Питательная среда для накопления биомассы бифидобактерий

 

Союз Советских

Социалистических

Республик

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ()789580 (61) Дополнительное к авт. саид-ву (22) Заявлено 1 gp 279 (21) 2728357/28-13 с присоединением заявки М (23) Приоритет

Опубликовано 231280,Бюллетень Мо 47

Дата опубликования описания 231280 (51) М. Кл.з

С 12 11 1/20

Государственный комитет

СССР яо делам изобретений н открытий (53) УДК 576. 8 (088. 8) (72) Авторы изобретения

Т.,М.Эрвольдер, Г.Д. Перфильев, А.В. ГУЛко -% А. Белова

Всесоюзный научно-исследовательский институт маслодельнсй и сыродельной промышленности Научно-производственного объединения "Углич" (71) Заявитель (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ НАКОПЛЕНИЯ БИОМАССЫ

БИФИДОБАКТЕРИИ

Изобретение относится к макробиологической и молочной промышленности и .может быть применено при производстве заквасок с использованием бифидобакте.5 рий.

Бифидобактерии являются облигатными анаэробами и отличаются черезвычайно сложными питательными потребностями.

Известна среда для выращивания 10 бифидобактерий, включающая гидролиэованное панкреатином молоко, пептон 2Ъ, поваренную соль О,ЗЪ цистеин 0,02Ъ, агар-агар .0,075Ъ. В этой среде дефицитный и дорогостоящий печеночный 15 бульон заменен более дешевым и доступным панкреатиновым гидролиэатом обезжиренного молока (1).

Среда МНИИЭМ не устраняет всех недостатков печеночных сред, так как 20 в ее состав входят дефицитные и дорогостоящие цистеин и пептон. Кроме .того, приготовление гидролизованного молока по Богданову занимает не менес 24 ч, что создает определенные 25 трудности на производстве.

Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому является питательная среда для накопления биома<.сы молочнокислых бактерий, в том 30 числе и бифидобактерий, включающая ферментативный гидролизат обеэжирей-, ного молока, глюкозу и трехзамещенную соль натрия 3а основу предлагаемой среды взято обезжиренное молоко, белки которого гидролиэованы протомезентерином или какой-либо другой нейтральной протеинаэой.

Хорошие результаты были также получены при гидролизе белков молока, пепсином, однако, при использовании пепсина рН молока следует доводить до

4,5 с последующим раскислением среды до значения рН 7,2-7,4. Гидролиэ белков молока продолжается в течение

2 ч при оптимальных температурах и рН для каждого протеолитического фер мента f2), Однако эта среда также не устраняет отмеченных недостатков и недостаточно богата ингредиентами, обеспечивающими быстрое накопление биомассы.

Цель изобретения — повышение выхода биомассы.

Поставленная цель достигается тем, что известная среда дополнительно содержит кормовой концентрат витаминов группы В, кукурузный экстракт, 789580.агар-агар маннит, гидрат сернокислой закиси железа, соль этилендиаминотетрауксусной кислоты, а из солей натрия используют трехзамещенный цитрат натрия, при следующем соотношении компонентов, вес.Ъ:

Трехзамещенный

9 цитрат натрия 0,9-1,0

Глюкоза 0,9-1,0

Кукурузный экстракт 0,9-1,0

Кормовой концентрат витаминов группы В 0,03-0,06 1©

Соль этилендиаминотетрауксуной кислоты

Агар-агар

Гидрат сернокислой закиси железа 0,01-0,015 3$

Маннит 0,0008-0,0009

Ферментативный гидролизат обезжиренного молока Остальное

В качестве источника солей этилен- щ диаминотетрауксусной кислоты используют препарат — трилон-Б.

Сущность изобретения состоит в следующем. е

B гидролизаты обезжиренного молока вводят 0,3-0,6Ъ КМБ-12- кормовой концентрат витаминов группы В, серийно выпускаемый промышленностью, который оказывает стимулирующее действие на рост бифидобактерий.

Компоненты среды — 0,9-1% глюкозы, 30 которая обладает заметными редуцирующими свойствами и является хорошим энергетическим источником для бифидобактерий, и 0,9-1% трехзамещенного цитрата натрия, который обеспечивает 3S буферность среды и поддерживает ее белковые компоненты в растворенном состоянии. Последнее обстоятельство очень важно при отделении биомассы бифидобактерий от культуральной сре- 4g ды.

0,008-0,012

0,075-0,08

В качестве дополнительного источника ростовых веществ в среду дабавляют 0,9-1% кукурузного экстракта

Для обогащения сред анаэробов 5Н- 45 группами и снижениях их редокс-потенциала применяют некоторые хелатные соединения, например этилендиаминотетрауксусная кислота (ЭДТА), которые связывают ионы меди и поддерживают 5р

5Н-группы в активном состоянии в присутствии кислорода. Поэтому в среду вносят соли ЭДТА в виде промышленного препарата "Трилон-Б", широко используемого в промышленности для смягчения воды в котельных установках.

Кроме того, в среду для бифидобак. терий включают 0,01-0,015% Fe 04

7 Н О (0,002Ъ Fe 7 и 8-9 мг/л маннита.

Для уменьшения скорости диффузии .кислорода из воздуха в среду вносят 60

0,075 агар-агара.

Пример . B 100 л водопроводной воды вносят 3 кг обезжиренного молока распылительной сушки. После тщательного перемешивания смесь нагре-65 вают до 55o C доводят рН с помощью

20Ъ-ного раствора йаОН до 6,7 .0,1.

Добавляют 11 г протомезентерина активностью 200000 ед. и выдерживают 2 ч.

После чего в смесь быстро вносят 1 кг глюкозы, 1 кг трехзамещенного цитрата натрия, 1 л кукурузного экстрата, 50 г КМБ 12, 10 r FeSOy ° 7Н О, 0 75 r агар-агара, 10 г трилона — Б и 800 г маннита и все содержимое перекачивают ферментер.

Получают среду следующего составаф„

Обезжиренное восстановленное молоко (3 кг сухого обезжиреного молока на

100 л воды), белки которого гидролизуют в течение 2 ч при

55 С и рН 6,7+0,1 протомезентерином до 100

Глюкоза 1

Трехзамещенный цитрат натрия 1

Кукурузный экстракт 1

КМБ-12 0 05

Трилон-Б 0,01

Ге504. 7Н О 0,001

Arap-агар 0,075

Маннит 0,0008 рН среды 6,7. Стерилизация 15 мин при 121 С.

Готовую среду в 100-литровом ферменте, марки ЛКБ инокулируют 10% культуры бифидобактерий (штаммы 9 1, используемые при профилактике и лечении желудочно-кишечных заболеваний).

Накопление биомассы бифидобактерий осуществляют в течение 24 ч с периодическим раскислением среды. Дальнейшие технологические операции по приготовлению сухого препарата бифидобактерий ведут по заданному отделом микробиологии ВНИИМСа режиму.

В результате испытаний установлено следующее: предлагаемая среда не предсталяет каких-либо трудностей для приготовления, не содержит дефицитных компонентов; среда обеспечивает нормальные условия для роста бифидобактерий; из 100 л испытуемой среды получено 600 г сухого препарата, содержащего в 1 r 500 млн колонийобразующих единиц бифидобактерий; предлагаемую среду можно испольэовать для промышленного производства препаратов бифидобактерий.

Формула изобретения

Питательная среда для накопления биомассы бифидобактерий, включающая ферментативный гидролизат обезжиренного молока, глюкозу и трехзамещенную соль натрия, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что, с целью повышения выхода биомассы, она дополнительно содержит кормовой концентрат витаминов группы В, кукурузный экстракт, 789580

0,01 -0,015

Составитель И.Привалова

Редактор С.Патрушева Техред Т,Маточка Корректор С.Цомак

Заказ 8999/29 Тираж 522

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 агар-агар, маннит, гидрат сернокислой закиси железа, соль этилендиаминотетрауксусной кислоты, а из солей натрия используют трехзамещенный цитрат натрия, при следующем соотношении компонентов, вес.Ъ:

Трехзамещенный цитрат натрия 0,9-1,0

Глюкоза 0 9-1,0

Кукурузный экстракт 0,9-1,0

Кормовой концентрат витаминов группы В 0,03-0,06

Соль этилендиаминотетрауксусной кислоты 0,008-0,012

Агар-агар 0,075-0,08

Гидрат сернокислой закиси железа

Маннит 0,0008-0,0009

Ферментативный гидролизат обезжиренного молока Остальное

2. Питательная среда по и, 1, о тл и ч а ю щ а я с я тем, что в качестве источника солей этилендиаминотетрауксусной кислоты используют препарат — трилон-Б.

Источники информации, 1О принятые во внимание при экспертизе

1. Богданов В.М.Микробиология молока и молочных продуктов. М., "Пищевая промышленность", 1969, с. 296.

2. Авторское свидетельство СССР

М 490814, кл. С 12 В 3/00, 1973 (прототип).