Штамм @ @ 907/2062,обладающий активностью в отношении @ - вибрионов 05 серовара,не относящихся к 01 группе

 

Штамм Phagum Nag 9р7/20б2; Ф-114 ( коллекция фагов Тбилисского НИИ вакцин и сывороток), обладающий активностью в отношении Nag -вибрионов 05 серовара, не относящихся к 01 группе. i

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„SU„„92949 цр ф С 12 N 7/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABTOPCKOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1 и,.

БКЬЛЫ6; -;",:

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

IlO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

/ (21) 3560292/28-13 (22) 12.01.83 (46) 30.11.85.Бюл.¹ 44 (71) Всесоюзный ордена Трудового

Красного Знамени научно-исследовательский противовирусный противочумный институт "Микроб" (72) В.П.Мороз, Н.М.Остроумова, 3.М.Агапова, Г.И.Коровкина и Н.II,.Êîííîâ (53) 576.8.077 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР № 635131, кп. С 12 N 7/00, 1978.

Авторское свидетельство СССР № 888540, кл. C 12 Я 7/00, 1980. (54) ITAMM Phagum Nag 907/2062, ОБЛАДАЮЩИЙ АКТИВНОСТЬЮ В ОТНОШЕНИИ

Nag- ÂÈÁÐÈÎÍÎÂ 05 СЕРОВАРА, НЕ ОТНОСЯЩИХСЯ К Ol ГРУППЕ. (57) Штамм Phagum Nag 907/2062, Ф-114 (коллекция фагов Тбилисского

НИИ вакцин и сывороток), обладающий активностью в отношении Nag -вибрионов 05 серовара, не относящихся к

0l группе.

1 .10

Изобретение относится к медицинс- кой микробиологии и касается штамма бактериофага, обладающего активностью в отношении Nag-вибрионов 05 серовара. Известен штамм Phagum cholericum

78 yTI серотипа, активный в отношении Nag-вибрионов 044 серовара..

Известен Phagum Nag 91 для идентификации энтеропатогенных Nag -вибрионов 0-22 серотипа.

Однако известный штамм не позволяет идентифицировать Nag-вибрионы 05 серовара.

Целью изобретения является создание штамма Phagum Nag обладающего активностью в отношении Nag-вибрионов 05 серовара, не относящихся к

01 группе.

Эта цель достигается созданием штамма Phagum Nag 907/2062.

Штамм Phagum Nag 907/2062 получен в результате селекции мутантов фага 907 на газоне штамма 2062 Nag-вибриона

05 серовара.

Штамм хранится в коллекции бактериофагов Тбилисского. НИИ вакцин и сывороток под номером Ф-114 и характеризуется следующими признаками °

Величина негативных колоний на газоне НАГ-вибриона 2062,,выращенного на агаре Мартена, равна 1,47 +

+ 0,07. мм в диаметре. Край колоний неровный, дно прозрачное, по периферии - зона неполного лиэиса.

Фаг относится к У морфологической группе. его корпускулы имеют головку гексогональной формы величиной

625 Х и сложный отросток с сокращающимся чехлом размером 110 х 104 А., Бульон Мартена. При посевной дозе 1 101 микробных клеток V.Nag

2062 на 1 мл среды и множественности инфекции фагом 7 : 1 в течение 2 ч 15 мнн инкубирования при

37 С накапливается до и 10 его о частиц на 1 мл среды.

Одиночный цикл развития фага характеризуется минимальным латентным периодом, равным 40-45 мин, и средним урожаем 200 фаговых частиц иа одну инфицированную клетку.

Серологические свойства.

Относится к 1 серотипу умеренных

Nag агов 05 серовара. С известными 10 серотипами холерных фагов и

92949

S

Nag-фагами 91, 93 серологического родства не имеет.

Спектр действия.

В концентрации л 10 лиэирует

86Х штаммов Nag-вибрионов 05,серовара и не лизирует вибрионы других

05 сероваров.

Микроорганизмы блиэкородственных видов, родов и семейств: A2bensis

Proteus Aегоmonas, P1)esiomonas., Comamonas, Psendomonas, Parachemolyticus, Entегоbacteriaceae резистентны к действию фага Ф-114 (907/2062)(см,таблицу).

Штамм фага Ф-114 (907/2062 ) активно репродуцируется на клетках

Nag-вибриона 2062 в бульоне Мартена, рН 7,6. При посевной дозе

1 . 10 микробных клеток на 1 мл среды и множественности инфекции 7 : 1 в течение 2 ч 15 мин инкубирования при 37 С фаг накапливается до и 10 8 частиц на 1 мл среды.

Для получения диагностического препарата фага Ф-114 (907/2062) используют агар и бульон. Мартена, .рН 7,6. Культуру штамма-продуцента

2062 18-ти часового. роста при 37 С на arape Мартена засевают в бульон.

Мартена. Через 3 ч при 37 С бульонную культуру добавляют к питательной среде (бульон Мартена ) иэ расчета 1:10 микробных клеток на 1 мл т среды, туда же одновременно вносят фаг Ф-114 (907/2062 ) из расчета ,множественности инфекции 7:1. Через

2 ч 15 мин культивирования фаголизат фильтруют через бактериальные .фильтры марки Ф-З,Ф-5. Фильтрат разливают по ампулам и контролируют на специфическую и общую стерильность и активность.

Готовый препарат используют для диагностики. следующим методом.

Готовят газон исследуемого штамма в слое мягкого агара по Грациа, т.е. добавляют О,2 мп бульонной культуры исследуемого штамма к 5 мл 0,77. расплавленного: arapa(45ОС), перемешивают и выливают на агаровую пластинку в чашке Петри. После застывания второго слоя на его поверхность капают фаг Ф-114 (907/2062 )..

Чашку помещают в термостат при

37 С. Учет результатов проводят чео рез 4-8 ч. При обнаружении на месте нанесения фага литического пятна

Диапазон специфического действия фага

Ф-114 (907/2062) Вид культур ы

Холерный классический

119

Эль тор

Вибрион Nag с 02 по 04, серовара

05 серовара 130

08 серовара 20

85 . 85, 06,07 серовара с 09 по 021 серовара . 64

022 серовара 18

77 с 023 по 056 серовара

174

36

39

ВНИИПИ Заказ 7043/4 Тиран 524 Подписное

Филиал ППП "Патент", г.уагород, ул.Проектная, 4

3 j1092949 исследуемый штамм относят. к вибрио- Применение штамма фага Ф 114 нам 05 серовара. (907/ 2062 ) в лабораторной;практике

Широкое внедрение диагностичес- исключит:. необходимость постановки кого метода, основанного на исполь- серологическнх реакций, которые s насзовании штамма фага Ф-114 (907/2062):, у тояцее. время являются единственным позволит улучшить диагностику вибрио способом идентификации Яа -вибрионов . нов. определенных сероваров.