Способ определения глитотоксических свойств биологического материала
О П И С А Н i4 Е I (i» ыэ.а4в
ИЗОБРЕТЕНИЯ
Союз Советских
Социалистнческин
Республнк (61}Дополнительное к авт, свнд-ву
Р ) М, Кл С 1ак 9/00 (22) Заявлено05.04.74 (2)) 2013404/13 с присоединением заявки №
Гкударственный номнтет
Свввтв Мпннстров СССР
fl0 делам нэебретеннй н вткрытнй (23) Приоритет(43) Опубликовано25.04.76.Бюллетень K 15 (53) "Д 576 8 097 (088.8) (45) Дата опубликования описанчя 02.08.76 (?2) Авторы изобретения
Л. И. Равкияа и A. Г. Горюнова (71) Заявитель е
Институт полчомиелита и вир.". ных энцефалитов
Академаэе медэщинских наук СССР (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЛИО ГОКСИЧЕСКИХ CBOACTB
БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА
Изобретение относится к медицине, а именно к методам клинико-лабораторного ио следования сыворотки крови и спинномозговой жидкости при различных заболеваниях цент ральной нервной системы. б
Известен способ определения глиотокси ческих свойств сыворотки путем соединения ее с культурой клеток головного мозга, С целью упрощения способа в качестве субстрата используют органную культуру го щ, ловного мозга.
Способ осуществляют следующим образом, Извлекают стерильно головной мозг у
; эмбрионов новорожденных или взрослых жи ! вотных (крысы, мыши, морские свинки), помещают в чашки Петри, разрезают на мелкие кусочки размером 0,5 х2 мм и отмы вают раствором Хенкса с антибиотиками, Культивирование органных культур прово дят по методу множественных органных ° 20 культур на специальных дисках из оргстек ла и миллипоровых фильтрах типа и Я .
Оптимальной для нервной ткани является среда, состоящая из 40 .о МЭМ, 40% Лакт (рН 7,0), 10% куриного эмбрионального Ж!
2 экстракта, глюкозы (400 мг на 100 мл
° среды) и антибиотиков (пенициллин и стреп томицин по 100 ед. на 1 мл среды). Газо образная среда состоит из 5% СО, растворенно о и воздухе.
Одновременно с посадкой кусочков добав-, ляют исследуемую жидкость с конечной кон центрацией 50-10%.
Через 17-24 час кусочки извлекают и фиксируют в течение 3 12 час в спиртфор малине и затем заливают в парафин или целлоидин, делают срезы и окрашивают по методу Ниссля (можно также окрашивать гематоксилин- эозином ) .Если кусочки нужно хранить длительное время до гистологической обработки, то их перекладывают в 80% -.ный спирт.
Положительный глиотоксический эффект выражается в распаде ядер глиальных клеток при сохранении нейронов, нейробластов и сосудистых элементов. Гибель отдельных глиальных клеток или гибель всех элементов нервной ткани не учитыватся.
Соста внтель С. Малютина
Редактор А. Яер. "кре ".; ю ч<-,, .. К орле%тор р рацнина
Лад. М, Д
Тнрая 575
Заказ 5 ") 16
Подписное
Ц1111111111 Росу дарстзенногс . он::,тс":: Сов-а В1нннстроа CCCP ло делам наоорет"=нкы н открь!ти({
Москва, 113035, Раун скан нао., 4
Фитн1ал ППП Патент, г, Ужгород, ул„Проектная, 4
Формула изобретения
Способ определения Глиотоксических свойств биологического материала путем его инеубании с тканью ГоловнОГО моэГа1 О т л и 1 а ю ш и и с я тем, что, с целью упрошения способа, в качестве субстрата ис пользуют орГанную культуру ГоловнОГО моэ- а с
