Способ получения анатоксина

 

О0 (72) Авторы изобретения

H. П. Ефимова и А. М. Николаева г (7! ) Заявитель

Пермский ордена Трудового Красного Знамени научноисследовательский институт вакцин и сывороток (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНАТОКСИНА

Изобретение относится к области микробиологии и может быть использовано в медицине при получении очишенного анатоксина..

Известен способ получения анатоксина путем вырашивания культуры С еьЬЧФum рвгФчифеов на питательной среде, отделения биомассы и стерилизации полученного фил ьтрата культурал ьной жидкости c Hoc ледующим осаждением целевого продукта, его элюцией, очисткой, обезвреживанием формалином в присутствии 1 - лизина я сорбцией на гндроокиси алюминия (1).

Однако такой способ не обеспечивает вйсокой иммуногенной активности анаток» Ig сина.

Целью изобретения является повышение иммунногенной активности анатоксина.

Это достигается тем, что культуру вырашивают на казеиново-панкреатической щ среде, целевой продукт осаждают из филььрата культуральной жидкости солями хло» ° ристого натрия и цинка и обезвреживание ведут 0,07 5-0,125%ным раствором фор2 малина в присутствии 0,0125-0,05 М раствора Q лизин&.

Способ осушествляют следуюшим образом.

К стерильному фильтрату культуры per+. чонепь добавляют 20% сухого химячески чистого хлористого натрия при непрерывном перемешивании раствора. После полного растворения соли добавляют хлористый цинк в виде насышенного раствора для того, чтобы конечная концентрация хлористого цинка в центрифугате.составляла 0,4-1%. Осажденный токсин оставляют на 16-18 час при температуре

О

4- 10 С. Образовавшийся осадок отделяют сепарированием or маточного раствора и элюируют 3-4%ным раствором двухзамещенного фосфата натрия. Смесь снова сепарируют, иерастворившуюся часть отбрасывают и элюат фильтруют через кольнки с гелем сефадекса Г»75, уравновешенного борноборатным буфером pf 7,1, элюцию активного белка с колонок проводят этим же буфером.,6637

Составитель С. Малютин

Редактор А, Бер Техред С. Мигай, Корректор И. Муска

Заказ 2922/21 Тираж 525 Подписное

ШП!ИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва,. Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4 с

После етого активные фракции объединяют, добавляют L - лизин в количестве

0,0125 М, формалин в концентрации .0,1%, коррегируют р!! до 7,2-7,3 и проводят обезвреживание пря 37 С.в тече- ние 20-25 суток. После обезвреживания анатоксин сорбируют на гндроокиси алюминия и используют по известным схемам.

Использование предлагаемого способа обеспечивает получение высокоиммуноген» 10

Hex препаратов, обладаюших высокой удельной активностью. Полученные препараты в 2-3 раза превосходят по удельной и иммуногенной активностям анатоксины, полученные известным способом. t 5

ФорМула изобретения

Способ получения анатоксина путем О вырашивания культуры CfoStl"1dium рЕгf!

4 ю навоз на питательной среде, отделения биомассы и стерилиэапии полученного фильтрата культуральной жидкости q,ïîcëåïóþшим осаждением целевого продукта,, его

Элюцией, очисткой, обезвреживанием формалином в присутствии l. -лизина и сорбцией на гндроокиси алюминия, о т л ич а ю ш и и с я тем, что, с целью повышения иммуногенной активности анатоксина, культуру вырашивают на казеиновоцанкреатической среде, целевой продукт осаждают иэ фильтрата кульгуральной жидкости солями хлористого натрия и цинка и обезвреживание ведут 0,075-0,125%» ным раствором формалина в присутствии

0,0125-0,005 М раствора Ь - лизина.

Источники информапии, принятые во внимание при экспертизе

1. fopan I.Ìæéñþå SHence Ъюйофц

21, 1968, с. 379-391.