Способ получения синтетическогодвухнитчатого полирибонуклеотидногокомплекса
@ -"тент«»-:.:.::; н;:,--.-....,, @86m«oт -,.» M -.t;
ОП ИСАНИ Е
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
I I42594O
Союз Советских
Социалистических
Республик
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) За видимое от авт. свидетельства— (22) Заявлено 17.09.68 (21),1270967/31-16 с присоединением заявки— (32) Приоритет—
Опубликовано 30.04.74. Бюллетень № 16
Дата опубликования описания 10.03.75 (51) М, Кл, С 121< 5/00
Государственный комитет
Совета Министров СССР оо делам изобретений и аткрепии (53) УДК 578.083 (088.8) (72) Авторы изобретения
Н. С. Сидорова, С. Е. Бреслер, Н. А. Зейтленок и Л. М. Вильнер
Институт Высокомолекулярных соединений АН СССР и
Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов
Академии медицинских наук СССР (71) Заявители (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СИНТЕТИЧЕСКОГО
ДВУХНИТЧАТОГО ПОЛ И P ИБОНУКЛ ЕОТИДНОГО
КОМПЛЕКСА
Изобретение относится к области медицины.
Известен способ получения комплексов полириоонуклеотидов путем смешения соответствующих полинуклеотидов в фосфатном буфере с ионной силой 0,15 М с последующим выдерживанием на холоду при 0 С, Полученный комплекс обладает интерферонотенными свойствами.
Цель изобретения — повышение и нтерфероногенной активности и снижение токсичности комплекса, Для этото э .качестве комплементарного пол инуклеотида применяют пол игуаниловую кислоту, смесь инкубируют при температуре от — 3 С до 10 С в течение 3 — 10 суток.
Для получения комплексов полигуаниловую кислоту синтезируют инкубированием гуанозин-5 -дифоофата при 60 С в присутствии высокоочищенной полинуклеотидфосфорилазы из Е. coli и Mn$04, а полицит и дило вую кислоту — инкубированием при 37 С цитидин-5 дифосфата с полинуклеотид фосфорилазой из
Micrococus lysodeikticus в пр исутспвии MgC1>.
Полинуклеотиды охарактеризованы константами седиментации для поли-Г 7,66$, для поли-Ц 2,04S.
Пр,и м е р. Смешивают растворы 1 мг поли-Г в 1 мл раствора 0,15М NaC1 в О,О06М фосфатном буфере рН 7 и 1 мг поли-Ц в 1 мл того же,буфера. Полученный раствор доводят этим же буферным раствором с NaC1 до 20мл.
Раствор выдерживают при 0 и через 10 дней испытывают на интерфероногенную активность.
Наличие комплекса доказано гиперхромным эффектом,в 8 — 10% при 260 нм,и гипохроvIHbIM эффектом в 15 — 17% при 280 нм.
Интерфероны, индуци ро ванные препаратами, активны лишь,в использованных гомологичQlciKHx клеточных системах и не обладают противовирусными свойствами в гетерологичных культурах клеток. Их активность в гомологических культурах клеток проявляется в отношении ря|да вирусов Чигкунгуния, Леса
Семлики, вез и кулярного стоматита и,не связана с непосредственным воздействием на вирус, так как условиями методики предусмотрено отмывание клеток от препарата до добавления вируса.
При э нут ривенном в ведении препарата (поли-Г) (поли-Ц) белым мышам не наблюдают токсичность при максимально используемой дозе 50 мг/кг, терапевтический индекс препарата 5 — 10 Х 10, Полученные данные показывают черезвычайно высокую активность комплекса (поли-Г) (поли-LI), который в концентрации i0,025 мкг/мл уже обуславливает подавление образования более 50% бляшек
З0 вируса.
425940
Составитель С. Щенева
Редактор Л. Ксенофонтова Техред 3. Тараненко Корректор И. Симкина
Зак. 73/247 Изд. Ме 1569 Тираж 456 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Тип. Харьк. фил. пред. «Патент»
Таким образом, разработанный способ,позволяет получить двухнитчатый комплекс синтетических полирибонуклеотидов (поли-Г) . (поли-Ц), который является высокоактивным интерфероногеном.
Предмет изобретения
Слособ получения синтетического двухнитчатого полирибонуклеотидного комплекса путем смешения в равных количествах поли-Ц с поли нуклеотидом, отличающийся тем, что, с целью повышения интерфероногенной активности и снижения токсичности комплекса, в качестве комплементарного полинуклеотида применяют полигуаниловую кислоту, смесь инкубируют при температуре от — 3 С до 10 С в течение 3 — 10 суток.
