Патенты автора Кобзева Ирина Владимировна (RU)
Изобретение относится к области медицины, в частности к биомедицине, а именно к регенеративной медицине и трансплантологии, тканевой инженерии для получения бесклеточного матрикса амниотической мембраны для последующей реконструкции дефектов тканей вследствие термических, химических и радиационных ожогов, язв и др. Способ получения бесклеточного матрикса амниотической мембраны для последующей реконструкции дефектов тканей в качестве покрытия с сохранными структурными компонентами внеклеточного матрикса включает следующее: донорскую плаценту переносят в ламинарно-потоковый шкаф II класса биологической опасности, отделяют внутреннюю плодную амниотическую оболочку от хориона, при этом из одной плаценты выделяют примерно 300 см2 амниотической мембраны. Выделенные фрагменты амниона площадью 50 см2 тщательно отмывают от крови в фосфатно-солевом буферном растворе с добавлением 250 ЕД/мл пенициллина и 250 мкг/мл стрептомицина троекратно в течение суток, через каждые 3 часа проводят замену раствора. Затем выделенные фрагменты амниотической мембраны площадью 50 см2 подвергают детергентно-ферментативной децеллюляризации, используя при этом: (1) 0,5% дезоксихолат натрия + 0,5% TritonX100 - 24 ч, 400 об/мин; (2) 0,05% Трипсин-ЭДТА - 1 ч, 200 об/мин; (3) DMEM, 10% FBS, 1% пенициллин-стрептомицина - 24 ч, 400 об/мин; (4) 300 ЕД/мл ДНКазы I, 40 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 10 mM NaCl - 16 ч, 400 об/мин; (5) PBS, 1% пенициллина-стрептомицина - 48 ч, 400 об/мин. Далее матрикс анализируют на наличие/отсутствие ядер клеток или теней ядер, сохранность основных компонентов внеклеточного матрикса (коллаген, ламинин, фибронектин) и уровень остаточной геномной ДНК. Технический результат – получение бесклеточного матрикса амниотической мембраны, не вызывающего воспалительного фиброза и макрофагально-лимфоцитарной инфильтрации, с целью заживления пораженной поверхности за счет повышения репаративных и иммунных процессов, восстановления трофики, ремоделирования фиброзной соединительной ткани.
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к лечению пациентов с местными лучевыми поражениями. Способ включает забор у пациента жировой ткани в нижней трети передней брюшной стенки шприцевой липосакцией. Из полученного липоапирата путем ферментативной обработки, промывания и фильтрации выделяют стромально-васкулярную фракцию жировой ткани, состоящую из стромальных клеток (15-30%, из них: 3% составляют стволовые клетки и клетки-предшественники, - положительная экспрессия CD105, CD90, CD73), эндотелиальных клеток (10-20% - положительная экспрессия более CD31), клеток крови (5-15% - положительная экспрессия CD45), перицитов (3-5% - положительная экспрессия CD146), гемопоэтических стволовых клеток (<0,1% - положительная экспрессия CD34). Затем осуществляют введение суспензии жизнеспособных клеток стромально-васкулярной фракции жировой ткани по всей поверхности пораженной области в полученном количестве в объеме 4,5 мл. Изобретение позволяет обеспечить благоприятные условия для заживления пораженной поверхности, повышения ранозаживляющей активности репаративных и иммунных процессов, восстановления трофики, ремоделирования фиброзной и соединительной ткани и достойного качества жизни пациентов. 1 пр., 4 ил.
Изобретение относится к области медицины, в частности к биомедицине, и может быть использовано в органной трансплантации и тканевой инженерии для реконструкции дефектов мягких тканей. Способ получения децеллюляризированных кожных лоскутов включает использование перфузионного модуля, интегрируемого в биореактор Ebers Teb 500, собранного из двух резервуаров различного объема, соединенных между собой с помощью трубок и люэр-фиттингов. Лоскут, помещенный в перфузионный модуль, обрабатывается следующим образом: лоскут отмывают путем перфузии 250 мл PBS с добавлением антибиотиков в течение суток; затем кожный лоскут последовательно отмывают в растворах 0,5 М NaCl, 1M NaCl и стерильной очищенной воде. После отмывки кожный лоскут обрабатывают раствором 0,25% трипсин – ЭДТА на платформенном шекере в рабочем пространстве биореактора EBERS ТЕВ 500 или инкубатора при 37°С со скоростью 500-600 об/мин. Далее промывают лоскут последовательно в стерильной очищенной воде и 100% изопропиловом спирте. Затем помещают фиксированный лоскут в перфузионный модуль и проводят перфузию 250 мл свежего профильтрованного раствора 1% 4-(1,1,3,3-тетраметилбутил)фенил-полиэтиленгликоля (TritonX100) и 0,8% дезоксихолата натрия (NaDOC) в течение 45 часов, при этом по истечению 24 часов раствор заменяют на свежий и с целью отмывания от детергентов перфузионный модуль не разбирают, а наливают в осушенный резервуар для перфузата 200-250 мл стерильной воды с добавлением 0,3% азида натрия и 1% ампициллина натрия, перфузию проводят в течение 48 часов с тремя заменами в течение каждых суток. После остановки перфузии лоскут промывают 40% этиловым спиртом, затем снова перфузируют лоскут со скоростью 20 мл/мин в течение двух часов. После перфузии лоскут переносят в новую емкость, заполненную 125 мл 70% этанола на +4°С и хранят в течение суток, а затем лоскут консервируют в 200-250 мл 7,14% DMSO и 7,14% PVP в DMEM и хранят при температуре -80°С. Способ позволяет добиться полного удаления ядер во всех слоях кожи, включая ядра адипоцитов, удаления молекул, являющихся антигенными детерминантами, отсутствия экспрессии МНС-1. 1пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии и дерматологии. У пациента под местной анестезией осуществляют забор жировой ткани в нижней трети передней брюшной стенки методом шприцевой липосакции. Выделяют стромально-васкулярную фракцию жировой ткани путем ферментативной обработки, промывания и фильтрации полученного липоаспирата с помощью центрифугирования. Осуществляют внутрикожное введение жизнеспособных клеток стромально-васкулярной фракции жировой ткани в очаги атрофии по всей поверхности пораженной области больших и малых половых губ в объеме 2 мл. Способ позволяет активизировать иммунные, репаративные процессы, восстановить трофику и пигментацию поврежденных тканей: кожных покровов и слизистых оболочек промежности, ремоделировать фиброзную и соединительную ткань, достигнуть удовлетворительного косметического и функционального результата, уменьшить зуд, улучшить психоэмоциональное состояние. 4 ил., 1 пр.
Изобретение относится к медицине, в частности к пластической хирургии, комбустиологии, и касается лечения пациентов с глубокими термическими ожогами. Способ включает использование клеток стромально-васкулярной фракции жировой ткани. Для этого после стабилизации общего состояния пациента и при достижении положительной динамики местного процесса в ране во время проведения плановых хирургических обработок ожоговых поверхностей проводят забор жировой ткани в нижней трети передней брюшной стенки шприцевой липосакцией. Из полученного липоапирата выделяют стромально-васкулярную фракцию жировой ткани путем ферментативной обработки. Непосредственно во время хирургической процедуры осуществляют введение суспензии жизнеспособных клеток стромально-васкулярной фракции жировой ткани в количестве 15×106 или 10×106 в объеме 2-4 мл суспензии в 10-15 точек вокруг каждой раневой поверхности. Способ обеспечивает регуляцию и активацию иммунных и репаративных процессов в дерме, полное восстановление поврежденной сосудистой сети и утраченных кожных покров без грубых рубцовых изменений, создавая в том числе благоприятные условия для приживления пересаженных кожных лоскутов. 2 пр., 3 ил.
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДЕЦЕЛЛЮЛЯРИЗИРОВАННЫХ МАТРИКСОВ ПАРЕНХИМАТОЗНЫХ ОРГАНОВ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ // 2653489
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу получения децеллюляризированных матриксов почек кролика или крыс. Способ получения децеллюляризированных матриксов почек кролика или крыс с помощью метода детергентно-ферментативной децеллюляризации с использованием высокопроизводительной системы перфузии, которая представлена модулем для децеллюляризации, образованным резервуарами для перфузируемого раствора и паренхиматозного органа, системой силиконовых трубок с внутренним диаметром '' и 1/8'', перистальтических трубок с тремя маркированными стопперами для подключения к картриджам насоса Ismatec и системой люэр-фиттингов, который в собранном виде подключается к проточному биореактору EBERS ТЕВ500 MasterUnit, после подключения модуля децеллюляризации к биореактору проводят последовательную перфузию почек растворами определенного состава. Вышеописанный способ позволяет сохранить структурную целостность компонентов экстрацеллюлярного матрикса, а также с содержанием сульфатированных гликозаминогликанов и растворимого коллагена, сопоставимыми с нативными органами, кроме того, полученные децеллюляризированные матриксы могут быть использованы для дальнейших этапов тканевой инженерии, в частности для последующих процедур криоконсервации, стерилизации и рецеллюляризации. 2 пр.
Группа изобретений относится к медицине и касается способа криоконсервации стволовых клеток, включающего получение взвеси стволовых клеток и добавление к ней раствора криопротектора при постоянном перемешивании, с последующей криоконсервацией, где в качестве криопротектора во взвесь добавляют 50%-ный раствор ДМСО в реополиглюкине до конечной концентрации ДМСО 10% в получившейся суспензии. Группа изобретений также касается комбинированного криопротектора для криоконсервации стволовых клеток, содержащего 50%-ный раствор ДМСО в реополиглюкине. Группа изобретений обеспечивает создание криопротектора с более низкой молекулярной массой и более низкой концентрацией ДМСО для улучшения сохранности клеток после размораживания. 2 н.п. ф-лы, 1 пр., 5 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для профилактики и лечения энтеропатий, развивающихся на фоне интенсивной цитостатической полихимиотерапии
