Способ отбора биохимически активных веществ
ОП ИСА
НИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
Союз Советских
Социалистических
Республик (11) 516957
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТРфЬСТВУ (о1) Дополнительное к авт. свнд. (51) М. Кл.
5 01И 33/16
С 12К 1/00 (22) Заявлено28.10.71 Я1) 1710690/30-15 с присоединением заявки №» ,,(32) Приоритет 04.02. 71 (31) (33)> ГДР 9Р C125/152888
Гасуда Рствеиный комитет
Совета Мииистров СССР па делам иэобрвтеиий и открытий (43) Опублнковано05.06.76.Бюллетень № 21 (45) Дата опубликования описания 26.10.76 (53) VgK 543.9(088.8) Иностранцы
Хайнц БОМ, Вернер Кохманн, Альфред Барт, Готтфрид Гюнтер, Вильфрид Крамер, Хуберт Крютер и Вильхельм Леттге (ГДР) (72) Авторы изобретения (71} Заявитель
Иностранное предприятие
"ФЕБ Хемикомбинат Биттерфильд" (ГЛР) (5 ) СПОСОБ ОТБОРА БИОХИМИ нЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕШЕСТВ
С целью ускорения пр6несса отбора пред- щ лагается в к".÷åñòâå хлорофиллсэдержаших растений испэльзэвать однэклетэчньв зеленые в дэрэсли в жидкой среде, Для сравнения обработанных растений с неэбрабэтанньми используют электронный 15 микроскоп, а также спектральн колэрнметрические и яефелометрические методы.
Пример 1. Свежие споры синхронных культур хлэреллы (штамм 211-86) помешают в питательный раствор и пэлучают 20 суспензию, 1 мл кэтэрэй содержит 2 миллиона клеток вэд: росли, 1 л пнтатсльнэгэ раствэра сэс "эит из
988 мл раств р- . " 1, 1 мл раствора ¹ 2 и 1 мл раствэра . 3 ° 25 вещества ввэдят B начале эсв.шенин II.III в б нее пэздний момент. Через 14 ыс освещения затеняют яа 8-12 чнс и ..:вэб.жИзобретение относится к способу отбора биохимически активных веществ.
Известен способ отбора биохимически активных веществ, включающий контактирование биохимически активных веществ с хлорофиллсодержашими растениями и сравнение обра ботанных растений с необработанными, Однако известньй способ очень длителен, 2
Питательный раствор ¹ 1 содержит (в г):
10 111 КИО э 6в210 НаН РО ° Н О, 2 465 M SO ° 7Н (тР, 0,100 СаС1 ° 6Н О
1 4 2 1 т 2 и 10 л дистиллированной воды.
Питательный раствор № 2 содержит (в мг), 61т0 Н ВО, 169,0 Мтт ЯО ° Н О, 287,0
3 3
ZnSO 7Н О, 2,5 CuS0 ° 5Н О, 12,4
1 °
4 2 молибдата аммония и 1 л дистиллированной воды, Для приготовлетшя питательнэгэ раствэра ¹ 30 69 мг FeSG ° 7H G и 0,95 мг
4 2 кэмплекса Йа.-ЕДТА растворяют в 80 мл кипяшей воды и доливают вэдэй дэ 100 мл.
Пэ 100 мл полученной суспензии вносят в пробирки, обрабатывают смесью э шшеянэгэ воздуха и 1,5% двуокиси углер-..да и эсвешают при 30 С =бэгашенньми красным светом люминесцеятными лампами (интенсивность"-10000 лк). Испытуемые
516957
3 дают самые ближайшие поколения спор водорослей от сильно выросших на свету матарцигких клеток. Во время затенения тщательно аэрируют очишенньм воздухом. По окончании затенения подсчитывают количест- 5 во клеток и измеряют их размер. Прирост массы можно, определить с помощью электронного микроскопа, нефелометрических или . спектрально- колориметрических измерений.f
Фенурон в концентрации 0,1, 0,05, 0,01; 10
0,005, 0,001 и 0,0005% заметно подавляет рост хлореллы При дальнейшем разбавлении (0,0001, 0,00005 и 0,00001%) гер4 бицидная жтивность фенурона значительно снижается, Пример 2. Проводят опыт, как в примере 1, вводя в контакт с хлореллой различные испытуемые вещества. В конце опыта для каждого испытуемого вещества подсчитывают число клеток в 1 мл или определяют прирост массь как в примере 1.
В табл. 1 приведены результаты; полученные через 16 час освещения, при подсчете числа клеток в культуре водорослей с помощью электронного микроскопа, Таблица 1.
Рост клеток, %, при концентрации. испытуемого вещества, % (Испытуемое вещество
0
О
0
О
0
О
55, 80
23
18
0
92
34
98
100
18
О
71
26
12
32
92
97
Результаты, полученные через 8 час оо- зеленых водорослей нефелометрически.1 ., овоще низ, приопределенин прироста мессы щ) тодом, приведены в табл. 2.
Симазин
Атразин
Прометрин
А резин
Паторан
Фенурон
Монурон
Пиурон
Цинурон
2,4-0
И а-соль 2,4-Q
Аминная соль 2,4 В
Амитрол
О-Изопропилфенил карбамат
О-Изойропил-3-хлорфе нилка бамат
Паракват
Дикват
Вофатокс
О,О-Дим етил-(1-окси-2, 2,2 трихлорэтил)-фосфонат
Сульфанилмочевина
Хлоральгидрат
Хлорхолинхлорид
Трикрезилфобфат
Р -ГХЦГ
И -ГХБГ
5
0
0
О
68
16
0
l5 о
8
106
108
46
100
516957
Таблица 2
Рост клеток, %,при "онцентРацнн: испытуемого вешества,%
Испытуемое вешество
0,001
Ot01
90
Хлорхолннхлорид
Ди енилгидантоин
Трикрезилфосфат
Сульфанилм очеви на
28
100
0.30
96
90
100
Уранилацетат
Вофатокс
Вотевит
100
77
58
100
А тразин
42
Паракват
2,4-D
Хлорапьгидрат
При подсчете числа клеток зеленьк водорослей чеоез 8 час эсвешения спектрально-колориметрнческнм методом (измерение45 световой абсорбции при 680 нм) получают результаты, приведенные в табл. 3.
Примером вешеств, 0,05%-ные растворы которых обладают незна штельнэй биологи Ю ческой активностью, могут служить моногндрофосфат натрия (94,5), хлэрид калия (84,5) сульфат магния Mg 30g 7 Н О (1 02,0), днгидрсфосфат натрия (99,0), бэрная кислота (98,5), хлорид натрия (90,5), нитрат калия (103,0), хлэрид к:iëüöèÿ (93,5), кар бэнат натрия (90,0), сульфат калия (11 0,0), хлопид марганца (81,0), хлэрид железа (Fe 2) (98,0), хлэрид магния (1 03,0), :фосфат натрия (100,0}, сули,»>т иа грня 60
f -Индолилуксусная кислота
Триамид гексаметилфосфэрной кислоты
Дифениловьй эфир
И -Бутил- Й -(1-(0,0-дипрэпилфосфонил) -2-метилциклогексил) -амин
Амитрол
Й -Бутил- Й - 1 «(0,0-диизобутилфосфэнил)-циклогексил3амин
М а ЯО 10Н О (107,0), нитрат кальция
2 4 2
Са(ЯО ) ° 4Н О(97,0), 3-амино-4- этилбензол-Ъ-хло У-этилфениловьй эфир (80,0), 5-хлор-2-экси-3-этилпропиофенон (70,4 ), Я этокси J3 ф -(2-этил-4-ацетилфеиэкси)-этокси -днэтиловый эфир (71,8), этиловый эфир 2,5-метилен-1,2,5,6-тетрагидрэбензойной кислоты (104,0), н-бутаиэл (109,6), метилциклэгексанэн (92,0), элеилметилтаурат натрия (70,4), синтетическая кремневая кислота (супрасил) (8 5,8 ), 60% ный алкиларилсульф >нат кальция (такинил CA 60) (77,3), мииеральи">c.;.наса.> я, (апифатическия углевод", >д} (! >8,.>)
12 и диспергатор ВО (эксиэ-.иии» >и и»ы>;.>килфенэл) (1 GG,7) .
Таблица 3.
Составитель,Я,gp ä,ö K В, Техред E.Ïåòðîâà редактор ГЛцарганова
КоРРектоР М.лейзерман
Закаэ Я ф
Тираж 1029 Подписное
П1Й ИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений иоткрлтий
11.3О35, Москва, Ж35, Раукская наб, д.4/5
Филиал ППП Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4
Формула изобретения
Способ отбора биохимически активных вешеств, включающий приведение их в контакт с хлорофиллсодержатйми растениями и после дуюяее сравнение сбработанных и необработаиных растений, о т л и ч а ю ш и и с я ,тем, что, с целью ускорения процесса отбо ра в качестве хлорофиллсэдержаших растений берут одноклеточные эаленьв водоросли в жидкой среде.
