Всесоюзная j

 

340690 ОПИСАНИЕ

Социалистических

ИЗОБPЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

М. Кл. С 12d 13/10

Заявлено 29.Ч.1970 (№ 1443620/28-13) с присоединением заявки ¹

Приоритет

Оп, бликовано 05.VI.1972. Бюллетень ¹ 18

Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министрое

УД К 577.15.08(088.8) Дата опубликования описания 23.И.1972

Авторы изобретения

М. E. Бекер, М. A. Дреймане, Л. П. Аузиня, A. К. Седвалдс, У. Э. Виестур, К. А. Калунянц, Л. И. Орещенко, Н. П. Черняев, В. Н. Гейзе и А. P. Валдман

Заявитель

Срс ЯЯ1-(АЯ нститут микробиологии им. Августа Кирхенштеи

АН Латвийской ССР

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЛЮКОАМИЛАЗЫ

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к производству ферментных препаратов микробного происхождения.

Известен способ получения глюкоамилазы путем выращивания дрожжей Endomycopsis на питательной среде, содержащей крахмал, вытяжку из солодовых ростков, сульфат аммония, однозамещенный фосфат калия, с последующим отделением клеток дрожжей, концентрированием культуральной жидкости и осаждением ферментов сульфатом аммония.

Цель изобретения — интенсификация процесса биосинтеза.

Для этого в качестве продуцента дрожжей используют штамм Endomycopsis fibuliger

R-313, а в питательную среду дополнительно вводят дрожжевой автолизат в количестве

1 — 3% от общего состава среды и 0,2—

0,6 г/л нитрата калия.

Сульфат аммония и однозамещенный фосфат калия целесообразно вводить в среду в количестве, соответственно равном (г/л) 3 — 0 и 1,5.

Для снижения себестоимости препарата дрожжевой автолизат получают из биомассы продуцента.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.

Производят выращивание дрожжей Endomycopsis fibuliger R-313 на питательной среде, содержащей 0,5% клейстер изова нного крахмала, 3,0 г/л сульфата аммония, 1,5 г/л

5 однозамещенного фосфата калия, 0,4 г/л нитрата кальция, 10 миг/л дрожжевого автолизата и 50 мл/л вытяжки из солодовых ростков при рН среды 7,0 — 8,0.

После выращивания клетки дрожжей отде10 ляют фильтрованием и фильтрат концентрируют на вакуум-выпарных установках, а затем выделяют ферменты путем осаждения их спиртом или сульфатом аммония. Для получения препарата для кормовых целей, куль15 туральную жидкость подвергают последовательному обезвоживанию в вакуум-выпарных аппаратах, а затем сушат на сублимационной сушилке.

Пример.,Применяется штамм Endomy20 copsis fibuliger К-313 со следующей характеристикой:

Морфология. Средняя величина клеток суточной культуры на среде Ридера, в которой в качестве источника углерода применяется

25 крахмал в количестве 0,5 — 1% от общего состава среды и дрожжевой автолизат в количестве 10 — 25 мл/л, диаметр клеток 4,8—

6,0 мк, длина 5,5 — 12 лук. Преобладающая форма овальная, при отсутствии интенсивноЗо го перемешивания образует настоящий раз340690

Предмет изобретени я

Составитель С. Могилевский

Текред 3. Тараненко

Корректор T. Китаева

Редактор А. Бер

Заказ 1844у9 Изд. № 823 Тираж 448 Подписное

ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совета Министров СССР

Москва, 7К-Э5, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 ветвленный белый мицелий, легко разделяющийся на клетки.

Органические среды, сусловая жидкая среда. На поверхности среды образуется влажная пленка. Через 5 дней на той же среде при

30 С образуется толстая пленка, покрывающая всю поверхность

Агаризованная сусловая среда. При 35 С образует бархатистые белые колонки, рост обильный, края ровные, возвышений нет.

Нитраты. Не восстанавливает в нитриты.

Отношение к азоту. Как источник азота использует соли аммония, слабо использует нитраты и мочевину.

Отношение к углеводам. Как источник углерода использует крахмал, мальтозу, лактозу, фруктозу; слабо использует глюкозу, сахарозу, парафин; не использует органические кислоты.

Молоко. Молоко свертывает и пептонизирует.

Биохимические свойства. Является активным продуцентом глюкоамилазы. Через 12—

15 час глубинного культивирования при интенсивной аэрации достигается глюкоамилазная активность в 8120 единиц на 100 мл при определении глюкооксидазным способом.

Штамм Endmycopsis fibuliger R-313 культивировался на лабораторном стенде с сопло-конусными ферментаторами емкостью 4 л, При этом питательная среда содержала от общего количества, : (NH4) 2SO 0,3

Са (МОз) 2 0,04

КН2Р04 0,15 растворимый крахмал 0,5 дрожжевой автолизат 1 мл/100 мл среды вытяжка из солодовых ростков 5мл 100мл среды.

Культивирование проводится при 30 С, рН 7,0. Посевной материал размножается в течение 24 час на вышеуказанной среде, его количество 8%. В микроскопе культура чи5 стая, гомогенная. Полученный препарат (биомасса) содержит 48,7 /о условного белка, влажность 12,3%, глюкоамилазная активность на 100 мл 8120 единиц, При этом культуральная жидкость после ферментации упа10 ривается при 38 — 40 С и высушивается в распылительной сушилке.

15 1. Способ получения глюкоамилазы путем выращивания дрожжей Endomycopsis на питательной среде, содержащей крахмал, вытяжку из солодовых ростков, слуьфат аммония, однозамещенный фосфат калия, с после20 дующим отделением клеток дрожжей, концентрированием культуральной жидкости и осаждением ферментов, например, сульфатом аммония, отличающийся тем, что, с целью интенсификации процесса биосинтеза, в каче25 стве продуцента дрожжей используют штамм

Endomycopsis fibuliger R-313, а в питательную среду дополнительно вводят дрожжевой автолизат в количестве 1 — 3 от общего состава среды и 0,2 — 0,6 г/л нитрата кальция.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что сульфат аммония, однозамещенный фосфат калия вводят в среду в количестве соответственно равном (г/л) 3,0 и 1,5.

Ç5 3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что, с целью снижения себестоимости препарата, дрожжевой автолизат получают из биомассы продуцента.