Патент ссср 410082
ОП ИСАНИ Е 41ОО82
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
К АфТОР :К МУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Ресгтублик
Зависимое от авт. свидетельства ¹â€”
М, Кл. С 12LI 13/10
Заявлено 05.1 ь .1972 (№ 17686681 28-13) с присоединением заявки №вЂ”
ПриоритетовЂ
Опубликовано 05.1.1974. Бюллетень № 1 Гпстдврственне!й камитет
Севета Министров СССР еа делам изобретений и аткрытнй
УДК 577.15.08(088.8) Даr;. оиуб,.пгковаиия описашгя 28Х.1974
Авторы изобретения
3. С. Каган, 3. M. Синельникова II T. В. Дворецкова
Всесоюзный научно-исследовательский витаминный институт
Заявитель
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОДЕГРАДАТИВНОЙ
L-ТРЕОНИНДEI ИДРАТАЗЫ
Хае1-!РО4 12ИеО
К1!2РО4
MgCI 6Н О (it)1-!4) ьо
FeSO4 71-1,0
Глюкоза
Среда имела pI I 7,0.
3,0
0,23
0,04
0,4
0,00005
0,8
Изобретение отиосится к микробиологии, а точнее к способам получеиия биолсградативиой 1 -треопипдепгдратазы.
Известен способ получения биодеградативиой 1 -трсопиилсгилратазы путом культивирования ее продуцситов, например EBcherichia
coli па водной мш!сральпой питательной среде, содержащей DL-треоиии В аиаэробпых условиях.
Цель изобретения — — увеличение выхода
L-треопипдсп!лратазы и повышение ее активности.
Это достигается тем, что перед культивированием в аиаэробиых условиях осуществляют ilpcgBBptt! сль!1Ос к льтиВирова!11!е этОГО продуцепта в аэроби1!х условиях па водной м и и с р а л ы 0 и с р сд с, с О д с р ж а! и с и Г л ю к О 3
Пример. Клетки бактерий Fscherichia с011 штамма К-12 выращивали вначале в аэробных условиях в среде следующего состава,,/О. о
Клетки выращивали в 100 !!.г среды в колбах Эрлсих!Сг !ера объемом 750 !!.г ца качалке при 30 С в тсчеиис смток.
При таких ус:IDBI1Hx роста получали IocT3точную биомассу клеток (около 1 а сырого веса клеток со 100 .!!л среды), однако пе обладающую искомой фермент!1ой активностью.
Клетки отделяли цситрифугироваписм, отмывали и переносили в 1,5 объема (к исходному
10 объему среды) среды того же минерального со тава, что и иа первой стHätttl с псптоиом (2% ) и 1М.-тpcotttltto» (1.10 ЗМ ); из среды исключали глюкозу.
Нес операции ttðoBoätt:Iè в стерильных усло15 виях. Клетки выращивали одгш сутки при
37 C в стационарных условиях в колбах, доверху наполненных средой.
Получеппуго массу суспеп3llpoBB;ttt в определенном объеме буфсра, разрушали ультра20 звук0м 11 Опрсде;lя ltt фермситативпу10 актив«ос.гь биодеградативпой 1 -трсоиtt»;ter»лратазы спек!рофотоа!стрическиа! спосооом с использова .исм л а ктат дегидрогсп азы в «ачестве вспомогательного фермента. Расчеты удсль25 пой и общей активности проводили с учетом содеp ! В таблице llpllBoдится сраьчгсиис выращивания клеток извсстпым и предлагаемым споо собом. 4100с 2 Г1редмет изобретения ю3 .с о с и ч :— 1 :о О :.> o < Cg га са I» о с3 С»» oо > Способ выра-! иива и!!я ЪФ о М CCI CC Ы > o СсС ! "о .) с, » -В. o < Известный Предлаt.;Ie)rый 1 0,7 8,3 122,0 8.0 0,8 1 5,0 10,2 1147,5 Состазитель Г. Субботина Текред T. Курилко 1 :.0) tc Toð Е. Сотник Корректор Е. Зимина Заказ 2141/7 Изд. ¹" 379 Тираж 456 Г!оди tcиое IAIIÈÈÏÈ Государственного ком;!тета Совета Министров СССР по дслагк изобретений и открыт:!й Москaa, тК-35, Раун!скан и во., д. 4/5 Малоярославецкая городская типограгрия Кал)окского областиого управлепяя палатеtbcTB, полиграйрии и к:I IIIoë t торговли о Д о и oo =тo га CCI аф с!. 5а го С с» Ъ о I» а Способ получения биодеградативной 1треониндегидратазы путем культивирования ее продуцентов, нанричер Escherichia co!i на подпои минеральной питательной среде, содер)ка)це!1 1),L-треоппн в анаэробных условия);, отлича1ои1ийся тем, что, с целью увеличеИИ51 В1>!Хс)да L-трЕОНИИДЕГИД1)а 11ЗЫ Il ПОВЬИИС10 пия ее Йктигн1ости, перед культивированием В аназробпык услови51:с на среде с D,!-трео1шНОЛ! ОСуlцЕС l Б I5IIO П1)ЕД!311рнтс;!аиlис и гЛЬТ5!ВИjl()ва 1и!е зто! !) В1)од1 пента В c13!)GQI I hiõ с,!О13И51. с !!а 1,одно!! IIIII(.ральной среде, с!)дср)ка15 ьцей глк)козу.
