Противомикробная смесь, содержащая 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-он и хлорфенезин, и косметическая композиция, содержащая ее
Настоящее изобретение относится к противомикробной смеси, содержащей 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-он и хлорфенезин, а также к косметической композиции, содержащей такую смесь. Применяется для ухода за кератиносодержащими материалами, нанесения на них макияжа и их очистки. 2 н. и 4 з.п. ф-лы. 2 пр.
Настоящее изобретение относится к антибактериальной смеси, содержащей 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-он и хлорфенезин, а также к косметической композиции, содержащей такую смесь.
4-(3-Этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-он (кетоновое соединение) является веществом, пригодным в качестве консерванта для косметических композиций, для защиты композиций от микробной контаминации, как описано в заявке на патент WO 2011/039445.
Однако желательно иметь возможность включать указанное кетоновое соединение в сниженной концентрации в композиции, особенно косметические или дерматологические композиции, при этом одновременно поддерживая хорошие свойства в отношении противомикробного консервирования. Таким образом, для осуществления данной цели стремились получить комбинации кетонового соединения с другими соединениями, которые обладают противомикробной эффективностью.
Авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что комбинация 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-она с хлорфенезином обеспечивает получение противомикробной смеси с синергетической противомикробной активностью, в частности в отношении плесени, в частности в отношении Aspergillus niger. Результаты примера 1, описанного ниже, демонстрируют синергетическую противомикробную активность, полученную с помощью измерений минимальной ингибирующей концентрации (MIC) для нескольких смесей. Полагают, что противомикробная активность является синергетической, если противомикробная смесь обеспечивает получение процента роста штамма, составляющего меньше или равняющегося 25% или даже меньше или равняющегося 20%.
Более конкретно, объектом настоящего изобретения является противомикробная смесь, содержащая 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-он и хлорфенезин или образованная из них (или состоящая из них).
Объектом настоящего изобретения также является композиция, в частности косметическая или дерматологическая композиция, содержащая в физиологически приемлемой среде указанную смесь, описанную ранее.
Дополнительным объектом настоящего изобретения является способ нетерапевтической косметической обработки кератиносодержащих материалов, включающий нанесение вышеописанной композиции на кератиносодержащие материалы. Способ может представлять собой косметический способ ухода за кератиносодержащими материалами, или нанесения макияжа на кератиносодержащие материалы, или их очищения.
4-(3-Этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-он представляет собой соединение формулы:
Хлорфенезин соответствует соединению, представляющему собой 3-(4-хлорфенокси)-1,2-пропандиол
(№ по CAS: 104-29-0) формулы:
Преимущественно 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-он и хлорфенезин
присутствуют в указанной смеси в таком количестве, что весовое соотношение 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-он/хлорфенезин находится в диапазоне от 0,1 до 0,9, предпочтительно от 0,1 до 0,7 и предпочтительно от 0,15 до 0,6.
Соединение, представляющее собой 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-он, может присутствовать в композиции в соответствии с настоящим изобретением в количестве, находящемся в диапазоне от 0,01% до 5% по весу относительно общего веса композиции, предпочтительно находящемся в диапазоне от 0,01% до 3% по весу, предпочтительно находящемся в диапазоне от 0,01% до 2,5% по весу и более предпочтительно находящемся в диапазоне от 0,01% до 2% по весу.
Объектом настоящего изобретения также является композиция, содержащая в физиологически приемлемой среде противомикробную смесь, описанную ранее.
Термин "физиологически приемлемая среда" означает среду, которая совместима с кератиносодержащими материалами человека, такими как кожа, кожа головы, волосы и ногти. Указанная среда может содержать один или несколько дополнительных ингредиентов, отличных от кетонового соединения и хлорфенезина.
Композиция может содержать по меньшей мере один дополнительный ингредиент, выбранный из воды, масел, полиолов, содержащих от 2 до 10 атомов углерода, гелеобразователей, поверхностно-активных веществ, пленкообразующих полимеров, красящих веществ, ароматизаторов, наполнителей, средств для защиты от УФ-излучения, растительных экстрактов, активных косметических и дерматологических средств и солей.
Композиция в соответствии с настоящим изобретением может содержать водную фазу.
Композиция может содержать воду, которая может присутствовать в количестве, находящемся в диапазоне от 5% до 90% по весу относительно общего веса композиции и предпочтительно находящемся в диапазоне от 35% до 75% по весу.
Композиция также может содержать полиол, который смешивается с водой при комнатной температуре (25°C), в частности выбранный из полиолов, содержащих главным образом от 2 до 10 атомов углерода, предпочтительно содержащих от 2 до 6 атомов углерода, таких как глицерин, пропиленгликоль, 1,3-пропандиол, бутиленгликоль, пентиленгликоль, гексиленгликоль, дипропиленгликоль, диэтиленгликоль или диглицерин. Преимущественно композиция в соответствии с настоящим изобретением содержит 1,3-пропандиол, в частности в количестве, находящемся в диапазоне от 0,1% до 20% по весу, предпочтительно находящемся в диапазоне от 0,1% до 10% по весу, предпочтительно находящемся в диапазоне от 0,5% до 5% по весу относительно общего веса композиции.
Композиции в соответствии с настоящим изобретением могут находиться в форме эмульсий типа "масло в воде" (O/W), эмульсий типа "вода в масле" (W/O) или множественных эмульсий (трехфазных: W/O/W или O/W/O), масляных растворов, масляных гелей, водных растворов, водных гелей, твердых композиций. Эти композиции получают в соответствии с обычными способами.
Композиции в соответствии с настоящим изобретением могут быть более или менее текучими и могут иметь вид белого или цветного крема, мази, молочка, лосьона, сыворотки, пасты или пены. В некоторых случаях их можно наносить на кожу в виде аэрозоля. Они также могут находиться в твердой форме, например в виде карандаша или компактной пудры.
Композиция в соответствии с настоящим изобретением может быть представлена главным образом в виде:
- средства для макияжа, в частности, для нанесения макияжа на кожу лица, тело, или губы, или ресницы;
- геля или лосьона после бритья; средства для бритья;
- дезодоранта (в виде карандаша, шарикового аппликатора или аэрозоля);
- крема для удаления волос;
- композиции для гигиены тела, такой как гель для душа или шампунь;
- фармацевтической композиции;
- твердой композиции, такой как мыло или брусок очищающего мыла;
- аэрозольной композиции, также содержащей газ-вытеснитель под давлением;
- лосьона для фиксации волос, крема или геля для укладки волос, композиции для окрашивания, композиции для перманентной завивки, лосьона или геля для борьбы с выпадением волос или кондиционера для волос;
- композиции для ухода за кожей или для ее очищения.
Объектом настоящего изобретения также является способ получения композиции, в частности косметической или дерматологической композиции, включающий стадию смешивания 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-она, хлорфенезина и одного или нескольких дополнительных ингредиентов, в частности косметических или дерматологических ингредиентов, таких как ингредиенты, описанные ранее.
Настоящее изобретение проиллюстрировано более подробно в следующем примере. Количества ингредиентов выражены в весовых процентах.
Пример 1. Определение синергетической противомикробной активности в MIC в отношении штамма микроорганизма Aspergillus niger
Демонстрацию эффекта, обусловленного синергетической противомикробной активностью смеси 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-она (называемого вещество A) и хлорфенезина (называемого вещество B) проводят путем расчета показателя синергии (или индекса FIC) в соответствии со следующей формулой: 
где
- MICa с B: минимальная концентрация продукта A в комбинации A+B, которая обеспечивает получение ингибирующего эффекта;
- MICb с A: минимальная концентрация продукта B в комбинации A+B, которая обеспечивает получение ингибирующего эффекта;
- MICa: минимальная ингибирующая концентрация продукта A в отдельности;
- MICb: минимальная ингибирующая концентрация продукта B в отдельности.
Данная формула впервые была описана в статье F.C. Kull, P.C. Eisman, H.D. Sylwestrowka и R.L. Mayer, Applied Microbiology 9:538-541, 1961.
Для каждого соединения, тестируемого в отдельности, MIC рассматривают как первую концентрацию, которая обеспечивает получение процента микробного роста, составляющего меньше или равняющегося 25%.
В отношении тестируемых комбинаций MICa с b и MICb с a представляют собой соответствующие концентрации A и B в комбинациях, которые обеспечивают получение процента микробного роста, составляющего меньше или равняющегося 25%.
Интерпретация индекса FIC
Если значение индекса FIC составляет меньше или равняется 1, считают, что комбинация тестируемых соединений обладает синергетическим эффектом.
Полученные результаты кратко изложены в следующих таблицах.
Применяли штамм микроорганизма Aspergillus niger ATCC 6275 и жидкую культуральную среду, представляющую собой бульон Сабуро двойной концентрации, дополненную полиоксиэтиленированным (20 OE) сорбитанмонопальмитатом (Tween 40 от Croda) и Phytagel© BioReagent (т. е. смесь 5 г Phytagel+0,6 г Tween 40+60 г бульона Сабуро).
Применяли 96-луночный микропланшет при температуре инкубации 32,5°C.
Время инкубации микропланшета составляло от 24 до 48 часов в аэробных условиях.
Тест
Для каждого соединения:
A представляет собой соединение, представляющее собой 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-он,
B представляет собой соединение, представляющее собой хлорфенезин,
подготавливали 10% (вес/объем) исходный раствор путем смешивания 1 г соединения в 9 мл водного 1%o раствора агара. Последующие разбавления осуществляли с помощью 1%o раствора агара.
Тест в отношении соединений A и B в отдельности
В лунки микропланшета добавляли 50 мкл каждого из полученных производных растворов, содержащих соединение A или B. Также в них добавляли 100 мкл жидкого питательного бульона Сабуро, инокулированного штаммом Aspergillus niger, и 50 мкл водного 1%o раствора агара.
Тесты в отношении соединений A и B в виде смеси
В лунки микропланшета добавляли 50 мкл каждого из полученных производных растворов, содержащих соединение A, и 50 мкл каждого из полученных производных растворов, содержащих соединение B. Также в них добавляли 100 мкл жидкого питательного бульона Сабуро, инокулированного двойной концентрацией штамма Aspergillus niger.
Контроль роста микроорганизмов
Также подготавливали положительный контроль роста микроорганизмов. Положительный контроль роста микроорганизмов соответствует смеси 100 мкл водного 1%o раствора агара со 100 мкл жидкого питательного бульона Сабуро, инокулированного двойной концентрацией штамма Aspergillus niger в отсутствие соединений A и B.
Контроль поглощательной способности для соединений A и B в отдельности
Контроль поглощательной способности проводили параллельно в отношении соединений A и B в отдельности. Данный контроль соответствует 100 мкл стерильного жидкого питательного бульона Сабуро двойной концентрации+100 мкл соединения A или B двойной концентрации.
В трех случаях (контроль поглощательной способности, контроль роста и тестируемый раствор) конечный объем, присутствующий в каждой из лунок микропланшета, составляет 200 мкл.
В двух случаях (тестируемый раствор и контроль) концентрация инокулята представляет собой концентрацию штамма Aspergillus niger, присутствующего в конечном объеме в лунках (200 мкл), и составляет от 2 до 6×105 КОЕ/мл Aspergillus niger.
Минимальную ингибирующую концентрацию (MIC) каждого соединения A и B в отдельности и в комбинации определяли известным способом с помощью измерений оптической плотности при длине волны 620 нм.
Получены следующие результаты.
Полученные результаты демонстрируют синергетическую ингибирующую активность для смесей:
i) 0,0625% A и 0,25% B, т. е. соотношение A/B=0,25,
ii) 0,125% A и 0,25% B, т. е. соотношение A/B=0,5.
Пример 2. Определение противомикробной активности противомикробной смеси
Противомикробную эффективность противомикробной смеси 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-она+хлорфенезина (соответствующее весовое соотношение составляет 0,16) оценивали с помощью способа проведения теста с заражением.
Протокол
Способ проведения теста с заражением состоял в искусственной контаминации образца штаммами микроорганизмов из коллекции (бактерий, дрожжей и плесени) и оценки числа жизнеспособных микроорганизмов через семь дней после инокуляции.
С целью демонстрации эффекта противомикробной смеси противомикробную активность косметического состава, содержащего 0,05% 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-она и 0,3% хлорфенезина, сравнивали с тем же составом в отдельности (контроль) после инокуляции с применением приблизительно 106 КОЕ (колониеобразующих единиц)/грамм косметического состава.
Косметический состав
Получали эмульсию для ухода за лицом типа "масло в воде", характеризующуюся следующим составом (значения содержания выражены в процентах по весу).
Сорбитантристеарат (Span 65 V от Croda) 0,9%
Смесь глицерил- моно/дистеарата (36/64)/стеарата калия
(Пеллеты Tegin от Goldschmidt) 3%
Стеарат полиэтиленгликоля (40 звеньев этиленоксида) 2%
4-(3-Этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-он 0,05%
Хлорфенезин 0,3%
Пропан-1,3-диол 3%
Смесь минерального масла, микрокристаллического воска и парафина
(Vaseline Blanche Codex 236 от Aiglon) 4%
Жидкая фракция масла ши (Shea Olein от Olvea) 1%
Циклопентадиметилсилоксан 5%
Цетиловый спирт 4%
Масло косточек абрикоса 0,3%
Гидрогенизированный полиизобутен (Parleam от NOF Corporation) 7,2%
Миристилмиристат 2%
Стеариновая кислота 1,2%
Кофеин 0,1%
Лимонная кислота 0,2%
Глицерин 3%
Гидроксид натрия 0,05%
Вода в достаточном количестве 100%
Контрольный состав A: состав, подобный предыдущему составу, содержащему 0,05% 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-она и не содержащему хлорфенезина (0,3% замещены водой).
Контрольный состав B: подобный состав, содержащий 0,3% хлорфенезина и не содержащий 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-она (0,05% замещены водой).
Культуры микроорганизмов
Применяли 5 чистых культур микроорганизмов.
| МИКРООРГАНИЗМЫ | Среда для получения субкультур | T° | ATCC |
| Escherichia coli (Ec) | Трипто-казеин-соевый бульон | 35°C | 8739 |
| Enterococcus faecalis (Ef) | Трипто-казеин-соевый бульон | 35°C | 33186 |
| Pseudomonas aeruginosa (Pa) | Трипто-казеин-соевый бульон | 35°C | 19429 |
| Candida albicans (Ca) | Сабуро | 35°C | 10231 |
| Aspergillus niger (An) | Солод | 35°C | 6275 |
ATCC=Американская коллекция типовых культур
Штаммы грамотрицательных бактерий (Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa), грамположительной бактерии (Enterococcus faecalis), дрожжей (Candida albicans) и плесень (Aspergillus niger) инокулировали в среду для получения субкультуры соответственно за день перед инокуляцией для бактерий и дрожжей и за 5 дней перед инокуляцией для плесени.
В день инокуляции:
- готовили суспензию в триптон-солевом разбавителе соответственно в случае бактерий и дрожжей так, чтобы получить суспензию с оптической плотностью, измеренной с помощью спектрофотометра, от 35% до 45% пропускаемого света при 544 нм;
- в случае плесени споры собирали путем осуществления смывов агара с помощью 6-7 мл раствора для сбора и суспензию извлекали в стерильную пробирку или колбу.
После гомогенизации суспензии микроорганизмов 0,2 мл инокулята вводили в каждую бутылку для лекарств (суспензии применяли в чистом виде: от 1×108 до 3×108 КОЕ на мл) и
16
суспензию микроорганизмов в 20 г продукта (представляющего собой косметический состав) тщательно гомогенизировали с применением шпателя.
Содержание микроорганизмов, присутствующих в продукте, после гомогенизации соответствует концентрации 106 микроорганизмов на грамм продукта, т. е. инокуляция до 1% инокулята, содержащего 108 микроорганизмов на мл.
Через 7 дней периода контакта между микроорганизмами и продуктом при 22°C±2°C и в темноте осуществляли десятикратные разбавления и подсчитывали число жизнеспособных микроорганизмов, остающихся в продукте.
Результаты
| Количество КОЕ/грамм продукта через T7 дней | |||||
| E. coli | P. aeruginosa | E. faecalis | C. albicans | A. niger | |
| Противо микробная смесь |
<200 | <200 | <200 | <200 | <200 |
<200 КОЕ: порог чувствительности способа.
1. Противомикробная смесь, содержащая 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-он и хлорфенезин.
2. Противомикробная смесь по предыдущему пункту, отличающаяся тем, что она содержит 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-он и хлорфенезин в таких количествах, что весовое соотношение 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-он/хлорфенезин находится в диапазоне от 0,1 до 0,9, предпочтительно находится в диапазоне от 0,1 до 0,7 и предпочтительно находится в диапазоне от 0,15 до 0,6.
3. Противомикробная смесь по любому из пп. 1 и 2, отличающаяся тем, что она обладает противомикробной активностью в отношении плесени, в частности в отношении Aspergillus niger.
4. Композиция, содержащая в физиологически приемлемой среде противомикробную смесь по любому из пп. 1-3.
5. Композиция по предыдущему пункту, отличающаяся тем, что она содержит по меньшей мере один дополнительный ингредиент, выбранный из воды, масел, полиолов, содержащих от 2 до 10 атомов углерода, гелеобразователей, поверхностно-активных веществ, пленкообразующих полимеров, красящих веществ, ароматизаторов, наполнителей, средств для защиты от УФ-излучения, растительных экстрактов, активных косметических и дерматологических средств и солей.
6. Композиция по любому из пп. 4 и 5, отличающаяся тем, что 4-(3-этокси-4-гидроксифенил)бутан-2-он присутствует в количестве, находящемся в диапазоне от 0,01% до 5% по весу от общего веса композиции, предпочтительно находящемся в диапазоне от 0,01% до 3% по весу и предпочтительно находящемся в диапазоне от 0,01% до 2,5% по весу.
