Штамм virus тjulос n 152-арг-для получения диагностических препаратов

 

Союэ Советскик

Соцналистичеснии

Республик.

ОП ИСАНИЕ

ИЗОВРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 170480 (21) 2913280/28-13 с присоединением заявки Нов (23) Приоритет (5!)М. Клз

С 12 N 7/00

Государственный комитет

СССР но аеаам изобретений и открытий

Опубликовано 070182. Бюллетень М31 и

Дата опубликования описания 070Х82 (53) УДК 615.373.3 (088. 8) Д.К. Львов, В..И. Герштейн, Т.М. Скворцова,,::..„„„-.ji

Ф.P. Карась и С.Г. Варгина пл 1 ENT"4 (Е)(ВМ 4% (72) Авторы изобретения 1E<"л

Киргизский научно-исследовательский инсти эпидемиологии, микробиологии и гигиены и вирусологии им. Д.И. Ивановского ANH СССР (11) Заявители (54) ШТАММ VIRUS TjULOC 9 152-АРГ

ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ

ПРЕПАРАТОВ

Изобретение относится к вирусологии и предназначено для получения диагностических препаратов (антигенов и специфических иммунных сывороток), которые могут быть использованы при индентификации выделенных вирусов и изучении иммунитета в серологических реакциях, реакции нейтрализации, методы прямой иммунофлюорес" ценции.

Предложенный штамм новый, в патентной и научно-технической литературе не описан.

Цель изобретения — новый штамм для получения специфических диагностичес- 15 ких препаратов.

Предложенный штамм Virus Tjufoc, N 152-Apr s e eH a Киргизии в окрестностях села Тюлек в 1978 г. от клещей Argas vuCgaris. 20

Штамм Virus Т3 ц Яос Р 152-Арг хранится в Государственной коллекции ви русов института вирусологии им.

Д.И. Ивановского под номером ГКВ

9 1616 ° 25

Культурально-морфологические признаки. Размеры вириона по данным ультрафильтрации через миллипоровые мембраны находятся в пределах 100 нм.

Падение титров инфекционности вируса 30 под действием эфира (на 2 Cg) и дезоксихолата натрия (на 3 Cg) указывает на наличие у него липидосодержащей оболочки. Отсутствие различий в титрах при культивировании вируса в присутствии 5-бром-дезоксиуридина (БУДР) (5,75 gg) ТЦД 50/мл) и в отсутствии ЕУДР (5,5 fg ТПЦ 50/мл) свидетельствует о наличии в составе вириона рыбонуклеиновой кислоты (РНК).

Штамм культивируется в первичнотрипсинизированных культурах фибробластов эмбриона курицы (ФЭК) и фибробластов эмбриона мыши (ФЭМ), перевиваемых линиях клеток СПЭВ, Йер-2.

На клетки ФЭК оказывает цитопатическое действие. Титры вируса в этой культуре достигают 5,0-7,0 Cg ТЦЦ

50/мл. По данным иммунофлюоресценции вирусные белки накапливаются преимущественно в ядрах пораженных клеток.

Штамм пассируется на 1-3-дневных белых мышах и 1-3-дневных белых крысах при внутримозговом заражении.

Адаптационные свойства. Инкубационный период составляет 5-6 дней ттрн .первичном выделении и сокращается до 3-4 дней в последующих пассажах. Инфекционный титр возбудителя

896068

Формула изобретения

Составитель С. Малютина

Техред А ° Бабинец Корректор E. Рошко

Редактор М. Келемеш г

Заказ 11631/10 Тираж 504

ВНИИПИ Государственного Комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4 для новорожденных белых мышей составляет 10 -10 ЛД 50/0,02 мп.

Антнгенные свойства.,По антигенным свойствам штамм близок к неклассифицированному вирусу Кваранфил из одноименной антигенной группы.

Штамм Virus Tjufoc Р 152-Apr npu иммунизации лабораторных животных вы-, зывает образование комплементсвязывакщих и вируснейтралиэующих антител.

Патогенные свойства. Вызывают

tìåðòåëüíóþ инфекцию у новорожденных белых мьнаей при внутримозговом и под.кожном заражении, у новорожденных белых крыс при внутримозговом, подкожном и внутрибрюшинном заражении, у 2-недельных и взрослых белых мышей при внутримозговом заражении, у однодневных цыплят при внутримозговом и подкожном заражении. Вызывает гибель 9-дневных куриных эмбрионов при заражении в аллантоисную полость. 20

Для получения диагностических препаратов штамм Virus Tjutoc Р 152Apr размножают, например, путем внутримозгового заражения новорожденных белых мышей. 25

В этом случае диагностический антиген готовят путем сахарозоацетоно, вой экстракции мозга новорожденных белых мышей, взятого на высоте кли.нических проявлений заболеваний. 30

П р и М е р. Лабораторные животные — взрослые белые мыши, самки.

Проводят пятикратную иммунизацию с интервалом в 7 дней, способ введения — внутрибрюшинный. Объем вводимбй вируссодержащей суспензии при первой и второй иммунизациях по 0,2 мл, при третьей, четвертой и пятой — по

0,25 мл. Суспенэию перед введением смешивают с равным объемом полного адьюванта Фрейнда.

Через сутки после пятой иммунизации внутрибрюшинно вводят асцит (Sarcoma-180 TG) .

Спустя 13 дней после введения асцита получают ИАЕ, содержащую комплементсвязывающие антитела в титре

1/64-1/128 (в PCK) . ИАЖ не теряет активности и специфичности после лиофилизации.

Предложенный штамм находит применение для получения эталонных диагностических препаратов, предназначенных для идентификации вновь выделенных штаммов.

Штамм .Virus Т3и8ос Р 152-Арг (хранится в Государственной коллекции вирусов Института вирусологии им.

Д.И. Ивановского под номером ГКВ

Р 1616) для получения диагностических препаратов.