Патенты автора Степаненко Василий Николаевич (RU)
Изобретение относится к биотехнологии. Предложены гибридный белок BDPA-1, являющийся рекомбинантным аналогом домена Б белка А из Staphylococcus aureus и обладающий сорбционной активностью по отношению к иммуноглобулинам, и его фрагмент, нуклеиновая кислота, кодирующая гибридный белок BDPA-1, рекомбинантная плазмидная ДНК для экспрессии указанного гибридного белка, клетка, обеспечивающая продукцию гибридного белка BDPA-1, способ выделения BDPA-1, конъюгат сорбент-белок, а также способ получения сорбента. Изобретение позволяет получить гибридный белок BDPA-1 с электрофоретической чистотой не менее 96%, а также получить на основе указанного белка аффинного сорбента для выделения иммуноглобулинов класса G, обладающего динамической емкостью до 55 мг IgG на 1 мл сорбента и выдерживающего до 40 циклов использования и санации без существенной потери ёмкости, а именно менее 10%. 8 н. и 9 з.п. ф-лы, 25 ил., 3 табл., 7 пр.
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЩЕЛОЧНОЙ ФИБРИНОЛИТИЧЕСКОЙ ПРОТЕАЗЫ, ОБРАЗУЕМОЙ МИКРОМИЦЕТАМИ Aspergillus ochraceus // 2782586
Изобретение относится к области биотехнологии и представляет собой способ получения рекомбинантной щелочной фибринолитической протеазы, образуемой микромицетами Aspergillus ochraceus. В результате получают высокоочищенный ферментный препарат в форме порошка белого либо кремового цвета с выходом до 250 мг с 1 л экспрессионной культуры. 1 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к генной инженерии и в частности к рекомбинантному белку L-HEP-HG6-CBD, рекомбинантному белку, который используется для получения рекомбинантного белка L-HEP-HG6-CBD, рекомбинантной плазмидной ДНК pET32b-L-HEP-HG6-CBD для экспрессии рекомбинантного белка, штамму Escherichia coli BL 21(DE3)/L-HEP-HG6-CBD, который продуцирует рекомбинантный белок, а также способу получения рекомбинантного белка L-HEP-HG6-CBD. Технический результат данного изобретения заключается в получении клеток штамма-продуцента рекомбинантного белка, обладающего каталитической активностью лёгкой цепи энтеропептидазы человека и способного к иммобилизации на металл-хелатных и хитиновых носителях без потери каталитической активности. 5 н. и 11 з.п. ф-лы, 4 пр., 3 ил.
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному получению биологически активных полипептидов, которые обладают модулирующим действием на участвующие в генерации болевого сигнала клеточные рецепторы, и может быть использовано для получения пептида РТ6 в системе экспрессии Е. coli. Изобретение обеспечивает высокоэффективную продукцию пептида РТ6, модулирующего активность пуринергических рецепторов, в клетках Е. coli BL21(DE3) с высоким выходом. 7 ил.
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному получению терапевтических белков и может быть использовано для получения активного фрагмента (1-34) эндогенного человеческого паратиреоидного гормона. Сконструирована рекомбинантная плазмидная ДНК pTrx-TEVrs-РТН, которая обеспечивает синтез гибридного белка, содержащего последовательность тиоредоксина и терипаратида в клетках Escherichia coli. Путём трансформации штамма E.coli BL 21(DE3) плазмидой pTrx-TEVrs-РТН получают штамм- продуцент гибридного белка Trx-TEVrs-РТН. Разработан способ получения рекомбинантного терипаратида, предусматривающий получение и культивирование продуцента гибридного белка, содержащего терипаратид, с последующим выделением и расщеплением указанного гибридного белка. Изобретение позволяет получить рекомбинантный терипаратид с высоким выходом и по упрощённой технологии. 4 н. и 3 з.п. ф-лы, 4 ил., 3 пр.
Изобретение относится к клеточным технологиям и может быть использовано для рекомбинантного получения фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) человека. Клеточную линию huFSHKKc6 получают путем трансформации клеток huFSHIK экспрессионной плазмидой длиной 7719 п.о., состоящей из гена устойчивости PuroR с SV40 polyA, укороченного 3'LTR HIV-1, гена устойчивости AmpR, промотора AmpR, ориджина репликации SV40 и pBR322, промотора NP гена р53 человека, pgk - конститутивного промотора гена фосфоглицераткиназы, синтетической нуклеотидной последовательности, кодирующей полноразмерную альфа-субъединицу ФСГ человека, сигнала терминации трансляции, состоящего из 3 пар оснований и консенсусной сигнальной последовательности Козак. Способ получения рекомбинантного ФСГ человека включает культивирование клеток huFSHKKc6 в бессывороточной среде, выделение из образующейся культуральной жидкости ФСГ человека и его хроматографическую очистку путем последовательного проведения ионообменной, аффинной и гидрофобной хроматографии. Изобретение обеспечивает получение высокопродуктивной и стабильно секретирующей ФСГ линии клеток. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 7 ил., 6 пр.
Настоящее изобретение относится к биохимии, в частности к рекомбинантной плазмидной ДНК pER-АРНС3, обеспечивающей синтез гибридного полипептида, содержащего АРНС3 и мини-интеин Ssp DnaB, в клетках Escherichia coli. Указанная плазмидная ДНК содержит BsaBI/Eco0109I-фрагмент ДНК плазмиды pTWIN-1, усилитель трансляции гена 10 фага Т7, NdeI/BamHI-фрагмент ДНК, содержащий ген мини-интеина Ssp DnaB и адаптированную к этим сайтам последовательность гена рекомбинантного АРНС3. Плазмида также содержит ген β-лактамазы, детерминирующий устойчивость трансформированных плазмидой pER-АРНС3 клеток E. coli к пенициллиновым антибиотикам, в качестве генетического маркера и уникальные сайты узнавания рестрикционных эндонуклеаз. Настоящее изобретение также раскрывает штамм Escherichia coli C3030/pER-APHC3, продуцирующий указанный гибридный полипептид. Настоящее изобретение также раскрывает способ получения указанного рекомбинантного белка АРНС3, предусматривающий культивирование указанного штамма Escherichia coli C3030/pER-APHC3. Настоящее изобретение позволяет получить рекомбинантный АРНС3 с высоким выходом и по упрощенной технологии. 3 н.п. ф-лы, 4 ил., 4 пр.
Группа изобретений относится к области биотехнологии и может быть использована в медицине и фармацевтической промышленности. Разработан способ региоселективного химического N-концевого ПЭГилирования тимозина бета 4. Данным способом получен моноконъюгат ПЭГ с тимозином бета 4, обладающий улучшенными фармакокинетическими свойствами. Подтверждена модификация N-концевой альфа аминогруппы тимозина бета 4. Применение изобретения позволяет получить моноПЭГилированный тимозин бета 4 с высоким выходом. 2 н.п. ф-лы, 4 ил., 3 пр.
Группа изобретений относится к области биотехнологии и может быть использовано в медицине и фармацевтической промышленности. Разработан способ региоселективного химического N-концевого сиалирования тимозина бета 4. Указанным способом получен моноконъюгат полисиаловой кислоты с тимозином бета 4, обладающий улучшенными фармакокинетическими свойствами. Подтверждена модификация N-концевой альфа-аминогруппы тимозина бета 4. Применение группы изобретений позволяет получить моносиалированный тимозин бета 4, обладающий пролонгированной стабильностью в токе крови, с высоким выходом. 2 н.п. ф-лы, 4 ил., 3 пр.
Группа изобретений относится к области биотехнологии, в частности к области модификации белков, и описывает способ региоселективного химического N-концевого гексаилирования тимозина бета 4, а также моноконъюгат, полученный вышеописанным способом. Способ характеризуется тем, что растворяют ангидрид гексановой кислоты в многокомпонентном водно-органическом буфере с pH 3, обеспечивающим региоселективное гексаилирование и содержащем дезацетилтимозин бета 4, инкубируют его в течение 3 ч при 25°C, очищают методом ОФ ВЭЖХ и лиофилизуют. Моноконъюгат капроновой кислоты с тимозином бета 4 обладает улучшенными фармакокинетическими свойствами. Изобретение позволяет получить моногексаилированный тимозин бета 4 с высоким выходом и может быть использовано в медицине и фармацевтической промышленности.2 н.п. ф-лы, 4 ил., 3 пр.
Изобретение относится к области генной и белковой инженерии и представляет собой рекомбинантную плазмидную ДНК pER-TA1GyrA-AcSer, предназначенную для одновременного биосинтеза двух белков - гибридного полипептида, содержащего аминокислотную последовательность тимозина α1 человека и интеина, и фермента E. coli - сериновой ацетилтрансферазы, имеющая молекулярную массу 5,04 МДа. Плазмида состоит из BsaBI/NdeI-фрагмента ДНК плазмиды pTWTN-1, содержащего последовательность промотора Т7 и оператора lacO; NdeI/PstI-фрагмента ДНК, содержащего последовательность гибридного белка, включающего в себя адаптированную к этим сайтам последовательность гена рекомбинантного человеческого тимозина α1, последовательность интеина Мхе GyrA и последовательность хитинсвязывающего домена; PstI/NcoI-фрагмента ДНК, кодирующего ослабленную последовательность Шайна-Дальгарно и нестандартную в качестве старт-кодона аминокислоту валин; NcoI/XhoI-фрагмента ДНК, содержащего последовательность сериновой N-ацетилтрансферазы; фрагмента ДНК, содержащего в качестве генетического маркера ген β-лактамазы, детерминирующий устойчивость трансформированных плазмидой pER-TA1GyrA-AcSer клеток E. coli к пенициллиновым антибиотикам; ДНК фрагмента, содержащего последовательность, кодирующую точку начала репликации; ДНК фрагмента, кодирующего последовательность лактозного репрессора LacI. Изобретение относится также к штамму Escherichia coli С3030/pER-TA1GyrA-AcSer, продуцирующему гибридный полипептид, содержащий аминокислотную последовательность тимозина α1 человека и интеина, а также сериновую ацетилтрансферазу, полученному путем трансформации клеток штамма Escherichia coli С3030 рекомбинантной плазмидной ДНК pER-TA1GyrA-AcSer. Изобретение позволяет получить рекомбинантный человеческий тимозин альфа 1 с высоким выходом и по упрощенной технологии. 3 н.п. ф-лы, 2 ил., 3 пр.
Изобретение относится к области генной и белковой инженерии и представляет собой рекомбинантную плазмидную ДНК pER-TB4GyrA-AcSer, предназначенную для одновременного биосинтеза двух белков - гибридного полипептида, содержащего аминокислотную последовательность тимозина β4 человека и интеин, и фермента E. coli - сериновой ацетилтрансферазы. Плазмида имеет молекулярную массу 5,07 МДа и состоит из BsaBI/NdeI-фрагмента ДНК плазмиды pTWIN-1, содержащего последовательность промотора Т7 и оператора lacO; NdeI/PstI-фрагмента ДНК, содержащего последовательность гибридного белка, включающего в себя адаптированную к этим сайтам последовательность гена рекомбинантного человеческого тимозина β4, последовательность интеина Mxe GyrA и последовательность хитин-связывающего домена; PstI/NcoI-фрагмента ДНК, кодирующего ослабленную последовательность Шайна-Дальгарно и нестандартную в качестве старт кодона аминокислоту валин; NcoI/XhoI-фрагмента ДНК, содержащего последовательность сериновой N-ацетилтрансферазы; фрагмента ДНК, содержащего в качестве генетического маркера ген β-лактамазы, детерминирующий устойчивость трансформированных плазмидой pER-TA1GyrA-AcSer клеток E. coli к пенициллиновым антибиотикам; ДНК фрагмента, содержащего последовательность, кодирующую точку начала репликации; ДНК фрагмента, кодирующего последовательность лактозного репрессора LacI. Изобретение относится также к штамму Escherichia coli C3030/pER-TB4GyrA-AcSer, продуцирующему гибридный полипептид, содержащий аминокислотную последовательность тимозина β4 человека и интеин, а также сериновую ацетилтрансферазу, полученному путем трансформации клеток штамма Escherichia coli C3030 рекомбинантной плазмидной ДНК pER-TB4GyrA-AcSer. Изобретение позволяет получить рекомбинантный человеческий тимозин бета 4 с высоким выходом и по упрощенной технологии. 3 н.п. ф-лы, 2 ил., 3 пр.
Изобретения касаются векторной конструкции, штамма Escherichia coli, включающего такую векторную конструкцию, и способа получения рекомбинантного анальгетического пептида РТ1. Векторная конструкция получена на основе вектора pTWIN1 и содержит ген химерного белка DnaB-PT1, который состоит из хитин-связывающего домена из Bacillus circulans, интеина DnaB из Synechocystis sp. и анальгетического пептида РТ1. Охарактеризованный способ получения включает проведение контролируемой экспрессии гена химерного белка DnaB-PT1 в составе охарактеризованной векторной конструкции в штамме-продуценте Е. coli ER2566 с использованием в качестве индуктора изопропил-β-D-1-тиогалактопиранозида. Далее проводят лизис клеток, отделение растворимых компонентов, очистку химерного белка DnaB-PT1 с помощью аффинной хроматографии на хитиновом сорбенте, автокаталитическое расщепление химерного белка DnaB-PT1 и очистку пептида РТ1 с помощью обращенно-фазовой хроматографии. Представленная группа изобретений позволяет получить анальгетический пептид с высоким выходом для использования в медицинских целях. 3 н.п. ф-лы, 8 ил., 6 пр.
Группа изобретений относится к медицине и касается оксинтомодулина человека, ковалентно связанного с гомополимерным полисахаридом, содержащим 50 звеньев альфа-2,8 сиаловой кислоты, для лечения гипергликемии; лекарственного препарата для лечения или профилактики гипергликемии, содержащего в качестве активного вещества эффективное количество указанного оксинтомодулина человека; способа лечения и профилактики гипергликемии у пациента. Группа изобретений обеспечивает пролонгированный фармакологический эффект и высокую гипогликемическую активность по сравнению с немодифицированным оксинтомодулином. 4 н.п. ф-лы, 3 фиг., 1 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области генной и белковой инженерии и касается рекомбинантной плазмидной ДНК pER-Hir, кодирующей гибридный белок, способный к автокаталитическому расщеплению с образованием [Leu1, Thr2]-63-десульфатогирудина, штамму Escherichia coli ER2566/pER-Hir - продуценту указанного белка и способу получения генно-инженерного [Leu1, Thr2]-63-десульфатогирудина
Изобретение относится к области генной и белковой инженерии и может быть использовано для получения рекомбинантного эпидермального фактора роста человека
Изобретение относится к области генной и белковой инженерии и может быть использовано в медицине и фармацевтической промышленности
