Способ консервации тканевых лимфоцитов

 

Q д д (: A Н Я Е (11)688)63

ИЗОБРЕТЕНИ Я

Союз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 21.03.77 (21) 2465046/28-13 с присоединением заявки № (23) Приоритет (51) М. Кл. -

А 01N 1/02

Государственный комитет (43) Опубликовано 30.09.79. Бюллетень № 36 (53) УДК 616-003.215 (088.8) ло делам изобретений и открытий (45) Дата опубликования описания 30.09.79. (72) Авторы изобретения

А. А. Цуцаева, Е. А. Гордиенко, Т. Н. Воскобойникова, Н. Н. Попов и Н. С. Пушкарь

Институт проблем криобиологии и криомедицины

АН Украинской ССР (71) Заявитель (54) СПОСОБ КОНСЕРВАЦИИ ТКАНЕВЫХ ЛИМФОЦИТОВ

Изобретение относится к области медицины и может найти применение при лечении больных с новообразованпямп, лучевой болезнью, иммунодефицитными состояниями различного генеза и при подборе пар донор — реципиент.

Известен способ консервации тканевых лимфоцитов, полученных из селезенок мышей, согласно которому тканевые лимфоциты замораживают в 3 этапа в присутствии полиэтиленоксида молекулярного веса 400.

Однако известный способ не обеспечивает высокой жизнеспособности клеток после деконсервации (жизнеспособность клеток составляет 52% ).

Целью изобретения является повышение жизнеспособности лимфоцитов, Эта цель достигается тем, что после второго этапа замораживания клетки выдерживают при минус 26 — минус 28 С в течение 15 — 20 мин.

Пример. Суспензию тканевых лимфоцптов получают гомогенезированием селезенок мышей в среде Игла и фильтруют через капроновую ткань. Концентрация ядросодержащих клеток в пробах составляет

1,0 10 клеток/мл. Затем добавляют криопротектор ПЭО-400 с таким расчетом, чтобы его конечная концентрация в суспензип клеток составляла 10 — 15%. После 15-минутной экспозиции клеток в ограждающей среде суспензию охлаждают сначала от 10 до — 5 С со скоростью 45 в мин, затем от — 5 до — 28 С со скоростью 3 в мин.

После второго этапа охлаждения образцы выдерживают в криостате при — 28 С в те10 чение 20 мин. Третий этап замораживания осуществляют погружением образцов в жидкий азот. Отогрев замороженных тканевых лимфоцитов производят в размораживателе на водяной бане. жизнеспособность консервирования предлагаемым способом тканевых лнмфоцитов составляет 95%.

Формула изобретения

2О Способ консервации тканевых лимфоцптов путем замораживания их в три этапа в присутствии полиэтиленоксида молекулярного веса 400, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью увеличения жизнеспособности лим25 фоцитов после второго этапа замораживания клетки выдерживают при минус 26— минус 28 С в течение 15 — 20 мин.