Способ определения биологической активности гормонов задней доли гипофиза

 

Союз Советских

Соцреалистических

Республик >69ОО7О (61) Дополнительное к авт. санд-ву (22) Завалено 01.1277 (21) 2552895/28-13 с присоединением заявки Нов (23) Г1риоритет—

С 12 К 1/00

Государственный комитет

СССР по делам изобретений н открытий

Опубликовано 05.1 0.79. бюллетень ЙЯ 37

Дата опубликования описания 08.10,79 (53) УДК 57o...8. 093 ° .1 (088.8) (72) Авторы

ИЭОбрФТЮНИЯ О.В. Бухарин, Е.И, Бритвина, Е.П. Володина и Я.И. Коц (73) ЗаяВИтЕЛЬ Оренбургский государственный медицинский институт (54 ) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ

ГОРМОНОВ ЗАДНЕИ ДОЛИ ГИПОФИЗА

Изобретение относится к области медицины, а именно к лекарственным препаратам.

Известен способ определения биологической активности гормонов задней доли гипофиза с использованием экспериментальных животных (11 . Однако известный способ является сложным (большое количество операций) и не обеспечивает высокой точности результатов, так как они зависят в значительной мере от индивидуальной чувствительности организма подопытных животных.

Цель изобретения — упрощение спо- 15 соба. . Эта цель достигается тем, что исследуемый гормон смешивают с тесткультурой BaciIIus suhtiIis, смесь выдерживают при температуре 35-40 С 20 в течение 5-15 мин, затем высевают на питательную среду и по величине антимикробной активности определяют биологическую активность гормона.

Пример . Проводят лабораторные испытания предлагаемого способа стандартизации гормонов задней доли гипофиэа. Ставят четыре опыта, в каждом из которых к 1 мл окситоцина (5 ед. стандартного образца) добавляют по 1 мп суспензии бактериальной тест-культуры сенной палочки (BaciIIus subtiIis), выращенной на питательной-среде — мясо-пептонном агаре (рН вЂ” 7,2) и оттитрованной по оптическому стандарту мутности. Смеси помещают в термостат и выдерживают при температуре 37 С в течение 1, 5, 10 и 15 мин. После этого осуществляют мерный высев смесей на чашки с питательной средой — мясо-пептонным агаром. Оценку биологической активности гормонов производят по их антимикробному эффекту следующим образом: через

24 ч экспозиции чашек в термостате при 37 С визуально определяют наличие проросших колоний тест-культурысенной палочки.

Результаты опытов приведены в таблице.

690070

Сплошной рост

2000-1900 0 колоний

Сплошной рост

10-5 колоний

700-6 00 колоний

То же

10

3-0 колоний

Разреженный рост

Формула изобретения

Составитель С. Малютина

Редактор Л. Ушакова Техред Н.Бабурка Корректор М. Селехман

Тираж 526 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Заказ 5912/24

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул.,Проектная, 4

Как видно из таблицы, для окситоцина микробная нагрузка составляет

10 микробных единиц., При этом при контакте бактериальной тест-культуры с окситоцином в течение 1 мин наблюдается сплошной рост колоний, 5 мин— насчитывают 600-700 колоний, 10 мин—

0-3 колоний, 15 мин — отсутствие колоний. Таким образом, оптимальное время контакта для этой микробной нагрузки (10 клеток) 10-15 мин. Для микробной нагрузки 10 клеток анти8 микробный эффект окситоцина выявляет- ЗО ся через 5-10 мин контакта культуры с гормоном.

Аналогичным способом определяют ак живность других. гормонов задней доли гипофиэа — вазопрессина и пи- . 35 туитрина. Микробная нагрузка для них составляет 10 -10 микробных единиц.

Использование предлагаемого способа опрЕделения биологической ак- . тивности гормонов задней доли гипо- 40 физа позволяет повысить точность стандартизации за счет использования тест-культуры, выращенной из одной бактериальной клотки, что дает возможность исключить. разброс данных 45 иэ-за различной чувствительности организма подопытных животных к гормонам. Определение биологической активности гормонов задней доли гипофиэа по предлагаемому способу по сравнению с известным проще, так как способ имеет меньшее количество операций и позволяет исключить использование подопытных лабораторных животных.

Способ определения биологической активности гормонов задней доли гипофиза, отличающийся тем, что, с целью упрсщения способа, исследуемый гормон смешивают с тесткультурой BaciIIus subtiIis смесь выдерживают при температуре 35-40 С в течение 5-15 мин, затем высевают на питательную среду и по величине антимикробной активности определяют биологическую активность гормона.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Авторское свидетельство СССР

Р 331795, кл. A 61 К 17/06, 1974.