Вещество, проявляющее антитромбогенную активность

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

И АВТОРСКОМУ ЮВИДИТИЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик оч745522

{61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 030177 (21) 2431904/28-13 (51) М. Кл,2

A 61 К 33/04 с присоединением заявки ¹

Государстееииый комитет

СССР ио делам изобретеиий и открытий (23) Приоритет

Опубликовано 070780. Бюллетень ¹ 25 (53) УДК 615.7 (088.8) Дата опубликования описания 07.0780

В.И. Шумаков, й.К, Чепуров, Т.Л. Егоров, Г.И. Лазаренко, Н.С. Махортов, P.Ê. Абоянц, A.3. Трошин и Н.Г. Мкервали (72) Авторы изобретения

Научно-исследовательский институт трансплантологии и искусственных органов (71) Заявитель (54) ВЕЩЕСТВО, ПРОЯВЛЯЮЩЕЕ АНТИТРОМБОГЕННУЮ

АКТИВНОСТЬ

Изобретение относится к области ,медицины, а .именно веществам, служащим для увеличения антитромбогенных свойств имнлантируемых в организм искусственных органов.

Йэвестно применение красителей тионинового ряда в гистохимии для окрашивания (1) .

Цель изобретения — расширение ассортимента веществ, проявляющих антитромбогенную активность.

Эта цель достигается применением катионных красителей тионинового ряда — толуидинового синего, азура, диметиленового синего, в качестве вещества, проявляющего антитромбогенную активность.

Катионные красители вводят внутривенно в концентрации 1%, 5% и 10% из расчета 0,25 мп на кг веса. Кровь для исследования гемокоагуляции берут из правой половины сердца до введения красителей, а также через

30 мин, 1,5 ч и 2,5 ч после их внутривенного введения. Из гемокоагуляционных показателей изучают: время тромбообраэования крови, тромбоаластограмма, концентрацию факторов протромбинового комплекса, количество фибриногена, толерантность— крови к гепарину с графической регистрацией на коагулографе, концентрацию свободного гепарина количество тромбоцитов,индекс адгезии тромбоцитов и агрегацию тромбоцитов.

Полученные данные статистически обработаны.

Исследования показали, что наиболее выраженные изменения со стороны коагуляции крови при действии катионных красителей наблюдаются при их 10%-ной концентрации. Из ис15 следуемых красителей толуидиновый синий и азур А оказывают более значительный эффект на гемокоагуляцию, чем 1:9 диметилметиленовый синий..

2О В таблице приведены данные о влиянии толуидинового синего и азу-. ра А на коагуляционные свойства крови. . Время тромбообразования крови после введения красителей замедляется.. Причем, наиболее выраженное замедление времени тромбообразования крови было отмечено через

1,5 ч после введения толуидинового

3 синего и азура А, которое через

74552?

2,5 ч было еще более замедленным.

Так, время тромбообразования крови через 2,5 ч после введения толуидинового синего и азура А было больше исходного соответственно на 210+18 с и 120+12 с (Р 0,02) . Количество факторов протромбинового комплекса после внедения красителей также уменьшается. Концентрация фибриногена резко уменьшилась. Особенно значительное снижение концентрации фибриногена было отмечено через

2,5 ч после введения азура А, которая была на 133+14 мг % меньше исходного (Р 0,001). Количество тромбоцитов после нведения катионных красителей всегда уменьшается.Наибольшее снижение количества тромбоцитов наблюдается после введения толуидинового синего и 1:9 диметилметиленового синего, которое было меньше исходного соответственно на

120+17 тыс. и 12б+11 тыс. (Р 0,01).

Катйонные красители вызывают выраженное снижение индекса адгезии тромбоцитов. Следует отметить,что индекс адгезии тромбоцитов снижается уже через 30 мин после инъекции красителей и остается ниже исходного в течение всего времени исследова- ния. Максимальное снижение индекса адгеэии тромбоцитов отмечают через

2,5 ч после введения красителей.

В частности толуидиновый синий вызывает уменьшение индекса адгезии тромбоцитов в четыре раза по сравнению с нормой. Существенные изменения после введения, красителей были «также отмечены и со стороны агРегации тромбоцитов. Максимальная амплитуда агрегатограммы тромбоцитов уменьшается, а скорость ее наступления значительно увеличивается

Исследуемые катионные красители вызывают выраженные измейения гепариновой активности крови. Количество свободного гепарина после введения красителей было сниженным в течение всего времени исследования. Исключение состаВляет толуидиновый синий, который в первые 30 мин пбсле его внутривенного введения не вызывает изменений количества свободного гепарина. Наиболее выраженное уменьшейие концентрации свободного.гепарина отмечается. через 1,5 ч после введения красителей. В дальнейшем концентрация свободного гепарина несколько увеличивается, оставаясь все еще ниже нормы. Из исследуемых катионных красителей, толуидиновый синий и 1:9 диметилметиленовый синий вызывает более выраженную гипогепаринемию, чем аэур A. В отличие от концентрации свободного гепарина толерантность крови к гепарину после введения красителей была наиболее замедленной через 2,5 ч. При этом

-характер изменений толерантности крОви к гепарину противоположен изменениям со стороны концентрации свободного гепарина, которые наблюдаются при введении тех же количеств катионных красителей.

Катионные красители тионинового ряда вызывают четко выраженные изменения коагуляционных свойств крови.

Причем гипокоагуляционным изменениям со стороны общей коагуляционной активности крови (время тромбообразования крови и тромбоэластограммы), концентрации факторов IIpoTpoMGHHoного комплекса и фибриногена соответствуют снижению толерантности крови к гепарину, тогда как количе15 ство свободного гепарина резко уменьшается. Гепарин не оказывает существенного влияния на тромбообраэующие свойства крови.

Введение красителей сопроножда. 2О ется резким снижением адгезионной и агрегационной способности тромбоцитов.

Катионные красители вызывают выраженное уменьшение способности тромбоцитов ассоциировать в агрегаты и их широкое распластывание.

Пример 1. Краситель толуидиноный синий внодят внутривенно кролику в концентрации 10% из расчета 0,25 мп на 1 кг веса. Кровь для исследования гемокоагуляции берут иэ правой половины сердца до введения красителей, а также через

30 мин, 1,5 ч и 2,5 ч после введения. Время тромбообразования крови после введений красителя замедляется на 100 с. Количество фибриногена уменьшается на 130 мг %, количество тромбоцитов в циркулирующей крови меньше исходного на 126000. . 4p Таким образом, внутривенное введение толуидинового синего вызывает замедление времени тромбообраэования крови, Пример 2. Для изучения тромбогенности в ячейках 7ю о изготавливают пленки из раствора фторлона в ацетоне с аэуром (1Ъ от веса полимера). На дно камеры помещают пленку с азуром А„ В качестве контроля используют пленку из раствора фторлона в ацетоне без нключения азура A. Свертываемость крови замедляется на 150 с по сравнению с контролем. Таким образом, при контакте крови с аз ром на пленке тромбо55 образование крови замедляется.

Пример 3. Применяющиеся н обычной практике лансановые сосудистые протезы в качестне соединительных магистралей искусственного щ сердца не отличаются оптимальными тромбореэистентными и механическими свойствами. Для уменьшений проницаемости используемых сосудистых протезон применяется пропитка силиконовым клеем или адсорбция на

745522 их внутренней поверхности фибринотромбоцитарной структуры (гемостатическая пробка).

Используют лавсановые сосудистые протезы, обработанные коллангеном с включением в их химический 5 состав катионных красителей тионинового ряда (азур, толуидиновый синий, 1:9 диметилметиленовый синий). го сердца показали, что использование сосудистых протезов, обработанных коллагеном с включением в их химический состав катионных красителей, отвечает требованиям, тромборезистентности, что выражается в 0Т сутствии тромбов В течение длительных экспериментов и оптимальной проницаемости для крови.

Применение красителей тионинового ряда в качестве антитромбогенных веществ с целью включения в химический состав синтетических материалов для повышения биологической активности, антитромбогенности, дает воэможность конструкции искусственного сердца, вспомогательного кровообращения, протезов сосудов в организм.

Дистальный конец сосудистого про теза диаметром 26 мм подшивают конец в конец обвивным швом к восходящему отделу аорты и легочной артерии.

Проксимальный конец сосудистых протезов фиксируют на выходном отделе левого и правого искусственных желудочков сердца. Результаты экспериментов по имплантации искусственно-!

Толуидиновый синий

Азур А

30 мин 90 мин 150 мин 30 мин 90 мин 150 мин

Время тромбообразования крови,c P

374+18 489 12 600+24 426+18 459%6 510 18

390+24

0,1

0,01

0,01

0,05

0,02

0 05

Протромбиновый комплекс, с P

79+ 3

0,01

72+4

0,001

56+2

0,02

49+4

67+4

0,05

5 3+2

0,05

41 3

0,1

Фибриноген, мг Ъ

17911 О 119+ 16 14 8+11 150 9 13 3+15 88+12

226+18

0,001

0,02 0,01

0,02 0,05

0,05

Гепарин, мг% P

1,4+0,2

0,01

1,7+0,2 0,6+0,2 О 9+0,3 1,3t0,2 0,9+0,1

6+0,8

0,05

0,02 0,05 0,001

0,001

Количество тромбоцитов в тыс. P

224+14 200+12

244+12

0,05

296 32 222 17 194+23 176+19

0,02

0,05

0,02

0,05 0,05

И ндекс адгезии тромбоцитов Р

11+3

13Й2,5

10 2

5 0,5

20,4+3,2 8 2 2 7+ 1

0,001 0,001

0,001 0,02

О, 001 О, 001

П р и м е ч а н и е: Достоверность Р по сравнению с нормой являющего антитромбогенную активность Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Ромейс Б. Микроскопическая техника. М;, 1953, с. 545.

Формула изобретения 55

Применение катионных красителей тионинового ряда, таких как толуиди1 нового синего, азура, диметиленового синего в качестве вещества, проI

ЦНИИПИ Заказ 4048/3 тираж 673 Подписное

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул, Проектная, 4