Способ получения гемагглютининов реовирусов
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Республин
Зависимое от авт. свидетельства №
Заявлено 0111.1971 (№ 1628196/31-16) с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 23.Х.1972. Бюллетень ¹ 32
Дата опубликования описания 17.XI.1972
М, Кл, С 12k 7/00
Комитет по делам иаобретений и открытий при Совете Министров
СССР
УДК 615.,371(088.8) 1
О. В. Давыдов и М. В. Береснева
Авторы изобретения
Заявитель
Белорусский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЕМАГГЛ1ОТИНИНОВ РЕОВИРУСОВ
Изобретение относится к области медицины, а именно к производству вирусных препаратов для диагностических и экспериментальных целей.
Известен способ получения гемагглютининов реовирусов путем заражения перевиваемых линий клеток. Однако указанный спосоо дает относительно низкий выход гемагглютининов из исходного сырья.
Цель изобретения — увеличение выхода получаемого продукта. Это достигается тем, что вируссодержащую суспензию обрабатывают ультразвуком с частотой колебаний
15 — 30 кгпв в течение 1 — 2 мин.
В стерильных условиях матрасы с перевиваемой тканью освобождают от ростовой среды, заражают эталонным штаммом реовируса 3 типа в объеме 3 л л. Матрасы оставляют для контакта вируса и ткани при комнатной температуре на 20 вин и заливают поддерживающую среду. Зараженные клетки инкубируют при 370 С до выраженного цитопатич еского действия, которое обычно отмечают на 5 — 6 сутки. Затем проводят трехкратное замораживание — оттаивание содержимого матрасов (— 20 С +20 C) . С образцами полученных вируссодержащих жидкостей в условиях комнатной температуры ставят реакцгпо гемагглютинации: к 0,2 лтл двухкратных разведений испытуемого материала добавляют 0,2 лил 0,75% взвеси эритроцитов «О» группы человека или бычьих эритроцитов.
Вируссодержащие жидкости, имеющие гемагглютинины, подвергают обработке ультразвуком в объеме 75 — 100 лил.
Из в ируссодержащих жидкостей, отрицательно реагирующих в реакции гемагглютинации, готовят концентрированный осадок: вируссодержащую жидкость в объеме 800 лл центрифугируют во флаконах по 200 л.л
15 мин при 1500 об)лтн. Осадок, полученный из флаконов путем отсасывания надосадочной жидкости в объеме 40 — 50,чл, ресуспендируют в уменьшенном объеме физиологического раствора до 100 л,г.
Если необходимо получить очень концентрированные препараты гемагглютининов, то озвучиванпю подвергают ресуспендированные .в малы»; объемах осадки, полученные из образцов, имеющих свободные гемагглютинины.
Рабочий режим озвучивания: длительность
1 — 2 мин, частота колебаний вибратора
15 — 30 кгпв, мощность генератора — 1,5 квт, диаметр торца концентратора 40 лм. С этой целью применяют ультразвуковую установку — универсальный прошивочный станок
30 4772. С озвученным материалом ставят РГА.
356291
Предмет изобретения
Составитель С. Щенева
Техред 3. Тараиенко Корректор С. Сатагулова
Редактор Н. Воликова
Заказ 3768/7 Изд. _#_0 l639 Тираж 406 Подписное
ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР
Москва, Ж-35, Раушская паб., д. 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2
Способ получения гемагглютининов реовирусов путем заражения перевиваемых линий клеток, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода, вируссодержащую суспензию обрабатывают ультразвуком с частотой колебаний 15 — 30 кга в течение 1 — 2 мин.
