Способ получения трипептидов или их солей

 

Оn ИСAHNE (1671721

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

Союз Советских

Социалистимеских

Республик

К ПАТЕНТУ (61) Дополнительный к патенту (51) М. Кл, (22) ЗаявлЕио 28.04,73 (21) 1916396/23-04 с присоединением заявки 1916792/23-04 (23) Приоритет — . (32) 02.05.72

С 07 С 103/52//

А 61 К 37/02

Государственный комитет

СССР оо делам изобретений и открытий (31) 5757/72 (33) Шв „я

Опубликовано 30.06.79. Бюллетень уо 24 (у) уД с 547.964. .407 (088.8) Дата опубликования описания 02.07.79

Иностранцы

° °

Карл Геран Клаесон, Биргитта Гунилла Карлссон, Ларс-Гундро Свендсен, Маргарита Бломбэк и Густаф Эрик Биргер Бломбэк (Швеция) (72) Авторы изобретения

Иностранная фирма

"Актиеболагет Каби" (Швеция) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРИПЕПТИДОВ ИЛИ ИХ.СОЛЕЙ где R — водород, бензил, Р-циклогексил, бензоил-N-циклогексил, бензоил-P-циклогексил;

R> — водород, фенил, алкил С, — Сб или циклогексил;

X — метилен или ординарная связь;

R3 — прямая, разветвленная или циклическая алкильная группа С,-Свй — прямая, разветвленная, циклическая алкильная группа С, — С>, фенил или бенэил;

n=2, 3, 4;

Изобретение относится к способу получения Цель изобретения — получение трипептидов трипептидов — новых соединений, содержащих с хромофорной группой, которые могут найти хромофорную группу, обладающих биологи ес- применение в медицине. кой актиВностью.

Известен способ конденсации пептидов и ами- а Поставленная цель достигается описываемым нокислот методом активированных эфиров 11). способом получения трипептидов формулы

0 . О, О

I а р й; Х-Х- СН- С-m- СН-С-3 к- СН- С -ННК, 1 1 1

З Зз В ц (С1 21и NK

З (I) — водород или гуанил;

15 Rq — фенил, нитрофенил, нафтил, 1-нитро-2-нафтил, 4-нитро-1-нафтил, или их солей, заключающимся в том, что

N-защищенную аминокислоту общей формулы

О

2о NH CH-С-ОН

7 (Сн2) и

NH

I б

671721 где и и Rs указаны выше, подвергают взаимодействию с соединением формулы

P c5 -Х, (Щ) где Х вЂ” изоцианатная группа.

5 в гексаметилфосфортриамиде или с изобутиловым эфиром хлормуравьиной кислоты в тетрагидрофуране с последующим взаимодействием полученного продукта с соединением формуль

1О Ь (11!а) где f — ами ног руппа, в результате получают производное Й-замещенной аминокислоты формулы

0 l1

NM -СН вЂ” С-NHQ а Ь

/СН2!и

{cv) R где Rs и R, указаны выше, затем ведут постепенное образование нужной пептидной структуры последовательным сочета- 2$ нием В диметнлформамиде и-нитрофениловых эфиров оставшихся аминокислот по методу активированных эфиров, причем хромофорную группу используют в качестве защитной группьв для С-конечной карбоксильной группы первой аминокислоты.

Анализ элюатов проведен хроматографией в тонком слое силикагеля марки F 254 фирмы

А6Е Мерк, Лармийарт" (ФРГ) в различных системах растворИтелей:

А: и- Бутанол — уксусная кислота — вода (3:1:1);

В; и-пропанол — этилацетат — вода (7:1:2);

С: и-гептан — и-бутанол — уксусная кислота (3:2:1);

P: хлороформ — метанол (9:1).

Пятна на хроматограммах обнаруживают вначале ультрафиолетовым светом (при 254 мк), затем хло1 толуидиновой кислотой.

При описании экспериментального материала использованы следующие сокрашения:

Бок — трет-бутнлоксикарбонил;

Вз — бензоил;

Взл — бензил;.

Кбо — карбобензокси;

56

На — нафтиламин;

ОпНФ вЂ” n-нитрофенокси; иНа — и-нитроанилид; п1 ос -- n-толуолсульфонил;

Фе — фенилала11ин;

Лиз — лизин;

Вал — валин;

Арг — аргинин;

Иле — изолецин;

Лей — лейцин; ГСХ вЂ” хроматография в тонком слое.

Гели Сафадекс G-15 и G-25, применяемые для фильтрования, представляют собой сшитые декстраноные гели с различной степенью сшивания, фирмы "Фармация Файн Кемикелс, Упсала" (1!!веция); гель Сефадекс LH-20 представляет собой оксипропилированный сшитый декстрановый гель фирмы "Фармация Файн.Кемикелс.

Упсала" (Швеция) .

Пример 1. Н-Лей-Лей-Apr-пНа 2НС! Я.

А. CIO-A!cr (NO )-nHa (Ta) .

В раствор 35. 3 г (0,01 моль) сухого

Кбо-Арг(МО -ОН в 200 мл свежеперегнанного и и

N N N N N N -гексаметилфосфортриами.t. 1 ю у да при комнатной температуре при персмешивании, добавляют 10,1 г (0,1 моль) триэтиламина и 24,6 r (0,15 моль) и-ннтрофенилизоцианата. Реакционную массу выдерживают 24 ч . при комнатной температуре, затем выливают в 2 л 2%-ного раствора бикарбоната натрия при перемешивании. Выпавший осадок отфильтровывают, три раза промывают по 0,5 л 2%-ного раствора бикарб,.ната натрия, два раза по 0,2 л дистиллированной воды, два раза по 05 л

0,5 н. соляной кислоты и пять раз по 0,2 л дистиллированной воды. Высушенный продукт суспендируют в теплом метаноле. Нерастворившуюся часть, представляющую собой N,. N-бис-п-нитрофенилкарбамид отфильтровывают.

Фильтрат чистят,гелевой хроматографией на колонке с Сефадексом LH-20 в равновесии с метанолом.

Выход 29,8 г (63,0%); а; т.пл. 185-188 С:. гомогенность по ТСХ в системе Р; (а) = — 1, 3 (с-1,1, уксусная кислота) .

Б. Кбо-Лей- Apr(NO )-nHa (g б) .

Раствор 5,0 r (10,6 ммоль), $ а в 21 мл уксусной кислоты и 22 мл 4 н. HSr в уксусной кислоте при полностью сухих условиях перемешивают 1 ч и медленно вливают в 200 мл сильно перемешиваемого эфира в осадок выпадает

1,5 HBr H-App(NOq)-nHa.

Эфирный раствор декантируют и гранулированный остаток обрабатывают еще три раза по

100 мл эфира для удаления бензилбромида и избытка H8r и уксусной кислоты.

После сушки в вакууме над пятиокисью фосс фора выход бромгидратной соли производного аминокислоты количественный (4,87 r). 4,87 r (10,6 ммоль) 1,5 НВг.Н Арг(NOq)-пНа растворяют в 50 мл перегнанного диметилформамида., Раствор охлаждают до — 10 С и добавляют к нему 1,6 r (15,9 ммоль) триэтиламина для выделе ния H- Apr(NO )-пНа из его бромистоводородной соли. Смесь оставляют на 1 ч в сухих условиях. Вь1павший триэтилбромид отфильтровына67l72l

Исходные вещества 0,48 г (0,83 ммоль) I I I a

4$ и 0,53 г (I 24 ммоль) Кбо-Р-цнклогексил-Ала105 106оC; ()з4= 288о (с днметилформамиц) .

Метод синтеза в условиях примера), Б.

Очистка. Гелевая хроматография на Сафадек® се LH-20 в метаноле.

Выход 531 г (88%) аморфного gf в, гомогенность по ТСХ в системе Р; (а) 4 = — 7,3о (c=2,0 диметилформамид) .

Н-циклогексил-Ала-Вал-Ар1 пНа 2НС! (DT) . р

Исходное вещество 120,4 г (О,!65 ммоль) !Ц.

Метод синтеза в условиях примера 1, Г.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе

5-15 в 20%-ной уксусной кислоты. ют и фильтрат охлаждают до — 10"С. Добавляют

4,3 r (12,7 ммоль) СРО-Leu-OpNP и медленно поднимают температуру раствора. Через 3 ч раствор снова охлаждают до — 10оC и буферируют

0,55 г (5 ммоль) триэтиламина. Буферирование 5 повторяют еще раз через 2-3 ч. Через 24 ч раствор упаривают при 40оC в вакууме досуха. Остаток обрабатывают три раза по 100 мл дистиллированной водой и сушат в вакууме. 1О

Сухой остаток растворяют в метаноле и чистят гелевой хроматографией на колонке с Сефадексом LH-20 в равновесии с метанолом.

Выход 6,! г (98%) аморфного б, гомогенность по TCX показана в системе Р; (а) 21 = — 33,3о (с - 1,0 метанол) . В. Кбо-Лей-Лей-Арг(НО ) --nHa (В) .

Исходные вещества: 2,8 г (4,т7 ммоль) б и 2,22 г (5,72 ммоль) Кбо-Лей-ОпНФ.

Метод синтеза соответствует примеру 7, Б.

Очистка, Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле.

Выход 2,5 г (80%) аморфного 1 в, гомогенность по ТСХ в системе Р; (а) = — 9,9 (c=1,0 метанол).

Г. Н-Лей-Лей-Арг пНа 2 HCI (1 г) .

Для отщепления нитрогруппы, защищающей гуанидиновую функцию аргинина и группы Кбо, в реакционный сосуд прибора Сакакибара помещают 134,2 мг(0,192 ммоль) в и подают 5 мл сухого фтористого водорода, реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч. Затем фтористый водород отгоняют при пониженном давлении и сухой остаток растворяют в диметилформамиде, добавляют 0,25 мл концентрированной соляной кислоты, раствор упаривают и конверсию фтористоводородного производного пептида в его солянокислую соль повторяют.

Очистка. Остаток после последнего выпаривания растворяют в 50%-ной уксусной кислоте и 4о чистят хроматографией на колонке с Сафадексом G-25 в равновесии с 50%-ной уксусной кислотой. Фракцию элюата, содержащего чистый хлоргидрат трипептида, лиофилизуют.

Выход 80,0 мг аморфного вещества содержание хлора 11,83%, гомогенность по ТСХ в системе А; (a) a = — 29,9о (с" 0,59, 50%-ная уксусная кислота) .

Анализ аминокислот дал следующее соотно- . шение Лей 2.0: Apr 095.

Пример 2. М Бз-Лей-Лей-Арг-лНа HCI Д1) .

А. N -Бз-Лей-Лей-Apr(NO2)-пНа Д а).

Исходные вещества 703 мг (1 ммоль) lв и 272 мг (1,2 ммоль) бензойного ангидридами

Метод синтеза. Декарбоксилирование веществ

° т ва» в ведут в условиях ппимера 1, Б. Отфильтровывают сухой продукт Д Лей-Лей-Apr(NO2)-nHa-HBr. Фильтрат охлаждают до — IO C и добавляют 272 мг (1,2 ммоль) бензойного ангидрида. Через 3 ч раствор принимает комнатную температуру. Его снова охлаждают и буферируют

0,07 мл (0,5 ммоль) триэтиламина. Буферирование снова повторяют через 3 ч.

Через 24 ч раствор упаривают в вакууме досуха. Остаток обрабатывают и сушат, как описано в примере 1, Б.

Очистка. Гелевая хроматография в колонке, с Сафадексом 1.Н-20 в метаноле.

Выход 550 мг (827) аморфно1о вещества

И а; гомогенность по TCX в системе Р; (aJg5= — 3,6о (с =1,01 диметилформамид) .

Б. и Бз-Лей-Лей-Артпйа HCI (17>

А

Исходное вещество 554, 8 мг (0,828 ммолл) (! а.

Синтез в условиях примера I, Г.

Гелевая хроматография на Гефадсксс G-15 в 20Я-ной уксусной кислоте н Сефадскс LH-20 в метаноле.

Выход 476 мг (87%) лиофилизовапного аморфноготь, содержание хлора 5ÄI07, гомогенность по ТСХ в системе А; (a) у4=73,0о (c"-0,6, 50/ная уксусная кислота), Анализ показал следующее соотнощение аминокислот Лей 2,0; Арг 0,95.

Пример 3. Н+циклогексил-Ала-Вал-Apr-nHa.2HC1 ()I!), 4Ь»

А. Кбо-Вал-Apr(N0 )-пНа (Я а).

Исходные вещества 20,6 г (43,5 ммоль) I a и 20,3 r (54,3 моль) Кбо-Вал-ОпНф.

Метод синтеза в условиях примсра 1, Г.

Очистка. Перекрнсталлизация сырого продукта из метанола. Маточную жидкость чистят гелевой хроматографией на Сефадексе LH- 0 в метаноле.

Выход 23,2 г (93,3%) Ш а; т.пл. 200-202 С; гомогенность по ТСХ в системах Р, (a) з = +5.8о (с "1,0 диметилформамид) .

Кбо-Р-циклогексил-Ала-Вал-АР (NO,)-nHa-(Ц1 в).

671721

Выход 55,6 мг (55%) лиофнлизованного аморфного I)(, содержание хлора 11,32%, гомогенность но ТСХ в системе А; (а) — 36,8" (с=0,62, 50%- ная уксусная кислота), Аминокислотный анализ показал соотношение Вал 1,0;

Р-циклогексил-Ала 1,1; Ар1 1,0, Пример 4. N-Бз-Р-циклогексил-Ала-Вал-АртяНа- НС! (1Ч).

А. N Бэ-Р-циклогексил-Ала-Вал-Арр (МОэ)-nHa (1Ч а).

Исходные вещества 243 мг (0,335 ммольЯ в и 93 мг (0,41 ммоль) бензойного ангидрида.

Синтез в условиях примера 2 А.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе I Н-20 в метаноле.

Выход 147 мг (63%) IV a; т.пл. 148-152 С, гомогенность по ТСХ в системе Р; (аф = — 6,33 (c = 0,84 диметилформамид) .

Б. N- Б з-Р-цнклогексил- Ала-Вал-Ар1 -пНа HCI (lV б).

Исходное вещество !06.0 мг (0,152 ммоль)

f u.

Метод синтеза в условиях примера 1 Г.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадек-2э се G-15 в 20У-ной уксусной кислоте.

Выход 86,7 мг (84%) лиофилизованного аморфного:вещества Я, содержание хлора 5,10%, гомогенность по ТСХ в системе А; (а) .— 770 {с 0,3, 50%-ная уксусная кислота).

Амннокислотный анализ показал соотношение Вал 1,0; )3-гексил-Ала 1,2; Арт 1,0.

Пример 5, N-Бз-N-цнклогексил-р-Ала-Вал.

-AprnHa HCI ф.

А. N-Кбо-N-цнклогексил+Ала-Вал-Apr{NO )- 35

-nHa (V а).

Исходные вещества 286 r (0,5 ммоль) и

300 r (0,7 ммоль) N-C30-1ч-циклогексил-р- Ала-Op N p.

Синтез в условиях примера 1, Б.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле.

Выход 313 мг (86%) аморфного а, гомогенность по ТСХ в системе Р; 1аЯ = +О (с -" 1,0 диметилформамид) . 45

Б. N-Бэ- N-циклогексил-Р-Ала-Вал-Apt (NO,)-nHa (V б).

Исходные вещества 300 мг (0,413 ммоль) и 123 мг (0,544 ммоль) бензойного ангидрида.

Синтез в условиях примера 2, А. 50

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле.

Выход 243,5 мг (87%) аморфного.V б, гомогенность по TCX в системе Р; (а) =0,5 (с -- 0,43 в диметилформамиде).

В. N-Бэ-N-цнклогексил-P -Ала-Вал-Ар рНа:

1НС! nr в).

Исходное вещество 170 мг (0,242 ммоль) 7б.

Метод синтеза в условиях примера 1, Г.

Очистка, Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле, Выход 126 мг (76%) лиофилиэованного аморфного вещества Ч; содержание хлора 5.11%, гомогенность но ТСХ в системе А; (a)$ = — 38,5О (с"- 0,69; 50%-ная уксусная кислота).

Аминокислотный анализ показал соотношение Вал 1,0; N-циклогексил-р-Ала 1.3; ÀÐr0,9.

П Р и м е Р 6. М)ГВэ-Вал-Вал. APr-пНа НС1 (Я1.

А. KGo-Вал-Вал-Арг- (NO )-nHa (Ч1 а) .

Исходные вещества 1,97 г (3,43 ммоль) Ilfa и 1,6 г (4,2 ммоль) Кбо-Вал-ОлНф.

Метод синтеза в условиях примера Iх Б.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе .Н-20 в метаноле.

Выход 1,9 г (82%) аморфного fL а, гомогенность по TCX в системе Р, Б. N Бз-Вал-Вал-Apr(NO )-nHa (Д б).

Исходные вещества 1,9 г (2,83 ммоль) Д а и 0,77 г (3,4 ммоль) бенэойного ангидрида.

Метод синтеза по примеру 2, А.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле.

Выход 1,4Х r (80 11 хморфиого 7) 6, гомогенность по Т(X в системе Р; (а) =+5,6 (с =1,01, диметнлформамид) .

В. М -Ьэ-Вал-Вал-Арг-пНа НС! (Й).

Исходное вещество 362 мг (0,564 ммоль) Ч16.

Метод синтеза в условиях примера 1, Г, Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе G-15 в 33%-ной уксусной кислоте, Выход 248 мг (69,7%) лиофилизованного аморфного VI; содержание хлора 5,54%, гомогенность по TCX в системе А; (аЯ =

= — 57,0 (c «0,65, 50%-ная уксусная кислота) .

Амннокислотный анализ показал соотношение Вал 20 АРг 09.

Пример 7, N -Ьз-Лей-Вал-ApritHa HCI (V))) .

А. Кбо-Лей-Вал-Артр(МО )-пНа (Я1а).

Исходные вещества 1,97 r (3,43 ммоль)

1Ц а и 1,7 г (4,2 ммоль) Кбо-Лей-ОпНа.

Метод синтеза в условиях примера 1, Б.

Очистка, Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле.

Выход 2,05 г (87%) аморфного ч )1 а, гомогенность по TCX в системе P.

Б. N -Бэ-Лей-Вал-Арг(МО )-пНа (Ч)16)

Исходные вещества 1,/5 г (2,55 ммоль) VII a и 695 мг (3,06 ммоль) бензойного ангидрида.

Метод синтеза в условиях примера 2, А.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле.

Выход 1,49 (91%1 аморфного VQ б, гомогенность по TCX в системе Р; (а) =+2,4 (с 1,01, диметилформамид) .

В. (ч -Бз-Лей-Вал-Apr-nHa HCI Л1Д.

Исходное вещество 319 мг (0,486 ммоль) 5 б.

Метод синтеза в условиях примера 1, Г.

6717 !

Очистка гелевой хроматографией на Сефадексе G.15 в 33%-ной уксусной кислоте.

Выход 276 мг (88%) лиофилизованного аморфного ЧЦ, содержание хлора 5,41%, гомо. генность по TCX в системе А; (а) — 520 сан О,яс, сОуа.ная уксусная кнсяоса анннокислотный анализ показал соотношение Вал 1,0;

Лей 1,1; Арг 0,95, Пример 8. и - Бз-Иле-Вал-Apr-п Нас HCI (V1ll), А. Кбо-Иле-Вал-Арг(МО2).пНа (ЧД1 а). )О

Исходные вещества 1,97 г (3,43 ммоль) III a и 1,7 г (4,2 ммоль) Кбо-Иле-ОпНф.

Метод синтеза в условиях примера 1.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле. !5

Выход 2,0 г (85%) аморфного ЧЩ a, гомогенность по ТСХ в системе Р, Б. N -БзаИле-Вал-Арг(МО )-пНа (ЧД11б), Исходные вещества 1,75 г (2,55 ммоль)

VIII а и 695 мг (3,06 ммоль) бензойного 20 айги дрида, Метод синтеза по примеру 2, А.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле, Выход 1,46 r (89%) аморфного Vill б, гомогенность по ТСХ в системе, P.

В. И -Бз-Иле-Вал-Apr-nHa HCI (ЧЩ).

Исходное вещество 319 мг (0,486 ммоль) Vill б.

Метод синтеза в условиях примера ), Г. 3I)

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе G-15 в 33%-иой уксусной кислоте, Выход 264 мг (84%) лнофилизованного аморфного Уй; содержание хлора 5,43%, гомогенность по TCX в системе А; (а®

= — 29,9 (с = 0,59; 50%-ная уксусная кислота).

Аминокислотный анализ показал соотношение Вал 1,0; Иле 0,9, Арг 1,1.

Пример 9. з-Вал-Иле-Арг-пНа HCI (Я).

А. Кбо-Иле-Apr(NOq)-nHa (g a). 40

Исхош!ые вещества 4,9 г (10,4 ммоль) Я а и 6,2 г (16 ммоль) Кбо-Иле-ОпНф.

Метод синтеза в условиях примера 1, Б.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадек-4 се LH-20 в метаноле.

Выход 4,75 г (78,1%) частично кристаллического Х а; гомогенность по TCX в системе ,Р; (a) > +2,3 (с = 1 0 диметилформамид).

Б. Кбо-Вал-Apr(NO )-nHa (IR б).

Исходное вещество .800 мг (1,37 ммоль)

И а и 615 мг (1,65 ммоль) Кбо-Вал-ОпНф, Метод синтеза как описано в примере 1, Б.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле.

Выход 833 мг (88,5%) аморфного 1Хб; гомогенность по TCX в системе Р; (а) --+3,23 (с 1.1 диметилформамид) .

В. и -Бз-Вал-Иле-Арг(йО,)-nHa (g в).

Исходные вещества 500 мг (0,73 ммоль)

Я б и 198 мг (0,876 ммоль) бензойного ангидрида.

Метод синтеза как в примере 2, А.

Очистка. Гслевая хроматография на Ссфадексе LH-20, метанол.

Выход 374 мг (78%) ал!орфного )P в . гомогенность по ТСХ в системе Р; (а)"=+1,9О (c=0,99 диметилформамид) . Г, Й -Бз-Вал-Иле-Apr-nHa HCI (15(г).

Исходное вещество 200 мг (0,305 л!л1оль) Й в.

Метод синтеза как описано в примсрс 1, Г.

Очистка. Гелевая хроматография на Ссфадсксе G-15 в 33%-ной уксусной кислоте.

Выход 53 мг (775%) лиофилиэованного аморфного ф; содержание хлора 5,40у", гомогенность по ТСХ в системе А; (а)2 = — 56,4О (с=0,64, 50%-ная уксусная кислота) .

Аминокислотный анализ показал соотношение Вал 1,0; Иле 1,1; APr 1,1.

Пример 10. ФБз-Вал-Лей-Apr-nHa HCI (Х) .

А. Кбо-Вал-Лей-Apr(NO,) -nHa (Х a), Исходные вещества 880 мг (1 5 мл1оль) I s и 670 мг (1,8 ммоль) Кбо-Вал-ОпНф.

Метод синтеза как в примере 1, Б.

Очистка. Гелевая хроматография на Ссфадсксе LH-20 в метаноле.

Выход 882 мг (86%) аморфного . . а, гомогенность по TCX в системе Р; (а) -- 6,6 (с =1,01 диметилформамид) .

Б. )ч+Бз-Вал-fleA-Арг(ИО,)-пйа (Х б).

Исхолныс вещества 400 мг (0,583 ммоль)

Х а и !60 мг (707 ммоль) бенэойного ангидрида.

Метод синтеза описан в примере 2, А.

Очистка. Гслевая хроматография на Сефадсксе LH- 0 в метаноле.

Выход 279 мг (733) аморфного Х, гомогенность no TCX в системс Р; (а) = --0,4 (с = 1,04 диметилформамид) .

Ь.

N -Бз-Вал-Лей-Арг-пНа HCI (Х).

Исходные вещества 150 мг (0,23 л!моль) Х б.

Мстод синтеза описан в примере I.

Очистка, Гелевая хроматография на Сефадсксс G-15 в 33%-ной уксусной кислоте.

Выход 128 мг (84,5 .) лиофилизованного аморфного Х, содержание хлора 5,45%; гомогенность по TCX в системс А; (a) = — 54,0 (с =0,64; 50%-ная уксусная кислота) .

Аминокислотный анализ показал соотношение

Вал 1,0; Лей 1,1;,Арг 1,0.

Пример 11. М -Бз-Иле-Илс-Арг пНааНС! (Х!).

Л. Кбо-Иле-Иле-Apr(NO>)-пНа (;л) з).

Исходные вещества 800 мг (1,37 л!моль),) а и 640 л!г (1,66 ммоль) Кбо-Иле-ОпНф.

Метод синтеза описан в примере I, Б.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле.

67172!

13

) Вь|ход 838 мг (87,5%) частично кристаллического Й а; гомогенность по TCX в системе

Р (a) +ç = — 5,7о (c = 1 04 диметилформамид) .

Ь.. N -Бз-Иле-Apr(NO2)-nHa (XI 6).

Исходные вещества 440 мг . (0,63 ммоль)

Х! а и 171. мг (0,76 ммоль) бензойного ангидрида.

Метод синтеза описан в примере 2, А.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле.

Выход 409 мг (97%) частично кристаллического Xt; гомогенность по ТСХ в системе P

В, N -Бэ-Иле-Иле-. Аргп1!аю НС! (XI в).

Исходные вещества 201 мг (0,3 ммоль) Х! б

Метод синтеза описан в примере 1.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе G-15 в 33%-ной уксусной кислоте, Выход 172 мг (87%) лиофилизованного аморфного Х); содержание хлора 5,33%, ro°

23 О могенность по ТСХ в системе А; (а))1 = — 57 (с Л0,67; 5"саная уксусная кислота), Аминокислотиый анализ дал соотношение

Иль 2,0; Аргу 0,9.,„

Пример 12. N -Бз-Лей-Иле-Apd.nHaiHCI (XI I

А, Кбо-Лей-Иле-Арг(И02)-пНа (Xtl а).

Исходные вещества 800 мг (1,37 ммоль)

IP, а и 640 мг (1,66 ммоль) Кбо-Лей-ОпНф.

Метод синтеза описан в примере 1, Б, Очистка. Гелевая хроматография на Сефа, дексе LH-20 в метаноле.

Выход 722 мг (81%) аморфного Xil à, гомогенность по TCX в системе Р; (аЯ3= — 7,3 (с "- 1,02, диметилформамид) .

Б. Й -Бз-Лей-Иле-Арг(ИО,)-пНа (Xll 6).

Исходные вещества 500 мг (0,72 смоль)

XII а и 205 мг (0,86 ммоль) бензойного ангидрида.

Метод синтеза описан в примере 2, А, Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе Н-20 в метаноле.

Выход 482 мг (82%) аморфного Xtl в, гомогенность по TCX в системе Р; (а)1 3=+0,5О (e. 1,03, диметилформамид) .

В. И -Бз-Лей-Иле-Apr-n Ha НО (XII).

Исходное вещество 193 мг (0,288 ммоль)

Х!) 6.

Метод синтеза описан в примере 1.

Оп стка. Гелевая хроматография на Сефадексе 6-15 в 33%-ной уксусной кислоте..

Выход 166 r (86%) лиофилизованного аморфного ХИ; содержание хлора 5,34%; гомогенность по ТСХ в системе А; (а) = — 51,4

23 О (с=0,67, 597о-ная уксусная кислота), Аминокислотиый анализ йокаэал соотноше ние Лей 1,0; Иле 1,2; APr 0,9.

Пример 13. И-Бэ-Иле-Лей-APr

-nHao HCI (Xr1I).

А. Кбо-Леи-Лей-АРг(ИО2)-пНа (ХИ! а) Исходные вещества 880 мг (1,5 ммоль) и

696 мг (1,08 ммоль) Кбо-Лей-ОпНф.

Метод синтеза описан в примере 1, Б.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле.

Выход,750 мг (71%) аморфного XQ)) а, 23 гомогенность по ТСХ в системе Р; (а)

= — 9,85" (с=1,05, диметилформамид) .

Б. И -Бз-Лле-Лей- Арг(ИО2)-пНа (ХIII6).

Исходные вещества 498 мг (0,71 ммоль)

ХЦ) а и 193 мг (0,85 ммоль) бенэойного ангидрида.

Метод синтеза описан в примере 2, А.

Очистка. Гелевая. хроматография на Сефанексе LH-20 в метаноле.

Выход 345 г (73%) частично кристаллического Хф1 б, гомогенность по TCX в системе (а) 5,7 (Gcl,04, в диметилформами

В. И - Бз-Иле.Лей APr.-nHaiHCI (Х Я) .

Исходные вещества 70 мг (0,254 ммоль) (Х!И 6).

Метод синтеза описан в примере !.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе G-15 в ЗЗЯ-ной уксусной кислоте.

Выход 129 мг (77%) лиофилизованного аморфного X1Il; содержание хлора 5,31%, гомогенность по TCX в системе А; (I2) 3ая — 49.,9

I (с-.0,68, 50%-ная уксусная кислота).

Аминокислотный анализ показал соотноше 0 ние Лей 1,0; Иле 1,1; Арг 1,05.

Пример 14. И -Бз-Лей-Лей- Арг

-2На HCI (ХЦ/).

Кбо-Apr(NO2)-nHa (XlV а).

К раствору 3,6 г (10 ммоль) сухого

З Кбо-Арг(ИО2)-OH в 200 мл тетрагидрофурана добавляют !,0 г (10 ммоль) триэтиламина и охлаждают до - 10 С в полностью сухих услоо виях.

К охлажденному раствору в течение 10 мин добавляют раствор 1,3 г (10 ммоль) изобутилхлороформиата в 10 мл тетрагидрофурана. Спустя 10 мин вводят 1,72 г (10 ммоль) 2-нафтиламина, Температуру реакционной смеси поднимают до комнатной и смесь оставляют при этой температуре на 24 ч. Затем упаривают в вакууме досуха, обрабатывают 3-5 раз дистиллированной водой, 3-5 раэ 5%-ным раствором бикарбоната натрия и снова -5 раэ дистиллированной водой, после чего продукт сушат в вакууме.

Очистка. Гелевая хроматография,на Сефадексе LH-20 в метаноле.

Выход 4,05 г (84%) частично кристаллического ХИ а, гомогенность по TCX в системе Р; (а® = +7,34О (с "1,0, диметилформамид) .

Кбо-Лей Арг (ИО2) -2- На UXV 6) .

Исходные вещества 1,5 r (3,1 ммоль) XIVa и 1,43 г (3,7 ммоль) Кбо-Лей-ОпНф.

671721 !

13

Метод синтеза описан в примере 1, b.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле, Вмхоо 1,о г (86%) аморфного Ч о, гомо. гег(ность по ТСХ в системе Р; (e)a+ = — 9,1 . 3 (с=1,0, диметилформамид) .

Кбо-Лей-Лей-Арг (NO )-2-На (ХгЧ в) .

Исходные вещества 1,35 г (2,26 ммоль)

XlV б и 1,05 г (2,72 ммоль) Кбо-Лей-ОпНф.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадек- >0 се LH-20 в метаноле.

Выхоц 1,0 г (62,4%) частично кристаллического ф(в; гомогенность по ТСХ в системе Р; ()24= 206О (c=l 0 ф )

N -Бз-Лей-Лей-Apr(NOq)-2-Ha (XQ г).

Исходные вещества 900 мг (1,4 ммоль)

XIV и и 407 мг (1,8 ммоль) бензойного ангидрида.

Метод синтеза описан в примере 2, А.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадек- 20 се LH-20 в метаноле.

Выход 800 мг (84%) аморфного V г; гомогенность по TCX в системе Р; (а) = — 13,4 (с=1,0; диметилформамид) .

А

N -Бз-Лей-Лей-Арг-2-На.HCI (XIV).

Исходное вещество 350 мг (0,52 ммоль) )QV г.

Метод синтеза описан в примере 1, Очистка, Гелевая хроматография на Сефадексе G-15 в 33%-ной уксусной кислоте.

Выход 260 мг (75%) лиофилизованного аморфного XIV; содержание хлора 5,3% гомогенность по ТСХ в системе А; (аЯ"= — 51,8 (с=0,57; 50%-ная уксусная кислота) .

Аминокислотный анализ показал соотношение Лей 2,0; Арг. 0,95.

Пример 15. N -Бз-Лей-Лей-Арг.l-нитро-2-На HCI (ХЧ ) .

Кбо-Арг (NO ) -1-нитро-2-На (ф а) .

Исходные вещества 3,6 г (10 ммоль)

Кбо-Арг(НО )-ОН и "-,26 г (12 ммоль) 1-нитро-"-нафтиламина.

Метод синтеза описан в примере 14, А.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле.

Выход 3,1 г (58,7%) аморфного ХЧ а ° гог могенность по ТСХ в системе Р; (аЦ1 = — !1,8 (Ы;0 диметилформамид) .

Кбо-Лей-Apr(NO,)-l-нитро-2-На (XV б).

Исходные вещества 950 мг (1,8 ммоль) ф а и 850 мг (2,2 ммоль) Кбо-Лей-ОпНф.

Метод синтеза описан в примере 1, Б.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадек= се LH-20 в метаноле, Выход 900 мг (78%) аморфного 3QT б; гомогенность по ТГХ в системе Р; (аЯ"= — 10,2о (c l,02, диметилформамид) .

Кбо-Лей-Лей-Apr (N02) -1-нитро-2-На (ХЧ в) .

Исходные вещества 900 мг (14 ммоль)

gf б и 650 мг (1,7 ммоль) Кбо-Лей-ОпНф.

Метод синтеза описан в примере 1, Г.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле.

Выход 810 цг (77%) аморфного gV в, гоо могенность по ТСХ в системе Р; (а)24= — 18,2 .Ю (c=l g I; диметилформамид) .

N -Бз-Лей-Apr(NO>)-1-нитро-2-Ha (XV г).

Исходные вещества 680 мг („0,88 ммоль)

XV в и 260 мг (1,15 ммоль) бензойного апгидрида.

Метод синтеза описан в примере 2, А.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле.

Выход 480 мг (73%) аморфного XV г, гомогенность по ТСХ в системе Р; (а) „ = — 34,4 о (с=6 9 диметилформамид) .

Nt -Бз-Лей-Лей-.Арг-. l-нитро-2-Ha HCI (XV).

Исходное вещество 74 мг (0,1 ммоль) ХЧ г.

Метод синтеза описан в примере 1, Очистка. Гелевая хроматография .на Сефадексе G-15 в 33%-ной уксусной кислоте.

Выход 47 мг (66%) лиофилизованного аморфного 35/; содержание хлора 4.94%, гомогенность по TCX в системе А; (а). = -33,6

22 о (c=0,74, 50%- ная уксусная кислота) .

Аминокислотный анализ показал соотношение Лей 2,0; Арг 0,9.

П р и и е р 16. N -Бз-Лей-Лей-Арг-4-нитро-1-На HCI (ХЧО. Кбо-Арг (NO )-4-нитро- I-Ha.

Исходные вещества 3,6 г (10 ммоль)

Кбо-Арг(NO2)-OH и 2,26 мг (12 ммоль) 4-йитро- l-нафтиламина.

Метод синтеза описан в нримере !4, А, Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле.

Выход 2,9 г (55%) аморфного 2QV, гомогенность по ТСХ в системе Р; (а). = — 11,4 (се!,01, диметилформамид), Кбо-Лей-Арг (NO ) -4-нитро- l-На (XV(б) .

Исходные вещества 650 мг (1,23 ммсль)

)Я1 а и 560 мг (1,45 ммоль) Кбо-Лсй-ОргНф.

Метод синтеза описан в примере 1, Б, Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле.

Выход 520 мг (66%) аморфного XV) б, гомогенность но TCX в системе P и В; ja)

22

= — I,8 (с=0,2, диметилформамид) .

Кбо-Лей-Лей-Apr(NO>)-4-нитро-1-На (ХЧ1 в).

Исходные вещества 520 мг (0,8 ммоль)

Х Ц б и 375 мг (0,87 ммоль) Кбо-Лей-Оп1lф.

Метод синтеза описан ы примере 1, Б.

Очистгка. Гелевая хроматог рафия на Ссфаггексе LH- 0 в метаноле.

671721

Выход 378 мг (64%) частично кристалличес кого ХЧ) в; гомогенность по ТСХ в системе

Р; (а) * — 18,0 (с =1,0, диметилформамид) . ! чу- !аз-Лей- Лей- Арг (НОт ) -4- нитро-1-На (X71 г) .

Исходные вещества 150 мг (0,2 ммоль)

XVI в и 57 мг (0,25 ммоль) бензойного ангидрида.

Метод синтеза описан в примере 2, А.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле.

Выход 120 мг (83%) аморфного Х71 r; гомогенность по ТСХ в системе Р; (а)11 30,9

Гз о (с=0 95; диметилформамид) .

N -Бз-Лей-Лей-Арг-4-нитро-1-На НС1 (Ql) .

Исходное вещество 120 мг (0,165 ммоль) 3Й) r, Методсинтеза описан в примере 1, Очистка, Гелевая хроматография на Сефадексе 6-15 в 33%-ной уксусной кислоте.

Выход 48 мг (42%) лиофилизованного аморфного XVI; содержание хлора 4,95%, гомогенность по ТСХ в системе А; ta) =36,0 (сЯ,71, 50%-ная уксусная кислота).

Аминокислотный анализ показал соотношение Лей 2,0 Apl. 0,9.

Пример 17. И -Ба-Лей-Лей-Лиз има>HCl (2М1).

А. N+Box-Лид-ф-Кво)-пНа (XVlf a), Х

К раствору 6,3 г (11,2 ммоль) N -Бок. -Лиэ- Я=Кбо)-ОН дициклогексиламина в 40 мл сухого. свежеперегнанного И, N, N, N> N N-гекса(Ф/ и ф )) метилфосфортриамид при комнатной температуре добавляют 5 г (30,5 моль)) и-нитрофенилизоцианата нри перемешиванни в сухих условиi ях. Реакционную массу выдерживают при ком-i натной температуре, затем обрабатывают как в примере 1, Р.

Нерастворившуюся часть, состоящую иэ !

N, N- бис-п-нитрофенилкарбамида отфильтровывают, фнльтрат чистят гелевой хроматографией на колонке с Сефадексом LH-20 в равновесии с метанолом.

Выход 4,17 г (74,5%) частично кристаллического ХЩ а, гомогенность по ТСХ в системе

Р; )а@! .+1,70 (с"1,0, диметилформамид).

Б. Й Бок-Лей-Лиз-(ф Кбо)-пНа (XVll б).

2,20 г (4,4 ммоль) XVJ1 а растворяют в 10

10 мл свежеперегнанной трифторуксусной кислоты в безводных условиях. Реакционную смесь перемешивают 1 ч при комнатной температуре, затем медленно выливают в 150 мл сухого сильно перемешиваемого эфира, после охлаждения вьшадает в осадок СЕзСООН Н-Лиз-(ф

° Кбо)-пНа. Эфирный раствор декантируют,, 4 аморфный осадок обрабатывают эфиром (Зх х75 мм). После сушки в вакууме иад Р О н

Na0H, выход трнфторуксусной соли аминокис азотного производного количественный (2,25 r), Раствор 2,25 г (4,4 ммоль) CF,COOH Н-Лиз-(ф-Кбо)-пНа в 10 мл диметилформамида охлаждают до — 10 С и к нему добавляют

0,78 мл (5,5 моль) триэтиламина для выделения аминокислотной соли. Добавляют 2,4 г (6 5 ммоль) Бок-Лей-ОпНф и:температуру . раствора поднимают до комнатной. Через 3 ч раствор вновь охлаждают до — 10ОC и буферируют 0,31 мл (2,2 ммоль) триэтиламина. БуферигО роваиие повторяют еше раз через 2-3 ч. Через

24 ч раствор. упаривают при 40 С в вакууме досуха, Остаток обрабатывают дистиллированной водой (3 х 20 ммл), затем сушат в вакууме.

Сырой сухой остаток растворяют в метаноле !

% и чистят гелевой хроматографией на колонке с Сефадексом LH-20 в равновесии с метанолом

Выход 1,70 г (70%) аморфного XV11 б, гомогенность по TCX в системах Р и В; )а), =

+4,9 с1,1; диметилформамид) .

26 В. и -Бок-Лей-Лей-Лиз-(6 -Кбо)-пНа (ф1в).

Исходные вещества 950 мг (1,55 ммоль)

3(УП б и !,16 мг (3,1 ммоль) Бок-Лей-ОпНф.

Метод синтеза описан в примере 17, Б.

Очистка. Гелевая хроматография на СефадекИ се LH-20 в метаноле.

Выход 985 мг (88%) аморфного ХЧП в, гомогенность по ТСХ в системе Р; (a) = — 22,0О (с =9.,0; риметилформамид) .

Г. N -Бз-Лей-Лей-Лиз- (Б -Кбо)-пНа.

Исходные вещества 1,25 г (1,4 ммоль)

ХЦ) в и 384 мг (1,7 ммоль) бензойного ангидрида.

Метод синтеза. Декарбобутилоксилирование

ХЧЯ ведут в условиях, описанных в примере 17, Б. Раствор сухого СР СООН И.Лей-Лей-Лиз-($-Кбо)-пНа в 20 мл диметилформамида охлаждают до -!AC затем добавляют 200 мл (1,45 ммоль) триэтиламина для выделения амина пептида иэ его соли. В раствор при — 10 С

46 вводят 384 мг (1,7 ммоль) бенэойного ангидрида, после чего буферирование и обработку осуществляют, как описано в примере 17, Б, Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе LH-20 в метаноле.

4> Выход 920 мг (90%) частично кристаллического XVB г; гомогенность по ТСХ в системах

Р и В; (аЯа -5 95е (с 1,02; диметилформамид) .

Л, и -Бз-Лей-Лей-Лиз-пНа НС1 (ХЧ1).

М

Исходное вещество 300 мт (041 смоль) Щ) г.

Метод синтеза описан в примере 1.

Очистка. Гелевая хроматография на Сефадексе 6-15 в 33%-ной уксусной кислоте. . Выход 170 мг (66%) лиофилизованного аморфного X7ll; содержание хлора 5,51%; гомогенность по ТСХ в системе А; )а) — 50,5О (сях1,62; 5№-ная уксусная кислота).

671721

18

Аминокислотный анализ показал соотношение Лей 2,0; Лиз 0,35.

Пример 18. N -Бз-Фе-Вал-Арг

-nHa HC1 (XV711).

А. Кбо-Арг(ИОД-пНа (Х1/Ш а), 1),К раствору 35,3 r (0,1 моль) сухого

КбоАрг (NO )-0H в 200 мл сухого свежепере(If u гнанного N, И, И, N1И,И -гексаметилфосфортриамида при комнатной температуре при перемешивании добавляют 10,1 г (0,1 моль) триэтиламина н 24,6 r (0,15 моль) паранитрофенил- . изоцианата без доступа влаги. После 24-часовой выдержки при комнатной температуре реакционную смесь выливают в 2 л 2%-ного раствора бикарбоната натрия при перемешивании. Выпавший осадок отфильтровывают, трижды промывают 0,5 л 2%-ного раствора бикарбоната

;натрия, дважды 0,2 л,дистиллированной воды, затем дважды 05 л 0,5 н. соляной кислоты и пять раз 0,2 л дистиллированной воды, Высушенный неочищенный продукт экстрагируют теплым (нагретым) метанолом, при этом растворяется целевой продукт и некоторое количество побочных. Нерастворимый остаток, сос( тоящий из N, N -биспаранитрофенилкарбамида отфильтровывают, фильтрат очищают, пропуская через колонку с Сефадексом LH-20, набухшим в метаноле.

Получают 29,8 г (63% XV а), т.пл. 185—

188 С однородный продукт по данным тонкослойной хроматографии в системах P и В, (еф= — 1,3 (сз1,1; уксусная кислота).

2) Растворяют 35,3 г (0,1 моль) сухого.

Кбо- Арг(ИО )-ОН в 600 мл смеси тетрагидрофурандиметилформамид (1:1). Вносят 10,1 г (0,1 моль) триэтиламина, после чего раствор охлаждают до — 100C и абсолютно сухих условиях.

Затем в охлажденную смесь в течение 10 мии по каплям приливают раствор 13,7 r (0,1 моль) изобутилхлорформиата в 50 мл тет. рагидрофурана, затем через десятиминутный интервал вносят 16,4 г (0,1 моль) паранитроаиилина. Температуру реакционной массы поднимают до комнатной, раствор оставляют при этой температуре на 24 ч, Затем растворитель отгоняют в вакууме, остаток обрабатывают по

3-5 раэ дистиллированной водой, 5%-ным раствором бикарбоната натрия, опять дистиллиро ванной водой после чего остаток сушат в вакууме.

Очистка. Двойная перекристаллизация из метанола. Маточник фильтруют через Сефадекс

LH-20 в метаноле. Получают 23 r (48,5%) соединения а с теми же физическими свойствами, что и в предыдущем примере.

3) Раствор 35,3 г (0,1 моль) Кбо Арг(NО } -ОН в диметилформамиде охлаждают до — 10ОС, вводят в него 20,6 r (0,1 моль) дициклогексилкарбодиимида и 16,4 г (0,1 моль) паранитроанилина. Реакционную массу выдерживают при комнатной температуре, раствор упаривают

Я досуха и обрабатывают по 3-5 раз дистиллированной водой, 5%-ным раствором бикарбоната натрия, дистиллированной водой, 0,5 н.соляной кислотой и вновь дистиллированной водой.

Остаток сушат в вакууме.

10 Очистка. Гель-фильтрация через Сефадекс

LH.-20 в метаноле.

Получают 14,7 г (34%) соединения Га; т.пл. 186 — 188 С, гомогенного в соответствии с тонкослойной хроматографией в системах Р

13 и С; (а} 14= — 1,38о (c 1,0; уксусная кислота), Б. Кбо-Вал-Арг(ИО )-пНа (Х И б).

К 20,6 r (43,5 ммоль) соединения XVI a добавляют 110 мл уксусной кислоты и 110 мл

4.н. бромистого водорода в уксусной кислоте

20 в отсутствии влаги. Смесь перемешивают 1 ч при комнатной температуре, после чего ее мед. ленно вливают в 750 мл сухого эфира при энергичном перемешивании, в осадок выпадает

1,5 НВг. Н АРг(ИО )-пНа. Эфирную фазу де25 кантируют, осадок четыре раза промывают

250 мл сухого эфира для удаления образовавшегося бензилбромида, избытка бромистого водорода и уксусной кислоты. После сушки в вакууме над пятиокисью фосфора получают бро39 мид производного аминокислоты с количественным выходом (20, r).

Раствор 20 г (3,5 ммоль) 1,5 HBr Н—

-Арг(ИО,)-лНа в 150 мл в диметилформамиде охлаждают до -10 С, Затем в него вносят 6,60 г

35 (65,2 ммоль) триэтиламина для выделения н Apr (NO )-nHa из ее гидробромида. Отфильтровывают образовавшийся бромгидрат триэтиламина и в фильтрат, охлажденный до — 10 С вносят 20,3 г (54,3 ммоль) Кбо-Вал-и-нитро40 фенокси. Через несколько часов, нагретый до комнатной температуры реакционный раствор вновь охлаждают и буферируют 2,2 г (21,7 смоль) триэтиламина. Буферироваиие повторяют через каждые 3 ч. Спустя 24 ч реакции

43 смесь сушат при 40 С в вакууме. Остаток обрабатывают трижды 100 мл дистиллированной воды, после чего сушат в вакууме.

Очистка, При двойной перекристаллизации неочищенного вещества иэ метанола. получают

12,4 r (50%) чистого вещества. Маточ ик очищают фильтрацией через гель в колонке c Ceфадексом LH-20 набухшим в метаноле. Иэ элюата отбирают фракцию, дающую еще 10,8 г чистого вещества.

В. Кбо-Фе-Вал-Арг (NO )-лНа (XVJJ1 в).

Исходное вещество 28,6 r (50 ммоль)

Я б и 31,5 г (75 ммоль) Сво-фс-нитрофенокси.

671721

Метод синтеза такои же, как в примере 18,Б.

Очистка. Тройная перекристаллизапия неочищенного вещества из метанола дает 14,4 г чистого продукта однородного по данным тонкослойной хроматографию в системе P. Маточц очищают фильтрацией через Сефадекс LH-20 в метаноле, получают еще 19,6 г чистого вещества однородного по данным тонкослойной хроматографии s системе P.

Итого 34 г (94,4%) 1 в; т.пл. 219,5 — 222 С, гомогенного по данным тонкослойной хроматографии в системе P и (а),й = — 17,1 (ст1,0; диметилформамид — уксусная кислота 99:! ) .

Г, N -Бз-Фе-Вал-APr(NO,)-Оме (Я1) г).

Исходные вещества 30,7 r (50 ммоль)

Кбо-Фе-Вал-Apr(NO>)-Оме и 16,0 г (75 ммоль) бензойного ангидрида.

Метод синтеза. Лекарбобензооксилирование

Кбо-Фе-Вал- Арг(МОг)-Оме осуществляют, как описано в примере 18, Б.

Раствор 30 г (50 ммоль) 1,5 НВг-Н-фе-Вал-Apr (NO>)-метилокси в 350 мл диметнлформамида охлаждают до — 10 С, затем. вноо сят 7,6 г (75 ммоль) триэтиламина. Раствор перемешивают 1 ч в безводных условиях, после чего отфильтровывают образовавшийся гид. робромнд триэтиламина. Фильтрат охлаждают до — 10 С и приливают к нему 16 r (75.ммоль) бензойного ангидрида. Реакционную массу выдерживают 3 ч. при комнатной температуре, вновь охлаждают и буферируют 2,5 г (25 ммоль) триэтиламина. Операцию буферирования повторяют каждые 3 ч. Реакция протекает в общей сложности в течение 24 ч. Затем раствор упаривают в вакууме, Остаток обрабатывают и сушат, как описано в примере 18, Б

Очистка. Фильтрацией через Сефадекс LH-20 в метаноле, Получают 26 г (88,9%) соединения ХЯП в, т.пл. 138 — 141 С, гомогенного в соответствии с тонкослойной хроматографией в системе Pl и (a) = — 39,8 (с а1; метанол) .

3. N -Бз-Фе-Ban Apr(NO,)-ОН (30 1@ r).

) аствор 11,7 r (20 ммоль) соединения

X+Vll г в 200 мл 50%-ного этанола приливают к 200 мл lн. раствору КОН в 95% этаноле и перемешивают в течение 75 минут при комнатной температуре, пропуская через раствор СОг, пока рН не достигнет 7.

Раствор упаривают в вакууме до 25 мл, затем разбавляют водой до 500 мл. Раствор четырежды экстрагируют этилацетатом, затем водную фазу подкисляют lн, соляной кислотой до рН 2,8.

Выпавшую при этом в осадок бенэоилтрипеп1 тндную кислоту, отфильтровывают и несколько

3! ч ааз промывают дистиллированной водой. Вещество сушат в вакууме.

Очистка. Двойная перекристаллизацня из метанола, Маточник очищают фильтрацией через

Сефадекс 1Н-20 в метаноле, Получают 10,1 г (88,5%) соединения 1 е в аморфном виде с эквивалентным весом 555,7 г, гомогенного в соответствии с тонкослойной хроматографией в системах А и В.

Е. N - Ьз-Фе- Вал- АРг (МОг ) -и -нитроанилил (2О1(Ц е) .

1) Исходные вещества 7,2 г (10 ммоль) соединения 1, в и 3,4 r (15 ммоль) бензойного ангидрида.

Метод синтеза аналогичен описанному в примере 1, Г.

Очист ..а. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 5,2 г (75,5%) соединения XVIJI r, т.пл. 236-2370С, гомогенного в соответствии с тонкослойной хроматографией в системах P u

C; (a) г 4 = 23о (col диметилформамид)

2) Исходный материал 5,7 г (10 ммоль) соединения XVI/(е. и 2,46 r (15 ммоль) и-нит2 рофенилизоаДната. Метод синтеза в соответствии с описанным в примере 18, А 1). Очистка. Фильрация через Сефадекс LH-20 в метаноле, Получают 5,3 r, (75,5%) соединения )ЩИ е

36 с т.пл, 235-237 С, гомогенного в соответствии с тонкослойной хроматографией в системах P и Д; (а))4= 23 50 (с-1, диметилформамид) .

Ж. N -Бз-Фе-Вал-(Apr--и-нитроанилид)6

-HCt (ЗИШж).

3% В реактор Сакакибара эа эужают 345 мг (0,5 ммоль) соединения ф7И(е и конденсиру. ют в нем 5 мл сухого фтористого водорода.

Реакционную смесь перемешивают 1 час при

0 С при этом отщепляется нитрогрулпа, защи40 щающая гаунидиновую группу (функцию), Фтористый водород отгоняют в вакууме, сухой остаток растворяют в диметилформамиде. ,Для, перевода фтористоводородного производного пептида в его гидрохлорид в диметил4 формамидный раствор вносят 0,25 мл концентрированной соляной кислоты, Раствор упаривают досуха в вакууме. Операцию конверсии повторяют. Остаток растворяют в 33%-ной уксусной кислоте. Получают 375 мг (80,7%) соединення )Я))1 после лиофилизации в виде аморфного порошка с 5,12%-ным содержанием хлора, гомогенного в соответствии с тонкослойной хроматографией;.в системе А; (а@э= — 43,50 (с=0,69; 50%-ная уксусная кислота).

Я Анализ аминокислот. Валин 1,0; фенилаланнн 1,2; аргинин 0,99.

Пример 19. N -3-фенилц)эопионил-Фе-Вал-Apt n-нитроанилид HCl (ХД(.).

67272!

22

2о

Получают 69,5 мг (45%) аморфного соедине® ния 3ЯЦ а, гомогенного в соответствии с тон кослойной хроматографией в системе Р; (а), з

= -26,1 (с=0,69; диметилформамид).

Б. и- Ме- B z- Фс-Вал-Арг;п-нитроанилид НС! (XXI I б) .

Исходный материал 68,98 мг (00965 ммоль)

8, соединения ХЕЦ а.

Метод синтеза. В соответствии с примером 18, N+-3-фенилпропинил-Фе-Вал Арг (NO ) -метил- окси (QX а).

Исходные соединенйя 307 r (50 моль)

Кбо-Фе-Вал-Apr(NO )-метилокси и 16,3 г (60 ммоль) З-феыилпропионил-п-нитрофенокси.

Метод синтеза. В соответствии с примером

18, Б.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле. Получают 25,2 г (82,5%) соединения Х2 а, гомогенного в соответствии с тонкослойной хроматографией в системах P и В.

N -3-Фенилпропионил-Фе-Вал-Apr(NO )-ОН (Х1Хб).

Исходный материал 7,1 r (!1,5 ммоль) соединения X)X a.

Метод синтеза. В соответствии с описанным в примере !8.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле. Получают 6,5 г (93%) соединения

XJX б с эквивалентным весом 584,1 г гомогенного в соответствии с тонкослойной хрома24 тографией в системах А и В; (а)т = — 9,3" (cà2,0, метанол) .

N -З-Фенилпропионил-Фе-Вал-,Apr(NOg)-и-нитроанилид (ХЦС в) .

Исходный материал 3 r (6 ммоль) соединения Хй.б и 1,23 г (7,5 ммоль) и-нитрофенилизоцианата.

Метод синтеза. В соответствии с описанным . в примере 18, А, 1).

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле. Получают 2,65 r (66,3%) соединения МХ в, гомогенного в соответствии с тонкослойной хроматографией в системс P.

N -3-Фенилпропионил-Фе-Вал-Арг-п-нитроанилидаНС! (XIX).

Исходный материал 179 (0,25 ммоль) соединения 3 @ в.

Метод синтеза-в соответствии с примером 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс G-15 в 33%-ной уксусной кислоте. Получают 45 мг (2о,5%) соединения после лиофильной сушки (сушки вымораживанием) в аморфном виде, с 4,91%-ным содержанием хло.12а, гомогенного в соответствии с тонкослой23 ной хроматографией в системе А; (а) =

= — 36,7 (cs0,71; в 50%-ной уксуснои кислоте), Анализ аминокислот: Валин 1,0; фенилаланин l,l; аргинии 0,99.

Пример 20. Н-Фе-Вал-Арг п-нитроанилид-2 HCI (ГХ),.

Исходн2ий материал 198 мг (0,28 ммоль) соединения ХЙП в.

Метод синтеза. В соответствии с примером 1

Очистка. Фильтрация через Сефадекс G-25, в 50%-ной уксусной кислоте. Получают 170 мг и (6! М) аморфного лиофилизованно о соедине ния Ша с 11,37%-ным содержанием хлора. гомогенного в соответствии с тонкослойной хро23 и 20 матографией в системе А (а) = —.6,3О (c=0,61; 50%-ная уксусная кислота).

Анализ аминокислот: Валин 2,0; фенилаланин 0,95; аргинил 1,0.

Пример 21. Н-Фе-Вал-Арг-и-нитроанилидр 2НС! (®), сии

А. Кбо-Фе-Вал- Арг(МО ) -и-нитроанилид (ХХ(а) .

Исходные материалы 335 мг (0,46 ммоль) соединения XV!IC в и 317 мг (0,75 ммоль)

Сво-Фе-п-нитрофенокси.

Метод синтеза, В соответствии с примером 18, Б.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 диметилФЧ2мамиде Получают 282 мг (70у) соединения ХХ1 а; т.пл. 201-204ОС; гомогенного в соответствии с тонкослойной хромато- . графией в системе Р; (а) а = — 1,02О (c," 0,98, диметилформамид) .

Б. Н-Фа-Ваи.Аргн.нитроанииин HCI (,ф).

Исходные материалы 92,9 мг (0,107 ммоль) соединения ХХТ а., Метод синтеза. В соответствии с примером 18, Б.

Очистка. Фильтрацией через Сефадекс G-25, в 50%-ной уксусной кислоте.

Получают 59,5 мг (73,1%) аморфного лиофилизованного соединения )Й) с 9,18/-ным содержанием хлора, гомогенного в, соответст.вин с тонкослойной хроматографией в системе А; (а) = 229,7О (с=0,76; 50%-ная уксусная кислота).

35 Анализ аминокислот: Валин 1,0; фенилаланин 2,2; аргинин 0,98.

Пример 22. п-Ме-Bz-Фе-Вал-Арг.-нитроанилид НС! (ХХП), А. и-М !.8г-Фе-Вал- Apr(NO ) -n-нитроанилид (КХ)) а):

Исходный материал 155 мг (0,216 ммоль) соединения 3фЦ в и 83,2 мг (0,324 ммоль) и"Ме-Bz-n-нитрофенокси, т.пл. 169-172ОС.

Метод синтеза. Аналогично описанному в при- мере 18.

Очистка. Фильтрацией через Сефадекс LH-20 в метаноле.

671721

24

Овтстка. Фильтрацией через Сефадекс 6-15 в 33%-ной уксусной кислоте.

Получают 44,5 г (66%) аморфного сублимациоино высушенного соединения ХХИ в 5,01%ным содержанием хлора, гомогенного в соответствии с тонкослойной хроматографией в системе А; (a) г — 40,8 (c=0,70; 50%-ная уксусная кислота) .

Анализ аминокислот: Вал 1,0; Фе 1,0;

Арг„ l 0.

А

Пример 23, И -Ацетил-Фе-Вал.Арг=

-и-нитроанилид HCI (QJU) .

А. !! -Ацетил-Фе-Вал- Арг(ЙОг) -л-нитроаничлид ()YXIll а).

Исходнь|й материал 233 мг (0,33 ммоль) соединения Хд((! в и 41 мг (0,40 ммоль) уксусного ангидрид да.

Метод синтеза. В соответствии с примером 18

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 .в метаноле.

Получают 118 мг (66%) соединения ХХЗИ а, гомогенного в соответствии с тонкослойной хроматографией в системе Р; (a) э -3,6о (c=I,16; диметилформамид) .

Б. М Ацетил-Фе-Вал-Арг ;и-нитроанилидюНС!.

Исходный материал 116 мг (0,185 ммоль) соединения Я а.

Метод синтеза в соответствии с примером 1, Г.

Очистка фильтрацией через Сефадекс G-155 в 20%-ной уксусной кислоте.

Получают 90 мг (79%) аморфного сублимационно высушенного соединения Я в

5,59%-ным содержанием хлора, гомогенного в .соответствии . с тонкослойной хроматографией в системе А; (஠— 21,(Iо (сЮ,62; 50%-ная уксусная кислота) .

Анализ аминокислот: Вал 1,0; Фе 1,2;

Арг; 1,1.

Пример 24. N -и-октаноил-Фе-Вал-Арг.п-нитроанипидв HCI Pg(V) .

А. М ти-Октаноил-Фе-Вал- АРГ(ИОг) -n-нитРоаиилид (Щ1Ч а).

Исходный материал 207 мг (0,283 ммоль) соединения )М}Ц в и 109 мг (0,41 ммоль) и-нитрофенилового эфира каприловой кисроты.

Метод ситпеза. В соответствии с примером 18, Б.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс I Н-20 в метаноле.

Получают 172 мг (84%) аморфного соединения XX)V а, гомогенного в соответствии с тоикослойной хроматографией в системе Р; (a) г з 6 6о (g 0 5 диметилфор) тамид)

В. N-и-Октаиноил-Фе-Вал- Арт и-нитроани. пид НС! (eW.

Исходный материал 1294 мг (0,182 ммоль) соединения XXJVa., Метод синтеза в соответствии с примером 18.

Очистка фильтрацией через Гефадекс G- I f, и 33%-ной уксусной кислоте.

Получают 109 мг (85%) аморфного высушенного сублимацией соединения X@V с 496%ным содержанием хлора, гомогенного согласно тонкослойной хроматографии в системе А; (a) >т = — 29,5о (с=0,7, 50%-ная уксусная кислота) .

Анализ аминокислот: Вал 1,0; Фе 10;

Арг. 0,95.

Пример 25. Й -Циклогексилкарбонил-Фе-Вал- Apr n-нитроанилидв НС! (ХУЧ) .

А. и -Циклогексилкарбонил-Фе-Вал Арг.(МО,)Э

-и-нитроанилид (Х,В а), Исходный материал 233 мг (0,33 ммоль) соединения XQ(G в и 100 мг (0,40 ммоль) и-нитронг".нилового эфира циклогексилкарбоновой. кислоты.

Метод синтеза аналогично примеру XVJll.

Очистка фильтрацией через Сефадекс LH-20 в метаноле, Получают 117 мг (50%) аморфного соединения ХИП а, гомогенного в соответствии с тонкослойной хроматографией в системе Р; (a) = — 10 9g (сз0,23 диметилформамид).

Б, (ч -Циклогексилкарбонил-Фе-Вал-Apr-и-нитроанилиде НС! (XXV) .

Исходный материал 48,02 мг (0,069 ммоль) соединения ХДЧ а.

В Метод синтеза в соответствии с примером 18, E

Очистка фильтрацией через Сефадекс G-15 в 50%-ной уксусной кислоте.

Получают 33,7 мг (81%) аморфного сублимационно высушенного соединения фЦ/ в 5,11%-ным содержанием хлора, гомогенного в соответствии с тонкослойной хроматографией в системе А; (а) гэ — 323о (са068 50% ная уксусная кислота) .

Анализ амйнокислот: Вал 1,0; Фе 1,3; Арг 1,0:.

Пример 26. N -Тос-Фе-Вал-Арг;и-нитроанилидеНС! +XVI), А, И .Тос-Фе-Вал-Арг(ИОг) -n-нитро нилид (ХХЧ(а), Исходный материал 360 мг (0,5 ммоль) сое. динения XVQI в и 180 мг (0,95 ммоль) .и-толуолсульфохлорида.

1 Метод синтеза. Раствор 360 мг соединения XVTP в в I мл уксусной кислоты и 1 мл В 5,6 й. HBr в уксусной кислоте в безводных условиях перемешивают 1 ч нри комнатной температуре. Реакционную смесь затем по кап,лям приливают в перегнанный эфир при знертэтчном перемешивании; в осадок выпадает

Я

/ . 350 мг l 5í. - HBã. Н-Фе-Вал. Арг(ЙОг ) -и-нитроаиилнда.

Эфирную фазу декантируют, осадок трижды ! пуомывают эфиром. После сушки в вакууме

671721

26

25 над пятиокисью фосфора получают гидробромид производного аминокислоты с количественным выходом. Гидробромид растворяют в 4 мл днметилформамида. Раствор охлаждают до -10оС и добавляют 75 мг (0,75 ммоль) тризтиламина для выделения Н-Фе-Вал Арг(НО,).п-нитроанилида иэ его гидробромида. Реакция длится

1 ч в безводных условиях. Отфильтровывают образовавшийся гидробромид трнэтиламина, фильтрат оставляют на 3 часа при комнатной температуре, затем охлаждают до -10 С и буо ферируют 25 мг (0,25 ммоль) триэтиламина.

Операцию буферирования проводят каждые 23 ч. Реакцию продолжают s обшей сложности

24 ч, РаствоР УпаРивают досУха пРи 40оС в

1$ вакууме. Остаток трижды обрабатывают дистиллированной водой и сушат в вакууме. Остаток растворяют в метаноле и чистят гельфильтрацией через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 135 мг (26,5%) аморфного соединения 1Й а, гомогенного в соответствии с тонкослойной хроматографией в системе Р; (аЯ

= +00 (c=?,0; диметилформамнд).

Б, И -Тос-Фе-Вал-Apr;n-,íèòðîàíèлид.нс1 (Жф.

Исходный материал 81 ?3 мг (0,11 ммоль) соединения XXVI a.

Метод синтеза в соответствии с примером 18, Очистка фильтрацией через Сефадекс 6-15

30 в 20%-ной уксусной кислоте.

Получают 63 мг (78,4%) аморфного сублимационно высушенного соединения XIV(" в

4,79%-ным содержанием хлора, гомогенного в соответствии с тонкослойной хроматографией в

Э$ системе А; (n)>)ç +Oo (с4),73; 50%-ная уксусная кислота) .

Анализ аминокислот. Вал 1,0; Фе 1,2; Арг.?,,Î.

Пример 27.

А. й-й-Амино-Бз-Фе-Вал- Арг-п-нитроЮвв 48 анилиде 2HCI (X@)II) .

Кбо-и-Амино-Бз-Фе-Вал- Apr(NO ) -n-нитроанилид (ХИН а).

Исходный материал 233 мг (0,33 ммоль) соединения МЩ в и 170 мг (0,44 ммоль) о 4$

Кбо-п-амино-Бз-п-нитрофенокси; т.пл. 169-172 С.

Метод синтеза аналогично описанному в примере 18, Очистка фильтрацией через Сефадекс 1.Í-20 в метаноле.

Получают 55 мг (20%) аморфного соедийения X. а, гомогенного в соответствии с тонкослойной хроматографией в системе Р; (а) = о

З

= -30,2 (с=0,53; диметилформамид) .

Б, 1А-Ам-Бз-Фе-Вал-Арг-и-нитроанилиде2НС1 (XXVll) .

Исходный материал 46,81 мг (0,056 ммоль) соединения ХХИь а.

Метод синтеза в соответствии с примером 18, Е.

Очистка фильтрацией через Сефадекс G-15 в 20%-ной уксусной кислоте, Получают 15 мг (37%) аморфного сублимационно высушенного соединения XXV)l в 9,42%ным содержанием хлора, гомогенного в соответствии с тонкослойной хроматографией в системе А; (а) + — 46,7 (c=0,74; 59%-ная уксусная кислота).

Анализ аминокислот Вар 1,0; Фе 1,0;

Пример 28. N 6-Аминогексаноил-Фе-Вал-Apr;n-нитроанилид а 2HCI (ф(ч()() .

А. Кбо-6-аминогексаноил-Фе-Вал-Арг (NO,)-n-нитроанилид (XXV(fl а).

Исходный материал 360 мг (0,5 ммоль) соединения ХЧЩ в и 290 мг (0,75 ммоль) и-ннтрофенилового эфира Кбо-6-аминокапроновой кислоты.

Метод синтеза аналогичен примеру 18, Б.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 398 мг (95,5%) аморфного

ХХИЦ а, гомогенного в соответствии с тонкослойной хроматографией; (аЯ = -5,70 (с -1,1. . днметилформамид) .

Б. А Аминогексаноил-Фе- Вал-и-ннтроанилндю2НС1 (XXV ?f б).

Исходный материал 300 мг (0,301 ммоль) соединения X)%(1 а.

Метод синтеза в соответствии с примером 18, Г.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс G-15 в 33%-ной уксусной кислоте.

Получают 127 мг (48%) аморфного сублнмационно высушенного соединения ф с 9,68%ным содержанием хлора, гомогенного в соответствии с тонкослойной хроматографией в системе А; (а) = -32,0 (с=0,72; 50% — ная уксусная кислота).

Анализ аминокислот: Вал 1,0; Фе 1,1; Apr.?,О.

Пример 29. H-Фе-Ле-Aprn-нитроаиилиде2НС1 (Х>ЛХ).

А. Кбо-Лей-Арг (NO ) -n-нитроани:лид (ХЯХ а), Исходнь и материал 5 r (10,6 ммоль) соединений XVIfE а и 4,92 г (12,6 ммоль) Кбо-Лей° п-нитрофенокси.

Метод синтеза в соответствии с примером 18, Б.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 6,1 г (98%) аморфного соединения

XXJX а; гомогенного в соответствии с тонкослой-. ной хроматографией в системе Р; (а) = — 33,5о .{c1,0; метанол), Б. Кбо-Фе-Лей-Apr(NO ) -и-нитроанилид (XXlX б).

Исходный материал 3,6 г (6,5 ммоль) соединения ХЩ а. 3,27 г (7,8 ммоль) Кбо-Фе-и-нитрофенокси.

Метод синтеза в соответствии с примером 18.

671721

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 2,95 r (69%) аморфного соединения )(3@C б, гомогенного, хроматография в тонком слое в системе Р; (аЯ вЂ” 6,2 5 (с- 1,0; диметилформамнд) .

В, Н-Фе-Лей. Арг и-нитроанилидю2НС1 (XKIX)

Исходный материал 124,9 мг (0,17 ммоль) соецинения ХЯХ б.

Метод синтеза в соответствии с примером 18. 10

Очистка. Фильтрация через Сефадекс G-25 в 50%-ной уксусной кислоте.

Получают 65 мг (61%) аморфного сублима- ционно высушенного соединения Х© с 11,15%ным содержанием хлора, гомогенного, хроматография в тонком слое в системе А; (а) э — 24,40 (с=0,63, 50%-ная уксусная кислота).

Анализ аминокислот: Лей 1,0; Фе 1,1; Арг.1,0.

Пример ЗО. N -Бэ-Фе-Лей-Арг:-л-нитроанилид ° HCI (ХХХ) .

А. N -Бз-Фе-Лей-Арг(М02)-л-нитроанилид (ХХХ а).

Исходнь|й материал 734 мг (1 ммоль) соединения XXIX б и 272 мг (1,2 ммоль) бензойного ангидрида.

Метод синтеза в соответствии с примером 18.

Очистка фильтрацией через Сефадекс LH-20 в этаноле.

Получают 589 мг (84%) соединения ХХХ а, т.пл. 196-197 С гомогенного, хроматография в тонком слое, в системах P и С; (а) = — 19,10 (с=1,01; диметилформамид) . . Б. N -Бз-Фе-Лей- Apron-нитроанилид НС1(ХХХб). б

3%

Исходный материал 198, 5 мг (0,282 ммоль) соединения ХХХ а.

Метод синтеза в соответствии с примером 1, Г.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс 6-25 в 50%-ной уксусной кислоте.

Получают 188 мг (96%) аморфного сублима46 ционно высушенного соединения ХХХ, с 4,96%ным содержанием хлора, гомогенного, xp(}MRToграфия в тонком слое в системе А; (а)1 =

24»

° — 38,30 (с=0,69; 50%-иая уксусная кислота) .

Анализ аминокислот: Лей 1,0; Фе 1,0; Apr.1,0.

Пример 31. Н-Фе-Изолей-Арг.п-нитроанилид 2HCI (2GQQ) .

А. Кбо-Изолей- Apr(NO2) -л-нитроанилид (ХХХ1 а) .

Исходный материал 1 r (2,1 ммоль) соединения Х7й1 а и 0,098 г (2,46 ммоль) Кбо- Изолей-п-нитрофенокси, Метод синтеза в соответствии с примером 18, Б.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20

Я, в метаноле.

Получают 1,12 г (91%) соединения ЯЧ, т.пл. 195-2020С, гомогенного, хроматография в тонком слое в системе Р; (а) 22 = +2,8" ! (ай,0; диметилформамид) .

Б. Кбо-Фе-Изолей- Apr(NO2)-и-нитроанилид (ХЙ(Т e).

Исходный материал 0,8 r (1,36 ммоль) соединения ХХМ а. 0,69 r (1,63 ммоль) Кбо-Фе-л- нитрофенокси.

Метод синтеза аналогично описанному в примере 18, Б.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 445 мг (41%) соединения КХХ1 б; .т.пл, 219-222" С гомогенного хроматография тонком слое B системе Р (а (ся1; диметилформамид) .

В. Н-Фе-Иэолей- Арг:л-нитроанилидэ H CI (Х©1 в) .

Исходный материал 166,43 мг (0,226 ммоль)

XXXI б.

Метод синтеза в соответствии с примером 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс G-25 в 50%-ной уксусной кислоте, Получают 95,3 мг (67 аморфного сублимационно высушенного Я)(1 с 11,!7%-ным содержанием хлора, гомогенного, хроматография в тонком слое в системе А; (а)2 =

= — 32 (ca0,63, 50%-ная уксусная кислота).

Анализ аминокислот: Изолей 1,0; Фе 1,1;

Арг 1,0, Пример 3 . и -Бз-Фе-Изолей-Арг<3(» и-нитроанилиде HCI (Х ХП), А. N -Бз-Фе-Изолсй-Apr(NO2) п(А

-нитроанилид (XXXll а) .

Исходный материал 250 мг (0,34 ммоль) соединения ХХХ б и 92 мг (0,4 ммоль) бензойного ангидрида.

Метод синтеза в соответствии с примером 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле..

Получают 210 мг (88%) соединения XXXII a с т.пл. 244-245 С, гомогенного в соответствии

0 с тонкослойной хроматографией в системе Р; (а)ф, — 22,3 (c=1; диметилформамид) .

Б. N -Бэ-Фе-Иэолей-АРг л- нитроид НС) (ХЯа).

Исходный материал 182,7 мг (0.26 ммоль) XXXlj a.

Метод синтеза в соответствии с примером 18.

Очисгка. Фильтрацией через Сефадекс G-25 в 50%-ной уксусной кислоте.

Получают 176,9 мг (97%) аморфного сублимационно высушенного соединения X XII с

4,98%-ным содержанием хлора, гомогенного, тонкослойная хроматография в системе А; (а ф= — 41,5 (c=0,69, 50%-ная уксусная кислота) .

Анализ аминокислот: Изолей 1,0; Фе l; Арг 1,1.

671721, 30

Пример 33. Н-Фе-Фе-Apr íèòðáанилиде 2НС) (ХЯ)П).

А. Кбо-Фе- Apr(NO2) -п-нитроанилид (XXKOT а)

Исходный материал 1 г (2,1 ммоль) соединения СЛД а и 1,06 г (2,46 ммоль) Кбо-Фе° и-нитрофенокси.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Оп»стка, Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают )Д5 г (96%) соединения XXXIII a с т.пл. 198-2040С гомогенного, тонкослойная

25 + 0 хроматография в системе Р, (а) = +4, (c=1,0; диметилформамид) .

Б, Кбо-Фе-Фе- Арг (NO2)-и- нитроанилид (ХХХИ) б).

Исходный материал 0,9 г (1,450 ммоль) соединения XXXIII а и 0,737 r (1,74 ммоль)

Кбо-Фе-и-нитрофенокси.

Метод синтеза аналогичен примеру 18, Б.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 635 мг (58%) соединения ХХХИ)б с т.пл. 201-203 С гомогенного, тонкослойная хроматография в системе Р; (а) . = 23 (с сз 1,0; диметилформамид) .

В. Н-Фе-Фе-Арг-и-нитроанилид 2НС! (ХХХИI).

Исходный материал 196,ф мг (0,257 ммоль) XXX I I I б.

Метод синтеза аналогично примеру 18;

Очистка, Фильтрация через Сефадекс G-25 в 50%-ной уксусной кислоте.

Получают 75,8 мг (46%) аморфного сублимационно высушенного соединения XXXIII c ,10,65%-ным содержанием хлора, гомогенного, хроматография в тонком слое в системе А; (а} Я= — 6,7 (c=0,65, 50%-ная уксусная кислота).

Анализ аминокислот: Фе 2,0; Ар» 1,1.

Пример 34ЛЧ » -Бз-Фе-Фе-Арг п.

-нитроанилиде НСI (XX IV), N - Бз-Фе-Фе-APr (NO2) -n-нитроанилид (ХХХ1Ч a).

Исходный материал 250 MI (0,325 ммоль)

ХХХIИ и 90.мг (0,312 ммоль) бензойного ангидрида.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 220 мг (92%) аморфного соединения XVII а, гомогенного. хроматография в тонком слое в системе Р; (а)2 = Зб,б (c=0,95; димстилформамид) .

N Бз-Фе-Фе-Apr;n-нитроанилидвНС! (X IV б)

Исходный материал 114,6 мг (0,156 ммоль)

XXXIV a.

Метод синтеза аналогичен примеру 18, Очистка. Фильтрация через Сефадекс G-25 в 50%-ной уксусной кислоте.

Получают 774 мг (68%) аморфного субли мационно высушенного XII с 4,8Я-ным содержанием хлора, гомогенного, хроматография в

24 0 тонком слое в системе А; (а) = — 25,5 (cd,72; 5ОЛ.-ная уксусная кислота) .

Анализ аминокислот: Фе 2,0; АРг 0,97.

Пример 35. H-Л-Фе-Вал-Арг-п-нитроанилид. 2HCI (ХХ Ч) .

Кбо-Л-Фе-Вал- Арг(МО2) -и-нитро-!

О анилид (ХХХЧ а).

Исходный материал 480 мг (0,83 ммоль) соединения I б и 530 мг (1,25 ммоль) Кбо-Л-Фе-и-нитрофенокси с т.пл. 126,2-126,6" С; (а ф 4 + 2 4 7 5 0 (c «) 0 . д и м е т ил ф о р м а м и д )

Метод синтеза аналогично примеру 1, Б.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 587 мг (98%) аморфного ХХХ Ч а, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе

20 Р; (а) д2 = +18,90 (c=2,0; диметилформамид) .

Н-Д-Фе-В«л-Apr-n-нитроанилил, 2 НС) (ХХ Ч б) .

Исходный материал 153,8 мг (0,212 ммоль) соединения ХХЯЧ а.

Метод синтеза в соответствии с примером 17..

25 Очистка. Фильтрация через Сефадекс G-15 в 20%-ной уксусной кислоте.

Получают 36,3 мг (28%) аморфного сублимационно высушенного ХХХЧ с 1),34Л-ным солержаниеМ хлора, гомогенного в соответствии с

TCX в системе А; (а) )з 70,30 (сЮ,61; 50%ная уксусная кислота).

Анализ аминокислот: Вал 1,0; Фе 1,0; Apr 1,0, Пример 36, N -Бз-Л-Фе-Вал-Apr u-.

-нитроанилид ° НС! (Х)ДЧ)) .

N - Бз-Л-Фе-Вал-Арг (NO2)-и-нитроd анилид (Х Х Х V а) .

Исходный материал 244 мг (0,34 ммоль)

ХХХЧ а и 92 мг (041 ммоль) бензойного «нгидрида.

Метод синтеза в соответствии с примером 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 181 г (77%) ХХХЧ! а с т.пл, 211215"С, гомогенного в соответствии с ТСХ в

45 системе Р; (а) 2 з = — 1,360 (с0,8; диметилформамид) . и - Бз-Д-Фе-Barr- Арг п-нитроанилид HCI (XXXVI).

Исходный материал 128,3 мг (0,186 ммоль)

X XV I a.

Синтез в соответствии с примером 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс G-25 в 5, -ной уксусной кислоте, Получают. 103,8 мг (8)%) аморфного сублимационно высушенного XVIII с 5,15%-ным содержа»нюм хлора, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе А; (а)2, = — 36,9 (с0,68; 507-ная уксусная кислота) .

671721

Анализ аминокислот: Вал 1,0; Фе 0,9; Арг 0,9

П р и и е р 37. Н-Тир-Вал- Арг-п-нитроаннлид. HCI (XXFVI I), Кбо-Тир- (ОБз) -Вал-Арг (NO )- п-нитроанилид (ХХ (Ч!! а).

Исходный материал 480 мг ХЧ(!! б (0,83 ммоль) и 660 мг (1,25 ммоль) Кбо-Тир- (ОБз).п-нитрофенокси с т.пл. 147,5—

149оС; (а) г - — 8,5о (с,О; диметилформамид)

Метод синтеза в соответствии с примером 18, Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле, Иолу ают 460 мг (65%) аморфного соединения XXXYII а, гомогенного в соответствии с

ТСХ в системе Р; (a)> = — 9,66о (cë1,0; диметилформамид) .

H-Тир-Вал-Арг нитроанилид.HCI (XX+VI I б) .

Исхоцный матепиая 144,7 r, (0,169 ммоль) XXXVII a.

Метод синтеза в соответствии с примером 18, Б.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс G-15 в уксусной кислоте, Получают 65,4 мг {ба аморфного сублимационно высушенного XXIX с 11,20%-ным содержанием хлора, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе А; (a)>з — 29,8о (се0,63;

50%-иая уксусная кислота).

Анализ аминокислот: Вал 1,0; Тир 1,2; Арг I,О

Пример 38. М -Бз-Тир-Вал-.AP(ek. .-n-нитроанилид. НС! (XXXVIII) .

Бз-Тир-Вал-Арг(ИО) ) -n-нитроанилид.

Исходный материал 246 мг (0,287 ммоль)

ХХХЧИ а и 65 мг (0,29 ммоль) бензойного ангидрида.

Метод синтеза аналогично примеру 18, Г.

Бензольная группа, защищающая тирозин-.ОН отщепляется до некоторой степени в процессе обработки бромистым водородом. Выход поэтому ниже и продукт состоит из соединения.

ХХХЧ!П а и N -Бз-Тир-(ОБз)-Вал-Арг(МОг)-и-нитраанилнда.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле, Получают 193 мг (81%) аморфного вещества, содержащего два вещества в соответствии с ТСХ в системе Р.

4 !

N - Бз-Тнр-Вал-Арг и-нитро° анилидНС! (XXXVI I I) .

Исходный материал 138,9 мг М -Бз-Тир- (ОБз) -Вал-Арг.(МОг) и нитроаннлида

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс G-15 в 50%-ной уксусной кислоте;

Получают 75,4 r аморфного сублнмационно высушенного XXXVIII с 5,3%-ным содержанием хлора, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе А; (аЯ 34,7 (с=0,7; 50%-ная уксусная кислота) .

Анализ. аминокислот Вал 1,0; Тир 1,2; АР Л,o.

Ю

ТСХ в системе А (a)ãç= — 320о (с=035

50 — ная уксусная кислота) ..

Анализ аминокислот: Вал 1,0; Фе 1,1; Apr.l,0.

Пример 41. 4-Аминоб ирил-ФеВал- Арпп-нитроанилидю 2НС! (ХХЛ ) .

Кбо-4- аминоб тирил-Фе- Вал-Арг (ИОг) -пнитроанилид (Х.Ы а) .

Исходный материал 234 мг (0,65 ммоль)

Кбо-4-аминобутирил-п-нитрофенокси и 360 мг (0,5 ммоль) )QQII в.

Пример 39, М 4-Аминоэтилциклоi ексилкарбонил. Фе- Вал- Арг- и-нитроанилид. 2НС!.

Кбо-4-Амииоэтилциклогексилкарбонил-Фе-Вал-Apr.n-нитроанилид (XXXIX а).

Исходный материал,268 мг (0,65 ммоль)

Кбо-4-аминоэтилциклогексакарбонил-и-нитрофенокси и 360 мг (0,5 ммоль) XVIII.

Метод синтеза соответственно примеру 18, Г, Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 !

6 в метаноле. t

Получают 265 мг (62%) аморфного ХХ1! а, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе

Р; (а) >2 = -8,50 (сЖ,5 1; диметилформамид) .

N -4-Аминоэтилциклогексилкарбонил-Фе13 -Вал-Арг-и-нитроанилидв2НС! (XIIX б) .

Исходный материал 137 мг (0,16 ммоль) XXXIX a.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс G-15

20 в 33%-ной уксусной кислоте.

Получают 82,2 мг (68,5%) аморфного суб лимационного высушенного X)QQX с 9,37%ным содержанием хлора, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе А; (а) г = — 35,2 (с 0,73, 50 -нан уксусная кислота).

Анализ аминокислот: Вал 1,0; Фе 1,1; Арг 1,0, Пример 40. N -2-1Ьклогексилацетилd

Фе- Вал- Арг п- нитроанилид «НС! (Х,1. ) .

N -2-Циклогекснлацетил-Фе-Вал-Арг(МОг)З!! -n-нитроанилид (XI a), Исходный материал 197 мг (0,75 ммоль) циклогексилацетип-и-нитрофенокси и 331 мг (0,46 ммоль) соединения ХЧЦ! в.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 ,в метаноле.

Получают 205 мг (63%) аморфного /La, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе

Р; (а)тг,г= — 5,0 (сс0,5; диметилформамид), N - 2- Циклогексилацетил-Фе-Вал-Арг-и э

:нитроанилид» НС! (X1 б) .

Исходный матеоиал, 173 мг (0,244 ммоль) XL a.

Метод синтеза .аналогично примеру 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс G-15 в 33%-ной уксусной кислоте.

Получают 139 мг (81%) аморфного высушенного сублимацией ХХа с 5,0%-ным содержанием хлора, гомогенного в соответствии с

671721

34

5S

Метод синтеза аналогично примеру 18, Очистка. Фильтрация через Сефадекс 1.H-20 в метаноле.

Получают 297 мг.(74%) аморфного ХЦа, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе Р; (а) — 5,0" (с=0,6; диметилформамид).

4- Лминобутирил-Фе- Вал-Арг- и- нитроанилидв 2HCI (X/I ).

Исходный материал 29! мг (0,362 ммоль)

Х1 1 а.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс G-15 в ЗЗЯ-ной уксусной кислоте.

Получают 167 мг (66%) аморфного, сублимапионно высушенного XLI с 10,05%.ным содержанием хлора, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе А: (а) 1 = -35,3

Ic ),72; 50/.-ная уксусная кислота).

Анализ аминокислот: Вал 1,0; Фе 1,0; Арг.1,1.

Пример 42. 2-(4-Аминофенил)-ацетил-Фе-Вал- Арг-п-нитроанилид. 2HCI (ХЫ), 2- (4- Кбо- А минофенил) - ацетил- Фе- Вал-Арг(NO>)-и-нитроанилид (Xgj) а).

Исходный материал 200 мг (0,278 ммоль)

XVill в и 152 мг (0,37! ммоль) 2-(4-аминофе пил) - ацетил-и- нитрофенокси.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 201 мг (85%) аморфного Х) Я)а, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе

Р; (a)> = — 4,3 (с=0,5; диметилформамид) .

2- (4-Аминофенил) -ацетил-Фе-Вал-Арг-и-нитроаиилид 2HCI (Х3чН б) .

Исходный материал 97,5 мг (0,114 ммоль) ХЦ(а.

Метод синтеза, аналогично примеру 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс G-15 в ЗЗЯ.-ной уксусной кислоте.

Получают.43,5 мг (51,4 аморфного сублимационно высушенного ХЬП, с 9,47%-ным содержанием хлора, гомогенного в соответст- . вии с ТСХ в системе А; (а)" = -ЗЗО (с=0,75; 50%-ная уксусная кислота), Аминокислотный анализ: Вал 1,0; Фе 1,1;

Apr.1,1, Пример 43. N -Бз-Фе-Гли-Вал-Apr.-и-иитроанилид. HCI (ХЯЦ ), Кбо-С-Фе- Гли-Вал- А рг(!чО )- n- нитроанилид (Х Ll)I а) .

Исходный материал 230 мг (0,568 ммоль)

Кбо-С-Фе-Гли-п-нитрофенокси и 250 мг (0,437 ммоль) XVIII б.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

$ !

О

f$

3$

4$

Получают 292 мг (95%) аморфного ХЫ(!а, гомогенного в соответствии с ТГХ в системе

Р; (e)> = +8,2" (с=0,50; диметилформамид) .

N - Бз-Ф .Гли-Вал- Арг(ЙО, ) -п- нитроанилид (ХЕ Щ б).

Исходный материал 290 мг (0.41 ммоль) "

XQH а и !30 мг (0,575 ммоль) бснзойного ангидрида, Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 211 мг (76%) аморфного Х2.Иб, гомогенного в соответствии с TCX в системе

Р; (а) = +10,4 (с=О,51; диметилформамид) . ! ч -Бз-С-Фе-Гли-Вал- Арг-и-ннтроанилидгидрохлорид (ХЪП() .

Исходный материал 200 мг (0,296 ммоль) Х))И б.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс G-15 в ЗЗЯ-ной уксусной кислоте.

Получают 186 Mr (95Я) аморфного сублимационно высушенного XK1)f с 5,25" -ным содержанием хлора, гомогенного в соответствии с TCX в системе А; (а) = - 7 (c=0,67: 50%-ная уксусная кислота) .

Анализ аминокислот: Вал 1,0; С-Фе-Гли 1,2;

Арг 0,9.

Пример 44. N -Бз-Фе-Фе-Вал-Арг-n-нитроанилид HCI {ХL IV) . сь г

N -Бз-Фе-Фе-Вал- Арг NOr)-n-нитроанилид (XL 1Ч a) .

И ходный материал 141 мг (0,163 ммоль)

XXl а и 90 мг (0,4 ммоль) бензойпого ан-. гидрида.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 114 мг (847 ) аморфного XLIVa, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе

Р; (а) > = — 0,75О (c =-1,2; днметнлформамид) .

N - Бз-Фе-Фе-Вал-Арг-и-нитроанилидб, гидрохлорид (ХХ И) .

Исходный материал 71 мг (0,087 ммоль) Хл!1/ а.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Фильтрация через Гефадскс G-15 . в уксусной кислоте.

Получают 47 мг (6(Х4) аморфного сублимационно высушенного Х И с 4,2 ; .-ным содержанием хлора, гомогешгого в соответствии с ТСХ в системе А.

Анализ аминокислот: Вал 1,0: Фе 23, Арг 1,0.

Пример 45. N -Бз-!Ы .C-Фе-ГлиА

-Вал-Арг-п-нитроанилид.HCI (Х »V) .

Кбо-Дл-С-Фе-Гли-Ваi-.Арг(МС ) -и-нитроанилид (Х \/ а) .

67172)

36

Исходный материал 285 мг (0,5 ммоль) соединения ХЧ!!! б и 285 мг (0,7 ммоль)

Кбо-Дл-С-Фе- Гли-нитрофенокси с т.пл. 107108О С.

Метод синтеза аналогично примеру 18, Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 353 мг (81%) аморфного соединения XXV а, гомогенного в соответствии с

ТСХ в системе Р; и -Бз-Дл-С-Фе- ли-Вал-Арг(ИОз) udl

-нитроанилид (Х Ч 6).

Исходный материал 285 мг (0,403 ммоль)

ХЗд/ а и 181 мг (0,8 ммоль) бензойного ангидрида.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 226 мг (83%) аморфного XLV6, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе Р I

N - Б з-Дл-С-Фе- Гли-Вал- Apr. è-нитроанилидеНС! (Х.! Ч).

Исходный материал 101 мг (0,15 ммоль) соединения Х1,Ч б.

Метод синтеза в соответствии с примером 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс G-15 в уксусной кислоте, Получают 61 мт (61 ß аморфного сублимациоино высушенного XLIII с 5,21%-ным содержанием хлора, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе А.

Аминокислотный анализ: Вал 1,0; С-Фе-Глн 1,2; Арг 0,9.

Пример 46. N -Бз-Фе-Вал-Apr;

-2-нафтиламин еНС! (XLVI), Кбо-Apr(NO>) 2-нафтиламин (Х1Ч! а).

Исходный материал 3,6 r (1О ммоль) Кбо-Apr(NO>)-ОН и 1,72 г (12 ммоль) 2-нафтиламина.

Метод синтеза аналогично примеру 18,а., Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Пооучаюг 4,05 г (84%) аморфного Х Ч а, гомогенного в соответствии с ТСХ в систее Р (a) "- з =+7 4о (сл1 0; диметилформамид) .

Сво-Вал-Apr(NOq) -2-нафтиламин ()CLVI б) .

Исходный материал 1,5 г (3,1 ммоль)

XIVI а и 1,38 r(3,,7 ммоль) Кбо-Вал-tt-нйтрофенокси.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс 1;Н-20 в метаноле.

Получают 1,66 г (95%) частично кристаллического )Q,VI в, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе Р (а(Ъ22=-600 (101. диметилформамид) .

Кбо- Фе- Вал- Apr(NO ) -2- нафтмл амин (ХЪЧ в) .

Исходный материал 1,65 г (?а84 ммоль)

ХХЧ! б и 1,43 г (3,4 ммоль) К6о-Фе-и-нитрофенокси.

Метод синтеза аналогично примеру !8.

Очистка, Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 1,55 г (75%) аморфного Х3,Ч! в, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе

P; (a)g — 10,9 (c 1,01; диметилформамид .

16 N -Бэ-Фе-Вал- Арг(ЙО, ) -2-нафтиламин (XKVEr) .

Исходный материал 1,15 г (1,58 ммоль)

ХА% s и 465 мг (2,05 ммоль) бензойного ангидрида.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

13 Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 0 89 r (80,3%) частично кристаллического XLVI, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе Р; (a) о= — 31,1 (c=l,01; .13

20 диметилформамид) .

А и -Бэ-Фе-Вал- Aðr 2-нафтиламиноНС! (Х1Ч!) .

Исходный материал 620 мг (0,89 ммоль) XIaVI r.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Фи)тьграция через Сефадекс G-15 в 50%-ной уксусной кислоте.

Получают 385 мг (63%) аморфного, сублимационно высушенного X/VI с 5,12%-ным содержанием хлора, гомогенного в соответствии

® с ТСХ в системе А; (а)"= — 53,8О (сМ,71;

50 ная уксусная кислота).

Аминокислотный анализ: Вал 1,0; Фе 1,1;

Apr 1,0.

Пример 47. N -Бз-Фе-Вал-Арг.1>> -нитро-2-нафтиламин HCI (Х Vl I) .

Кбо-Арг (NO2) -1-нитро-2-нафтиламин (ХИРа) .

Исходный материал 3,6 r (10 ммоль) Кбо-Арг(NO>) -ОН и 2,26 ммоль 1-нитро-2-нафтиламина.

4П Метод синтеза аналогично примеру 18.

Оясткаа Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 3,85 г (73,1%) аморфного ХЪЧ!! а, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе

P; ja)> — 11,8" (c 1,0; диметилформамид).

Кбо-Вал-Арг(NO>) -1-нитро-2-нафтиламин (Х б).

Исходный материал 950 мг (18 ммоль) а и 825 мг (2,2 ммоль) Кбо-Вал-и-нитрофенокси.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Оыстка, Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 0,9 г (80%) частично кристаллического XKll б, гомогенного в соответствии с

ТСХ в системе Р; (a() "+1050 (c=l,0; диметилформамид) .

6717 1

Кбо-Фе-Вал- Apr(NO, ) -1-ц-"-нафтиламин (XIVII в).

Исходный материал 800 мг (1,27 ммоль)

XXVII б и 640 мг (1,52 ммоль) Кбо-Фе-п- ннтрофенокси.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка, Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 785 мг (79,9%) аморфного )QJI в, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе

Р; (а) э — 7,0О (с 1,02; диметилформамид) .

N - Бз-Фе- Вал-APr, NО, ) -1-нитро-2-нафтиламин (VII r).

И.ходный материал 680 мг (0,88 ммоль)

ХЬЧ!! б и 260 мг (1,15 ммоль) бензойного ангидрида.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Гель-фильтрация через Сефадекс

l Н-20 в метаноле.

Получают 480 мг (73%) аморфного X+VII r, гомогенного в соответствии с TCX в системе

Р; (а), - — 31,4 (с =0,9; диметилформамид) .

N -Бз-Фе-Вал-.APrl-нитро-2-нафтиламинА гидрохлорид (XLV I I) .

Исходный матепиал 480 мг (0,65 ммоль) XI/It r.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Гель-фильтрация через Сефадекс

G-15 в ЗЗЯ-ной уксусной кислоте.

Получают 268 мг (571.) аморфного сублимационно высушенного ХЯ с 4,80%-ным содержанием хлора, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе А; (а)» "- — 39,7 (с:-0,73;

50", >-ная уксусная кислота).

ll р и м е р 48. и -Бз-Фе-Вал- Apr 1*

-нитро-1-нафтиламин HCI (Х1>В11), Кбо- Apr(NO, ) -4- нитро-1- нафтиламин (X VI t t а) .

HcxGJLHbIN материал 3,6 г (10 ммоль) Кбо-Арг(NOq)-OH и 2,26 r (12 ммоль) 4-нитро- I-нафтиламина.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Гель-фильтрация через Гефадекс

LH-20 в метаноле.

Получают 3,61 r (607 ) частично кристаллического, гомогенного в соответствии с ТГХ в системе Р; (а) — 11,4 (с Ы,О1; диметилформамид) .

Кбо- Вал-Apr (NOg ) -4- нитро-1- нафтиламин (Х1.И!1 6).

Исходный материал 650 м г (1,23 ммоль)

XLI11 а и 556 мг (1,45 ммоль) Кбо-Вал-и-йитрофенокси.

Метод синтеза аналогично примеру .1, Б..

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH- . в метаноле.

И

Получают 460 мг (60%) аморфного XLVI I I б, гомогенного в соответствии с ТСХ в системс

Р; (а) 3 a!0,9 (с 0,55; диметилформамид) .

Кбо- Фе- Вал-.Арг (Nog ) -4- нитро- 1- нафтиламин (XLVIII в).

Исходт(ый материал 450 мг (0,72 ммоль)

XLVttI б и 365 мг (0,86 ммоль) Кбо-Фе-и-нитрофенокси.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле. Получают 500 мг (907) частично кристаллического с гомогенного в соответствии с ТСХ в системе Р; (а) 4 — 6,0 (су1,0; диметилформамид) .

N -Бз-Ф-Вал-Арг(NOg)-4- HMTpo-1-нафтилL амин (XIVIII в).

Исхощ ыи материал 490 мг (0,633 ммоль)

XLVItt в и 180 мг (0,80 ммоль) бензойного ангидрида.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20 в метаноле.

Получают 400 мг (84,7%) аморфного

ХРИП в, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе Р; (а) о = — 31,0 (с 2,0; диметилформамид).

М - Бз-Фе-Вал-Арг 4-нитро-1-нафтиламипгидрохлорид (ХМП1) .

Исходный материал 380 мг (0,51 ммоль) Х?,Ч111 в.

Метод синтеза аналогично примеру 18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс G-15 в 5ОЛ-ной уксусной кислоте

Получают 303 мг. (81Я) аморфного субли мационно высушенного XLVlll с 479j>-ным содержанием хлора, гомогенного в соответствии с TCX в системе А! (а) 1 =37,7 (с=0,74;

50 Л-ная уксусная кислота).

Аминокислотный анализ Вал 1,0; Фе I,1;

Арг 0,9.

Пример 49. N -Бз-Фе-Вал-Лиз-и-нитрофснокси ° HCI (ХЛ ) .

А

A. N -Бок-Лих-(эпсилон-Кбо)-и-нитроанилиц (Х1? а).

Приготовляют раствор 6,3 г (11,2 ммоль)

N - Бок-лиз- (эпсилон-Кбо) -OH-дициклогсксил* амина в 40 мл сухого свежеперсгнанного

I >>

N,. N, N, N,N, N -гексаметилфосфортриамида нрл комнатной температуре, после чего порпиями вносят 5 г (30,5 ммоль) I>-нитрофенилизоцианата при перемешивании без доступа влаги. Перемсшивание реакционной массы продолжают 24 ч при комнатной температуре, затем реакционную смесь обрабатывают как описано в примере 1, A. Побочными продуктами рс:>кции является N N-бис-и-нитрофс»ит>

<арбах!»>д и N-и-нитрофснил>тиц»>;.;: I ксил671721

39

Лиз 1,1.

Формула изобретения

Способ получения трипептидов формулы

0 0 О

I Р

R,- Ì -Х- СН- С вЂ” МН- СН- С -он- Са- С -ХНВ, 1 I 1

R 3 В ч. (c,н,1„

NR

I 5

"т — водород, фенил, алкил C,.C, или циклогексил;

Х вЂ” метилен или одинарная связь; где R, — водород, бензил, Р-циклогексил, бензоил-N-циклогексил, бенэоил

+циклогексил; карбамид, слаборастворимые в метаноле. Для очистки продукта используют фильтрацию через колонку с Сефадексом LH-20, набухшим в метаноле. Получают 4,17 г (74,5%) частично кристаллического а, гомогенного в соотвевы с ТСХ в сй еме Р Ья!=11,70 (с =1,0; диметилформамид) .

Б. N -Бок-Вал-Лиэ- (эпсилон-Кбо) -и-нитроА вюи.д <х71, а).

2,20 г (4,4 моль) соединения ХЙ а в безводных условиях добавляют 10 мл свежеперегнанной трифторуксусной кислоты, смесь перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре, затем реакционную массу выливают в 150 мл сухого эфира при энергичном перемешивании. Выпадает СэСООН-Лиэ-(эпсилон-Кбо)-и-нитроанилид в виде масла, отверждающийся при охлаждении. Эфирную .фазу декантируют, а осадок трижды обрабатывают 75 мл сухого эфира. После сушки ,,под вакуумом над едким натром и пятиокисью фосфора получают трифторацетатную соль производного лизина с количественным выходом (2,25 . г).

Эту соль (2,25 г, 4,4 ммоль) растворяют в 10 мл диметилформамида и охлаждают до — 10 С. Приливают 0,75 мл (5,5 ммоль) триэтиламина для выделения аминокислотного производного из ее соли (трифторацетатной), а затем 2 г (5,5 ммоль) Бок-Вал-п-нитрофенокси. Через несколько часов, когда реакционный раствор достигнет комнатной температуры, его охлаждают вновь и буферируют 0,31 мл (2,2 ммоль) триэтиламина. Буферирование повторяют каждые 2 ч. Через

24 ч раствор унаривают досуха в вакууме при 40 С. Остаток трижды обрабатывают

20 мл дистиллированной воды и сушат в вакууме.

Неочищенный продукт растворяют в метаноле и фильтруют через колонку с Сефадексом

LH-20, набухшим в метаноле. Из фракции полденной из элюата, получают 2,12г (80,3%)

1Д в, гомогенного в соответствии с ТСХ в системах P и В; (а) — 1,9 (с:в1,0; диметилформамид) .

Бок-Фе-Вал-Лиз- (эпсилон-Кбо) -и-нитрод (Х3в) Исходный материал 0,85 r (1,42 ммоль) I б.и 0,77 r (2 ммоль) Бок-Фе-п-нитрофенокси, Метод синтеза в соответствии с примером ®

Очистка. Фильтрация через Сефадекс LH-20

3 в метаноле.

Получают 0,84 r (79,3%) аморфного Xlk в, гомогенного в соответствии с TCX В системе

Р; fa) > - — 9,3О (с 1,02; диметилформамид) .

ФБз-Фе-Вал-Лиз- (эпсилон-Кбо)-и-нитроl0 аннлид (XIL r) .

«Исходный материал 600 мг (0,804 ммоль)

ХП4 в и 280 мг (1,25 ммоль) бенэойного ангидрида, Метод синтеза декарбобутилоксилирование

15 соединения XTL в осуществляют аналогично описанному в примере 49, Б. К раствору

608 мг СF> С0ОН.Н-Фе-Вал-Лиз- (эпсилон-Кбо)-н-нитроанилнда в 10 мл диметилформамида охлажденному до — 10 С приливают

113 мл (0,8 ммоль) триэтиламина для выделения пептидного амина из его соли. В раствор вносят 280 мл (1,25 ммоль) бенэойного ангидрида при — 10 С. Затем реакционную смесь буферируют и обрабатывают, как описано в

2 примере XIL б. 11осле фильтрации неочищенного продукта через колонку с Сефадексом

LH-20 в метаноле получают 460 мг чистого продукта, гомогенного в соответствии с ТСХ в системе Р; (а) 4 — 22,80 (c0,99; диметилформамид) .

1Ч -Бз-Фе-Вал-Лиэ-и- нитроанилид. HCI (ХЦ ф

Исходный материал 280 мг (0,373 ммоль) XIL г.

Метод синтеза аналогично примеру,18.

Очистка. Фильтрация через Сефадекс G-15 в 50%-ной уксусной кислоте.

Получают 172 мг (71% аморфного сублимационно высушенного ХЦ, с 5,39%-ным содержанием хлора, гомогенного в соответствии

40 с ТСХ в системе А; 1а — 36,2 (с-"0,67;

50%-ная уксусная кислота).

Аминокислотный анализ Вал 1,0; Фе 0,9;

671721

42.

10 вя -сн-е - Он (Ыйв

ЖН

fl Я

Составитель В.. Волкова

Редактор Л. Герасимова Техред .М.Петко Корректор Г. Назарова

Заказ 3938/61 Тираж 512 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб,, д. 4/5

Филиал ППП ".Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

R3 — прямая, разветвленная или циклическая алкильная группа Сз-Са;

Я4 — прямая, разветвленная нли циклическая алкильная группа Сз-Са, фенил или бензил;

n - "2, 3 или 4;

Йа — водоРод илн ГУаннл1 и — фенил, ннтрофеннл, нафтил, 1-нитро-2-нафтил, 4-нитро-1-нафтил, или их солей, отличающийся тем, что

N-защищенную аминокислоту общей формулы где п и Rq указаны выше, подвергают взаимодействию с соединением формулы з х,, где Х вЂ” изоцианатная группа, s гексаметилфосфортриамиде или с изобутило- вым эфиром хлормуравьиной кислоты, в тетрагидрофуране с последующим взаимодействием полученного продукта с соединением формулы з,-у, где g — аминогруппа, с образованием производного N-замешенной аминокислоты формулы

1 где Rz и Яб указаны выше, с последующим последовательным сочетанием в диметилформамиде и-нитрофеннловых эфиров оставшихся., аминокислот методом активированных эфиров, причем хромофорную группу используют в качестве защитной группы для С-конечной карбоксильной группы первой аминокислоты.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

251. Шредер Э., Любке К.-, "Пептиды™, ч. I, М., Мир", 1967, с, 116.