Патенты автора Севастьянов Виктор Иванович (RU)

Изобретение относится к медицинской технике, а именно к области биотехнологии и регенеративной медицины, и может быть использовано при "выращивании" клеточно- и тканеинженерных конструкций, культивировании клеток, микроорганизмов, исследовании биосовместимости различных материалов, а также для изучения влияния различных факторов на эти процессы. Проточный биореактор включает резервуар с культуральной средой и перистальтические насосы, образующие систему циркуляции культуральной среды через культуральные камеры, разделенную на две части резервуаром с культуральной средой. В каждой из частей на выходе из резервуара размещен перистальтический насос. Каждая часть системы содержит по две подключенные параллельно друг другу культуральные камеры, следующие за перистальтическим насосом. Одна часть системы циркуляции после культуральных камер содержит последовательно установленные датчик давления, датчик содержания кислорода, датчик содержания углекислого газа, датчик рН и блок отбора проб. Другая часть системы циркуляции - оксигенатор, подключенный к баллону с газовой смесью. Осуществление изобретения обеспечивает возможность одновременного культивирования нескольких КИК и/или ТИК при оптимальном (экономном) расходе культуральной среды и постоянном контроле состояния культивируемых объектов. 8 ил, 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области биохимии, клеточной биологии и медицине, в частности к биополимерному материалу для клеточно-инженерных и тканеинженерных конструкций, а также способу его получения. Указанный материал обладает губчатой морфологией с системой взаимосвязанных макропор сечением от 60 до 310 мкм и представляет собой химически сшитый макропористый криоструктурат на основе уксуснокислого экстракта ткани животного, исключая человека, содержащий белковые и полисахаридные компоненты в массовом соотношении от 10:90 до 90:10. Для получения такого материала сначала готовят водный раствор с рН 5.0-7.0 и содержанием сухих веществ 2-4 мас.% из уксуснокислого экстракта ткани животного, исключая человека. Затем указанный раствор замораживают при температуре от -10 до -40°С в течение 2-24 ч с последующей лиофилизацией замороженного образца. После этого полученный макропористый криоструктурат обрабатывают 0.05-0.10М этанольным раствором спирторастворимого карбодимиида при 6-36°С в течение 12-36 ч и далее промывают этанолом. Полученный материал хранят в среде 70-96%-ного этанола до использования в качестве носителя для культивирования клеток. Настоящее изобретение позволяет упростить и удешевить способ для получения биополимерного материала для создания клеточно-инженерных и тканеинженерных конструкций. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 10 ил., 5 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к гепатологии, и может быть использовано для лечения острой печеночной недостаточности (ОПН) в эксперименте, после хирургической операции, в результате которой формируется критический дефицит функционирующей ткани печени. Получают несортированную фракцию мононуклеарных клеток костного мозга (ККМ) от крысы-донора и хранят в растворе «Кустодиол» при температуре 4-6°С в течение 3-18 часов. После чего из нее получают общую РНК (оРНК) и вводят однократно внутрибрюшинно интраоперационно экспериментальному животному - крысе после выполнения хирургической операции, в дозе 90-110 мкг/100 г веса животного. Способ обеспечивает возможность ускорения темпа, надежности и результативности лечения тяжелых и крайне тяжелых форм ОПН, развивающихся после хирургического иссечения критических объемов ткани печени, за счет повышения активности индукционного и регуляторного воздействия оРНК из свежевыделенных ККМ на процессы репаративной регенерации печени. 1 з.п. ф-лы, 2 ил., 4 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к гепатологии, и может быть использовано для коррекции хронической печеночной недостаточности в эксперименте. Получают несортированную фракцию мононуклеарных клеток костного мозга от крысы-донора и хранят ее в растворе «Кустодиол» при температуре 4-6°С в течение 3-18 часов. После чего получают из нее общую РНК и вводят внутрибрюшинно экспериментальному животному - крысе, у которой предварительно проведено моделирование хронической печеночной недостаточности, в дозе 90-110 мкг/100 г веса животного на 7 и 14 сутки после создания модели. Способ обеспечивает возможность сокращения сроков и повышения эффективности устранения функциональных и структурных нарушений в печени, в том числе гистологических признаков фиброза (формирование соединительнотканных септ в печени) при моделировании хронической печеночной недостаточности, за счет повышения мощности регенерационного процесса в печени, формирующегося в рамках неспецифического адаптационного синдрома клеточной системы на воздействия стресс-факторов слабой и умеренной биологической силы, за счет активации общей РНК из несортированных мононуклеарных клеток костного мозга, предварительно подвергнутых аутофагии при хранении в растворе «Кустодиол». 2 ил., 4 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к области биотехнологии. Способ включает нарезание суставного хряща свиньи фрагментами размером не более 0,5 см, измельчают и выделяют частицы размером от 100 мкм до 250 мкм. Далее выполняют децеллюляризацию: не менее 3 циклов охлаждения при температуре -196°С в течение одного часа с последующим оттаиванием при 35-40°С в течение одного часа, инкубацию в трех сменах фосфатного буфера (138 мМ NaCl, 2.67 мМ KCl, 1.47 мМ KH2PO4, 8.1 мМ Na2HPO4, рН 7,4 (ФБС), рН=7.4), объемом 20-500 мл, содержащего 0,1% додецилсульфат натрия и повышающуюся концентрацию Тритона X100 (1, 2 и 3%, соответственно), инкубацию в течение 12-48 часов при температуре 37°С в 1-10 мл раствора, содержащего 30-50 Е/мл ДНКазы I типа в буферном растворе, полученном из состава 10 мМ Трис-HCl, 2,5 мМ MgCl2, 0.5 мМоль CaCl2, дистиллированная вода до 1 л с рН 7.6. Далее производят отмывку частиц хряща путем ополаскивания 100-500 мл бидистиллированной воды, экспозиции в течение суток в 20-500 мл бидистиллированной воды при комнатной температуре и периодическом перемешивании со скоростью 10-500 об/мин в течение одного часа трижды на протяжении суток, экспозиции по меньшей мере 48 часов при комнатной температуре в бидистиллированной воде, содержащей ампициллин из расчета 10-20 мкг/мл и амфотерицин из расчета 1,5-2,0 мкг/мл, ополаскивания в 20-500 мл бидистиллированной воды. После чего частицы хряща высушивают и стерилизуют γ-облучением в дозе 1,5 Мрад с получением образцов искомого матрикса. Изобретение позволяет повысить полноту удаления клеток за счет микронизации и предлагаемого оригинального комплексного воздействия физических (замораживание/оттаивание), химических (смесь ионных и не ионных ПАВ) и биологических (ДНКаза) факторов, примененных в оптимальной комбинации, облегчить рецеллюляризацию матрикса клетками за счет увеличения площади для заселения при сохранении объема и упрощении наблюдения за ней за счет увеличения площади адгезированных поверхностей матрикса путем его предварительной микронизации. 2 з.п. ф-лы, 7 ил., 1 табл., 7 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной и клинической медицине. Не менее чем за 50-58 часов до выполнения хирургической операции из костного мозга донора выделяют мононуклеарную фракцию клеток костного мозга. Затем из полученной фракции выделяют суммарную РНК и вводят ее экспериментальному животному - крысе внутрибрюшинно или внутривенно в дозе 50-60 мкг/100 г веса экспериментального животного двукратно, сначала за 44-52 часа до выполнения операции, а затем через 3-4 часа после нее. Способ позволяет сократить сроки лечения или профилактики острой печеночной недостаточности при одновременном повышении эффективности, профилактике развития летальных исходов путем заблаговременного обеспечения у оперируемого пациента требуемого уровня активации митотической и пролиферативной активности клеток. 3 з.п. ф-лы, 1 табл, 4 ил.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к получению тканеспецифического матрикса для тканевой инженерии паренхиматозного органа млекопитающего. Способ включает получение донорского материала в виде донорского паренхиматозного органа или его части, дальнейшую фрагментацию донорского материала, формируя фрагменты размером от 10 мм до 15 мм, замораживание фрагментов и их последующее оттаивание, первоначальное измельчение фрагментов, получая частицы с размером от 0,5 мм до 5 мм. Затем осуществляют децеллюляризацию, лиофилизацию и замораживание измельченных частиц, последующее измельчение замороженных частиц до размера в диапазоне от 50 до 300 мкм с получением образцов искомого матрикса. Изобретение позволяет расширить арсенал технических средств. 2 н. и 19 з.п. ф-лы, 7 ил., 4 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к гепатологии, трансплантологии, и может быть использовано для коррекции печеночной недостаточности у субъекта. Для этого применяют суммарную РНК, выделенную из мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток костного мозга млекопитающего. Изобретение позволяет повысить эффективность лечения печеночной недостаточности и предупредить развитие осложнений, связанных с применением биотехнологических методов коррекции и профилактики печеночной недостаточности стволовыми/прогениторными клетками. 2 з.п. ф-лы, 2 табл., 4 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к гепатологии, трансплантологии и может быть использовано для лечения печеночной недостаточности. Для этого выделяют из костного мозга донора мононуклеарную фракцию клеток. Затем после их культивирования выделяют из них фракцию мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток костного мозга (ММСК КМ). После чего из полученной фракции выделяют суммарную РНК ММСК КМ и вводят ее пациенту внутрибрюшинно или в паренхиму печени в дозе 1-3 мг в сутки, трехкратно, с интервалом сначала 1-3 суток, а затем с интервалом 2-5 суток. Изобретение позволяет повысить эффективность лечения печеночной недостаточности и предупредить развитие осложнений, связанных с применением биотехнологических методов коррекции и профилактики печеночной недостаточности стволовыми/прогениторными клетками. 4 з.п. ф-лы, 2 табл., 4 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к гепатологии, трансплантологии, и может быть использовано для лечения печеночной недостаточности в эксперименте. Для этого выделяют из костного мозга крысы-донора мононуклеарную фракцию клеток. Затем после их культивирования выделяют из них фракцию мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток костного мозга (ММСК КМ). Далее из полученной фракции выделяют суммарную РНК ММСК КМ. Полученную РНК вводят внутрибрюшинно или в паренхиму печени в дозе 15-45 мкг на 100 г веса крысы с индуцированной печеночной недостаточностью. Введение осуществляют по меньшей мере трехкратно с интервалом 1-3 суток между первым и вторым введением и далее через 2-5 суток между последующими введениями. Способ обеспечивает многократное использование полученного препарата, предупреждает осложнения, связанные с применением стволовых/прогениторных клеток, индуцируя в поврежденной печени процесс ускоренной и эффективной восстановительной регенерации. 1 пр., 4 ил., 2 табл.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается моделирования тяжелой хронической печеночной недостаточности. Способ включает подкожное введение крысе 60% масляного раствора CCl4. На первом этапе моделирования раствор вводят по следующей схеме: сначала по 0,5 мл на 100 г веса животного 2 раза в неделю в течение 2 –х недель с интервалом 3-4 дня, а затем по 0,3 мл на 100 г веса животного 2 раза в неделю с интервалом 3-4 дня также в течение 2-х недель. На втором этапе в течение последующих трех недель продолжают введение 60% масляного раствора CCl4 в дозе 0,5 мл на 100 г веса 1 раз в неделю. При этом на втором этапе за сутки до введения раствора внутрибрюшинно вводят 1 мл неполного адъюванта Фрейнда. Способ обеспечивает создание модели тяжелой печеночной недостаточности без спонтанной реверсии биохимических и гистологических признаков повреждения печени за счет стабильного уменьшения массы жизнеспособных клеток, образования печеночного аутоантигена и торможения на этом фоне процессов восстановительной регенерации в печени при индукции аутоиммунного воспаления. 13 ил., 1 табл.

Изобретение относится к медицине, клеточной трансплантологии, гепатологии. Проводят имплантацию в паренхиму печени клеточно-инженерной конструкции (КИК) с последующим назначением антикоагулянтов и антиагрегантов в профилактической дозе. При этом сначала в течение 8-12 ч при 4°С инкубируют матрикс из децеллюляризированной донорской печени млекопитающего в физиологическом растворе, забуференном фосфатами и имеющем следующий состав: 138 мМ NaCl, 2,67 мМ KCl, 1,47 мМ KH2PO4, 8,1 мМ Na2HPO4, дистиллированная вода до 1 л и содержащем фибронектин и ламинин по 10 мкг/мл, с pH 7,4. Соотношение объемов матрикса и физраствора составляет 1:1. Затем на матриксе в течение 2-4 сут проводят сокультивирование свежевыделенных аллогенных клеток печени и предварительно культивированных аллогенных или аутологичных мезенхимальных стволовых клеток костного мозга при соотношении клеток костного мозга к клеткам печени от 1:1 до 1:10, обеспечивая прикрепление клеток в количестве 2×106-15×106 на 1 см3 матрикса. Общий объем матрикса с прикрепленными клетками составляет не менее 0,05 см3. Перед имплантацией получают КИК, смешивая матрикс с прикрепленными к нему клетками и биополимерным гетерогенным коллагенсодержащим гидрогелем в объемном соотношении 3:1. В частном случае матрикс получают из децеллюляризированной донорской печени человека. Матрикс может иметь размеры частиц от 200 до 700 мкм, размеры пор не более 50 мкм, суммарную пористость 70-85%. В качестве гетерогенного биосовместимого биодеградируемого геля может быть использован сферогель. Способ позволяет улучшить результаты лечения печеночной недостаточности путем активизации двухсторонних взаимодействий между имплантированными КИК как готовыми гепатоподобными структурами и паренхимой поврежденной печени реципиента с ускоренной интеграцией их с поврежденной печенью. 3 з.п. ф-лы, 5 ил.
Изобретение относится к медицине, а именно к колопроктологии, и может быть использовано для восстановления запирательного аппарата прямой кишки. Для этого в мягкие ткани параанальной области однократно вводят трансплантат, содержащий клеточную массу аутологичного костномозгового пунктата. В состав вводимого трансплантата включают также биодеградируемый гетерогенный гидрогель Сферо®ГЕЛЬ медиум. Соотношение объёма вносимой клеточной массы к объёму гидрогеля Сферо®ГЕЛЬ медиум составляет 1:1. После этого осуществляют воздействие на эту область двуполярным симметричным флюктуирующим током курсом 10 ежедневных процедур. При этом один электрод располагают на поясничном отделе позвоночника, а второй - в области ануса. Силу тока постепенно повышают до 5-10 мА до появления видимого сокращения мышц. Такое выполнение способа обеспечивает восстановление мышечных структур запирательного аппарата прямой кишки, повышение эффективности аутомиелотерапии и снижение травматичности при лечении данной патологии в результате повышения жизнеспособности вводимой клеточной массы и стимуляции регенеративных процессов в зоне введения в течение необходимого срока для восстановления тканей. 1 пр.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и биотехнологии и может быть использовано для стимуляции регенерации мышечной ткани в эксперименте. Для этого лабораторному животному в область раневого дефекта мышечной ткани вводят клеточно-гелевый комплекс, состоящий из клеточной массы костного мозга и биодеградируемого гетерогенного гидрогеля Сферо®ГЕЛЬ медиум. Соотношение объема вносимой клеточной массы и объема гидрогеля Сферо®ГЕЛЬ составляет 1:1. Способ позволяет повысить эффективность лечения при травматическом поражении мышечной ткани, снизить травматичность метода и вероятность иммунной реакции на введение препаратов при его простоте. 6 ил.

Изобретение относятся к медицине, хирургии, трансплантологии. Матрикс из децеллюляризированной донорской печени млекопитающего в объеме 1:1, в течение 8-12 часов, при температуре 4°C инкубируют в растворе с рН 7,4. Состав раствора: 138 мМ NaCl, 2,67 мМ KCl, 1,47 мМ KH2PO4, 8,1 мМ Na2HPO4, фибронектин и ламинин по 10 мкг/мл, дистиллированная вода до 1л. Проводят сокультивирование клеток печени и стволовых клеток костного мозга в течение 2-4 суток количестве 2×106-15×106 на 1 см матрикса. Матрикс с клетками объемом не менее 0,05 см3 смешивают с коллагенсодержащим гидрогелем в объеме 3:1. Размеры частиц матрикса от 200 до 700 мкм, пор не более 50 мкм, пористость 70-85%. В паренхиму печени имплантируют полученную клеточно-инженерную конструкцию. Антикоагулянты применяют в профилактической дозе. Способ позволяет улучшить результаты лечения пациента с печеночной недостаточностью за счет активизации двухсторонних взаимодействий между имплантированной клеточно-инженерной конструкции и паренхимой поврежденной печени реципиента. 3 з.п. ф-лы, 3 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к клеточной трансплантологии, и может быть использовано при изготовлении матриксов и тканеинженерных конструкций. Для получения тканеспецифического матрикса выполняют перфузионную отмывку паренхиматозного органа и его децеллюляризацию. При этом за 60-120 минут до перфузионной отмывки донорского органа проводят профилактику внутрисосудистой агрегации клеточных элементов крови и нарушений микроциркуляции путем внутримышечного или внутривенного введения донору дезагреганта или дезагрегантов (гепарин и трентал). Далее осуществляют перфузию органа путем введения в его сосудистое русло физиологического раствора забуференного фосфатами, полученного из следующего состава: 138 мМ NaCl, 2,67 мМ KCl, 1,47 мМ KH2PO4, 8,1 мМ Na2HPO4, дистиллированная вода до 1 л, и содержащего 1% сывороточного альбумина и 10-15% глицерина или 10-15% диметилсульфоксида, с рН 7,4 в объеме, равном двойному объему сосудистого русла органа при перфузионном давлении в его артериальной системе 100-120 мм ртутного столба. Затем децеллюляризированный орган измельчают до размера частиц от 0,5 мм до 4 мм, измельченные фрагменты разделяют на порции по 5-10 г и замораживают каждую порцию путем погружения в жидкий азот на 5-10 минут. Замороженные порции измельчают повторно до размера частиц не более 600 мкм, после чего проводят размораживание каждой порции путем ресуспендирования в 30-70 мл физиологического раствора забуференного фосфатами, полученного из состава, содержащего 138 мМ NaCl, 2,67 мМ KCl, 1,47 мМ KH2PO4, 8,1 мМ Na2HPO4, дистиллированную воду до 1 л, с рН 7,4, при комнатной температуре. Затем из полученной суспензии удаляют частицы размером менее 200 мкм, после чего полученную фракцию подвергают лиофильному высушиванию и стерилизации с получением образцов искомого матрикса. Использование данного способа позволяет повысить полноту децеллюляризации за счет профилактики нарушений микроциркуляции в донорском органе, обеспечить увеличение плотности и равномерности рецеллюляризации всего объема матрикса и упрощение контроля за ней за счет увеличения площади адгезивных поверхностей матрикса для контакта с засеваемыми клетками путем получения его в форме порошка (микрогранул).3 з.п. ф-лы, 5 пр., 9 ил.

Изобретение относится к медицине. Биоактивный пористый 3D-матрикс для тканевой инженерии включает резорбируемый частично-кристаллический полимер с пористостью 60-80% и размером пор от 2 до 100 мкм. В часть пор инкорпорирован биополимерный гель с размером частиц 30-100 мкм. Соотношение полимер/гель составляет от 99:1 до 50:50 мас.%. Для получения матрикса растирают смесь геля и порошка полимера со средним размером частиц 100 мкм и наполняют приготовленной смесью предварительно обработанные пресс-формы, которые затем помещают в камеру высокого давления, где повышают сначала температуру до 25-40°C, а затем давление CO2 до 4,0-25,0 МПа. Систему выдерживают в указанных условиях 1 час, после чего в течение 30-120 минут сбрасывают давление в камере до атмосферного значения, понижают температуру до комнатной и извлекают образцы. Технический результат заключается в обеспечении универсальности применения матрикса в различных органах и системах, в отсутствии токсичности, в повышении способности к стимуляции регенерации тканей, в увеличении длительности проявления эффекта биостимуляции. 2 н. и 4 з.п. ф-лы, 5 пр., 1 табл., 4 ил.

Изобретение относится к области медицины, в частности к инъекционному гидрогелю для заместительной и регенеративной хирургии

Изобретение относится к области медицины и касается препарата стволовых клеток (СК) с репрограммированным клеточным сигналингом, способа получения этого препарата и его применения

Изобретение относится к области биомедицины и клеточных технологий и касается способа обработки пористых полимерных материалов

Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии, и касается лечения заболеваний щитовидной железы, сопровождаемых гипотиреозом
Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии, и касается лечения сахарного диабета

Изобретение относится к области медицины, а именно к нейрохирургии и тканевой инженерии органов

 


© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности
Наверх