Установка для количественного определения эндогенных биологически активных веществ методом суперфузии

 

п, 682821

Оп ИГРАНИ Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

М АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

Е ф (б1) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 11.04.77 (21) 2472942 28-13 с присоединением заявки № (23) Приоритет (51) М. Кл."G 01N 33/16

Государственный комитет (43) Опубликовано 30.08.79. Бюллетень № 32 (53) УДК 578 (088.8) по делам изобретений и открытий (4 ) Дата опубликования описания 30.,08.79 (72) Авторы изобретения Н. В. Беляков, К. В. Логачева, Н. И. Савельев, Б. В. Семушин и В. Н. Соколов (71) Заявитель (54) УСТАНОВКА ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО

ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЭНДОГЕННЫХ БИОЛОГИЧЕСКИ

АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ МЕТОДОМ СУПЕРФУЗИИ

Изобретение относится к биологии и медицине, а именно к устройствам для количественного определения биологически а«тивных веществ гормональной медиаторной природы, основанной на регистрации эффекторной реакции изолированных гладкомышечных органов некоторых лабораторных животных.

Известны установки для количественного определения биологически активных веществ методом суперфузии.

Наиболее близкой к предлагаемой по технической сущности и достигаемому результату является установка для количественного определения эндогенных биологически активных веществ методом суперфузии, содержащая емкости для питательного и исследуемого растворов, органную баню, обогревательный трубопровод, связанный с водяным ультратермостатом, каплеобразователь, трубопровод для подвода питательного и исследуемого растворов к каплеобразователю, перфузионный насос, приспособление для фиксации тест-органа и регистрирующее устройство (1).

Однако эта установка не позволяет достичь достаточной точности и достоверности проводимых измерений, поскольку не ооеспечивает равномерной концентрации исследуемого раствора в питательной среде, а также стабильного температурного режима внутри органной бани.

Целью изобретения является устранение указанных недостатков и повышение точб ности измерений.

Это достигается тем, что органная баня выполнена в виде двух коаксиально установленных с зазором цилиндров, причем обогревательный трубопровод размещен !

О равномерно по наружной поверхности внутреннего цилиндра, а трубопровод для подвода питательного и исследуемого растворов размещен внутри обогревательноготрубопровода, при этом каплеобразователь выполнен в виде втулки, имеющей открытую кольцевую полость для подачи раствора на тест-орган, расположенную коаксиально относительно осевого отверстия, сообщаемую с трубопроводом для подвода питательного

20 и исследуемого растворов посредством канала, выполненного в боковои стенкевтулки на уровне дна полости.

На фиг. 1 схематично изображена установка, общий вид; на фпг. 2 — узел 1 на

25 фиг. 1 (разрез каплеобразователя).

Установка для количественного определения эндогенных биологически активных веществ методом суперфузпи содержптемкости 1 и 2 для питательного и исследуемоЗ0 го растворов, органную баню 3, выполнен682821 ную в виде двух коаксиально установленных с зазором цилиндров 4 и 5, обогревательный трубопровод б, внутри которого в токе нагретой до заданной температуры воды, подаваемой от водяного ультратермостата 7, размещен трубопровод 8 для подвода питательного и исследуемого растворов. Внутри органной бани 3 размещен тест-орган 9, концы которого соединены с приспособлением для его фиксации, представляющим собой нить 10 подвеса, один конец которой закреплен неподвижно, а другой связан с дозированным грузом 11 через регистрирующее устройство, состоящее из блока 12 питания, преобразователя 13, регистрирующего прибора 14 и индукционного датчика линейных перемещений, в свою очередь состоящего из индуктивной катушки 15 и ферритового стержня 16.

В верхней части органной бани 3 размещен каплеобразователь 17, выполненный в виде втулки 18, имеющей открытую кольцевую полость 19, для подачи раствора на тест-орган 9, расположенную коаксиально осевого отверстия, сообщаемую с трубопроводом 8 для подвода питательного и исследуемого растворов посредством канала

20, выполненного в боковой стенке втулки

18 на уровне дна полости 19, при этом нить подвеса 10 с тест-органом 9 проходит по центру осевого отверстия втулки 18. Подача питательного и исследуемого растворов к каплеобразователю 17 осуществляется перфузионным насосом 21. Для обеспечения возможности перемещения регистрирующего устройства и органной бани 3 по вертикали имеются подвижные кронштейны

22, смонтированные на опорной штанге 23.

Установка работает следующим образо».

После включения водяного ультратермостата 7 и регистрирующего устройства через 30 — 40 мин установка готова к проьедению опытных работ по количественному определению эндогепных биологически активных веществ методом суперфузии.

От водяного ультратермостата 7 вода по трубопроводу 6 циркулирует по всему контуру установки, поддерживая температуру внутри органной бани 3 на заданно» уровне и обогревая трубопровод 8 для подвода питательного и исследуемого растворов.

Ферритовый стержень 16 регистрирующего устройства для уменьшения сил трения и упрощения процесса юстировки выполнен плавающим по дуге окружности, а оси его вставлены в конуса из часовых камней.

После закрепления тест-органа 9 при помощи подвижных кронштейнов 22 производят установку электрического нуля индукционного датчика линейных перемещений и визуальную установку верхней части тссторгана 9 под каплеобразователем 17 по его центру. На тест-орган 9 питательный и исследуемый растворы подаются через каплеэ

25 30

4д

Я

6э

4 образователь 17 по трубопроводу 8, представляющим собой тонкую (внутренний диаметр 0,5 мм) трубку, выполненную из селиконовой резины не адсорбирующей на своей поверхности исследуемое вещество.

Перемещение растворов по контуру установки обеспечивается перфузионным насосом 21. Трубопровод 8 для подвода питательного и исследуемого растворов через тройник (на чертеже не показан) вводится в полость обогревательного трубопровода

6, выполненного в виде эластичной трубки с внутренним диаметром о мм. Внутри трубопровода б циркулирует вода, поступающая от ультратермостата 7 при заданной температуре, Благодаря постоянной скорости подачи питательного и исследуемого растворов температура внутри органной бани 3 и температура омывающих тест-орган 9 растворов строго постоянна.

Образующиеся в нижней части каплеобразователя 17 капли подаваемых растворов формируются на верхней части тесторгана 9, закрепляемого по центру каплеобразователя 17, и растворы плавно без пульсаций обтекают тест-орган 9 со всех сторон.

Растворы, пройдя по тест-органу 9, образуют в нижней части органной бани 3 водяной затвор, препятствуя проникновению более холодного наружного воздуха через нижнюю часть органной бани 3. Это также способствует поддержанию заданного температурного режима внутри органной бани.

Передвижение растворов по трубопроводу

8 происходит последовательно: за питательным раствором следует разделенный пузырьком воздуха, образующимся при переносе заборного конца трубопровода 8 из емкости 1 в емкость 2, исследуемый раствор.

Пузырек воздуха производпг вращательное движение, собирая на себя остатки прошедшего раствора, в результате чего исключается возможность смешения различных растворов при повторных экспериментах.

Под действием растворов происходит эффекторная реакция тест-органа 9 (сокращения). Это сопровождается перемещением ферритового стержня 16 индуктивного датчика линейных перемещений, разбалансом сигналов первичной и вторичной индуктивной катушки 15, что сопровождается возникновением электрического сигнала, снимаемого с индуктивного датчика регистрирующим прибором 14. Величина сигнала прямо пропорциональна величине сокращений тест-орган 9, а последняя находится в определенной зависимости от количества исследуемого раствора.

Установка обеспечивает создание опти»альных условий жизнедеятельности изолированных гладкомышечных органов (строго постоянный те»пературпый режим, пол682821

Фиг, 1 ное отсутствие обезвоживания органа). Это позволяет значительно повысить точность и достоверность производимых опытов. Б качестве объективного критерия оценки воспроизводимости в данном случае выби- 5 рают коэффициент вариаций, который при количественном определении брадикинина с использованием в качестве тест-органа изолированного рога матки крысы составляет 7% по сравнению с 14,2% при исполь- 10 зовании известной установки. Иными словами, предлагаемая установка обеспечивает в 2 раза более высокую воспроизводимость исследований.

Формула изобретения

Установка для количественного определения эндогенных биологически активных веществ методом суперфузии, содержащая 20 емкости для питательного и исследуемого растворов, органную баню, обогревательный трубопровод, связанный с водяным ультратермостатом, каплеобразователь, трубопровод для подвода питательного и 25 исследуемого растворов к каплеобразователю, перфузионный насо", приспособление для фиксации тест-органа и регистрирующее устройство, от л и ч а ю щ а я с я тем, что, с целью повышения точности измерений, органная баня выполнена в виде двух коаксиально установленных с зазором цилиндров, причем обогревательный трубопровод размещен равномерно по наружной поверхности внутреннего цилиндра, а трубопровод для подвода питательного и исследуемого растворов размещен внутри обогревательного трубопровода, при этом каплеобразователь выполнен в виде втулки, имеющей открытую кольцевую полость для подачи раствора на тест-орган, расположенную коаксиально относительно осевого отверстия, сообщаемую с трубопроводом для подвода питательного и исследуемого растворов посредством канала, выполненного в боковой стенке втулки на уровне дна полости.

Источники информации, принятые во внимание прп экспертизе

1. D. S. graaf, Angiotensin — II, Niotropic

of some des asparagin — I, ana1oues, Vinsit

Zeiden, 1970, с. 17 — 22.

682821

4 ив

Составитель Е. Новикова

Техред А. Камышникова

Редактор H. Хлудова

Корректор Р. Беркович

Типография, пр. Сапунова, 2

Заказ 2111/6 Изд. № 522 Тираж 1090 Подписное

НПО «Поиск» Государственнбго комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва %-35, Раушская наб., д. 4/5