Gly Thr Ala Asn Ala Arg Thr Pro Gln Lys Asp

65 70 75 80

Leu Trp Val Lys Arg Met Arg Val Leu Arg Arg Leu Leu Lys Lys Tyr

85 90 95

Arg Glu Ala Lys Lys Ile Asp Asn His Leu Tyr His Gln Leu Tyr Met

100 105 110

Lys Ala Lys Gly Asn Val Phe Lys Asn Lys Arg Val Leu Met Glu Phe

115 120 125

Ile His Lys Lys Lys Ala Glu Lys Ala Arg Ala Lys Met Leu Ser Asp

130 135 140

Gln Ala Glu Ala Arg Arg Gln Lys Val Lys Glu Ala Arg Lys Arg Lys

145 150 155 160

Glu Ala Arg Phe Leu Gln Asn Arg Lys Glu Leu Leu Ala Ala Tyr Ala

165 170 175

Arg Glu Asp

<210> 358

<211> 275

<212> БЕЛОК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 358

Gly Leu Glu Val Glu Ser Ser Asp Ser Ile Glu Asn Val Lys Ala Lys

1 5 10 15

Ile Gln Asp Lys Glu Gly Ile Pro Pro Asp Gln Gln Arg Leu Ile Phe

20 25 30

Ala Gly Lys Gln Leu Glu Asp Gly Arg Thr Leu Ser Asp Tyr Asn Ile

35 40 45

Gln Lys Glu Ser Thr Leu His Leu Val Leu Arg Leu Arg Gly Gly Met

50 55 60

Gln Ile Phe Val Lys Thr Leu Thr Gly Lys Thr Ile Thr Leu Glu Val

65 70 75 80

Glu Ser Ser Asp Ser Ile Glu Asn Val Lys Ala Lys Ile Gln Asp Lys

85 90 95

Glu Gly Ile Pro Pro Asp Gln Gln Arg Leu Ile Phe Ala Gly Lys Gln

100 105 110

Leu Glu Asp Gly Arg Thr Leu Ser Asp Tyr Asn Ile Gln Lys Glu Ser

115 120 125

Thr Leu His Leu Val Leu Arg Leu Arg Gly Gly Met Gln Ile Phe Val

130 135 140

Lys Thr Leu Thr Gly Lys Thr Ile Thr Leu Glu Val Glu Ser Ser Asp

145 150 155 160

Ser Ile Glu Asn Val Lys Ala Lys Ile Gln Asp Lys Glu Gly Ile Pro

165 170 175

Pro Asp Gln Gln Arg Leu Ile Phe Ala Gly Lys Gln Leu Glu Asp Gly

180 185 190

Arg Thr Leu Ser Asp Tyr Asn Ile Gln Lys Glu Ser Thr Leu His Leu

195 200 205

Val Leu Arg Leu Arg Gly Gly Met Gln Ile Phe Val Lys Thr Leu Thr

210 215 220

Gly Lys Thr Ile Thr Leu Glu Val Glu Ser Ser Asp Ser Ile Glu Asn

225 230 235 240

Val Lys Ala Lys Ile Gln Asp Lys Glu Gly Ile Pro Pro Asp Gln Gln

245 250 255

Arg Leu Ile Phe Ala Gly Lys Gln Leu Glu Asp Gly Arg Thr Leu Ser

260 265 270

Asp Tyr Asn

275

<210> 359

<211> 56

<212> БЕЛОК

<213> Acyrthosiphon pisum

<400> 359

Asp Leu Leu His Pro Thr Ala Ile Glu Glu Arg Arg Lys His Lys Leu

1 5 10 15

Lys Arg Leu Val Gln His Pro Asn Ser Phe Phe Met Asp Val Lys Cys

20 25 30

Pro Gly Cys Tyr Lys Ile Thr Thr Val Phe Ser His Ala Gln Ser Val

35 40 45

Val Ile Cys Thr Gly Cys Ser Thr

50 55

<210> 360

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 360

atcatgcagg cgtacgcccg 20

<210> 361

<211> 19

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 361

cggagggggc gagatcact 19

<210> 362

<211> 62

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Ампликон

<400> 362

atcatgcagg cgtacgcccg agaagacgag gctgccgtca aaaagtgatc tcgccccctc 60

cg 62

<210> 363

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 363

tgtgttggct actggtggct ac 22

<210> 364

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 364

tcggatggaa ctggacaaat tcaag 25

<210> 365

<211> 137

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Ампликон

<400> 365

tgtgttggct actggtggct acggcagagc ttacttttca tgcacttcag ctcacacttg 60

cacgggagat ggccaagcaa tggtttcacg agctgggctt cccaacgaag atcttgaatt 120

tgtccagttc catccga 137

<210> 366

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 366

gcaacccgtg ttctccaaag c 21

<210> 367

<211> 28

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 367

tcaactcgta ttctcgtact ttcaaacc 28

<210> 368

<211> 146

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Ампликон

<400> 368

gcaacccgtg ttctccaaag ccagatacac tgtgcgatcc ttcggtatca ggcgtaacga 60

aaaaatcgcc gttcactgca ctgtcagggg cgccaaagca gaggaaattc tggagcgtgg 120

tttgaaagta cgagaatacg agttga 146

<210> 369

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 369

atggccgacg atgaagctaa g 21

<210> 370

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 370

tggttctggt tcgggttcaa 20

<210> 371

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 371

cggtaatgcg atgcggtaag 20

<210> 372

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 372

tcatcttctc gggcgtatgc 20

<210> 373

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 373

tttggaagtt gagtcatcag attcc 25

<210> 374

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 374

gttgtagtcg gaaagggtac gtcc 24

<210> 375

<211> 20

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 375

attgtggaac atccggtaca 20

<210> 376

<211> 23

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 376

aagacttgct tcatcctact gca 23

<210> 377

<211> 28

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<220>

<221> иной_признак

<222> (20)..(20)

<223> n представляет собой a, c, g или t

<400> 377

ccaagaaggc caagaagggn ttyatgac 28

<210> 378

<211> 29

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 378

tcctcctcca gggtgaactc yttyttytt 29

<210> 379

<211> 26

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<220>

<221> иной_признак

<222> (21)..(21)

<223> n представляет собой a, c, g или t

<220>

<221> иной_признак

<222> (24)..(24)

<223> n представляет собой a, c, g или t

<400> 379

gccaagaagg gcttcatgac nccnga 26

<210> 380

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 380

gaagttgaac tcggcggcyt tyttytg 27

<210> 381

<211> 26

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<220>

<221> иной_признак

<222> (24)..(24)

<223> n представляет собой a, c, g или t

<400> 381

ctggaggagg ccgagaaraa rmgnca 26

<210> 382

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<220>

<221> иной_признак

<222> (14)..(14)

<223> n представляет собой a, c, g или t

<400> 382

tgccgggccg ctcnccraac ca 22

<210> 383

<211> 28

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<220>

<221> иной_признак

<222> (20)..(20)

<223> n представляет собой a, c, g или t

<220>

<221> иной_признак

<222> (23)..(23)

<223> n представляет собой a, c, g или t

<400> 383

agatcgccat cctgaggaan gcnttyra 28

<210> 384

<211> 31

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 384

cggtcatcat ctccatgaac tcrtcraart c 31

<210> 385

<211> 170

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Интрон

<400> 385

tctagaaggt aagtgtacac actacatttt catgaacatt attgcgaccg ttgagattct 60

cattgtttgg tgattgatta tctaaagtag aagcatgaat agatataaca taaactagta 120

actaatgggt tagttatggg tatacttcat gcttttctct caggctcgag 170

<210> 386

<211> 521

<212> ДНК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 386

tcgatttttc atttttcttt tattatttgg agtgggcctg ttgtggtcgt tatcaaaatg 60

ggtaaaataa tgaaatctgg taaagtcgta ttggtccttg gaggccgata cgctggaaga 120

aaggcagtag tcataaaaaa ttacgatgat gggacgtcag ataaacaata tggacatgcc 180

gtggtggctg gaatcgatag gtaccctaga aaaatccaca aacgtatggg caaaggaaaa 240

atgcacaaga ggtccaaaat caagcccttc cttaaggtgc tcaactataa ccatttgatg 300

cctacaagat attcagtgga tttgacttcg gacttgaaag tggcgcccaa agacctcaag 360

gatccagtga agaggaagaa gattaggttc caaaccagag ttaaattcga agagagatac 420

aagcaaggaa aacacaaatg gtttttccag aaattgaggt tctagattct ataaatttaa 480

ccattttgta atccacccac ctttttgttc aaataaattg t 521

<210> 387

<211> 475

<212> ДНК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 387

tatcgcgaaa aatatacaac ttacaaaatg aggaacacgt atgagttgag ccctaaagaa 60

gcagcaaatt tcactcgtcg aaatttagca gatactcttc gaagcaggag tccatatcat 120

gttaatcttc tcttggctgg atatgacaag aaagacgggg ctcagttgta ttacatggat 180

tatctagcgt ctgttgctag tgttgattac gctgcccatg gatacggagg atatttctcc 240

ctttccataa tggatcgcaa ttatttgaaa accctgtcga aagatcaagg atacgaactt 300

ctgaaggaat gtgttaaaga agttcaaaag agacttgcta taaatttacc aaatttcaaa 360

gttcaggtta ttgataaaga tggtattaag gatatgccta atataacttc aaaaggtttg 420

aattgattaa gcaacttcag tttcagattt ttttctaaat aaacatttaa agtgt 475

<210> 388

<211> 467

<212> ДНК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 388

gcggggactg gatacatctc taaaacacag aaaaatgaaa ttcttcaagt caggaatata 60

ttctgttgta tttttggcaa ttatattttc tttggtcact gaggaagtgg aaggtcgaag 120

gactatttta agagggcgta aaacactgac gagaacctat tttcgtgaca atgcagtccc 180

agcatacgtc atagtgatac tcgttggaat aggagaaatc attttgggag ctatcctgta 240

tgttataatg aggaaaacga taatagattt tcctttatca gggagttacg cagtggcccc 300

tactcaagaa gcataaatcc cattgaaatt gtgactgttt actttctttg gaaaaatgtg 360

tataataaat acaattcatt tataatattt atatttggaa cttaaaatac ttacaaaatt 420

accatttaca tgatcaaata actaataaag ttctgtctca attataa 467

<210> 389

<211> 906

<212> ДНК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 389

ggattggaag taaaaatata caattcatgc tgtagctgta gtgtaaaaac tgaactgaaa 60

gccataaaat aaagaccttg caagaaacat gtccaagatt aatgaggtgt ctaatttgta 120

caaacaactg aaatcagaat ggaacacatc caatccaaat ttaagcaaat gtgaaaagct 180

tttgtcagat ttgaagcttg agctaacaca cttaatgttc cttccaactt caaacgccac 240

tgcttcaaaa caagaacttc ttctggcaag agatgttctg gaaattgggg tacaatggag 300

tatagctgca aatgatatac ctgcctttga aagatacatg gcacagttga aatgttatta 360

tttcgattat aagaatcaac ttcccgaatc ttctttcaaa tatcagttac tgggtctgaa 420

tttactattt ttgttatcac aaaatagagt ggcagagttc cacacagaat tagaattgtt 480

gcctgctgac cacattcaga atgatgtata catcaggcac cctccatcta ttgaacagta 540

ccttatggaa ggaagttata ataagatatt tctggcaaag ggaaatgtcc cagcaacaaa 600

ttacaatttt tttatggata tacttctaga tactatcaga ggggagattg cagattgtct 660

agagaaagca tatgaaaaaa tatcaattaa agatgttgct aggatgctat acttgggcag 720

tgaagaatcg gccaaggcct ttgtaacaaa gagtaagaca tggaaattag aaaaggacaa 780

cttctttcac ttcacgcccg aggttaaaaa gacacatgag ccaattctat ccaaagaatt 840

ggcacaacaa gctattgaat atgcaaaaga actggaaatg attgtttaaa gtaataaagt 900

ttttca 906

<210> 390

<211> 135

<212> БЕЛОК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 390

Met Gly Lys Ile Met Lys Ser Gly Lys Val Val Leu Val Leu Gly Gly

1 5 10 15

Arg Tyr Ala Gly Arg Lys Ala Val Val Ile Lys Asn Tyr Asp Asp Gly

20 25 30

Thr Ser Asp Lys Gln Tyr Gly His Ala Val Val Ala Gly Ile Asp Arg

35 40 45

Tyr Pro Arg Lys Ile His Lys Arg Met Gly Lys Gly Lys Met His Lys

50 55 60

Arg Ser Lys Ile Lys Pro Phe Leu Lys Val Leu Asn Tyr Asn His Leu

65 70 75 80

Met Pro Thr Arg Tyr Ser Val Asp Leu Thr Ser Asp Leu Lys Val Ala

85 90 95

Pro Lys Asp Leu Lys Asp Pro Val Lys Arg Lys Lys Ile Arg Phe Gln

100 105 110

Thr Arg Val Lys Phe Glu Glu Arg Tyr Lys Gln Gly Lys His Lys Trp

115 120 125

Phe Phe Gln Lys Leu Arg Phe

130 135

<210> 391

<211> 141

<212> БЕЛОК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 391

Tyr Arg Glu Lys Tyr Thr Thr Tyr Lys Met Arg Asn Thr Tyr Glu Leu

1 5 10 15

Ser Pro Lys Glu Ala Ala Asn Phe Thr Arg Arg Asn Leu Ala Asp Thr

20 25 30

Leu Arg Ser Arg Ser Pro Tyr His Val Asn Leu Leu Leu Ala Gly Tyr

35 40 45

Asp Lys Lys Asp Gly Ala Gln Leu Tyr Tyr Met Asp Tyr Leu Ala Ser

50 55 60

Val Ala Ser Val Asp Tyr Ala Ala His Gly Tyr Gly Gly Tyr Phe Ser

65 70 75 80

Leu Ser Ile Met Asp Arg Asn Tyr Leu Lys Thr Leu Ser Lys Asp Gln

85 90 95

Gly Tyr Glu Leu Leu Lys Glu Cys Val Lys Glu Val Gln Lys Arg Leu

100 105 110

Ala Ile Asn Leu Pro Asn Phe Lys Val Gln Val Ile Asp Lys Asp Gly

115 120 125

Ile Lys Asp Met Pro Asn Ile Thr Ser Lys Gly Leu Asn

130 135 140

<210> 392

<211> 104

<212> БЕЛОК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 392

Arg Gly Leu Asp Thr Ser Leu Lys His Arg Lys Met Lys Phe Phe Lys

1 5 10 15

Ser Gly Ile Tyr Ser Val Val Phe Leu Ala Ile Ile Phe Ser Leu Val

20 25 30

Thr Glu Glu Val Glu Gly Arg Arg Thr Ile Leu Arg Gly Arg Lys Thr

35 40 45

Leu Thr Arg Thr Tyr Phe Arg Asp Asn Ala Val Pro Ala Tyr Val Ile

50 55 60

Val Ile Leu Val Gly Ile Gly Glu Ile Ile Leu Gly Ala Ile Leu Tyr

65 70 75 80

Val Ile Met Arg Lys Thr Ile Ile Asp Phe Pro Leu Ser Gly Ser Tyr

85 90 95

Ala Val Ala Pro Thr Gln Glu Ala

100

<210> 393

<211> 266

<212> БЕЛОК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 393

Met Ser Lys Ile Asn Glu Val Ser Asn Leu Tyr Lys Gln Leu Lys Ser

1 5 10 15

Glu Trp Asn Thr Ser Asn Pro Asn Leu Ser Lys Cys Glu Lys Leu Leu

20 25 30

Ser Asp Leu Lys Leu Glu Leu Thr His Leu Met Phe Leu Pro Thr Ser

35 40 45

Asn Ala Thr Ala Ser Lys Gln Glu Leu Leu Leu Ala Arg Asp Val Leu

50 55 60

Glu Ile Gly Val Gln Trp Ser Ile Ala Ala Asn Asp Ile Pro Ala Phe

65 70 75 80

Glu Arg Tyr Met Ala Gln Leu Lys Cys Tyr Tyr Phe Asp Tyr Lys Asn

85 90 95

Gln Leu Pro Glu Ser Ser Phe Lys Tyr Gln Leu Leu Gly Leu Asn Leu

100 105 110

Leu Phe Leu Leu Ser Gln Asn Arg Val Ala Glu Phe His Thr Glu Leu

115 120 125

Glu Leu Leu Pro Ala Asp His Ile Gln Asn Asp Val Tyr Ile Arg His

130 135 140

Pro Pro Ser Ile Glu Gln Tyr Leu Met Glu Gly Ser Tyr Asn Lys Ile

145 150 155 160

Phe Leu Ala Lys Gly Asn Val Pro Ala Thr Asn Tyr Asn Phe Phe Met

165 170 175

Asp Ile Leu Leu Asp Thr Ile Arg Gly Glu Ile Ala Asp Cys Leu Glu

180 185 190

Lys Ala Tyr Glu Lys Ile Ser Ile Lys Asp Val Ala Arg Met Leu Tyr

195 200 205

Leu Gly Ser Glu Glu Ser Ala Lys Ala Phe Val Thr Lys Ser Lys Thr

210 215 220

Trp Lys Leu Glu Lys Asp Asn Phe Phe His Phe Thr Pro Glu Val Lys

225 230 235 240

Lys Thr His Glu Pro Ile Leu Ser Lys Glu Leu Ala Gln Gln Ala Ile

245 250 255

Glu Tyr Ala Lys Glu Leu Glu Met Ile Val

260 265

<210> 394

<211> 750

<212> ДНК

<213> Leptinotarsa decemlineata

<400> 394

cgcccagcag tggtatcaac gcagagtacg cgggagacat tcaagtcttg tgatagtgca 60

ggcacggcag ttcaaataaa ctggtgcctt caatttattt atatatttat acttttttac 120

tagaaaccaa atactaacca atcaacatgt gtgacgaaga ggttgccgca ttagtcgtag 180

acaatggatc tggtatgtgc aaagctggat ttgctgggga tgatgccccc cgtgcagttt 240

tcccatccat tgttggtcgt ccaagacatc aaggagttat ggtaggaatg ggccaaaagg 300

actcgtatgt aggagatgaa gcccaaagca aaagaggtat ccttaccttg aaatacccca 360

ttgaacacgg tattgtcaca aactgggatg atatggagaa aatctggcac cataccttct 420

acaatgaact tcgagttgcc cccgaagagc accctgtttt gttgacagag gcaccattga 480

accccaaagc caacagggag aagatgaccc agatcatgtt tgaaaccttc aatacccccg 540

ccatgtacgt cgccatccaa gctgtattgt ctctgtatgc ttctggtcgt acaactggta 600

ttgtgctgga ttctggagat ggtgtttctc acacagtacc aatctatgaa ggttatgccc 660

ttcctcatgc catccttcgt ttggacttgg ctggtagaga cttgactgat taccttatga 720

aaattctgac tgaacgtggt tactctttca 750

<210> 395

<211> 204

<212> БЕЛОК

<213> Leptinotarsa decemlineata

<400> 395

Pro Ile Asn Met Cys Asp Glu Glu Val Ala Ala Leu Val Val Asp Asn

1 5 10 15

Gly Ser Gly Met Cys Lys Ala Gly Phe Ala Gly Asp Asp Ala Pro Arg

20 25 30

Ala Val Phe Pro Ser Ile Val Gly Arg Pro Arg His Gln Gly Val Met

35 40 45

Val Gly Met Gly Gln Lys Asp Ser Tyr Val Gly Asp Glu Ala Gln Ser

50 55 60

Lys Arg Gly Ile Leu Thr Leu Lys Tyr Pro Ile Glu His Gly Ile Val

65 70 75 80

Thr Asn Trp Asp Asp Met Glu Lys Ile Trp His His Thr Phe Tyr Asn

85 90 95

Glu Leu Arg Val Ala Pro Glu Glu His Pro Val Leu Leu Thr Glu Ala

100 105 110

Pro Leu Asn Pro Lys Ala Asn Arg Glu Lys Met Thr Gln Ile Met Phe

115 120 125

Glu Thr Phe Asn Thr Pro Ala Met Tyr Val Ala Ile Gln Ala Val Leu

130 135 140

Ser Leu Tyr Ala Ser Gly Arg Thr Thr Gly Ile Val Leu Asp Ser Gly

145 150 155 160

Asp Gly Val Ser His Thr Val Pro Ile Tyr Glu Gly Tyr Ala Leu Pro

165 170 175

His Ala Ile Leu Arg Leu Asp Leu Ala Gly Arg Asp Leu Thr Asp Tyr

180 185 190

Leu Met Lys Ile Leu Thr Glu Arg Gly Tyr Ser Phe

195 200

<210> 396

<211> 44

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 396

gcgtaatacg actcactata ggatgtgtga cgaagaggtt gccg 44

<210> 397

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 397

gtcaacaaaa cagggtgctc ttcg 24

<210> 398

<211> 22

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 398

atgtgtgacg aagaggttgc cg 22

<210> 399

<211> 46

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Праймер

<400> 399

gcgtaatacg actcactata gggtcaacaa aacagggtgc tcttcg 46

<210> 400

<211> 320

<212> ДНК

<213> Leptinotarsa decemlineata

<400> 400

atgtgtgacg aagaggttgc cgcattagtc gtagacaatg gatctggtat gtgcaaagct 60

ggatttgctg gggatgatgc cccccgtgca gttttcccat ccattgttgg tcgtccaaga 120

catcaaggag ttatggtagg aatgggccaa aaggactcgt atgtaggaga tgaagcccaa 180

agcaaaagag gtatccttac cttgaaatac cccattgaac acggtattgt cacaaactgg 240

gatgatatgg agaaaatctg gcaccatacc ttctacaatg aacttcgagt tgcccccgaa 300

gagcaccctg ttttgttgac 320

<210> 401

<211> 1152

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Шпилька

<400> 401

tgacgacctt gagttggttt ctgaagttga actcggcagc cttcttctgg agcttggcga 60

atttgttttc gtacttggaa acctttttca aggtaggttt gacgaattta ccacggaggt 120

cgttgacctg gctgttgagg tcggcgatct caaggtcacg tctctccact tcgaattcga 180

tgtcaatttt actcctctcc agagcgtcaa ttcgcttatg gtagtctgtg cagagtttct 240

tcaaggttgc ttcattggcg ttgtcgacgt cggcaatttg cccgcagcgc tcctcaatcg 300

ttcgcctcct ctcagctgct ttgcgttcct gctccttctt cagttcctca gcggcttttt 360

tcctcagcag gagtcggagt ttcttcttcc tttccggggt catgaaaccc ttcttggctt 420

tcttcgcctt agaggcttcc tccatcctct tgcgcacttc agcgcgcttc ctctcgattt 480

cggcctgttt gtctagaagg taagtgtaca cactacattt tcatgaacat tattgcgacc 540

gttgagattc tcattgtttg gtgattgatt atctaaagta gaagcatgaa tagatataac 600

ataaactagt aactaatggg ttagttatgg gtatacttca tgcttttctc tcaggctcga 660

gcaaacaggc cgaaatcgag aggaagcgcg ctgaagtgcg caagaggatg gaggaagcct 720

ctaaggcgaa gaaagccaag aagggtttca tgaccccgga aaggaagaag aaactccgac 780

tcctgctgag gaaaaaagcc gctgaggaac tgaagaagga gcaggaacgc aaagcagctg 840

agaggaggcg aacgattgag gagcgctgcg ggcaaattgc cgacgtcgac aacgccaatg 900

aagcaacctt gaagaaactc tgcacagact accataagcg aattgacgct ctggagagga 960

gtaaaattga catcgaattc gaagtggaga gacgtgacct tgagatcgcc gacctcaaca 1020

gccaggtcaa cgacctccgt ggtaaattcg tcaaacctac cttgaaaaag gtttccaagt 1080

acgaaaacaa attcgccaag ctccagaaga aggctgccga gttcaacttc agaaaccaac 1140

tcaaggtcgt ca 1152

<210> 402

<211> 1192

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Шпилька

<400> 402

ctcttgcttc ttggtggcga tcctctcctc gcgcctcttc ttcgcctcct tgaccttgag 60

acgtctcgcc tctgcctggt ccttcaacat ctttgatctc gccttttcag ccttcttctt 120

gtgaatgaag tccatcagta ccctcttgtt tttgaagacg ttacctttgg ctttcatgta 180

aaggtcgtgg tacatttgcc tatcgatctt cttggcttct ctgtattttt taaggagccg 240

tcgcaggact ctcattctgt tgacccacag gaccttcaca ggcattctgg cgttggcggt 300

acccttcctc ttaccgaagc cacagtgacg acccttccgt ctggcttctg tgtttttacg 360

gacgcgggct ctggagtgga cagccacagg ctttttgatg atcaaaccat ccttgatcag 420

cttacggatg ttttgcctag agttggtgtt ggcgatttcg ttgatttcat tagggtccaa 480

ccacactttc ttcttgccgc atctcatcac ctctagaagg taagtgtaca cactacattt 540

tcatgaacat tattgcgacc gttgagattc tcattgtttg gtgattgatt atctaaagta 600

gaagcatgaa tagatataac ataaactagt aactaatggg ttagttatgg gtatacttca 660

tgcttttctc tcaggctcga gggtgatgag atgcggcaag aagaaagtgt ggttggaccc 720

taatgaaatc aacgaaatcg ccaacaccaa ctctaggcaa aacatccgta agctgatcaa 780

ggatggtttg atcatcaaaa agcctgtggc tgtccactcc agagcccgcg tccgtaaaaa 840

cacagaagcc agacggaagg gtcgtcactg tggcttcggt aagaggaagg gtaccgccaa 900

cgccagaatg cctgtgaagg tcctgtgggt caacagaatg agagtcctgc gacggctcct 960

taaaaaatac agagaagcca agaagatcga taggcaaatg taccacgacc tttacatgaa 1020

agccaaaggt aacgtcttca aaaacaagag ggtactgatg gacttcattc acaagaagaa 1080

ggctgaaaag gcgagatcaa agatgttgaa ggaccaggca gaggcgagac gtctcaaggt 1140

caaggaggcg aagaagaggc gcgaggagag gatcgccacc aagaagcaag ag 1192

<210> 403

<211> 792

<212> ДНК

<213> Искусственная

<220>

<223> Шпилька

<400> 403

actctgtctg gcttttggct gtgacgcaca gttcatagag ataaccttca cccgaatatg 60

ccttgcgagg tcgcaaaatc ggcgaaattc catacctgtt caccgacgac ggcgctggat 120

caattccaca gttttcgcga tccagactga atgcccacag gccgtcgagt tttttgattt 180

cagatacgta cacttttccc ggcaataaca tacggcgtga catcggcttc aaatggcgta 240

tagccgccct gatgctccat cacactttgc cgtaatgagt gaccgcatcg aaacgcagca 300

cgatacgctg gtctagaagg taagtgtaca cactacattt tcatgaacat tattgcgacc 360

gttgagattc tcattgtttg gtgattgatt atctaaagta gaagcatgaa tagatataac 420

ataaactagt aactaatggg ttagttatgg gtatacttca tgcttttctc tcaggctcga 480

gccagcgtat cgtgctgcgt ttcgatgcgg tcactcatta cggcaaagtg tgatggagca 540

tcagggcggc tatacgccat ttgaagccga tgtcacgccg tatgttattg ccgggaaaag 600

tgtacgtatc tgaaatcaaa aaactcgacg gcctgtgggc attcagtctg gatcgcgaaa 660

actgtggaat tgatccagcg ccgtcgtcgg tgaacaggta tggaatttcg ccgattttgc 720

gacctcgcaa ggcatattcg ggtgaaggtt atctctatga actgtgcgtc acagccaaaa 780

gccagacaga gt 792

<210> 404

<211> 839

<212> ДНК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 404

cagtcagcac cgagtccttg ttgactgctc acattttcca tcgtttctac cagaacaaca 60

gcaacaactt tcatcatggc ggacgacgag gaaaagagga ggaaacaagc ggaaattgaa 120

cgcaagaggg ctgaggtcag ggctcgcatg gaagaggcct ccaaggccaa aaaagccaag 180

aaaggtttca tgacccctga gaggaagaag aaacttaggt tattgctgag aaagaaagca 240

gcagaagaac tgaaaaaaga acaagaacgc aaagctgccg aaaggcgtat tattgaagag 300

agatgcggaa aaccaaaact cattgatgag gcaaatgaag agcaggtgag gaactattgc 360

aagttatatc acggtagaat agctaaactg gaggaccaga aatttgattt ggaatacctt 420

gtcaaaaaga aagacatgga gatcgccgaa ttgaacagtc aagtcaacga cctcaggggt 480

aaattcgtca aacccactct caagaaagta tccaaatacg agaacaaatt tgctaaactc 540

caaaagaaag cagcagaatt caatttccgt aatcaactga aagttgtaaa gaagaaggag 600

ttcaccctgg aggaggaaga caaagaaaag aagcccgatt ggtcgaagaa gggagacgaa 660

aagaaggtac aagaagtgga agcatgatct gtccctacaa tttaatattt cccttcgtcc 720

gtggaaattt tacaacttaa gatatattta ttttattcgc ttcttatgag actatgaaag 780

tgatgtctgc atgtatatta ttcgttttat gtatgtatta aaaaaagaac ttgattgaa 839

<210> 405

<211> 203

<212> БЕЛОК

<213> leptinotarsa decemlineata

<400> 405

Met Ala Asp Asp Glu Glu Lys Arg Arg Lys Gln Ala Glu Ile Glu Arg

1 5 10 15

Lys Arg Ala Glu Val Arg Ala Arg Met Glu Glu Ala Ser Lys Ala Lys

20 25 30

Lys Ala Lys Lys Gly Phe Met Thr Pro Glu Arg Lys Lys Lys Leu Arg

35 40 45

Leu Leu Leu Arg Lys Lys Ala Ala Glu Glu Leu Lys Lys Glu Gln Glu

50 55 60

Arg Lys Ala Ala Glu Arg Arg Ile Ile Glu Glu Arg Cys Gly Lys Pro

65 70 75 80

Lys Leu Ile Asp Glu Ala Asn Glu Glu Gln Val Arg Asn Tyr Cys Lys

85 90 95

Leu Tyr His Gly Arg Ile Ala Lys Leu Glu Asp Gln Lys Phe Asp Leu

100 105 110

Glu Tyr Leu Val Lys Lys Lys Asp Met Glu Ile Ala Glu Leu Asn Ser

115 120 125

Gln Val Asn Asp Leu Arg Gly Lys Phe Val Lys Pro Thr Leu Lys Lys

130 135 140

Val Ser Lys Tyr Glu Asn Lys Phe Ala Lys Leu Gln Lys Lys Ala Ala

145 150 155 160

Glu Phe Asn Phe Arg Asn Gln Leu Lys Val Val Lys Lys Lys Glu Phe

165 170 175

Thr Leu Glu Glu Glu Asp Lys Glu Lys Lys Pro Asp Trp Ser Lys Lys

180 185 190

Gly Asp Glu Lys Lys Val Gln Glu Val Glu Ala

195 200

<---

1. Двухцепочечная рибонуклеиновая кислота (дцРНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя,

при этом дцРНК содержит соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности по меньшей мере 21 последовательного нуклеотида, которая комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и

при этом ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую SEQ ID NO 387 или комплементарную ей последовательность, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей по меньшей мере на 85% идентична SEQ ID NO 387 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую SEQ ID NО 387 или

комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 85% идентична последовательности, представленной в SEQ ID NО 387, или

(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой SEQ ID NО 387;

где видами указанных насекомых-вредителей являются Leptinotarsa

spp., Nilaparvata spp. или Lygus spp.

2. ДцРНК по п.1, где насекомое-вредитель растения выбрано из группы, состоящей из Leptinotarsa decemlineata (колорадский жук), Nilaparvata lugens (коричневый дельфацид) или Lygus hesperus (слепняк западный матовый).

3. ДцРНК по пп. 1, 2, где ген-мишень кодирует субъединицу протеасомного белка бета-типа или ортолог белка насекомых CG17331 Dm.

4. ДцРНК по любому из пп. 1-3, где подавление экспрессии гена-мишени вызывает снижение роста, развития, размножения или выживания вредителя по сравнению с видом вредителя, подверженного воздействию интерферирующей рибонуклеиновой кислоты, воздействующей на несущественный ген, или интерферирующей рибонуклеиновой кислоты, которая не подавляет какие-либо гены у вида-вредителя.

5. ДНК-конструкция для экспрессии дцРНК по любому из пп.1-4, где ДНК-конструкция является экспрессирующей конструкцией, в которой полинуклеотидная последовательность, кодирующая дцРНК, функционально связана по меньшей мере с одной регуляторной последовательностью, способной управлять экспрессией полинуклеотидной последовательности.

6. Клетка-хозяин для экспрессии дцРНК по любому из пп.1-4, содержащая дцРНК по любому из пп.1-4 или ДНК-конструкцию по п. 5.

7. Клетка-хозяин по п.6, где клетка-хозяин является прокариотической или эукариотической клеткой.

8. Клетка-хозяин по п.7, где клетка-хозяин является бактериальной клеткой.

9. Композиция для предотвращения или борьбы с нападением насекомых-вредителей, содержащая по меньшей мере одну дц рибонуклеиновую кислоту (дцРНК) и по меньшей мере один подходящий носитель, наполнитель или разбавитель, причем дцРНК функционирует при поглощении вредителем с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного вредителя,

при этом дцРНК содержит соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности по меньшей мере 21 последовательного нуклеотида, которая комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и

при этом ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую SEQ ID NO 387 или комплементарную ей последовательность, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей по меньшей мере на 85% идентична SEQ ID NO 387 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из SEQ ID NО 387 или комплементарную ей последовательность, при этом при оптимальном выравнивании указанного фрагмента и сравнении c соответствующим фрагментом в SEQ ID NО 387 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента по меньшей мере на 85% идентична указанному соответствующему фрагменту SEQ ID NO 387 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую SEQ ID NО 387 или

комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 85% идентична последовательности, представленной в SEQ ID NО 387, или

(iv) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой SEQ ID NО 387.

10. Композиция по п.9, где дцРНК является такой, как определено в любом из пп.1-4.

11. Композиция по п. 9 или 10, где дцРНК кодируется ДНК- конструкцией по п. 5.

12. Композиция по любому из пп.9-11, где дцРНК продуцируется клеткой-хозяином по любому из пп. 6-8.

13. Композиция по п.12, где клетка-хозяин является бактериальной клеткой.

14. Композиция по любому из пп.9-13, где композиция находится в форме, подходящей для поглощения насекомым.

15. Композиция по любому из пп.9-14, где композиция находится в твердой, жидкой или гелеобразной форме.

16. Композиция по любому из пп. 9-15, где композиция составлена в виде инсектицидного спрея.

17. Композиция по п.16, где спрей представляет собой распыляемый под давлением спрей/спрей в виде аэрозоля или спрей для пульверизатора.

18. Применение композиции по любому из пп.9-17 для предотвращения и/или борьбы с нападением вредителя.

19. Применение композиции по любому из пп.9-17 в качестве пестицида для растений.

20. Способ подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя с целью предотвращения и/или борьбы с нападением вредителей, включающий приведение в контакт указанного вида вредителя с эффективным количеством по меньшей мере одной дц рибонуклеиновой кислоты (дцРНК), где дцРНК функционирует при поглощении вредителем с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного вредителя,

при этом дцРНК содержит соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности по меньшей мере 21 последовательного нуклеотида, которая комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и

при этом ген-мишень

(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую SEQ ID NО 387 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, такую, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 85% идентичной SEQ ID NО 387 или комплементарной ей последовательности, или

(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из SEQ ID NO 387 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в SEQ ID NO 387 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента является по меньшей мере на 85% идентичной указанному соответствующему фрагменту SEQ ID NO 387 или комплементарной ей последовательности, или

(iii) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую SEQ ID NO 387 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 85% идентична последовательности, представленной в SEQ ID NO 387, или

(iv) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой SEQ ID NО 387.

21. Способ по п.20, где дцРНК является такой, как определено в любом из пп.1-4.

22. Способ по п.20 или 21, где подавление экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя применяют с целью получения по меньшей мере 20% эффективности борьбы с вредителями или по меньшей мере 20% смертности вредителей по сравнению с контрольными насекомыми-вредителями, проконтактировавшими с дц рибонуклеиновой кислотой (дцРНК), воздействующей на несущественный ген вредителя или ген-мишень, не экспрессирующийся у указанного вредителя.

23. Способ по любому из пп.20-22, где способ применяют для предотвращения и/или борьбы с нападением вредителя на растение.

24. Способ по п.23, где растение выбирают из группы, включающей хлопчатник, картофель, рис, канолу, подсолнечник, сорго, просо, кукурузу, землянику, сою, люцерну, томат, баклажан, перец и табак.

25. Применение дц рибонуклеиновой кислоты (дцРНК) по любому из пп.1-4, ДНК-конструкции по п. 5 или композиции по любому из пп. 9-17 для предотвращения или борьбы с нападением насекомого-вредителя.

26. Набор, содержащий дц рибонуклеиновую кислоту (дцРНК) по любому из пп.1-4, ДНК-конструкцию по п. 5 или композицию по любому из пп. 9-17, для предотвращения или борьбы с нападением насекомого-вредителя и один подходящий разбавитель или носитель.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к биотехнологии. Описана рекомбинантная векторная плазмида для переноса и доставки гетерогенной полинуклеотидной последовательности в клетку млекопитающего, содержащая: векторный геном аденоассоциированного вируса (AAV), содержащий гетерологичную полинуклеотидную последовательность и последовательность контроля экспрессии, которая запускает тренскрипцию гереологичной полинуклеотидной последовательности; и основную последовательность, содержащую первую инертную полинуклеотидную последовательность филлера или спейсерную полинуклеотидную последовательность, где указанная гетерологичная полинуклеотидная последовательность в длину составляет менее 4,7 Кб и расположена между двух последовательностей инвертированного концевого повтора (ITR) аденоассоциированного вируса (AAV), где указанная первая инертная полинуклеотидная последовательность филлера или спейсерная полинуклеотидная последовательность расположена за пределами ITR AAV и имеет длину 4,5-10 Кб или 6-8 Кб и где длина указанной основной последовательности составляет по меньшей мере 7,0 Кб.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к грызуну, содержащему в своем геноме делецию участка с полной кодирующей части экзона 2 по кодирующую часть экзона 11 эндогенного локуса C9orf72, его клетке, ткани, эмбриону, а также к способу его получения.

Настоящее изобретение относится к генной инженерии. Предложен способ in vitro модификации генома в представляющем интерес геномном локусе в нечеловеческой плюрипотентной клетке млекопитающего, включающий внесение в клетку компонентов системы CRISPR/Cas9 в комбинации с крупным направляющим вектором (LTVEC), который составляет по меньшей мере 10 т.п.о.

Настоящая группа изобретений относится к биотехнологии. Предложена композиция, содержащая систему CRISPR-Cas для применения при лечении нарушения постмитотической клетки, где Cas9 содержит по меньшей мере одну последовательность ядерной локализации.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способам проведения пренатальной и постанатальной генетической диагностики числовых хромосомных аномалий у эмбрионов человека и ДНК-микрочипам для их осуществления.
Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ подготовки для морфологических и молекулярно-генетических исследований образцов нематод, паразитирующих у жвачных животных, включающий консервацию образцов нематод в 96%-ном этаноле, помещение по мере необходимости исследования нематод на часовые стекла, промывание в 0,9%-ном изотоническом растворе хлорида натрия, помещение нематод на предметные стекла в каплю 10%-ного водного раствора глицерина, накрывание предметным стеклом, микрокопирование в проходящем свете при 40-400-кратном увеличении для определения морфологических отличий, важных для таксономической дифференциации, где законсервированных в 96%-ном этаноле нематод промывают в дистиллированной воде при комнатной температуре, затем нематод помещают в пластиковые пробирки объемом 1,5 мл по одному образцу в каждую и замораживают при температуре -20°C до 30 суток, а затем используют для молекулярно-генетических исследований.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к генетически модифицированной мыши, которая экспрессирует вариабельные домены тяжелой и легкой цепей иммуноглобулина человека, где вариабельные домены легкой цепи человека экспрессируются из единственной перегруппированной Vκ1-39/Jκ5 последовательности человека, присутствующей в геноме зародышевой линии мыши, а также к В-клетке, полученной из вышеуказанной мыши, и гибридоме, полученной из вышеуказанной клетки.

Изобретение относится к области биотехнологии. Описана группа изобретений, включающая антисмысловой олигомер длиной 14-32 основания для исключения экзона 45 в человеческом гене дистрофина, фармацевтическую композицию для лечения мышечной дистрофии, способ лечения мышечной дистрофии путем индукции исключения экзона 45 в человеческом гене дистрофина, применение вышеуказанного антисмыслового олигомера или его фармацевтически приемлемой соли или для получения фармацевтической композиции для лечения мышечной дистрофии и антисмысловой олигомер длиной 14-32 основания для исключения экзона 45 в человеческом гене дистрофина для применения в лечении мышечной дистрофии.

Изобретение относится к области биотехнологии. Описана группа изобретений, включающая соединение, состоящее из группы конъюгата и модифицированного олигонуклеотида, композицию, для лечения заболевания, связанного с избытком гормона роста у человека, содержащую вышеуказанное соединение, применение соединения или композиции в способе лечения заболевания, связанного с избытком гормона роста у человека, и применение соединения или композиции в способе снижения уровней рецептора гормона роста у человека.

Изобретение относится к области биотехнологии. Описана группа изобретений, включающая способ создания искусственных референсных образцов ДНК и тест-системы с использованием образцов ДНК, полученных указанным способом.
Изобретение относится к области биотехнологии. Представлена рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты для обеспечения повышенной инсектицидной устойчивости или толерантности растений к чешуекрылым насекомым-вредителям.
Наверх