Способ получения препарата, содержащего урокиназу
О П-И С А Н И Е
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
3639I7
Союз Советских
Социалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства Л
Заявлено 04.V.1970 (№ 1431361/31-16) М. Кл. G Oln 33/16
С 07д 7/00 с присоединением заявки хв—
Комитет по делам изобретений и открытий ори Совете Министров
СССР
Приоритет—
Опубликовано 25.Х11.1972. Бюллетень Л 4 за 1973.
Дата опубликования описания 15.11.1973
УДK 612.461.268 (OS8.8) Авторы изобретения
3. Д. Федорова, Л. Г. Богомолова и И. К. С.побожанкина
Ленинградский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови
Заявитель
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА, СОДЕРЖАЩЕГО УРОКИНАЗУ (УРОКИНИНА) Предмет изобретения
Изобретение относится к медико-фармацевтической промышленности.
Известен способ получения препарата, содержащего урокиназу, выделением из мочи урокиназы путем осаждения балластных примесей, охлаждении, суспендировании и сорбировании осадка урокиназы, отделения его, элюирования цитратом натрия и осаждения этиловым спиртом.
Цель изобретения — увеличение выхода препарата и повышение его активности.
Цель достигается тем, что мочу после отделения балластных примесей замораживают ири температуре от — !8 до — -20 С в течение
18 — 20 час с последующим размораживанием при комнатной температуре, и сорбинирование урокиназы производят 40 -ным водным раствором сернокислого аммония. При этом водный раствор урокиназы стерилизуют фильтрацией и высушивают под вакуумом из замороженного состояния.
Пример. Мочу помещают в стеклянный сосуд, подщелачивают Н. раствором щелочи до рН 8,0. После 4 — 5 час отстоя ири 4 С мочу отделяют от выпавшего осадка фильтрацией, Жидкость подкисля|от Н. раствором соляной кислоты до рН 4,5 и замораживают нри температуре от — 18 до †20 в течение
18 — 20 час с последующим разморажнванием при комнатной температуре и отделяют выделившийся осадок.
Затем осадок суспендируют в дистиллированной воде при рН 7,2 — 7,4 и к полученной суспензии добавляют 100 г 40 ",,-ного водного раствора сернокислого аммония (в расчете на 1 л исходной мочи), на котором происходит сорбирование фермента.
После 30 лин обработки ири энергичном встряхивании смеси ее центрифугируют и цен10 трифугат отбрасывают.
Осадок промывают водой иод контролем хлористого бария. Затем активное начало элюнруют 2,4-ным нитратом натрия при рН
7,2 — -7,4 и переосаждают ири 0 C охлажден15 ным этиловым спиртом. Осадок отделяют центрифугнрованием.
Преципитат растворяют в дистиллированной воде прн рН 7,4, стерилизуют посредством фильтрации через керамические свечи М 3, 20 растворяют в стерильные флаконы и высушивают под вакуумом из замороженного состояния.
При этом выход препарата составляет
20 — -25 лг из 1 л мочи с его активност1ио от
25 1200 до 3200 ед. Кристенсена.
Способ получения препарата, содержащего
З0 урокиназу 1урокшни|а), выделением из мочи
363917
Составитель Т. Головина
Редактор А. Кудряков Тсхрсд. T. Миронова Корректоры А. Дзесова и Г. Запорожец
Заказ 182 Изд. № 1066 Тираж 404 Подписное
Ц11ИИПИ Комитета по делам изооретсний и открытий при Совете Министров СССР
Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Загорская типография урокипазы нут(. м осаждения оалластпых IlpHмесей, охлаждения, суспеидироваиия и сорбнровання осадка урокиназы, отделения его, элюирования цитратом натрия и осаждения этиловым спиртом, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода препарата и повышения его активности, мочу после отделения балластных примесей замораживают и размораживают и сорбирование урокиназы Ilpoизводят водным раствором сернокнслого аммония.
2. Способ по и. 1, от.гииаюгггийся тем, что замораживание производят при температуре
oT — 18 до — 20 в течение 18 — 20 час с последующим размораживанием при комнатной температуре.
3. Способ Ilo и. 1, от,гтаюигиггая тем, что сернокислый аммонпй применяют в виде
40%-ного водного раствора.
