Всесоюзная i

Авторы патента:

G01N33/53 - иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого (препараты для терапевтических целей, содержащие антигены или антитела,A61K; гептены вообще, см. соответствующие рубрики в классе C07; пептиды, например протеины, вообще C07K)

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

3432I8

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от а вт. св идетельства №

Заявлено 10.VI I.1970 (№ 146И74/31-16) с .присоединением заявии №

Приоритет

Опубликовано 22.Ч1.1972. Бюллетень ¹ 20

Дата опубликования описания 19 Ч11.1972

М. Кл. G 01п 3,3/16

Комитет оо делам изобретений и открытий ори Совете Министров

СССР

УДК 612.017.4(088.8) НСЕСОгОЗ1-1АЯ ПИ".33-7ЕЯ1%,8. - .E

БИБЛИОТЕКА

Авторы изобретения

М. В, Далин и T. М. Оксман

Заявитель

СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ИШЕМИЧЕСКОГО ТОКСИНА

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, Известен способ выделения ишемического токсина из аноксемированного органа путем изолированной перфузии органа.

Предлагаемый способ выделения ишемического токсина из аноксемированного органа путем изолированной перфузии органа позволяет получить концентрированный и очищенный ишемический токсин. Это достигается тем, что перфузат сгущают выветриванием, диализуют через полупроницаемую мембрану, диализат концентрируют выветриванием и фракционируют на хроматографической колонке, например с сефадексом Г-15.

Для выделения ишемического токсина ампутированную конечность после 3 час ишемии подключают к аппарату искусственного кровообращения, заполненному пер фузионным раствором, например раствором Рингер-Локка, и проводят трехчасовую перфузию при

36 С. Полученный перфузат сгущают выветриванием с последующим диализом приготовленного концентрата. Ишемический токсин проходит через полупроницаемую мембрану и накапливается в диализате. После концентрирования диализующего раствора выветриванием его наносят на колонку с сефадексом

Г-15 (5 мл на колонку 2>(100 см), уравновешенным нейтральным физиологическим раствором. Элюцию осуществляют этим же физио5 логическим раствором со скоростью 15вЂ”

18 мл/час, Отбор фракций производят на хроматографе ХККВ-1 с интервалом 20 мин. Концентрацию белка во фракциях контролируют на спектрофотометре, например СФ-Д-2, при

10 280 мм. Фракцию, содержащую ишемический токсин, выделяют, а остальные отбрасывают.

Очищенный от примесей раствор концентрируют выветриванием в целофановых ысшках

«вискинг» при 4 С.

Предмет изобретения

Способ выделения ишемического токсина из аноксемированного органа путем изолиро20 ванной перфузии органа, отличающийся тем, что, с целью концентрирования и очистки ишемического токсина, перфузат сгущают выветриванием, диализуют через полупрогпщаемую мембрану, диализат концентрируют вы25 ветриванием и фракционируют на хроматографической колонке, например с сефадексом

Г-15.