Фармацевтическая композиция пролонгированного действия в виде суппозитория, содержащая гексапептид

Группа изобретений относится к области фармацевтики и предназначена для получения суппозитория для ректального введения. Для получения суппозитория для ректального введения применяют фармацевтическую композицию пролонгированного действия, содержащую 0,02-2,0 мас.% гексапептида формулы H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg-OH (I) или его фармацевтически приемлемой соли и суппозитарную основу. Способ получения указанного суппозитория включает стадию растворения гексапептида формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли в воде и стадию смешивания полученного раствора с суппозитарной основой с получением суппозитории. Использование группы изобретений обеспечивает длительное (пролонгированное) и пропорциональное высвобождение гексапептида (I) в систему кровообращения, что позволяет поддерживать терапевтически эффективные уровни гексапептида (I) в крови в течение более длительного периода времени, чем при инъекционном введении гексапептида (I) в той же дозе. 2 н. и 12 з.п. ф-лы, 5 табл., 5 пр.

 

Область изобретения

Изобретение относится к фармацевтическим композициям пролонгированного действия в виде суппозитория для ректального введения, содержащим гексапептид.

Сведения о предшествующем уровне техники

Гесксапептид с аминокислотной последовательностью H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg-OH (YdAGFLR) в форме диацетатной соли применяется в составе инъекционных средств лечения язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, панкреатита и панкреонекроза под названием даларгин. Применение гексапептида как активного фармацевтического ингредиента в составе лекарственных средств раскрыто в следующих патентах РФ (№№): 2032422, 2241488, 2198641, 2104717, 2270025, 2351334, 2343885, 2405534, 2363455, 2515550, 2180598, 2635083, 2436588, 2473325, 2144831, 2646569, 2200026, 2146530, 2155608, 2185176, 2139725, 2266130, 2326661, 2299742, 2218896, 2416398, 2318503, 2430753, 2299438, 2258529, 2099077, 2122415, 2261713, 2006039, 2366416, 2228762, 2185849, 2496493, 2366417, 2017488, 2167671, 2181564, 2284192, 2290203, 2286793, 2366432, 2299065, 2429002, 2196603, 2142814, 2285522, 2203693, 2230549, 2180591, 2142736, 2113856, 2217139, 2266752, 2261722, 2362580, 2223741, 222814869, 2217186, 2266130, 2326661, 2299742, 2218896, 2672888, 2416398, 2318503, 2430753, 2299438, 2258529, 2099077, 2122415, 2261713, 2006039, 2366416. На практике, гесапептид применяется в виде инъекций. Наиболее часто используемая инъекционная лекарственная форма гексапептида представляет собой твердый лиофилизат, который растворяют в изотоническом растворе хлорида натрия непосредственно перед внутримышечным или внутривенным введением пациенту. Известна также жидкая инъекционная лекарственная форма гексапептида для инъекций, содержащая гексапептид, натрия хлорид и воду для инъекций (патент РФ № 2241488).

При инъекционном введении гексапептид подвергается быстрой деградации под действием эндогенных пептидаз, вследствие чего время полувыведения гексапептида из системного кровообращения после инъекции составляет несколько минут. Каленикова ЕИ и др. Фармакокинетика даларгина. Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии.1988, 34(1): 75-83. Пролонгированное внутривенное инфузионное введение гексапептида, хотя и обеспечивает длительное поступление гексапептида в системное кровообращение, требует специальных условий и наличие обученного медицинского персонала. Еще одним существенным недостатком инъекционных лекарственных форм гексапептида является то, что инъекционное введение вызывает боль и дискомфорт у пациентов. Поэтому существует необходимость в альтернативных неинвазивных лекарственных формах гексапептида обеспечивающих более длительное (пролонгированное) поступление гексапептида в системный кровоток для повышения фармакологического эффекта гексапептида и не требующих специальных условий применения в виде специально оборудованных медицинских помещений и наличия медицинского персонала.

Ректальное введение пептидов и белков в составе суппозиториев является неинвазивным способом системного введения, альтернативным инъекциям. Однако, биодоступность пептидов при этом способе введения как правило очень мала по сравнению с инъекционным введением. Например, биодоступность ректального кальцитонина составляет менее 1%. Miyake M et al., Chem Pharm Bull (Tokyo). 1985, 33(2):740-5. Пренебрежимо малая биодоступность наблюдалась при ректальном введении пептида дезглицинамида аргининвазопрессина. van Hoogdalem E et al., J Pharmacol Exp Ther. 1989, 251(2):741-4. Биодоступность ректального инсулина составляет 0,2%. van Hoogdalem E et al. Pharm Res. 1990 7(2):180-3. Для увеличения биодоступности пептидов при ректальном введении используются специальные вспомогательные вещества, называемые «усилителями абсорбции», например, поверхностно-активное вещество производное желчной кислоты тауро-24,25-дигидрофузидат натрия, которое обеспечивает увеличение биодоступности пептидов при ректальном введении до уровня нескольких процентов. Mackay M et al. Advanced Drug Delivery Reviews. 1997: 28:253-273. Без усилителей абсорбции ректальные суппозитории содержащие пептиды не обеспечивают пролонгированный выход пептидов в системный кровоток. Например, ректальные суппозитории с инсулином обеспечивают поддержание терапевтических концентраций инсулина в крови менее 25 мин, тогда как суппозитории с добавлением усилителей абсорбции (енамина) позволяют пролонгировать поддержание концентрации инсулина в крови 60-90 минут. Nishihata T et al. J. Pharm. Pharmacol. 1985, 37:22-26. Однако, поскольку усилители абсорбции оказывают свое прямое действие, нарушая целостность слизистых оболочек, они вызывают ряд побочных эффектов, таких как отек, раздражение и гистологические изменения тканей (образование вакуолей, уменьшение количества десмосом и потеря верхних слоев клеток), особенно при регулярном применении, поэтому использование усилителей проникновения требует решения проблем безопасности, а именно выявления приемлемых пределов раздражения, оценки степени и скорости восстановления повреждений слизистой оболочки. Auletta C. Journal of the American College of Toxicology. 1994, 13(1): 48-63. Таким образом, для обеспечения безопасности существует необходимость в создании пролонгированных лекарственных форм в виде ректальных суппозиториев без использования усилителей абсорбции в их составе.

RU2217186C1 раскрывает применение вагинальных суппозиториев, содержащих даларгин для местного применения, а именно лечения доброкачественных заболеваний шейки матки. Однако, использование даларгина в составе суппозиториев для системного, а не местного, пролонгированного введения неизвестно из уровня техники.

Нами неожиданно обнаружено, что ректальные суппозитории содержащие гексапептид YdAGFLR, в отличие от ректальных суппозиториев содержащих другие пептидные соединения, обеспечивают высокую биодоступность и пролонгированное высвобождение гексапептида в системный кровоток без использования усилителей абсорбции, обладающих местной токсичностью, что обеспечивает неинвазивную безопасную и эффективную альтернативу инъекционным лекарственным формам гексапептида.

Описание изобретения

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композициии пролонгированного действия, содержащей гексапептид формулы H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg-OH (I) или его фармацевтически приемлемую соль, характеризущейся тем, что выполнена в виде суппозитория для ректального введения, содержащего 0,02-2,0 мас. % гексапептида формулы H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg-OH (I) или его фармацевтически приемлемой соли и суппозитарную основу.

Техническим результатом настоящего изобретения является то, что фармацевтическая композиция в виде суппозитория, содержащая гексапептид (I), при ректальном введении обеспечивает длительное (пролонгированное) высвобождение гексапептида (I) в систему кровообращения, что позволяет поддерживать терапевтически эффективные уровни гексапептида (I) в крови в течение более длительного периода времени чем при инъекционном введении гексапептида (I) в той же дозе.

Вследствие того, что фармацевтические композиции настоящего изобретения в виде ректальных суппозиториев вводятся неинвазивно, эти композиции более удобны для пациента по сравнению с инъекциями гексапептида (I), так как не вызывают боль, раздражение, воспаление и не нарушают целостность тканей в месте введения.

Гексапептид формулы (I), короткое название гексапептид (I), имеет брутто-формулу C₃₅H₅₁N₉O₈, молекулярную массу 725,84 дальтон и регистрационный номер CAS 81733-79-1 в качестве идентификатора. Химическое название гексапептида (I) - тирозил-D-аланил-глицил-фенилаланил-лейцил-аргинин.

Настоящее изобретение относится к гексапептиду формулы (I) и всем его фармацевтически приемлемым солям, а также сольватам. Неэксклюзивные примеры фармацевтически приемлемых солей гексапептида формулы (I) включают хлорид, бромид, сульфат, ацетат, пируват, малат, фумарат, цитрат. Предпочтительной фармацевтически приемлемой солью гексапептида формулы (I) является диацетат гексапептида (I), имеющий формулу C₃₅H₅₁N₉O₈ x 2C₂H₄O₂. Химическое название диацетата гексапептида (I) - тирозил-D-аланил-глицил-фенилаланил-лейцил-аргинина диацетат.

Гексапептид формулы (I) может быть получен любым способом известным из уровня техники, в частности, твердофазным синтезом. Гексапептид формулы (I) и его соли и сольваты коммерчески доступны, например, в каталоге Bachem № 4030569.0100 (https://shop.bachem.com/4030569.html). Кроме того, диацетат гексапептида формулы (I) производится в качестве коммерчески доступной фармацевтической субстанции в Российской Федерации несколькими производителями.

Использованный здесь термин «пролонгированное действие» относится к свойству фармацевтической композиции поддерживать терапевтически эффективные концентрации действующего вещества в системе кровообращения в течение длительного периода времени, например, не менее одного часа для гексапептида (I). Для сравнения, период полувыведения гексапептида (I) из кровотока при однократном инъекционном введении составляет несколько минут.

Использованный здесь термин «суппозиторий для ректального введения» означает твердую при комнатной температуре дозированную лекарственную форму, содержащую по меньшей мере одно действующее вещество, растворенное или диспергированное в подходящей основе, предназначенную для введения в полости тела и расплавляющуюся (растворяющуюся, распадающуюся) при температуре тела.

Использованный здесь термин «суппозиторная основа», эквивалентный термину «основа для суппозитория», означает вспомогательное вещество, твердое при комнатной температуре, способное плавиться или растворяться при температуре тела и обеспечивающее высвобождение действующего вещества из суппозитория при введении суппозитория в прямую кишку. Согласно общей фармакопейной статье «ОФС.1.4.1.0013.15 Суппозитории», основы для суппозиториев подразделяются на липофильные, гидрофильные и дифильные.

В практике настоящего изобретения, фармацевтические композиции могут содержать основы для суппозиториев любого вида, известные из уровня техники, в том числе липофильные, гидрофильные и дифильные основы.

Неэксклюзивные примеры липофильных основ для суппозиториев настоящего изобретения включают масло какао, сплавы масла какао с парафином и гидрогенизированными жирами, растительные и животные гидрогенизированные жиры, твердый жир, ланоль, сплавы гидрогенизированных жиров с воском, твердым парафином и другие основы, разрешенные для медицинского применения. Предпочтительная липофильная суппозиторная основа для использования в составе фармацевтической композиции настоящего изобретения – это масло какао.

Неэксклюзивные примеры гидрофильных основ для суппозиториев настоящего изобретения включают желатино-глицериновые гели, сплавы полиэтиленоксидов различных молекулярных масс (ПЭО-6000, ПЭО-4000, ПЭО-1500) и другие основы, разрешенные для медицинского применения.

Неэксклюзивные примеры дифильных основ для суппозиториев настоящего изобретения включают композиции, обладающие липофильными и гидрофильными свойствами и содержащие в своем составе поверхностно-активные вещества, например, сложные эфиры высших жирных кислот типа Витепсол (Witepsol^® H 5, 12, 15, 19, 32, 35, или 37; Witepsol^® W 25, 31, 32, 35, или 45; Witepsol^® S 51, 55, или 58; Witepsol^® Е 75, 76, или 85), Лазупол, Суппорин М, бутирол, имхаузен, ланоль и другие основы, разрешенные к медицинскому применению. Предпочтительная дифильная суппозитоная основа для использования в составе фармацевтической композиции настоящего изобретения - это Витепсол W35 (Witepsol® W35).

В передпочтительном воплощении изобретения, суппозиторная основа представляет собой смесь масла какао и Витепсола W35.

В практике настоящего изобретения, единичная дозированная форма суппозитория может иметь общую массу от 0,5 (детские) до 5,0 г; длину от 2 до 5 см и максимальный диаметр до 1,5 см. По геометрической форме единичная дозированная форма суппозитория может быть выполнена в виде конуса, цилиндра с заостренным концом, палочки с заостренным концом, шарика (глобулы), плоского объекта с закругленным концом (пессарии), объекта яйцеобразной формы (овули), сигарообразной формы, торпедообразной формы, а также в виде любых других геометрических форм, обеспечивающих удобное введение суппозитория в прямую кишку как описано, например, в «Технология лекарственных форм» под ред. Ивановой ЛА. - М.: Медицина, 1991.

Фармацевтическая композиция настоящего изобретения в виде суппозитория настоящего изобретения помимо основы для суппозитория может содержать другие вспомогательные вещества.

Использованный здесь термин «вспомогательное вещество» означает вещество неорганического или органического происхождения, не являющееся основой для суппозитория и используемое в процессе производства, изготовления лекарственного препарата для придания ему необходимых физико-химических свойств.

Неэксклюзивные примеры вспомогательных веществ для использования в композициях настоящего изобретения включают воду фармакопейного качества, буферные системы для поддержания требуемого значения рН, антимикробные консерванты и стабилизаторы, стабилизирующие агенты и эмульгаторы. Подбор вспомогательных веществ для использования в композициях настоящего изобретения может быть осуществлен на основе следующих критериев: вспомогательное вещество не должно влиять на основное терапевтическое действие композиции, не должно быть токсичными в используемых количествах и не должно неблагоприятно воздействовать на функции слизистой оболочки прямой кишки.

В некоторых воплощениях, композиции настоящего изобретения могут содержать до 20% вспомогательного вещества.

Использованный здесь термин «вода фармакопейного качества» относится к воде, удовлетворяющей требованиям фармакопеи и нормативных документов РФ и других стран, в частности, требованиям ФС.2.2.0020.15 «вода очищенная»; требованиям ФС.2.2.0019.15 «вода для инъекций»; нормативным документам «Руководство по качеству воды для применения в фармации. Методические рекомендации», Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения и социального развития РФ, 2009» и «CPMP/QWP/158/01 «Note for Guidance on Quality of Water for Pharmaceutical Use», EMEA, 2002»; или любым другим нормативным актам действующим в этой сфере. Предпочтительно, вода в составе композиций настоящего изобретения выбирается из группы, состоящей из воды очищенной и воды для инъекций.

Использованный здесь термин «ректальное введение» означает введение фармацевтической композиции в полость прямой кишки с целью абсорбции и поступления действующего вещества в систему кровообращения для последующей доставки в органы и ткани, на которые данное вещество оказывает терапевтическое воздействие.

В некоторых воплощениях изобретения, фармацевтическая композиция в виде суппозитория для ректального введения содержит 3-15 мас.% воды, 1-75 мас.% масла какао и до 100,0 мас.% Витепсола W35.

В передпочтительном воплощении изобретения, единичная дозированная форма фармацевтической композиции в виде суппозитория для ректального введения содержит 0,5 мас.% гексапептида формулы (I) в качестве действующего вещества, 5 мас.% воды очищенной, 5 мас.% масла какао и до 100,0 мас.% Витепсола W35.

Настоящее изобретение относится к способу получения фармацевтической композиции пролонгированного действия, содержащей 0,02-2,0 мас. % гексапептида формулы H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg-OH (I) или его фармацевтически приемлемой соли, характеризующийся тем, что получают композицию в виде суппозитория, при этом способ включает стадию растворения гексапептида формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли в воде и стадию смешивания полученного раствора с суппозитарной основой.

В передпочтительном воплощении изобретения, в качестве фармацевтически приемлемой соли гексапептида формулы (I) используют диацетат.

В некоторых воплощениях изобретения, в качестве суппозиторной основы используют смесь, содержащую масло какао и Витепсол, предпочтительно смесь, содержащую масло какао и Витепсол W35.

В некоторых воплощениях изобретения, для растворения гексапептида формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли используют воду очищенную.

В передпочтительном воплощении изобретения, используют воду и компоненты суппозитарной основы в количествах, необходимых для получения суппозиториев следующего состава: 3-15 мас.% воды очищенной, 1-75 мас.% масла какао и до 100,0 мас.% Витепсола W35.

В передпочтительном воплощении изобретения, используют компоненты композиции в количествах, необходимых для получения суппозиториев следующего состава: 0,5 мас.% гексапептида формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, 5 мас.% воды очищенной, 5 мас.% масла какао и до 100,0 мас.% Витепсола W35.

В практике настоящего изобретения, процесс получения фармацевтической композиции в виде суппозиториев может включать подготовительную стадию (подготовка вентиляционного воздуха и воды очищенной, подготовка производства, подготовка сырья), приготовление водного раствлора гексапептида (I), приготовление расплава суппозиторной основы, приготовление суппозиторной массы смешиванием водного раствора гексапептида (I) и расплава суппозиторной основы, розлив суппозиториев в ячейки суппозиторной ленты, запайку суппозиториев.

В практике настоящего изобретения, фармацевтические композиции пролонгированного действия в виде суппозиториев могут быть использованы для лечения заболеваний, связанных с воспалением, включая: острый и хронический панкреатит; язва желудка и двенадцатиперстной кишки; воспалительные заболевания органов таза; заболевания скелетно-мышечной и соединительной ткани, включая аутоиммунные ревматические заболевания, такие как аутоиммунный миозит, эозинофильный фасциит, смешанное заболевание соединительной ткани, рецидивирующий полихондрит, синдром Шегрена, системная красная волчанка; патология синовиальных сумок, мышц и сухожилий, включая бурсит, фибромиалгии, тендинит и теносиновит; заболевания суставов, включая нейрогенную артропатию, остеоартроз, ревматоидный артрит, анкилозирующий спондилит, псориатический артрит, реактивный артрит остеоартрит, ювенильный хронический артрит, септический артрит, артрит Лайма, спондилоартропатию; боли в шее и спине; васкулит; болезни периферических вен, включая хроническую венозную недостаточность и постфлебитический синдром, тромбоз глубоких вен, тромбоз поверхностных вен, варикозное расширение вен; болезни периферических артериальных сосудов, включая поражение периферических артерий, острую окклюзию периферических артерий, облитерирующий тромбангиит; нарушения сердечно-сосудистой системы, включая атеросклероз, аритмии, ишемическую болезнь сердца, стенокардию, синдром Х, нестабильную стенокардию, острый инфаркт миокарда, осложнения острых коронарных синдромов, эндокардит, сердечная недостаточность, артериальная гипертензия, неотложные состояния, заболевания лимфатической системы, миокардит и перикардит, спортивное сердце; эндокринные и метаболические нарушения, включая нарушения работы надпочечников, амилоидоз, сахарный диабет и нарушения углеводного обмена, нарушения липидного обмена, дислипидемия, пониженный уровень липопротеинов высокой плотности, гиполипидемия; легочные нарушения, включая острый бронхит, бронхиальная астма и смежные патологии, бронхоэктатическая болезнь и ателектаз, хроническая обструктивная болезнь легких и сопутствующие заболевания, интерстициальные заболевания лёгких, острая эозинофильная пневмония, хроническая эозинофильная пневмония, синдром Леффлера, гиперчувствительный пневмонит, острая интерстициальная пневмония, криптогенная организующаяся пневмония, вирусная пневмония, грибковая пневмония, идиопатический легочный фиброз, абсцесс лёгких, заболевания средостения и плевры, фиброз и кальциноз плевры, вирусный плеврит, пневмония, внебольничная пневмония, внутрибольничная пневмония, вентиляторно-ассоциированная пневмония, легочная гипертензия, апноэ; заболевания пародонта, включая острый некротический язвенный гингивит, гингивит; стоматологическая патология, включая пульпит, кариес, воспаление губ; заболевания уха, горла и носа, включая заложенность носа и ринорея, ангина, нарушения вкуса и обоняния, аносмия, заболевания наружного уха, дерматит слухового прохода (хронический наружный отит), обструкция наружного уха, наружный отит (острый), потеря слуха, заболевания внутреннего уха, ганглионит узла коленца, болезнь Меньера, гнойный лабиринтит, вестибулярный нейронит, заболевания гортани, ларингит, заболевания среднего уха и барабанной перепонки, мастоидит, мирингит, острый средний отит, средний отит (секреторный), средний отит (хронический гнойный), баротравма, отосклероз, травматическая перфорация барабанной перепонки, заболевания носа и параназальной пазухи, неаллергический ринит, синусит, заболевания полости рта и глотки, заболевания аденоидов, окологлоточный абсцесс, паратонзиллярный абсцесс и паратонзиллит, заглоточный абсцесс, сиалоаденит, тонзиллофарингит; болезни печени и желчевыводящих путей; сосудистые нарушения печени, включая синдром Бадда-Киари, застойная гепатопатия, ишемическая холангиопатия, ишемический гепатит, тромбоз воротной вены, облитерирующий эндофлебит; патология мочкполовой системы, включая хроническую болезнь почек, простатит; реакция "трансплантат против хозяина", отторжение трансплантата органа, острое или хроническое иммунное заболевание, связанное с трансплантацией органа; хронический активный гепатит, увенит, септический шок, синдром токсического шока, септический синдром, кахексия, синдром приобретенного иммунодефицита, острый поперечный миелит, ишемический и геморрагический инсульт, транзиторная ишемическая атака; первичный билиарный цирроз; гемолитическая анемия; хроническая ишемия нижних конечностей; эндотелиальная дисфункция; синдром высвобождения цитокинов; цитокиновый шторм, синдром системного воспалительного ответа; дерматологическая патология, включая зуд, крапивницу, кожные проявления внутренних заболеваний, акне и связанные с ними расстройства, вульгарные угри, гнойный гидраденит, фолликулит, фурункулы и карбункулы, лимфаденит, лимфангит, кожные папилломы, сосудистые поражения кожи, нарушения кератинизации, дерматит, атопический дерматит (экзема), контактный дерматит, витилиго, пролежни, псориаз и десквамативные дерматозы, фоточувствительность, солнечный ожог; неврологические расстройства, включая нарушение памяти, мышечные спазмы, онемение, слабость, боль, хроническая боль, нейропатическая боль, рефлекторная симпатическая дистрофия, заболевания периферической нервной системы и мотонейрона, нарушения нервно-мышечной передачи, синдром Исаакса, синдром мышечной скованности, хроническая воспалительная демиелинизирующая полинейропатия, боковой амиотрофический склероз и другие болезни мотонейрона, миастения гравис, поражения нервных корешков, периферическая нейропатия, мононевропатии, множественная мононейропатия, полинейропатия, заболевания плечевого и пояснично-крестцового сплетений, спинальные мышечные атрофии.

Следующие примеры демонстрируют изобретение. Примеры иллюстрируют изобретение и не предназначены для ограничения объема изобретения тем или иным образом.

Пример 1.

Пример иллюстрирует фармацевтическую композицию настоящего изобретения.

Состав фармацевтической композиции в виде суппозитория показан в таблице 1.

Таблица 1. Состав фармацевтической композиции.

Состав	Содержание, мас.%
Гексапептид (I) диацетат	0,02-2,0
Вода очищенная	3,0-15,0
Масло какао	1,0-75,0
Витепсол W35	до 100,0

Фармацевтическую композицию в виде суппозитория получают следующим образом. Диацетат гексапептида (I) растворяют в воде очищенной в количествах необходимых для получения раствора с содержанием гексапептида (I) указанным в таблице 1. В смеситель загружают масло какао и Витепсол W35 в соотношениях, указанных в таблице 1, нагревают содержимое при 45°С до образования гомогенного расплава, охлаждают до 40°С. В полученный расплав добавляют водный раствор диацетата гексапептида (I), гомогенизируют суппозиторную массу при перемешивании, разливают в ячейки ленты суппозитория и суппозитории запаивают.

Пример 2.

Пример иллюстрирует процесс получения фармацевтической композиции в виде суппозитория.

Процесс получения фармацевтической композиции в виде суппозитория для ректального введения включает следующие стадии:

Подготовка вентиляционного воздуха. Процесс производства суппозиториев осуществляется в помещениях с контролируемыми параметрами микроклимата, при этом вентиляционный воздух, поступающий в помещения производства, проходит через базовую систему очистки и кондиционируется в помещениях с тем, чтобы максимально-допустимое общее количество микроорганизмов в 1 м³ воздуха не превышало 200 КОЕ.

Подготовка воды очищенной. Вода очищенная по показателям ФС производится из питьевой воды с использованием комбинации обратного осмоса, мембранной дегазации и электродеионизации.

Подготовка помещений и технологического оборудования. Подготовка помещений и технологического оборудования в производственных помещениях осуществляется согласно внутренним стандартным процедурам, чтобы предупредить микробную обсемененность производимой фармацевтической композиции.

Подготовка сырья. Все поступающее сырье проходит входной контроль.

Приготовление суппозиторной массы. В открытый смеситель загружают 1788,9 г Витепсола W35 и 100 г масло какао. При открытой крышке смесителя нагревают содержимое до 45°С при перемешивании и выдерживают при данной температуре до полного расплавления, затем расплав охлаждают до 40°С. В отдельной таре растворяют 11,1 г гексапептида (I) диацетата в 100 г воды очищенной в пропорциях, указанных в таблице 2, до образования прозрачного раствора. Смешивают приготовленный водный раствор гексапептида (I) и нагретый расплав смеси Витепсола W35 и масла какао в смесителе. Закрывают крышку смесителя, устанавливают количество оборотов гомогенизатора 2000 и запускают процесс гомогенизации. По окончании гомогенизации переносят массу в отдельную емкость. Выход суппозиторной массы 98,5%.

Розлив суппозиториев. Размещают пустую суппозиторную ленту в держателе машины розлива и устанавливают температуру наполняющей емкости для суппозиторной массы 40°С и начинают автоматический розлив горячей суппозиторной массы. После розлива суппозитории оставляют охлаждаться в отсеке размещения наполненной ленты. Выход на стадии составляет 99% (по основному веществу).

Запайка суппозиториев. Застывшие суппозитории фиксируют на держателе ленты, запускают процесс запайки и разрезания суппозиторной ленты. Готовая продукция представляет собой суппозитории массой 2 г, содержанием гексапептида (I) 10 мг. Состав суппозиториев показан в таблице 2. Готовую продукцию перемещают на основной склад. Выход на стадии составляет 100% (по основному веществу).

Таблица 2. Состав суппозитория.

Состав	Содержание, мас.%
Гексапептида (I) диацетат	0,5*
Вода очищенная	5,0
Масло какао	5,0
Витепсол W35	до 100,0

*В пересчете на свободный гексапептид (I).

Пример 3.

Пример показывает фармакокинетику гексапептида (I) в системном кровообращении при введении фармацевтической композиции настоящего изобретения в виде суппозитория в сравнении с инъекционным введением.

Светлогорские мини-свиньи самцы массой 18-20 кг (n=4, группа 1) получили однократно ректально суппозиторий настоящего изобретения, массой 2 г с составом как в примере 2 (таблица 2), что соответствует вводимой дозе 10 мг гексапептида (I). В группе сравнения, мини-свиньи (n=3, группа 2) получили однократно внутримышечно раствор, содержащий 10 мг гексапептида (I). Концентрацию гексапептида (I) в сыворотке крови измеряли до (0 мин) и через 1, 5, 10, 15, 20, 30, 45, 60, 90, 120 мин после введения методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным детектированием с применением времяпролетного масс-детектора ВЭЖХ-МС-МС (Agilent 1260, оснащенный автодозатором, с масс-селективным детектором Agilent 6545XT Accurate mass Q-TOF LC/MS). Результаты представлены в таблице 3 как среднее ± ошибка среднего концентрации гексапептида (I) в сыворотке крови в разные моменты времени после введения препаратов.

Таблица 3. Фармакокинетика.

Время, мин	Концентрация гексапептида (I) в сыворотке крови, нг/мл
Суппозиторий	Внутримышечная инъекция
0 1 5 10 15 20 30 45 60 90 120	0 ± 0 32,1 ± 4,3 24,6 ± 5,5 24,3 ± 5,7 52,4 ± 21,6* 43,8 ± 15,5* 52,9 ± 14,7* 60,4 ± 20,3* 85,6 ± 28,7* 67,3 ± 28,6* 57,5 ± 31,9*	0 ± 0 254,1 ± 27,9 17,4 ± 2,2 5,9 ± 2,0 5,2 ± 0,9 5,9 ± 1,7 5,8 ± 2,1 7,0 ± 2,7 8,1 ± 1,4 9,8 ± 4,0 6,2 ± 1,2

*Достоверное отличие от внутримышечной инъекции (p<0,05).

Таблица 3 показывает, что ректальное введение фармацевтической композиции настоящего изобретения в виде суппозитория обеспечивает достоверно более высокую концентрацию гексапептида (I) в сыворотке крови в интервале времени 15-120 минут после введения, чем инъекционное введение гексапептида (I) в той же дозе. Таким образом, фармацевтические композиции настоящего изобретения обладают пролонгированным действием, т.е. они обеспечивают поддержание терапевтически эффективных уровней гексапептида (I) в крови в течение длительного времени, а именно в течение не менее двух часов, против 10 минут при инъекционном введении гексапептида (I) в той же дозе без применения усилителей абсорбции.

Площадь под фармакокинетической кривой (AUC) концентрации гексапептида (I) в сыворотке крови за 120 мин после введения суппозитория настоящего изобретения составила 7282 нг/мл против 1563 нг/мл при инъекционном введении, т.е. фармацевтическая композиция настоящего изобретения обеспечивает многократное увеличение суммарной концентрации гексапептида (I) в сыворотке крови при введении в виде суппозитория по сравнению в/м инъекцией раствора гексапептида (I) в той же дозе.

Пример 4.

Пример иллюстрирует пролонгированное высвобождение гексапептида (I) при введении суппозиториев настоящего изобретения.

Светлогорские мини-свиньи самцы массой 18-20 кг (n=4) получили однократно ректально суппозитории настоящего изобретения с содержанием гексапептида (I) диацетата 0,01 мас. % (состав: 0,2 мг гексапаптида (I) диацетата, 100 мг воды, 100 мг масла какао, 1799,8 мг Витепсола W35); 0,02 мас. % (состав: 0,4 мг гексапаптида (I) диацетата, 100 мг воды, 100 мг масла какао, 1799,6 мг Витепсола W35); 0,55 мас. % (состав: 11,1 мг гексапаптида (I) диацетата, 100 мг воды, 100 мг масла какао, 1788,9 мг Витепсола W35); 2,0 мас.% (состав: 40,0 мг гексапаптида (I) диацетата, 100 мг воды, 100 мг масла какао, 1760,0 мг Витепсола W35); и 5,0 мас. % (состав: 100 мг гексапептида (I) диацетата, 100 мг воды, 100 мг масла какао, 1700 мг Витепсола W35). В контроле животные получили суппозиторий не содержащий гексапептида (I) диацетата (0 мас.%). Концентрацию гексапептида (I) в сыворотке крови измеряли через 60 мин после введения суппозитория методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным детектированием с применением времяпролетного масс-детектора ВЭЖХ-МС-МС (Agilent 1260, оснащенный автодозатором, с масс-селективным детектором Agilent 6545XT Accurate mass Q-TOF LC/MS). Результаты представлены в таблице 4 как среднее ± ошибка среднего концентрации гексапептида (I) в сыворотке крови через 60 мин после введения суппозиториев.

Таблица 4. Концентрация гексапептида (I) в сыворотке крови через 60 мин после введения суппозиториев.

Содержание гексапептида (I) диацетата в суппозитории, мас.%	Концентрация гексапептида (I) в сыворотке крови, нг/мл
0	НП*
0,01	НП
0,02	3,1 ± 1,9
0,55	85,6 ± 28,7
2,0	373,1 ± 39,2
5,0	419,5 ± 45,3

*НП - не определялся (ниже предела обнаружения)

Таблица 4 показывает, что фармацевтические композиции настоящего изобретения в виде суппозиториев обеспечивают пролонгированное (не менее одного часа) и пропорциональное дозе высвобождение действующего вещества, а именно гексапептида (I), в системное кровообращение при ректальном введении в диапазоне содержания гексапептида (I) диацетата в суппозитории от 0,02 до 2,0 мас.%. Ниже указнного диапазона гексапептид (I) не определялся в крови, а выше указанного диапазона высвобождение гексапептида (I) в кровоток было непропорционально вводимой дозе. Таким образом, контролируемое пролонгированное высвобождение гексапептида (I) в системный кровоток наблюдалось в диапазоне его содержания в суппозитории от 0,02 до 2,0 мас.%.

Пример 5.

Пример иллюстрирует эффективность фармацевтической композиции настоящего изобретения в виде суппозитория.

Эффективность водной фармацевтической композиции настоящего изобретения была изучена на модели цитокинового шторма и острого поражения легких, вызыванного интратрахеальным введением липополисахарида (ЛПС), основного компонента клеточной стенки грамотрицательных бактерий, как описано в D'Alessio FR. Mouse Models of Acute Lung Injury and ARDS. Methods Mol Biol. 2018, 1809:341-350, с модификацией Aoyagi T et al., Shock. 2019, 52(1):83-9. Мышам вводили интратрахеально альфа-галактозилкерамид (1 мкг/мышь) и через 24 часа интратрахеально липополисахарид (ЛПС из E.coli; 1 мг/мышь) растворенный в полном адьюванте Фрейнда. Уровни интерлейкина-6 (ИЛ-6) в легких были использован как показатель поражения легких в данной модели острого поражения легких. Rincon M & Irvin CG. Int J Biol Sci. 2012;8(9):1281-90. Для оценки эффективности лекарственной формы через 30 мин после введения ЛПС мышам вводили однократно ректально 100 мкг/кг гексапептида (I) диацетата в виде суппозитория примера 2 с размерами, адаптированными для введения в мышь. В группах сравнения мышам вводили однократно внутримышечно 100 мкг/кг гексапептида (I) диацетата в виде раствора в дистиллированной воде (n=4) или дистиллированную воду (n=4, контроль). Концентрацию интерлейкина-6 в тканях легкого животных всех трех групп измеряли через 5 часов после введения ЛПС. Для сравнения, были измерены уровни ИЛ-6 в легочной ткани у интактных здоровых животных (n=4). Измерения проводились на мультиплексном ридере Bio-Plex® MAGPIX™ Multiplex Reader (Bio-Rad, SN: 12250707) с использованием стандартной коммерчески доступной панели (Bio-Plex Pro™ Mouse Cytokine Th17 Panel A 6-Plex #M6000007NY). Экстракт лёгочной ткани, стабилизированный ЭДТА, вносили в лунки планшета. Дальнейшие операции выполняли в соответствии с протоколом производителя. Результаты представлены в таблице 5 как среднее ± ошибка среднего содержания ИЛ-6 в легочной ткани.

Таблица 5. Содержание ИЛ-6 в легких.

Группа №№	Содержание ИЛ-6, пг/мл
Интактные	117 ± 14
Контроль	876 ± 92*
Гексапептида (I) диацетат в/м инъекция	408 ± 64*#
Гексапептида (I) диацетат суппозиторий	156 ± 16*#

*Достоверное отличие от интактных (p<0,05). ^#Достоверное отличие от контроля (p<0,05).

Таблица 5 показывает, что ЛПС многократно увеличивает продукцию ИЛ-6 в легких p<0,05) по сравнению с таковой у интактных животных. Инъекционное в/м введение гексапептида (I) снижает продукцию ИЛ-6 в легких в 2,1 раза (p>0,05) по сравнению с контролем. Введение гексапептида (I) в составе фармацевтической композиции пролонгированного действия в виде суппозитория снижает продукцию ИЛ-6 в легких в 5,6 раза (p<0,05) по сравнению с контролем, причем композиция пролонгированного действия была более эффективна, чем инъекция гексапептида (I) в той же дозе. Таким образом, фармацевтической композиции пролонгированного действия настоящего изобретения в виде суппозитория является более эффективной лекарственной формой для достижения терапевтического эффекта гексапептида (I), чем в/м инъекция гексапептида (I) в той же дозе.

1. Применение фармацевтической композиции пролонгированного действия, содержащей 0,02-2,0 мас.% гексапептида формулы H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg-OH (I) или его фармацевтически приемлемой соли и суппозитарную основу, для получения суппозитория для ректального введения.

2. Применение по п. 1, отличающееся тем, что фармацевтически приемлемая соль гексапептида формулы (I) представляет собой диацетат.

3. Применение по любому из пп. 1, 2, отличающееся тем, что суппозитарная основа содержит масло какао и Витепсол.

4. Применение по п. 3, отличающееся тем, что суппозитарная основа масло какао и содержит Витепсол W35.

5. Применение по любому из пп. 1-4, отличающееся тем, что содержит 3-15 мас.% воды, 1-75 мас.% масла какао и до 100,0 мас.% Витепсола W35.

6. Применение по п. 5, отличающееся тем, что содержит воду очищенную.

7. Применение по любому из пп. 5, 6, отличающееся тем, что содержит 0,5 мас.% гексапептида формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, 5 мас.% воды очищенной, 5 мас.% масла какао и до 100,0 мас.% Витепсола W35.

8. Способ получения суппозитория для ректального введения, содержащего 0,02-2,0 мас.% гексапептида формулы H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg-OH (I) или его фармацевтически приемлемой соли, характеризующийся тем, что включает стадию растворения гексапептида формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли в воде и стадию смешивания полученного раствора с суппозитарной основой с получением суппозитория.

9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что в качестве фармацевтически приемлемой соли гексапептида формулы (I) используют диацетат.

10. Способ по любому из пп. 8, 9, отличающийся тем, что в качестве суппозиторной основы используют смесь, содержащую масло какао и Витепсол.

11. Способ по любому из пп. 8-10, отличающийся тем, что в качестве суппозиторной основы используют смесь, содержащую масло какао и Витепсол W35.

12. Способ по любому из пп. 8-11, отличающийся тем, что для растворения гексапептида формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли используют воду очищенную.

13. Способ по любому из пп. 8-12, отличающийся тем, что используют воду и компоненты суппозитарной основы в количествах, необходимых для получения суппозиториев следующего состава: 3-15 мас.% воды очищенной, 1-75 мас.% масла какао и до 100,0 мас.% Витепсола W35.

14. Способ по любому из пп. 8-13, отличающийся тем, что используют компоненты композиции в количествах, необходимых для получения суппозиториев следующего состава: 0,5 мас.% гексапептида формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, 5 мас.% воды очищенной, 5 мас.% масла какао и до 100,0 мас.% Витепсола W35.