Способ стимуляции образования специфического иммунитета у животных

 

п! 540640

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 28.03.75 (21) 2119355/15 с присоединением заявки № (51) М. Кл.2 А 61К 39/18

С 12К 5/00

Совета Министров СССР по делан изобретений и открытий (53) УДК 615.37(088.8) Опубликовано 30.12.76. Бюллетень ¹ 48

Дата опубликования описания 30.12.76 (72) Авторы изобретения

А, В. Исполатова, Я. С. Шварцман, Н. В. Цыбульская и С. М. Матвеева

Всесоюзный научно-исследовательский институт гриппа (71) Заявитель (54) СПОСОБ СТИМУЛЯЦИИ

ОБРАЗОВАНИЯ СПЕЦИФИЧЕСКОГО ИММУНИТЕТА

У ЖИВОТНЫХ

Государственный комитет (23) Приоритет

Изобретение относигся к вирусологии, в частности к способу стимуляции образования специфического иммунитета у животных к вирусу гриппа.

Известны способы стимуляции образования специфического иммунитета у животных, включающие введение им вируса гриппа парэнтерально (1).

Для усиления образования циркулирующп; в крови антител вместе с вирусом применяют адьювант 65, полинуклеотиды и др.

Недостаток этих способов заключается в том, что они не стимулируют секреторный иммунитет.

Известен также способ стимуляции образования специфического иммунитета у животных путем введения им иммунизирующего агента совместно с липополисахаридом (2).

Однако этот способ не обеспечивает стимулирование образования секреторных антител в организме животных при иммунизации его вирусом гриппа.

Цель изобретения — разработать способ, позволяющий одновременно со стимуляцией общего иммунитета у животных против вируса гриппа обеспечить стимуляцию секреторного специфического иммунитета.

Это достигается тем, что иммунизирующий агент — вирус гриппа вводят вместе с липополисахаридом S. typhi интраназально.

В результате этого происходит увеличение накопления антител в секретах дыхательных путей и сыворотках крови, которое определяют в реакции непрямой гемагглютинации

5 (РНГА) .

На фиг. 1 графически изображена динамика образования циркулирующих в крови антител 1, секреторных антител 2 и 3 соответственно в смывах пз трахеи и носа у животных, интраназаль| о иммунизированных вирусом гриппа с липополисахаридом S. typhi. Ha фиг. 2 представлены те же данные, но у животных, интраназально иммунизированных вирусом без лппополпсахарида S. typhi.

Кривые отражают данные, представленные в таблице, приведенной ниже.

П р и и е р. Одну группу крыс Упстар в количестве 50 голов весом по 150 — 180 г иммунизировалп интраназально 0,5 мл разведенной 1: 10 впрусосодержащей эллантопсной культурой с инфекционной активностью 7,5 1g

ЗИД 50 0,! мл в смеси с 0,02 мг лппополисахарида S. typhi. Второй группе таких же животных вводили в качестве контроля тот же

25 вирус без липополисахарида S. typhi. После иммунизации животных из обеих групп забивали крыс на 5, 10, 15, 30 и 60 день. Исследовали смывы из полости носа, трахеп и сыворотки крови. Для взятия смыва из носа жи30 вотных, под легким эфирным наркозом, укла540640 магглютинации (РНГА). Для определения достоверности полученные данные обработаны статистическими методами и представлены в таблице.

5 Данные иммунизации животных вирусом гриппа вместе с липополисахаридом S. 1урЫ в сравнении с данными по иммунизации животных вирусом гриппа без липополисахарида

S. typhi.

Иммунизация животных вирусом гриппа с липополисахаридом

Дни наблюдений

THTpbl антител B 1ок

Титры антител в 1о@ в смывах из трахеи смывах из носа сыворотках крови смывах из трахеи сыворотках крови смывах из носа

0,2 0,1

0,8 0,33

0,8 0,2

0,5 0,16

0,4 0,05

0,2 0,28

1,0 0,39 0,2 0,1

5,4 0,08 1,4 0,27

5,6 0,14 1,3 0,28

5,0 0,26 1,6 0,2

3,7 0,09 0,6 0,02

2,0 0,07 0,4 0,2

0,2 0,1

2,1 0,14

2,7 0,28

3,0 0,14

3,1 0,26

2,2 0,14

1,0 0,39 0,2 0,1

5,3 0,09 2,2 0,14

5,6 0,28 3,0 0,21

5,7 0,43 3,5 0,17

8,2 0,28 3,9 0,1

4,8 0,09 2,8 0,1

15

60

10 туры и механизмов взаимодействия с вирусами. Предлагаемый способ может быть использован для усовершенствования метода иммунизации против гриппа людей, а также свиней и кур.

Для выполнения данного способа требуется липополисахарид S. typhi — отечественный, доступный препарат, изготавливаемый в промышленных масштабах производственными институтами вакцин и сывороток Министерства здравоохранения СССР.

Способ стимуляции образования специфического иммунитета у животных, включающий введение иммунизирующего агента совместно с липополнсахаридом, отличающийся тем, что, с целью одновременного стимулирования образования секреторных антител в ор30 ганизме животного при иммунизации его вирусом гриппа, последний вводят интраназально с липополисахаридом S. typhi.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

l. Патент СССР № 441711, кл. С 12k 5/00, 1968.

2. Заявка Франции 2123562, А 61К 23/00, 1972 (прототип). дывали на бок. Полость носа промывали с помощью пастеровской пипетки 0,5 мл физиологического раствора, Для взятия смывов пз трахеи в верхнюю часть трахеп вводили кончик пипетки, фиксировали его и промывали

1,0 мл физиологического раствора. Для определения концентрации антител в смывах и сыворотках использовали реакцию непрямой reИз таблицы видно, что при иммунизации животных вирусом гриппа вместе с липополисахаридом S. typhi уже с 5 дня резко возрастает концентрация секреторных антител в смывах из трахеи и носа. Их титр был выше, чем во второй группе животных в 2,0 — 2,5 раза. Максимального развития ответная реакция у животных первой группы достигает к 30 дню, когда она начинает угасать у животных, иммунизированных вирусом без липополисахарида

S, typhi. В этот период уровень антител в смывах из полости носа у животных первой группы превышает уровень антител у животных второй группы в 8 раз, а в смывах из трахеи— в 16 раз. Одновременно с этим интраназальное введение вируса вместе с липополпсахарпдом S. typhi стимулировало и образование циркулирующих антител на поздних сроках.

На 30 и 60 день титр циркулирующих антител у животных первой группы был в 8 — 16 раз выше, чем у животных второй группы.

Использование предлагаемого способа иммунизации лабораторных животных по сравнению с известным обеспечивает усиление образования секреторных и циркулирующих противогриппозных антител.

В результате использования этого способа можно получить значительные количества секреторных антител с целью изучения»х струкИммунизация животных Вирусом гриппа без липополисахарида

Формула изобретения

Ю r5 ZO u

Ю 15 ZO Ю

Дни фиг.2

Составитель Л. Мурав

Редактор М, Дмитриева Техред А, Камышникова Корректор Л. Денискина

Заказ 2881/11 Изд. № 1890 Тираж 630 Подпи

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, 5К-35, Раушская наб., д. 4!5

Типография, пр. Сапунова, 2