Способ количественного определения 3,5,7,3 ,4 -пента-он- флавона

 

О П И С А Н И Е ()892277

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистические

Республик (61) Дополнительное к авт. свнд-ву— (22) Заявлено 17. 01. 80 (21)2872478/23-04 с присоединением заявки .%. (23) Приоритет(5l)M. Кл.

G 01 М 21/00

Гееударстеанный комитет

СССР

Опубликовано 23.12.81. Бюллетень ¹ 47 ле делам нзебретеннй н открытей (53) УДК S43.432 (088. 8) Дата опубликования описания 23. 12. 81

А.И.Рыбаченко, В.П.Георгиевский, А.Г.Пиотровская и Т.А.Богаевская I lg

« » "

-м., Харь ковский научно-исследовательский химикофармацевтический институт (72) Авторы изобретения (71) Заявитель (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ

3 ° 5э7в3 э4 ПЕНТА OH фЛАВОНА

Изобретение относится к анали" тической химии, а именно к способам количественного определения 3, 5, 7, 3>, 4 -пента-OH-флавона (кверцетина), Известен способ количественного определения 3,5,7,3,4 -пента-ОН-фла5 вона, заключающийся в хроматографировании анализируемой пробы с последующей обработкой хроматограммы раствором хлористого алюминия с последующим флуориметрированием полученной хроматограммы 111, Недостатком способа является сложность определения.

Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ количестк Ф венного определения 3, 5, 7 3,4-пента-ОН-флавона, заключающийся в растворении анализируемой пробы в метиловом спирте и обработке полученного раствора раствором ацетатз свинца в метиловом спирте, и после,дующем центрифугировании, отделении и растворении полученного осадка азотной кислотой, обработке получен-. ного при этом раствора ацетатом натрия и титровании его раствором этилендиамина тетраацетата натрия (21.

Недостатком способа является его сложность и длительность (время определения более 8 ч).

Цель изобретения - упрощение и сокращение времени определения.

Поставленная цель достигается тем> что в качестве спирта используют этиловый спирт в качестве химичесJ кого реагента - 51,3-51,53-ный раствор серной кислоты и полученный после обработки раствора спектрофотометрируют.

Способ осуществляется следующим образом.

Навеску препарата экстрагHpóþò кипящим этанолом, отмеренное количество этанольного раствора переносят в мерную колбу и смешивают с раствором

892277 серной кислоты известной концентрации (51 3-51,5Ф). Измеряют оптическую плотность сернокислотного раствора препарата на спектрофотометре при длине около 440 нм, применяя в качестве контрольного 51,3-5 1,53-ный раствор серной кислоты. Предлагаемый способ основан на различной способности кверцетина и ликуразида присоединять протон в сильнокислой среде: константы протонизации (рКс1)

1 кверцетина и ликуразида (2 4-ди-ОН-!

-4 -0- -0-.глюкопираноэил-2-0-P-О-апифураноэид халкон) составляют соот-. ветственно -2,55 и -4,53, Длина волны максимума поглощения протонированного кверцетина лежит B области 440 нм, à в спектре протонированного ликуразида при 440 нм имеется минимум. При этом удельные показатели поглощения кверцетина и ликураэида при 440 нм существенно различны и соответственно равны 985 и 303.

Кроме того, в основе предлагаемого способа лежит тот факт, что в интервале 51,3-51,53-ных концентраций серная кислота создает кислотность по шкале Гаммета, равную

3,54 единиц Н . В этих условиях кверцетин протонируется на 90,724, а ликураэид - лишь на 9,283.

Пример . Отвешенные 0,6459 r препарата экстрагируют кипящим этанолом, фильтруют в мерную колбу емкостью 100 мл, охлаждают до комнатной температуры и доводят раствор до метки этанолом (раствор А), 1 мл раствора А переносят в мерную колбу емкостью 25 мл, несколько подупаривают на водяной бане и приливают до метки 51,3-51,53-ный раствор серной кислоты (получают раствор -Б), Измеряегг оптическую плотность раствора Б

Приравнивая С и С, выводят, что оптическая плотность кверцетина

0„ превышает оптическую плотность ликураэида 0„ц„ в 31,8 раз.

nÄÄ 0,462/31,8=0,014;

n, = 0,462-0,014=0,448.

Рассчитывают содержание кверцетина в препарате (в процентах):,948 ЛЕ

085 0,6459 0 9072

Рассчитывают также и содержание ликуразида (в процентах):

=1,93 .

Необходимость применения 51,4 g

+0,14-ной серной кислоты вызвана тем, что именно в данном интервале кислотности получаются наиболее стабильные и правильные результаты анализа; при данной кислотности отношение степеней протонизации кверцетина и ликураэида около 10 и

40 нарушение этого отношения в большую или меньшую сторону влияет на правильность анализа, что показано в таблице. на спектрофотометре при длине волны около 440 нм в кювете с толщиной слоя

1 см, величина оптической плотности раствора составляет 0,462.

Согласно расчетам„ при данной кислотности среды НО=-3,54 кверцетин протонируется на 90,72>, а ликуразид - на 9,284. Отсюда. величина оптической плотности раствора Б n „ складывается из следующих величин.

0о„ =985.0,9072.Ск [phone]»

С„„„, где Скв и С „, - концентрации кверцетина и ликураэида в растворе Б.

I

Степень протонизации, Ж

Концентрация серной кислоты

Функция

Н@

ОтноСодержание кверцетина ф кверцетина ликуразида

-3,39 87,37 8,07

-3,54 90,72 9,28

-9,59 91,69 10)29

49,9

10 8 1,81 1,76

1,94 1,93

9,.8

51,4

8,9 2,08 2,21

51 9 пользуют этиловый спирт, в качестве химического реагента - 51,3-51 53"ный раствор серной кислоты и полученный после обработки раствор спектрофотометрируют.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1.Георгиевский B,Il. 1)ибаченко А.Г.. Флуороденситометричне визначення л1куразиду та кверцетину у препарат1 "Флакарб1н".-"Фармацевтический журнал", 1974, N 4, с.51-54.

2. Определение кверцетина в препарате "Флакарбин" ВФС 42-898-79 (прототип).

Формула изобретения

Составитель Л. Соломенцева

Редактор И.Николайчук Техред А„Ач

Корректор H,Êot-òà

Заказ 11240/64 Тираж 910

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

1 13035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. /5 . 4/5 юЪ» филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.Прое ектная 4

Предлагаемый способ более прост в осуществлении, и время определения составляет 2 ч, что в 4 раза быстрее, чем известным способом.

Способ количественного определения 3,5,7,3,4 -пента-ОН-Флавона пу-. тем растворения анализируемой пробы в спирте и обработки полученного раствора химическим реагентом, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью упрощения и сокращения аремени определения, в качестве спирта исшение степеней протонизации кверце" тина и ликуразида

Содержание ликуразида,t