Способ получения простагландинов

 

цСРСОЮЗНМ ., ПЛТЕ:-. . 0библиотека /ЛБ »

ОПИСАН И"

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

Е пц 457475

Союз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Зависимое от авт. свидетельства (22) Заявлено 12.04.74 (21) 2011152/31-16 с присоединением заявки № (32) Приоритет

Опубликовано 25.01.75. Бюллетень № 3

Дата опубликования описания 04.03.75 (51) М. Кл. А 61k 27/00

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 615.45:615.361 (088.8) (72) Авторы изобретения

P. В. Бобылев, P. П. Евстигнеева, И. К. Сарычева, И. С. Ажгихин, В. Г. Гандель, В. М. Печенников, Г. Ш. Орлова и Н. В. Серебрянников

Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени медицинский институт им. И. М. Сеченова и Московский ордена

Трудового Красного Знамени институт тонкой химической технологии им. М. В. Ломоносова г71) Заявители (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОСТАГЛАНДИНОВ

Изобретение относится к медицинской промышленности, а именно к получению лекарственных препаратов.

Известен способ получения простагландинов, согласно которому к арахидоновой кислоте добавляют фермент — гомогенат семенников барана, инкубируют в фосфатном буфере с рН 7,4 — 8,5 в течение 1 час, биосинтез прерывают добавлением лимонной кислоты, целевой продукт извлекают петролейным эфиром.

Целью изобретения является расширение сырьевой базы.

Эта цель достигается тем, что отходы IlpOизводства препаратов надпочечников и поджелудочной железы экстрагируют этиловым спиртом, фильтруют и к фильтрату добавляют щелочь, серную кислоту, экстрагируют бензолом, упаривают, остаток растворяют в ацетоне, проводят низкотемпературную кристаллизацию, ацетон упаривают, остаток хроматографируют с последующей обработкой выделенной арахидоновой кислоты известным образом, Пример. 500 r липидов (отходы при получении медицинских препаратов) экстрагируют при 10 — 20 С в течение 2 час дважды по

700 мл этилового спирта. К полученному

2 фильтрату добавляют 180 г едкого кали в

450 мл воды в атмосфере азота в течение

1 час и перемешивают 4 час при 40 С. К смеси добавляют 60%-ный раствор серной кисло5 ты до рН 3,5 и экстрагируют бензолом (2 400 мл) в течение 30 мин. Бензол отгоняют в вакууме при 40 С, остаток (262 г) растворяют в 2100 мл ацетона и перемешивают

2 час при 20 С вЂ” 15 С. После удаления осадка проводят низкотемпературную кристаллизацию последовательно при температуре минус 40, 60, 72 — 70 С. Ацетон удаляют в вакууме в атмосфере азота при 30 С и получают концентрат арахидоновой кислоты (36,7 г) с

15 содержанием 25 9% арахидоновой кислоты.

Полученный концентрат подвергается дальнейшей хроматографической очистке.

На 10 хроматографических пластинок с тонким слоем силикагеля наносят 1,2 r концент20 рата в 2 мл этилового спирта и хроматографнруют в системе хлороформ — метанол — уксусная кислота — вода в соотношении 90: 6:

: 1: 0,75. После окончания хроматографирования полосу с Rf 0,66 — 0,68 срезают и элюи25 руют этиловым спиртом. Элюат упаривают в вакууме до полного удаления этилового спирта и получают 100 мг арахидоновой кислоты, которую немедленно включают в биосинтез.

457475

Составитель С. Малютина

Техред T. Миронова

Редактор Д. Пинчук

Корректор T. Хворова

Заказ 442)9 Изд. Ко 319 Тираж 559 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

Биосинтез осуществляют следующим образом.

100 мг арахидоновой кислоты смешивают с

0,5 г восстановленного глютатиона и 100 г гомогената, полученного измельчен нем 100 г пузырьковых желез барана (без соприкосновения с металлом) в 200 мл 0,15 М фосфатного буфера (рН 8,4) и инкубируют аэробно при перемешивании без доступа прямых лучей света в течение 30 мин при 37 С. После этого в инкубируемую смесь добавляют еще

100 r того же гомогената, в котором растворяют 0,5 г восстановленного глютатиона. Через 30 мин биосинтез прерывают добавлением к инкубату 1800 мл этилового спирта, и смесь фильтруют; фильтрат упаривают в вакууме при температуре не выше 35 С до содержания спирта в смеси 66о/в и экстрагируют равным объемом петролейного эфира.

Эфирный раствор упаривают в вакууме до сухого состояния. Сухой остаток растворяют в 10 мл метанола, 0,1 мл метанольного раствора хроматографируют на пластинке с силикагелем в системе бензол — диоксан — уксусная кислота в соотношении 20: 20: 1. Зону с Rf 0,62 — 0,64 элюируют метанолом оптически чистым, спектрофотометрируют и определяют максимум поглощения при 278 нм.

5 Биологическая активность водного раствора элюата соответствует активности простагландина Ег.

Предмет изобретения

10 Способ получения простагландинов путем ферментативного превращения ненасыщенных высших жирных кислот в буферном растворе, например фосфатном, и экстрагирования петролейным эфиром, отличающийся тем, 15 что, с целью расширения сырьевой базы, отходы производства препаратов надпочечников и поджелудочной железы экстрагируют этиловым спиртом, фильтруют, к фильтрату добавляют щелочь, серную кислоту, экстраги20 руют бензолом, упаривают, остаток растворяют в ацетоне, проводят низкотемпературную кристаллизацию, ацетон упаривают, остаток хроматографируют с последующей ферментацией известными приемами.