Способ количественного определения моногалакто- зилдиглицерида, дигалактозилдиглицерида и сульфолипида в липидопигментной смеси

 

з есс:-);)

QA7Ky ° -и

ОПИСАН И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

За явлено 20.1V.1970 (№ 1429580/23-4) М. Кл. G 01п 7!04 с присоединением заявки %

Приоритет

Опубликовано 05.VI.1972. Б|оллетснь № 18

Дата опубликования описания 23Х1.1972

Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров

СССР

УДК 543.853(088.8) Авторы изобретения

В. С. Родионов, К. А. Нюппиева и Л. С. Захарова

Институт биологии Карельского филиала АН СССР

Заявитель

СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОНОГАЛАКТОЗИЛДИГЛИЦЕРИДА, ДИГАЛАКТОЗИЛДИГЛИЦЕРИДА

И СУЛЬФОЛИПИДА В ЛИПИДОПИГМЕНТНОЙ СМЕСИ

Изобретение относится к аналитической хи. мии природных веществ.

Известен способ количественного определения моногалактозилдиглицерида, дигалактозилдиглицерида и сульфолипида путем определения в них галактозы после очистки от примесей на колонках с адсорбентом и разделения на пластинка«с тонким слоем силикагеля с последующими проявлением хроматограмм опрыскиванием растворами р-нафтола и определением количества по площади пятен.

Однако известный метод обладает недостаточными специфичностью и точностью.

С целью повышения точности и избирательности анализа, предлагается способ количественного определения указанны«соединений в липидопигментной смеси путем пропускания их через колонки с адсорбентом, разделения на пластинках с тонким слоем силикагеля в токе растворителя и проявления хроматограмм опрыскиванием раствором реактива молибденовокислого аммония с последующим определением количества липидов по площади пятен.

Пример. Липиды экстрагпруют из листьев картофеля, отмывают от нелипидных загрязнений и фракционируют HB колонках

ДЭАЭ-,целлюлозы. Растворители выпаривают, липиды растворяют в хлороформе и 0,01—

0,05 мл раствора наносят на пластинки с тонким слоем спликагеля КСК. Липидпук сме«ь разделяют в системе «лороформ — мстанол ——

7 н. 1чН1ОН (б5: 30: 4 по объему) в вос«одящем токе растворителей при комнатной

5 температуре, пластинки опрыскивают реактивом, приготовленным следующихт образом, 16 г молибдена аммония растворяют в

120 мл воды (раствор 1), после чего к 80 ил раствора 1 добавляют 40 мл концентрирован10 ной НС1 и встряхивают 30 мин с 10 ил ртути.

Ртуть отделяют фильтрованием и к оставшейся части раствора 1 добавляют 200 м.т концентрированной H SO„. Фильтрат после отделения ртути и охлажденнуfo «месь доводяг

15 водой до 1 л. Обработанные реактивом «роматограммы оставляют на 20 — 30 мпн при комнатной температуре, В течение этого «рока белый фон пластинок превращается в «иний, на котором моногалактозплдиглицерпд, 20 дигалактозилдиглицерпд и сульфолиппд проявляются в виде белых пятен.

Количественное определение ведут, «троя предварительно калибровочные графики в

2S координатах площадь пятен — — количество лпппдов (в мпкромоля«) после разделения и обработки смесей с известным содергкапием липидов, Площадь пятен определяют планиметром

30 или весовым способом путем взвешивания

340937

Составитель В. Бодня

Коррскгор E. Зимина

Тскред 3. Тараненко

Рсдактор О. Кузнецова

Заказ 1844/15 Изд. № 823 Тираж 448 Подписное

ЦИИИПИ Комппста по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, 7К-35, Раушская наб., д. 4, 5

Типография, пр. Сапунова, 2 вырезанных из кальки пятен на аналитических весах.

В пределах 0,1 — 1,5 дгк,ноль концентрация кахкдого глнколипнда пропорциональна площади пятен, чувствительность метода

0,05 ик,ио гь, точность +-4,2о о.

Предмет изобретения

Способ количественного определения моногалактозилдиглицерида, дигалактозилдиглицернда и сульфолипида в липидопигментной смеси путем пропускания их через колонки с адсорбентом с последующими разделением на пластинках с тонким слоем силикагеля в токе растворителя и проявлением полученных хро5 матограмм путем опрыскивания их проявителем с последующим измерением полученной при этом площади пятен, от гицающийся тем, что, с целью повышения точности и избирательности анализа, в качестве проявителя

10 хроматограмм используют раствор реактива молибденовокислого аммония.