Продукт, содержащий экзосомы растительного происхождения

Авторы патента:

ШАХИН, Фикреттин (TR)

ЙИЛДИРИМ, Мерве (TR)

КОЧАК, Полен (TR)

УЛУКАН, Бюрге (TR)

A61P35/00 - Противоопухолевые средства

A61K36/8962 - Лекарства и медикаменты для терапевтических, стоматологических или гигиенических целей (изготовление специальных лекарственных форм A61J; химические аспекты или использование материалов для дезодорации воздуха, для дезинфекции или стерилизации или для бандажей, перевязочных средств, впитывающих прокладок или хирургических приспособлений A61L; соединения как таковые C01, C07,C08,C12N; мыла C11D; микроорганизмы как таковые C12N)

Владельцы патента RU 2764717:

ЕДИТЕПЕ УНИВЕРСИТЕСИ (TR)

Настоящее изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к продукту для лечения рака. Продукт для лечения рака, который содержит растительные экзосомы, где рак выбран из рака простаты, рака молочной железы и рака почки и растительная экзосома получена из ростков пшеницы. Вышеописанный продукт эффективен для лечения рака, выбранного из рака простаты, рака молочной железы и рака почки, не вызывает токсического воздействия на организм человека, не вызывает повреждения здоровых клеток во время курса лечения рака, не представляет никакого риска инфицирования, так как не требует каких-либо процедур, например лучевой терапии или оперативного вмешательства, и при этом не наблюдаются побочные эффекты, возникающие при химиотерапии. 1 з.п. ф-лы, 8 ил.

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к продукту, содержащему экзосомы растительного происхождения, который может быть использован для лечения рака и заживления ран.

Уровень техники изобретения

В многоклеточных организмах коммуникация, осуществляемая в результате связывания высвобождаемых из клетки белков с рецепторами на поверхности другой клетки, является фундаментальным принципом межклеточной коммуникации. Хотя о экзосомах известно не так много информации, они являются главными молекулами коммуникации, которые в настоящее время значительно востребованы (1-3). Хотя они фигурировали как материал, нежелательный для клетки, и как клеточные отходы, когда их впервые обнаружили, в результате проведенных исследований было доказано, что экзосомы играют существенную роль в иммунной системе (4). Экзосомы представляют собой везикулы размером 20-130 нм (наноразмерные), которые продуцируются всеми клетками в плазме и высвобождаются из клетки (5). Недавно было обнаружено, что эти везикулы играют роль в эндокринной системе, обеспечивая аутокринные и паракринные сигналы для локальных или дистальных клеток-хозяев. Эти экзосомы также отвечают за перенос белков, жиров, нуклеиновых кислот (все типы РНК) и передачу их в клетки-реципиенты. Таким образом, информация, которая должны быть передана от клеток, передается другим соседним клеткам (3). Семейство тетраспанинов является группой белков, которая наиболее часто встречается на поверхности экзосом. Это семейство включает белки CD9, BCD63, CD81, CD82, CD83. Белки семейства тетраспанинов обладают способностью взаимодействовать с белками МНС и интегринами (6). Независимо от того, насколько пытаются обобщить пул белков экзосом, он является в значительной степени клеточноспецифическим, поэтому зависит от клетки, из которой высвобождается. Следовательно, различные белки (теплового шока) являются членами этого пула (hsp70). В то же время белки, обнаруженные в цитоскелете, а именно: β-актин, тубулин, миозин, кофилин, молекулы главного комплекса гистосовместимости I-II класса и глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа, которые являются основными распространенными белками пула белков экзосом. Для того чтобы экзосома попала в клетки, которым она будет передана, она должна стимулировать рецепторы клеточной поверхности другой клетки. Следовательно, белки сигнального пути Wnt-β-катенин, notchligang, дельта-подобный белок 4 и интерлейкины должны находиться на поверхности экзосомы. В противном случае экзосома не сможет стимулировать клетку-хозяина, которой она будет передавать информацию.

В исследовании доказан тот факт, что экзосомы, полученные от клеток млекопитающих, потенциально могут быть использованы при лечении рака (Reghu et al. 2016). Кроме того, было показано, что экзосомы обладают антиканцерогенной активностью в отношении раковых клеток млекопитающих (Ohno et al. 2013). В другом исследовании, проведенном аналогичным образом, было установлено, что экзосомы, полученные из эпителия мозга, демонстрируют активность против рака мозга (Reriro et al. 2015).

Пшеница (Triticum Aestivum) играет важную роль в рационе питания человека в рамках классификации растительной пищи. В соответствии с проведенными эпидемиологическими исследованиями было доказано, что она играет защитную роль у больных хронической талассемией и раком. Для использования в лечении рака было разработано множество форм пшеницы (ростки или семя (зародыш)). Кроме того, антиоксидантами также являются имбирь и чеснок. В проведенных исследованиях, экзосомы животного происхождения использовались для различных применений. При этом, хотя установлено, что экзосомы растительного происхождения являются антиоксидантами, отмечается, что существует колоссальная потребность в их изучении. По имеющимся данным, экзосомы растений проявляют сходные свойства с экзосомами млекопитающих.

Методы лечения, такие как хирургические операции, лучевая терапия и химиотерапия, которые нацелены на делящиеся клетки, часто приводят к рецидиву рака или возникновению большого количества побочных эффектов (Kubota, 2012).

Патентный документ США № US2016346334 раскрывает экзосомы, полученные из здоровых клеток, для использования при лечении рака молочной железы.

Благодаря настоящему изобретению был разработан альтернативный способ лечения, позволяющий вызывать гибель раковых клеток без нанесения вреда здоровым клеткам с помощью продукта, содержащего растительные экзосомы. Кроме того, тот факт, что экзосомы являются продуктами, не содержащими клеток, позволил предотвратить проблемы, которые могут быть вызваны клеточной терапией. Экзосомы представляют собой готовые терапевтические агенты. Они могут храниться при низких температурах, не требуя использования токсичных криоконсервантов и ультранизкотемпературных морозильников, и могут быть безопасно доставлены пациентам. Основываясь на этой информации, способ направлен на использование ростков пшеницы, чеснока и имбиря, которые используются в альтернативной медицине в лечении рака и в качестве целебного средства для ран.

Сущность изобретения

Целью настоящего изобретения является создание продукта, содержащего экзосомы растительного происхождения, который может быть использован для лечения рака.

Другой целью настоящего изобретения является создание продукта, не оказывает токсического воздействия на организм человека.

Еще одной целью настоящего изобретения является создание продукта, который эффективен для заживления ран и восстановления поврежденных тканей.

Другой целью настоящего изобретения является создание продукта, при использовании которого не наблюдаются побочные эффекты, возникающие при химиотерапии.

Другой целью настоящего изобретения является создание продукта, который не вызывает повреждения здоровых клеток во время лечения рака.

Еще одной целью настоящего изобретения является создание продукта, который не представляет никакого риска инфицирования, поскольку он не требует какой-либо процедуры, например, лучевой терапии или оперативного вмешательства.

Еще одной целью настоящего изобретения является создание недорогого продукта.

Еще одной целью настоящего изобретения является создание продукта природного происхождения, при котором не происходит химического заражения, возникающее в организме из-за синтетических лекарственных средств.

Другой целью настоящего изобретения является создание практичного и легкодоступного продукта, поскольку растения, используемые для лечения, растут легко, и за короткий период времени получают значительное количество экзосом.

Подробное описание изобретения

«Продукт, содержащий экзосомы растительного происхождения», разработанный для выполнения задач настоящего изобретения, иллюстрируется на прилагаемых фигурах, где

на Фиг. 1-А представлены значения проточной цитометрии контрольной группы клеток рака почки A498.

На Фиг. 1-B представлены значения проточной цитометрии контрольной группы клеток рака почки A498 с окрашиванием аннексином V.

На Фиг. 1-C представлены значения проточной цитометрии контрольной группы клеток рака почки A498 с окрашиванием PI.

На Фиг. 1-D представлены значения гибели клеток рака почки A498, полученных методом проточной цитометрии, для которых применяли экзосомы пшеницы в концентрации 15 мг/мл.

На Фиг. 1-E представлены значения гибели клеток рака почки A498, полученных методом проточной цитометрии, для которых применяли экзосомы имбиря в концентрации 15 мг/мл.

На Фиг. 1-F представлены значения гибели клеток рака почки A498, полученных методом проточной цитометрии, для которых применяли экзосомы чеснока в концентрации 15 мг/мл.

На Фиг. 2-А представлены значения проточной цитометрии контрольной группы эпителиальных клеток почки HEK 293.

На Фиг. 2-B представлены значения проточной цитометрии контрольной группы эпителиальных клеток почки HEK 293 с окрашиванием PI.

На Фиг. 2-С представлены значения проточной цитометрии контрольной группы эпителиальных клеток почки HEK 293 с окрашиванием аннексином V.

На Фиг. 2-D представлены значения гибели эпителиальных клеток почки HEK 293, полученных методом проточной цитометрии, для которых применяли экзосомы пшеницы в концентрации 15 мг/мл.

На Фиг. 2-E представлены значения гибели эпителиальных клеток почки HEK 293, полученных методом проточной цитометрии, для которых применяли экзосомы имбиря в концентрации 15 мг/мл.

На Фиг. 2-F представлены значения гибели эпителиальных клеток почки HEK 293, полученных методом проточной цитометрии, для которых применяли экзосомы чеснока в концентрации 15 мг/мл.

На Фиг. 3-А представлены значения проточной цитометрии контрольной группы клеток рака простаты 22RV1.

На Фиг. 3-B представлены значения проточной цитометрии контрольной группы клеток рака простаты 22RV1 с окрашиванием аннексином V.

На Фиг. 3-C представлены значения проточной цитометрии контрольной группы клеток рака простаты 22RV1 с окрашиванием PI.

На Фиг. 3-D представлены значения гибели клеток рака простаты 22RV1, полученных методом проточной цитометрии, для которых применяли экзосомы пшеницы в концентрации 15 мг/мл.

На Фиг. 3-E представлены значения гибели клеток рака простаты 22RV1, полученных методом проточной цитометрии, для которых применяли экзосомы имбиря в концентрации 15 мг/мл.

На Фиг. 3-F представлены значения гибели клеток рака простаты 22RV1, полученных методом проточной цитометрии, для которых применяли экзосомы чеснока в концентрации 15 мг/мл.

На Фиг. 4-А представлены значения проточной цитометрии контрольной группы эпителиальных клеток простаты PNT1A.

На Фиг. 4-B представлены значения проточной цитометрии контрольной группы эпителиальных клеток простаты PNT1A с окрашиванием PI.

На Фиг. 4-B представлены значения проточной цитометрии контрольной группы эпителиальных клеток простаты PNT1A с аннексином V.

На Фиг. 4-D представлены значения гибели эпителиальных клеток простаты PNT1A, полученных методом проточной цитометрии, для которых применяли экзосомы пшеницы в концентрации 15 мг/мл.

На Фиг. 4-E представлены значения гибели эпителиальных клеток простаты PNT1A, полученных методом проточной цитометрии, для которых применяли экзосомы имбиря в концентрации 15 мг/мл.

На Фиг. 4-F представлены значения гибели эпителиальных клеток простаты PNT1A, полученных методом проточной цитометрии, для которых применяли экзосомы чеснока в концентрации 15 мг/мл.

На Фиг. 5-А представлены значения проточной цитометрии контрольной группы клеток рака молочной железы MCF 7.

На Фиг. 5-B представлены значения проточной цитометрии контрольной группы клеток рака молочной железы MCF 7 с окрашиванием аннексином V.

На Фиг. 5-С представлены значения проточной цитометрии контрольной группы клеток рака молочной железы MCF 7 с окрашиванием PI.

На Фиг. 5-D представлены значения гибели клеток рака молочной железы MCF 7, полученных методом проточной цитометрии, для которых применяли экзосомы пшеницы в концентрации 15 мг/мл.

На Фиг. 5-E представлены значения гибели клеток рака молочной железы MCF 7, полученных методом проточной цитометрии, для которых применяли экзосомы имбиря в концентрации 15 мг/мл.

На Фиг. 5-F представлены значения гибели клеток рака молочной железы MCF 7, полученных методом проточной цитометрии, для которых применяли экзосомы чеснока в концентрации 15 мг/мл.

На Фиг. 6-А представлены значения проточной цитометрии контрольной группы эпителиальных клеток молочной железы MCF 10A.

На Фиг. 6-B представлены значения проточной цитометрии контрольной группы эпителиальных клеток молочной железы MCF 10A с окрашиванием PI.

На Фиг. 6-С представлены значения проточной цитометрии контрольной группы эпителиальных клеток молочной железы MCF 10A с окрашиванием аннексином V.

На Фиг. 6-D представлены значения гибели эпителиальных клеток молочной железы MCF 10A, полученных методом проточной цитометрии, для которых применяли экзосомы пшеницы в концентрации 15 мг/мл.

На Фиг. 6-E представлены значения гибели эпителиальных клеток молочной железы MCF 10A, полученных методом проточной цитометрии, для которых применяли экзосомы имбиря в концентрации 15 мг/мл.

На Фиг. 6-F представлены значения гибели эпителиальных клеток молочной железы MCF 10A, полученных методом проточной цитометрии, для которых применяли экзосомы чеснока в концентрации 15 мг/мл.

Фиг. 7 представляет собой электронно-микроскопическое изображение, на котором определяется присутствие растительной экзосомы, полученной из пшеницы.

Фигура 8 представляет собой диаграмму проточной цитометрии, где присутствие растительной экзосомы, полученной из пшеницы, определяют с помощью поверхностного маркера HSP 70.

В соответствии с этими результатами показано, что растительная экзосома приводит к апоптозу только раковых клеток, вызывая гибель указанных клеток, но не вызывает гибели в здоровых клетках.

Экспериментальное исследование

Получение экзосомы растительного происхождения

В заявляемом продукте содержится экзосома растительного происхождения; ростки пшеницы, имбирь и чеснок можно использовать отдельно или в сочетании в качестве растительного источника. Пшеница предпочтительно выбрана в экспериментальных исследованиях, была получена из Турции, Адан, Джейхан, 69 семян. В ходе работы по предварительной пробоподготовке было установлено, что для роста семян достаточно периода 1,5 недели.

Собранные ростки пшеницы сначала измельчали в 1% PBS (фосфатно-солевой буферный раствор) и затем фильтровали. Полученный фильтрат ростков пшеницы центрифугировали при 1000 g в течение 10 мин, 3200 g в течение 20 мин, 15000 g в течение 60 мин и затем выделяли клеточную культуру, используя набор для выделения экзосом. Выделенные экзосомы растворяли в 0,9% изотонической сыворотке.

Экзосомы продукта по изобретению, которые были выделены и находились в форме сыворотки, наблюдали с помощью сканирующего электронного микроскопа (Фиг. 7). Затем их инкубировали, используя маркер HSP 70, и обнаруживали наличие экзосом методом проточной цитометрии.

Разработка метода лечения

Определение токсичности для клеток

Токсическое действие приготовленного продукта по изобретению определяли с помощью метода MTS-теста, представленного в литературе (Yalvac et al., 2009).

Химические молекулы получали в среде в заданных концентрациях и наносили на клеточные линии HEK (эпителиальные клетки почки человека), MCF 10A (эпителиальные клетки молочной железы человека) и PNT1A (эпителиальные клетки простаты человека), которые высевали на 96-луночные культуральные планшеты, посредством подсчета (5000 клеток на лунку). Реакцию клеток на токсичность химических веществ определяли путем измерения жизнеспособности клеток в течение 4 сут. Анализ жизнеспособности клеток проводили по методу MTS-теста. MTS-тест представляет собой колориметрический метод, используемый для измерения активности митохондриальных ферментов. К клеткам, которые были посеяны в лунки заранее, применяли различные дозы, и изучали влияние применяемого вещества на жизнеспособность в течение определенного периода времени. Применяемое вещество MTS при увеличении количества жизнеспособных клеток при смешивании со средой приобретает темный цвет. Полученное изменение цвета оценивали на основании измерения оптической плотности с использованием ридера для ИФА-планшетов. Продукт, разработанный в рамках настоящего изобретения, получают таким образом, чтобы достичь результатов при концентрациях 5 нг/мл, 10 нг/мл, 15 нг/мл в течение 24, 48, 72 и 96 ч в здоровых клетках.

Анализ гибели раковых клеток

Чтобы изучить влияние на рак продукта по изобретению, было изучено присутствие белка аннексина V, одного из наиболее значимых белков пути апоптоза, который является механизмом самоуничтожения. Для определения наличия некроза использовали краситель PI (пропидий иодид).

Клетки 22RV1 (клетки рака предстательной железы), MCF 7 (клетки рака молочной железы), A498 (клетки рака почки) высевали в 6-луночные планшеты для культивирования при плотности 300000 клеток на лунку. 10% FBS (сыворотка крови эмбрионов коров) и 1% PSA (пенициллин-стрептомицин-амфотерицин) добавляли к средам с высоким содержанием глюкозы RPMI для линии клеток 22RVI и DMEM для линий клеток MCF 7 и A498, позволяя тем самым клеткам расти. Показатели гибели клеток, которые обрабатывали при указанных концентрациях, исследовали через 24 ч. Результаты показали, что клетка, связанная с антителом к аннексину V, подвергалась апоптозу или вскоре подвергалась апоптозу, и что клетка, связанная с антителом, окрашенная PI, подвергалась или вскоре подвергалась некрозу. Учитывая наличие этих антител, было определено, что применяемая обработка уничтожила клетку.

Аналогичный протокол эксперимента также был применен к клеточным линиям MCF10-A, PNT1-A и HEK, которые являются здоровыми клеточными линиями.

Исследование заживления ран

Помимо применения продукта по настоящему изобретению при лечении рака, также изучалось его применение при заживлении ран. В экспериментальном исследовании, проведенном с этой целью, здоровые клетки линии HEK высевали в 6-луночные культуральные планшеты. Модель раны была сформирована путем создания царапины, проходящей через центр лунок. Продукт, содержащий экзосомы, наносили на клетки, в которых была сформирована модель раны. Клетки инкубировали в течение 48 ч в продукте с концентрацией 15 нг/мл и среде DMEM, содержащей 2% FBS. Процесс заживления ран наблюдали последовательно, фотографируя каждый день под микроскопом.

Результаты эксперимента

Экзосома была получена с помощью разработанного способа выделения, предпочтительно с использованием ростков пшеницы. Этот продукт был экспериментально охарактеризован, и его активность по отношению к раку и ранозаживляющие свойства подтверждены результатами. На основе данных, полученных на изображении электронного микроскопа, было обнаружено, что рассматриваемые везикулы имеют сходство с электронно-микроскопическими изображениями экзосом, представленными в литературе (Фиг. 7). Результаты проточной цитометрии показали, что экспрессия маркера поверхности экзосом составляет 84,16%. Это одно из доказательств того, что полученная нами молекула является экзосомой (Фиг. 8).

Результат MTS-теста доказал, что воздействие на здоровые клетки сыворотки с растительными экзосомами вызывает пролиферацию в клетках. Значение оптической плотности, которое увеличилась по сравнению с отрицательным контролем, показало, что жизнеспособность увеличилась. Соответственно, проведенный анализ подтвердил, что экзосомы пшеницы увеличивали скорость деления клеток в здоровых клетках (Фиг. 3).

Через 24 ч после обработки клеток 22RV1 сывороткой в концентрациях 5 мкг/мл, 10 мкг/мл, 15 мкг/мл применяли аннексин V, используя метод проточной цитометрии для изучения гибели клеток. В соответствии с этими результатами при расчете соотношения некроза и апоптоза соотношения гибели клеток составляли 26,02%, 40,08% и 34,36% соответственно при вышеуказанных концентрациях (Фиг. 3).

Через 24 ч после обработки клеток PNT1A сывороткой в концентрациях 5 мкг/мл, 10 мкг/мл, 15 мкг/мл применяли аннексин V, используя метод проточной цитометрии для изучения гибели клеток. В соответствии с этими результатами при расчете соотношения некроза и апоптоза соотношения гибели клеток составляли 1,81%, 3,26% и 3,22% соответственно (Фиг. 4).

Через 24 ч после обработки клеток MCF-7 сывороткой в концентрациях 5 мкг/мл, 10 мкг/мл, 15 мкг/мл применяли аннексин V, используя метод проточной цитометрии для изучения гибели клеток. В соответствии с этими результатами при расчете соотношения некроза и апоптоза соотношения гибели клеток составляли 24,96%, 31,13% и 23,49% соответственно (Фиг. 5).

Через 24 ч после обработки клеток MCF-10A сывороткой в концентрациях 5 мкг/мл, 10 мкг/мл, 15 мкг/мл применяли аннексин V, используя метод проточной цитометрии для изучения гибели клеток. В соответствии с этими результатами, при анализе соотношения некроза и апоптоза соотношения гибели клеток составляли 1,57%, 1,25% и 2,74% соответственно (Фиг. 6). Через 24 ч после обработки клеток A498 сывороткой в концентрациях 5 мкг/мл, 10 мкг/мл, 15 мкг/мл применяли аннексин V, используя метод проточной цитометрии для изучения гибели клеток. В соответствии с этими результатами при расчете соотношения некроза и апоптоза соотношения гибели клеток составляли 51,05%, 38,01% и 42,76% соответственно (Фиг. 1).

Через 24 ч после обработки клеток HEK 293 сывороткой в концентрациях 5 мкг/мл, 10 мкг/мл, 15 мкг/мл применяли аннексин V, используя для изучения гибели клеток метод проточной цитометрии. В соответствии с этими результатами при анализе соотношения некроза и апоптоза соотношения гибели клеток составляли 1,79%, 1,63% и 3,16% соответственно (Фиг. 2).

В результате экспериментальных исследований было доказано, что продукт по настоящему изобретению запускает механизм клеточного самоуничтожения в организме, вызывая гибель раковых клеток. Было отмечено, что применяемое лечение настоящим продуктом, устранило недостаток повреждения здоровых клеток при одновременном уничтожении раковых клеток, который часто встречается при химиотерапии.

В результате модели раны, сформированной на основе результата MTS-теста, было доказано, что модель раны в клетках, обработанных продуктом по настоящему изобретению, показала намного более быстрое заживление по сравнению с необработанными контрольными клетками. Это показало, что полученный продукт, в частности продукт, полученный из экзосом пшеницы, положительно влияет и ускоряет процесс в моделях заживления ран и восстановления тканей.

Применение изобретения

Настоящее изобретение в основном применяется при формах рака простаты, молочной железы, почки; и при этом активен в отношении форм рака поджелудочной железы, печени, коcтей, кожи, мозга, легких, плевры, матки, яичников, желудка, кишечника, мочевого пузыря, крови, лимфы, щитовидной железы.

Продукт по настоящему изобретению может быть получен преимущественно в форме сыворотки в жидком состоянии, кроме того, он также может быть получен в твердой или гидрогелевой форме. Он может быть в форме сыворотки, сиропа, таблетки, лекарственного препарата, геля и крема. Кроме того, другое действующее вещество (например, лекарственное средство, химическое вещество) может быть перенесено в клетку, используя молекулу-наноноситель. Этот метод переноса может использоваться в различных формах и композициях, как указано выше.

Ссылочные материалы

1. Johnstone,RM, Adam, M, Hammond,JR,Orr L and Turbide, C(1987). Vesicle formation during reticulocyte maturation. Association of plasma mebrane activities with released vesicles (exosomes)./BiolChem 262: 9412-9460

2. Valadi, H, Ekström, K, Bossios, A, Sjöstrand, M, Lee JJ and Lçtvall JO (2007). Exosome-mediated transfer of mRNAs and microRNAs is a novel mechanism of genetic Exchange between cells. Nat Cell Biol9:654-659

3. Théry, C, Ostrowski, M and Segura, E (2009). Membrane vesicles as conveyors of immuneresponses. NatRevImmunol 9: 581-593

4. Gogolak P, Rethi B, Hajas G, Rajnavolgyi E.(2003) Targeting dendritic cells for priming cellular immuneresponses. J.Mol.Recognit.; 16:299-317.

5. An,Q, Hücvkelhoven, R,Kogel,KHandvan Bel, Aj(2006). Multi vesicular bodies participate in a cell wall-associated defence response in barley leaves attacked by the pathogenic powdery mildew fungus. Cell Microbial8:1009-1091

6. Escola, J.M., M.J. Kleijmeer, W. Stoorvogel, J.M. Griffth, O. Yoshie, and H.J. Geuze. (1998). Selective enrichment of tetraspan proteins on the internal vesicles of multivesicular endosomesand on exosomes secreted by human B-lymphocytes. J. Biol. Chem. 273:20121-20127.

7. Buschow, S.I., B.W. vanBalkom, M. Aalberts, A.J. Heck, M. Wauben, and W. Stoorvogel. (2010). MHC class II-associatedproteins in B-cell exosomes and potential functional implications for exosome biogenesis. Immunol. Cell Biol. 88:851-856

8. Simpson RJ, Lim JW, Moritz RL, Mathivanan S. (2009) Exosomes: proteomic insights and diagnostic potential. Expert.Rev.Proteomics.; 6:267-283.

9. Gogolak P, Rethi B, Hajas G, Rajnavolgyi (2003) E. Targeting dendritic cells for priming cellular immuneresponses. J.Mol.Recognit.; 16:299-317

10. Vermeulen, P.B.,Verhoeven, D., Hubens, G., Van Marck, E., Goovaerts, G., Huyghe, M., De Bruijn, E.A., Van Oosterom, A.T. and Dirix, L.Y. (1995). Microvessel density, endothelial cell proliferation and tumour cell proliferation in human colorectal adenocarcinomas. Annals of oncology, 6(1), 59-64.

11. Yalvac, M.E.,Ramazanoglu, M., Gumru, O.Z., Sahin, F., Palotás, A. and Rizvanov, A.A. (2009). Comparison and optimisation of transfection of human dental folliclecells, a novel source of stem cells, with different chemical methods and electro-poration. Neuro chemical research, 34(7), 1272-1277.

1. Продукт для лечения рака, отличающийся тем, что он содержит растительные экзосомы, где рак выбран из рака простаты, рака молочной железы и рака почки и растительная экзосома получена из ростков пшеницы.

2. Продукт по п. 1, отличающийся тем, что он находится в форме сыворотки, сиропа, таблетки, лекарственного препарата, геля или мази.

Изобретение относится к области рыбоводства и может быть использовано при оздоровлении рыбоводческих хозяйств от паразитарных болезней. Способ профилактики или лечения крустацеозов рыб заключается в том, что рыбам в течение 7 дней подряд с кормом вводят препарат, содержащий, мг/г: эмамектина бензоат - 1,5-2,5, карбоксиметилцеллюлозы натриевую соль - 150,0-250,0, бутилгидроксианизол - 0,1-0,2, крахмал кукурузный - до 1 г.

Соединения, ингибирующие металлоферменты // 2764666

Изобретение относится к соединению, выбранному из: Также предложены способ ингибирования и способ модуляции активности металлофермента альдостеронсинтазы (CYP11B2), способы лечения заболеваний или нарушений, вызванных таким металлоферментом, и фармацевтическая композиция. Предложенные соединения способны ингибировать активность металлофермента альдостеронсинтазы (CYP11B2) и могут быть использованы для лечения заболеваний или нарушений, вызванных таким металлоферментом.

Анти-icos антитела // 2764548

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к выделенному антителу, специфически связывающему внеклеточный домен индуцибельного Т-клеточного костимулятора (ICOS) человека и мыши, а также к содержащей его композиции. Также раскрыта клетка-хозяин in vitro для экспрессии вышеуказанного антитела.

Соединение аминопиразолопиримидина, используемое в качестве ингибитора тирозинкиназного рецептора нейротрофического фактора // 2764523

Группа изобретений относится к области органической химии и фармакологии, а именно к соединению, которое может ингибировать активность Trk киназы. Соединение представлено формулой I или его фармацевтически приемлемой солью, где R1, R4 и R7 представляют собой водород; R2 выбран из группы, состоящей из водорода, C1-6алкила, -C(=O)R9, -C(=O)NHR9 и -S(=O)2R9, где C1-6алкил не замещен или замещен одним заместителем, независимо выбранным из группы, состоящей из 6-членного алифатического гетероциклила и возможно замещенного фенила; R3 выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, циано, -C(=O)R10, -C(=O)NR10R11, -C(=S)NR10R11, фенила и 5-членного ароматического гетероциклила, где фенил и 5-членный ароматический гетероциклил каждый независимо не замещен или замещен одним заместителем, независимо выбранным из группы, состоящей из С1-6алкила, C1-6алкоксикарбонила, морфолинила и возможно замещенного пирролидинилкарбонила; R5 и R6 независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, галогена и гидрокси, или R5 и R6 вместе образуют оксо; R8 представляет собой фенил, который не замещен или замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из галогена; R9 выбран из группы, состоящей из C1-6алкила и фенила, где фенил не замещен или замещен одним заместителем, независимо выбранным из C1-6алкила; R10 и R11 независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, гидрокси, C1-6алкила, C1-6алкокси, 3-6-членного циклоалкила и фенила, где С1-6алкил, C1-6алкокси, 3-6-членный циклоалкил и фенил каждый независимо не замещен или замещен одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена, гидрокси, С1-4алкила и группы гидрокси(С1-6алкил), 2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ила и N,N-ди(С1-4алкил)амино; или R10 и R11 вместе с N, к которому они присоединены, образуют 5-членный алифатический гетероциклил, который не замещен или замещен одним заместителем, выбранным из гидрокси, где "возможно замещенный" означает, что группа может быть не замещена или замещена одним заместителем, независимо выбранным из гидрокси или C1-6алкокси, и указанный "алифатический гетероцикл" или "ароматический гетероцикл" содержат 1-2 гетероатома, независимо выбранных из серы, кислорода и/или азота.

Гетероциклические соединения в качестве ингибиторов pad // 2764243

Изобретение относится к соединению формулы (I), его стереоизомерам и их фармацевтически приемлемым солям, где X представляет собой O или S; Y выбран из O или N; Z представляет собой N; A представляет собой CR1; B представляет собой CR2; n составляет 0 или 1; R1 и R2 независимо выбраны из водорода; R3 отсутствует, когда Y является O, или, когда Y является N, выбран из группы, состоящей из водорода, C1-6алкила, C3-6циклоалкила, C(O)C1-6алкила, SO2C1-6алкила, SO2C3-6циклоалкила и SO2C6арила, где SO2C6арил и SO2C1-6алкил необязательно замещены C1-6алкокси, галогеном и C6арилом; R10 и R11 взяты вместе с образованием 5-6-членного моноциклического насыщенного гетероциклического кольца, где 5-6-членное моноциклическое насыщенное гетероциклическое кольцо необязательно замещено заместителями, выбранными из группы, состоящей из амино, C1алкиламино и -NHC(O)CH=CHCH2N(CH3)2; R12, R13, R14 и R15 независимо выбраны из группы, состоящей из водорода и C1-6алкила, R16 выбран из 9-членного бициклического гетероарила, содержащего 1-2 гетероатома, выбранных из N или S, где 9-членный бициклический гетероарил необязательно замещен 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, C1-6алкила, C1-6алкокси, C1-6алкил-C6арила, C2-6алкенил-C6арила, C1-6алкил-C3-5гетероциклила, где гетероциклил содержит один гетероатом, выбранный из атома азота или кислорода (оксетан, тетрагидропиран, пиперидин), C3-5гетероарила и C1-6алкил-C3-5гетероарила, где гетероарил содержит от 1 до 2 гетероатомов в кольце, выбранных из атома азота или серы (пиридин, пиримидин, пиридазин и тиазол), и где C1-6алкил, C1-6алкил-C6арил, C3-5гетероарил, C1-6алкил-C3-5гетероарил и C1-6алкил-C3-5гетероциклил необязательно замещены одной или несколькими группами, выбранными из водорода, C1-6алкила, C1-6алкокси, C3-8циклоалкила, галогена, гидроксила, -CH2OH и -COOH.

Связывающиеся с cd38 и pd-l1 молекулы // 2764201

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к биспецифической молекуле, включающей, по меньшей мере, один анти-CD38 домен и, по меньшей мере, один анти-PD-L1 домен, которая способна одновременно связываться с антигеном CD38 и PD-L1. Изобретение эффективно для лечения рака, выбранного из группы, состоящей из множественной миеломы, неходжкинской лимфомы (NHL), рака молочной железы, меланомы и рака легкого.

Бифункциональные композиции для лечения рака // 2764175

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии, и предназначено для лечения или профилактики рака у млекопитающего. Для индукции апоптоза в пролиферирующих раковых клетках осуществляют введение млекопитающему композиции, содержащей терапевтически эффективное количество пиронаридина (PND) или его фармацевтически приемлемой соли, по меньшей мере каждый второй или третий день в течение по меньшей мере двух недель.

Комбинация, содержащая палбоциклиб и 6-(2,4-дихлорфенил)-5-[4-[(3s)-1-(3-фторпропил)пиррролидин-3-ил]-8,9-дигидро-7h-бензо[7]аннулен-2-карбоновую кислоту, и ее применение для лечения рака // 2764116

Группа изобретений относится к области медицины, а именно к комбинации для лечения рака молочной железы, содержащей 6-(2,4-дихлорфенил)-5-[4-[(3S)-1-(3-фторпропил)пирролидин-3-ил]оксифенил]-8,9-дигидро-7H-бензо[7]аннулен-2-карбоновую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль и палбоциклиб, а также к фармацевтической композиции для лечения рака молочной железы, содержащей 6-(2,4-дихлорфенил)-5-[4-[(3S)-1-(3-фторпропил)пирролидин-3-ил]оксифенил]-8,9-дигидро-7H-бензо[7]аннулен-2-карбоновую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль и палбоциклиб и по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, также относится к применению 6-(2,4-дихлорфенил)-5-[4-[(3S)-1-(3-фторпропил)пирролидин-3-ил]оксифенил]-8,9-дигидро-7H-бензо[7]аннулен-2-карбоновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, осуществляемому путем совместного введения с палбоциклибом для лечения рака молочной железы, и к применению палбоциклиба, осуществляемому путем совместного введения с 6-(2,4-дихлорфенил)-5-[4-[(3S)-1-(3-фторпропил)пирролидин-3-ил]оксифенил]-8,9-дигидро-7H-бензо[7]аннулен-2-карбоновой кислотой или ее фармацевтически приемлемой солью для лечения рака молочной железы, и также относится к фармацевтическому набору для лечения рака молочной железы, содержащему: (i) первую фармацевтическую композицию, содержащую 6-(2,4-дихлорфенил)-5-[4-[(3S)-1-(3-фторпропил)пирролидин-3-ил]оксифенил]-8,9-дигидро-7H-бензо[7]аннулен-2-карбоновую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество; (ii) вторую фармацевтическую композицию, содержащую палбоциклиб и по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество; при этом обе фармацевтические композиции (i) и (ii) находятся в отдельных камерах и предназначены для независимого друг от друга введения, при этом каждое введение в отношении другого является одновременным, раздельным или распределенным во времени.

Условно активные химерные антигенные рецепторы для модифицированных т-клеток // 2764074

Изобретение относится к области биохимии, в частности к химерному антигенному рецептору для связывания с тирозинкиназным рецептором фактора роста. Раскрыты вектор экспрессии, генно-инженерная цитотоксическая клетка, фармацевтическая композиция.

Ингибиторы erbb/btk // 2764069

Изобретение относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, сложному эфиру, гидрату, сольвату или стереоизомеру. В формуле (I): A1 представляет N или CR8, каждый из А2, А3, А4 и А5 независимо представляет N или CR9, причем не более чем один из A2, А3, А4 и A5 представляет N, каждый из R1 и R2 независимо представляет водород или С1-12алкил, возможно монозамещенный -NRaRb, С1-12алкилом, 3-10-членным насыщенным карбоциклилом или 3-6-членным насыщенным гетероциклилом, содержащим один гетероатом, выбранный из N и О, где каждый из 3-10-членного насыщенного карбоциклила и 3-6-членного насыщенного гетероциклила может быть не замещен или моно- или полизамещен С1-12алкилом, где каждый из Ra и Rb независимо выбран из водорода или С1-12алкила, который может быть возможно монозамещен или независимо полизамещен дейтерием или тритием, или Ra и Rb, взятые вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 3-10-членный насыщенный гетероциклил, возможно монозамещенный С1-12алкилом, или R1 и R2, взятые вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 3-12-членное моноциклическое или полициклическое кольцо, возможно содержащее один дополнительный гетероатом, выбранный из N и О, которое может быть возможно монозамещено или независимо полизамещено галогеном, С1-12алкилом, -NRaRb или группой -С1-12алкил-NRaRb, R3 представляет Н, С1-12алкил или -C1-12алкил-NRaRb, каждый из R4 и R5 независимо представляет C1-6алкил, возможно монозамещенный или независимо полизамещенный одним или более чем одним дейтерием, тритием или галогеном, или R4 и R5, взятые вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют 3-10-членное моноциклическое кольцо, возможно содержащее один гетероатом О, которое может быть возможно монозамещено или независимо полизамещено одним или более чем одним дейтерием или тритием, R6 представляет водород, R7 представляет С1-12алкил, который может быть возможно моно- или полизамещен дейтерием или тритием, R8 представляет водород, дейтерий, тритий, галоген, циано, С1-12алкил, C1-12алкоксил, который может быть возможно монозамещен или независимо полизамещен одним или более чем одним дейтерием, тритием или галогеном, R9 отсутствует или представляет водород, дейтерий или тритий, n равно 0, 1, 2, 3 или 4, каждый R независимо представляет галоген, С1-12алкил, 3-10-членный насыщенный карбоциклил или 3-6-членный насыщенный или ненасыщенный гетероциклил, содержащий один гетероатом N, при этом указанный гетероциклил конденсирован с кольцом, с которым он связан, которые могут быть возможно монозамещены или независимо полизамещены одним или более чем одним дейтерием, тритием, галогеном или С1-12алкилом.

Композиции и связанные с ними способы // 2764716

Группа изобретений относится к области фармацевтики и медицины, а именно к фармацевтической композиции для лечения повреждения головного мозга и нейропсихиатрических и нейродегенеративных заболеваний и расстройств, включая поведенческие и психологические симптомы деменции (BPSD), содержащей терапевтически эффективное количество средства с двойной активностью, способного ингибировать CYP2D6 и действовать в качестве антагониста рецептора 5-HT2A, выбранного из группы, состоящей из сарпогрелата (соединение 50), его энантиомеров (соединения 51 и 52), их дейтерированных производных, фармацевтически приемлемых солей, или их комбинации; и терапевтически эффективное количество антагониста рецептора NMDA, представляющего собой декстрометорфан (соединение 149) или его метаболиты, выбранные из декстрорфана (DO), 3-гидроксиморфинана (HYM) и 3-метоксиморфинана (MEM), его дейтерированные производные, фармацевтически приемлемые соли, или их комбинацию, при условии, что композиция не является жидкой композицией, содержащей 2,5-10 μM декстрометорфана; к способу лечения повреждения головного мозга и нейропсихиатрических и нейродегенеративных заболеваний и расстройств, включая поведенческие и психологические симптомы деменции (BPSD), включающему введение субъекту терапевтически эффективного количества указанной композиции без исключающего условия; и к применению указанной композиции без исключающего условия, в изготовлении лекарственного препарата, предназначенного для терапевтического и/или профилактического лечения заболевания или расстройства, выбранного из нейропсихиатрического, нейродегенеративного или повреждения головного мозга, включая поведенческие и психологические симптомы деменции (BPSD), у нуждающегося в этом пациента, где указанное лечение предусматривает введение терапевтически эффективного количества указанной композиции, целенаправленно воздействующей на фермент CYP2D6 и рецепторы NMDA и 5-HT2A.