Способ получения антрациклингликозидов

Авторы патента:

C07H15/252 - нафтаценовые радикалы, например дауномицины, адриамицины

A61K31/704 - присоединенные к конденсированной карбоциклической кольцевой системе, например сеннозиды, тиоколхикозиды,эсцин, даунорубицин, дигитоксин

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТРАЦИКЛИНГЛИКОЭИДОВ Общей формулы . О , Hei(i) BjiO где R-t - водород или гидроксил; RgW Rj,-. независимо друг от друга водород или метил, при условии, что Rj и Rj ие являются одновременно водородом , отличающийся тем, что, . 11-деоксидаунорубицин псшвергают взаимодействию с ангидридом трифторуксусной кислоты в безводном хлороформе , полученное при этом соответствующее lJ-трифторацетильное производное обрабатывают йодистым метилом ;В присутствии ОКИСИ Серебра, отделят полученный таким образом 4-0-метил-И-деокси-Х-трифторацетилдаунорубицин от одновременно образующегося 4-6-ди-0-метилг11-деокси-АА-трифторацетилдауиорубищсна посредством хромато17рафии на колонке с силикагелем с использованием градиентного раствора смеси хлороформа с метанолом, отдельно удгшяют из каждого соединения запретные N-трифторацетильные группы с помощью мягкого щелочного гидролиза с получением свободного :гликозидного основания I ), кото:рое выделяют с помощью обработки раствором хлористого водорода в метаноле D виде хлористоводородной соли или в случае необходимости подверга;ют реакции с бромом в хлороформе, и полученное соответствующее 14-бром:производное гидролизуют при комнатной :температуре раствором муравьинокисло:го натрия с получением производного доксорубицина общей формулы

СООЗ СОВЕТСНИХ . CN3WNOII

РЕСПУБЛИН ъ

OAHCAHHE HSOBPETEHHR - К ПАТЕНТУ

° нй (z

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ С0СР.

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТЮ (21) 2943002/23-04 (22) 03.07 ° 80 (31) 79 ° 23225 .(32) 04 ° 07,79 (33) Италия

;(46) 07,05.83. Бюл. 9 17 (72) Джузеппе Кассинелли, Сальваторе

Френэа, Мария Клара Рипамонти и Даниэла Руджиэри {Италия} (71) фармиталия Карло Эрба С.n.A (Великобритания) (53) 547.455.07(088.8) .(56) 1. Патент CIQA 9 3803124, .кл, 260-210, опублик. 1974. (54)(57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ AHTPAIgfKЛИНГЛИКОЗИДОВ общей формулы

9 6

Н где Re - водород или гидроксил)

1(m R>- независимо друг от друга.водород или метил, при условии, что R и Rg не являются одновременно водородом, „.SU„„101 1 3 А

3(Я) С 07 Н 15 24 IA 61 К 31 70 отличающийся тем, что, 11-деоксидаунорубицин псдвергают взаимодействию с ангидридом трифторуксусной кислоты в безводном хлоро,форме, полученное при этом соответствующее М-трифторацетильное произ.водное обрабатывают иодистым метилом

:в присутствии окиси серебра, отделяют. полученный таким образом 4-0-метил.-11-деокси-м-трифторацетилдаунорубицин от одновременно обраэукицегося 4-6-ди-О-метил-.11-деокси-@-трифторацетилдаунорубицина посредством хроматографии на колонке с силикагелем с использованием градиентного раствора смеси хлороформа с метанолом,,отдельно удаляют из каждого соедине- I ния защитные И-трифторацетильные группы с йомощью мягкого щелочного гидролиэа с получением свободного . . гликозидного основания L Rq-Н ), кото.рое выделяют с помощью обработки раствором хлористого водорода в ме- Я таноле в виде хлористоводородной соли или в случае необходимости подверга- .. ют реакции с бромом в хлороформе, :.и полученное соответствующее 14-бром- ( производное гидролизуют при комнатной

-.температуре раствором муравьинокисло- го натрия с получением производного - а с) доксорубицина общей формулы (1 ) .(Йд-ОН), которое также выделяют в ви-. де хлористоводородной соли.

1017173

Изобретение относится к способу получения новых .производных антрациклингликозкда, облацающих ценными фармакологическими, овойствами, Цель изобретения - получение но.вых полезных соединений, расширяющих 5 арсенал средств воздействия на живой организм.

Известен способ, получения антрациклингликазидов путе синтеза последних, основанный на известных реакциях защиты аминогруппы, алкилкрования, 14-бромирования производных антрациклина и гидралиэа «, Ö. указанная цель достигается тем, 1 ( что согласно способу получения антра-1 циклингликоэидав общей формулы

- деаксидаунорубицина в безводном хлороформе (60 мл7 обрабатывают при

0 С ангидридом трифторуксусной кислоты. Через 1 ч полученный раствор выпаривают да сухого состояния при пониженном давлении, и остаток суспендируют в воде (50 мп), доведенной до рН Й с помощью насыщенного водного раствора бикарбоната натрия, и экстрагкруют хлороформом { 2х50 мл).

0 Органическую фазу отделяют, высушивают над безводным сульфатом натрия и доводят до небольшого объема

5 мл). Затем к ней добавляют

00 мл метанола. Через 2 ч полученный раствор выпаривают до сухого состояния, остаток растворяют в мини-. мальном необходимом количестве хлороформа, после чего в результате добавления достаточного количества петролейного эфира осаждают 0,630 r (1,05 ммаль) 11-деокси-Я-трифторацетилдаунорубицина (1ХХ) в виде желтого кристаллического порошка (выход 96%); т.пл. 147 149оС; ЫЗр= +140 а(с

О, 1 в МеОН); М/е 607 (Nt ) . Спектр протонного магнитного резонанса(СЭЮ ) показывает наличке поглощения при величинах 129 (d, СН -0-5) у 2,37 (В, СНь-СО); 4,03 (g О-4-ОСНз); 5,22 (ширакйй сигнал, с-7-Н); 5,47 (широкий сигнал, 0-1 -H) и 13,80 О

0-б-ОН ).

Соединение 011 ) (0,650 гj1,07 ммоль) обрабатывают иодкстым метилом (50 мял в присутствии окиси серебра (1,3 r ) в течение 2 ч при 40 С и пасToRHHoM перемешквании. Реакционную смесь фильтруют, твердое вещество промывают хлороформом (Зх100 мл), после чего соединенные фильтраты выпаривают да сухого состояния при

:пониженном давлении. Неочищенную ре-! акционную смесь очищают в колонке с силикагелем, элюируют градиентным раствором хлороформа и метанола, что приводит к получению 4 -0-метил-11-деакси-Я-.тр фторацетилдауноруби.цина(IVI (0,250 г, 0,41 ммаль) (выход 40%) и 4,б-ди-0-метил-11-деакси- М-трифтарацетилдаунорубицина (М (6,200 rj 0,31 ммоль) (выход 30%).

Соединение (й) (элюированное. хлороформом) : имеет температуру плавления

128-131 С; QgL3y = +140 (с = 0,1. в СНЗОН); Е//е 621 (М ). Спектр протон; нога магнитного резонанса(СЗб .®3)показывает наличие поглощения при величинах 1,37(сС, СНэ-0-5 ) у 2,40 (5

CH -CO)j 3,57 (З, С-4 -ОСН ) 4,08 (g, С-4-ОСНОВ) 1 5,30 (широкйй сигнал, С-7-H)j 5р53 (широкий сигнал, С-1 - Й) и 13, 70 6(5 С-б-ОН).

Соединение (V) элюираваннае растворам хлороформа и метанола (99:1) имеет температуру плавления 124-127 С;

«р/ Зв= +25 . (с = 0,1 в СНЗОН); ъм/е

635 (М+). Спектр протанног магнит 2 1, 20

° .a@0) H3(0 0 яф

2 %2 где Ra - вадорад или гидрокскл; к R - независима друг от друга.водород кли метил при усло- . вии, что 9, и й3 не являются одновременно водородом, 11-деокскдаунорубицкн подвергают взаимодействию с ангидридом трифторуксуснай кислоты в безводном хлороформе, полученное при,этом. соответствующее й-тркфтарацетильное производное .обрабатывают иодистым метилом, в присутствии окиси серфбра, отделяют полученный таким образфм 4-0-метил-11-де- 40". акск-Й-трифторацетклдаунорубицин от одновременно образующегося 4-б-ди-0-метил-11-деокси-N-,òðèÔòoðàöåòêëäàóíîрубицина посредствфм хроматографии на колонке с силикфгелем с испольэо- 45 ванием градиентногф раствора смеси хла.хлороформа с метан лом, отдельно удаляют из каждого соединения защитные .й-трифторацетильные группы с помощью . мягкого щелочного гидролиза с получе- щ кием свободного глккозидного основания (R -H), которой вьщеляют с помощью обработки раствором илоркстаго водоро-. да в метаноле в виде хлористоводорадной соли или в случае необходимостиподвергают реакции, с бромом в хлороформе, и палученкоЕ соответствующее

14-бром-производное гидрализуют при комнатной температуре раствором ( мурьвьинокислого натрия с получением прои водйого доксорубкцина общей формулы (Х)(Й "ОН ), которое также вьщеляют в виде хларистоводорадной соли.

Пример 1. Раствор 0,600 г (1,09 ммаль) хлористоводораднога 11- 65

1017173 кого резонанса(СЭСВз) показывает наличие поглощения при величинах 1,37

f3, СН,-С-5 ); 2,38 (S, СнаCO))

3,55 (8, С-4-ОСЙь); 4,02,(с;, две ароматические группы ОСН ); 5,33 ,(широкий сигнал, С-7-8) и 5,43 d (широкий сигнал, С-1 «Н).

Раствор соедийенияОУ), (0,230 г

0,37 ммоль) в 0,25 И водной растворе едкого натра (.25 мл) выдерживают втечение 30 мин при комнатной темпера- 10 туре к перемешиваник. Полученный раствор разбавляют водой (30 мл), дово= дят до рН 3 при помощи О,25 М раствора соляной кислоты и экстрагкруют хлороформом с целью, удаления загряз- .15 няющих-примесей. Водную фазу, доведенную до рН 8,2 с помощью насьааен- ного водного раствора бикарбоната натрия, экстрагируют хлороформом (Зх100 мп ; Соединенные органические экстракты высушивают. над безводным сульфатом натрия, доводят до небольшого объема и подКксляют до достижения значения рН 4,5 о помощью 0,5 М раствора хлористого водорода в метаноле. Добавление достаточного количества петролейного эфира позволяет осадить 4 -0-метил-11-деоксидаунорубицкн (II) в виде его хлористово дородной соли (0,200 ri 0 36 mean»I выход 97,28; т.пл. 194-197 C (с раз- ЗО ложением); масс-спектр в условиях полевой десорбции, en/е 525 (м+).

Спектр инфрак1-ясного излучения (КВг) показывает наличие поглощения при . величинах 1710 (СО НЗ); .1670, 1620 35 и 1590 см "(полосы поглощения хинона 1. Видимая часть спектра ультрафиолетового излучения показывает наличие максимального. поглощения при значениях 227, 260, 284, 417 40 и 434 (5 ) .км (Е 500, 330, 173, ;167 и 146).

П р к м е р 2. 4 -0-Метил-11- деоксидоксорубицин (ЧО ЯСЕ/20291)

Раствор соединения 12 (0,180 г; 45

0,34 ммоль) в безводном метаноле (2,5 мл) безводном диоксане (6,9 мл),:и этиловом эфире ортоиура- . вьиной кислоты (0,18 мп) обрабатывают 1g3 М раствором брома s xnopo форме..Спустя 2 ч при 10 С полученный раствор выливают в петролейный эфир (18 мл) и простой диэткловый эфир (36 мл) . Осадок отфильтровыва»

° юту промывают простым дизтиловым 55 эфйром и высушивают в условиях вакуума °

Пол ченный таким образом продукт растворяют в ацетоне (5,8 мя) и добавляют 0,25 М водный.раствор"-бромистого водорода (5,8 мл). Эту реак- 60 ционную смесь выперживавт и тече,ние ночи при комнатной температуре, затем к ней добавляют 208-ный водный раствор муравьинокислого натрия (1,35 мп). Этот раствор выдерживают в течение 24 ч при 30"С. Полученную смесь экстрагируют хлороформом с целью удаления загрязняющих примесей, а затем доводят до рН 7,5 с помощью насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и экстрагируют хлороформом. Органическую фазу проьывают водой, высушивают над безводным сульфатом натрия, растворяют в н-пропаноле и доводят до небольшого объема. Добавление 2,1 н.раствора хлористого водорода в метаноле и простого диэтнлового эфира в достаточном количестве для того, чтобы вызвать осаждение, позволяет получить 0,135 r (О,23 ммоль) выход

67,68) 4 -0-метил-11-деоксидоксору« . бицкна (Н) в виде его хлористоводородной смолы; т.пл. 189-193 С, масс-спектр, в условиях полевой десорбции, )л/е (М ). Спектр инфракрасного излучения (КВ ) показывает наличие поглощения при величинах

1725 (СОСН ОН), 1670 1630 и

1590 см-"(полосы поглощения хкнона).

Видимая часть спектра ультраф;олетового излучения в(СН ОН) показывает наличие максимального поглощения при величинах.227, 259, 285 (5Ы, 418 и 436 (5Ь) (E 673,424, 221, 177 и 151) .

Пример 3. 4, б-Ди-0-метил-11-деоксидаунорубицин (ЧИ)(СЕ/20 302 )

Щелочной гкдролиз 4, ч-ди-0-метил-11-деокси-й-тркфторацетилдаунорубицнна (,Ч) (0,180 г; 0,23 ммоль), произведенный вслед за процедурой, описанной в примере i позволяет получить 4, б-ди-0-метил-11-деоксидаунорубицин в виде его хлористоводородной .соли(ЧИ) (0,030 г; 0,05 ммоль) (выход 188), т.пл. 182-185 С с разложением; масс-спектр, в условиях полевой десорбции, ку е 539 (М ).

Спектр инфракрасного излучения Ks показывает наличие поглощения при величинах 1710 (СОСНз) 1670 и 1590 см (полосы поглощения хинона). Видимая часть спектра ультрафиолетового .излучения (в СНзОН) показывает каличке максимального поглощения при величинах 223, 260 и 382 нм (Е „353 326 и 109) .

Новые соединения испытывали а на клетках Хела в отношении эффек« тивности клонирования в лабораторными условиях к при лечении асцитной лей=. кемин Р-38& у мжаей по сравнению с даунорубицином.к доксорубицином.

Данные, Представленные в табл. 1, показывают, что 11-деокск 4 -0-метильные производные даунорубицина (р) и даунорубицина (y1) являются менее цктотоксичными, чем их исходные соединения;

Таким образом, они также являются менее токсичными в естественных усло3 1017173 4 виях и при максимальной допустимой (табл. 2). Особый интерес представдозе показали наличие противоонухо- ляет соединение (vl), которое отличалевой активности, сравнимой с этой ется широким диапазоном активных и активностью у исходных соединений . нетоксичных доз.

Таблица 1

Влиянйе на эФфективность клонирования клеток

Хела в лабораторных условиях

ЬЭ „нг/мп

Соеди не ние

Даунорубицин НСВ

7,2

Доксорубицин - HCC (адриамицин )

4 -0-Метил-11-деоксидаунорубицин HCg (i) 9,5

4 -0-Метил-11-деоксидоксорубицин. HCt М) !

4 -6-Ди-0- метил«1.1-деоксидаунорубицин HCt (Мн) 1000

П р и м е ч а н и е: Клетки Хела подвергали воздействию лекарственных препаратов в"течение 24 ч, а затем высез вали на чашки. Число колоний определяли 5 дней спустя. ! Таблица 2

Противоопухолевая активность при лечении асцитной лейкемии Р-388 у мааей

2,9

О/10, О/8

3/10, О/6

8/10, О/6

Даунорубицин HCE

175122

180122

165122

4,4

6 6

4 -О-Метил-11-деоксидаунорубиции . НСВ(З) 180