Патенты автора Кристиан КЛАЙН (CH)
Настоящее изобретение относится к области биоинженерии и иммунологии. Предложен способ получения биспецифического антигенсвязывающего белка, включающего модифицированную тяжелую цепь первого антитела, которое специфически связывается с первым антигеном, С-конец которой дополнительно слит с N-концом VH-CH1 доменов первого антитела через пептидный коннектор; две легкие цепи первого антитела; модифицированную тяжелую цепь второго антитела, которое специфически связывается со вторым антигеном, в котором СН1-домен заменен на CL-домен второго антитела и С-конец дополнительно слит с N-концом VH-CL второго антитела через пептидный коннектор; и две модифицированные легкие цепи второго антитела, в которых CL-домен заменен на СН1-домен второго антитела, причем СН3-домены тяжелых цепей соприкасаются друг с другом по принципу "выступ-впадина" ("knobs-into-holes"). Также рассмотрена клетка-хозяин для получения указанного биспецифического антитела. Данное изобретение обеспечивает получение стабильных биспецифических антител с высоким выходом и может найти дальнейшее применение в разработке терапевтических тетравалентных антител. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 4 ил.
ПОЛИСПЕЦИФИЧНЫЕ АНТИТЕЛА, ВКЛЮЧАЮЩИЕ АНТИТЕЛА ПОЛНОЙ ДЛИНЫ И ОДНОЦЕПОЧЕЧНЫЕ ФРАГМЕНТЫ FAB // 2598248
Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии. Предложен способ получения полиспецифичного антитела, включающего полноразмерное антитело, специфически связывающееся с первым антигеном и состоящее из двух тяжелых цепей антитела и двух легких цепей антитела, и один или несколько одноцепочечных фрагментов Fab, связывающихся с одним или несколькими дополнительными антигенами, в котором указанные одноцепочечные Fab-фрагменты соединены с указанным полноразмерным антителом через пептидный коннектор с С-конца тяжелой или легкой цепи указанного полноразмерного антитела, причем пептидный коннектор имеет структуру (GxS)n или (GxS)Gm, где G = глицин, S = серин, и (х = 3, n = 3, 4, 5 или 6 и m = 0, 1, 2 или 3) или (х = 4, n = 2, 3, 4 или 5 и m = 0, 1, 2 или 3). Полиспецифические антитела, полученные рассмотренным способом, обладают хорошей стабильностью и низкой склонностью к агрегации. В этой связи способ по настоящему изобретению может найти применение в приготовлении лекарственных средств. 4 з.п. ф-лы, 15 ил., 3 табл., 6 пр.
Настоящее изобретение относится к области медицины, биотехнологии и иммунологии. Предложено применение антитела анти-CD20 типа I для лечения рака, экспрессирующего CD20, а также применение для получения лекарственного средства, предназначенного для лечения рака, экспрессирующего CD20, отличающееся тем, что указанное антитело анти-CD20 типа I вводят совместно с антителом анти-CD20 типа II, где антителом анти-CD20 типа I является ритуксимаб, а антителом анти-CD20 типа II - гуманизированное антитело B-LyI, причем по меньшей мере 40% или более олигосахаридов Fc областей антител анти-CD20 типа II в составе композиции являются нефукозилированными, а раком, экспрессирующим CD20, является не-Ходжкинская лимфома. Применение антитела анти-CD20 типа I совместно с антителом анти-CD20 типа II по настоящему изобретению обеспечивает долговременное подавление роста опухоли по сравнению с применением указанных антител в отдельности. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 3 ил., 2 табл., 3 пр.
Группа изобретений раскрывает комбинации антитела к CD20 типа II, которое представляет собой созданное с помощью гликоинженерии гуманизированное антитело B-Ly1, где гуманизированное антитело B-Ly1 имеет вариабельную область тяжелой цепи (VH) SEQ ID No. 7 и вариабельную область легкой цепи (VL) SEQ ID No. 20, и химиотерапевтических средств, выбранных из группы, включающей циклофосфамид, винкристин и доксорубицин, предназначенные для лечения B-клеточной неходжкинской лимфомы, а также применение вышеуказанного антитела для приготовления лекарственного средства. Группа изобретений эффективна в лечении B-клеточной неходжкинской лимфомы. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 4 ил., 3 табл., 4 пр.
ДВУХВАЛЕНТНЫЕ БИСПЕЦИФИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА // 2587616
Изобретение относится к иммунологии и представляет собой способ получения двухвалентного биспецифического антитела, где указанное антитело содержит первую легкую цепь и первую тяжелую цепь антитела, специфически связывающегося с первым антигеном; и вторую легкую цепь и вторую тяжелую цепь антитела, специфически связывающегося со вторым антигеном, в котором вариабельные домены VL и VH второй легкой цепи и второй тяжелой цепи заменены друг на друга, где СН3-домен одной тяжелой цепи и СН3-домен другой тяжелой цепи соприкасаются друг с другом поверхностями, которые изменены для активации формирования двухвалентного биспецифического антитела. Способ включает следующие этапы: трансформацию клетки-хозяина экспрессионными векторами и культивирование клетки-хозяина в условиях, которые позволяют синтезировать указанное двухвалентное биспецифическое антитело, и выделение указанного двухвалентного биспецифического антитела из культуры. Изобретение позволяет эффективно получать биспецифические антитела к двум антигенам. 1 з.п. ф-лы, 15 ил., 4 пр.
3D-FACS-АНАЛИЗ-ADCC NK-КЛЕТОК // 2577702
Группа изобретений относится к медицине, а именно к биотехнологии, и может быть использована для выявления in vitro антитела, обладающего эффекторной функцией. Для этого смешивают естественные клетки-киллеры и опухолевые клетки, добавляют примерно по 104 клеток на 200 мкл в лунки многолуночного планшета. Затем проводят центрифугирование многолуночного планшета и тем самым индукцируют образования трехмерного сфероида. Добавляют каждого из полученных антител в индивидуальную лунку многолуночного планшета и инкубируют в течение промежутка времени, составляющего от примерно 20 до примерно 72 ч. Анализируют клетки в лунках многолуночного планшета с помощью клеточного сортера с возбуждением флуоресценции и тем самым оценивают эффекторную функцию антитела. Выявляют антитела, обладающие эффекторной функцией, при применении которого обнаружено, что соотношение мертвых к жизнеспособным клеткам превышает 1. Группа изобретений относится также к применению трехмерного сфероида или агрегата, который содержит опухолевые клетки и естественные клетки-киллеры, для оценки эффекторной функции комбинации антител. 3 н. и 9 з.п. ф-лы, 7 ил., 5 пр.
Группа изобретений относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использована для получения лекарственного средства для лечения рака. Для этого применяют нефукозилированное анти-CD20 антитело с количеством фукозы 60% или менее от общего количества олигосахаридов (сахаров) в положении Asn297 в комбинации с бендамустином. При этом раком является рак, экспрессирующий CD20, и указанное антитело включает аминокислотную последовательность вариабельной области тяжелой цепи (VH) SEQ ID NO: 7 и аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (VL) SEQ ID NO: 20, также предложен способ лечения рака, экспрессирующего CD20. Группа изобретений обеспечивает лечение рака у пациентов за счет синергетического действия комбинации нефукозилированного анти-CD20 антитела с бендамустином. 2 н. и 8 з.п. ф-лы, 3 табл., 1 ил.
ДВУХВАЛЕНТНЫЕ БИСПЕЦИФИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА // 2575066
Изобретение относится к области биохимии, в частности к cпособу получения двухвалентного биспецифического антитела, который включает трансформацию клетки-хозяина векторами, содержащими молекулы нуклеиновых кислот, кодирующих первую легкую цепь и первую тяжелую цепь двухвалентного биспецифического антитела, и векторами, содержащими молекулы нуклеиновых кислот, кодирующих вторую легкую цепь и вторую тяжелую цепь двухвалентного биспецифического антитела, культивирование клетки-хозяина в условиях, которые обеспечивают синтез молекулы двухвалентного биспецифического антитела и выделение молекулы двухвалентного биспецифического антитела из указанной культуры. При этом указанное антитело содержит легкую цепь и тяжелую цепь антитела, специфически связывающегося с первым антигеном и легкую цепь и тяжелую цепь антитела, специфически связывающегося со вторым антигеном, в котором CL- и СН1-домены константных областей заменены друг на друга. Изобретение позволяет повышать выход правильного биспецифического антитела путем увеличения уровня правильной гетеродимеризации тяжелых цепей дикого типа и модификацией полученных в результате кроссинговера тяжелых цепей. 1 з.п. ф-лы, 15 ил., 4 пр.
БИСПЕЦИФИЧЕСКИЕ АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЕ БЕЛКИ // 2573914
Изобретение относится к области биотехнологии и представляет собой способ получения биспецифического антигенсвязывающего белка, содержащего: две легкие цепи и две тяжелые цепи полноразмерного антитела, включающего два Fab-фрагмента и специфически связывающегося с первым антигеном; и два дополнительных Fab-фрагмента антитела, которое специфически связывается со вторым антигеном, где указанные дополнительные Fab-фрагменты оба слиты посредством пептида-коннектора с С- или N-концами тяжелых цепей, указанных в подпункте а); где пептидом-коннектором является (Gly-x-Ser)n, или (Gly-x-Ser)nGlym(х=3, n=3, 4, 5 или 6 и m=0,1, 2 или 3), или (х=4, n=2,3, или 5 и m=0, 1, 2 или 3) и где в Fab-фрагментах осуществлены следующие модификации: I) в обоих Fab-фрагментах, указанных в подпункте а), или в обоих Fab-фрагментах, указанных в подпункте б), вариабельные домены VL и VH заменены друг на друга и/или константные домены CL и СН1 замены друг на друга; II) в обоих Fab-фрагментах, указанных в подпункте а), вариабельные домены VL и VH заменены друг на друга и константные домены CL и СН1 заменены друг на друга, и в обоих Fab-фрагментах, указанных в подпункте б), вариабельные домены VL и VH заменены друг на друга или константные домены CL и СН1 заменены друг на друга; III) в обоих Fab-фрагментах, указанных в подпункте а), вариабельные домены VL и VH заменены друг на друга или константные домены CL и СН1 заменены друг на друга, и в обоих Fab-фрагментах, указанных в подпункте б), вариабельные домены VL и VH заменены друг на друга и константные домены CL и СН1 заменены друг на друга; IV) в обоих Fab-фрагментах, указанных в подпункте а), вариабельные домены VL и VH заменены друг на друга и в обоих Fab-фрагментах, указанных в подпункте б), константные домены CL и СН1 заменены друг на друга; или V) в обоих Fab-фрагментах, указанных в подпункте а), константные домены CL и СН1 заменены друг на друга и в обоих Fab-фрагментах, указанных в подпункте б), вариабельные домены VL и VH заменены друг на друга; а способ включает этапы: а) трансформацию клетки-хозяина экспрессионными векторами, которые содержат молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие указанный биспецифический антигенсвязывающий белок; б) культивирования клетки-хозяина в условиях, которые позволяют синтезировать молекулу этого биспецифического антигенсвязывающего белка; и в) выделение молекулы указанного биспецифического антигенсвязывающего белка из указанной культуры. Изобретение позволяет получить биспецифическое антитело с указанной выше структурой. 6 з.п. ф-лы, 7 ил., 3 табл., 3 пр.
ТРИ- ИЛИ ТЕТРАСПЕЦИФИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА // 2570633
Изобретение относится к области биотехнилогии. Описан способ получения триспецифического или тетраспецифического антитела, где триспецифическое или тетраспецифическое антитело содержит: а) легкую цепь и тяжелую цепь полноразмерного антитела, обладающего способностью специфически связываться с первым антигеном; и б) модифицированную легкую цепь и модифицированную тяжелую цепь полноразмерного антитела, обладающего способностью специфически связываться со вторым антигеном, в котором вариабельные домены VL и VH заменены друг на друга и/или в котором константные домены CL и СН1 заменены друг на друга; и в) в котором от одного до четырех одноцепочечных антител, обладающих способностью специфически связываться с одним или двумя дополнительными антигенами, слиты посредством пептида-коннектора с С- или N-концом легких цепей или тяжелых цепей, указанных в подпункте а) и/или б); где способ включает этапы: i) трансформацию клетки-хозяина векторами экспрессии, включающими молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие легкую цепь и тяжелую цепь полноразмерного антитела, которое специфически связывает первый антиген; и модифицированную легкую и тяжелую цепь полноразмерного антитела, где вариабельные домены VL и VH заменены один на другой, и/или константные домены CL и СН1 замены один на другой, и где одно до четырех одноцепочечных антител слиты посредством пептида-коннектора с С- или N- терминальными концами легких цепей или тяжелых цепей (а) и/или (б); ii) культивирование клетки-хозяина при условиях, которые позволяют синтез указанной молекулы антитела; и iii) выделение указанной молекулы антитела из указанной культуры. Также представлена клетка-хозяин для получения указанных триспецифического или тетраспецифического антитела, содержащая векторы экспрессии, включающие молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие указанные антитела. Изобретение позволяет получить триспецифическое или тетраспецифическое антитело с высоким выходом за счет снижения неправильных спариваний цепей антитела. 2 н. и 11 з.п. ф-лы, 11 ил., 3 табл., 3 пр.
АНТИТЕЛА ПРОТИВ АНГИОПОЭТИНА-2 ЧЕЛОВЕКА // 2569107
Изобретение относится к области биохимии, в частности к антителам против ангиопоэтина-2 человека, кодирующим их нуклеиновым кислотам и клеткам-хозяевам. Антитело отличается тем, что не связывается с ангиопоэтином-1 человека. Также представлена фармацевтическая композиция, содержащая антитело против ангиопоэтина-2 человека, предназначенная для лечения рака, предупреждения метастазирования или лечения сосудистых заболеваний. Изобретение позволяет повысить специфичность, понизить токсичность и улучшить фармакокинетические свойства антител против ангиопоэтина-2 человека. 5 н. и 8 з.п. ф-лы, 13 ил., 10 табл., 9 пр.
ДВУХВАЛЕНТНЫЕ БИСПЕЦИФИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА // 2547615
Изобретение относится к области биохимии, в частности к cпособу получения двухвалентного биспецифического антитела, который включает трансформацию клетки-хозяина векторами, содержащими молекулы нуклеиновых кислот, кодирующих первую легкую цепь и первую тяжелую цепь двухвалентного биспецифического антитела, и векторами, содержащими молекулы нуклеиновых кислот, кодирующих вторую легкую цепь и вторую тяжелую цепь двухвалентного биспецифического антитела, культивирование клетки-хозяина в условиях, которые обеспечивают синтез молекулы двухвалентного биспецифического антитела и выделение молекулы двухвалентного биспецифического антитела из указанной культуры. При этом указанное антитело содержит первую легкую цепь и первую тяжелую цепь антитела, специфически связывающегося с первым антигеном, и вторую легкую цепь и вторую тяжелую цепь антитела, специфически связывающегося со вторым антигеном, в котором вариабельные домены VL и VH второй легкой цепи и второй тяжелой цепи заменены друг на друга и константные домены CL и СН1 второй легкой цепи и второй тяжелой цепи заменены друг на друга. Изобретение позволяет повышать выход правильного биспецифического антитела путем увеличения уровня правильной гетеродимеризации тяжелых цепей дикого типа и модификацией полученных в результате кроссинговера тяжелых цепей. 1 з.п. ф-лы, 31 ил., 3 табл., 4 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии. Описаны биспецифические антитела против фактора роста сосудистого эндотелия человека VEGF и ангиопоэтина-2 человека ANG-2, способы их получения, фармацевтические композиции, содержащие указанные антитела, и их применения. 6 н. и 7 з.п. ф-лы, 26 ил., 15 табл., 19 пр.
КОМБИНИРОВАННАЯ ТЕРАПИЯ АНТИТЕЛАМИ АНТИ-CD20 ТИПА II В СОЧЕТАНИИ С АКТИВНЫМ АГЕНТОМ АНТИ- BCL-2 // 2541805
Группа изобретений относится к комбинации антитела анти-СD20 типа II и анти-Всl-2 активного агента для лечения рака, прежде всего рака, экспрессирующего CD20, где указанное антитело анти-CD20 типа II является гуманизированным антителом B-Lyl и где указанный активный агент анти-Bcl-2 является ингибитором связывания белка Bcl-2, который действует посредством связывания белка Bcl-2 и таким образом разрушает комплекс Bad/Bcl-2 с IC50 ингибиторной активности анти-Bcl-2 1 мкМ или менее, а также к применению антитела анти-СD20 типа II для получения лекарственного средства, предназначенного для лечения рака, прежде всего рака, экспрессирующего CD20, в комбинации с анти-Всl-2 активным агентом. Группа изобретений эффективна в лечении рака, прежде всего рака, экспрессирующего CD20, в комбинации с анти-Всl-2 активным агентом. 2 н. и 8 з.п. ф-лы, 3 ил., 2 табл., 4 пр.
Группа изобретений раскрывает фармацевтическую композицию и набор, включающие антитела анти-CD20 типа II и ингибитор протеасомы, предназначенные для применения в лечении рака, экспрессирующего CD20. Также группа изобретений относится к применению антител анти-CD20 типа II для получения лекарственного средства, предназначенного для лечения рака, экспрессирующего CD20, в комбинации с ингибитором протеасомы. Группа изобретений характеризуется использованием антител, обладающих повышенной антитело-зависимой клеточно-опосредованной цитотоксичностью и эффективностью в терапии раковых заболеваний. 4 н. и 9 з.п. ф-лы, 3 ил., 4 табл., 3 пр.
